CN101556241A - 一种简便测定禽蛋中卵磷脂的含量的方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种简便测定新鲜禽蛋中卵磷脂含量的分光光度测定方法。该方法的原理将新鲜禽蛋，经过沸水煮制变性后，分离蛋黄与蛋清，然后采用无水乙醚彻底提取蛋黄中的油脂，然后将磷脂转化为无机磷化合物，在酸性条件下生成磷钼酸铵，在被还原为蓝色的钼蓝，在650nm下比色，测定磷含量，最后计算出禽蛋中磷脂含量的方法。对于蛋制品，直接采用此方法可以满足日常实验室分析测定的需要。本发明操作简便，选择性高，去除了禽蛋中无机磷的干扰，测定结果可靠。

Description

一种简便测定禽蛋中卵磷脂的含量的方法

技术领域

本发明属于食品中营养成分的检测范围，特别是涉及可以作为食品加工厂通过分光光度法简便准确测定鲜禽蛋中卵磷脂含量的方法。

背景技术

卵磷脂被营养学家誉为与蛋白质、维生素并列的“第三营养素”。卵磷脂对人体有很多益处。保护肝脏、防治糖尿病及并发症，每天食用20克以上的卵磷脂，对糖尿病的恢复，效果是相当显著的；防治动脉硬化、促进胎儿、婴儿大脑发育、美国食品与管理局(FDA)规定在婴儿奶粉中必须添加卵磷脂；卵磷脂还具有防治老年痴呆症、胆结石、缓解紧张状态的功效。

鸡蛋是人们日产饮食获得卵磷脂的最佳途径，因此很多食品生产厂家把检测鸡蛋中卵磷脂的含量作为评价禽蛋品质的重要手段。目前国家标准检测方法并没有专门的对卵磷脂测定的描述，间接测定鸡蛋中总磷进行换算的方法会受到其他无机磷化物干扰，而使测定结果不准确。鸡蛋中的卵磷脂主要存在于蛋黄的中性脂质中，这种脂质处于稳定的乳化状态，直接使用非极性溶剂提取比较困难。因此研究简便、准确、价廉的测定禽蛋中卵磷脂的方法十分必要。本研究提供了禽蛋中卵磷脂测定的简便方法，适于于工厂和检测机构推广应用。目前国家标准中没有关于禽蛋中卵磷脂的测定方法，本发明简便、可靠，满足人们的检测工作及研究需要。本方法的发明，填补了紫外-可见分光光度法测定禽蛋中卵磷脂方法空白。

发明内容

本发明的目的是提供一种简便测定禽蛋中卵磷脂的含量的方法。其特征在于：该方法的步骤是：

①样品制备：将鲜禽蛋样品首先经过沸水煮制熟透后，冷却分离鸡蛋壳，然后小心分离鸡蛋白和蛋黄，将蛋黄捣碎后加入无水乙醚浸泡，直至将其中的油脂提取干净(使用滤纸检查无油迹为止)，挥干去除无水乙醚后。定量称取样品10-15g左右，然后在电炉上炭化，送至马弗炉内灼烧至完全灰化，取出冷却加入盐酸溶液溶解灰分移入容量瓶中用蒸馏水定容至刻度取此溶液用水稀释至刻度，以此溶液作为试样进行测定。

②标准曲线的绘制：取六支10mL具塞比色管，按以下步骤配制标准系列；即在6只10mL具塞比色管中，分别加入10mL、9mL、8mL、6mL、4mL、2mL蒸馏水，再向该组比色管中分别加入0mL、1mL、2mL、4mL、6mL、8mL磷酸盐标准使用液(相当于0.01mg/mL磷)，分别加入硫酸联氨溶液8mL，钼酸铵溶液2mL。加塞，摇匀后，将比色管放入沸水浴中加热10min，取出冷却至室温，用水稀释至刻度，混匀。放置10min后，用1cm比色皿，在波长650nm处，以试剂空白调整零点，测定吸光度。以吸光度对含磷量(μg)绘制标准曲线。

③样品处理与测定：吸取待测样品溶液到50mL具塞比色管中，同②加入处理后，用试样空白调整零点，测定吸光度。

④卵磷脂含量计算公式：

$X=26.31\×\frac{C}{M}\×\frac{V_1}{V_2}\×{10}^5---\left(1\right)$

式中：

V1-试样灰化后稀释体积，单位为毫升(mL)；

V2-比色时所取测定液体积，，单位为毫升(mL)；

M-试样质量，单位为克(g)；

C-标准曲线查得的被测液的含磷量，单位为毫克(mg)。

X-样品中卵磷脂含量，单位为g/100g

本发明的优点是：新方法首先以沸水加热鸡蛋的方法破坏蛋白质，将蛋黄分离，同时也解除了蛋黄中中性脂质的乳化状态，从而应用无水乙醚可以高效地提取出脂质，高温消化制样，使磷脂转化为无机磷进行测定.提供了一种可靠的便于实施的方法，能够满足研究和厂家卵磷脂检测的需要。

具体实施方式

实施例鸡蛋中卵磷脂的测定

样品精密度的测定：对购买的五个平行样品进行检测，据标准曲线Y＝0.0093X+0.0134，R²＝0.9995(λ＝650nm)计算出鸡蛋中卵磷脂的含量，结果见表1-1；并对第一个和第二个平行样品重复测定五次，并计算出样品浓度，分析结果见表1-2.由表1-1可知，平行样的相对标准偏差(RSD)为2.56％。由表1-2可知，样品的相对标准偏差(RSD)分别为2.99％和4.14％。

表1-1：鸡蛋中卵磷脂含量测定

表1-2：重复性测定

显而易见，本领域的普通技术人员，可以用发明的这种分光光度钼兰比色法对鸡蛋中的卵磷脂进行定量检测。其他禽蛋的测定方法与此相同，不再举例说明。

上述实施例仅供说明本发明之用，而并非是对本发明的限制，有关技术领域的普通技术人员，在不脱离本发明适用范围的情况下，还可以作出各种变化和变型，因此所有等同的技术方案也应属于本发明的范畴，本发明的专利保护范围应由各权利要求限定。

Claims (3)

1.一种简便测定禽蛋中卵磷脂的含量的方法，其特征在于：该方法的步骤是：

①样品制备：将鲜禽蛋样品首先经过沸水煮制熟透后，冷却分离鸡蛋壳，然后小心分离鸡蛋白和蛋黄，将蛋黄捣碎后加入无水乙醚浸泡，直至将其中的油脂提取干净(使用滤纸检查无油迹为止)，挥干去除无水乙醚后。定量称取样品10-15g左右，然后在电炉上炭化，送至马弗炉内灼烧至完全灰化，取出冷却加入盐酸溶液溶解灰分移入容量瓶中用蒸馏水定容至刻度取此溶液用水稀释至刻度，以此溶液作为试样进行测定。

②标准曲线的绘制：取六支10mL具塞比色管，按以下步骤配制标准系列；即在6只10mL具塞比色管中，分别加入10mL、9mL、8mL、6mL、4mL、2mL蒸馏水，再向该组比色管中分别加入0mL、1mL、2mL、4mL、6mL、8mL磷酸盐标准使用液(相当于0.01mg/mL磷)，分别加入硫酸联氨溶液8mL，钼酸铵溶液2mL。加塞，摇匀后，将比色管放入沸水浴中加热10min，取出冷却至室温，用水稀释至刻度，混匀。放置10min后，用1cm比色皿，在波长650nm处，以试剂空白调整零点，测定吸光度。以吸光度对含磷量(μg)绘制标准曲线。

③样品处理与测定：吸取待测样品溶液到50mL具塞比色管中，同②加入处理后，用试样空白调整零点，测定吸光度。

④卵磷脂含量计算公式：

$X=26.31\×\frac{C}{M}\×\frac{V_1}{V_2}\×{10}^5---\left(1\right)$

式中：

V1-试样灰化后稀释体积，单位为毫升(mL)；

V2-比色时所取测定液体积，，单位为毫升(mL)；

M-试样质量，单位为克(g)；

C-标准曲线查得的被测液的含磷量，单位为毫克(mg)。

X-样品中卵磷脂含量，单位为g/100g

2.根据权利要求1所述的一种简便测定禽蛋中卵磷脂的含量的方法其特征在于：采用紫外-可见分光光度法测定禽蛋中的卵磷脂含量。

3.根据权利要求1所述的一种简便测定禽蛋中卵磷脂的含量的方法其特征在于：以沸水加热鸡蛋的方法破坏蛋白质，将蛋黄分离，同时也解除了蛋黄中中性脂质的乳化状态，便于高效提取卵磷脂，提供了一种可靠的便于实施的方法。