TW201601751A - 黏膜疫苗組合物 - Google Patents

黏膜疫苗組合物 Download PDF

Info

Publication number
TW201601751A
TW201601751A TW103134468A TW103134468A TW201601751A TW 201601751 A TW201601751 A TW 201601751A TW 103134468 A TW103134468 A TW 103134468A TW 103134468 A TW103134468 A TW 103134468A TW 201601751 A TW201601751 A TW 201601751A
Authority
TW
Taiwan
Prior art keywords
mucosa
vaccine composition
antigen
mucosal
manufactured
Prior art date
Application number
TW103134468A
Other languages
English (en)
Inventor
Masahiro Fukasaka
Mitsuhiko Hori
Katsuyuki Okubo
Daisuke Asari
Arimichi Okazaki
Eiji KIYOTOH
Kyohei Matsushita
Original Assignee
Nitto Denko Corp
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Nitto Denko Corp filed Critical Nitto Denko Corp
Publication of TW201601751A publication Critical patent/TW201601751A/zh

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/385—Haptens or antigens, bound to carriers
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/02—Bacterial antigens
    • A61K39/04—Mycobacterium, e.g. Mycobacterium tuberculosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/02—Bacterial antigens
    • A61K39/08—Clostridium, e.g. Clostridium tetani
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/02—Bacterial antigens
    • A61K39/09—Lactobacillales, e.g. aerococcus, enterococcus, lactobacillus, lactococcus, streptococcus
    • A61K39/092—Streptococcus
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/12—Viral antigens
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/12—Viral antigens
    • A61K39/125—Picornaviridae, e.g. calicivirus
    • A61K39/13—Poliovirus
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/12—Viral antigens
    • A61K39/145—Orthomyxoviridae, e.g. influenza virus
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/12—Viral antigens
    • A61K39/15—Reoviridae, e.g. calf diarrhea virus
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/12—Viral antigens
    • A61K39/155—Paramyxoviridae, e.g. parainfluenza virus
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/12—Viral antigens
    • A61K39/155—Paramyxoviridae, e.g. parainfluenza virus
    • A61K39/165—Mumps or measles virus
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/12—Viral antigens
    • A61K39/20—Rubella virus
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/12—Viral antigens
    • A61K39/205—Rhabdoviridae, e.g. rabies virus
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/12—Viral antigens
    • A61K39/245—Herpetoviridae, e.g. herpes simplex virus
    • A61K39/25—Varicella-zoster virus
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/12—Viral antigens
    • A61K39/29—Hepatitis virus
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/12—Viral antigens
    • A61K39/29—Hepatitis virus
    • A61K39/292—Serum hepatitis virus, hepatitis B virus, e.g. Australia antigen
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0053—Mouth and digestive tract, i.e. intraoral and peroral administration
    • A61K9/006—Oral mucosa, e.g. mucoadhesive forms, sublingual droplets; Buccal patches or films; Buccal sprays
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04—Antibacterial agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A61P31/16—Antivirals for RNA viruses for influenza or rhinoviruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/04—Immunostimulants
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N7/00—Viruses; Bacteriophages; Compositions thereof; Preparation or purification thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/54—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the route of administration
    • A61K2039/541—Mucosal route
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
    • A61K2039/55511—Organic adjuvants
    • A61K2039/55572—Lipopolysaccharides; Lipid A; Monophosphoryl lipid A
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/57—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the type of response, e.g. Th1, Th2
    • A61K2039/575—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the type of response, e.g. Th1, Th2 humoral response
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2710/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA dsDNA viruses
    • C12N2710/00011—Details
    • C12N2710/16011—Herpesviridae
    • C12N2710/16711—Varicellovirus, e.g. human herpesvirus 3, Varicella Zoster, pseudorabies
    • C12N2710/16734—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2710/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA dsDNA viruses
    • C12N2710/00011—Details
    • C12N2710/20011—Papillomaviridae
    • C12N2710/20034—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2720/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA dsRNA viruses
    • C12N2720/00011—Details
    • C12N2720/12011—Reoviridae
    • C12N2720/12311—Rotavirus, e.g. rotavirus A
    • C12N2720/12334—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2730/00—Reverse transcribing DNA viruses
    • C12N2730/00011—Details
    • C12N2730/10011—Hepadnaviridae
    • C12N2730/10111—Orthohepadnavirus, e.g. hepatitis B virus
    • C12N2730/10134—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2760/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses negative-sense
    • C12N2760/00011—Details
    • C12N2760/16011—Orthomyxoviridae
    • C12N2760/16034—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2760/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses negative-sense
    • C12N2760/00011—Details
    • C12N2760/16011—Orthomyxoviridae
    • C12N2760/16111—Influenzavirus A, i.e. influenza A virus
    • C12N2760/16134—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2760/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses negative-sense
    • C12N2760/00011—Details
    • C12N2760/16011—Orthomyxoviridae
    • C12N2760/16211—Influenzavirus B, i.e. influenza B virus
    • C12N2760/16234—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2760/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses negative-sense
    • C12N2760/00011—Details
    • C12N2760/18011—Paramyxoviridae
    • C12N2760/18411—Morbillivirus, e.g. Measles virus, canine distemper
    • C12N2760/18434—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2760/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses negative-sense
    • C12N2760/00011—Details
    • C12N2760/18011—Paramyxoviridae
    • C12N2760/18711—Rubulavirus, e.g. mumps virus, parainfluenza 2,4
    • C12N2760/18734—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2760/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses negative-sense
    • C12N2760/00011—Details
    • C12N2760/20011—Rhabdoviridae
    • C12N2760/20111—Lyssavirus, e.g. rabies virus
    • C12N2760/20134—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2770/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses positive-sense
    • C12N2770/00011—Details
    • C12N2770/24011—Flaviviridae
    • C12N2770/24111—Flavivirus, e.g. yellow fever virus, dengue, JEV
    • C12N2770/24134—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2770/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses positive-sense
    • C12N2770/00011—Details
    • C12N2770/32011—Picornaviridae
    • C12N2770/32411—Hepatovirus, i.e. hepatitis A virus
    • C12N2770/32434—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2770/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses positive-sense
    • C12N2770/00011—Details
    • C12N2770/32011—Picornaviridae
    • C12N2770/32611—Poliovirus
    • C12N2770/32634—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2770/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses positive-sense
    • C12N2770/00011—Details
    • C12N2770/36011—Togaviridae
    • C12N2770/36211—Rubivirus, e.g. rubella virus
    • C12N2770/36234—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Physiology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)

Abstract

本發明之目的在於提供一種可用作感染症或癌之預防或治療劑的黏膜疫苗組合物，其可安全且有效地誘導全身性免疫應答及黏膜免疫應答，可對口腔內黏膜、眼黏膜、耳黏膜、生殖器黏膜、咽喉黏膜、氣管黏膜、支氣管黏膜、肺黏膜、胃黏膜、腸道黏膜或直腸黏膜投予。 本發明係關於一種黏膜疫苗組合物，其特徵在於：其係對選自由人類或動物之口腔內黏膜、眼黏膜、耳黏膜、生殖器黏膜、咽喉黏膜、氣管黏膜、支氣管黏膜、肺黏膜、胃黏膜、腸道黏膜及直腸黏膜所組成之群中之至少1種黏膜投予者，並且包含至少一種抗原、與作為免疫活化劑之源自如下革蘭氏陰性細菌之脂多糖或其鹽，該革蘭氏陰性細菌係選自由沙雷氏菌屬(Serratia)、勒克氏菌屬(Leclercia)、拉恩氏菌屬(Rahnella)、醋桿菌屬(Acidicaldus)、嗜酸菌屬(Acidiphilium)、酸球形菌屬(Acidisphaera)、酸胞菌屬(Acidocella)、酸單胞菌屬(Acidomonas)、亞細亞菌屬(Asaia)、別爾納普氏菌屬(Belnapia)、脆弱球菌屬(Craurococcus)、葡糖醋桿菌屬(Gluconacetobacter)、葡糖桿菌屬(Gluconobacter)、柯紮克氏菌屬(Kozakia)、Leahibacter、鼠球菌屬(Muricoccus)、Neoasaia、石油分解菌屬(Oleomonas)、副脆弱球菌屬(Paracraurococcus)、紅球狀菌屬 (Rhodopila)、玫瑰球菌屬(Roseococcus)、Rubritepida、糖桿菌屬(Saccharibacter)、星狀菌屬(Stella)、Swaminathania、Teichococcus、紮瓦爾金氏菌屬(Zavarzinia)、假單胞菌屬(Pseudomonas)、無色桿菌屬(Achromobacter)、芽孢桿菌屬(Bacillus)、甲烷囊菌屬(Methanoculleus)、甲烷八疊球菌屬(Methanosarcina)、梭菌屬(Clostridium)、微球菌屬(Micrococcus)、黃桿菌屬(Flavobacterium)、泛菌屬(Pantoea)、醋桿菌屬(Acetobacter)、醱酵單胞菌屬(Zymomonas)、黃色單胞菌屬(Xanthomonas)及腸桿菌屬(Enterobacter)所組成之群中之至少1種。

Description

黏膜疫苗組合物
本發明係關於一種黏膜疫苗組合物，其可用作感染症或癌之預防或治療劑，並且可對口腔內黏膜、眼黏膜、耳黏膜、生殖器黏膜、咽喉黏膜、氣管黏膜、支氣管黏膜、肺黏膜、胃黏膜、腸道黏膜或直腸黏膜進行投予。本發明尤其關於一種藉由以特定之脂多糖作為佐劑而與抗原一併投予至黏膜表面從而可安全且有效地誘導全身性免疫應答及黏膜免疫應答的黏膜疫苗組合物。
作為疫苗製劑之劑型，目前實現製品化者中大部分為注射劑。注射型疫苗會誘導血中(全身性)之免疫應答(IgG抗體之產生)，但並不誘導於黏膜處之免疫應答(IgA抗體之產生)，從而可防止感染後之病原體增殖，但存在難以防禦經黏膜途徑之病原體感染本身的問題。
因此，近年來，自黏膜之疫苗接種受到關注，其中，對使用流行性感冒病毒作為抗原之黏膜投予(經鼻投予)型疫苗的開發引人注目。
黏膜投予型疫苗並非僅誘導全身性免疫(IgG抗體之產生)，亦可誘導黏膜免疫(IgA抗體之產生)。該IgA抗體係以並不特別嚴格區別目標疾病之病原體類型為特徵，認為即便逐年改變之病原體之流行類型發生變化亦可應對，對於防止流行病有效。
又，經鼻投予型疫苗受到關注之原因之一在於：於對消化道黏膜投予抗原時，易受到胃酸之影響或蛋白分解酵素之影響，難以防止 該等影響，相對於此，於對經鼻黏膜投予抗原時並無該等影響。進而，另一原因在於：於鼻腔黏膜上有稱為NALT(Nasal-Associated Lymphoid Tissue，鼻相關淋巴組織)之抗原識別組織，對免疫應答有效。
然而，對鼻腔黏膜投予抗原儘管效果較高，但急性腦病等嚴重副作用之可能性亦較高，又，對老人或嬰兒等而言經鼻投予本身較繁雜且困難，進而存在因鼻涕等身體因素而無法獲得穩定效果之問題。
另一方面，業界亦多次嘗試經口投予抗原並咽下後於消化道黏膜(小腸)等處誘導全身性免疫及黏膜免疫。此時之擔憂在於能否防止由胃酸引起之抗原之分解、由蛋白分解酵素引起之抗原之分解。為了解決該等，業界一直以來對如使大量含有中和胃酸之制酸劑或利用微球體等被膜技術而保護抗原之技術進行開發。
但是，實際開發成功者為原本於胃酸中穩定性較高之減毒活脊髓灰白質炎病毒疫苗或減毒活輪狀病毒疫苗。
作為以經口腔黏膜途徑誘導黏膜免疫及全身性免疫之例，有以下報告。
專利文獻1中提出有於經口(例如舌下投予)組合物中包含1種以上之抗原及Toll樣受體(TLR)促效劑的免疫原性組合物，作為抗原，揭示有流行性感冒抗原，作為佐劑，揭示有TLR4促效劑。
然而，專利文獻1所提出之免疫原性組合物中之TLR4促效劑於免疫誘導方面效果較弱，而要求可誘導更強之免疫且安全之佐劑。
又，專利文獻2中提出有源自泛菌之脂多糖(lipopolysaccharide，LPS)，記載其與先前之LPS相比安全性更高，且於與抗原同時投予之情形時免疫反應得以增強。
然而，專利文獻2中並未明確言及或例示對獲得免疫之使用，又，亦未言及佐劑/抗原之最佳比率。進而，專利文獻2中亦未明確言 及源自泛菌之LPS的作為黏膜疫苗之用途。
又，專利文獻3中提出有包含病原體之不活化抗原、以及作為免疫活化劑(佐劑)之聚肌胞(Poly(I：C))及酵母聚糖之組合的疫苗，記載有使用源自成團泛菌(Pantoea agglomerans)之脂多糖(LPS)作為佐劑並使用流行性感冒病毒作為病原體的例。
然而，專利文獻3中記載之使用源自成團泛菌(Pantoea agglomerans)之脂多糖(LPS)的疫苗之例為對鼻黏膜投予者，關於對口腔內黏膜等特定黏膜之投予未作教導。一般而言，若投予部位不同則有效之佐劑不同之情況係技術常識。因此，由該專利文獻3中記載之使用源自成團泛菌(Pantoea agglomerans)之脂多糖(LPS)的疫苗之例並不明瞭源自成團泛菌(Pantoea agglomerans)之脂多糖(LPS)是否會於口腔內黏膜、眼黏膜、耳黏膜、生殖器黏膜、咽喉黏膜、氣管黏膜、支氣管黏膜、肺黏膜、胃黏膜、腸道黏膜或直腸黏膜發揮效果。
[先前技術文獻] [專利文獻]
專利文獻1：日本專利特表2013-527218號公報
專利文獻2：日本專利第4043533號
專利文獻3：日本專利特開2009-242367號公報
本發明鑒於上述現狀，其課題在於提供一種黏膜疫苗組合物，其安全且可用作感染症或癌之預防或治療劑，並且可有效地誘導全身性免疫應答及黏膜免疫應答，可對口腔內黏膜、眼黏膜、耳黏膜、生殖器黏膜、咽喉黏膜、氣管黏膜、支氣管黏膜、肺黏膜、胃黏膜、腸道黏膜或直腸黏膜進行投予。
本發明者等人為了解決上述課題，經過努力研究，結果發現：於對口腔內黏膜、眼黏膜、耳黏膜、生殖器黏膜、咽喉黏膜、氣管黏膜、支氣管黏膜、肺黏膜、胃黏膜、腸道黏膜或直腸黏膜進行投予時，藉由以源自選自由沙雷氏菌屬(Serratia)、勒克氏菌屬(Leclercia)、拉恩氏菌屬(Rahnella)、醋桿菌屬(Acidicaldus)、嗜酸菌屬(Acidiphilium)、酸球形菌屬(Acidisphaera)、酸胞菌屬(Acidocella)、酸單胞菌屬(Acidomonas)、亞細亞菌屬(Asaia)、別爾納普氏菌屬(Belnapia)、脆弱球菌屬(Craurococcus)、葡糖醋桿菌屬(Gluconacetobacter)、葡糖桿菌屬(Gluconobacter)、柯紮克氏菌屬(Kozakia)、Leahibacter、鼠球菌屬(Muricoccus)、Neoasaia、石油分解菌屬(Oleomonas)、副脆弱球菌屬(Paracraurococcus)、紅球狀菌屬(Rhodopila)、玫瑰球菌屬(Roseococcus)、Rubritepida、糖桿菌屬(Saccharibacter)、星狀菌屬(Stella)、Swaminathania、Teichococcus、紮瓦爾金氏菌屬(Zavarzinia)、假單胞菌屬(Pseudomonas)、無色桿菌屬(Achromobacter)、芽孢桿菌屬(Bacillus)、甲烷囊菌屬(Methanoculleus)、甲烷八疊球菌屬(Methanosarcina)、梭菌屬(Clostridium)、微球菌屬(Micrococcus)、黃桿菌屬(Flavobacterium)、泛菌屬(Pantoea)、醋桿菌屬(Acetobacter)、醱酵單胞菌屬(Zymomonas)、黃色單胞菌屬(Xanthomonas)及腸桿菌屬(Enterobacter)所組成之群中之至少1種革蘭氏陰性細菌的脂多糖或其鹽為佐劑而與抗原一併投予至口腔內黏膜、眼黏膜、耳黏膜、生殖器黏膜、咽喉黏膜、氣管黏膜、支氣管黏膜、肺黏膜、胃黏膜、腸道黏膜或直腸黏膜，可安全且有效地誘導全身性免疫應答及黏膜免疫應答，從而完成本發明。
即，本發明係一種黏膜疫苗組合物，其特徵在於：其係對選自由人類或動物之口腔內黏膜、眼黏膜、耳黏膜、生殖器黏膜、咽喉黏 膜、氣管黏膜、支氣管黏膜、肺黏膜、胃黏膜、腸道黏膜及直腸黏膜所組成之群中之至少1種黏膜投予者，並且包含至少一種抗原、與作為免疫活化劑之源自如下革蘭氏陰性細菌之脂多糖或其鹽，該革蘭氏陰性細菌係選自由沙雷氏菌屬、勒克氏菌屬、拉恩氏菌屬、醋桿菌屬(Acidicaldus)、嗜酸菌屬、酸球形菌屬、酸胞菌屬、酸單胞菌屬、亞細亞菌屬、別爾納普氏菌屬、脆弱球菌屬、葡糖醋桿菌屬、葡糖桿菌屬、柯紮克氏菌屬、Leahibacter、鼠球菌屬、Neoasaia、石油分解菌屬、副脆弱球菌屬、紅球狀菌屬、玫瑰球菌屬、Rubritepida、糖桿菌屬、星狀菌屬、Swaminathania、Teichococcus、紮瓦爾金氏菌屬、假單胞菌屬、無色桿菌屬、芽孢桿菌屬、甲烷囊菌屬、甲烷八疊球菌屬、梭菌屬、微球菌屬、黃桿菌屬、泛菌屬、醋桿菌屬、醱酵單胞菌屬、黃色單胞菌屬及腸桿菌屬所組成之群中之至少1種。
又，較佳為本發明之黏膜疫苗組合物係液劑、噴霧劑、半固形製劑或固形製劑，且上述半固形製劑及固形製劑會因體液及/或體溫而溶解。
又，較佳為本發明之黏膜疫苗組合物係會因體液及/或體溫而溶解之固形製劑。
又，較佳為本案發明之黏膜疫苗組合物係用於誘導體液性免疫。
又，較佳為本案發明之黏膜疫苗組合物中之抗原係源自感染症之抗原或癌抗原。
以下詳細說明本發明。
本發明之黏膜疫苗組合物含有至少一種抗原。
作為本發明中使用之抗原，較佳為源自感染症之抗原或癌抗原。
於為源自感染症之抗原時，為了預防疾病，必須藉由疫苗投予 而預先形成抗體，因此認為較理想為利用本發明。本發明之黏膜疫苗組合物適於使體液性免疫活化。
作為該源自感染症之抗原，只要為感染性病原體及源自感染性病原體之抗原則並無特別限定。
作為因上述感染性病原體所罹患之疾病，並無特別限定，例如可列舉：因腺病毒、疱疹病毒(例如HSV-I、HSV-II、CMV或VZV)、痘病毒(例如痘瘡或牛痘、或傳染性軟疣等原痘病毒)、小核糖核酸病毒(例如鼻病毒或腸病毒)、正黏液病毒(例如流行性感冒病毒)、副黏液病毒(例如副流行性感冒病毒、流行性腮腺炎病毒、麻疹病毒、呼吸道融合病毒(RSV))、冠狀病毒(例如SARS)、乳多泡病毒(例如引起生殖器疣、尋常疣或足底疣者等人類乳頭狀瘤(Papilloma)病毒)、肝脫氧核糖核酸病毒(例如B型肝炎病毒)、黃病毒(例如C型肝炎病毒或登革熱病毒)或反轉錄病毒(例如HIV等慢病毒)等病毒感染而罹患之疾病等病毒性疾病，經由埃希氏菌屬、腸桿菌、沙氏桿菌、葡萄球菌、痢疾桿菌、李斯特單胞菌、嗜氧菌、螺桿菌、克雷伯氏菌、變形桿菌、假單胞菌、鏈球菌、披衣菌、黴漿菌、肺炎球菌、奈瑟氏雙球菌、梭菌、芽孢桿菌、棒狀桿菌、分歧桿菌、取狀桿菌、弧菌、沙雷氏菌、普羅威登菌、有色桿菌、布氏桿菌、耶氏桿菌、嗜血桿菌或博多特拉菌等細菌感染而罹患之疾病等細菌性疾病，披衣菌，以念珠菌病、麴菌病、組織漿菌病、隱球菌腦膜炎為代表但並不限定於該等之真菌性疾病，瘧疾，卡氏肺囊蟲肺炎，利什曼病，隱孢子蟲病，弓蟲病及錐體蟲感染等。
於本發明中，上述源自感染症之抗原較佳為選自由源自流行性感冒病毒之抗原、源自人類乳突病毒之抗原及源自肺炎球菌之抗原所組成之群中之至少一種，其中，更佳為源自流行性感冒病毒之抗原。
此處，上述所謂流行性感冒病毒係屬於正黏液病毒科之具有直 徑約100nm之粒子尺寸的RNA包膜型病毒，根據內部蛋白之抗原性，分為A、B及C型。上述流行性感冒病毒包含被具有脂質雙層結構之病毒包膜所包裹之內部核蛋白衣(nucleocapsid)或與核蛋白締合之核糖核酸(RNA)之核心、及外部糖蛋白。上述病毒包膜之內層主要由基質蛋白所構成，外層大部分由源自宿主之脂質物質所構成。又，上述流行性感冒病毒之RNA具有分節結構。再者，於世界範圍內大流行之流行性感冒係由A型流行性感冒病毒引起者，該A型流行性感冒病毒具有血球凝集素(HA)及神經胺酸酶(NA)2種包膜糖蛋白，根據抗原性之差異，HA被分為16種亞型，NA被分為9種亞型。
於本發明中，作為上述源自感染症之抗原，可較佳地使用源自A型及B型流行性感冒病毒之抗原。再者，作為上述A型及B型流行性感冒病毒之亞型，並無特別限定，可為迄今為止已單離出之亞型，亦可為將來會單離出之亞型。
於本發明中，作為源自流行性感冒病毒之抗原，只要為構成上述流行性感冒病毒之各種成分之至少一部分，則並無特別限定，可為於有機溶劑/界面活性劑或其他試劑中分解精製病毒粒子以使脂質包膜溶解而成之亞病毒(subvirion)或以HA及NA為代表之病毒次單元，亦可為病毒全粒子。就免疫原性之觀點而言，較佳為HA或病毒全粒子。上述病毒全粒子更佳為利用福馬林等使之不活化者。
上述流行性感冒病毒抗原之製備方法並無特別限定，可無限定地使用公知之方法。例如可列舉如下方法：使雞蛋等感染自流行性感冒感染動物或流行性感冒患者所單離出之病毒株，藉由常規方法加以培養、精製，並由所獲得之病毒原液製備抗原。又，亦可使用於基因工程培養細胞中所製備之源自病毒之抗原。
於本發明之黏膜疫苗組合物中，上述抗原只要以有效量含有即可，例如於本發明之黏膜疫苗組合物中，較佳為以平均每1次投予量 計於0.01~10000μg之範圍內含有。若未達0.01μg，則存在作為感染症或癌之預防或治療劑的功能變得不充分之情況，若超過10000μg，則存在安全性成為問題之情況。上述抗原含量之更佳下限為0.1μg，更佳上限為5000μg。
關於本說明書中提及之「抗原之質量」，除作特別說明之情況以外，係指疫苗組合物中之抗原所含之抗原蛋白質之質量。因此，於抗原為病毒等源自活體之物質之情形時，意指該抗原所含之全部蛋白質之質量。
本發明之黏膜疫苗組合物含有免疫活化劑。
作為上述免疫活化劑，可列舉Toll樣受體4(TLR4)促效劑，於本發明中，作為該Toll樣受體4(TLR4)促效劑，可使用特定之脂多糖或其衍生物或鹽。
再者，本說明書中提及之「脂多糖」不僅為脂多糖本身，只要具有其之性質，則亦可為其衍生物。本說明書中提及之所謂鹽，可為任意之有機酸或無機酸，較佳為藥學上所容許之鹽。
此處，對脂多糖(lipopolysaccharide，以下有時記為LPS)進行說明。
上述LPS係包裹大腸菌、沙氏桿菌、百日咳菌等革蘭氏陰性細菌細胞壁之肽聚糖的外膜所存在之包含脂質及糖之複合化合物，其作為O抗原及內毒素之活性成分而為人所知[J.M.Ghuysen and R.Hakenbeck編，「New Comprehensive Biochemistry」，第27卷，Bacterial Cell Wall，第18頁，Elsevea，1994年]。
上述LPS之基本結構包括具有特異性脂質之脂質A、與其共價鍵結之稱為R核之低聚糖及O特異性多糖3種成分(「日經生物技術最新用語辭典」，第431頁，Nikkei McGraw-Hill社，1985年)。
上述O特異性多糖之結構於構成成分中最為多樣，對菌種具有特 異性，表現出作為所謂O抗原之活性。其特徵在於一般包含數種單糖之低聚糖的重複結構，亦已知包含同一單糖者、或並非重複結構者。
本發明之黏膜疫苗組合物包含源自特定之革蘭氏陰性細菌的脂多糖或其鹽作為上述免疫活化劑。該等包含於許多食品、中草藥中，對活體之安全性得到擔保，亦可直接使用源自該等細菌之萃取物或其改型體。
作為上述免疫活化劑所使用之脂多糖之來源細菌，可列舉：沙雷氏菌屬(泛菌近種/麵包、肉類、牛乳，一種本土細菌)、勒克氏菌屬(泛菌近種/全部食品(土壤菌))、拉恩氏菌屬(泛菌近種/一種本土細菌)、醋桿菌屬(Acidicaldus)(醋酸菌類/醱酵食品製造)、嗜酸菌屬(醋酸菌類/醱酵食品製造)、酸球形菌屬(醋酸菌類/醱酵食品製造)、酸胞菌屬(醋酸菌類/醱酵食品製造)、酸單胞菌屬(醋酸菌類/醱酵食品製造)、亞細亞菌屬(醋酸菌類/醱酵食品製造)、別爾納普氏菌屬(醋酸菌類/醱酵食品製造)、脆弱球菌屬(醋酸菌類/醱酵食品製造)、葡糖醋桿菌屬(醋酸菌類/醱酵食品製造)、葡糖桿菌屬(醋酸菌類/醱酵食品製造)、柯紮克氏菌屬(醋酸菌類/醱酵食品製造)、Leahibacter(醋酸菌類/醱酵食品製造)、鼠球菌屬(醋酸菌類/醱酵食品製造)、Neoasaia(醋酸菌類/醱酵食品製造)、石油分解菌屬(醋酸菌類/醱酵食品製造)、副脆弱球菌屬(醋酸菌類/醱酵食品製造)、紅球狀菌屬(醋酸菌類/醱酵食品製造)、玫瑰球菌屬(醋酸菌類/醱酵食品製造)、Rubritepida(醋酸菌類/醱酵食品製造)、糖桿菌屬(醋酸菌類/醱酵食品製造)、星狀菌屬(醋酸菌類/醱酵食品製造)、Swaminathania(醋酸菌類/醱酵食品製造)、Teichococcus(醋酸菌類/醱酵食品製造)、紮瓦爾金氏菌屬(醋酸菌類/醱酵食品製造)、假單胞菌屬(假單胞菌類/牛肉、蛋、肉類、魚貝類、蔬菜)、無色桿菌屬(無色桿菌類/魚貝類、肉類)、芽孢桿菌屬(芽孢桿菌類/米、蔬菜)、甲烷囊菌屬(產甲烷菌類/寄生於動物腸內之產甲烷 菌)、甲烷八疊球菌屬(產甲烷菌類/寄生於動物腸內之產甲烷菌)、梭菌屬(梭菌類/肉類、牛乳、蔬菜、罐頭)、微球菌屬(放射菌類/肉類、魚貝類)、黃桿菌屬(非病原性腸桿菌類/食品之腐敗菌)、泛菌屬、醋桿菌屬、醱酵單胞菌屬、黃色單胞菌屬及腸桿菌屬。該等包含於許多食品中，或用於食品之製造步驟，因此對活體之安全性得到擔保。
其中，較佳為選自由沙雷氏菌屬、勒克氏菌屬、拉恩氏菌屬、醋桿菌屬(Acidicaldus)、嗜酸菌屬、酸球形菌屬、酸胞菌屬、酸單胞菌屬、亞細亞菌屬、別爾納普氏菌屬、脆弱球菌屬、葡糖醋桿菌屬、葡糖桿菌屬、柯紮克氏菌屬、Leahibacter、鼠球菌屬、Neoasaia、石油分解菌屬、副脆弱球菌屬、紅球狀菌屬、玫瑰球菌屬、Rubritepida、糖桿菌屬、星狀菌屬、Swaminathania、Teichococcus、紮瓦爾金氏菌屬、泛菌屬、醋桿菌屬、醱酵單胞菌屬、黃色單胞菌屬及腸桿菌屬所組成之群中之至少1種。
更佳為作為上述革蘭氏陰性菌，為選自由泛菌屬、醋桿菌屬、醱酵單胞菌屬、黃色單胞菌屬及腸桿菌屬所組成之群中之至少1種。尤其是源自泛菌之脂多糖目前正作為健康食品而使用，可謂尤其於經口投予時更有效。亦可直接使用源自該等菌之萃取物或其改型體。
又，於使用源自上述革蘭氏陰性細菌之脂多糖或其鹽之情形時，一般而言，需顧及對活體之安全性，亦可以用於將該等解毒化之改型體之形式使用。
又，作為上述Toll樣受體4(TLR4)促效劑，亦可為上述特定之脂多糖之衍生物，例如可列舉：將多糖部分去除所獲得之脂質A或單磷醯脂質A、3-脫-醯基化MPL等，或者亦可為鹽。
作為將上述脂多糖之多糖部分去除所獲得之脂質A，只要為源自上述特定之革蘭氏陰性菌的單離物即可，或者亦可使用以成為與該等源自革蘭氏陰性菌之單離物相同結構之方式所合成之物質。
又，作為上述脂質A之改型體，亦可較佳地使用經脫磷酸化之單磷醯脂質(MPL)或鹽。再者，本說明書中提及之單磷醯脂質不僅為單磷醯脂質本身，只要具有其之性質，則亦可為其衍生物。尤其就對活體之安全性之觀點而言，較佳為於醫療用途中作為免疫活化劑已有實效之3-脫-醯基化單磷醯脂質(3D-MPL)或美國專利申請公開第2010/0310602號說明書中所提出之未進行脫醯基化之合成吡喃葡萄糖脂質(Glucopyranosyl lipid)。
又，作為上述單磷醯脂質，亦可較佳地使用具有安全性及存在使用先例之源自沙氏桿菌者。
於本發明中，更佳為使用源自成團泛菌(Pantoea agglomerans)之LPS。其中，源自成團泛菌之LPS較佳為使用蛋白質標記物利用SDS-PAGE(Sodium Dodecyl Sulfate-Polyacrylamide Gelelectrophoresis，十二烷基硫酸鈉-聚丙烯醯胺凝膠電泳)法所測得之分子量為5000±3000、較佳為5000±2000的源自成團泛菌之LPS。此處提及之分子量係根據使用蛋白質標記物之SDS-PAGE法中之染色帶之位置進行測定，詳情見下文。
本發明中較佳地使用之源自成團泛菌之LPS係以O-抗原部分為鼠李糖與葡萄糖之重複結構為特徵之脂多糖。
關於上述源自成團泛菌之LPS，可藉由常規方法培養成團泛菌(Pantoea agglomerans)，自培養基中收集菌體，自所收集到之菌體藉由公知方法進行精製而製造。
再者，上述源自成團泛菌之LPS之分子量可藉由以下方法而測定。
即，對於作為調配物所準備之源自成團泛菌之LPS、或藉由適當方法自疫苗組合物中萃取精製之源自成團泛菌之LPS，可藉由以下方法測定分子量。
使源自成團泛菌之LPS溶解於蒸餾水中而製備濃度1mg/mL之溶液，將該溶液與樣品緩衝溶液(Sample buffer solution)2ME+(WAKO公司製造)進行等量混合，浸於沸水浴中5分鐘，其後立即浸於冰水中進行急冷。
於板狀凝膠電泳槽(Marisol公司製造)中裝滿電泳緩衝液(Running Buffer)(ATTO公司製造)，將20%聚丙烯醯胺凝膠固定於電泳槽，於樣品槽中裝入各10μL之檢體，於電壓100V下持續進行至少1小時之電泳直至色素自凝膠溶出。電泳結束後，藉由銀染色套組161-0443(Bio-Rad公司製造)於室溫下進行銀染色，確認舉動。
於本發明之黏膜疫苗組合物中，較佳為以上述免疫活化劑之含量之質量相對於本發明之黏膜疫苗組合物之疫苗抗原之質量的比率(免疫活化劑之總質量/抗原之總質量)成為0.002~500之範圍之方式含有上述免疫活化劑。若未達0.002，則存在無法獲得充分之作為感染症或癌之預防或治療劑之功能的情況，若超過500，則存在安全性成為問題之情況。上述比率之更佳下限為0.01，更佳上限為100。
又，本發明之黏膜疫苗組合物只要含有源自特定之革蘭氏陰性細菌的脂多糖或其鹽作為上述免疫活化劑，則亦可將該等與其他先前公知之免疫活化劑組合使用。
本發明之黏膜疫苗組合物可藉由於上述抗原及免疫活化劑中視需要添加其他成分(例如磷酸緩衝溶液等)並利用公知之方法進行攪拌混合而製備，或者視需要進而利用公知之方法進行加熱、冷卻或非加熱乾燥而製備。
又，使用本發明之黏膜疫苗組合物，能夠製備液劑、半固形製劑、固形製劑、噴霧劑，除使用上述材料以外，視需要亦可適當使用賦形劑、結合劑、香料、矯味劑、甘味劑、著色劑、防腐劑、抗氧化劑、穩定化劑、界面活性劑等。
作為該等材料，並無特別限定，可使用先前公知者。
本發明之黏膜疫苗組合物較佳為液劑、噴霧劑、半固形製劑或固形製劑。如下所述，藉由本發明之黏膜疫苗組合物為液劑、噴霧劑、半固形製劑或固形劑，可較佳地投予至人類或動物之黏膜表面。
又，由於本發明之黏膜疫苗組合物係對人類或動物之黏膜表面投予者，故而上述半固形製劑及固形製劑較佳為會因體液及/或體溫而溶解。
更佳為本發明之黏膜疫苗組合物由於就抗原之穩定性確保之觀點而言較佳為保存時含水量較少，故而較佳為於保存時為乾燥狀態且於黏膜表面投予後會因體液及/或體溫而溶解之固形製劑。此處所提及之所謂「含水量較少」，意指於本發明之黏膜疫苗組合物之總重量中含水率較佳為20重量%以下、更佳為10重量%以下。
又，此處提及之「含水率」係依據日本藥典第十六修訂版、一般試驗法、乾燥減量法、第一法而求出。即，藉由將本發明之黏膜疫苗組合物之試驗片於105℃、3小時之條件下加熱時之重量之減少比率而求出。
為了獲得上述固形製劑之特性，較佳為選擇會因體液及/或體溫而溶解之材料作為本發明之黏膜疫苗組合物之材料。作為此種材料，例如作為免疫活化劑，較佳為選擇源自水溶性較高之成團泛菌的LPS，作為賦形劑，較佳為選擇會因體液及/或體溫而溶解之物性之聚合物。藉由製成此種固形製劑，而無需特別器件便可簡便地投予至口腔內。
此處，上述固形製劑包括錠劑、包衣錠劑、散劑、顆粒劑、細粒劑、崩解錠、貼附劑、即溶錠、膜劑，只要為對黏膜表面投予之固體形狀者則並無特別限定。上述固形製劑較佳為膜製劑、崩解錠或即溶錠。
又，上述半固形製劑較佳為凝膠劑、軟膏劑、乳霜劑或糖漿劑。
本發明之黏膜疫苗組合物係對選自由人類或動物(哺乳類、鳥類等)之口腔內黏膜、眼黏膜、耳黏膜、生殖器黏膜、咽喉黏膜、氣管黏膜、支氣管黏膜、肺黏膜、胃黏膜、腸道黏膜或直腸黏膜所組成之群中之至少1種黏膜投予者，較佳為對口腔內黏膜投予者。口腔內黏膜、眼黏膜、耳黏膜、生殖器黏膜、咽喉黏膜、氣管黏膜、支氣管黏膜、肺黏膜、胃黏膜、腸道黏膜或直腸黏膜一般被認為難以使免疫活化，但本發明之黏膜疫苗組合物由於將上述特定之免疫活化劑與至少一種抗原併用，故而即便為對口腔內黏膜、眼黏膜、耳黏膜、生殖器黏膜、咽喉黏膜、氣管黏膜、支氣管黏膜、肺黏膜、胃黏膜、腸道黏膜或直腸黏膜之投予，亦可有效地誘導全身性免疫應答及黏膜免疫應答。又，藉由選擇口腔黏膜作為投予途徑，而不會如對消化道黏膜投予抗原之情形般會受到胃酸之影響或蛋白分解酵素之影響，又，不會如對經鼻黏膜投予抗原之情形般有急性腦病等嚴重副作用之可能性，即便對於老人或嬰兒等亦容易投予，進而不會因鼻涕等身體因素妨礙穩定之效果。
又，本發明之黏膜疫苗組合物之投予方法如上所述。又，作為其投予量，係考慮動物種類、對象之年齡、性別、體重等而決定，例如於使用HA作為抗原之情形時，通常可投予0.1μg~50μg，1次或2次以上。較佳為複數次投予，於該情形時，較佳為以1~4週為間隔投予。
本發明之黏膜疫苗組合物由於將上述特定之免疫活化劑與至少一種抗原併用，故而藉由對口腔內黏膜、眼黏膜、耳黏膜、生殖器黏膜、咽喉黏膜、氣管黏膜、支氣管黏膜、肺黏膜、胃黏膜、腸道黏膜 或直腸黏膜之投予，可安全且有效地誘導體液性免疫、例如全身性免疫應答及黏膜免疫應答。
圖1係表示實施例1、比較例1~5之小鼠鼻腔清洗液中流行性感冒HA(B型)特異性IgA效價之結果的圖表。
圖2係表示實施例1、比較例1~5之小鼠血清中流行性感冒HA(B型)特異性IgG效價之結果的圖表。
圖3係表示實施例2、比較例6~10之小鼠鼻腔清洗液中流行性感冒HA(H1N1)特異性IgA效價之結果的圖表。
圖4係表示實施例2、比較例6~10之小鼠血清中流行性感冒HA(H1N1)特異性IgG效價之結果的圖表。
圖5係表示參考例1、參考比較例1、2之小鼠生存率的圖表。
圖6係表示實施例2、3、4、比較例10之小鼠鼻腔清洗液中流行性感冒HA(H1N1)特異性IgA效價之結果的圖表。
圖7係表示實施例2、3、4、比較例10之小鼠血清中流行性感冒HA(H1N1)特異性IgG效價之結果的圖表。
圖8係表示實施例5、比較例11、12之小鼠鼻腔清洗液中肺炎球菌莢膜多糖特異性IgA效價之結果的圖表。
圖9係表示實施例5、比較例11、12之小鼠血清中肺炎球菌莢膜多糖特異性IgG效價之結果的圖表。
圖10係表示實施例6、比較例13、14之小鼠鼻腔清洗液中HPV16特異性IgA效價之結果的圖表。
圖11係表示實施例6、比較例13、14之小鼠血清中HPV16特異性IgG效價之結果的圖表。
圖12係表示實施例5、7、8、比較例12之小鼠鼻腔清洗液中肺炎球菌莢膜多糖特異性IgA效價之結果的圖表。
圖13係表示實施例5、7、8、比較例12之小鼠血清中肺炎球菌莢膜多糖特異性IgG效價之結果的圖表。
圖14係表示實施例6、9、10、比較例14之小鼠鼻腔清洗液中HPV16特異性IgA效價之結果的圖表。
圖15係表示實施例6、9、10、比較例14之小鼠血清中HPV16特異性IgG效價之結果的圖表。
圖16係表示實施例25、比較例15之小鼠鼻腔清洗液中OVA特異性IgA效價之結果的圖表。
圖17係表示實施例25、比較例15之小鼠唾液中OVA特異性IgA效價之結果的圖表。
圖18係表示實施例25、比較例15之小鼠肺胞清洗液中OVA特異性IgA效價之結果的圖表。
圖19係表示實施例25、比較例15之小鼠陰道清洗液中OVA特異性IgA效價之結果的圖表。
圖20係表示實施例25、比較例15之小鼠糞便萃取液中OVA特異性IgA效價之結果的圖表。
圖21係表示實施例25、比較例15之小鼠血清中OVA特異性IgG效價之結果的圖表。
圖22係表示實施例26、比較例16之小鼠鼻腔清洗液中OVA特異性IgA效價之結果的圖表。
圖23係表示實施例26、比較例16之小鼠唾液中OVA特異性IgA效價之結果的圖表。
圖24係表示實施例26、比較例16之小鼠肺胞清洗液中OVA特異性IgA效價之結果的圖表。
圖25係表示實施例26、比較例16之小鼠陰道清洗液中OVA特異性IgA效價之結果的圖表。
圖26係表示實施例26、比較例16之小鼠糞便萃取液中OVA特異性IgA效價之結果的圖表。
圖27係表示實施例26、比較例16之小鼠血清中OVA特異性IgG效價之結果的圖表。
圖28係表示實施例27、比較例17之小鼠陰道清洗液中OVA特異性IgA效價之結果的圖表。
圖29係表示實施例27、比較例17之小鼠糞便萃取液中OVA特異性IgA效價之結果的圖表。
圖30係表示實施例27、比較例17之小鼠血清中OVA特異性IgG效價之結果的圖表。
圖31係表示實施例28、比較例18之小鼠陰道清洗液中OVA特異性IgA效價之結果的圖表。
圖32係表示實施例28、比較例18之小鼠糞便萃取液中OVA特異性IgA效價之結果的圖表。
圖33係表示實施例28、比較例18之小鼠血清中OVA特異性IgG效價之結果的圖表。
藉由以下之實施例具體地說明本發明，但本發明並不限定於該等實施例。
(實施例1)
於含流行性感冒疫苗抗原之溶液(B/Wisconsin/1/2010，阪大微生物病研究會製造)2.25μL(445μg/mL)與源自成團泛菌之脂多糖(Nacalai Tesque公司製造)溶液5μL(2mg/mL)中添加磷酸緩衝液(Nacalai Tesque公司製造)而製備300μL之黏膜疫苗組合物。
將6隻小鼠(雌性之8週齡BALB/C小鼠，Japan SLC公司)麻醉後，於各小鼠之舌下投予所製備之疫苗組合物30μL。自該投予起經過1週 後，再次對小鼠實施麻醉，於各小鼠之舌下投予所製備之疫苗組合物30μL。自第2次投予起進而經過1週後，採取小鼠之血清及鼻腔清洗液，藉由ELISA(Enzyme Linked Immunosorbent Assay，酵素結合免疫吸附分析)法對血清中流行性感冒HA(B型)特異性IgG效價及鼻腔清洗液中流行性感冒HA(B型)特異性IgA效價進行測定。再者，詳細之測定方法於下文說明。
(比較例1~5)
代替源自成團泛菌之脂多糖，於比較例1中使用源自大腸桿菌(Escherichia coli)之脂多糖(WAKO公司製造)，於比較例2中使用源自鼠傷寒沙門氏桿菌(Salmonella typhimurium)之脂多糖(WAKO公司製造)，於比較例3中使用吡喃葡萄糖脂質(MPLAs，InvivoGen公司製造)，於比較例4中使用咪喹莫特(Imiquimod)(InvivoGen公司製造)，除此以外，以與實施例1相同之方式製備黏膜疫苗組合物，以表1所示之投予量以與實施例1相同之順序進行試驗。於比較例5中不添加疫苗抗原或佐劑而僅對小鼠投予磷酸緩衝液(Nacalai Tesque公司製造)。
(實施例2)
於含流行性感冒疫苗抗原之溶液(A/California/07/2009(H1N1)， 阪大微生物病研究會製造)1.25μL(801μg/mL)與源自成團泛菌之脂多糖(Nacalai Tesque公司製造)溶液5μL(2mg/mL)中添加磷酸緩衝液(Nacalai Tesque公司製造)而製備300μL之黏膜疫苗組合物。
將6隻小鼠(雌性之8週齡BALB/C小鼠，Japan SLC公司)麻醉後，於各小鼠之舌下投予所製備之黏膜疫苗組合物30μL。自該投予起經過1週後，再次對小鼠實施麻醉，於各小鼠之舌下投予所製備之黏膜疫苗組合物30μL。自第2次投予起進而經過1週後，採取小鼠之血清及鼻腔清洗液，藉由ELISA法對血清中流行性感冒HA(H1N1)特異性IgG效價及鼻腔清洗液中流行性感冒HA(H1N1)特異性IgA效價進行測定。再者，詳細之測定方法於下文說明。
(比較例6~10)
代替源自成團泛菌之脂多糖，於比較例6中使用源自大腸桿菌之脂多糖(WAKO公司製造)，於比較例7中使用源自鼠傷寒沙門氏桿菌之脂多糖(WAKO公司製造)，於比較例8中使用吡喃葡萄糖脂質(MPLAs，InvivoGen公司製造)，於比較例9中使用咪喹莫特(InvivoGen公司製造)，除此以外，以與實施例2相同之方式製備黏膜疫苗組合物，以表2所示之投予量以與實施例2相同之順序進行試驗。於比較例10中不添加疫苗抗原或佐劑而僅對小鼠投予磷酸緩衝液(Nacalai Tesque公司製造)。
(參考例1)
製備包含與實施例1投予樣品相同之抗原及免疫活化劑且(抗原/免疫活化劑)與實施例1相同的樣品，評估其安全性。即，於含流行性感冒疫苗抗原之溶液(B/Wisconsin/1/2010，阪大微生物病研究會製造)225μL(445μg/mL)與源自成團泛菌之脂多糖(Nacalai Tesque公司製造)溶液500μL(2mg/mL)中添加磷酸緩衝液(Nacalai Tesque公司製造)而製備1000μL之疫苗組合物。
將8隻小鼠(雌性之8週齡BALB/C小鼠，Japan SLC公司)麻醉後，於各小鼠之皮下投予所製備之疫苗組合物100μL。自該投予起對小鼠進行過程觀察直至經過72小時，觀察其生存率。
(參考比較例1、2)
代替源自成團泛菌之脂多糖，於參考比較例1中使用源自大腸桿菌之脂多糖(WAKO公司製造)，於參考比較例2中使用源自鼠傷寒沙門氏桿菌之脂多糖(WAKO公司製造)，除此以外，以與參考例1相同之方式製備疫苗組合物，以表3所示之投予量以與參考例1相同之順序進行試驗。
(實施例3、4)
於含流行性感冒疫苗抗原之溶液(A/California/07/2009(H1N1)，阪大微生物病研究會製造)2.5μL(801μg/mL)與源自成團泛菌之脂多糖(Nacalai Tesque公司製造)溶液10μL(2mg/mL)中添加作為基材之羥丙基纖維素(HPC-SSL，日本曹達公司製造)45mg，添加磷酸緩衝液(Nacalai Tesque公司製造)並均勻地混合，製成500mg。其後，分注各25mg，於實施例3中進行冷凍乾燥而製成即溶錠，於實施例4中進行減壓乾燥而製成膜製劑。
將6隻小鼠(雌性之8週齡BALB/C小鼠，Japan SLC公司)麻醉後，於各小鼠之舌下投予所製備之即溶錠或膜製劑。自該投予起經過1週後，再次對小鼠實施麻醉，於各小鼠之舌下投予所製備之即溶錠或膜製劑。自第2次投予起進而經過1週後，採取小鼠之血清及鼻腔清洗液，藉由ELISA法對血清中流行性感冒HA(H1N1)特異性IgG效價及鼻腔清洗液中流行性感冒HA(H1N1)特異性IgA效價進行測定。再者，詳細之測定方法於下文說明。於表4中亦揭示實施例2及比較例10之結果。
(實施例5)
於含肺炎球菌莢膜多糖之溶液(Pneumovax NP，MSD股份有限公司製造)87μL(1150μg/mL)與源自成團泛菌之脂多糖(Nacalai Tesque公司製造)溶液2.5μL(2mg/mL)中添加磷酸緩衝液(Nacalai Tesque公司製造)而製備100μL之黏膜疫苗組合物。
將4隻小鼠(雌性之8週齡BALB/C小鼠，Japan SLC公司)麻醉後，於各小鼠之舌下投予所製備之黏膜疫苗組合物20μL。自該投予起經過1週後，再次對小鼠實施麻醉，於各小鼠之舌下投予所製備之黏膜疫苗組合物20μL。自第2次投予起進而經過1週後，採取小鼠之血清及鼻腔清洗液，藉由ELISA法對血清中肺炎球菌莢膜多糖特異性IgG效價及鼻腔清洗液中肺炎球菌莢膜多糖特異性IgA效價進行測定。再者，詳細之測定方法於下文說明。
(比較例11、12)
於比較例11中，使用吡喃葡萄糖脂質(MPLAs，InvivoGen公司製造)代替源自成團泛菌之脂多糖，除此以外，以與實施例5相同之方式製備黏膜疫苗組合物，以表5所示之投予量以與實施例5相同之順序進 行試驗。於比較例12中不添加疫苗抗原或佐劑而僅對小鼠投予磷酸緩衝液(Nacalai Tesque公司製造)。
(實施例6)
於含HPV(Human Papillomavirus，人類乳突病毒)16重組蛋白質之溶液(HPV16，PROSPEC公司製造)61μL(820μg/mL)與源自成團泛菌之脂多糖(Nacalai Tesque公司製造)溶液2.5μL(2mg/mL)中添加磷酸緩衝液(Nacalai Tesque公司製造)而製備100μL之黏膜疫苗組合物。
將4隻小鼠(雌性之8週齡BALB/C小鼠，Japan SLC公司)麻醉後，於各小鼠之舌下投予所製備之黏膜疫苗組合物20μL。自該投予起經過1週後，再次對小鼠實施麻醉，於各小鼠之舌下投予所製備之黏膜疫苗組合物20μL。自第2次投予起進而經過1週後，採取小鼠之血清及鼻腔清洗液，藉由ELISA法對血清中HPV16特異性IgG效價及鼻腔清洗液中HPV16特異性IgA效價進行測定。再者，詳細之測定方法於下文說明。
(比較例13、14)
於比較例13中，使用吡喃葡萄糖脂質(MPLAs，InvivoGen公司製造)代替源自成團泛菌之脂多糖，除此以外，以與實施例6相同之方式製備黏膜疫苗組合物，以表6所示之投予量以與實施例6相同之順序進 行試驗。於比較例14中不添加疫苗抗原或佐劑而僅對小鼠投予磷酸緩衝液(Nacalai Tesque公司製造)。
(實施例7、8)
於含肺炎球菌莢膜多糖之溶液(Pneumovax NP，MSD股份有限公司製造)174μL(1150μg/mL)與源自成團泛菌之脂多糖(Nacalai Tesque公司製造)溶液5μL(2mg/mL)中添加作為基材之羥丙基纖維素(HPC-SSL，日本曹達公司製造)22.5mg，添加磷酸緩衝液(Nacalai Tesque公司製造)並均勻地混合，而製成250mg。其後，分注各25mg，於實施例7中進行冷凍乾燥而製成即溶錠，於實施例8中進行減壓乾燥而製成膜製劑。
將4隻小鼠(雌性之8週齡BALB/C小鼠，Japan SLC公司)麻醉後，於各小鼠之舌下投予所製備之即溶錠或膜製劑。自該投予起經過1週後，再次對小鼠實施麻醉，於各小鼠之舌下投予所製備之即溶錠或膜製劑。自第2次投予起進而經過1週後，採取小鼠之血清及鼻腔清洗液，藉由ELISA法對血清中Pneumovax NP特異性IgG效價及鼻腔清洗液中Pneumovax NP特異性IgA效價進行測定。再者，詳細之測定方法於下文說明。於表7中亦揭示實施例5及比較例12之結果。
(實施例9、10)
於含HPV16重組蛋白質之溶液(HPV16，PROSPEC公司製造)122μL(820μg/mL)與源自成團泛菌之脂多糖(Nacalai Tesque公司製造)溶液5μL(2mg/mL)中添加作為基材之羥丙基纖維素(HPC-SSL，日本曹達公司製造)22.5mg，添加磷酸緩衝液(Nacalai Tesque公司製造)並均勻地混合，製成250mg。其後，分注各25mg，於實施例9中進行冷凍乾燥而製成即溶錠，於實施例10中進行減壓乾燥而製成膜製劑。
將4隻小鼠(雌性之8週齡BALB/C小鼠，Japan SLC公司)麻醉後，於各小鼠之舌下投予所製備之即溶錠或膜製劑。自該投予起經過1週後，再次對小鼠實施麻醉，於各小鼠之舌下投予所製備之即溶錠或膜製劑。自第2次投予起進而經過1週後，採取小鼠之血清及鼻腔清洗液，藉由ELISA法對血清中HPV16特異性IgG效價及鼻腔清洗液中HPV16特異性IgA效價進行測定。再者，詳細之測定方法於下文說明。於表8中亦揭示實施例6及比較例14之結果。
(實施例11)
於含減毒活輪狀病毒之溶液(RotaTeq內用液，MSD公司製造)1000μL與源自成團泛菌之脂多糖(Nacalai Tesque公司製造)溶液5μL(2mg/mL)中添加作為基材之羥丙基纖維素(HPC-SSL，日本曹達公司製造)22.5mg而製成1005μL。其後分注各100μL，進行冷凍乾燥而製備即溶錠。
將4隻小鼠(雌性之8週齡BALB/C小鼠，Japan SLC公司)麻醉後，於各小鼠之舌下投予所製備之即溶錠。自該投予起經過1週後，再次對小鼠實施麻醉，於各小鼠之舌下投予所製備之即溶錠。自第2次投予起進而經過1週後，採取小鼠之血清及鼻腔清洗液，藉由ELISA法對血清中減毒活輪狀病毒特異性IgG效價及鼻腔清洗液中減毒活輪狀病毒特異性IgA效價進行測定。
(實施例12~22)
於實施例12中使用含不活化脊髓灰白質炎病毒之溶液(IMOVAX POLIO皮下注射，Sanofi公司製造)，於實施例13中使用含不活化A型肝炎病毒之溶液(Aimmugen，化學及血清療法研究所公司製造)，於實施例14中使用含不活化日本腦炎病毒之溶液(ENCEVAC皮下注射 用，化學及血清療法研究所公司製造)，於實施例15中使用含減毒活腮腺炎病毒之溶液(流行性腮腺炎活疫苗，北里第一三共疫苗公司製造)，於實施例16中使用含減毒活麻疹病毒之溶液(麻疹活疫苗，北里第一三共疫苗公司製造)，於實施例17中使用含減毒活風疹病毒之溶液(乾燥減毒活風疹疫苗，北里第一三共疫苗公司製造)，於實施例18中使用含破傷風類毒素結合流行性感冒菌b型多糖之溶液(ActHIB，Sanofi公司製造)，於實施例19中使用含重組HBs抗原蛋白質之溶液(Bimmugen，化學及血清療法研究所公司製造)，於實施例20中使用含減毒活黃熱病毒之溶液(黃熱疫苗，Sanofi公司製造)，於實施例21中使用含破傷風類毒素之溶液(破傷風類毒素，Denka Seiken公司製造)，於實施例22中使用含減毒活水痘病毒之溶液(乾燥減毒活水痘疫苗，阪大微生物病研究會公司製造)，以與實施例11相同之方式製備即溶錠。又，以與實施例12相同之方法進行免疫實驗。
(實施例23)
於含活BCG(Bacille Calmette Guerin，卡介苗)之溶液(乾燥BCG疫苗，Japan BCG Laboratory公司製造)300μL與源自成團泛菌之脂多糖(Nacalai Tesque公司製造)溶液5μL(2mg/mL)中添加作為基材之羥丙基纖維素(HPC-SSL，日本曹達公司製造)22.5mg而製成305μL。其後分注各30μL，進行冷凍乾燥而製備即溶錠。
將4隻小鼠(雌性之8週齡BALB/C小鼠，Japan SLC公司)麻醉後，於各小鼠之舌下投予所製備之即溶錠。自該投予起經過1週後，再次對小鼠實施麻醉，於各小鼠之舌下投予所製備之即溶錠。自第2次投予起進而經過1週後，採取小鼠之血清及鼻腔清洗液，藉由ELISA法對血清中活BCG特異性IgG效價及鼻腔清洗液中減毒活BCG特異性IgA效價進行測定。
(實施例24)
於含不活化狂犬病病毒之溶液(組織培養不活化狂犬病疫苗，化學及血清療法研究所公司製造)2000μL與源自成團泛菌之脂多糖(Nacalai Tesque公司製造)溶液5μL(2mg/mL)中添加作為基材之羥丙基纖維素(HPC-SSL，日本曹達公司製造)22.5mg而製成2005μL。其後分注各200μL，進行冷凍乾燥而製備即溶錠。
將4隻小鼠(雌性之8週齡BALB/C小鼠，Japan SLC公司)麻醉後，於各小鼠之舌下投予所製備之即溶錠。自該投予起經過1週後，再次對小鼠實施麻醉，於各小鼠之舌下投予所製備之即溶錠。自第2次投予起進而經過1週後，採取小鼠之血清及鼻腔清洗液，藉由ELISA法對血清中不活化狂犬病病毒特異性IgG效價及鼻腔清洗液中不活化狂犬病病毒特異性IgA效價進行測定。
(實施例25)
於卵白蛋白(Ovalbumin，OVA)(Sigma-Aldrich Japan)100μL(1000μg/mL)與源自成團泛菌之脂多糖(Nacalai Tesque公司製造)溶液5μL(2mg/mL)中添加磷酸緩衝液(Nacalai Tesque公司製造)而製備200μL之黏膜疫苗組合物。
將6隻小鼠(雌性之8週齡BALB/C小鼠，Japan SLC公司)麻醉後，於各小鼠之舌下投予所製備之疫苗組合物20μL。自該投予起經過1週後，再次對小鼠實施麻醉，對各小鼠同樣地於舌下投予。自第2次投予起進而經過1週後，採取小鼠之血清及黏膜樣品，藉由ELISA法對血清中卵白蛋白特異性IgG效價及鼻腔清洗液中、唾液中、肺胞清洗液中、陰道清洗液中、糞便萃取物中卵白蛋白特異性IgA效價進行測定。再者，詳細之測定方法於下文說明。
(比較例15)
於卵白蛋白(OVA)(Sigma-Aldrich Japan)100μL(1000μg/mL)中添加磷酸緩衝液(Nacalai Tesque公司製造)而製備300μL之黏膜疫苗組合物。其後之操作及評估與實施例25相同。
(實施例26)
於卵白蛋白(OVA)(Sigma-Aldrich Japan)100μL(1000μg/mL)與源自成團泛菌之脂多糖(Nacalai Tesque公司製造)溶液5μL(2mg/mL)中添加磷酸緩衝液(Nacalai Tesque公司製造)而製備500μL之黏膜疫苗組合物。
將6隻小鼠(雌性之8週齡BALB/C小鼠，Japan SLC公司)麻醉後，使用液體用噴霧器(Penn-Century公司製造)，對各小鼠之支氣管噴霧投予所製備之疫苗組合物50μL。自該投予起經過1週後，再次對小鼠實施麻醉，對各小鼠同樣地對肺投予。自第2次投予起進而經過1週 後，採取小鼠之血清及黏膜樣品，藉由ELISA法對血清中卵白蛋白特異性IgG效價及鼻腔清洗液中、唾液中、肺胞清洗液中、陰道清洗液中、糞便萃取物中卵白蛋白特異性IgA效價進行測定。再者，詳細之測定方法於下文說明。
(比較例16)
於卵白蛋白(OVA)(Sigma-Aldrich Japan)100μL(1000μg/mL)中添加磷酸緩衝液(Nacalai Tesque公司製造)而製備500μL之黏膜疫苗組合物。其後之操作及評估與實施例26相同。
(實施例27)
於卵白蛋白(OVA)(Sigma-Aldrich Japan)100μL(1000μg/mL)與源自成團泛菌之脂多糖(Nacalai Tesque公司製造)溶液5μL(2mg/mL)中添加磷酸緩衝液(Nacalai Tesque公司製造)而製備200μL之黏膜疫苗組合物。
將6隻小鼠(雌性之8週齡BALB/C小鼠，Japan SLC公司)麻醉後，使用移液管對各小鼠之陰道投予所製備之疫苗組合物20μL。自該投予起經過1週後，再次對小鼠實施麻醉，對各小鼠同樣地對陰道投予。自第2次投予起進而經過1週後，採取小鼠之血清及黏膜樣品，藉由ELISA法對血清中卵白蛋白特異性IgG效價及陰道清洗液中、糞便萃取物中卵白蛋白特異性IgA效價進行測定。再者，詳細之測定方法於下文說明。
(比較例17)
於卵白蛋白(OVA)(Sigma-Aldrich Japan)100μL(1000μg/mL)中添加磷酸緩衝液(Nacalai Tesque公司製造)而製備200μL之黏膜疫苗組合物。其後之操作及評估與實施例27相同。
(實施例28)
於卵白蛋白(OVA)(Sigma-Aldrich Japan)100μL(1000μg/mL)與源自成團泛菌之脂多糖(Nacalai Tesque公司製造)溶液5μL(2mg/mL)中添加磷酸緩衝液(Nacalai Tesque公司製造)而製備500μL之黏膜疫苗組合物。
將6隻小鼠(雌性之8週齡BALB/C小鼠，Japan SLC公司)麻醉後，使用1mL注射器及小鼠用管(Fuchigami器械)，對各小鼠之直腸投予所製備之疫苗組合物50μL。自該投予起經過1週後，再次對小鼠實施麻醉，對各小鼠同樣地對直腸投予。自第2次投予起進而經過1週後，採取小鼠之血清及黏膜樣品，藉由ELISA法對血清中卵白蛋白特異性IgG效價及陰道清洗液中、糞便萃取物中卵白蛋白特異性IgA效價進行測定。再者，詳細之測定方法於下文說明。
(比較例18)
於卵白蛋白(OVA)(Sigma-Aldrich Japan)100μL(1000μg/mL)中添加磷酸緩衝液(Nacalai Tesque公司製造)而製備500μL之黏膜疫苗組合物。其後之操作及評估與實施例28相同。
(小鼠免疫實驗)
對8週齡之雌性BALB/c小鼠每隔一週投予1次，共2次。自最終投予起經過一週後，採取小鼠血液及鼻腔清洗液。將血液於4℃下以3000G離心10分鐘，於上清液20μL中添加磷酸緩衝液(Nacalai Tesque公司製造)300μL而製成血清樣品。各種黏膜樣品之採取方法如下所述。關於鼻腔清洗液，將BALB/c小鼠之氣管下部切開，流入200μL之磷酸緩衝液(Nacalai Tesque公司製造)，回收鼻腔中流出之樣品，作為鼻腔清洗液樣品。關於唾液，對小鼠之腹腔投予12μg/mL之氯化胺甲醯膽鹼(Carbamylcholine Chloride)500μL，促進唾液產生後，採取唾液20μL。關於肺胞清洗液，將BALB/c小鼠之氣管下部切開，將500μL之磷酸緩衝液(Nacalai Tesque公司製造)流入肺內，回收流出之磷酸緩衝液，作為肺胞清洗液樣品。關於陰道清洗液，向BALB/c小鼠之陰道內流入150μL之磷酸緩衝液(Nacalai Tesque公司製造)，將10次移液所得者作為陰道清洗液樣品。關於糞便萃取液，對所回收之糞便每10mg添加100μL之磷酸緩衝液(Nacalai Tesque公司製造)，進行10分鐘之旋渦混合。其後於4℃下以3000G離心10分鐘，將上清液作為糞便萃取液樣品。
藉由測定小鼠血清中之免疫抗原特異性IgG效價，而評估全身性免疫應答。又，藉由測定小鼠黏膜樣品中之免疫抗原特異性IgA效價，而評估黏膜免疫應答。關於各評估法如下所示。
又，將各評估結果示於圖1~4、6~33。
(小鼠血清中抗原特異性IgG效價測定方法(ELISA法))
於ELISA用96孔板中添加利用碳酸緩衝液進行稀釋之各抗原(例如於測定B/Wisconsin/1/2010(B)特異性IgG抗體效價時為B/Wisconsin/1/2010(B)流行性感冒HA抗原溶液)(2.5μg/mL)各100μL，並放置一晚。
利用預先準備之含Tween20之PBS(Phosphate Buffered Saline，磷酸鹽緩衝生理食鹽水)(以下稱為清洗液)將孔清洗3次，添加利用純化水將阻斷劑(Block Ace，DS Pharma Biomedical公司製造)稀釋為4g/400mL而成之阻斷溶液各200μL，於室溫下放置2小時。其後，利用清洗液將孔清洗3次。
使用利用磷酸緩衝液(Nacalai Tesque公司製造)將阻斷劑(Block Ace，DS Pharma Biomedical公司製造)稀釋為0.4g/100mL而成之溶液(以下稱為試劑稀釋液)，將上述血清樣品以每次1/2倍階段稀釋15次，分別添加該溶液各50μL，於室溫下放置2小時。
其後，利用清洗液將孔清洗3次，添加利用試劑稀釋液將HRP(Horseradish Peroxidase，辣根過氧化酶)標記抗小鼠IgG抗體(山羊抗小鼠IgG Fc HRP，BETHYL公司製造)稀釋為10000倍者各100μL，於室溫下放置1小時。
其後，利用清洗液將孔清洗3次，添加TMB(tetramethyl benzidine，四甲基聯苯胺)溶液(ELISA POD TMB套組，Nacalai Tesque公司製造)各100μL。於其中添加1M硫酸溶液各100μL，利用微盤讀取器(168-11135CAM，Bio-Rad公司製造)對該96孔板測定450nm之吸光度。根據階段稀釋時之吸光度，將該吸光度未低於0.1之最大稀釋倍率作為小鼠血清中IgG效價，將該值以Log2之值求出。
(小鼠黏膜樣品中清洗液中抗原特異性IgA效價測定方法(ELISA 法))
基本上與抗原特異性IgG效價測定方法相同，但測定樣品為各種黏膜樣品，又，使用HRP標記抗小鼠IgA抗體(山羊抗小鼠IgA α HRP，BETHYL公司製造)代替HRP標記抗小鼠IgG抗體。其以外之操作均相同。
(有關LPS之安全性的研究)
於BALB/c小鼠之皮下注射投予包含B型疫苗與各種LPS之參考例1及參考比較例1、2之疫苗組合物之樣品100μL。關於其後之經過觀察，每隔24小時檢查小鼠之狀態，觀察其生死。持續觀察直至72小時後，算出其生存率。將結果示於圖5。採用該評估結果作為黏膜疫苗組合物中之LPS之安全性之結果。
如圖1~4、6~15所示，於實施例及比較例中，藉由使用脂多糖而以較高水準產生抗原特異性IgG及IgA。相對於此，於其他比較例中，關於抗原特異性IgG亦有產生者，但關於抗原特異性IgA，產生量較低。由該等結果發現：作為免疫活化劑，脂多糖或其鹽對於舌下之黏膜免疫誘導有效。又，如圖16~33所見，藉由對黏膜投予抗原與脂多糖，不僅於該黏膜面而且於相隔較遠之黏膜面亦確認到誘導免疫(例如若於舌下投予抗原與脂多糖，則於腸道或陰道面確認到抗原特異性IgA之產生)。即，發現脂多糖或其鹽作為對所有黏膜面有效之免疫活化劑而發揮作用，且可於全身充分地誘導抗原特異性IgA。
又，如圖5所示，藉由注射免疫進行含源自成團泛菌之脂多糖的疫苗組合物、含源自大腸桿菌之脂多糖的疫苗組合物及含源自鼠傷寒沙門氏桿菌之脂多糖的疫苗組合物之比較，結果可確認到含源自成團泛菌之脂多糖的疫苗組合物之安全性較高。
因此，考慮到黏膜投予免疫誘導效果與投予組合物安全性兩方面，發現含源自成團泛菌之脂多糖的疫苗組合物優異。
[產業上之可利用性]
本發明之黏膜疫苗組合物由於將上述特定之免疫活化劑與至少一種抗原併用，故而即便為對口腔內黏膜、眼黏膜、耳黏膜、生殖器黏膜、咽喉黏膜、氣管黏膜、支氣管黏膜、肺黏膜、胃黏膜、腸道黏膜或直腸黏膜之投予，亦可安全且有效地誘導全身性免疫應答及黏膜免疫應答。

Claims (5)

  1. 一種黏膜疫苗組合物，其特徵在於：其係對選自由人類或動物之口腔內黏膜、眼黏膜、耳黏膜、生殖器黏膜、咽喉黏膜、氣管黏膜、支氣管黏膜、肺黏膜、胃黏膜、腸道黏膜及直腸黏膜所組成之群中之至少1種黏膜投予者，並且包含至少一種抗原、與作為免疫活化劑之源自如下革蘭氏陰性細菌之脂多糖或其鹽，該革蘭氏陰性細菌係選自由沙雷氏菌屬(Serratia)、勒克氏菌屬(Leclercia)、拉恩氏菌屬(Rahnella)、醋桿菌屬(Acidicaldus)、嗜酸菌屬(Acidiphilium)、酸球形菌屬(Acidisphaera)、酸胞菌屬(Acidocella)、酸單胞菌屬(Acidomonas)、亞細亞菌屬(Asaia)、別爾納普氏菌屬(Belnapia)、脆弱球菌屬(Craurococcus)、葡糖醋桿菌屬(Gluconacetobacter)、葡糖桿菌屬(Gluconobacter)、柯紮克氏菌屬(Kozakia)、Leahibacter、鼠球菌屬(Muricoccus)、Neoasaia、石油分解菌屬(Oleomonas)、副脆弱球菌屬(Paracraurococcus)、紅球狀菌屬(Rhodopila)、玫瑰球菌屬(Roseococcus)、Rubritepida、糖桿菌屬(Saccharibacter)、星狀菌屬(Stella)、Swaminathania、Teichococcus、紮瓦爾金氏菌屬(Zavarzinia)、假單胞菌屬(Pseudomonas)、無色桿菌屬(Achromobacter)、芽孢桿菌屬(Bacillus)、甲烷囊菌屬(Methanoeulleus)、甲烷八疊球菌屬(Methanosarcina)、梭菌屬(Clostridium)、微球菌屬(Micrococcus)、黃桿菌屬(Flavobacterium)、泛菌屬(Pantoea)、醋桿菌屬(Acetobacter)、醱酵單胞菌屬(Zymomonas)、黃色單胞菌屬(Xanthomonas)及腸桿菌屬(Enterobacter)所組成之群中之至少1 種。
  2. 如請求項1之黏膜疫苗組合物，其為液劑、噴霧劑、半固形製劑或固形製劑，且上述半固形製劑及固形製劑會因體液及/或體溫而溶解。
  3. 如請求項2之黏膜疫苗組合物，其係會因體液及/或體溫而溶解之固形製劑。
  4. 如請求項1、2或3之黏膜疫苗組合物，其係用於誘導體液性免疫。
  5. 如請求項1、2、3或4之黏膜疫苗組合物，其中抗原為源自感染症之抗原或癌抗原。
TW103134468A 2013-10-03 2014-10-02 黏膜疫苗組合物 TW201601751A (zh)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP2013208663 2013-10-03

Publications (1)

Publication Number Publication Date
TW201601751A true TW201601751A (zh) 2016-01-16

Family

ID=52778767

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
TW103134468A TW201601751A (zh) 2013-10-03 2014-10-02 黏膜疫苗組合物

Country Status (13)

Country Link
US (1) US10092642B2 (zh)
EP (1) EP3053595B1 (zh)
JP (1) JP6494232B2 (zh)
KR (1) KR20160058773A (zh)
CN (1) CN105530958A (zh)
AU (1) AU2014330337A1 (zh)
BR (1) BR112016006245A2 (zh)
CA (1) CA2923040A1 (zh)
HK (1) HK1219054A1 (zh)
MX (1) MX2016003321A (zh)
RU (1) RU2016109368A (zh)
TW (1) TW201601751A (zh)
WO (1) WO2015050180A1 (zh)

Families Citing this family (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US10391167B2 (en) * 2013-10-03 2019-08-27 Nitto Denko Corporation Mucosal vaccine composition
JP2016074654A (ja) * 2014-10-02 2016-05-12 日東電工株式会社 経皮投与用ワクチン医薬組成物
US10688120B2 (en) * 2015-05-01 2020-06-23 Nitto Denko Corporation Allergy vaccine composition

Family Cites Families (23)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS6367364A (ja) 1986-09-05 1988-03-26 ナショナル住宅産業株式会社 換気装置
JP4043533B2 (ja) * 1995-01-27 2008-02-06 水野 傳一 低分子量リポポリサッカライド
JPH08245702A (ja) * 1995-03-13 1996-09-24 Denichi Mizuno 高分子量リポポリサッカライド
US6010719A (en) * 1997-09-16 2000-01-04 Universiteit Gent Freeze-dried disintegrating tablets
CA2538887A1 (en) * 2003-09-15 2005-03-31 Id Biomedical Corporation Of Quebec Measles subunit vaccine
TWI457133B (zh) 2005-12-13 2014-10-21 Glaxosmithkline Biolog Sa 新穎組合物
CN103059118B (zh) 2007-11-21 2017-11-24 罗斯基勒大学 具有冰结合活性的多肽
JP5190628B2 (ja) * 2008-03-31 2013-04-24 一般財団法人阪大微生物病研究会 混合免疫賦活剤を含む新規ワクチン
CN102481312B (zh) 2009-06-05 2015-07-15 传染性疾病研究院 合成的吡喃葡萄糖脂佐剂
GB201009273D0 (en) 2010-06-03 2010-07-21 Glaxosmithkline Biolog Sa Novel vaccine
JP2012082156A (ja) * 2010-10-09 2012-04-26 Bio Medical Research Group:Kk 免疫活性化剤及び免疫活性化剤配合物
EP2726097A4 (en) 2011-07-01 2015-03-11 Univ California HERPES VIRUS VACCINE AND METHOD OF USE
JP5650780B2 (ja) * 2012-04-04 2015-01-07 日東電工株式会社 ワクチン組成物
KR20140100422A (ko) 2013-02-05 2014-08-14 닛토덴코 가부시키가이샤 백신 조성물
EP2762153A3 (en) 2013-02-05 2015-04-01 Nitto Denko Corporation Vaccine composition for mucosal administration
IN2014CH00386A (zh) 2013-02-05 2015-04-03 Nitto Denko Corp
EP2762157A1 (en) 2013-02-05 2014-08-06 Nitto Denko Corporation Vaccine composition for transdermal or mucosal administration
US10206985B2 (en) 2013-02-05 2019-02-19 Nitto Denko Corporation WT1 peptide cancer vaccine composition for mucosal administration
US20160206728A1 (en) 2013-10-03 2016-07-21 Nitto Denko Corporation Dried influenza vaccine preparation and method of producing the same
US10071155B2 (en) 2013-10-03 2018-09-11 Nitto Denko Corporation Nasal mucosal vaccine composition
US10391167B2 (en) 2013-10-03 2019-08-27 Nitto Denko Corporation Mucosal vaccine composition
KR20160067087A (ko) 2013-10-03 2016-06-13 닛토덴코 가부시키가이샤 주사 백신 조성물
GB201505585D0 (en) 2015-03-31 2015-05-13 Immatics Biotechnologies Gmbh Novel peptides and combination of peptides and scaffolds for use in immunotherapy against renal cell carinoma (RCC) and other cancers

Also Published As

Publication number Publication date
JP6494232B2 (ja) 2019-04-03
BR112016006245A2 (pt) 2017-08-01
RU2016109368A3 (zh) 2018-07-12
EP3053595A4 (en) 2017-04-19
JP2015091792A (ja) 2015-05-14
US20160193327A1 (en) 2016-07-07
MX2016003321A (es) 2016-08-12
AU2014330337A1 (en) 2016-03-17
CN105530958A (zh) 2016-04-27
EP3053595A1 (en) 2016-08-10
EP3053595B1 (en) 2020-09-16
WO2015050180A1 (ja) 2015-04-09
RU2016109368A (ru) 2017-11-10
CA2923040A1 (en) 2015-04-09
HK1219054A1 (zh) 2017-03-24
KR20160058773A (ko) 2016-05-25
US10092642B2 (en) 2018-10-09

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP6378380B2 (ja) ワクチン組成物
JP6494233B2 (ja) 粘膜ワクチン組成物
WO2015050181A1 (ja) 注射ワクチン組成物
WO2015050178A1 (ja) 鼻粘膜ワクチン組成物
US10420837B2 (en) Vaccine pharmaceutical composition for transdermal administration
JP6494232B2 (ja) 粘膜ワクチン組成物
WO2017090766A1 (ja) 口腔内投与用ワクチン医薬組成物及び口腔内投与用ワクチン医薬組成物の製造方法