CN103961701A - 疫苗组合物 - Google Patents

Abstract

本发明提供疫苗组合物。本发明提供在对抗原的细胞免疫诱导中能对各种各样的抗原普遍使用的、包含Th2细胞分化抑制剂且发挥高的细胞免疫诱导效果的疫苗组合物。本发明提供一种疫苗组合物，其特征在于，包含用于诱导细胞免疫的抗原，且所述疫苗组合物包含1种以上第一细胞免疫诱导促进剂。

Description

疫苗组合物

技术领域

本发明涉及细胞免疫诱导疫苗组合物。

背景技术

通常被广泛使用的疫苗是为了诱导免疫而给予微生物或者病毒等病原体或它们的一部分的物质。此外，还有以使细胞免疫系统识别癌细胞特异性抗原、诱导免疫系统对癌细胞的特异性攻击为目的的癌症疫苗，该疫苗被用作癌症治疗手段之一。

通常，微生物、病毒由于其尺寸的原因而可以通过皮肤阻止侵入，因此，疫苗需要侵入式地给予到体内。因而，免疫通常使用注射。但是，注射存在如下的问题：疼痛、恐惧心理、注射伤痕及注射伤痕发展而成的疤痕、只有医务工作者才能进行注射、免疫效果高的皮内注射的给予手艺难、存在医务工作者的针扎感染事故的风险、进行反复给予时需要经常去医院而成为患者的生活负担、产生注射针等需要特殊废弃的医疗废弃物等问题，因此，其并不能说是最佳的给予途径。

作为疫苗的给予途径，皮下或皮内注射是最一般的，除此以外，也尝试了利用各种各样的给予途径例如经皮给予（专利文献1及非专利文献1）、颊部给予、鼻腔给予、舌下给予等（非专利文献2、专利文献2及专利文献3）的免疫诱导。

作为利用注射来进行的免疫中通常使用的佐剂，包含氢氧化铝、磷酸铝、氯化铝这样的铝盐、MF59、AS03这样的角鲨烯的乳剂等已被实用化，除此以外，还广泛研究了鞭毛成分、核酸、细胞因子、阳离子聚合物、多肽等。作为利用注射以外的途径例如经皮给予、经粘膜给予来进行的免疫中正在研究的佐剂，可以列举出氢氧化铝、磷酸铝、氯化铝这样的铝盐、霍乱毒素、大肠杆菌不耐热毒素这样的毒素类等，但目前还未能实用化。这些物质基本都是作为为了预防由病毒、细菌等导致的感染疾病而诱导产生抗体的体液免疫的佐剂使用。另外，如果限定在细胞免疫诱导，则对于注射，研究了弗氏佐剂、Montanide、GM-CSF、IL-2、IL-12、IFN-γ，但目前还未能实用化，对于经皮给予、粘膜给予，也仅为霍乱毒素、大肠杆菌不耐热毒素这样的毒素类、核酸类有非常少的报道的程度。

另外，洛索洛芬、阿司匹林这样的抗炎药通过大规模的流行病学调查（非专利文献3～5）而得出了服用它们的患者的癌症产生率低的报告，但其作用机制尚不明确，认为抑制了癌细胞转移时释放的PGE2的产生是原因之一。

现有技术文献

专利文献

专利文献1：美国专利申请公开US2008/0193487号

专利文献2：日本特表2002-531415号公报

专利文献3：美国专利申请公开US2008/0112974号

专利文献4：日本特表平7-505883号公报

专利文献5：日本特表2007-529531号公报

非专利文献

非专利文献1：Hosoi Akihiro et al.，Cancer Research，68，3941-3949（2008）

非专利文献2：Zhengrong Cui et al.，Pharmaceutical Research，Vol.19，No.7，947-953（2002）

非专利文献3：PM Rothwell et al.，The Lancet，Vol.376，9754，1741-1750（2010）

非专利文献4：K Jolly et al.，Drugs，Vol.62，Number6，12，945-956（2002）

非专利文献5：A Agrawal.，Int J Clin Pract，62（3），444-449（2008）

发明内容

发明要解决的问题

目前为止在使用的细胞免疫诱导促进剂只有促进向Th1细胞的分化这样的Toll样受体配体之类的Th1佐剂、IL-12之类的Th1细胞因子、作为通过抗原的缓释性来提高效果这样的油脂系佐剂的弗氏佐剂之类的有限的种类，它们的安全性和效果的平衡方面存在问题。。

另外，关于抗原的给予方法，也只有皮下注射或皮内注射、肌肉内注射这样的侵入式给予方法，在给予次数多的癌症疫苗这样的治疗方法中，从患者的QOL的观点考虑存在问题。由于皮肤中存在很多作为抗原提呈细胞的朗格汉斯细胞（langerhans cell），因此，作为解决注射中存在的各种问题的手段之一，想到了经皮给予及经粘膜给予。但是，几乎没有利用抗原的经皮给予来进行的细胞免疫诱导中可以使用的有效的细胞免疫诱导促进剂的相关报道，经皮给予与注射相比常常不能获得充分的细胞免疫诱导效果。

因此，本发明的目的在于，提供发挥高的细胞免疫诱导效果的疫苗组合物。

用于解决问题的方案

本发明人等发现，通过不直接促进Th1细胞分化，而是抑制向Th2细胞分化，能够间接地促进Th1细胞分化，有效地诱导细胞免疫。另外，本发明还发现了有效地抑制向这些Th2细胞的分化、对细胞免疫诱导有效的多个药物。此外还发现，通过使用这些Th2细胞分化抑制剂，不仅抗原的皮下注射或皮内注射、肌肉内注射、向受损皮肤的给予这样的侵入式给予方法能有效地诱导细胞免疫，而且经皮给予以及粘膜给予也能有效地诱导细胞免疫。

利用皮下、皮内、肌肉内注射来进行的免疫诱导中，由于注射带来的侵入以及注射液中所含的添加剂，注射部位产生轻微的炎症。认为这些炎症显示出促进Th2细胞的分化、而抑制Th1细胞的分化的作用。在鼻腔给予、舌下给予这样的经粘膜给予中，为了增加抗原的渗透性，需要添加各种各样的渗透促进剂，这些促进剂也有可能使给予部位产生轻微的炎症。此外，在利用经皮给予来进行的免疫诱导中，为了增大抗原的渗透性，通常，进行例如利用胶带粘贴除去角质层等皮肤的预处理。这样的预处理也使皮肤发炎。认为这些给予方法均显示出引发一些炎症、促进Th2细胞的分化、抑制Th1细胞的分化的作用。

着眼于这样的观点，本发明人等发现，通过以由炎症产生的信号不关联到Th2细胞分化的方式添加用于阻断这些信号传达系统的药物，细胞免疫诱导效果提高。进而还发现，本发明的疫苗组合物通过进一步含有用于促进Th1细胞的分化的Th1佐剂，能够进一步提高细胞免疫诱导。

在本发明的一个实施方式中，通过与抗原一同使用特定的Th2细胞分化抑制剂，能够有效地诱导细胞免疫。具体而言，通过在疫苗组合物中使用选自由环氧酶抑制剂、前列腺素受体拮抗剂、前列腺素受体激动剂、TSLP产生抑制剂、腺苷酸环化酶抑制剂、ω-3脂肪酸、PPAR激动剂、多巴胺受体拮抗剂、多巴胺受体激动剂、组胺受体激动剂、组胺受体拮抗剂、血清素受体激动剂、血清素受体拮抗剂、加压素受体拮抗剂、加压素受体激动剂、毒蕈碱受体拮抗剂、毒蕈碱受体激动剂、肾上腺素受体拮抗剂、肾上腺素受体激动剂、血管紧张素受体激动剂、GABA受体激动剂、凝血酶受体拮抗剂、凝血酶受体激动剂、阿片类受体激动剂、ADP受体激动剂、白三烯受体拮抗剂、白三烯受体激动剂、褪黑素受体激动剂、生长抑素受体激动剂、大麻素受体激动剂、鞘氨醇1-磷酸受体激动剂、代谢型谷氨酸受体激动剂、磷脂酶A2抑制剂、TGF-β产生抑制剂、及Th2细胞因子抑制剂组成的组中的1种以上Th2细胞分化抑制剂，能够得到高的细胞免疫诱导效果。

另外，在本发明的一个实施方式中，通过包含该Th2细胞分化抑制剂，并进一步包含选自由TLR配体、环状二核苷酸、辅助肽、免疫调节低分子药物组成的组中的1种以上细胞免疫诱导促进剂，能够得到更高的细胞免疫诱导效果。

另外，在本发明的一个实施方式中，不仅皮下注射及皮内注射、肌肉内注射本发明的疫苗组合物能够获得高的细胞免疫效果，经皮给予、经粘膜给予也能获得高的细胞免疫诱导效果。进而，经皮给予中，通过在低刺激条件下给予，能够获得高效的细胞免疫诱导效果。

因此，本发明提供以下列举的实施方式：

（1）一种疫苗组合物，其特征在于，包含用于诱导细胞免疫的抗原，且所述组合物包含选自由环氧酶抑制剂、前列腺素受体拮抗剂、前列腺素受体激动剂、TSLP产生抑制剂、腺苷酸环化酶抑制剂、ω-3脂肪酸、PPAR激动剂、多巴胺受体拮抗剂、多巴胺受体激动剂、组胺受体激动剂、组胺受体拮抗剂、血清素受体激动剂、血清素受体拮抗剂、加压素受体拮抗剂、加压素受体激动剂、毒蕈碱受体拮抗剂、毒蕈碱受体激动剂、肾上腺素受体拮抗剂、肾上腺素受体激动剂、血管紧张素受体激动剂、GABA受体激动剂、凝血酶受体拮抗剂、凝血酶受体激动剂、阿片类受体激动剂、ADP受体激动剂、白三烯受体拮抗剂、白三烯受体激动剂、褪黑素受体激动剂、生长抑素受体激动剂、大麻素受体激动剂、鞘氨醇1-磷酸受体激动剂、代谢型谷氨酸受体激动剂、磷脂酶A2抑制剂、TGF-β产生抑制剂、及Th2细胞因子抑制剂组成的组中的1种以上Th2细胞分化抑制剂（以下也称为第一细胞免疫诱导促进剂）；

（2）根据（1）所述的疫苗组合物，其中，Th2细胞分化抑制剂为环氧酶抑制剂；

（3）根据（1）所述的疫苗组合物，其中，Th2细胞分化抑制剂为前列腺素受体拮抗剂，进而，前列腺素受体拮抗剂为EP2受体拮抗剂、EP4受体拮抗剂、DP受体拮抗剂、IP受体拮抗剂；

（4）根据（1）所述的疫苗组合物，其中，Th2细胞分化抑制剂为前列腺素受体激动剂，进而，前列腺素受体激动剂为EP3受体激动剂；

（5）根据（1）所述的疫苗组合物，其中，Th2细胞分化抑制剂为TSLP产生抑制剂；

（6）根据（1）所述的疫苗组合物，其中，Th2细胞分化抑制剂为腺苷酸环化酶抑制剂；

（7）根据（1）所述的疫苗组合物，其中，Th2细胞分化抑制剂为ω-3脂肪酸；

（8）根据（1）所述的疫苗组合物，其中，Th2细胞分化抑制剂为PPAR激动剂，进而，PPAR激动剂为PPAR-α激动剂、PPAR-δ激动剂、PPAR-γ激动剂；

（9）根据（1）所述的疫苗组合物，其中，Th2细胞分化抑制剂为多巴胺受体拮抗剂，进而，多巴胺受体拮抗剂为D1受体拮抗剂、D5受体拮抗剂；

（10）根据（1）所述的疫苗组合物，其中，Th2细胞分化抑制剂为多巴胺受体激动剂，进而，多巴胺受体激动剂为D2受体激动剂、D3受体激动剂、D4受体激动剂；

（11）根据（1）所述的疫苗组合物，其中，Th2细胞分化抑制剂为组胺受体拮抗剂，进而，组胺受体拮抗剂为H1受体拮抗剂、H2受体拮抗剂；

（12）根据（1）所述的疫苗组合物，其中，Th2细胞分化抑制剂为组胺受体激动剂，进而，组胺受体激动剂为H1受体激动剂、H3受体激动剂、H4受体激动剂；

（13）根据（1）所述的疫苗组合物，其中，Th2细胞分化抑制剂为血清素受体拮抗剂，进而，血清素受体拮抗剂为5-HT2受体拮抗剂、5-HT4受体拮抗剂、5-HT6受体拮抗剂、5-HT7受体拮抗剂；

（14）根据（1）所述的疫苗组合物，其中，Th2细胞分化抑制剂为血清素受体激动剂，进而，血清素受体激动剂为5-HT1受体激动剂、5-HT2受体激动剂；

（15）根据（1）所述的疫苗组合物，其中，Th2细胞分化抑制剂为加压素受体拮抗剂，进而，加压素受体拮抗剂为V2受体拮抗剂；

（16）根据（1）所述的疫苗组合物，其中，Th2细胞分化抑制剂为加压素受体激动剂，进而，加压素受体激动剂为V1受体激动剂；

（17）根据（1）所述的疫苗组合物，其中，Th2细胞分化抑制剂为毒蕈碱受体拮抗剂，进而，毒蕈碱受体拮抗剂为M1受体拮抗剂、M3受体拮抗剂、M5受体拮抗剂；

（18）根据（1）所述的疫苗组合物，其中，Th2细胞分化抑制剂为毒蕈碱受体激动剂，进而，毒蕈碱受体激动剂为M1受体激动剂、M2受体激动剂、M3受体激动剂、M4受体激动剂、M5受体激动剂；

（19）根据（1）所述的疫苗组合物，其中，Th2细胞分化抑制剂为肾上腺素受体拮抗剂，进而，肾上腺素受体拮抗剂为α1受体拮抗剂、β1受体拮抗剂、β2受体拮抗剂、β3受体拮抗剂；

（20）根据（1）所述的疫苗组合物，其中，Th2细胞分化抑制剂为肾上腺素受体激动剂，进而，肾上腺素受体激动剂为α1受体激动剂、α2受体激动剂；

（21）根据（1）所述的疫苗组合物，其中，Th2细胞分化抑制剂为血管紧张素受体激动剂，进而，血管紧张素受体激动剂为AT2受体激动剂；

（22）根据（1）所述的疫苗组合物，其中，Th2细胞分化抑制剂为GABA受体激动剂，进而，GABA受体激动剂为GABA_B受体激动剂；

（23）根据（1）所述的疫苗组合物，其中，Th2细胞分化抑制剂为凝血酶受体拮抗剂，进而，凝血酶受体拮抗剂为PAR-1受体拮抗剂；

（24）根据（1）所述的疫苗组合物，其中，Th2细胞分化抑制剂为凝血酶受体激动剂，进而，凝血酶受体激动剂为PAR-1受体激动剂；

（25）根据（1）所述的疫苗组合物，其中，Th2细胞分化抑制剂为阿片类受体激动剂；

（26）根据（1）所述的疫苗组合物，其中，Th2细胞分化抑制剂为白三烯受体拮抗剂，进而，白三烯受体拮抗剂为CysLT1受体拮抗剂、CysLT2受体拮抗剂；

（27）根据（1）所述的疫苗组合物，其中，Th2细胞分化抑制剂为白三烯受体激动剂，进而，白三烯受体激动剂为BLT受体激动剂；

（28）根据（1）所述的疫苗组合物，其中，Th2细胞分化抑制剂为褪黑素受体激动剂；

（29）根据（1）所述的疫苗组合物，其中，Th2细胞分化抑制剂为生长抑素受体激动剂；

（30）根据（1）所述的疫苗组合物，其中，Th2细胞分化抑制剂为大麻素受体激动剂；

（31）根据（1）所述的疫苗组合物，其中，Th2细胞分化抑制剂为鞘氨醇1-磷酸受体激动剂；

（32）根据（1）所述的疫苗组合物，其中，Th2细胞分化抑制剂为代谢型谷氨酸受体激动剂，进而，代谢型谷氨酸受体为mGluR2受体激动剂、mGluR3受体激动剂、mGluR4受体激动剂、mGluR6受体激动剂、mGluR7受体激动剂、mGluR8受体激动剂；

（33）根据（1）所述的疫苗组合物，其中，Th2细胞分化抑制剂为ADP受体激动剂；

（34）根据（1）所述的疫苗组合物，其中，Th2细胞分化抑制剂为磷脂酶A2抑制剂；

（35）根据（1）所述的疫苗组合物，其中，Th2细胞分化抑制剂为TGF-β产生抑制剂；

（36）根据（1）所述的疫苗组合物，其中，Th2细胞分化抑制剂为Th2细胞因子抑制剂；

（37）根据（1）所述的疫苗组合物，其特征在于，该组合物还包含选自由TLR配体、环状二核苷酸及免疫调节低分子药物组成的组中的1种以上第二细胞免疫诱导促进剂和/或辅助肽；

（38）根据（1）～（37）中任一项所述的疫苗组合物，其中，该组合物被给予到皮肤和/或粘膜上；

（39）根据（38）所述的疫苗组合物，其中，该组合物被给予到低刺激条件下的皮肤上；

（40）根据（39）所述的疫苗组合物，其中，低刺激条件是皮肤刺激评价用动物模型的给予前的经皮水分散发量（TEWL）为50g/h·m²以下的条件。

（41）根据（39）所述的疫苗组合物，其中，低刺激条件是皮肤刺激评价用动物模型的给予结束时的皮肤内TSLP水平为10000pg/mg蛋白质以下的条件；

（42）根据（1）～（37）中任一项所述的疫苗组合物，其中，该组合物通过皮内注射、皮下注射、或肌肉内注射进行给予。

在其它实施方式中，本发明的疫苗组合物可以用于疾病的治疗或预防。因此，本发明还提供以下列举的实施方式：

（43）一种癌症的治疗或预防方法，其包括给予对治疗有效的量的（i）癌抗原、以及（ii）Th2细胞分化抑制剂，所述Th2细胞分化抑制剂选自由环氧酶抑制剂、前列腺素受体拮抗剂、前列腺素受体激动剂、TSLP产生抑制剂、腺苷酸环化酶抑制剂、ω-3脂肪酸、PPAR激动剂、多巴胺受体拮抗剂、多巴胺受体激动剂、组胺受体激动剂、组胺受体拮抗剂、血清素受体激动剂、血清素受体拮抗剂、加压素受体拮抗剂、加压素受体激动剂、毒蕈碱受体拮抗剂、毒蕈碱受体激动剂、肾上腺素受体拮抗剂、肾上腺素受体激动剂、血管紧张素受体激动剂、GABA受体激动剂、凝血酶受体拮抗剂、凝血酶受体激动剂、阿片类受体激动剂、ADP受体激动剂、白三烯受体拮抗剂、白三烯受体激动剂、褪黑素受体激动剂、生长抑素受体激动剂、大麻素受体激动剂、鞘氨醇1-磷酸受体激动剂、代谢型谷氨酸受体激动剂、磷脂酶A2抑制剂、TGF-β产生抑制剂、及Th2细胞因子抑制剂组成的组中的1种以上；

（44）一种感染性疾病的治疗或预防方法，其包括给予对治疗有效的量的（i）来源于感染性病原体的抗原、以及（ii）Th2细胞分化抑制剂，所述Th2细胞分化抑制剂选自由环氧酶抑制剂、前列腺素受体拮抗剂、前列腺素受体激动剂、TSLP产生抑制剂、腺苷酸环化酶抑制剂、ω-3脂肪酸、PPAR激动剂、多巴胺受体拮抗剂、多巴胺受体激动剂、组胺受体激动剂、组胺受体拮抗剂、血清素受体激动剂、血清素受体拮抗剂、加压素受体拮抗剂、加压素受体激动剂、毒蕈碱受体拮抗剂、毒蕈碱受体激动剂、肾上腺素受体拮抗剂、肾上腺素受体激动剂、血管紧张素受体激动剂、GABA受体激动剂、凝血酶受体拮抗剂、凝血酶受体激动剂、阿片类受体激动剂、ADP受体激动剂、白三烯受体拮抗剂、白三烯受体激动剂、褪黑素受体激动剂、生长抑素受体激动剂、大麻素受体激动剂、鞘氨醇1-磷酸受体激动剂、代谢型谷氨酸受体激动剂、磷脂酶A2抑制剂、TGF-β产生抑制剂、及Th2细胞因子抑制剂组成的组中的1种以上。

在其它实施方式中，本发明还提供用于诱导对抗原的细胞免疫的、包含（i）选自由环氧酶抑制剂、前列腺素受体拮抗剂、前列腺素受体激动剂、TSLP产生抑制剂、腺苷酸环化酶抑制剂、ω-3脂肪酸、PPAR激动剂、多巴胺受体拮抗剂、多巴胺受体激动剂、组胺受体激动剂、组胺受体拮抗剂、血清素受体激动剂、血清素受体拮抗剂、加压素受体拮抗剂、加压素受体激动剂、毒蕈碱受体拮抗剂、毒蕈碱受体激动剂、肾上腺素受体拮抗剂、肾上腺素受体激动剂、血管紧张素受体激动剂、GABA受体激动剂、凝血酶受体拮抗剂、凝血酶受体激动剂、阿片类受体激动剂、ADP受体激动剂、白三烯受体拮抗剂、白三烯受体激动剂、褪黑素受体激动剂、生长抑素受体激动剂、大麻素受体激动剂、鞘氨醇1-磷酸受体激动剂、代谢型谷氨酸受体激动剂、磷脂酶A2抑制剂、TGF-β产生抑制剂、及Th2细胞因子抑制剂组成的组中的1种以上并且包含（ii）选自由TLR配体、环状二核苷酸及免疫调节低分子药物组成的组中的1种以上和/或辅助肽的（i）和（ii）的组合。因此，本发明还提供以下的实施方式：

（45）用于诱导对抗原的细胞免疫的、包含（i）选自由环氧酶抑制剂、前列腺素受体拮抗剂、前列腺素受体激动剂、TSLP产生抑制剂、腺苷酸环化酶抑制剂、ω-3脂肪酸、PPAR激动剂、多巴胺受体拮抗剂、多巴胺受体激动剂、组胺受体激动剂、组胺受体拮抗剂、血清素受体激动剂、血清素受体拮抗剂、加压素受体拮抗剂、加压素受体激动剂、毒蕈碱受体拮抗剂、毒蕈碱受体激动剂、肾上腺素受体拮抗剂、肾上腺素受体激动剂、血管紧张素受体激动剂、GABA受体激动剂、凝血酶受体拮抗剂、凝血酶受体激动剂、阿片类受体激动剂、ADP受体激动剂、白三烯受体拮抗剂、白三烯受体激动剂、褪黑素受体激动剂、生长抑素受体激动剂、大麻素受体激动剂、鞘氨醇1-磷酸受体激动剂、代谢型谷氨酸受体激动剂、磷脂酶A2抑制剂、TGF-β产生抑制剂、及Th2细胞因子抑制剂组成的组中的1种以上并且包含（ii）选自由TLR配体、环状二核苷酸及免疫调节低分子药物组成的组中的1种以上和/或辅助肽的（i）和（ii）的组合。

另外，本发明还提供以下记载的实施方式：

（46）一种细胞免疫诱导方法，其包括将（i）抗原及（ii）Th2细胞分化抑制剂给予到对象，所述Th2细胞分化抑制剂选自由环氧酶抑制剂、前列腺素受体拮抗剂、前列腺素受体激动剂、TSLP产生抑制剂、腺苷酸环化酶抑制剂、ω-3脂肪酸、PPAR激动剂、多巴胺受体拮抗剂、多巴胺受体激动剂、组胺受体激动剂、组胺受体拮抗剂、血清素受体激动剂、血清素受体拮抗剂、加压素受体拮抗剂、加压素受体激动剂、毒蕈碱受体拮抗剂、毒蕈碱受体激动剂、肾上腺素受体拮抗剂、肾上腺素受体激动剂、血管紧张素受体激动剂、GABA受体激动剂、凝血酶受体拮抗剂、凝血酶受体激动剂、阿片类受体激动剂、ADP受体激动剂、白三烯受体拮抗剂、白三烯受体激动剂、褪黑素受体激动剂、生长抑素受体激动剂、大麻素受体激动剂、鞘氨醇1-磷酸受体激动剂、代谢型谷氨酸受体激动剂、磷脂酶A2抑制剂、TGF-β产生抑制剂、及Th2细胞因子抑制剂组成的组中的1种以上；

（47）选自由环氧酶抑制剂、前列腺素受体拮抗剂、前列腺素受体激动剂、TSLP产生抑制剂、腺苷酸环化酶抑制剂、ω-3脂肪酸、PPAR激动剂、多巴胺受体拮抗剂、多巴胺受体激动剂、组胺受体激动剂、组胺受体拮抗剂、血清素受体激动剂、血清素受体拮抗剂、加压素受体拮抗剂、加压素受体激动剂、毒蕈碱受体拮抗剂、毒蕈碱受体激动剂、肾上腺素受体拮抗剂、肾上腺素受体激动剂、血管紧张素受体激动剂、GABA受体激动剂、凝血酶受体拮抗剂、凝血酶受体激动剂、阿片类受体激动剂、ADP受体激动剂、白三烯受体拮抗剂、白三烯受体激动剂、褪黑素受体激动剂、生长抑素受体激动剂、大麻素受体激动剂、鞘氨醇1-磷酸受体激动剂、代谢型谷氨酸受体激动剂、磷脂酶A2抑制剂、TGF-β产生抑制剂、及Th2细胞因子抑制剂组成的组中的1种以上Th2细胞分化抑制剂在促进对抗原的细胞免疫诱导中的应用；

（48）（i）抗原和（ii）Th2细胞分化抑制剂的组合在诱导对抗原的细胞免疫中的应用，所述Th2细胞分化抑制剂选自由环氧酶抑制剂、前列腺素受体拮抗剂、前列腺素受体激动剂、TSLP产生抑制剂、腺苷酸环化酶抑制剂、ω-3脂肪酸、PPAR激动剂、多巴胺受体拮抗剂、多巴胺受体激动剂、组胺受体激动剂、组胺受体拮抗剂、血清素受体激动剂、血清素受体拮抗剂、加压素受体拮抗剂、加压素受体激动剂、毒蕈碱受体拮抗剂、毒蕈碱受体激动剂、肾上腺素受体拮抗剂、肾上腺素受体激动剂、血管紧张素受体激动剂、GABA受体激动剂、凝血酶受体拮抗剂、凝血酶受体激动剂、阿片类受体激动剂、ADP受体激动剂、白三烯受体拮抗剂、白三烯受体激动剂、褪黑素受体激动剂、生长抑素受体激动剂、大麻素受体激动剂、鞘氨醇1-磷酸受体激动剂、代谢型谷氨酸受体激动剂、磷脂酶A2抑制剂、TGF-β产生抑制剂及Th2细胞因子抑制剂组成的组中的1种以上；

（49）（i）抗原和（ii）选自由环氧酶抑制剂、前列腺素受体拮抗剂、前列腺素受体激动剂、TSLP产生抑制剂、腺苷酸环化酶抑制剂、ω-3脂肪酸、PPAR激动剂、多巴胺受体拮抗剂、多巴胺受体激动剂、组胺受体激动剂、组胺受体拮抗剂、血清素受体激动剂、血清素受体拮抗剂、加压素受体拮抗剂、加压素受体激动剂、毒蕈碱受体拮抗剂、毒蕈碱受体激动剂、肾上腺素受体拮抗剂、肾上腺素受体激动剂、血管紧张素受体激动剂、GABA受体激动剂、凝血酶受体拮抗剂、凝血酶受体激动剂、阿片类受体激动剂、ADP受体激动剂、白三烯受体拮抗剂、白三烯受体激动剂、褪黑素受体激动剂、生长抑素受体激动剂、大麻素受体激动剂、鞘氨醇1-磷酸受体激动剂、代谢型谷氨酸受体激动剂、磷脂酶A2抑制剂、TGF-β产生抑制剂、及Th2细胞因子抑制剂组成的组中的1种以上Th2细胞分化抑制剂（第一细胞免疫诱导促进剂）和（iii）选自由TLR配体、环状二核苷酸及免疫调节低分子药物组成的组中的1种以上第二细胞免疫诱导促进剂和/或辅助肽的组合在诱导对抗原的细胞免疫中的应用；

（50）（i）癌抗原和（ii）Th2细胞分化抑制剂的组合在癌症的治疗或预防中的应用，所述Th2细胞分化抑制剂选自由环氧酶抑制剂、前列腺素受体拮抗剂、前列腺素受体激动剂、TSLP产生抑制剂、腺苷酸环化酶抑制剂、ω-3脂肪酸、PPAR激动剂、多巴胺受体拮抗剂、多巴胺受体激动剂、组胺受体激动剂、组胺受体拮抗剂、血清素受体激动剂、血清素受体拮抗剂、加压素受体拮抗剂、加压素受体激动剂、毒蕈碱受体拮抗剂、毒蕈碱受体激动剂、肾上腺素受体拮抗剂、肾上腺素受体激动剂、血管紧张素受体激动剂、GABA受体激动剂、凝血酶受体拮抗剂、凝血酶受体激动剂、阿片类受体激动剂、ADP受体激动剂、白三烯受体拮抗剂、白三烯受体激动剂、褪黑素受体激动剂、生长抑素受体激动剂、大麻素受体激动剂、鞘氨醇1-磷酸受体激动剂、代谢型谷氨酸受体激动剂、磷脂酶A2抑制剂、TGF-β产生抑制剂及Th2细胞因子抑制剂组成的组中的1种以上；

（51）（i）来源于感染性病原体的抗原和（ii）Th2细胞分化抑制剂的组合在感染性疾病的治疗或预防中的应用，所述Th2细胞分化抑制剂选自由环氧酶抑制剂、前列腺素受体拮抗剂、前列腺素受体激动剂、TSLP产生抑制剂、腺苷酸环化酶抑制剂、ω-3脂肪酸、PPAR激动剂、多巴胺受体拮抗剂、多巴胺受体激动剂、组胺受体激动剂、组胺受体拮抗剂、血清素受体激动剂、血清素受体拮抗剂、加压素受体拮抗剂、加压素受体激动剂、毒蕈碱受体拮抗剂、毒蕈碱受体激动剂、肾上腺素受体拮抗剂、肾上腺素受体激动剂、血管紧张素受体激动剂、GABA受体激动剂、凝血酶受体拮抗剂、凝血酶受体激动剂、阿片类受体激动剂、ADP受体激动剂、白三烯受体拮抗剂、白三烯受体激动剂、褪黑素受体激动剂、生长抑素受体激动剂、大麻素受体激动剂、鞘氨醇1-磷酸受体激动剂、代谢型谷氨酸受体激动剂、磷脂酶A2抑制剂、TGF-β产生抑制剂及Th2细胞因子抑制剂组成的组中的1种以上；

（52）（i）抗原、以及（ii）Th2细胞分化抑制剂在用于诱导对抗原的细胞免疫的疫苗组合物的制造中的应用，所述Th2细胞分化抑制剂选自由环氧酶抑制剂、前列腺素受体拮抗剂、前列腺素受体激动剂、TSLP产生抑制剂、腺苷酸环化酶抑制剂、ω-3脂肪酸、PPAR激动剂、多巴胺受体拮抗剂、多巴胺受体激动剂、组胺受体激动剂、组胺受体拮抗剂、血清素受体激动剂、血清素受体拮抗剂、加压素受体拮抗剂、加压素受体激动剂、毒蕈碱受体拮抗剂、毒蕈碱受体激动剂、肾上腺素受体拮抗剂、肾上腺素受体激动剂、血管紧张素受体激动剂、GABA受体激动剂、凝血酶受体拮抗剂、凝血酶受体激动剂、阿片类受体激动剂、ADP受体激动剂、白三烯受体拮抗剂、白三烯受体激动剂、褪黑素受体激动剂、生长抑素受体激动剂、大麻素受体激动剂、鞘氨醇1-磷酸受体激动剂、代谢型谷氨酸受体激动剂、磷脂酶A2抑制剂、TGF-β产生抑制剂及Th2细胞因子抑制剂组成的组中的1种以上；

（53）（i）癌抗原、以及（ii）Th2细胞分化抑制剂在用于癌症的治疗或预防的疫苗组合物的制造中的应用，所述Th2细胞分化抑制剂选自由环氧酶抑制剂、前列腺素受体拮抗剂、前列腺素受体激动剂、TSLP产生抑制剂、腺苷酸环化酶抑制剂、ω-3脂肪酸、PPAR激动剂、多巴胺受体拮抗剂、多巴胺受体激动剂、组胺受体激动剂、组胺受体拮抗剂、血清素受体激动剂、血清素受体拮抗剂、加压素受体拮抗剂、加压素受体激动剂、毒蕈碱受体拮抗剂、毒蕈碱受体激动剂、肾上腺素受体拮抗剂、肾上腺素受体激动剂、血管紧张素受体激动剂、GABA受体激动剂、凝血酶受体拮抗剂、凝血酶受体激动剂、阿片类受体激动剂、ADP受体激动剂、白三烯受体拮抗剂、白三烯受体激动剂、褪黑素受体激动剂、生长抑素受体激动剂、大麻素受体激动剂、鞘氨醇1-磷酸受体激动剂、代谢型谷氨酸受体激动剂、磷脂酶A2抑制剂、TGF-β产生抑制剂及Th2细胞因子抑制剂组成的组中的1种以上；及

（54）（i）来源于感染性病原体的抗原、以及（ii）Th2细胞分化抑制剂在用于感染性疾病的治疗或预防的疫苗组合物的制造中的应用，所述Th2细胞分化抑制剂选自由环氧酶抑制剂、前列腺素受体拮抗剂、前列腺素受体激动剂、TSLP产生抑制剂、腺苷酸环化酶抑制剂、ω-3脂肪酸、PPAR激动剂、多巴胺受体拮抗剂、多巴胺受体激动剂、组胺受体激动剂、组胺受体拮抗剂、血清素受体激动剂、血清素受体拮抗剂、加压素受体拮抗剂、加压素受体激动剂、毒蕈碱受体拮抗剂、毒蕈碱受体激动剂、肾上腺素受体拮抗剂、肾上腺素受体激动剂、血管紧张素受体激动剂、GABA受体激动剂、凝血酶受体拮抗剂、凝血酶受体激动剂、阿片类受体激动剂、ADP受体激动剂、白三烯受体拮抗剂、白三烯受体激动剂、褪黑素受体激动剂、生长抑素受体激动剂、大麻素受体激动剂、鞘氨醇1-磷酸受体激动剂、代谢型谷氨酸受体激动剂、磷脂酶A2抑制剂、TGF-β产生抑制剂及Th2细胞因子抑制剂组成的组中的1种以上。

发明的效果

本发明的疫苗组合物即使不使用直接作用于免疫活性细胞的Th1佐剂，也能有效地诱导细胞免疫，另外，作为本发明发现的Th2细胞分化抑制剂，大多为在药房等销售的安全性高已经得到广泛认可的药物，从副作用方面考虑也被认为很优异。

另外，本发明的疫苗组合物不仅可以皮下注射及皮内注射、肌肉内注射给予，也可以经皮给予及粘膜给予，因此，具有以下优点：优异的依从性，例如非侵入式给予、无痛、不产生对注射的恐惧、因给予方便而患者可以自行给予、还可以避免医务工作者的针扎感染事故的风险、能够减少反复给予时的去医院的频率而有助于提高患者的生活品质、不产生注射针这样的需要特殊废弃的医疗废弃物。另外，为巴布剂、带状制剂（tapes）等贴剂形态时，具有能够可靠地给予规定的给予量、能够任意地控制药物释放速度、并且给予时不会附着在其它部位的优点。进而，贴剂可以容易地贴附/撕除，因此，还具有在产生副作用时等自应用部位除去贴剂从而患者自己便能立即终止给予的优点。进而，本发明的疫苗组合物还具有与单独给予抗原的情况相比效能显著提高的优点。进而，本发明的疫苗组合物的经皮给予及粘膜给予还具有与注射给予相比诱导更强的细胞免疫的优点。

附图说明

图1是表示组合使用作为Th2细胞分化抑制剂的洛索洛芬（LOX）或小檗碱（BER）、和作为Th1佐剂的咪喹莫特（IMQ）时的协同效果的图。

具体实施方式

为了更容易理解本发明，以下首先定义本说明书中使用的术语。未进行定义的术语只要没有上下文不同的启示就表示本领域技术人员、尤其是医学、药学、免疫学、细胞生物学、生物化学、高分子化学等领域的从业者所通常理解的意思。

I.定义

在本说明书中使用时，术语“抗原”是指能够诱导免疫应答的所有物质，例如可列举出蛋白质、肽等。另外，在要求抗原的皮肤渗透性的经皮给予中，优选使用分子量小的抗原，例如可以使用由约8～约12个氨基酸构成的肽。在本发明中，例如可以将以下记载的Survivin2B肽、GPC3肽、HER2/neu_A24肽、MAGE3_A24肽、IPEP87肽、PR1肽、HER2/neu_A02肽、MAGE3_A02肽、HBVenv肽、HER2/neu E75肽、MUC1肽等用作抗原。

在一个实施方式中，本发明的疫苗组合物中使用的抗原不包含选自由经皮或粘膜给予的癌症疫苗用途的HER2/neu E75肽、以及经皮或粘膜给予的癌症疫苗用途的经改变的HER2/neu E75肽、经皮或粘膜给予的癌症疫苗用途的WT1肽、及经皮或粘膜给予的癌症疫苗用途的经改变的WT1肽组成的组中的1种以上的肽。

在本说明书中使用时，术语“Survivin2B肽”是指由序列Ala Tyr Ala CysAsn Thr Ser Thr Leu（序列号1）构成的、来源于癌基因产物Survivin的肽。

在本说明书中使用时，术语“GPC3肽”是指由序列Glu Tyr Ile Leu Ser LeuGlu Glu Leu（序列号2）构成的、来源于癌基因产物GPC3的肽。

在本说明书中使用时，术语“HER2/neu_A24肽”是指由序列Thr Tyr LeuPro Thr Asn Ala Ser Leu（序列号3）构成的、来源于癌基因产物HER2/neu的HLA-A24限制性肽。

在本说明书中使用时，术语“MAGE3_A24肽”是指由序列Ile Met Pro LysAla Gly Leu Leu Ile（序列号4）构成的、来源于癌基因产物MAGE3的HLA-A24限制性肽。

在本说明书中使用时，术语“IPEP87肽”是指由序列Asp Leu Met Gly TyrIle Pro Ala Val（序列号5）构成的、来源于丙型肝炎病毒（HCV）蛋白质的肽。

在本说明书中使用时，术语“PR1肽”是指由序列Val Leu Gln Glu Leu AsnVal Thr Val（序列号6）构成的、来源于癌基因产物蛋白酶-3的肽。

在本说明书中使用时，术语“HER2/neu_A02肽”是指由序列Lys Val PheGly Ser Leu Ala Phe Val（序列号7）构成的、来源于癌基因产物HER2/neu的HLA-A02限制性肽。

在本说明书中使用时，术语“MAGE3_A02肽”是指由序列Lys Val Ala GluIle Val His Phe Leu（序列号8）构成的、来源于癌基因产物MAGE3的HLA-A02限制性肽。

在本说明书中使用时，术语“HBVenv肽”是指由序列Trp Leu Ser Leu LeuVal Pro Phe Val（序列号9）构成的、来源于乙型肝炎病毒（HBV）蛋白质的肽。

在本说明书中使用时，术语“HER2/neu E75肽”是指由序列Lys Ile Phe GlySer Leu Ala Phe Leu（序列号10）构成的、来源于癌基因HER2/neu的产物（HER2蛋白质）的肽。

在本说明书中使用时，术语“MUC1肽”是指由序列Ser Thr Ala Pro Pro ValHis Asn Val（序列号11）构成的、来源于在多个癌细胞上高度表达的糖蛋白即MUC1蛋白的肽。

在本说明书中使用时，术语“WT1肽”是指由癌基因WT1（Wilm’s肿瘤）的产物即WT1蛋白片段化而得到的、由约8～约15个、优选约8～约12个氨基酸构成的部分肽，其中包括Db126肽、Db235肽（均记载在日本专利第4422903号公报中）等。另外，WO2000/06602中公开的WT1产物的部分肽、WO2005/095598中记载的来源于WT1的HLA-A26结合性癌抗原肽、WO2007/097358中记载的HLA-A^＊3303限制性WT1肽、及WO2008/081701中记载的HLA-A^＊1101限制性WT1肽也包含在本说明书的”WT1肽”中。

在本说明书中使用时，术语“经改变的XX肽”（XX为任意的肽的名称）是指XX肽的全部或一部分氨基酸通过置换、修饰等而被改变了的肽。

经改变的XX肽包括例如：

（a）由在XX肽的氨基酸序列中置换、缺失或附加1个～数个、例如1个、2个、3个、4个或5个氨基酸而得到的氨基酸序列构成的肽；及

（b）由在XX肽的氨基酸序列中全部或一部分氨基酸、例如1个或多个、例如1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个或10个氨基酸经过修饰而得到的氨基酸序列构成的肽。

作为经改变的XX肽可以具有的氨基酸的“修饰”，并不限定于此，例如可以列举出乙酰化、甲基化等烷基化、糖基化、羟基化、羧基化、醛化、磷酸化、磺酰化、甲酰化、豆蔻酰化、棕榈酰化、硬脂酰化这样的脂肪链附加修饰、辛酰化、酯化、酰胺化、脱酰胺化、胱氨酸修饰、谷胱甘肽修饰、巯基乙酸修饰这样的二硫键形成修饰、糖化、泛素化、琥珀酰亚胺形成、谷酰化、异戊二烯化等。经改变的XX肽也可以组合包含1个以上氨基酸的置换、缺失或附加、和1个以上氨基酸的修饰。

在优选的实施方式中，本发明的经皮给予用疫苗组合物所含有的抗原为选自由Survivin2B肽和/或经改变的Survivin2B肽、GPC3肽和/或经改变的GPC3肽、HER2/neu_A24肽和/或经改变的HER2/neu_A24肽、MAGE3_A24肽和/或经改变的MAGE3_A24肽、IPEP87肽和/或经改变的IPEP87肽、PR1肽和/或经改变的PR1肽、HER2/neu_A02肽和/或经改变的HER2/neu_A02肽、MAGE3_A02肽和/或经改变的MAGE3_A02肽、HBVenv肽和/或经改变的HBVenv肽、以及MUC1肽和/或经改变的MUC1肽组成的组中的肽。或者，作为抗原可以使用HER2/neu E75肽和/或经改变的HER2/neu E75肽。

上述列举的肽可以为游离形态或药理学上容许的任意的盐形态，例如为酸盐（醋酸盐、TFA盐、盐酸盐、硫酸盐、磷酸盐、乳酸盐、酒石酸盐、马来酸盐、富马酸盐、草酸盐、氢溴酸盐、琥珀酸盐、硝酸盐、苹果酸盐、柠檬酸盐、油酸盐、棕榈酸盐、丙酸盐、甲酸盐、苯甲酸盐、苦味酸盐、苯磺酸盐、十二烷基硫酸盐、甲磺酸盐、对甲苯磺酸盐、戊二酸盐、各种氨基酸盐等）、金属盐（碱金属盐（例如钠盐、钾盐）、碱土金属盐（例如钙盐、镁盐）、铝盐等）、胺盐（三乙胺盐、苄胺盐、二乙醇胺盐、叔丁胺盐、二环己胺盐、精氨酸盐、二甲基铵盐、铵盐等）的形态。优选的药理学上容许的盐为醋酸盐或TFA盐。本发明中能够用作抗原的上述肽可以使用利用公知的方法来合成或生产、并进行分离及精制而得到的肽。

在本说明书中使用时，术语“Th1细胞”及“Th2细胞”分别是指1型辅助性T细胞及2型性辅助T细胞。

细胞免疫诱导效果可以通过使用免疫评价用动物模型的免疫诱导试验及ELISPOT方法（IFN-γ）来测定。用于测定细胞免疫的样品为免疫评价用动物模型的脾脏。

在本说明书中使用时，术语“细胞免疫诱导促进剂”是指能够使一同给予的抗原的诱导细胞免疫的效率与没有给予其时的效率相比能够得到改善的所有物质，不受促进细胞免疫诱导的作用机制限定，是指本申请说明书中特定的物质。

在一个优选的实施方式中，通过给予含有抗原以及选自由环氧酶抑制剂、前列腺素受体拮抗剂、前列腺素受体激动剂、TSLP产生抑制剂、腺苷酸环化酶抑制剂、ω-3脂肪酸、PPAR激动剂、多巴胺受体拮抗剂、多巴胺受体激动剂、组胺受体激动剂、组胺受体拮抗剂、血清素受体激动剂、血清素受体拮抗剂、加压素受体拮抗剂、加压素受体激动剂、毒蕈碱受体拮抗剂、毒蕈碱受体激动剂、肾上腺素受体拮抗剂、肾上腺素受体激动剂、血管紧张素受体激动剂、GABA受体激动剂、凝血酶受体拮抗剂、凝血酶受体激动剂、阿片类受体激动剂、ADP受体激动剂、白三烯受体拮抗剂、白三烯受体激动剂、褪黑素受体激动剂、生长抑素受体激动剂、大麻素受体激动剂、鞘氨醇1-磷酸受体激动剂、代谢型谷氨酸受体激动剂、磷脂酶A2抑制剂、TGF-β产生抑制剂、及Th2细胞因子抑制剂组成的组中的1种以上Th2细胞分化抑制剂的疫苗组合物来实现。

在本说明书中使用时，术语“Th2细胞分化抑制剂”是指具有抑制由Th0细胞向Th2细胞分化的作用的物质。在一个实施方式中，Th2细胞分化抑制剂为本发明的第一细胞免疫诱导促进剂。

在本说明书中使用时，术语“环氧酶抑制剂“是抑制环氧酶（COX）的功能的物质。以下也称为“COX抑制剂”。COX抑制剂有选择性作用于特定的环氧酶（例如COX-1、COX-2）的抑制剂、不具有选择性的抑制剂。作为本发明中可以使用的COX抑制剂，可以列举出：依托度酸、洛索洛芬、塞来昔布、伐地昔布、帕瑞昔布、罗美昔布、美洛昔康、替诺昔康、双氯芬酸、甲芬那酸、托芬那酸、氟芬那酸、甲氯芬那酸、尼氟灭酸、苄达明、吲哚布芬、三氟醋柳酸、托美丁、非诺洛芬、噻洛芬酸、联苯乙酸、奈帕芬胺、氨芬酸、普拉朵林、扎托布洛芬、舒林酸、萘丁美酮、二氟尼柳、吡罗昔康、布洛芬、萘普生、非诺洛芬、阿司匹林、水杨酸甲酯、水杨酸酰胺、双水杨酸酯、阿洛普令、托美丁、吲哚美辛、丙谷美辛、阿西美辛、氟比洛芬、普拉洛芬、对乙酰氨基酚、夫洛非宁、氯诺昔康、替诺昔康、噻洛芬酸、奥沙普秦、酮洛芬、右酮洛芬、右布洛芬、阿明洛芬、酮咯酸、莫苯唑酸、保泰松、羟基保泰松、酮基保泰松、非普拉宗、Phenbutazone、乙柳酰胺、噻拉米特、替诺立定、依匹唑、依莫法宗及它们的衍生物、以及它们的药理学上容许的盐等。本发明的优选的实施方式中，COX抑制剂为依托度酸和/或洛索洛芬。

洛索洛芬用式

表示。

在本说明书中使用时，术语“前列腺素受体拮抗剂”是指具有妨碍前列腺素作用于受体的功能的物质，例如包括EP2受体拮抗剂、EP4受体拮抗剂、DP受体拮抗剂、IP受体拮抗剂。

在本说明书中使用时，术语“EP2受体拮抗剂”是指具有妨碍前列腺素E2作用于EP2受体的功能的物质。作为EP2受体拮抗剂，可以列举出AH6809及其衍生物、以及它们的药理学上容许的盐等。

AH6809用式

表示。

在本说明书中使用时，术语“EP4受体拮抗剂”是指具有妨碍前列腺素E2作用于EP4受体的功能的物质。作为EP4受体拮抗剂，可以列举出GW627368X及其衍生物、以及它们的药理学上容许的盐等。

GW627368X用式

表示。

在本说明书中使用时，术语“DP受体拮抗剂”是指具有妨碍前列腺素D₂作用于DP受体的功能的物质。作为DP受体拮抗剂，可以列举出S-5751、BWA868C及其衍生物、以及它们的药理学上容许的盐等。

BWA868C用式

表示。

在本说明书中使用时，术语“IP受体拮抗剂”是指具有妨碍前列腺素I₂作用于IP受体的功能的物质。作为IP受体拮抗剂，可以列举出RO1138452及其衍生物、以及它们的药理学上容许的盐等。

RO1138452用式

表示。

在本说明书中使用时，术语“前列腺素受体激动剂”是指具有该物质自身作用于前列腺素受体的功能的物质，例如包括EP3受体激动剂。

在本说明书中使用时，术语“EP3受体激动剂”是指具有该物质自身作用于EP3受体的功能的物质。作为EP3受体激动剂，可以列举出：噻普酮、GR63799、氯前列醇、ONO-AE-248、卡巴环素、及其衍生物、以及它们的药理学上容许的盐等。

噻普酮用式

表示。

在本说明书中使用时，术语“TSLP产生抑制剂”是指具有抑制TSLP产生的功能的物质。抑制NF-kB的药物制剂被认为也间接地抑制TSLP产生，因此，包括在该范畴内。作为TSLP产生抑制剂，可以列举出：柚皮素、小檗碱、白藜芦醇、木樨草素、芹黄素、金圣草黄素、维露汀（velutin）、芦丁、橙皮苷、槲皮素、大豆甙元、染料木素、那可丁、二吲哚甲烷、呫吨酮、小白菊内酯及它们的衍生物、以及它们的药理学上容许的盐等。

小檗碱用式

表示。

在本说明书中使用时，术语“腺苷酸环化酶抑制剂”是指具有抑制腺苷酸环化酶的活性的功能的物质。作为腺苷酸环化酶抑制剂，可以列举出2’,5’-双脱氧腺苷、烟酸、胰岛素、及它们的衍生物、以及它们的药理学上容许的盐等。

2’,5’-双脱氧腺苷用式

表示。

在本说明书中使用时，术语“ω-3脂肪酸”为不饱和脂肪酸的分类的一种，表示在ω-3位具有碳-碳双键的物质。作为ω-3脂肪酸，可以列举出二十碳五烯酸、α-亚麻酸、二十二碳六烯酸、及它们的衍生物、以及它们的药理学上容许的盐等。

二十碳五烯酸用式

表示。

在本说明书中使用时，术语“PPAR激动剂”是指具有该物质自身作用于过氧化物酶体增殖物激活受体的功能的物质，例如包括PPAR-α激动剂、PPAR-δ激动剂、PPAR-γ激动剂。

在本说明书中使用时，术语“PPAR-α激动剂”是指具有该物质自身作用于α型过氧化物酶体增殖物激活受体的功能的物质。术语“PPAR-δ激动剂”是指具有该物质自身作用于δ型过氧化物酶体增殖物激活受体的功能的物质。术语“PPAR-γ激动剂”是指具有该物质自身作用于γ型过氧化物酶体增殖物激活受体的功能的物质。作为PPAR-α激动剂、和/或PPAR-δ激动剂、和/或PPAR-γ激动剂，可以列举出：氯贝特、非诺贝特、苯扎贝特、环丙贝特、依托贝特、替米沙坦、油基乙醇酰胺、十四烷基巯基乙酸、曲格列酮、吡格列酮、罗格列酮、巴格列酮、来格列酮、环格列酮、达格列酮、依格列宗、耐格列酮(netoglitazone)、英格列扎、替格列扎、莫格他唑、阿格列扎及它们的衍生物、以及它们的药理学上容许的盐等。

氯贝特用式

表示。

在本说明书中使用时，术语“多巴胺受体拮抗剂”是指具有妨碍多巴胺作用于受体的功能的物质，例如包括D1受体拮抗剂、D5受体拮抗剂。

在本说明书中使用时，术语“D1受体拮抗剂”是指具有妨碍多巴胺作用于D1受体的功能的物质。作为D1受体拮抗剂，可以列举出苯并氮杂卓（benzazepine）、非诺多泮、氯卡色林、SCH23390、SCH39166、LE300及它们的衍生物、以及它们的药理学上容许的盐等。

苯并氮杂卓用式

表示。

在本说明书中使用时，术语“D5受体拮抗剂”是指具有妨碍多巴胺作用于D5受体的功能的物质。作为D5受体拮抗剂，可以列举出SCH39166及它们的衍生物、以及它们的药理学上容许的盐等。

SCH39166用式

表示。

在本说明书中使用时，术语“多巴胺受体激动剂”是指具有该物质自身作用于多巴胺受体的功能的物质，例如包括D2受体激动剂、D3受体激动剂、D4受体激动剂。

在本说明书中使用时，术语“D2受体激动剂”是指具有该物质自身作用于D2受体的功能的物质。作为D2受体激动剂，可以列举出卡麦角林、溴麦角环肽、培高利特、罗匹尼罗、他利克索、阿立哌唑、鲁拉西酮、及它们的衍生物、以及它们的药理学上容许的盐等。

罗匹尼罗用式

表示。

在本说明书中使用时，术语“D3受体激动剂”是指具有该物质自身作用于D3受体的功能的物质。作为D3受体激动剂，可以列举出吡贝地尔、罗替戈汀、PD1289077、OH-DPAT及它们的衍生物、以及它们的药理学上容许的盐等。

罗替戈汀用式

表示。

在本说明书中使用时，术语“D4受体激动剂”是指具有该物质自身作用于D4受体的功能的物质。作为D4受体激动剂，可以列举出氟班色林、ABT724、PD168077、CP226269及它们的衍生物、以及它们的药理学上容许的盐等。

氟班色林用式

表示。

在本说明书中使用时，术语“组胺受体拮抗剂”是指具有妨碍组胺作用于受体的功能的物质，例如包括H1受体拮抗剂、H2受体拮抗剂。

在本说明书中使用时，术语“H1受体拮抗剂”是指具有妨碍组胺作用于H1受体的功能的物质。作为H1受体拮抗剂，可以列举出：酮色林、松齐拉敏、美吡拉敏、曲吡那敏、二甲茚定、氯马斯汀、巴米品、氮异丙嗪、氯苯沙明、二甲替嗪、氯丙嗪、羟嗪、奥匹哌醇、倍他司汀、桂利嗪、左卡巴斯汀、安他唑啉、双苯拉林、卡比沙明、多西拉敏、阿列马嗪、赛克利嗪、美克洛嗪、左西替利嗪、赛庚啶、苯茚胺、曲普利啶、阿扎他啶、阿司咪唑、特非那定、阿伐斯汀、依巴斯汀、地洛他定、卢帕他定、比拉斯汀、咪唑斯汀、诺贝斯汀、柔卡斯啶、替美斯汀、贝他斯汀、苯海拉明、氯苯那敏、酮替芬、异丙嗪、赛庚啶、依匹斯汀、奥洛他定、贝托斯汀、阿司咪唑、依美斯汀、美喹他嗪、奥沙米特、氯雷他定、非索非那定、西替利嗪、氮卓斯汀、及它们的衍生物、以及它们的药理学上容许的盐等。

苯海拉明用式

表示。

在本说明书中使用时，术语“H2受体拮抗剂”是指具有妨碍组胺作用于H2受体的功能的物质。作为H2受体拮抗剂，可以列举出西咪替丁、雷尼替丁、法莫替丁、尼扎替丁、罗沙替丁、拉呋替丁、及它们的衍生物、以及它们的药理学上容许的盐等。

法莫替丁用式

表示。

在本说明书中使用时，术语“组胺受体激动剂”是指具有该物质自身作用于组胺受体的功能的物质，例如包括H1受体激动剂、H3受体激动剂、H4受体激动剂。

在本说明书中使用时，术语“H1受体激动剂”是指具有该物质自身作用于H1受体的功能的物质。作为H1受体激动剂，可以列举出2-吡啶基乙胺、2-噻唑基乙胺及它们的衍生物、以及它们的药理学上容许的盐等。

2-吡啶基乙胺用式

表示。

在本说明书中使用时，术语“H3受体激动剂”是指具有该物质自身作用于H3受体的功能的物质。作为H3受体激动剂，可以列举出Immethridine、Imetit、Immepip、α-甲基组胺、Proxifan、及它们的衍生物、以及它们的药理学上容许的盐等。

Proxifan用式

表示。

在本说明书中使用时，术语“H4受体激动剂”是指具有该物质自身作用于H4受体的功能的物质。作为H4受体激动剂，可以列举出4-甲基组胺、VUF8430、Immepip及它们的衍生物、以及它们的药理学上容许的盐等。

4-甲基组胺用式

表示。

在本说明书中使用时，术语“血清素受体拮抗剂”是指具有妨碍血清素作用于受体的功能的物质，例如包括5-HT2受体拮抗剂、5-HT4受体拮抗剂、5-HT6受体拮抗剂、5-HT7受体拮抗剂。

在本说明书中使用时，术语“5-HT2受体拮抗剂”是指具有妨碍血清素作用于5-HT2受体的功能的物质。作为5-HT2受体拮抗剂，可以列举出苯噻啶、利培酮、奥氮平、喹硫平、阿立哌唑、布南色林、氯氮平、帕潘立酮、利坦色林、育亨宾、美舒麦角、阿戈美拉汀、环苯扎林、沙格雷酯、美西麦角、酮色林及它们的衍生物、以及它们的药理学上容许的盐等。

奥氮平用式

表示。

在本说明书中使用时，术语“5-HT4受体拮抗剂”是指具有妨碍血清素作用于5-HT4受体的功能的物质。作为5-HT4受体拮抗剂，可以列举出哌波色罗（piboserod）、GR113808、GR125487、RS39604、SB204070及它们的衍生物、以及它们的药理学上容许的盐等。

哌波色罗用式

表示。

在本说明书中使用时，术语“5-HT6受体拮抗剂”是指具有妨碍血清素作用于5-HT6受体的功能的物质。作为5-HT6受体拮抗剂，可以列举出Cerlapirdine、氯氮平及它们的衍生物、以及它们的药理学上容许的盐等。

Cerlapirdine用式

表示。

在本说明书中使用时，术语“5-HT7受体拮抗剂”是指具有妨碍血清素作用于5-HT7受体的功能的物质。作为5-HT7受体拮抗剂，可以列举出甲麦角林及它们的衍生物、以及它们的药理学上容许的盐等。

甲麦角林用式

表示。

在本说明书中使用时，术语“血清素受体激动剂”是指具有该物质自身作用于血清素受体的功能的物质，例如包括5-HT1受体激动剂、5-HT2受体激动剂。

在本说明书中使用时，术语“5-HT1受体激动剂”是指具有该物质自身作用于5-HT1受体的功能的物质。作为5-HT1受体激动剂，可以列举出吡氯佐坦（piclozotan）、坦度螺酮、舒马曲坦、佐米曲坦、依立曲坦、利扎曲坦、那拉曲坦、阿莫曲坦、夫罗曲坦、阿维曲坦、麦角胺、麦角生物碱及它们的衍生物、以及它们的药理学上容许的盐等。

佐米曲坦用式

表示。

在本说明书中使用时，术语“5-HT2受体激动剂”是指具有该物质自身作用于5-HT2受体的功能的物质。作为5-HT2受体激动剂，可以列举出α-甲基-5-HT、阿戈美拉汀、去乙芬氟拉明、间氯苯哌嗪及它们的衍生物、以及它们的药理学上容许的盐等。

阿戈美拉汀用式

表示。

在本说明书中使用时，术语“加压素受体拮抗剂”是指具有妨碍加压素作用于受体的功能的物质，例如包括V2受体拮抗剂。

在本说明书中使用时，术语“V2受体拮抗剂”是指具有妨碍加压素作用于V2受体的功能的物质。作为V2受体拮抗剂，可以列举出托伐普坦（tolvaptan）、莫扎伐普坦、考尼伐坦、利希普坦、及它们的衍生物、以及它们的药理学上容许的盐等。

莫扎伐普坦用式

表示。

在本说明书中使用时，术语“加压素受体激动剂”是指具有该物质自身作用于加压素受体的功能的物质，例如包括V1受体激动剂。

在本说明书中使用时，术语“V1受体激动剂”是指具有该物质自身作用于V1受体的功能的物质。作为V1受体激动剂，可以列举出加压素、苯赖加压素、去氨加压素、赖氨加压素、特利加压素、鸟氨酸加压素、精氨酸加压素、及它们的衍生物、以及它们的药理学上容许的盐等。

去氨加压素用式

表示。

在本说明书中使用时，术语“毒蕈碱受体拮抗剂”是指具有妨碍乙酰胆碱作用于毒蕈碱受体的功能的物质，例如包括M1受体拮抗剂、M3受体拮抗剂、M5受体拮抗剂。

在本说明书中使用时，术语“M1受体拮抗剂”是指具有妨碍乙酰胆碱作用于M1受体的功能的物质。术语“M3受体拮抗剂”是指具有妨碍乙酰胆碱作用于M3受体的功能的物质。术语“M5受体拮抗剂”是指具有妨碍乙酰胆碱作用于M5受体的功能的物质。作为M1受体拮抗剂、和/或M3受体拮抗剂、和/或M5受体拮抗剂，可以列举出哌仑西平、阿托品、曲美布汀、哌立度酯、奥昔布宁、托吡卡胺、丙哌维林、托特罗定、索非那新、达非那新、咪达那新、羟苄利明、噻托溴铵、艾司奥昔布宁、替喹溴铵、及它们的衍生物、以及它们的药理学上容许的盐等。

奥昔布宁用式

表示。

在本说明书中使用时，术语“毒蕈碱受体激动剂”是指具有该物质自身作用于毒蕈碱受体的功能的物质，例如包括M1受体激动剂、M2受体激动剂、M3受体激动剂、M4受体激动剂、M5受体激动剂。

在本说明书中使用时，术语“M1受体激动剂”是指具有该物质自身作用于M1受体的功能的物质。术语“M2受体激动剂”是指具有该物质自身作用于M2受体的功能的物质。术语“M3受体激动剂”是指具有该物质自身作用于M3受体的功能的物质。术语“M4受体激动剂”是指具有该物质自身作用于M4受体的功能的物质。术语“M5受体激动剂”是指具有该物质自身作用于M5受体的功能的物质。作为M1受体激动剂、和/或M2受体激动剂、和/或M3受体激动剂、和/或M4受体激动剂、和/或M5受体激动剂，可以列举出乙酰胆碱、醋克利定、阿伐美林（alvameline）、他沙利定、呫诺美林、毛果芸香碱、西维美林、氨甲酰甲胆碱、马扎替可、毒蕈碱及它们的衍生物、以及它们的药理学上容许的盐等。

氨甲酰甲胆碱用式

表示。

在本说明书中使用时，术语“肾上腺素受体拮抗剂”是指具有妨碍肾上腺素作用于受体的功能的物质，例如包括α1受体拮抗剂、β1受体拮抗剂、β2受体拮抗剂、β3受体拮抗剂。

在本说明书中使用时，术语“α1受体拮抗剂”是指具有妨碍肾上腺素作用于α1受体的功能的物质。作为α1受体拮抗剂，可以列举出哌唑嗪、多沙唑嗪、布那唑嗪、曲马唑嗪、阿夫唑嗪、西洛多辛、特拉唑嗪、坦索罗辛、及它们的衍生物、以及它们的药理学上容许的盐等。

坦索罗辛用式

表示。

在本说明书中使用时，术语“β1受体拮抗剂”是指具有妨碍肾上腺素作用于β1受体的功能的物质。术语“β2受体拮抗剂”是指具有妨碍肾上腺素作用于β2受体的功能的物质。术语“β3受体拮抗剂”是指具有妨碍肾上腺素作用于β3受体的功能的物质。作为β1受体拮抗剂、和/或β2受体拮抗剂、和/或β3受体拮抗剂，可以列举出波吲洛尔、吲哚洛尔、噻吗洛尔、二氯异丙肾上腺素、阿普洛尔、卡替洛尔、茚诺洛尔、布尼洛尔、喷布洛尔、普萘洛尔、纳多洛尔、尼普洛尔、替利洛尔、醋丁洛尔、塞利洛尔、美托洛尔、阿替洛尔、比索洛尔、倍他洛尔、普拉洛尔、贝凡洛尔、布托沙明、卡维地洛、氨磺洛尔、阿罗洛尔、拉贝洛尔、及它们的衍生物、以及它们的药理学上容许的盐等。

普萘洛尔用式

表示。

在本说明书中使用时，术语“血管紧张素受体激动剂”是指具有该物质自身作用于血管紧张素受体的功能的物质，例如包括AT2受体激动剂。

在本说明书中使用时，术语“肾上腺素受体激动剂”是指具有该物质自身作用于肾上腺素受体的功能的物质，例如包括α1受体激动剂、α2受体激动剂。

在本说明书中使用时，术语“α1受体激动剂”是指具有该物质自身作用于α1受体的功能的物质。术语“α2受体激动剂”是指具有该物质自身作用于α2受体的功能的物质。作为α1受体激动剂、和/或α2受体激动剂，可以列举出：去甲肾上腺素、去甲苯福林、依替福林、萘甲唑林、苯肾上腺素、米多君、甲氧胺、辛弗林、间羟胺、阿布他明、麻黄碱、羟甲唑啉、四氢唑林、赛洛唑啉、曲马唑啉、伪麻黄碱、地匹福林、阿米福林、甲基麻黄碱、利美尼定、溴莫尼定、美托咪定、甲苯噻嗪、替扎尼定、胍法辛、甲基多巴、胍那苄、及它们的衍生物、以及它们的药理学上容许的盐等。

甲苯噻嗪用式

表示。

在本说明书中使用时，术语“血管紧张素受体激动剂”是指具有该物质自身作用于血管紧张素受体的功能的物质，例如包括AT2受体激动剂。

在本说明书中使用时，术语“AT2受体激动剂”是指具有该物质自身作用于AT2受体的功能的物质。作为AT2受体激动剂，可以列举出Novokinin、血管紧张素及它们的衍生物、以及它们的药理学上容许的盐等。

血管紧张素用式

表示。

在本说明书中使用时，术语“GABA受体激动剂”是指具有该物质自身作用于GABA受体的功能的物质，例如包括GABA_B受体激动剂。

在本说明书中使用时，术语“GABA_B受体激动剂”是指具有该物质自身作用于GABA_B受体的功能的物质。作为GABA_B受体激动剂，可以列举出巴氯芬、γ-氨基丁酸、阿巴氯芬（Arbaclofen）及它们的衍生物、以及它们的药理学上容许的盐等。

巴氯芬用式

表示。

在本说明书中使用时，术语“凝血酶受体拮抗剂”是指具有妨碍凝血酶作用于受体的功能的物质，例如包括PAR-1受体拮抗剂。

在本说明书中使用时，术语“PAR-1受体拮抗剂”是指具有妨碍凝血酶作用于PAR-1受体的功能的物质。作为PAR-1受体拮抗剂，可以列举出Vorapaxar、Atopaxar、FR171113、RWJ56110、达比加群、达比加群酯、美拉加群、希美加群、水蛭素、哈艾劳格（hirolog）、阿加曲班及它们的衍生物、以及它们的药理学上容许的盐等。

Vorapaxar用式

表示。

在本说明书中使用时，术语“凝血酶受体激动剂”是指具有该物质自身作用于凝血酶受体的功能的物质，例如包括PAR-1受体激动剂。

在本说明书中使用时，术语“PAR-1受体激动剂”是指具有该物质自身作用于PAR-1受体的功能的物质。作为PAR-1受体激动剂，可以列举出TRAP-6、TRAP-14、NAT6-NH2及它们的衍生物、以及它们的药理学上容许的盐等。

TRAP-6用式

表示。

在本说明书中使用时，术语“阿片类受体激动剂”是指具有该物质自身作用于阿片类受体的功能的物质。作为阿片类受体激动剂，可以列举出曲美布汀、爱维莫潘、吗啡、羟考酮、二氢可待因、海洛因、哌替啶、喷他佐辛、丁丙诺啡、布托啡诺、纳布啡、替利定、地佐辛、美普他酚、他喷他多、纳曲酮、美沙酮、乙基吗啡、氢可酮、乙酰基二氢可待因、烯丙吗啡、洛哌丁胺、瑞莫必利、奥匹哌醇、及它们的衍生物、以及它们的药理学上容许的盐等。

丁丙诺啡用式

表示。

在本说明书中使用时，术语“白三烯受体拮抗剂”是指具有妨碍白三烯作用于受体的功能的物质，例如包括CysLT1受体拮抗剂、CysLT2受体拮抗剂。

在本说明书中使用时，术语“CysLT1受体拮抗剂”是指具有妨碍白三烯作用于CysLT1受体的功能的物质。术语“CysLT2受体拮抗剂”是指具有妨碍白三烯作用于CysLT2受体的功能的物质。作为CysLT1受体拮抗剂、和/或CysLT2受体拮抗剂，可以列举出孟鲁司特、扎鲁司特、普仑司特、及它们的衍生物、以及它们的药理学上容许的盐等。例如，作为孟鲁司特的药理学上容许的盐，可以列举出孟鲁司特钠等。

孟鲁司特钠用式

表示。

在本说明书中使用时，术语“白三烯受体激动剂”是指具有该物质自身作用于白三烯受体的功能的物质，例如包括BLT受体激动剂。

在本说明书中使用时，术语“BLT受体激动剂”是指具有该物质自身作用于BLT受体的功能的物质。作为BLT受体激动剂，可以列举出白三烯B4、CAY10583及它们的衍生物、以及它们的药理学上容许的盐等。

白三烯B4用式

表示。

在本说明书中使用时，术语“ADP受体激动剂”是指具有该物质自身作用于ADP受体的功能的物质。作为ADP受体激动剂，可以列举出腺苷二磷酸、及它们的衍生物、以及它们的药理学上容许的盐等。

腺苷二磷酸用式

表示。

在本说明书中使用时，术语“褪黑素受体激动剂”是指具有该物质自身作用于褪黑素受体的功能的物质。作为褪黑素受体激动剂，可以列举出褪黑素、哌拉平、他司美琼、及它们的衍生物、以及它们的药理学上容许的盐等。

褪黑素用式

表示。

在本说明书中使用时，术语“生长抑素受体激动剂”是指具有该物质自身作用于生长抑素受体的功能的物质。作为生长抑素受体激动剂，可以列举出生长抑素、生长抑素-14、奥曲肽、及它们的衍生物、以及它们的药理学上容许的盐等。

奥曲肽用式

表示。

在本说明书中使用时，术语“大麻素受体激动剂”是指具有该物质自身作用于大麻素受体的功能的物质。作为大麻素受体激动剂，可以列举出屈大麻酚、大麻隆、左南曲朵、奥特那班（otenabant）、GW833972A、GW405833、及它们的衍生物、以及它们的药理学上容许的盐等。

屈大麻酚用式

表示。

在本说明书中使用时，术语“鞘氨醇1-磷酸受体激动剂”是指具有该物质自身作用于鞘氨醇1-磷酸受体的功能的物质。作为鞘氨醇1-磷酸受体激动剂，可以列举出芬戈莫德、ponesimod、RPC-1063、ONO-4641、SEW2871、鞘氨醇1-磷酸及它们的衍生物、以及它们的药理学上容许的盐等。

芬戈莫德用式

表示。

在本说明书中使用时，术语“代谢型谷氨酸受体激动剂”是指具有该物质自身作用于代谢型谷氨酸受体的功能的物质，例如包括mGluR2受体激动剂、mGluR3受体激动剂、mGluR4受体激动剂、mGluR6受体激动剂、mGluR7受体激动剂、mGluR8受体激动剂。

在本说明书中使用时，术语“mGluR2受体激动剂”是指具有该物质自身作用于mGluR2受体的功能的物质。术语“mGluR3受体激动剂”是指具有该物质自身作用于mGluR3受体的功能的物质。术语“mGluR4受体激动剂”是指具有该物质自身作用于mGluR4受体的功能的物质。术语“mGluR6受体激动剂”是指具有该物质自身作用于mGluR6受体的功能的物质。术语“mGluR7受体激动剂”是指具有该物质自身作用于mGluR7受体的功能的物质。术语“mGluR8受体激动剂”是指具有该物质自身作用于mGluR8受体的功能的物质。作为mGluR2受体激动剂、和/或mGluR3受体激动剂、和/或mGluR4受体激动剂、和/或mGluR6受体激动剂、和/或mGluR7受体激动剂、和/或mGluR8受体激动剂，可以列举出VU0361737、VU0155041、联苯茚酮A、PBDA、L-AP4、及它们的衍生物、以及它们的药理学上容许的盐等。

VU0361737用式

表示。

在本说明书中使用时，术语“磷脂酶A2抑制剂”是指具有抑制磷脂酶A2的活性的功能的物质。作为磷脂酶A2抑制剂，可以列举出甘草酸、甘草次酸、及它们的衍生物、以及它们的药理学上容许的盐等。

甘草次酸用式

表示。

在本说明书中使用时，术语“TGF-β产生抑制剂”是指具有抑制TGF-β产生的功能的物质。作为TGF-β产生抑制剂，可以列举出吡非尼酮、曲尼司特、及其衍生物、以及它们的药理学上容许的盐等。

吡非尼酮用式

表示。

在本说明书中使用时，术语“Th2细胞因子抑制剂”是指具有抑制IL-4、IL-5这样的Th2细胞因子产生的功能的物质。作为Th2细胞因子抑制剂，可以列举出suplatast及其衍生物、以及它们的药理学上容许的盐等。作为suplatast的药理学上容许的盐，例如可以列举出甲磺司特。本发明的优选的实施方式中，Th2细胞因子抑制剂为甲磺司特。

甲磺司特用式

表示。

在本说明书中使用时，术语“TLR配体”是指Toll样受体（TLR）的配体，例如包括TLR1～9的配体。作为TLR配体，可以列举出TLR1/2配体、TLR2/6配体、TLR2及Dectin1配体、TLR3配体、TLR4配体、TLR5配体、TLR7和/或TLR8配体、TLR9配体等。本发明的优选的实施方式中，TLR配体为TLR1/2配体、TLR2及Dectin1配体、TLR3配体、TLR4配体、TLR7和/或TLR8配体、和/或TLR9配体。

在本说明书中使用时，术语“TLR1/2配体”是指Toll样受体（TLR）1及Toll样受体（TLR）2的异质二聚体的配体，例如包括来源于细菌的细胞壁的三酰化脂蛋白及其盐，它们也可以是萃取物、产物或合成品，但并不限定于它们。

本发明的优选的实施方式中，TLR1/2配体为Pam₃CSK₄。Pam₃CSK₄具有式

在本说明书中使用时，术语“TLR2及Dectin1配体”是指Toll样受体（TLR）2及β1,3-葡聚糖受体（Dectin1）的配体，例如包括来源于真菌的细胞壁的β1,3-葡聚糖及其盐，它们也可以是萃取物、产物或合成品，但并不限定于它们。本发明的优选的实施方式中，TLR2及Dectin1配体为来源于酵母细胞壁的酵母多糖。

在本说明书中使用时，术语“TLR3配体”是指Toll样受体（TLR）3的配体，例如包括来源于病毒的双链RNA（dsRNA）及其盐，它们也可以是萃取物、产物或合成品，但并不限定于它们。本发明的优选的实施方式中，TLR3配体为作为合成品的聚肌胞苷酸（Poly（I：C））和/或其盐。

在本说明书中使用时，术语“TLR4配体”是指Toll样受体（TLR）4的配体，包括例如来源于细菌或者植物的脂多糖（LPS）、特别是脂质A衍生物例如单磷酰基脂质A、3-脱酰基单磷酰基脂质A（3D-MPL）、OM174、OM294DP或者OM197MP-Ac DP等、烷基氨基葡糖苷磷酸酯（AGP）、例如WO9850399或者US6303347中公开的AGP或US6764840中公开的AGP的盐，另外，还包括来源于成团泛菌的脂多糖、吡喃葡萄糖基脂（glucopyranosyllipid）、透明质酸钠，但并不限定于这些。

本发明的优选的实施方式中，TLR4配体优选来源于醋酸杆菌属（例如醋化醋酸杆菌、木醋杆菌、东方醋酸菌等）、发酵单胞菌属（例如运动发酵单胞菌等）、黄单胞菌属（例如野油菜黄单胞菌等）、肠杆菌属（例如阴沟肠杆菌等）、泛菌属（例如成团泛菌等）的脂多糖。来源于这些脂多糖的萃取物或精制的脂多糖也可以直接使用。另外，例如来源于成团泛菌的脂多糖（IP-PA1）可以自Funakoshi Corporation买入。另外，本发明的优选的实施方式中，TLR4配体为来源于成团泛菌的脂多糖、吡喃葡萄糖基脂、和/或透明质酸钠。

在本说明书中使用时，术语“TLR7和/或TLR8配体”是指Toll样受体（TLR）7和/或TLR8的配体，包括例如单链RNA、咪喹莫特、雷西莫特（R848）、TLR7-II及其它化合物、例如洛索立宾及溴匹立明，但并不限定于这些。

本发明的优选的实施方式中，TLR7和/或TLR8配体为咪喹莫特。咪喹莫特为式

的1-（2-甲基丙基）-1H-咪唑并[4，5-c]喹啉-4-胺，例如日本特表平7-505883号公报（专利文献4）中记载有其特征及制造方法。

在其它的优选的实施方式中，TLR7和/或TLR8配体为雷西莫特。雷西莫特为式

的4-氨基-2-（乙氧基甲基）-α,α-二甲基-1H-咪唑并[4,5-c]喹啉-1-乙醇。

在其它的优选的实施方式中，TLR7和/或TLR8配体为TLR7-II。TLR7-II用式

表示。

在其它的优选的实施方式中，TLR7和/或TLR8配体为溴匹立明。溴匹立明用式

表示。

在本说明书中使用时，术语“TLR9配体”是指Toll样受体（TLR）9的配体，例如包括ODN1826等。本发明中使用的TLR9配体可以是萃取物、产物或合成品，但并不限定于它们。本发明的优选的实施方式中，TLR9配体为ODN1826。

ODN1826是包含以下的序列（序列号12）的寡聚脱氧核苷酸。

5’―ｔｃｃａｔｇａｃｇｔｔｃｃｔｇａｃｇｔｔ―3’

在本说明书中使用时，术语“TLR2/6配体”是指Toll样受体（TLR）2及Toll样受体（TLR）6的异质二聚体的配体，例如包括来源于支原体的细胞壁的二酰化脂蛋白及其盐，它们可以是萃取物、产物或合成品，但并不限定于它们。本发明的优选的实施方式中，TLR2/6配体为Pam₂CSK₄、MALP-2和/或FSL-1。

Pam₂CSK₄用下式表示。

FSL-1用下式表示。

在本说明书中使用时，术语“TLR5配体”是指Toll样受体（TLR）5的配体，例如包括鞭毛蛋白等。本发明中使用的TLR5配体可以是萃取物、产物或合成品，但并不限定于它们。本发明的优选的实施方式中，TLR5配体为鞭毛蛋白。

Toll样受体（TLR）是通过其体内激活而引发特异性细胞因子、趋化因子及生长因子参与的先天性免疫应答的I型跨膜蛋白的家族。所有的TLR都能够激活固定的细胞内信号传递分子、例如核因子κB（NF-κB）及丝裂原激活蛋白激酶（MAP激酶）等，并且，释放出的细胞因子及趋化因子的特异性集合体是各TLR特有的。TLR3、7、8、及9包含存在于免疫细胞（树突状细胞及单核细胞等）的内涵体区室或溶酶体区室中的TLR的亚族。具体而言，TLR3由树突状细胞、成纤维细胞等大范围的细胞表达，TLR7由浆细胞样树突状细胞表达，并且较少的程度由单核细胞表达，TLR8由单核细胞以及来源于单核细胞的树突状细胞及髓样树突状细胞表达，TLR9由浆细胞样树突状细胞表达。该亚族介导微生物核酸（单链RNA、双链RNA、单链DNA等）的识别。TLR3、TLR7和/或TLR8、TLR9的激动剂刺激各种促炎细胞因子（例如包括白介素-6、白介素-12、TNF-α、及干扰素-γ）的产生。该激动剂还促进协同刺激分子（例如CD40、CD80、及CD86等）、主要组织相容性复合体分子、及趋化因子受体的表达的增加。I型干扰素（IFNα及IFNβ）在利用TLR7和/或TLR8激动剂激活时由细胞产生。

在本说明书中使用时，术语“环状二核苷酸”是指2个核苷酸的糖部分的2个OH基分别与同一磷酸分子生成酯并环化而得到的分子及其类似物，例如包括环状二AMP（c-di-AMP）、环状二GMP（c-di-GMP）、c-dGpGp、c-dGpdGp、c-GpAp、c-GpCp、c-GpUp等，但并不限定于它们。环状二核苷酸激活树突状细胞或T细胞。环状二核苷酸的进一步的例子、能够将它们作为佐剂使用、及它们的制造方法记载在日本特表2007-529531号公报（专利文献5）中。本发明的优选的实施方式中，环状二核苷酸为环状二GMP和/或环状二AMP。环状二GMP具有下式

在Kawai et al.,Nucleic Acids Research Suppl.3：103-4中记载有其合成方法。

在本说明书中使用时，术语“辅助肽”是指激活辅助性T细胞的所有肽，例如包括来源于结核菌的辅助肽、来源于麻疹病毒的辅助肽、来源于乙型肝炎病毒的辅助肽、来源于丙型肝炎病毒的辅助肽、来源于沙眼衣原体的辅助肽、来源于热带恶性疟原虫子孢子的辅助肽、来源于钥孔虫戚血蓝蛋白的辅助肽、来源于破伤风毒素的辅助肽、来源于百日咳毒素的辅助肽、来源于白喉毒素的辅助肽、来源于癌细胞的辅助肽（例如IMA-MMP-001辅助肽、CEA-006辅助肽、MMP-001辅助肽、TGFBI-004辅助肽、HER-2/neu（aa776-790）辅助肽、AE36辅助肽、AE37辅助肽、MET-005辅助肽、BIR-002辅助肽等）、通用辅助类似物（universal helper analog）（例如PADRE）。

另外，本发明中，也可以代替上述的辅助肽、或与其组合而使用该辅助肽的全部或一部分氨基酸通过置换、修饰等而被改变了的肽（以下称为“经改变的辅助肽”）。

经改变的辅助肽包括例如：

（a）由在原始的辅助肽的氨基酸序列中置换、缺失或附加1个～数个、例如1个、2个、3个、4个或5个氨基酸而得到的氨基酸序列构成的肽；及

（b）由在原始的辅助肽的氨基酸序列中全部或一部分氨基酸、例如1个或多个、例如1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个、10个、11个、12个、13个、14个、或15个氨基酸经过修饰而得到的氨基酸序列构成的肽。

作为经改变的辅助肽可以具有的氨基酸的“修饰”，并不限定于此，例如可以列举出：乙酰化、甲基化等烷基化、糖基化、羟基化、羧基化、醛化、磷酸化、磺酰化、甲酰化、豆蔻酰化、棕榈酰化、硬脂酰化这样的脂肪链附加修饰、辛酰化、酯化、酰胺化、脱酰胺化、胱氨酸修饰、谷胱甘肽修饰、巯基乙酸修饰这样的二硫键形成修饰、糖化、泛素化、琥珀酰亚胺形成、谷酰化、异戊二烯化等。另外，经改变的辅助肽也可以组合包含1个以上氨基酸的置换、缺失或附加、和1个以上氨基酸的修饰。

本发明的优选的实施方式中，辅助肽是由10～18个氨基酸、优选12～16个氨基酸、更优选13～15个氨基酸构成的。本发明的优选的实施方式中，辅助肽为Peptide-25或经改变的Peptide-25、PADRE。经改变的Peptide-25的一例为Peptide-25B。Peptide-25是与作为由人型结核菌（结核分枝杆菌）分泌的主要蛋白质之一的Ag85B的氨基酸残基240～254相对应的、由序列Phe GlnAsp Ala Tyr Asn Ala Ala Gly Gly His Asn Ala Val Phe（序列号13）构成的15个氨基酸的肽。Peptide-25B是为了提高免疫激活效果而改变了Peptide-25的一部氨基酸而得到的经改变的Peptide-25的一例，是由序列Phe Gln Asp Ala Tyr Asn Ala Val His Ala Ala His AlaVal Phe（序列号14）构成的15个氨基酸的肽。PADRE是由序列D-Ala Lys环己基-Ala Val Ala Ala Trp Thr Leu Lys Ala Ala D-Ala构成的13个氨基酸的肽（本申请中，示为序列号15）。

在本说明书中使用时，术语“免疫调节低分子药物”是指激活或抑制T细胞、NK细胞、巨噬细胞等免疫细胞的物质中不属于上述TLR配体、环状二核苷酸、辅助肽、环氧酶抑制剂、前列腺素受体拮抗剂、前列腺素受体激动剂、TSLP产生抑制剂、腺苷酸环化酶抑制剂、ω-3脂肪酸、PPAR激动剂、多巴胺受体拮抗剂、多巴胺受体激动剂、组胺受体激动剂、组胺受体拮抗剂、血清素受体激动剂、血清素受体拮抗剂、加压素受体拮抗剂、加压素受体激动剂、毒蕈碱受体拮抗剂、毒蕈碱受体激动剂、肾上腺素受体拮抗剂、肾上腺素受体激动剂、血管紧张素受体激动剂、GABA受体激动剂、凝血酶受体拮抗剂、凝血酶受体激动剂、阿片类受体激动剂、ADP受体激动剂、白三烯受体拮抗剂、白三烯受体激动剂、褪黑素受体激动剂、生长抑素受体激动剂、大麻素受体激动剂、鞘氨醇1-磷酸受体激动剂、代谢型谷氨酸受体激动剂、磷脂酶A2抑制剂、TGF-β产生抑制剂、及Th2细胞因子抑制剂中的任一种的药物。作为免疫调节低分子药物，例如可以列举出贝他定、匹多莫德、左旋咪唑、戈洛莫德、福芬诺尔、及它们的衍生物、以及它们的药理学上容许的盐等。例如，作为左旋咪唑的药理学上容许的盐，可以列举出左旋咪唑盐酸盐等。

贝他定用式

表示。

匹多莫德用式

表示。

左旋咪唑盐酸盐用式

表示。

本发明中，免疫调节低分子药物通常为分子量不足1000、优选不足500的化合物。本发明的优选的实施方式中，免疫调节低分子药物为选自由贝他定、匹多莫德及左旋咪唑盐酸盐组成的组中的1种以上化合物。

本发明发现，在给予目标抗原时，通过使用作为具有抑制Th2细胞的分化的作用的Th2细胞分化抑制剂的环氧酶抑制剂、前列腺素受体拮抗剂、前列腺素受体激动剂、TSLP产生抑制剂、腺苷酸环化酶抑制剂、ω-3脂肪酸、PPAR激动剂、多巴胺受体拮抗剂、多巴胺受体激动剂、组胺受体激动剂、组胺受体拮抗剂、血清素受体激动剂、血清素受体拮抗剂、加压素受体拮抗剂、加压素受体激动剂、毒蕈碱受体拮抗剂、毒蕈碱受体激动剂、肾上腺素受体拮抗剂、肾上腺素受体激动剂、血管紧张素受体激动剂、GABA受体激动剂、凝血酶受体拮抗剂、凝血酶受体激动剂、阿片类受体激动剂、ADP受体激动剂、白三烯受体拮抗剂、白三烯受体激动剂、褪黑素受体激动剂、生长抑素受体激动剂、大麻素受体激动剂、鞘氨醇1-磷酸受体激动剂、代谢型谷氨酸受体激动剂、磷脂酶A2抑制剂、TGF-β产生抑制剂、及Th2细胞因子抑制剂，有利于增大细胞免疫诱导。因此，在一个实施方式中，本发明的细胞免疫诱导促进剂为选自它们中的1种以上的物质。另外还发现，在进一步的实施方式中，通过进一步含有选自由这些Th2细胞因子抑制剂组成的组中的1种以上第一细胞免疫诱导促进剂和选自由TLR配体、环状二核苷酸、免疫调节低分子药物组成的组中的1种以上第二细胞免疫促进剂和/或作为第三细胞免疫诱导促进剂的辅助肽，有利于进一步增大细胞免疫诱导。作为定量测定细胞免疫的诱导的方法，开发了很多方法，可以使用其中的任1种或1种以上、例如实施例中记载的ELISPOT法。

在优选的实施方式中，本发明的疫苗组合物含有的细胞免疫诱导促进剂为选自由Th2细胞分化抑制剂组成的组中的1种以上的第一细胞免疫诱导促进剂，更优选进一步包含选自由TLR配体、环状二核苷酸及免疫调节低分子药物组成的组中的1种以上的第二细胞免疫诱导促进剂和/或作为第三细胞免疫诱导促进剂的辅助肽。

在本说明书中使用时，非侵入式给予是指不主动对皮肤、粘膜赋予物理刺激和/或化学刺激、优选不主动对皮肤、粘膜赋予物理刺激（例如胶带粘贴（tape stripping）、微针、剥离处理、损伤处理、穿孔处理）地进行给予。

在本说明书中使用时，术语“低刺激条件”是指，赋予皮肤的刺激比为了提高现有疫苗中所含的抗原的皮肤渗透性而通常对皮肤赋予的刺激低的条件或不对皮肤赋予刺激的条件。将现有的疫苗组合物经皮给予时，给予前或给予时对皮肤赋予物理刺激和/或化学刺激从而提高抗原的皮肤渗透性。在优选的实施方式中，作为低刺激条件，可以列举出物理刺激低的条件及化学刺激低的条件。物理刺激低的条件为例如疫苗给予前的皮肤刺激评价用动物模型的经皮水分散发量（TEWL）（g/h·m²）为50以下、优选45以下、更优选40以下、进一步优选35以下、更进一步优选30以下的条件。对于未经治疗的皮肤，TEWL水平为约2（g/h·m²），因此，给予前的TEWL水平为2（g/h·m²）以上。在一个实施方式中，化学刺激低的条件为皮肤刺激评价用动物模型的皮肤内的胸腺基质淋巴细胞生成素（TSLP）水平（pg/mg蛋白质）为10000以下、优选9000以下、更优选8000以下、进一步优选7000以下的条件。对于未经治疗的皮肤，TSLP水平为约1（pg/mg蛋白质），因此，给予结束时，TSLP水平超过1（pg/mg蛋白质），优选超过2（pg/mg蛋白质），更优选超过3（pg/mg蛋白质）。胸腺基质淋巴细胞生成素（TSLP）是参与Th2细胞的分化、募集（recruit）的细胞因子，本发明中，可以用作皮肤刺激的程度的指标（值越大刺激越强）。作为用于达成物理刺激低的条件的手段，例如可以列举出不进行通常进行的给予前的皮肤的预处理、例如胶带粘贴、微针穿刺等。作为用于达成化学刺激低的条件的手段，例如可以列举出不给予特定量以上的具有刺激性的化学成分、例如乙醇、表面活性剂等。向目标对象给予本发明的疫苗组合物时，可以使用皮肤刺激评价用动物模型确定用于达成上述低刺激条件的具体手段，将该手段适用于向目标对象、例如人等给予时。

在本说明书中使用时，术语“癌症”是指伴随癌基因的异常表达、例如过表达的癌症，例如造血器官肿瘤、实体肿瘤。作为癌基因，例如可列举出Survivin基因、GPC3基因、HER2/neu基因、MAGE3基因、MAGE A1基因、MAGE A3/A6基因、MAGE A4基因、MAGE12基因、蛋白酶-3基因、AFP基因、CA-125基因、CD44基因、CEA基因、c-Kit基因、c-met基因、c-myc基因、L-myc基因、COX2基因、CyclinD1基因、Cytokeratin-7基因、Cytokeratin-19基因、Cytokeratin-20基因、E2F1基因、E2F3基因、EGFR基因、Gli1基因、hCGβ基因、HIF-1α基因、HnRNP A2/B1基因、hTERT基因、MDM基因、MDR-1基因、MMP-2基因、MMP-9基因、Muc-1基因、Muc-4基因、Muc-7基因、NSE基因、ProGRP基因、PSA基因、RCAS1基因、SCC基因、Thymoglobulin基因、VEGF-A基因、VEGF-A基因等。伴随着Survivin基因的异常表达的癌症包括恶性淋巴瘤、膀胱癌、肺癌、大肠癌等，但并不限定于此。伴随着GPC3基因的异常表达的癌症包括肝癌、胆管癌、胃癌等，但并不限定于此。伴随着HER2/neu基因的异常表达的癌症包括乳癌、胃癌、卵巢癌、子宫癌、膀胱癌、非小细胞肺癌、前列腺癌等，但并不限定于此。伴随着MAGE3基因的异常表达的癌症包括黑色素瘤、肺癌、头颈部癌、膀胱癌、胃癌、食道癌、肝癌，但并不限定于此。伴随着蛋白酶-3基因的异常表达的癌包括急性骨髄性白血病、胰腺癌，但并不限定于此。

在本说明书中使用时，术语“基因的异常表达”是指某个细胞的基因的表达水平与相同组织的其它细胞相比显著升高或降低例如2倍以上、例如4倍以上。术语“过表达”是指异常表达为表达水平之上。基因的表达水平可以使用该技术领域公知的任意方法来容易地测定。

在本说明书中使用时，术语“对象”是指在实际应用阶段给予疫苗组合物而能够诱导免疫应答的任意动物，典型的为包括人在内的哺乳类、例如小鼠、大鼠、狗、猫、兔子、马、牛、绵羊、猪、山羊、猴、黑猩猩等。特别优选的对象为人。

在本说明书中使用时，术语“免疫评价用动物模型”是指用于评价疫苗组合物的免疫诱导特性的动物模型，具体而言是指用于评价细胞免疫诱导水平的动物模型。作为免疫评价用动物模型，考虑疫苗组合物中的抗原和动物的MHC I类分子的相容性，使用能够评价利用疫苗组合物中的抗原的细胞免疫诱导的动物。在例如包含HLA-A^＊24型MHC限制性1类肽的疫苗组合物的情况下，用BALB/c小鼠进行评价。在包含HLA-A^＊02型MHC限制性肽的疫苗组合物的情况下，用能评价利用HLA-A^＊02型MHC限制性肽的细胞免疫诱导的转基因小鼠进行评价。在包含其它的HLA型的MHC限制性肽的疫苗组合物的情况下，用能评价利用该HLA型的MHC限制性肽的细胞免疫诱导的动物进行评价。在包含蛋白抗原的疫苗组合物的情况下，用具备与蛋白抗原的氨基酸序列中所含的1类表位中想要进行细胞免疫诱导的1类表位具有相容性的MHC的动物进行评价。为了确保经皮给予部位而将毛剪掉时，使用由剪毛导致的皮肤损伤充分恢复了的状态的动物。

在本说明书中使用时，术语“皮肤刺激评价用动物模型”是指用于评价作为皮肤的物理刺激的指标的经皮水分散发量（TEWL）、作为疫苗组合物的皮肤刺激特性的TSLP的动物模型。不管疫苗组合物中所含的抗原的种类如何，作为皮肤刺激评价用动物模型，使用C57BL/6小鼠。为了确保经皮给予部位而将毛剪掉时，使用由剪毛导致的皮肤损伤充分恢复了的状态的动物。

在本说明书中使用时，术语“癌抗原”是指特异性地表达肿瘤细胞乃至癌细胞、能够诱导免疫应答的蛋白质、肽等物质。

在本说明书中使用时，术语“癌抗原肽”是指来源于癌抗原蛋白质的部分肽，其能够诱导细胞免疫应答。通常，癌抗原肽通过癌基因的产物即癌抗原蛋白质在癌细胞内分解而产生，通过MHC I类分子而在癌细胞的表面提呈。在癌症疫苗制剂中使用的癌抗原肽可以是从癌细胞中分离·精制出的内源性的癌抗原肽，也可以是具有与内源性的癌抗原肽相同的氨基酸序列的合成肽。在本发明的优选实施方式中，为了诱导细胞免疫，可以使用例如选自由Survivin2B肽和/或经改变的Survivin2B肽、GPC3肽和/或经改变的GPC3肽、HER2/neu_A24肽和/或经改变的HER2/neu_A24肽、MAGE3_A24肽和/或经改变的MAGE3_A24肽、PR1肽和/或经改变的PR1肽、HER2/neu_A02肽和/或经改变的HER2/neu_A02肽、HER2/neu E75肽和/或经改变的HER2/neu E75肽、MAGE3_A02肽和/或经改变的MAGE3_A02肽、以及MUC1肽和/或经改变的MUC1肽组成的组中的内源性或合成的癌抗原肽。

在本说明书中使用时，术语“来源于感染性病原体的抗原”是指感染性病原体或其构成成分或来源于它们的物质，其能够诱导细胞免疫应答。因而，通过将来源于感染性病原体的抗原、优选与细胞免疫诱导促进剂一起经皮给予到对象，能够治疗或预防感染性疾病。在本发明的优选实施方式中，例如，可以将选自由IPEP87肽和/或经改变的IPEP87肽以及HBVenv肽和/或经改变的HBVenv肽组成的组中的肽用作来源于感染性病原体的抗原。

在本说明书中使用时，术语“感染性疾病”是指由感染性病原体的感染、增殖等引起的疾病，代表性的有例如：腺病毒（例如人腺病毒）、疱疹病毒（例如单纯疱疹病毒、水痘·带状疱疹病毒、巨细胞病毒、人疱疹病毒或卡波西肉瘤相关疱疹病毒）、小核糖核酸病毒（例如脊髓灰质炎病毒、感冒病毒或甲型肝炎病毒）、痘病毒（例如天花病毒、牛痘病毒或感染性软疣病毒）、小核糖核酸病毒（例如鼻病毒或肠道病毒）、正粘病毒（例如流感病毒）、副粘病毒（例如副流感病毒、腮腺炎病毒、麻疹病毒、呼吸道合胞体病毒（RSV）或新城疫病毒）、细小病毒（例如腺相关病毒）、披膜病毒（例如风疹病毒）、冠状病毒（例如SARS冠状病毒）、嗜肝DNA病毒（例如乙型肝炎病毒）、黄病毒（例如日本脑炎病毒、黄热病病毒、登革热病毒、西尼罗河热病毒、圣路易斯脑炎病毒、墨累谷脑炎病毒、丙型肝炎病毒或G型肝炎病毒）、肝炎病毒（例如戊型肝炎病毒）、乳头瘤病毒（例如人乳头瘤病毒）、杯状病毒（例如诺罗病毒）、棒状病毒（例如狂犬病病毒或水泡性口炎病毒）、线状病毒（例如伊波拉出血热病毒）、沙粒病毒（例如拉沙病毒或丁型肝炎病毒）、布尼亚病毒（例如加州脑炎病毒或裂谷热病毒）、呼肠孤病毒（例如轮状病毒）或逆转录病毒（例如人类免疫缺陷病毒（HIV）或成人T细胞白血病病毒）的感染引起的疾病等病毒疾病、埃希氏杆菌属、肠杆菌、沙门氏菌、葡萄球菌、志贺氏菌、李斯特菌、气杆菌、螺杆菌、克雷伯氏菌、变形杆菌、假单胞菌、链球菌、衣原体、支原体、肺炎球菌、奈瑟氏菌、梭菌、芽孢杆菌、棒状杆菌、分枝杆菌、弯曲杆菌、弧菌、沙雷氏菌、普罗维登斯菌、色杆菌、布鲁氏菌、耶尔森氏菌、嗜血杆菌、或鲍特氏菌等细菌感染引起的疾病等细菌疾病、以衣原体、念珠菌病、曲霉病、组织胞浆菌病、隐球菌性脑膜炎为代表但并不限定于此的真菌疾病、和疟疾、卡氏肺孢子虫肺炎、利什曼病、隐孢子虫病、弓形虫病、及锥虫感染，但并不限定于此。

＜经皮给予用疫苗组合物＞

在本说明书中使用时，术语“经皮给予用”组合物为经皮给予中通常使用的任意制剂例如搽剂或者洗剂这样的外用液体制剂、气雾剂这样的外用喷雾剂、软膏剂、硬膏剂、霜剂、凝胶剂或带状制剂或者巴布剂这样的贴剂即可。这些组合物的区分、定义、性质、制法等在本技术领域是公知的，可以参考例如日本药典第16版。

例如，作为搽剂用基质，可以列举出水、乙醇、脂肪油例如固体石蜡、软石蜡、液体石蜡、甘油、石蜡油、蜜蜡、金属皂；粘液（mucilage）；天然油[例如：杏仁油、玉米油、花生油、蓖麻油、橄榄油、或它们的衍生物（例如聚氧乙烯醚蓖麻油（Polyoxyl Castor Oil））]；羊油或其衍生物、脂肪酸和/或酯（例如：硬脂酸、油酸、肉豆蔻酸异丙酯）。

洗剂是将活性成分微细地均匀分散在水性液体中而得到的制剂，有悬浮性洗剂和乳浊性洗剂。作为悬浮剂，例如可以列举出阿拉伯胶、海藻酸钠、羧甲基纤维素钠、甲基纤维素、膨润土等。作为乳化剂，例如可以列举出月桂基硫酸钠、山梨糖醇酐脂肪酸酯等。

例如，作为软膏基质，可以使用通常作为疏水性基质的油脂类、蜡、烃化合物等。具体而言，作为软膏基质，可以列举出黄色凡士林、白色凡士林、石蜡、液体石蜡、液体石腊和聚乙烯的复合软膏基质（plastibase）、有机硅等矿物性基质、蜜蜡、动植物性油脂等动植物性基质等。

例如，作为霜剂用基质，可以列举出亲水性软膏、雪花膏（vanishingcream）等水/油型基质；亲水性凡士林、精制羊毛脂、阿夸弗尔（aquaphor）、优塞林（Eucerin）、Neoeserine、含水羊毛脂、冷霜（cold cream）、亲水性液体石腊和聚乙烯的复合软膏基质（plastibase）等油/水型基质。

例如，作为凝胶基质，可以使用作为水凝胶基质的羧基乙烯基聚合物、凝胶基质（gelbase）、无脂肪性软膏、聚乙烯基吡咯烷酮、聚乙烯醇、聚丙烯酸钠、羧甲基纤维素、淀粉、黄原胶、刺梧桐胶、海藻酸钠、甲基纤维素、羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素邻苯二甲酸酯（HPMCP）、醋酸邻苯二甲酸纤维素（CAP）、羧甲基乙基纤维素（CMEC）、乙基纤维素、羟乙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、羧基乙烯基聚合物、黄蓍胶、阿拉伯胶、塔拉胶（taragum）、罗望子胶、车前子胶、琼脂、结冷胶、葡甘露聚糖、刺槐豆胶、瓜尔豆胶、角叉菜胶、糊精、葡聚糖、直链淀粉、羧甲基纤维素钾、羧甲基纤维素钠、羧甲基纤维素钙、普鲁兰多糖、壳聚糖、羧甲基淀粉钠、车前属种皮、半乳甘露聚醣、甲基丙烯酸氨基烷基酯共聚物E、甲基丙烯酸氨基烷基酯共聚物RS、甲基丙烯酸共聚物L、甲基丙烯酸共聚物LD、甲基丙烯酸共聚物S、丙烯酸甲酯·甲基丙烯酸·甲基丙烯酸甲酯共聚物、丙烯酸乙酯·甲基丙烯酸甲酯共聚物、聚乙烯醇缩醛二乙基氨基乙酸酯、酪蛋白、海藻酸烷基酯、明胶、聚乙二醇等。

例如，作为巴布剂用基质，可以列举出明胶、羧甲基纤维素钠、甲基纤维素、聚丙烯酸钠、高岭土、聚乙烯醇、聚乙烯基吡咯烷酮、甘油、丙二醇、水等。

例如，带状制剂包含粘合剂层和用于支撑粘合剂层的支撑体，所述粘合剂层包含丙烯酸系粘合剂、天然橡胶系粘合剂、合成橡胶系粘合剂（包括合成异戊二烯橡胶、聚异丁烯（PIB）、丁苯橡胶、苯乙烯-异戊二烯-苯乙烯（SIS）橡胶等橡胶系弹性体）、有机硅系粘合剂、乙烯酯系粘合剂、乙烯基醚系粘合剂等。根据需要，可以进一步含有在使用前使粘合剂层不会露出、而在使用时能够容易地从粘合剂层剥离的剥离衬垫。

本发明的组合物中的抗原及细胞免疫诱导促进剂的比例没有特别限定。在一个实施方式中，本发明的组合物含有以组合物的总重量为基准优选0.01～40重量%、更优选0.1～30重量%的目标抗原。在一个实施方式中，本发明的组合物含有以组合物的总重量为基准优选0.001～30重量%、更优选0.01～20重量%的细胞免疫诱导促进剂。

本发明的经皮给予用疫苗组合物为带状制剂的形态的情况下，该带状制剂（以下有时也称为“本发明的带状制剂”）的粘合剂层包含抗原，根据需要，还包含细胞免疫诱导促进剂。在一个实施方式中，本发明的带状制剂的粘合剂层包含以粘合剂层的总重量为基准优选0.01～40重量%、更优选0.1～30重量%的抗原。本发明的带状制剂的粘合剂层包含细胞免疫诱导促进剂时，以粘合剂层的总重量为基准包含优选0.001～30重量%、更优选0.01～20重量%的细胞免疫诱导促进剂。

用于形成本发明的带状制剂的粘合剂层的粘合剂没有特别限定，例如为由丙烯酸系聚合物形成的丙烯酸系粘合剂；包含苯乙烯-二烯-苯乙烯嵌段共聚物（例如苯乙烯-异戊二烯-苯乙烯嵌段共聚物、苯乙烯-丁二烯-苯乙烯嵌段共聚物等）、聚异戊二烯、聚异丁烯、丁基橡胶、聚丁二烯等橡胶系弹性体的橡胶系粘合剂；有机硅橡胶、二甲基硅氧烷基料、二苯基硅氧烷基料等有机硅系粘合剂；聚乙烯基甲基醚、聚乙烯基乙基醚、聚乙烯基异丁基醚等乙烯基醚系粘合剂；醋酸乙烯酯-乙烯共聚物等乙烯酯系粘合剂；由对苯二甲酸二甲酯、间苯二甲酸二甲酯、邻苯二甲酸二甲酯等羧酸成分与乙二醇等多元醇成分形成的聚酯系粘合剂等。特别优选的粘合剂为丙烯酸系粘合剂、橡胶系粘合剂、有机硅系粘合剂。这些粘合剂以其固体成分计，以粘合剂层的总重量为基准，以优选10～90重量%、更优选20～80重量%的量包含在粘合剂层中。

作为丙烯酸系粘合剂的例子，可以列举出将以包含（甲基）丙烯酸C2～18烷基酯为第1单体的聚合物作为主成分的丙烯酸酯系粘合剂。作为上述（甲基）丙烯酸烷基酯（第1单体）的例子，可以列举出为烷基的碳数1～18的直链状、支链状或环状烷基（例如甲基、乙基、丙基、丁基、戊基、己基、环己基、庚基、辛基、2-乙基己基、壬基、癸基、十一烷基、十二烷基、十三烷基等）的（甲基）丙烯酸烷基酯等，优选为烷基的碳数4～18的直链状、支链状或环状烷基（例如丁基、戊基、己基、环己基、庚基、辛基、2-乙基己基、壬基、癸基、十一烷基、十二烷基、十三烷基等）的（甲基）丙烯酸烷基酯。进而，为了在常温下赋予粘合性，更优选使用使聚合物的玻璃化转变温度降低的单体成分，因此，更优选为烷基的碳数4～8的直链状、支链状或环状烷基（例如丁基、戊基、己基、环己基、庚基、辛基、2-乙基己基等，优选丁基、2-乙基己基、环己基，特别优选2-乙基己基）的（甲基）丙烯酸烷基酯。具体而言，更优选丙烯酸丁酯、丙烯酸2-乙基己酯、甲基丙烯酸2-乙基己酯、丙烯酸环己酯、甲基丙烯酸环己酯等，其中，最优选丙烯酸2-乙基己酯。这些（甲基）丙烯酸烷基酯（第1单体成分）可以使用1种或组合使用2种以上。

另外，丙烯酸系粘合剂可以含有能与上述（甲基）丙烯酸烷基酯共聚的第2单体，作为这样的第2单体，可以列举出具有能成为使用交联剂时的交联点的官能团的单体。作为能够参与交联反应的官能团，可以列举出羟基、羧基、乙烯基等，优选羟基及羧基。作为该单体（第2单体成分）的具体例，可以列举出（甲基）丙烯酸羟乙酯、（甲基）丙烯酸羟丙酯、N-羟烷基（甲基）丙烯酰胺、（甲基）丙烯酸、衣康酸、马来酸、马来酸酐、中康酸、柠康酸、戊烯二酸等。其中，从获得的容易性的观点考虑，优选丙烯酸、甲基丙烯酸、丙烯酸羟乙酯（尤其是丙烯酸2-羟乙酯），最优选丙烯酸。这些单体（第2单体成分）可以使用1种或组合使用2种以上。

进而，丙烯酸系粘合剂根据需要可以含有第2单体以外的第3单体。作为第3单体（第3单体成分），例如可以列举出醋酸乙烯酯、丙酸乙烯酯等乙烯酯类；甲基乙烯基醚、乙基乙烯基醚等乙烯基醚类；N-乙烯基-2-吡咯烷酮、N-乙烯基己内酰胺等乙烯基酰胺类；（甲基）丙烯酸甲氧基乙酯、（甲基）丙烯酸乙氧基乙酯、（甲基）丙烯酸四氢糠基酯等（甲基）丙烯酸烷氧基酯；（甲基）丙烯酸羟丙酯、丙烯酸α-羟甲酯等含羟基单体（由于是作为第3单体成分使用，因此，不作为交联点）；（甲基）丙烯酰胺、二甲基（甲基）丙烯酰胺、N-丁基（甲基）丙烯酰胺、N-羟甲基（甲基）丙烯酰胺等具有酰胺基的（甲基）丙烯酸衍生物；（甲基）丙烯酸氨基乙酯、（甲基）丙烯酸二甲氨基乙酯、（甲基）丙烯酸叔丁氨基乙酯等（甲基）丙烯酸氨基烷基酯；（甲基）丙烯酸甲氧基乙二醇酯、（甲基）丙烯酸甲氧基二乙二醇酯、（甲基）丙烯酸甲氧基聚乙二醇酯、（甲基）丙烯酸甲氧基聚丙二醇酯等（甲基）丙烯酸烷氧基亚烷基二醇酯；（甲基）丙烯腈；苯乙烯磺酸、烯丙基磺酸、（甲基）丙烯酸磺丙基酯、（甲基）丙烯酰氧基萘磺酸酯、丙烯酰胺甲基磺酸等具有磺酸的单体；乙烯基哌啶酮、乙烯基嘧啶、乙烯基哌嗪、乙烯基吡咯、乙烯基咪唑、乙烯基噁唑、乙烯基吗啉等含乙烯基单体等。其中，优选乙烯酯类、乙烯基酰胺类，乙烯酯类优选醋酸乙烯酯，乙烯基酰胺类优选N-乙烯基-2-吡咯烷酮。这些单体（第3单体成分）可以使用1种或组合使用2种以上。

该丙烯酸系粘合剂为（甲基）丙烯酸烷基酯（第1单体成分）与具有能参与交联反应的官能团的乙烯基单体（第2单体成分）的共聚物时，优选（甲基）丙烯酸烷基酯与具有能参与交联反应的官能团的乙烯基单体以（甲基）丙烯酸烷基酯：具有能参与交联反应的官能团的乙烯基单体＝99～85：1～15的重量比进行配混并共聚，更优选为99～90：1～10的重量比。

另外，该丙烯酸系粘合剂为（甲基）丙烯酸烷基酯（第1单体成分）、具有能参与交联反应的官能团的乙烯基单体（第2单体成分）、与这两种单体以外的其它单体（第3单体成分）的共聚物时，优选（甲基）丙烯酸烷基酯、具有能参与交联反应的官能团的乙烯基单体、与这两种单体以外的其它单体以（甲基）丙烯酸烷基酯：具有能参与交联反应的官能团的乙烯基单体：这两种单体以外的其它单体＝40～94：1～15：5～50的重量比进行配混并共聚，更优选为50～89：1～10：10～40的重量比。

聚合反应使用自身公知的方法进行即可，没有特别限定，例如可以列举出添加聚合引发剂（例如过氧化苯甲酰、偶氮二异丁腈等），在溶剂（例如醋酸乙酯等）中使上述单体在50～70℃下反应5～48小时的方法。

作为本发明中特别优选的丙烯酸系粘合剂，例如为丙烯酸2-乙基己酯/丙烯酸/N-乙烯基-2-吡咯烷酮的共聚物、丙烯酸2-乙基己酯/N-（2-羟乙基）丙烯酰胺/N-乙烯基-2-吡咯烷酮的共聚物、丙烯酸2-乙基己酯/丙烯酸2-羟乙酯/醋酸乙烯酯的共聚物、丙烯酸2-乙基己酯/丙烯酸的共聚物等，更优选为丙烯酸2-乙基己酯/丙烯酸/N-乙烯基-2-吡咯烷酮的共聚物。

根据需要，可以对这些丙烯酸系粘合剂实施利用紫外线照射、电子射线照射等辐射线照射进行的物理交联，使用三官能性异氰酸酯等异氰酸酯系化合物、有机过氧化物、有机金属盐、金属醇盐、金属螯合化合物、多官能性化合物（多官能性外部交联剂，二丙烯酸酯、二甲基丙烯酸酯等多官能性内部交联用单体）等各种交联剂的化学交联处理。

作为橡胶系粘合剂，可以列举出配混有作为橡胶系弹性体的例如聚异丁烯·聚丁烯系、苯乙烯·二烯·苯乙烯嵌段共聚物、苯乙烯·丁二烯系、腈系、氯丁二烯系、乙烯基吡啶系、聚异丁烯系、丁基系、异戊二烯·异丁烯系等弹性体的橡胶系粘合剂。其中，从对肽及其细胞免疫诱导促进剂的溶解性及皮肤粘接性的方面考虑，优选使用聚异丁烯（PIB）、苯乙烯·二烯·苯乙烯嵌段共聚物〔例如苯乙烯·丁二烯·苯乙烯嵌段共聚物（SBS）、苯乙烯·异戊二烯·苯乙烯嵌段共聚物（SIS）等〕等，这些可以混合使用。

另外，为了达到适度的粘合力及药剂溶解性，橡胶系粘合剂可以混合为相同成分或不同成分且平均分子量不同的橡胶系弹性体来使用。例如，以聚异丁烯为例进行说明时，优选为平均分子量150,000～5,500,000的高分子量的聚异丁烯与平均分子量10,000～150,000的中分子量的聚异丁烯和/或平均分子量500～4,000的低分子量的聚异丁烯的混合物。这里，适宜的是，以高分子量：中分子量：低分子量＝10～80、优选20～70：0～90、更优选10～80：0～80、进一步优选10～60的重量比配混高分子量、中分子量及低分子量的聚异丁烯。

本发明的平均分子量是指利用Flory的粘度式计算的粘均分子量，其是由20℃下的乌氏粘度计的毛细管1的流动时间利用Schulz-Blaschke式算出斯托丁格指数（Staudinger Index）（J₀），使用该J₀值通过下述式求出的。

[数学式1]

(式)

J₀二n_sp/c(i+0.3ln_sp)(Schulz-Blaschke式)

η_sp＝t/t₀－１

t:溶液的流动时间(利用HagenbaCh－couette校正公式

t_０:溶剂的流动时间(利用Hagenbach－couette校正公式)

c:溶液的浓度（g/cm³)

$J_0=3.06\×{10}^{-2}\stackrel{\‾}{\mathrm{Mv}}0.65$

粘均分子量

在该橡胶系粘合剂中，为了赋予适合的粘合性，可以配混例如松香系树脂、聚萜烯树脂、香豆酮-茚树脂、石油系树脂、萜烯-酚醛树脂、二甲苯树脂、脂环族饱和烃树脂等赋粘剂。赋粘剂可以以橡胶系粘合剂的总重量为基准，以50重量%以下、优选5～40重量%的比例配混上述赋粘剂中的1种或2种以上。

作为有机硅系粘合剂，可以列举出由聚有机硅氧烷系、聚二甲基硅氧烷系、或聚二甲基二苯基硅氧烷系等形成的有机硅系粘合剂。其中，优选使用来自Dow Corning Corporation的BIO PSA这样的商业上能获得的有机硅系粘合剂等。

作为支撑粘合剂层的支撑体，没有特别限定，优选实质上使肽、细胞免疫诱导促进剂不透过的支撑体，即不会发生粘合剂层中所含的肽、细胞免疫诱导促进剂、添加剂等通过支撑体中而自背面流失从而含量降低的支撑体。

作为支撑体，例如可以使用聚酯、聚酰胺、聚偏氯乙烯、聚乙烯、聚丙烯、聚氯乙烯、乙烯-丙烯酸乙酯共聚物、聚四氟乙烯、离聚物树脂、金属箔等单独的薄膜或它们的层叠薄膜等。其中，为了使支撑体和粘合剂层的粘接性（锚固性）良好，优选将支撑体设为由上述材质形成的无孔的塑料薄膜和多孔薄膜的层叠薄膜。该情况下，理想的是，粘合剂层形成于多孔薄膜侧。作为这样的多孔薄膜，采用与粘合剂层的锚固性提高的多孔薄膜，具体而言，可以列举出纸、织布、无纺布、编织布、实施了机械穿孔处理的片等。其中，从操作性等观点考虑，特别优选纸、织布、无纺布。多孔薄膜从锚固性提高、带状制剂的柔软性及贴附操作性等方面考虑，采用厚度1～200μm的范围的多孔薄膜。另外，作为多孔薄膜，使用织布、无纺布时，将单位面积重量设为优选5～30g/m²、更优选6～15g/m²即可。

作为最适合的支撑体，可以列举出厚度1.5～6μm的聚酯薄膜（优选聚对苯二甲酸乙二醇酯薄膜）和单位面积重量6～15g/m²的聚酯（优选聚对苯二甲酸乙二醇酯）制无纺布的层叠薄膜。

为了保护粘合剂层的粘合面直至使用为止，理想的是，在本发明的带状制剂粘合面层叠剥离衬垫。作为剥离衬垫，只要能够进行剥离处理、并确保足够轻的剥离力就没有特别限定，例如可以使用通过在与粘合剂层的接触面涂布有机硅树脂、氟树脂等而实施了剥离处理的聚酯、聚氯乙烯、聚偏氯乙烯、聚对苯二甲酸乙二醇酯等薄膜、优质纸、玻璃纸等纸、或优质纸或者玻璃纸等与聚烯烃的层压薄膜等。剥离衬垫的厚度优选为10～200μm、更优选为25～100μm。作为剥离衬垫，从阻隔性、价格等方面考虑，优选由聚酯（尤其是聚对苯二甲酸乙二醇酯）树脂形成的衬垫。进而，该情况下，从操作性方面考虑，优选具有25～100μm左右的厚度的衬垫。

另外，本发明的组合物根据需要可以含有添加剂。添加剂根据与基质的主成分、抗原及细胞免疫诱导促进剂的相容性、想要实施的给予方案等而自例如等渗剂、防腐·杀菌剂、抗氧化剂、溶解剂、助溶剂、悬浮剂、填充剂、pH调节剂、稳定剂、吸收促进剂、释放速度控制剂、着色剂、增塑剂、交联剂、粘合剂等、或者它们的2种以上的组合中选择。另外，本发明的组合物为带状制剂的形态时，该带状制剂可以含有皮肤渗透性增强剂作为添加剂。

在本说明书中使用时，术语“皮肤渗透性增强剂”是指经皮给予的抗原渗透皮肤的效率与未给予皮肤渗透性增强剂的效率相比能够得到改善的所有物质。作为皮肤渗透性增强剂，只要是在室温（25℃）为液态即具有流动性、或混合使用2种以上时混合物在室温（25℃）下最终变为液态、并具有促进吸收的效果的物质就没有特别限定。作为该有机液态成分，从与粘合剂层的相容性的观点考虑，优选疏水性液态成分。

作为该皮肤渗透性增强剂，例如可以列举出油醇、辛基十二烷醇等高级醇；甘油、乙二醇、聚丙二醇等多元醇；油酸、辛酸等高级脂肪酸；肉豆蔻酸异丙酯、棕榈酸异丙酯、油酸乙酯等脂肪酸酯；癸二酸二乙酯、己二酸二异丙酯等多元酸酯；三异硬脂酸二甘油酯、单油酸山梨糖醇酐、二辛酸丙二醇、单月桂酸聚乙二醇、四油酸聚氧乙烯山梨糖醇等多元醇脂肪酸酯；聚氧乙烯月桂基醚等聚氧乙烯烷基醚；角鲨烷、液体石蜡等烃；橄榄油、蓖麻油等植物油；硅油；N-甲基吡咯烷酮、N-十二烷基吡咯烷酮这样的吡咯烷酮类；癸基甲基亚砜这样的亚砜等，这些增强剂可以使用1种或混合使用2种以上。

在使用橡胶系或丙烯酸系的粘合剂的情况下，可以使用第二皮肤渗透性增强剂。具体的第二皮肤渗透性增强剂例如包含聚乙烯基吡咯烷酮、交联聚乙烯吡咯烷酮、聚丙二醇、聚乙烯醇、羧基乙烯基聚合物、羟丙基纤维素等或它们的混合物，但并不限定于此，在优选的实施方式中，本发明的第二皮肤渗透性增强剂为聚乙烯基吡咯烷酮、交联聚乙烯吡咯烷酮和/或聚丙二醇。

从增强抗原肽的皮肤渗透性的观点出发，作为皮肤渗透性增强剂，可优选使用的：高级醇，更具体而言为碳数8～18（优选为8～14）的高级醇，脂肪酸酯，更具体而言为碳数8～18（优选为12～16）的脂肪酸与碳数为1～18的一元醇的脂肪酸酯、多元醇脂肪酸酯等，尤其优选使用脂肪酸酯、特别是肉豆蔻酸异丙酯、棕榈酸异丙酯、或癸二酸二乙酯。该皮肤渗透性增强剂的量以粘合剂层的总重量为基准优选为0.1重量%～70重量%、更优选为1重量%～65重量%、更优选为5重量%～60重量%。皮肤渗透性增强剂的比例为0.1重量%以上时，可以得到高的经皮吸收促进效果。为70重量%以下时，能够抑制粘合剂层整体的粘合力、内聚力的降低，能够获得高的经皮吸收性，因而是有利的。

本发明的组合物优选在低刺激条件下向对象给予。低刺激条件下的给予例如可以通过如下方式来达成，（i）在用皮肤刺激评价用动物模型进行评价时的经皮水分散发量（TEWL）（g/h·m²）为50以下的给予条件下将本发明的组合物给予给对象，（ii）将用皮肤刺激评价用动物模型进行评价时的皮肤内TSLP水平（pg/mg蛋白质）为10000以下的组合物给予给对象等方式。

在本说明书中使用时，本发明的组合物中可以含有的“药理学上容许的盐”是指不对给予对象产生有害的作用、且不会使该组合物中的成分的药理活性消失的盐。包括无机酸盐（例如盐酸盐、磷酸盐）、有机酸盐（例如醋酸盐、邻苯二甲酸盐、TFA盐）、金属盐（碱金属盐（例如钠盐、钾盐）、碱土金属盐（例如钙盐、镁盐）、铝盐等）、胺盐（三乙胺盐、苄胺盐、二乙醇胺盐、叔丁胺盐、二环己胺盐、精氨酸盐、二甲基铵盐、铵盐等），但并不限定于此。

本发明中，物理刺激是指以擦伤、摩擦为代表的使角质损伤的所有的物理刺激。例如，利用粘合带等除去角质的胶带粘贴的操作、利用切割刀使皮肤受伤的操作、或用微小的针在角质上开孔的使用微针的操作也包含在该物理刺激中。

经皮水分散发量是指每小时从1m²角质散发的水分量（g）。经皮水分散发量可以利用水分散发量测定装置容易地在短时间内进行测定，其通常被广泛用作评价皮肤的损伤程度的指标。本发明中，作为物理刺激水平的指标，也可以使用经皮水分散发量。

TSLP（胸腺基质淋巴细胞生成素）是由皮肤的角化细胞、胸腺、粘膜上皮细胞产生的IL-7样细胞因子的1种，已知其参与树突状细胞的成熟化、T细胞分化。本发明中，作为源自药物、添加剂的刺激的化学刺激水平的指标可以使用TSLP水平。

＜粘膜给予用疫苗组合物＞

本发明的粘膜给予用疫苗组合物在对象的各种抗原的粘膜给予中发挥高的细胞免疫诱导效果。

在本说明书中使用时，术语“粘膜给予用”组合物是粘膜给予例如舌下、鼻腔、颊部、直肠或阴道给予中通常使用的任意制剂，例如可以为凝胶剂（胶浆剂）、霜剂、软膏剂、硬膏剂等半固体制剂、液体制剂、散剂、细粒剂、颗粒剂、膜剂、片剂、口腔崩解片等固体制剂、气雾剂这样的粘膜用喷雾剂、吸引剂等。这些组合物的区分、定义、性质、制法等在本技术领域是公知的，可以参考例如日本药典第16版。

例如，作为液体制剂用溶剂，可以使用适量的水或乙醇、甘油、丙二醇等溶剂，可以使成分分散或溶解在该溶剂中而制备液体制剂。

例如，作为凝胶剂（胶浆剂）用基质，可以使用作为水凝胶基质的羧基乙烯基聚合物、凝胶基质（gelbase）、无脂肪性软膏、聚乙烯基吡咯烷酮、聚乙烯醇、聚丙烯酸钠、羧甲基纤维素、淀粉、黄原胶、刺梧桐胶、海藻酸钠、甲基纤维素、羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素邻苯二甲酸酯（HPMCP）、醋酸邻苯二甲酸纤维素（CAP）、羧甲基乙基纤维素（CMEC）、乙基纤维素、羟乙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、羧基乙烯基聚合物、黄蓍胶、阿拉伯胶、塔拉胶（tara gum）、罗望子胶、车前子胶、琼脂、结冷胶、葡甘露聚糖、刺槐豆胶、瓜尔豆胶、角叉菜胶、糊精、葡聚糖、直链淀粉、羧甲基纤维素钾、羧甲基纤维素钠、羧甲基纤维素钙、普鲁兰多糖、壳聚糖、羧甲基淀粉钠、车前属种皮、半乳甘露聚醣、Eudragit、酪蛋白、海藻酸烷基酯、明胶、聚乙二醇等。将这些基质溶解在溶剂中能够制备具有流动性的凝胶剂、具有成型性的凝胶剂。作为溶剂，优选为水，还可以使用甘油、丙二醇。

例如，作为霜剂用基质，可列举出亲水性软膏、雪花膏等水/油型基质；亲水性凡士林、精制羊毛脂、阿夸弗尔（aquaphor）、优塞林（Eucerin）、Neoeserine、含水羊毛脂、冷霜（cold cream）、亲水性液体石腊和聚乙烯的复合软膏基质（plastibase）等油/水型基质。通过将这些基质投入到油脂系溶剂或水中，利用均质器等进行高速搅拌，能够制备霜剂。

例如，作为膜剂用基质，可列举出聚乙烯基吡咯烷酮、聚乙烯醇、聚丙烯酸钠、羧甲基纤维素、淀粉、黄原胶、刺梧桐胶、海藻酸钠、甲基纤维素、羧基乙烯基聚合物、琼脂、羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素邻苯二甲酸酯（HPMCP）、醋酸邻苯二甲酸纤维素（CAP）、羧甲基乙基纤维素（CMEC）、乙基纤维素、羟乙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、羧基乙烯基聚合物、黄蓍胶、阿拉伯胶、刺槐豆胶、瓜尔豆胶、角叉菜胶、糊精、葡聚糖、直链淀粉、羧甲基纤维素钾、羧甲基纤维素钠、羧甲基纤维素钙、普鲁兰多糖、壳聚糖、羧甲基淀粉钠、车前属种皮、半乳甘露聚醣、甲基丙烯酸氨基烷基酯共聚物E、甲基丙烯酸氨基烷基酯共聚物RS、甲基丙烯酸共聚物L、甲基丙烯酸共聚物LD、甲基丙烯酸共聚物S、丙烯酸甲酯·甲基丙烯酸·甲基丙烯酸甲酯共聚物、丙烯酸乙酯·甲基丙烯酸甲酯共聚物、聚乙烯醇缩醛二乙基氨基乙酸酯、酪蛋白、海藻酸烷基酯等。通过将这些基质溶解在水或乙醇等极性有机溶剂中，进行薄膜涂布后使其干燥，能够制备膜剂。在一个优选的实施方式中，本发明的粘膜给予用疫苗组合物为膜状制剂的形态。

例如，作为散剂、细粒剂、颗粒剂、片剂用添加剂，可以使用乳糖、玉米淀粉、结晶纤维素之类的赋形剂；羟丙基纤维素、阿拉伯胶等结合剂；以及适量的水或乙醇等溶剂，进行混合搅拌后，造粒、干燥、压片，组合这些工序进行制备。根据需要还可以添加硬脂酸镁之类的润滑剂、羟丙基纤维素、蔗糖等包衣剂。

例如，作为口腔崩解片（冷冻干燥型）用基质，可列举出明胶、普鲁兰多糖等多糖类。另外，作为成型剂，可以使用甘露糖醇、海藻糖、山梨糖醇、甘氨酸等。通过将这些添加剂溶解在水中，分注后使其冷冻干燥，能够制备口腔崩解片（冷冻干燥型）。在一个优选的实施方式中，本发明的粘膜给予用疫苗组合物为口腔崩解片的形态。

例如，作为气雾剂，作为内容物可列举出液体制剂、流动性高的凝胶剂、霜剂、散剂等微粉。通过使用喷雾设备使固体或液体的微粒分散在气体中，能够高效地给予至口腔粘膜、鼻腔粘膜之类的给予部位。

＜皮内、皮下、肌肉内给予用疫苗组合物＞

本发明的皮内、皮下、肌肉内给予用给予用疫苗组合物在对象的各种抗原的皮内、皮下、肌肉内的给予中发挥高的细胞免疫诱导效果。

在本说明书中使用时，术语“皮内、皮下、肌肉内给予用”组合物只要为例如液体制剂、悬浮剂、霜剂这样的能注射给予的具有一定程度的流动性的形态即可。这些组合物的区分、定义、性质、制法等在本技术领域是公知的，可以参考例如日本药典第16版。

例如，作为液体制剂用溶剂，可以使用适量的水或生理盐水、乙醇、甘油、丙二醇等溶剂，使成分分散或溶解在该溶剂中来制备液体制剂。

例如，作为水溶性悬浮剂用基质，可以使用作为水凝胶基质的羧基乙烯基聚合物、凝胶基质（gelbase）、无脂肪性软膏、聚乙烯基吡咯烷酮、聚乙烯醇、聚丙烯酸钠、羧甲基纤维素、淀粉、黄原胶、刺梧桐胶、海藻酸钠、甲基纤维素、羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素邻苯二甲酸酯（HPMCP）、醋酸邻苯二甲酸纤维素（CAP）、羧甲基乙基纤维素（CMEC）、乙基纤维素、羟乙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、羧基乙烯基聚合物、黄蓍胶、阿拉伯胶、塔拉胶（tara gum）、罗望子胶、车前子胶、琼脂、结冷胶、葡甘露聚糖、刺槐豆胶、瓜尔豆胶、角叉菜胶、糊精、葡聚糖、直链淀粉、羧甲基纤维素钾、羧甲基纤维素钠、羧甲基纤维素钙、普鲁兰多糖、壳聚糖、羧甲基淀粉钠、车前属种皮、半乳甘露聚醣、Eudragit、酪蛋白、海藻酸烷基酯、明胶、聚乙二醇等。将这些基质溶解在溶剂中能够制备具有流动性的悬浮剂。作为溶剂，优选为生理盐水，还可以使用甘油、丙二醇。

例如疏水性悬浮剂用基质，可以列举出亲水性软膏、雪花膏等水/油型基质；亲水性凡士林、精制羊毛脂、阿夸弗尔（aquaphor）、优塞林（Eucerin）、Neoeserine、含水羊毛脂、冷霜（cold cream）、亲水性液体石腊和聚乙烯的复合软膏基质（plastibase）等油/水型基质。通过将这些基质投入到油脂系溶剂或水中，利用均质器等进行高速搅拌，能够制备油脂系悬浮剂。

本发明的组合物中的抗原及细胞免疫诱导促进剂的比例没有特别限定。在一个实施方式中，本发明的组合物包含以组合物的总重量为基准优选0.001～40重量%、更优选0.01～30重量%的目标抗原。在一个实施方式中，本发明的组合物包含以组合物的总重量为基准优选0.001～30重量%、更优选0.01～20重量%的细胞免疫诱导促进剂。

另外，本发明的组合物根据需要可以含有添加剂。添加剂根据与基质的主成分、抗原及其细胞免疫诱导促进剂的相容性、想要实施的给予方案等而自例如等渗剂、防腐·杀菌剂、抗氧化剂、溶解剂、助溶剂、悬浮剂、填充剂、pH调节剂、稳定剂、吸收促进剂、释放速度控制剂、着色剂、增塑剂、粘合剂等、或者它们的2种以上的组合中选择。

在本说明书中使用时，本发明的组合物中可以含有的“药理学上容许的盐”是指不对给予对象产生有害的作用、且不会使该组合物中的成分的药理活性消失的盐。包括无机酸盐（例如盐酸盐、磷酸盐）、有机酸盐（例如醋酸盐、邻苯二甲酸盐、TFA盐）、金属盐（碱金属盐（例如钠盐、钾盐）、碱土金属盐（例如钙盐、镁盐）、铝盐等）、胺盐（三乙胺盐、苄胺盐、二乙醇胺盐、叔丁胺盐、二环己胺盐、精氨酸盐、二甲基铵盐、铵盐等），但并不限定于此。

抗原的对治疗有效的量根据疾病的严重程度、对象的年龄及相对的健康以及其它的已知的因素而可以大范围地变化，通常，1日用量约0.1μg～1g/kg体重能够得到令人满意的结果。细胞免疫诱导促进剂与抗原同时或逐次给予，优选同时给予。细胞免疫诱导促进剂的有效量根据所使用的具体的细胞免疫诱导促进剂、其它细胞免疫诱导促进剂的有无等而可以大范围地变化，但1日用量0.01μg～1g/kg体重能够得到令人满意的结果。1日用量可以1次给予，也可以分2次以上例如2次、3次、4次或5次等多次来给予。每次的连续给予时间在1分钟～7天的区间内适当选择。给予间隔可以根据患者的状态、疾病的严重程度、是治疗目的还是预防目的等从每天～1年1次（例如1日1次、2日1次、3日1次、1周1次、2周1次、1个月1次、3个月1次、6个月1次、1年1次）或比该范围更长的给予间隔中适当选择。通常，出于实际具有严重疾病的患者的治疗的目的，以更高频率、高用量给予抗原，出于不患有疾病的患者的预防的目的，以更低频率、低用量给予抗原。

以下，列举实施例对本发明进行更详细且具体的说明，但本发明并不限定于实施例的范围。

实施例

所使用的材料

使用咪喹莫特：东京化成工业制造、氯贝特：LKT Laboratories制造、非诺贝特：和光纯药制造、槲皮素：Cayman Chemical制造、小檗碱（盐酸小檗碱n水合物）：和光纯药制造、那可丁：和光纯药制造、3,3’-二吲哚甲烷：和光纯药制造、呫吨酮：和光纯药制造、小白菊内酯：和光纯药制造、依托度酸：和光纯药制造、洛索洛芬（洛索洛芬Na）：阳进堂制造、吲哚美辛：和光纯药制造、阿司匹林：Sigma-Aldrich制造、双氯芬酸（双氯芬酸钠）：和光纯药制造、酮洛芬：和光纯药制造、塞来昔布：TOCRIS bioscience制造、伐地昔布：TOCRIS bioscience制造、二十二碳六烯酸：CaymanChemical制造、2’,5’-双脱氧腺苷：BIOMOL International、SCH23390：和光纯药制造、罗匹尼罗（盐酸罗匹尼罗）：Ragactives制造、罗替戈汀：STARNASCENS制造、GW627368X：Cayman Chemical制造、噻普酮：Cayman Chemical制造、氯前列醇：和光纯药制造、BWA868C：CaymanChemical制造、RO1138452：Cayman Chemical制造、白三烯B4：CaymanChemical制造、孟鲁司特（孟鲁司特钠）：LG Life Sciences、齐留通：TorontoResearch Chemicals、烟酸：和光纯药制造、甘草酸（甘草酸二钾）：和光纯药制造、吡非尼酮：TOCRIS bioscience制造、曲尼司特：和光纯药制造、法莫替丁：和光纯药制造、Immepip(Immepip二氢溴酸盐)：TOCRISbioscience制造、Proxifan：TOCRIS bioscience制造、氮卓斯汀(氮卓斯汀盐酸盐)：LKT Labs、西咪替丁：和光纯药、4-甲基组胺：TOCRIS bioscience制造、奥氮平：和光纯药制造、育亨宾（育亨宾盐酸盐）：和光纯药制造、乙酰胆碱（氯化乙酰胆碱）：和光纯药制造、甲麦角林（甲麦角林苯基甲基酯）：TOCRIS bioscience制造、氯氮平：和光纯药制造、舒马曲坦：MYUNGIN PHARM制造、佐米曲坦：Cipla制造、托伐普坦：Sigma-Aldrich制造、去氨加压素：Sigma-Aldrich制造、毛果芸香碱（盐酸毛果芸香碱）：和光纯药制造、米多君（盐酸米多君）：和光纯药制造、普萘洛尔（盐酸普萘洛尔）：和光纯药制造、甲苯噻嗪：和光纯药制造、Novokinin：Sigma-Aldrich制造、巴氯芬：东京化成制造、TRAP-6：Bachem制造、腺苷二磷酸：MP Biomedicals制造、生长抑素-14：Bachem制造、GW405833：Sigma-Aldrich制造、SEW2871：Cayman Chemical制造、曲美布汀（马来酸曲美布汀）：东京化成制造、洛哌丁胺（洛哌丁胺盐酸盐）：和光纯药制造、褪黑素：LKT Labs、联苯茚酮A：Sigma-Aldrich制造、L-AP4（L-2-氨基-4-膦酰基丁酸）：和光纯药制造、苯海拉明（苯海拉明盐酸盐）：和光纯药制造、坦索罗辛（坦索罗辛盐酸盐）：Cipla制造、白藜芦醇（白藜芦醇（合成品））：和光纯药制造、奥昔布宁（奥昔布宁盐酸盐）：SIGMA制造。

GPC3肽、Survivin2B肽、HER2/neu＿A24肽、MAGE3＿A24肽、IPEP87肽、HER2/neu E75肽、PR1肽、HER2/neu＿A02肽、MAGE3＿A02肽、HBVenv肽、MUC1肽、OVA肽（序列Ser-Ile-Ile-Asn-Phe-Glu-Lys-Leu（序列号16）的8个氨基酸的肽）、Peptide-25、Peptide-25B使用化学合成并进行HPLC精制而成的物质。OVA蛋白使用Sigma-Aldrich制造。

评价方法

关于给予各给予物后的免疫诱导水平的评价，用ELISPOT法、体内CTL杀伤试验、荷瘤小鼠试验进行。

ELISPOT法

在固定有抗小鼠IFN-γ抗体的ELISPOT板的孔中，与培养液一起加入脾细胞(3×10⁶细胞/孔)和抗原肽(100μM)或抗原蛋白（100μg/mL），在37℃、5%CO₂的培养条件下共培养20小时，用ELISPOT法评价IFN-γ产生细胞斑点数（斑点数/3×10⁶细胞）。

体内CTL杀伤试验

自最终免疫给予起7天后，按照下述要领移植脾脏细胞（靶细胞或者对照细胞（control cell）），在移植完18小时后取脾脏，进行FACS测定，从而求出%特异性溶解。

步骤1.首次接受试验的小鼠的脾脏细胞采取

自首次接受试验的小鼠（C57BL/6）摘除脾脏，在加入了RPMI1640培养基的培养皿中，使用载玻片磨碎。回收至50mL管后，进行10℃、1100rpm、5分钟离心分离，然后，丢弃上清液，加入20mL裂解缓冲液，在室温下孵育5分钟。加入20mL培养基后，进行离心分离，然后，加入培养基，通过细胞筛网。

步骤2.脾脏细胞的抗原标记

将步骤1中制备的脾脏细胞进行10℃、1100rpm、5分钟离心分离，然后，丢弃上清液，加入HBSS缓冲液，成为2×10⁷细胞/mL。将该细胞液分注入2根50mL管中，在一个管的细胞液中以最终浓度为10μM的方式加入100μM抗原溶液（抗原为各免疫给予物中配混的抗原），作为靶细胞。另一个管的细胞为对照细胞。将两种细胞在37℃下孵育1小时，然后，进行离心分离，丢弃上清液，加入培养基。

步骤3.脾脏细胞的CFSE标记

将步骤2中进行了抗原标记的细胞离心分离，以为1×10⁷细胞/mL的方式加入0.1%BSA-PBS。在靶细胞液中以最终浓度为10μM的方式加入5mMCFSE溶液，在对照细胞液中以最终浓度为1μM的方式加入5mM CFSE溶液，涡流混合后在37℃下孵育10分钟。其后进行离心分离，丢弃上清液，加入培养基。

步骤4.脾脏细胞移植

将步骤3中进行了CFSE标记的细胞离心分离，丢弃上清液，使用HBSS缓冲液，以为5×10⁷细胞/mL的方式进行制备。将靶细胞液和对照细胞液等量混合，自眼窝静脉向免疫了的小鼠每次给予200μL（移植细胞数：1×10⁷细胞/只）。

步骤5.免疫小鼠的脾脏细胞制备和FACS测定

脾脏细胞移植18小时后，摘除脾脏，与步骤1同样地制备脾脏细胞。其后，利用FACS检测CFSE阳性细胞，由CFSE高的细胞（靶细胞）和CFSE低的细胞（对照细胞）的比率，利用以下的式子评价细胞毒性。利用该指标评价抗原特异性诱导的免疫在生物体内特异性攻击抗原提呈细胞的能力，结果确认本发明的给予物质的效果高。

r=（%CFSE低的细胞）/（%CFSE高的细胞）

%特异性溶解=（1-（r_非免疫/r_免疫））×100

荷瘤小鼠试验

对C57BL/6小鼠，通过皮下注射接种OVA表达E.G7癌细胞（E.G7)(从ATCC购入)（2×10⁶细胞/只）。然后，每3～4天进行5次免疫，在自癌细胞接种起第25天评价肿瘤的大小。

评价通过抑制肿瘤成长而诱导的免疫的效果，确认了本发明的给予物的效果高。

将各给予剂型的制备方法和评价结果示于以下。

经皮给予用霜剂的制备

制备具有下述表1～23的组成的霜剂。具体而言，以表1～23中记载的配合量配合抗原（肽或蛋白质）、Th2细胞分化抑制剂、Th1佐剂、辅助肽、15重量份的二甲基亚砜，向其中加入基质（基底霜），使总量为100重量份，进行混合，得到霜剂。所使用的基底霜是按照表24记载的组成配合材料并混合而制备的。

准备以PET薄膜侧为带侧将PET薄膜/PET无纺布层叠品（面积0.7cm²）贴合在固定用粘合带的中央部而得到的复合基材。将在该复合基材的无纺布部分涂布霜剂4mg而得到的物质作为免疫试验的给予样品。

经皮给予用霜剂的小鼠免疫试验

使用如上操作制造的霜剂，使用免疫评价用动物模型进行小鼠免疫试验。免疫诱导水平的评价利用ELISPOT法进行。具体而言，将小鼠背部的毛剪掉，设置用于使因剪毛而导致的皮肤损伤恢复的饲养时间，然后，对小鼠的背部皮肤给予24小时的各霜剂4mg并除去，进行6天的饲养，评价抗原特异性细胞免疫的诱导水平。自给予起经过6天后，摘除脾脏，制备脾细胞悬浮液。在固定有抗小鼠IFN-γ抗体的ELISPOT板的孔中与培养液一起加入脾细胞（3×10⁶细胞/孔）和抗原肽（100μM）或抗原蛋白（100μg/mL），在37℃、5%CO₂的培养条件下共培养20小时，利用ELISPOT法评价IFN-γ产生细胞斑点数（斑点数/3×10⁶细胞）。

对于抗原的种类、辅助肽的有无及种类不同的各种各样的霜剂，表示出Th2细胞分化抑制剂的效果。对于实施例及比较例，与所使用的小鼠一起示于表1～23。对于实施例示出的配方，通过Th2细胞分化抑制剂，免疫诱导水平均得到增强。对于表示出了评价结果的实施例条件，通过Th2细胞分化抑制剂，免疫诱导水平均得到增强。需要说明的是，将表2的结果示于图1。如图1所示，通过在Th2细胞分化抑制剂中组合使用Th1佐剂，能够获得协同效果。

表23中，比较评价了本发明中的第一细胞免疫诱导促进剂（环氧酶抑制剂）和第二细胞免疫诱导促进剂（咪喹莫特或者c-di-GMP）的特性的不同。其结果，配合了第一细胞免疫诱导促进剂（洛索洛芬）的实施例霜与配合了第二细胞免疫诱导促进剂（咪喹莫特或者c-di-GMP）的比较例霜显示出不同的特征。即，尽管诱导的免疫的强度（ELISPOT结果及体内CTL杀伤试验）没那么强，也有效地抑制了肿瘤尺寸的增大化。

[表1-1]

表1

[表1-2]

表1续

[表1-3]

表1续

[表1-4]

表1续

[表1-5]

表1续

[表1-6]

表1续

[表1-7]

表1续

OVAp：OVA肽（序列号16）

PEP：Peptide-25（序列号13）（辅助肽）

PADRE：PADRE（序列号15）（辅助肽）

[表2]

OVAp：OVA肽（序列号16）

PEP：Peptide-25（序列号13）（辅助肽）

[表3]

PEPB：Peptide-25B（序列号14）（辅助肽）

PADRE：PADRE（序列号15）（辅助肽）

[表4]

受损皮肤：给予到进行了10次胶带粘贴处理的皮肤

PEPB：Peptide-25B（序列号14）

[表5]

PEPB：Peptide-25B（序列号14）

[表6]

PEPB：Peptide-25B（序列号14）

[表7]

PEP：Peptide-25（序列号13）（辅助肽）

PADRE：PADRE（序列号15）（辅助肽）

[表8-1]

表8

[表8-2]

表8续

[表8-3]

表8续

[表8-4]

表8续

[表8-5]

表8续

[表8-6]

表8续

[表8-7]

表8续

[表8-8]

表8续

PEP：Peptide-25（序列号13）（辅助肽）

PADRE：PADRE（序列号15）（辅助肽）

[表9]

PEP：Peptide-25（序列号13）（辅助肽）

[表10]

PEP：Peptide-25（序列号13）（辅助肽）

[表11]

PEP：Peptide-25（序列号13）（辅助肽）

PADRE：PADRE（序列号15）（辅助肽）

[表12]

PEP：Peptide-25（序列号13）（辅助肽）

PADRE：PADRE（序列号15）（辅助肽）

[表13]

PEP：Peptide-25（序列号13）（辅助肽）

PADRE：PADRE（序列号15）（辅助肽）

[表14-1]

表14

[表14-2]

表14续

[表14-3]

表14续

[表14-4]

表14续

[表14-5]

表14续

OVAp：OVA肽（序列号16）

[表15]

表15

OVAp：OVA肽（序列号16）

[表16]

[表17]

[表18]

[表19]

[表20]

[表21]

[表22]

[表23]

OVAp：OVA肽（序列号16）

PADRE：PADRE（序列号15）（辅助肽）

[表24]

添加剂	添加量
		白色凡士林	60.7重量%
单硬脂酸山梨糖醇酐	0.7重量%
		异硬脂酸	12.0重量%
苄醇	2.4重量%
		鲸蜡醇	2.4重量%
硬脂醇	3.5重量%
		聚山梨酸酯60	3.5重量%
浓甘油	2.4重量%
		纯化水	12.4重量%

白色凡士林、单硬脂酸山梨糖醇酐、异硬脂酸、苄醇、硬脂醇、聚山梨酸酯60、浓甘油、二甲基亚砜（DMSO）从和光纯药工业购入。鲸蜡醇从东京化成工业购入。

（TSLP水平的测定方法）

在制剂给予结束时，摘除小鼠背部皮肤，在萃取溶剂（包含蛋白酶抑制剂（Protease Inhibitor Cocktail for general use,SIGMA―ALDRICH制造）和10μM吲哚美辛（和光纯药制造）的PBS溶液）中使用均质器（Physcotron、Micro Tech Nichion Inc.制造）将皮肤粉碎。使粉碎的皮肤以4℃、9000g进行10分钟离心分离后，回收上清液。用ELISA（Mouse TSLPQuantikine ELISA Kit、R＆D Systems制造）测定上清液中的TSLP量。另外，用BCA法（Pierce BCA Protein Assay Kit、Thermo SCIENTIFIC）测定上清液中的总蛋白质量，用TSLP量除以总蛋白质量，进行标准化。

（经皮水分散发量测定）

使用便携式密闭室方式水分散发量测定装置（ASAHIBIOMED制造、VAPO SCAN AS-VT100RS），使该设备接触小鼠皮肤5～15秒左右，从而进行测定。将在对小鼠皮肤进行预处理的10分钟后测定的值作为经皮水分散发量（TEWL）（g/h·m²）。

经皮给予用带状制剂的制备

如下制备带状制剂中使用的粘合剂（丙烯酸系粘合剂）。在非活性气氛下，使丙烯酸2-乙基己酯75重量份、N-乙烯基-2-吡咯烷酮22重量份、丙烯酸3重量份及偶氮二异丁腈0.2重量份在醋酸乙酯中在60℃下溶液聚合，得到丙烯酸系粘合剂溶液。

使用该丙烯酸系粘合剂溶液制备具有表25、26的组成的经皮给予用带状制剂。具体而言，按照表25、26中记载的配合量配合抗原肽或抗原蛋白质、Th2细胞分化抑制剂、Th1佐剂、辅助肽、以及34重量份的肉豆蔻酸异丙酯、粘合剂溶液及有机溶剂（醋酸乙酯、乙醇、甲苯等），进行混合，以干燥后的厚度为约80μm的方式延展在剥离衬垫上，通过干燥除去有机溶剂，贴合支撑体，制备带状制剂。粘合剂溶液以有机溶剂干燥后的各成分和粘合剂的总和为100重量份的方式配合。将该带状制剂以面积为0.7cm²的方式切割而得到的物质作为免疫试验的给予样品。给予时，剥下剥离衬垫后给予。

支撑体使用聚对苯二甲酸乙二醇酯（PET）薄膜（厚度25μm）。剥离衬垫使用实施了有机硅剥离处理的聚对苯二甲酸乙二醇酯（PET）制衬垫（厚度75μm）。

经皮给予用带状制剂的小鼠免疫试验2（带状制剂）

使用如上操作制备的带状制剂，使用免疫评价用动物模型进行小鼠免疫试验。免疫诱导水平的评价用ELISPOT法进行。具体而言，将小鼠背部的毛剪掉，设置用于使因剪毛而导致的皮肤损伤恢复的饲养时间，然后，对小鼠的背部皮肤给予24小时的各带状制剂0.7cm²并除去，进行6天的饲养，评价抗原特异性细胞免疫的诱导水平。自给予起经过6天后，摘除脾脏，制备脾细胞悬浮液。在固定有抗小鼠IFN-γ抗体的ELISPOT板的孔中与培养液一起加入脾细胞（3×10⁶细胞/孔）和抗原肽（100μM），在37℃、5%CO₂的培养条件下共培养20小时，利用ELISPOT法评价IFN-γ产生细胞斑点数（斑点数/3×10⁶细胞）。

对于实施例及比较例，与所使用的小鼠一同示于表25、26。表中的“转基因小鼠”是能评价利用HLA-A＊0201型MHC限制性肽来进行的细胞免疫诱导的转基因小鼠。对于实施例示出的配方，通过Th2细胞分化抑制剂均能增强免疫诱导水平。对于表示出了评价结果的实施例条件，通过Th2细胞分化抑制剂，均能增强免疫诱导水平。

另外，通过在Th2细胞分化抑制剂中组合使用Th1佐剂，能获得协同效果。[表25]

表25

PEP：Peptide-25（序列号13）（辅助肽）

PADRE：PADRE（序列号15）（辅助肽）

[表26]

皮下给予用注射剂的制备

制备具有表27～35的组成的皮下给予用注射剂，作为免疫试验的给予样品。具体而言，在表27～35记载的配合量的抗原（肽或蛋白）、Th2细胞分化抑制剂、辅助肽、以及作为缓释性基质的Montanide ISA51VG（SEPPIC制造）中添加10重量份的添加剂（二甲基亚砜）及作为基质的生理盐水，使总量为100重量份，进行混合，制备注射剂。

皮下给予用注射剂的小鼠免疫试验

使用如上操作制造的注射剂，使用免疫评价用动物模型进行小鼠免疫试验。免疫诱导水平的评价用ELISPOT法。具体而言，将小鼠背部的毛剪掉，设置用于使因剪毛而导致的皮肤损伤恢复的饲养时间，然后，对小鼠背部皮下注射给予各注射剂200μL，进行6天的饲养，评价抗原特异性细胞免疫的诱导水平。自给予起经过6天后，摘除脾脏，制备脾细胞悬浮液。在固定有抗小鼠IFN-γ抗体的ELISPOT板的孔中与培养液一起加入脾细胞（3×10⁶细胞/孔）和抗原肽（100μM），在37℃、5%CO₂的培养条件下共培养20小时，利用ELISPOT法评价IFN-γ产生细胞斑点数（斑点数/3×10⁶细胞）。

对抗原的种类、辅助肽的有无及种类不同的各种各样的注射剂，表示出Th2细胞分化抑制剂的效果。对于实施例及比较例，与所使用的小鼠一同示于表27～35。对于实施例示出的配方，通过Th2细胞分化抑制剂，免疫诱导水平均得到增强。对于表示出了评价结果的实施例条件，通过Th2细胞分化抑制剂，免疫诱导水平均得到增强。

[表27-1]

表27

[表27-2]

表27续

[表27-3]

表27续

OVAp：OVA肽（序列号16）

PEP：Peptide-25（序列号13）（辅助肽）

PADRE：PADRE（序列号15）（辅助肽）

[表28-1]

表28

[表28-2]

表28续

[表28-3]

表28续

[表28-4]

表28续

[表28-5]

表28续

[表28-6]

表28续

OVAp：OVA肽（序列号16）

[表29]

[表30]

[表31]

[表32]

[表33]

[表34]

[表35]

鼻腔给予用液体制剂的制备

制备具有表36～45的组成的鼻腔给予用液体制剂，作为免疫试验的给予样品。具体而言，添加表36～45记载的配合量的抗原（肽或蛋白）、Th2细胞分化抑制剂、辅助肽、20重量份的添加剂（二甲基亚砜）及作为基质的生理盐水，使总量为100重量份，进行混合，制备液体制剂。

鼻腔给予用液体制剂的小鼠免疫试验

使用如上操作制备的鼻腔给予用液体制剂，使用免疫评价用动物模型进行小鼠免疫试验。免疫诱导水平的评价用ELISPOT法进行。具体而言，将小鼠麻醉后，使其从鼻腔吸入鼻腔给予用液体制剂10μL，1周后，再次从鼻腔吸入鼻腔给予用液体制剂10μL，其后，饲养6天，评价抗原特异性细胞免疫的诱导水平。自给予起经过6天后，摘除脾脏，制备脾细胞悬浮液。在固定有抗小鼠IFN-γ抗体的ELISPOT板的孔中，与培养液一起加入脾细胞(3×10⁶细胞/孔)和抗原肽(100μM)，在37℃、5%CO₂的培养条件下共培养20小时，用ELISPOT法评价IFN-γ产生细胞斑点数（斑点数/3×10⁶细胞）。

对抗原的种类、辅助肽的有无及种类不同的各种各样的鼻腔给予液体制剂，表示出Th2细胞分化抑制剂的效果。对于实施例及比较例，与所使用的小鼠一同示于表36～45。对于实施例示出的配方，通过Th2细胞分化抑制剂，免疫诱导水平均得到增强。对于表示出了评价结果的实施例条件，通过Th2细胞分化抑制剂，免疫诱导水平均得到增强。

[表36-1]

表36

[表36-2]

表36续

[表36-3]

表36续

[表36-4]

表36续

[表36-5]

表36续

[表36-6]

表36续

[表36-7]

表36续

OVAp：OVA肽（序列号16）

PEP：Peptide-25（序列号13）（辅助肽）

PADRE：PADRE（序列号15）（辅助肽）

[表37-1]

表37

[表37-2]

表37续

[表37-3]

表37续

[表37-4]

表37续

PEP：Peptide-25（序列号13）（辅助肽）

PADRE：PADRE（序列号15）（辅助肽）

[表38-1]

表38

[表38-2]

表38续

[表38-3]

表38续

[表38-4]

表38续

[表38-5]

表38续

OVAp：OVA肽（序列号16）

[表39]

[表40]

[表41]

[表42]

[表43]

[表44]

[表45]

舌下给予用液体制剂的制备

制备具有表46～55的组成的舌下给予用液体制剂，作为免疫试验的给予样品。具体而言，添加表46～55中记载的配合量的抗原（肽或蛋白）、Th2细胞分化抑制剂、辅助肽、20重量份的添加剂（二甲基亚砜）及作为基质的生理盐水，使总量为100重量份，进行混合，制备液体制剂。

舌下给予用液体制剂的小鼠免疫试验

使用如上操作制备的舌下给予用液体制剂，使用免疫评价用动物模型，进行小鼠免疫试验。免疫诱导水平的评价用ELISPOT法进行。具体而言，将小鼠麻醉后，向舌下部给予舌下给予用液体制剂20μL，维持原样2分钟，1周后，再次向舌下给予舌下给予用液体制剂20μL，维持原样2分钟，然后，饲养6天，评价抗原特异性细胞免疫的诱导水平。自给予起经过6天后，摘除脾脏，制备脾细胞悬浮液。在固定有抗小鼠IFN-γ抗体的ELISPOT板的孔中，与培养液一起加入脾细胞(3×10⁶细胞/孔)和抗原肽(100μM)，在37℃、5%CO₂的培养条件下共培养20小时，用ELISPOT法评价IFN-γ产生细胞斑点数（斑点数/3×10⁶细胞）。

对抗原的种类、辅助肽的有无及种类不同的各种各样的舌下给予液体制剂，表示出Th2细胞分化抑制剂的效果。对于实施例及比较例，与所使用的小鼠一同示于表46～55。对于实施例示出的配方，通过Th2细胞分化抑制剂，免疫诱导水平均得到增强。对于表示出了评价结果的实施例条件，通过Th2细胞分化抑制剂，免疫诱导水平均得到增强。

[表46-1]

表46

[表46-2]

表46续

[表46-3]

表46续

[表46-4]

表46续

[表46-5]

表46续

[表46-6]

表46续

[表46-7]

表46续

OVAp：OVA肽（序列号16）

PEP：Peptide-25（序列号13）（辅助肽）

PADRE：PADRE（序列号15）（辅助肽）

[表47-1]

表47

[表47-2]

表47续

[表47-3]

表47续

[表47-4]

表47续

[表47-5]

表47续

[表47-6]

表47续

PEP：Peptide-25（序列号13）（辅助肽）

PADRE：PADRE（序列号15）（辅助肽）

[表48-1]

表48

[表48-2]

表48续

[表48-3]

表48续

[表48-4]

表48续

[表48-5]

表48续

OVAp：OVA肽（序列号16）

[表49]

[表50]

[表51]

[表52]

[表53]

[表54]

[表55]

舌下给予用膜制剂的制备

在D-甘露醇（Rocket制造）46重量份及聚乙二醇400（和光纯药制造）2.6重量份中添加纯化水150重量份，进行超声波搅拌。向其中添加羟丙基纤维素(日本曹达制造、HPC-SSL)46重量份、以及干燥后的浓度为表56所示的浓度的量的抗原肽、Peptide-25、及Th2细胞分化抑制剂，进行充分搅拌混合。将该溶液的1/100量（2.5重量份）滴加在聚对苯二甲酸乙二醇酯制剥离薄膜上，进行风干及减压干燥，得到1重量份的膜状制剂。抗原肽、Th2细胞分化抑制剂的获得来源与上述经皮给予用霜剂的情况同样。

舌下给予用口腔内崩解片的制备

在明胶（水溶性明胶CSF、Nippi,Incorporated制造）20重量份及D-甘露醇74.6重量份中添加纯化水500重量份，进行搅拌使其溶解。向其中添加干燥后的浓度为表56所示的浓度的量的抗原肽、Peptide-25、及Th2细胞分化抑制剂，使其溶解。将该溶液分注入成型了的铝制容器中，进行一昼夜冷冻干燥处理，得到口腔内崩解片。在进行小鼠免疫试验时，将该口腔内崩解片粉碎，称量10mg来使用。抗原肽、Th2细胞分化抑制剂的获得来源与上述经皮给予用霜剂的情况同样。

舌下给予用膜制剂及舌下给予用口腔内崩解片的小鼠免疫试验

使用如上操作制备的舌下给予用膜剂或舌下给予用口腔内崩解片，使用免疫评价用动物模型进行小鼠免疫试验。免疫诱导水平的评价用ELISPOT法进行。具体而言，将小鼠麻醉后，向舌下部给予舌下给予用膜剂或舌下给予用口腔内崩解片，维持原样2分钟，1周后，再次向舌下给予舌下给予用膜剂或舌下给予用口腔内崩解片，维持原样2分钟，然后，饲养6天，评价抗原特异性细胞免疫的诱导水平。自给予起经过6天后，摘除脾脏，制备脾细胞悬浮液。在固定有抗小鼠IFN-γ抗体的ELISPOT板的孔中，与培养液一起加入脾细胞(3×10⁶细胞/孔)和抗原肽(100μM)，在37℃、5%CO₂的培养条件下共培养20小时，用ELISPOT法评价IFN-γ产生细胞斑点数（斑点数/3×10⁶细胞）。

将免疫试验的结果与所使用的小鼠一同示于下述表56。

对于膜剂或者口腔内崩解片的剂型，在实施例条件下，通过Th2细胞分化抑制剂，免疫诱导水平也得到增强。

[表56]

OVAp：OVA肽（序列号16）

PEP：Peptide-25（序列号13）（辅助肽）

对于含有抗原的疫苗组合物，评价在经皮给予、粘膜给予、注射给予中对细胞免疫诱导的促进有效的第一细胞免疫诱导促进剂。

其结果，可以明确，选自由环氧酶抑制剂、前列腺素受体拮抗剂、前列腺素受体激动剂、TSLP产生抑制剂、腺苷酸环化酶抑制剂、ω-3脂肪酸、PPAR激动剂、多巴胺受体拮抗剂、多巴胺受体激动剂、组胺受体激动剂、组胺受体拮抗剂、血清素受体激动剂、血清素受体拮抗剂、加压素受体拮抗剂、加压素受体激动剂、毒蕈碱受体拮抗剂、毒蕈碱受体激动剂、肾上腺素受体拮抗剂、肾上腺素受体激动剂、血管紧张素受体激动剂、GABA受体激动剂、凝血酶受体拮抗剂、凝血酶受体激动剂、阿片类受体激动剂、ADP受体激动剂、白三烯受体拮抗剂、白三烯受体激动剂、褪黑素受体激动剂、生长抑素受体激动剂、大麻素受体激动剂、鞘氨醇1-磷酸受体激动剂、代谢型谷氨酸受体激动剂、磷脂酶A2抑制剂、TGF-β产生抑制剂、及Th2细胞因子抑制剂组成的组中的1种以上第一细胞免疫诱导促进剂是有效的。

更具体而言，选自由环氧酶抑制剂、前列腺素受体拮抗剂、前列腺素受体激动剂、TSLP产生抑制剂、腺苷酸环化酶抑制剂、ω-3脂肪酸、PPAR激动剂、多巴胺受体拮抗剂、多巴胺受体激动剂、组胺受体激动剂、组胺受体拮抗剂、血清素受体激动剂、血清素受体拮抗剂、加压素受体拮抗剂、加压素受体激动剂、毒蕈碱受体拮抗剂、毒蕈碱受体激动剂、肾上腺素受体拮抗剂、肾上腺素受体激动剂、血管紧张素受体激动剂、GABA受体激动剂、凝血酶受体激动剂、阿片类受体激动剂、ADP受体激动剂、白三烯受体拮抗剂、白三烯受体激动剂、褪黑素受体激动剂、生长抑素受体激动剂、大麻素受体激动剂、鞘氨醇1-磷酸受体激动剂、代谢型谷氨酸受体激动剂、磷脂酶A2抑制剂、TGF-β产生抑制剂、及Th2细胞因子抑制剂组成的组中的1种以上第一细胞免疫诱导促进剂在免疫结果方面是有效的。

更优选的是，选自由环氧酶抑制剂、TSLP产生抑制剂、前列腺素受体拮抗剂、前列腺素受体激动剂、PPAR激动剂、TGF-β产生抑制剂、组胺受体激动剂、组胺受体拮抗剂、血清素受体激动剂、血清素受体拮抗剂、毒蕈碱受体拮抗剂、肾上腺素受体拮抗剂、阿片类受体激动剂、褪黑素受体激动剂及代谢型谷氨酸受体激动剂组成的组中的1种以上第一细胞免疫诱导促进剂是有效的。

进一步优选的是，选自由环氧酶抑制剂、TSLP产生抑制剂、前列腺素受体拮抗剂、前列腺素受体激动剂、PPAR激动剂、组胺受体拮抗剂、血清素受体激动剂、阿片类受体激动剂及褪黑素受体激动剂组成的组中的1种以上第一细胞免疫诱导促进剂特别有效。

另外还发现，通过进一步含有选自由TLR配体、环状二核苷酸及免疫调节低分子药物组成的组中的1种以上第二细胞免疫诱导促进剂和/或辅助肽，能够进一步促进细胞免疫诱导。

另外，在经皮给予中，不仅确认了霜剂的效果，而且确认了从给予简便性、保存稳定性的观点考虑更优选的剂型即带状制剂也具有强的免疫诱导。

对于粘膜给予，从安全性的观点考虑，与鼻腔给予相比，更优选舌下给予，不仅确认了液体制剂的效果，而且确认了从给予简便性、保存稳定性的观点考虑更优选的剂型即膜剂、口腔内崩解片也具有强的免疫诱导。

还确认了注射给予也具有强的免疫诱导效果。

Claims (7)

1.一种疫苗组合物，其特征在于，包含用于诱导细胞免疫的抗原，且所述组合物包含选自由环氧酶抑制剂、前列腺素受体拮抗剂、前列腺素受体激动剂、TSLP产生抑制剂、腺苷酸环化酶抑制剂、ω-3脂肪酸、PPAR激动剂、多巴胺受体拮抗剂、多巴胺受体激动剂、组胺受体激动剂、组胺受体拮抗剂、血清素受体激动剂、血清素受体拮抗剂、加压素受体拮抗剂、加压素受体激动剂、毒蕈碱受体拮抗剂、毒蕈碱受体激动剂、肾上腺素受体拮抗剂、肾上腺素受体激动剂、血管紧张素受体激动剂、GABA受体激动剂、凝血酶受体拮抗剂、凝血酶受体激动剂、阿片类受体激动剂、ADP受体激动剂、白三烯受体拮抗剂、白三烯受体激动剂、褪黑素受体激动剂、生长抑素受体激动剂、大麻素受体激动剂、鞘氨醇1-磷酸受体激动剂、代谢型谷氨酸受体激动剂、磷脂酶A2抑制剂、TGF-β产生抑制剂、及Th2细胞因子抑制剂组成的组中的1种以上第一细胞免疫诱导促进剂。

2.根据权利要求1所述的疫苗组合物，其特征在于，所述组合物还包含选自由TLR配体、环状二核苷酸及免疫调节低分子药物组成的组中的1种以上第二细胞免疫诱导促进剂和/或辅助肽。

3.根据权利要求1或2所述的疫苗组合物，其中，所述组合物被给予到皮肤和/或粘膜上。

4.根据权利要求3所述的疫苗组合物，其中，所述组合物被给予到低刺激条件下的皮肤上。

5.根据权利要求4所述的经皮给予用疫苗组合物，其中，低刺激条件是皮肤刺激评价用动物模型的所述组合物给予前的经皮水分散发量即TEWL为50g/h·m²以下的条件。

6.根据权利要求4所述的经皮给予用疫苗组合物，其中，低刺激条件是皮肤刺激评价用动物模型的所述组合物给予结束时的皮肤内腺基质淋巴细胞生成素即TSLP水平为10000pg/mg蛋白质以下的条件。

7.根据权利要求1或2所述的疫苗组合物，其中，所述组合物通过皮内注射、皮下注射或肌肉内注射进行给予。