CN103969248A - 微波消解测定油脂中磷/磷脂含量的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种微波消解测定油脂中磷/磷脂含量的方法；向0.2g样品中加入硝酸4~8mL，双氧水1~3mL后放入微波消解仪内消解，将消解液置于容量瓶中定容、摇匀；制备硫酸联氨溶液和钼酸氨硫酸溶液；绘制标准曲线形成曲线方程；制备标准曲线用磷酸盐标准溶液；向容量瓶消解液中加硫酸联氨溶液和钼酸氨硫酸溶液；用去离子水稀释到刻度、摇匀，以去离子水为空白，静置后，在波长650nm下测定其吸光度；根据被测液的吸光度，从标准曲线查得磷量，按下式计算磷脂含量：
Description
发明领域
本发明涉及一种利用微波消解技术测定油脂中磷/磷脂含量的方法。
背景技术
磷脂是由甘油、脂肪酸、磷酸和氨基醇所组成的复杂混合物，能溶解在含水很少的油脂中。油料种子内含有较多的磷脂，在制油过程中磷脂容易转移到油中。由于磷脂具有亲水性，能使油脂水分增加，促使油脂水解和酸败；磷脂还具乳化性，在烹饪加热时会产生大量泡沫；同时易氧化，受热会发黑变苦，影响油炸食品品质。通过对磷脂含量的测定，才能确定生产过程中毛油的加水量。同时磷脂本身又是一种极有价值的营养物质和乳化剂，亦在食品工业中广泛应用，因此检验磷脂，对油脂的品质和开展综合利用都有着实际意义。
目前，磷/磷脂测定方法，主要包括重量法、浊度法、比色法、紫外分光光度法(UV)、傅立叶变换红外光谱法(FTIR)等方法。重量法和浊度法测定精确程度满足不了应用要求。而UV和FTIR法所用仪器昂贵，分析成本高，需要具备扎实专业知识的操作人员才能完成。
比色法：其中使用最多的是钼蓝比色法。其原理是将样品与金属氧化物灰化，试样中的磷变为磷酸盐，加酸溶解而得磷酸根，再加入钼酸盐后生成磷钼酸盐，磷钼酸盐被还原而产生钼蓝，其颜色深浅与磷脂含量成正比关系，由此可进行比色定量。国标GB/T5537-2008就是采用此种方法。该法检测限值低，分析数据准确可靠，明显的缺点就是样品炭化、灰化时间耗时较长，一般需要9个小时以上才能完成。
发明内容
本发明目的是提供一种快速、简单、安全、准确的油脂中磷/磷脂含量检测方法。
本发明所提供的微波消解测定油脂中磷/磷脂含量的方法，包括以下步骤：
a.油脂的消解：准确称取样品0.2g于聚四氟乙烯消解罐中，加入硝酸4~8mL，双氧水1~3mL，摇匀，旋紧密封盖，将罐放入微波消解仪内,调节功率800~1000W，时间7~9min进行消解，消解完毕，取出消解罐冷却后，将消解液置于50m容量瓶中，定容、摇匀；
b.硫酸联氨溶液的制备：将0.15g硫酸联氨溶解在1L水中，得到0.015%的硫酸联氨溶液；
C．钼酸钠溶液的制备：量取140mL浓硫酸注入300mL水中，冷却到室温，加入12.5g钼酸钠，溶解后用水定容到500mL。充分摇匀，静置24h备用；
d．标准曲线的绘制:向6只比色管中分别加入磷酸盐标准溶液0mL、1mL、2mL、4mL、6mL、8mL，加水补齐至10mL；再加入硫酸联氨溶液8mL，钼酸钠溶液2mL；比色管加塞，摇匀，去塞后沸水浴10min，冷却至室温后，加水稀释至50mL，摇匀后静置10min；650nm测定吸光度，绘制标准曲线，形成曲线方程；
e．标准曲线用磷酸盐标准溶液的制备：称取干燥的磷酸二氢钾0.4387g，用水溶解并稀释定容至1000mL；用移液管吸取标准上述溶液10mL至100mL容量瓶中，加水稀释并定容；
f．样品的测定：取10mL容量瓶中消解液于50mL容量瓶中，加8mL0.015％硫酸联氨溶液和2mL钼酸氨硫酸溶液；用去离子水稀释到刻度、摇匀，同时以去离子水为空白，静置20min后，在波长650nm下，用lcm液槽，测定其吸光度；
g．结果计算:根据被测液的吸光度，从标准曲线查得磷量，按下式计算磷脂含量：
式中，X为磷脂含量，mg/g
P为标准曲线查得的磷含量，mg；
m为试样质量，g
V1为样品灰化后稀释的体积，mL
V2为比色时所取的被测液体体积，mL
26.31为每毫克磷相当于磷脂的毫克数。
本发明的优点及积极效果：将样品加入硝酸和双氧水，在微波消解炉中进行消解，替代磷脂干灰化测定法，可在10分钟内完成磷脂测定中的前期样品处理过程，大幅度缩短分析时间，消解液可以直接定容，便于后续操作，测定结果的精确度和准确度符合要求，能够满足生产企业磷脂检测的需要。
具体实施方式
实施例1
精密度试验
称取5个花椒籽油样品，各2.0g于聚四氟乙烯消解罐中，分别加入硝酸4~8mL，双氧水1~3mL，摇匀，旋紧密封盖，将罐放入微波消解仪内,调节功率800~1000W，时间7~9min进行消解。消解完毕，取出消解罐冷却后，将消解液分别置于50m容量瓶中，定容、摇匀。
取10mL容量瓶中消解液于5个50mL容量瓶中，加8mL0.015％硫酸联氨溶液和2mL钼酸氨硫酸溶液。用去离子水稀释到刻度、摇匀，同时以去离子水为空白，静置20min后，在波长650nm下，用Lcm液槽，分别测定其吸光度，利用标准曲线方程求出大豆油中磷脂的含量。其具体实验数据见表1，RSD%为1.03，说明本方法具有很好的重现性，满足测量要求。
表1花椒籽油磷脂含量精密度实验结果
实施例2
回收率试验
分别配制三种浓度的磷标准溶液，加入到大豆油中，混匀后测其中的磷含量，操作条件与实施例1方法相同。具体实验数据见表2、3、4。
表2浓度一（含磷量约0.8mg）的回收率实验结果
表3浓度二（含磷量约0.4mg）的回收率实验结果
表4浓度三（含磷量约0.1mg）的回收率实验结果
从表2、3、4可以说明，回收率在97.57~101.88%之间，本发明的准确度满足检测要求。
实施例3
对比实验与GB5537-2008的对比试验
按照GB5537-2008方法重复上述测定，具体实验数据见表5。
表5GB5537-2008浓度一的回收率实验结果
表6GB5537-2008浓度二的回收率实验结果
表7GB5537-2008浓度三的回收率实验结果
表8本方法与GB5537-2008的回收率对比实验结果
从表8实验数据可以说明，本发明测得的回收率与GB5537-2008相当，但其精密度在三个水平均优于后者。
实施例4
桐油毛油中的磷脂含量测定
a.硫酸联氨溶液的制备：将0.15g硫酸联氨溶解在1L水中，得到0.015%的硫酸联氨溶液。
b．钼酸钠溶液的制备：量取140mL浓硫酸注入300mL水中，冷却到室温，加入12.5g钼酸钠，溶解后用水定容到500mL。充分摇匀，静置24h备用。
c．标准曲线用磷酸盐标准溶液的制备：称取干燥的磷酸二氢钾0.4387g，用水溶解并稀释定容至1000mL；用移液管吸取标准上述溶液10mL至100mL容量瓶中，加水稀释并定容。
d．标准曲线的绘制:向6只比色管中分别加入磷酸盐标准溶液0、1、2、4、6、8mL，加水补齐至10mL;再加入硫酸联氨8mL，钼酸钠2mL；比色管加塞，摇匀，去塞后沸水浴10min，冷却至室温后，加水稀释至50mL，摇匀后静置10min；650nm测定吸光度，绘制标准曲线，形成曲线方程。
e．油脂的消解：准确称取样品0.2g桐油于聚四氟乙烯消解罐中，加入硝酸4~8mL，双氧水1~3mL，摇匀，旋紧密封盖，将罐放入微波消解仪内,调节功率800~1000W，时间7~9min进行消解。消解完毕，取出消解罐冷却后，将消解液置于50m容量瓶中，定容、摇匀。
f．样品的测定：取10mL容量瓶中消解液于50mL容量瓶中，加8mL0.015％硫酸联氨溶液和2mL钼酸氨硫酸溶液。用去离子水稀释到刻度、摇匀，同时以去离子水为空白，静置20min后，在波长650nm下，用lcm液槽，测定其吸光度，从标准曲线法中查得样品中磷脂含量。
g．结果计算:根据被测液的吸光度，从标准曲线查得磷量，按下式计算磷脂含量：
测量结果为桐油毛油中磷脂含量为618.6mg/kg。
Claims (1)
1.一种微波消解测定油脂中磷/磷脂含量的方法，其特征在于：包括以下步骤：
a.油脂的消解：准确称取样品0.2g于聚四氟乙烯消解罐中，加入硝酸4~8mL，双氧水1~3mL，摇匀，旋紧密封盖，将罐放入微波消解仪内,调节功率800~1000W，时间7~9min进行消解，消解完毕，取出消解罐冷却后，将消解液置于50m容量瓶中，定容、摇匀；
b.硫酸联氨溶液的制备：将0.15g硫酸联氨溶解在1L水中，得到0.015%的硫酸联氨溶液；
C．钼酸钠溶液的制备：量取140mL浓硫酸注入300mL水中，冷却到室温，加入12.5g钼酸钠，溶解后用水定容到500mL，充分摇匀，静置24h备用；
d．标准曲线的绘制:向6只比色管中分别加入磷酸盐标准溶液0mL、1mL、2mL、4mL、6mL、8mL，加水补齐至10mL；再加入硫酸联氨溶液8mL，钼酸钠溶液2mL；比色管加塞，摇匀，去塞后沸水浴10min，冷却至室温后，加水稀释至50mL，摇匀后静置10min；650nm测定吸光度，绘制标准曲线，形成曲线方程；
e．标准曲线用磷酸盐标准溶液的制备：称取干燥的磷酸二氢钾0.4387g，用水溶解并稀释定容至1000mL；用移液管吸取标准上述溶液10mL至100mL容量瓶中，加水稀释并定容；
f．样品的测定：取10mL容量瓶中消解液于50mL容量瓶中，加8mL0.015％硫酸联氨溶液和2mL钼酸氨硫酸溶液；用去离子水稀释到刻度、摇匀，同时以去离子水为空白，静置20min后，在波长650nm下，用lcm液槽，测定其吸光度；
g．结果计算:根据被测液的吸光度，从标准曲线查得磷量，按下式计算磷脂含量：
式中，X为磷脂含量，mg/g；
P为标准曲线查得的磷含量，mg；
m为试样质量，g；
V1为样品灰化后稀释的体积，mL；
V2为比色时所取的被测液体体积，mL；
26.31为每毫克磷相当于磷脂的毫克数。
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