CN103877432A - 薏苡子麸皮的萃取物及其应用 - Google Patents

Abstract

本发明提供薏苡子麸皮的萃取物，其包含薏苡子麸皮的具有1至7碳数的醇萃取物(A)及薏苡子麸皮的二氧化碳超临界流体萃取物(B)。优选地，该薏苡子麸皮的萃取物具有治疗皮肤及/或皮下组织疾病的效果。

Description

薏苡子麸皮的萃取物及其应用

技术领域

本发明涉及薏苡子麸皮萃取物及其用途；具体言之，用于治疗皮肤及/或皮下组织疾病。

背景技术

皮肤为人体中最大的器官与身体和环境间的主要屏障，可在第一线抵御微生物病原和物理及化学性压力或剌激。皮肤不仅提供物理与化学性保护，也为能有效引起被动和主动免疫反应的免疫器官，进而保护人体。

皮肤由外到内，可分成表皮、真皮及皮下组织三层结构，最外层的表皮负责保护功能；位于其中的真皮层是构成皮肤的最主要部份，其负责支撑表皮及以各种纤维交织成支撑网，并可使血管、淋巴管、神经、皮脂腺、汗腺及毛囊等分布于其中；皮肤的最里层则为皮下组织，广义来说是指脊椎动物真皮的深层，狭义来说则指真皮与其下方骨胳、肌肉之间的脂肪结缔组织，其与真皮之间无明显界限，主要是由脂肪细胞所形成，负责热阻隔、吸收震动以及提供能量的来源，也是脂肪代谢的主要地方。

皮肤及/或皮下组织会因先天或后天的因素而产生各种疾病，造成患者的不适，且因外观上的变化使患者产生心理上的负担，而现今所采用的皮肤及/或皮下组织药物或为类固醇，或为酸性药物，如应用不当副作用大，并非适合的治疗方式。

皮肤及/或皮下组织疾病中，因放射线治疗而造成的损害为一重要类别，放射线治疗时常并发放射线皮肤炎、疲倦感、放射线肺炎及淋巴水肿等副作用(McCormick etal.,1989，Int JRadiat Oncol Biol Phys.,17:1299–1302；Lingosetal.,1991，Int.J.Radiat.Oncol.Biol.Phys.,21:355-360；Taylor etal.,1995，Int J.Radiat.Oncol.Biol.Phys.,31:753-764；Gorodetsky etal.,1999，Int.J.Radiat.Oncol.Biol.Phys.,45:893-900；Erickson etal.,2001，J.Natl.CancerInst,93:96-111)。以乳癌为例，其中约有50%至60%的乳癌病患需接受手术后放射线治疗。这些病患在接受手术切除及全身化学药物治疗后，常合并掉发、白血球低下、恶心、呕吐等副作用。可能让患者因恐惧而逃避或拒绝治疗。而医学界也一直由治疗设备、技术的改良，以期减少放射线治疗的副作用，其中因放射线引起的皮肤红斑、色素沉淀，甚至少数患者会产生溃疡等较严重的副作用，医界也一直努力尝试使用一些放射线保护剂(如Amifostine)(Yuhas etal.,1980，Cancer Clin.Trials.,3:211-216)。然而这些药物同时伴随副作用太强或效果不彰，或是价格昂贵，在实际医疗上仍甚少使用。业界仍须开发达到放射线保护或加强放射线疗效、以降低其放射线剂量的药剂，以造福接受放射线治疗的癌症病患。

薏苡(Coix lachryma-jobi L.var.ma-yuen Stapf)子又称约伯的眼泪(Job'stears)，为中药材(TCM)之一，长久以来做为抗发炎药，用于治疗疣(warts)、皮肤龟裂(chapped skin)、风湿病(rheumatism)及神经痛(neuralgia)(李时珍着，本草纲目，1596)。最近一份研究报告显示，去壳薏苡子(dehulled adlay，DA)可调节大鼠肠道的微生物丛(microbiota)(Chiang，W.;Cheng，C.;Chiang，M.;Chung，K.T.J.Agric.Food Chem.2000,48,829-832)，而体外试验也证实薏苡子具有抗发炎与抗氧化的疗效(Lee,M.Y.;Tsai，S.H.;Kuo,Y.H.;Chiang，W.Food Sci.Biotechnol.2008,17，1265-1271;Kuo,C.C.;Shih,M.C.;Kuo,Y.H.;Chiang，W.J.Agric.Food Chem.2001,49,1564-1570)。许多不同来源薏苡子中，所含的多种强效成分皆已定量出(Wu,T.T.;Charles,A.L.；Huang，T.C.Food Chem.2007,104,1509-1515)。薏苡子可分离出数种酚类抗氧化剂，且萃取出的生物活性成分，在处理过程中皆相当稳定(Hsu,H.Y.;Lin,B.F.;Lin,J.Y.;Kuo,C.C.;Chiang，W.J.Agric.Food Chem.2003,51,3763-3769)。采用分析导向进行分离(assay-guided isolation)时，可自薏苡壳(adlay hull，AH)分离出木酚素(Lignan)与酚类化合物(Kuo,C.C.;Shih,M.C.;Kuo,Y.H.;Chiang，W.J.Agric.FoodChem.2001,49,1564-1570)。分离薏苡子的抗发炎成分时，则可分离出黄酮类与数种酚酸化合物(Huang，D.W.;Kuo,Y.H.;Lin,F.Y.;Lin,Y.L.;Chiang，W.J.Agric.FoodChem.2009,57，2259-2266;Huang,D.W；Chung，C.P.;Kuo,Y.H.;Lin,Y.L.;Chiang，W.J.Agric.FoodChem.2009，57，10651-10657;Chen,H.J.;Chung，C.P.；Chiang，W.;Lin,Y.L.FoodChem.2011,126，1741-1748)。研究发现，薏苡种皮(adlay testa，AT)中的酚醇具有抗过敏活性(Chen,H.J.;Shih,C.K.;Hsu,H.Y.;Chiang，W.J.Agric.FoodChem.2010,58,2596-2601)，去壳薏苡子与薏苡子麸皮(adlay bran，AB)具有抗发炎活性，能延缓癌症形成(Shih,C.K.;Chiang，W.;Kuo,M.L.FoodChem.Toxicol.2004,42,1339-1347;Li，S.C.;Chen,C.M.;Lin,S.H.;Chiang，W.;Shih,C.K.J.Sci.Food Agric.2011,91,547-552)，而阿魏酸(ferulic acid)经深入研究后发现为抗发炎的活性成分(Chung，C.P.；Hsu,H.Y.;Huang，D.W.;Hsu,H.H.;Lin,J.T.;Shih,C.K.;Chiang，W.J.Agric.FoodChem.2010，58,7616-7623)。

薏苡子的许多用途虽已经报导，但薏苡子的萃取物的不同应用仍待开发。

发明内容

于本发明中，由薏苡子萃取物而达到治疗皮肤及/或皮下组织疾病的效果，特别是提供放射线保护或加强放射线疗效、以降低其放射线剂量，可造福接受放射线治疗的癌症患者。

本发明提供一种组合物，其包含薏苡子麸皮(bran)的萃取物，该薏苡子麸皮的萃取物包含薏苡子麸皮的具有1至7碳数的醇萃取物(A)及薏苡子麸皮的二氧化碳超临界流体萃取物(B)，其中该薏苡子麸皮的具有1至7碳数的醇萃取物(A)与该薏苡子麸皮的二氧化碳超临界流体萃取物(B)的重量比为自约3:1至约1:4。

本发明亦提供一种前述的薏苡子麸皮的萃取物的用途，其用于制造治疗皮肤及/或皮下组织疾病的药物。

本发明又提供一种于个体中治疗皮肤及/或皮下组织疾病的方法，其包含给予该个体治疗有效量的薏苡子麸皮的萃取物及视需要的医药上可接受的载剂或赋形剂。

本发明又提供一种本发明再提供一种前述的薏苡子麸皮的萃取物的用途，其用于制造降低介白素(IL)-1α、介白素-1β、介白素-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α、介白素-8、前列腺素2(PGE2)及/或C反应蛋白(CRP)的药物。

本发明再提供一种于个体中降低介白素-1α、介白素-1β、介白素-6、肿瘤坏死因子-α、介白素-8、前列腺素2及/或C反应蛋白的方法，其包含给予该个体治疗有效量的薏苡子麸皮的萃取物及视需要的医药上可接受的载剂或赋形剂。

附图说明

图1显示根据本发明的薏苡子麸皮的具有1至7碳数的醇萃取物(A)的HPLC图谱。

图2显示根据本发明的薏苡子麸皮的二氧化碳超临界流体萃取物(B)的HPLC图谱。

图3显示根据本发明的薏苡子麸皮的具有1至7碳数的醇萃取物(A)及薏苡子麸皮的二氧化碳超临界流体萃取物(B)重量比为1:4的HPLC图谱。

图4显示不同喂食剂量薏苡子胶囊或临床放射线治疗皮肤损伤药物Sulfasil，对放射线治疗引发小鼠腿部毛皮组织损伤效应的组织病理切片图。RT表示放射线治疗；假治疗(sham)表示未进行放射线治疗；载剂(vehicle)表示不含薏苡子萃取物的载剂。

图5显示肿瘤动物给予放射线治疗同时管喂不同浓度薏苡子胶囊或临床放射线治疗皮肤损伤药物Sulfasil，体重变化结果图。RT表示放射线治疗；假治疗表示未进行放射线治疗；载剂表示不含薏苡子萃取物的载剂。

图6显示肿瘤动物给予放射线治疗同时管喂不同浓度薏苡子胶囊或临床放射线治疗皮肤损伤药物Sulfasil，肿瘤体积变化结果图。RT表示放射线治疗；假治疗表示未进行放射线治疗；载剂表示不含薏苡子萃取物的载剂。

图7显示肿瘤动物给予放射线治疗同时管喂不同浓度薏苡子胶囊或临床放射线治疗皮肤损伤药物Sulfasil，血清中IL-1α浓度变化结果图。RT表示放射线治疗；假治疗表示未进行放射线治疗；载剂表示不含薏苡子萃取物的载剂。

图8显示肿瘤动物给予放射线治疗同时管喂不同浓度薏苡子胶囊或临床放射线治疗皮肤损伤药物Sulfasil，血清中IL-1β浓度变化结果图。RT表示放射线治疗；假治疗表示未进行放射线治疗；载剂表示不含薏苡子萃取物的载剂。

图9显示肿瘤动物给予放射线治疗同时管喂不同浓度薏苡子胶囊或临床放射线治疗皮肤损伤药物Sulfasil，血清中IL-6浓度变化结果图。RT表示放射线治疗；假治疗表示未进行放射线治疗；载剂表示不含薏苡子萃取物的载剂。

图10显示肿瘤动物给予放射线治疗同时管喂不同浓度薏苡子胶囊或临床放射线治疗皮肤损伤药物Sulfasil，血清中TNF-α浓度变化结果图。RT表示放射线治疗；假治疗表示未进行放射线治疗；载剂表示不含薏苡子萃取物的载剂。

图11显示肿瘤动物给予放射线治疗同时管喂不同浓度薏苡子胶囊或临床放射线治疗皮肤损伤药物Sulfasil，血清中IL-8浓度变化结果图。RT表示放射线治疗；假治疗表示未进行放射线治疗；载剂表示不含薏苡子萃取物的载剂。

图12显示肿瘤动物给予放射线治疗同时管喂不同浓度薏苡子胶囊或临床放射线治疗皮肤损伤药物Sulfasil，血清中PGE2浓度变化结果图。RT表示放射线治疗；假治疗表示未进行放射线治疗；载剂表示不含薏苡子萃取物的载剂。

图13显示肿瘤动物给予放射线治疗同时管喂不同浓度薏苡子胶囊或临床放射线治疗皮肤损伤药物Sulfasil，血清中CRP浓度变化结果图。RT表示放射线治疗；假治疗表示未进行放射线治疗；载剂表示不含薏苡子萃取物的载剂。

图14显示25种不同喂食剂量/组合对放射线治疗引发小鼠腿部毛皮组织损伤效应的组织病理切片图。横轴与纵轴分别显示具有1至7碳数的醇萃取物(A)及薏苡子麸皮的二氧化碳超临界流体萃取物(B)喂食剂量/组合(mg/g)。每张图分别显示小鼠肿瘤放射线治疗过程管喂不同剂量组合的小鼠的皮毛组织的组织病理切片。

实施方式

本发明提供一种组合物，其包含薏苡子麸皮(bran)的萃取物，该薏苡子麸皮的萃取物包含薏苡子麸皮的具有1至7碳数的醇萃取物(A)及薏苡子麸皮的二氧化碳超临界流体萃取物(B)，其中该薏苡子麸皮的具有1至7碳数的醇萃取物(A)与该薏苡子麸皮的二氧化碳超临界流体萃取物(B)的重量比为自约3:1至约1:4。

参考以下对本发明的各方案、实例、及伴随相关描述的化学图式及表格的详细描述，可更容易地了解本发明。在揭示及描述本发明的化合物、组合物及/或方法之前，应了解，除非由权利要求另外特别地指出，否则本发明不受限于特定制备方法、载剂或制剂、或将本发明化合物调配成用于局部、经口或非经肠给予的产物或组合物的特定模式，此是由于本领域技术人员非常清楚此等事情是可以加以变化的。亦应了解，本文所用的术语仅用于描述特定方案的目的而不意欲用于限制性本发明的范围。

除非另外指出，否则如本发明所用的以下术语应解释为具有以下含义。

范围在本文中通常表述为“约”一个特定值及/或至“约”另一个特定值。当表述此类范围时，一方案为包括一个特定值及/或至另一个特定值的范围。类似地，当值通过使用字“约”表述为近似值时，应了解特定值可形成另一方案。另外应了解，每一范围的各端点皆有显著性，一端点与另一端点既有相关性，亦彼此独立。

“视情况”或“视情况地”意指随后所述的事件或状况可能发生或可能不发生，且该描述包括该事件或状况发生的情况及其未发生的情况。举例而言，“视情况包含药剂”意指该药剂可能存在或可能不存在。

必须指出，除非上下文另外清楚规定，否则如本说明书及随附权利要求中所用的单数形式“一”及“该”包括复数个所指标的物。因此，除非上下文另外需要，否则单数术语应包括复数且复数术语应包括单数。

如本文所用的术语“个体”表示任何动物，优选为哺乳动物，且更优选为人类。个体的实例包括人类、非人类灵长类动物、啮齿动物、天竺鼠、兔、绵羊、猪、山羊、母牛、马、狗及猫。

术语如本文所提供的化合物的“有效量”意指该化合物的量足以提供对所需功能(诸如基因表现、蛋白质功能或诱导特定类型的反应)的所需调节。如下文所指出，确实的需要量将在个体之间有变化，此视个体的疾病病况、身体状况、年龄、性别、物种及体重、组合物的特性及配方等而定。给药方案可经调整以诱导最佳治疗反应。举例而言，可每日给予若干分次剂量，或可依治疗情形的紧急程度按比例减少剂量。因此，很难指定确实的“有效量”。然而，本领域技术人员使用常规实验即可确定适当的有效量。

如本文所用的术语“治疗”表示逆转、减轻或改善此术语所适用的病症或病状、或该病症或病状的一或多种症状，或抑制其进展。

如本文所用的术语“载剂”或“赋形剂”是指自身并不为治疗剂，而是用作用于将治疗剂传递至个体的载剂及/或稀释剂及/或佐剂或媒剂，或添加至制剂中以改善制剂的处理或储存性质或允许或有助于组合物的剂量单位形成适于经口给予的剂量单位(诸如胶囊或锭剂)的任何物质。适合的载剂或赋形剂为一般熟习制造医药制剂或食品的通常知识者所熟知。载剂或赋形剂可包括(举例而言但不限于)缓冲剂、稀释剂、崩解剂、粘合剂、粘着剂、湿润剂、聚合物、润滑剂、滑动剂、为遮蔽或抵消不良味道或气味而添加的物质、调味剂、染料、芳香剂及为改善组合物的外观而添加的物质。可接受的载剂或赋形剂包括柠檬酸盐缓冲剂、磷酸盐缓冲剂、乙酸盐缓冲剂、碳酸氢盐缓冲剂、硬脂酸、硬脂酸镁、氧化镁、磷酸及硫酸的钠盐及钙盐、碳酸镁、滑石、明胶、阿拉伯胶、海藻酸钠、果胶、糊精、甘露糖醇、山梨糖醇、乳糖、蔗糖、淀粉、明胶、纤维素物质(诸如烷酸的纤维素酯及纤维素烷基酯)、低熔点蜡、可可脂、氨基酸、尿素、醇类、抗坏血酸、磷脂、蛋白质(例如血清白蛋白)、乙二胺四乙酸(EDTA)、二甲亚砜(DMSO)、氯化钠或其他盐、脂质体、甘露糖醇、山梨糖醇、甘油或粉末、聚合物(诸如聚乙烯吡咯烷酮、聚乙烯醇及聚乙二醇)、及其他医药学上可接受的物质。载剂不应破坏治疗剂的药理学活性，且在以足以传递治疗量的药剂的剂量给予时应无毒性。

根据本发明的组合物是包含薏苡子麸皮的萃取物，根据本发明的薏苡子麸皮优选是自去壳薏苡子中所得，本文中所述的“去壳薏苡子”一词是指不具有壳、种皮(testas)、外皮(coverings)、外壳(shells)或荚(pods)的种子。自薏苡子中去除壳、外皮、外壳或荚的方式为本发明所属技术领域中具通常知识者所熟知。一般而言，去壳薏苡子包含麸皮及胚乳(endosperm)，自去壳薏苡子取得麸皮的方式为本发明所属技术领域中具通常知识者所熟知。

本发明所述的薏苡子并无特殊限定，优选地，该薏苡属于禾本科(Gramineae family)、黍亚科(Panicoideae sub-family)、薏苡属(Coix species)，或姜目(Poales order)、早熟禾科(Poaceae family)、薏苡属。更优选地，该薏苡为Coix lachryma-jobi、Coix lachryma-jobiL.,Coix lachryma-jobiL.var.ma-yuen Stapf、Coix agrestis Lour.,Coix arundinacea Lam.、Coix exaltata Jacq.或Coix lacrymaL.。

根据本发明的薏苡子麸皮的萃取物包含薏苡子麸皮的具有1至7碳数的醇萃取物(A)及薏苡子麸皮的二氧化碳超临界流体萃取物(B)。

本文中所述的“具有1至7碳数的醇”一词是指直链或支链、具有取代基或不具有取代基、单元或多元、饱和或不饱和的醇，优选为不具有取代基、单元及饱和醇。另一方面，该具有1至7碳数的醇优选为1至4碳数的醇。于本发明的一优选具体实施例中，该具有1至7碳数的醇为甲醇、乙醇、正丙醇(n-propanol)、异丙醇(isopropanol)、正丁醇、异丁醇(iso-butanol)、仲丁醇(sec-butanol)、叔丁醇(tert-butanol)、1-戊醇、2-戊醇、3-戊醇、2-甲基-1-丁醇、2-甲基-2-丁醇、3-甲基-2-丁醇、3-甲基-1-丁醇、2,2-二甲基-1-丙醇、1-己醇、2,4-己二烯-1-醇、2-甲基-环戊醇、环己醇、1-庚醇、2-庚醇或环庚醇；尤其优选地，该醇为甲醇或乙醇；最优选地，该醇为乙醇。该醇可单独使用或混合多种使用。

本文中所述的具有1至7碳数的醇优选为水溶液，其浓度优选为自约49%至约99.9%的醇溶液；更优选为自约75%至约99.9%的醇溶液；尤其优选为自约90%至约98.0%的醇溶液。

本文中所述的“薏苡子麸皮的具有1至7碳数的醇萃取物(A)”一词是指以具有1至7碳数的醇萃取薏苡子麸皮所得的萃取物。以溶液萃取种子部位的方式为本发明所属技术领域中具通常知识者所熟知。于本发明的一优选具体实施方案中，该薏苡子麸皮浸于该醇溶液中以供萃取，更优选地，该薏苡子麸皮浸于该醇溶液中，并经超音波震荡以供萃取。

该萃取的温度优选为自约10℃至约100℃；更优选为自约15℃至约50℃；尤其优选为约20℃至约40℃。

于本发明的一优选具体实施方案中，该薏苡子麸皮的具有1至7碳数的醇萃取物(A)是由包含下列步骤的制备方法所制备：

(a)提供薏苡子麸皮；

(b)将该薏苡子麸皮切成小块；及

(c)以具有1至7碳数的醇萃取步骤(b)的小块以提供该萃取物。

根据本发明的制备方法，于步骤(b)前该薏苡子麸皮优选经干燥。

于本发明的一优选具体实施方案中，步骤(b)进一步包含将该小块搅碎为粉末。切块及/或搅碎的方式为本发明所属技术领域中具通常知识者所熟知。

该去壳薏苡子及醇溶液的比例(w/v)并无特殊限制，可为约1:1至约1:10；优选地，约1:3至约1:8；尤其优选地；约1:5。

于本发明的一优选具体实施方案中，该萃取步骤(c)可重复实施，并收集合并该萃取物。

优选地，该制备方法进一步包含步骤(d)自该萃取物获得液体分液，并移除固体。移除固体部份以获得该液体分液的方法为本发明所属技术领域中具通常知识者所熟知。

优选地，该制备方法进一步包含浓缩步骤。浓缩的方法为本发明所属技术领域中具通常知识者所熟知，例如使用减压浓缩机进行。

根据本发明的该薏苡子麸皮的二氧化碳超临界流体萃取物(B)是指以二氧化碳超临界流体萃取薏苡子麸皮所得的萃取物。超临界流体是指当超过临界温度及临界压力以上，气体与液体的性质会趋近于类似，最后会达成一个均匀相(homogenous)的流体状态。超临界流体类似气体具有可压缩性，兼具有类似液体的流动性，可用于萃取，亦有商用的超临界流体萃取设备可供使用，例如NATEX、SEPAREX、UHDE及台超科皆提供有商用的超临界流体萃取设备，其型号规格一般都以萃取槽能处理的容量表示，自500g至2000kg可供选择，可依所需选取适宜的超临界流体萃取设备。

于本发明的一具体实施方案中，该薏苡子麸皮的二氧化碳超临界流体萃取物(B)的萃取压力为自约150bar至约500bar；优选是自约200bar至约400bar；更优选为自约350bar至约380bar。

于本发明的一具体实施方案中，该薏苡子麸皮的二氧化碳超临界流体萃取物(B)的萃取温度为自约30℃至约80℃；优选是自约40℃至约70℃；更优选为自约50℃至约60℃。

于本发明的一具体实施方案中，该薏苡子麸皮的二氧化碳超临界流体萃取物(B)的二氧化碳流量为自约20kg/h至约50kg/h；优选为自约30kg/h至约45kg/h；尤其优选为自约38kg/h至约40kg/h。

于本发明的一具体实施方案中，该薏苡子麸皮的二氧化碳超临界流体萃取物(B)的萃取时间为自约40分钟至约100分钟；优选为自约50分钟至约80分钟。

于本发明的一具体实施方案例中，该薏苡子麸皮的二氧化碳超临界流体萃取物(B)是于共溶剂的存在下进行萃取，该共溶剂例如约1%至约10%的95%乙醇。

优选地，该超临界流体萃取方法进一步包含浓缩步骤。浓缩的方法为本发明所属技术领域中具通常知识者所熟知，例如使用减压浓缩机进行。

根据本发明的该薏苡子麸皮的具有1至7碳数的醇萃取物(A)与该薏苡子麸皮的二氧化碳超临界流体萃取物(B)的重量比为自约3:1至约1:4，于此比例范围内，针对皮肤及/或皮下组织疾病的治疗效果十分显著；优选地，该比例为自约3:2至约1:2；尤其优选地，该比例为约3:2、约3:1、约1:2或约1:4。

于本发明的一优选具体实施方案中，该薏苡子麸皮的萃取物进行高效液相层析(high performance liquid chromatography，HPLC)分析。样品以丙酮为溶剂，配制成1g/mL的浓度，并经由0.45μm滤膜过滤。取20μL过滤后的样品液注入

analysis HPLC分析，分析管柱为RP-18，侦测器光电二极管阵列检测器(photo-diode array detector)。该管柱为反相C18管柱(250×4.6mmi.d.;YMC Co.,INC)。管柱温度为40℃。该层析于280nm监控。该流动相使用A溶液：5%醋酸于水中；B溶液：0.5%醋酸于水中/100%乙腈(1:1，v/v)。洗脱梯度模式示于表1。

表1

该薏苡子麸皮的具有1至7碳数的醇萃取物(A)的图谱示于图1；该薏苡子麸皮的二氧化碳超临界流体萃取物(B)的图谱示于图2；该薏苡子麸皮的具有1至7碳数的醇萃取物(A)与该薏苡子麸皮的二氧化碳超临界流体萃取物(B)的重量比为1:4的图谱示于图3，该图谱于下列滞留时间至少包含峰：约12.5分钟至约13.5分钟、约14分钟至约15.5分钟、约15.5分钟至约16.5分钟、约21分钟至约22.5分钟、约32分钟至约35分钟。

根据本发明的组合物优选为医药组合物、食品组合物或化妆品组合物。

本发明的医药组合物可通过本发明领域中已知的任何方法局部或全身给予，包括但不限于通过肌肉内、皮内、静脉内、皮下、腹膜内、鼻内、经口、粘膜或外部途径给予。适当的给药途径、调配方法及给药时程可由本领域技术人员来决定。在本发明中，医药组合物可根据相应给药途径以多种方式调配，诸如液体溶液、悬浮液、乳液、糖浆、锭剂、丸剂、胶囊、持续释放制剂、散剂、颗粒、安瓿、注射液、输注液、套组、软膏、洗剂、擦剂、乳膏或其组合。在必要时，其可经灭菌或与任何医药学上可接受的载剂或赋形剂混合，其中有许多医药学上可接受的载剂或赋形剂已为一般技术者所知，例如参见[实施方式]第10段。

本发明所述的外部途径亦可称为局部给药，包含但不限于以吹气或吸入给药。局部给药的各类制剂实例包含软膏、乳液、乳霜、凝胶、发泡体，以经皮贴片输送的制剂，吸入或吹气用的粉末、喷雾剂、气溶胶、胶囊或药匣，或滴剂(例如眼睛用或鼻子用滴剂)，供雾化用溶液/悬浮液、栓剂、阴道药栓、驻留灌肠剂及咀嚼剂或可吸入的锭剂或药片或脂质或为胶囊制剂。

软膏、乳霜及凝胶可例如配合水性或油性基质，且添加适用增稠剂及/或胶凝剂及/或溶剂调配。该基质因此可包含例如水及/或油，如液态链烷或植物油，如花生油或蓖麻油，或溶剂如聚乙二醇。可依据基质性质使用的增稠剂及胶凝剂包含软质链烷、硬脂酸铝、鲸酰硬脂基醇、聚乙二醇、毛脂肪、蜜蜡、羧基聚亚甲基及纤维素衍生物，及/或单硬脂酸甘油酯，及/或非离子性乳化剂。

乳液可配合水性或油性基质调配，且通常亦含有一或多种乳化剂、安定剂、分散剂、悬浮剂或增稠剂。

外涂用粉末可配合任何适用的粉末状基质形成，例如滑石、乳糖或淀粉。滴剂可配合水性或非水性基质调配，且亦包括一或多种分散剂、溶解剂、悬浮剂或保存剂。

喷雾组合物可例如调配成水溶液或悬浮液，或调配成自预加压袋输送的气溶胶，如剂量吸入器，且配合使用适用的液化推进剂。适用于吸入用的气溶胶组合物可为悬浮液或溶液，该气溶胶组合物可视情况含有额外的本领域已知的调配佐药，如表面活性剂例如油酸或卵磷脂及共溶剂例如乙醇。

局部用制剂可通过每天对欲作用的区域施用一或多次给药；且在皮肤区域上优选使用覆盖贴片。可通过粘着剂储存系统持续或延长输送。

根据本发明的化妆品组合物可为水相制剂，其本质上包括水；其亦可包含水及与水互溶溶剂的混合物(在25℃为大于50重量%的水互溶力)，例如含1至5个碳原子的低碳单醇，如乙醇或异丙醇，含2至8个碳原子的二醇，如丙二醇、乙二醇、1,3-丁二醇、或二丙二醇，C₃-C₄酮与C₂-C₄醛，及甘油。该水相制剂优选为水性凝胶或水凝胶制剂的形式。水凝胶制剂包含增稠剂以将液态溶液增稠。增稠剂的实例包括但不限于碳合物、纤维素为主材料、胶、海藻素、瓜尔胶、果胶、鹿角菜苷、明胶、矿物性或经改性矿物性增稠剂、聚乙二醇与多醇、聚丙烯酰胺、及其他的聚合增稠剂。优选为使用对组合物赋予安定性及最适流动特性的增稠剂。

根据本发明的化妆品组合物可为乳液或乳霜制剂的形式。其可含乳化表面活性剂，这些表面活性剂可选自阴离子及非离子表面活性剂。对于表面活性剂的性质及功能(乳化)，可参考文件"Encyclopedia of Chemical Technology,Kirk-Othmer"，第22卷，第333-432页，第3版，1979,Wiley，对于阴离子及非离子表面活性剂，特别是该参考资料的第347-377页。

优选地，用于本发明组合物的表面活性剂选自﹕非离子表面活性剂﹕脂肪酸，脂肪醇，聚乙氧化或聚乙二醇化脂肪醇，如聚乙氧化硬脂醇或鲸蜡基硬脂醇，蔗糖的脂肪酸酯，烷基葡萄糖酯，特别是C₁-C₆烷基葡萄糖的聚氧亚乙基化脂肪酸酯，及其混合物；阴离子表面活性剂﹕经胺、氨水或碱盐中和的C₁₆-C₃₀脂肪酸，及其混合物。优选为使用可得到水包油或水包蜡乳液的表面活性剂。

根据本发明的化妆品组合物可进一步包含有效量的生理上可接受抗氧化剂，其选自丁基化对甲酚、丁基化氢醌一甲醚与生育酚。

本发明的组合物可进一步包含天然或改性氨基酸、天然或改性固醇化合物、天然或改性胶蛋白、丝蛋白或大豆蛋白。

本发明的组合物优选为调配成局部应用于角蛋白材料，如皮肤、毛发、睫毛、或指甲。其可为正常用于此型应用的任何表现形式，特别是水性或油性溶液、水包油或油包水乳液、聚硅氧乳液、微乳液或纳米乳液、水性或油性凝胶或液体、浆状或固态水合产物的形式。

本发明通常可为流体且可具有白色或有色乳霜、软膏、乳汁、洗剂、浆液、浆料、慕斯、或凝胶的外观。其可视需要以气溶胶、贴片或粉末的形式局部地应用于皮肤上。其亦可为固态形式，例如棒形式。其可作为皮肤用保养产品及/或化妆产品使用。或者，其可调配成洗发精或润丝精。

在已知方式中，本发明的组合物亦可含化妆品常用的添加剂及佐剂，如亲水性或亲脂性胶化剂、防腐剂、抗氧化剂、溶剂、香料、填料、颜料、臭味吸收剂、与染料。

根据本发明的食品组合物中，该薏苡子麸皮的萃取物可在食品制造过程中，添加于常用的食品组合物中(亦即可食用的食品或饮品或其前驱物)。几乎所有的食品组合物皆可添加根据本发明的该薏苡子麸皮的萃取物。可添加根据本发明的该薏苡子麸皮的萃取物的食品组合物包含，但不限于糖果、烘焙食品、冰淇淋、乳制品、甜品及风味小点、小吃、肉类替代产品、快餐食品、汤类、面食、面条、罐头食品、冷冻食品、干制食品、冷藏食品、油脂、婴儿食品、软食物、或面包涂酱或其混合物。

本发明亦提供一种前述的薏苡子麸皮的萃取物的用途，其用于制造治疗皮肤及/或皮下组织疾病的药物。

本发明又提供一种于个体中治疗皮肤及/或皮下组织疾病的方法，其包含给予该个体治疗有效量的薏苡子麸皮的萃取物及视需要的医药上可接受的载剂或赋形剂。

本发明所述的“皮肤及/或皮下组织疾病”是指发生于皮肤及/或皮下组织的病变，于本发明的一优选具体实施方案中，其选自发炎、毛囊损伤、皮肤萎缩(skin atrophy)、瘀伤(Bruising)、烧伤(Burn)、口唇炎(Cheilitis)、干性肌肤(Dry skin)、面红(Flushing)、脱发(alopecia)、色素沉着症(Hyperpigmentation)、色素过少症(Hypopigmentation)、浸润(Induration)、纤维化(Fibrosis)、注射部位反应(Inj ection site reaction)、化学药物外漏(extravasation change)、指甲改变(Nail change)、光敏感(Photo sensitivity)、搔痒(Pruritus/Itching)、脱皮脱屑(Rash/Desquamation)、痤疮(Acne/Acneinform)、放射线皮肤炎(Dermatitisassociated with radiation)、多发性红斑(Erythema multiforme)、手/足皮肤反应(Hand-foot skin reaction)、皮肤受损(Skin breakdown)、褥疮(Decubitus ulcer)、纹(Striae)、毛细血管扩张症(Telangiectasia)、溃疡(Ulceration)、荨麻疹(Urticaria)。

于本发明的一更优选具体实施方案中，该皮肤及/或皮下组织疾病为因放射线照射所引起的皮肤及/或皮下组织疾病。该放射线照射优选为肿瘤放射线治疗的放射线照射，该肿瘤优选为乳癌或肺癌。

本发明又提供一种前述的薏苡子麸皮的萃取物的用途，其用于制造降低介白素-1α、介白素-1β、介白素-6、肿瘤坏死因子-α、介白素-8、前列腺素2及/或C反应蛋白的药物。

本发明再提供一种于个体中降低介白素-1α、介白素-1β、介白素-6、肿瘤坏死因子-α、介白素-8、前列腺素2及/或C反应蛋白的方法，其包含给予该个体治疗有效量的薏苡子麸皮的萃取物及视需要的医药上可接受的载剂或赋形剂。

以下的非限制性的实施例有助于本发明所属技术领域中具通常知识者实施本发明。这些实施例不应视为过度地限制本发明。本发明所属技术领域中具有通常知识者可在不背离本发明的精神或范畴的情况下对本文所讨论的实施例进行修改及变化，而仍属于本发明的范围。

实施例

实施例1：动物模式

药品及试剂：薏苡子购自台湾台中县农民，于2009年种植，为台中选育4号(Taichung Shuenyu no.4，TCS4)薏苡(C.lachrymajobi L.)。

薏苡子麸皮的具有1至7碳数的醇萃取物(A)：以研磨机去除薏苡子的壳与种皮，再薏苡麸皮，研磨成粉，25℃下浸泡于3倍量的95%乙醇(w/v)中，于超音波震荡下萃取24小时。混合三次萃取液后，于50℃下减压浓缩而得薏苡子麸皮的乙醇萃取液。

薏苡子麸皮的二氧化碳超临界流体萃取物(B)：以研磨机去除薏苡子的壳与种皮，再薏苡麸皮，研磨成粉，将薏苡子麸皮装入不锈钢萃取内槽，随后将内槽放入超临界萃取设备萃取槽中。萃取条件如下：萃取压力：360bar；萃取温度：55℃；二氧化碳流量：38至40kg/h；共溶剂：2%的95%乙醇；萃取时间：60分钟。收取萃出物，再以减压浓缩机进行浓缩。

萃取物重量比例：薏苡子麸皮萃取物喂食剂量的选定以100mg/Kg，100μL/天的喂食剂量进行，管喂体积为100μL/小鼠。实验所用的薏苡子麸皮萃取物全部以超音波震荡方式悬浮于0.5%CMC(羧甲基纤维素(carboxymethylcellulose))并以管喂方式进行，并于第35天牺牲小鼠。薏苡子麸皮的具有1至7碳数的醇萃取物(A)以0、100、200、300及400mg/kg及薏苡子麸皮的二氧化碳超临界流体萃取物(B)以0、100、200、300、400mg/kg，彼此搭配共25种不同喂食剂量组合，管喂体积为100μL/小鼠/天。

萃取物对动物肿瘤放射线治疗引发皮肤发炎反应副作用的活性与机制探讨：以管喂方式喂食动物薏苡子胶囊(试验组，萃取物A：萃取物B为1:4)，测试不同剂量对减轻放射线治疗引发皮肤发炎反应副作用的效用。动物模式为将小鼠乳癌细胞(4T1，1x10⁶细胞/小鼠)植入BALB/c小鼠腿部，肿瘤直径约4mm时开始管喂不同剂量试验样品，两天后开始给予放射线治疗(每天照射5Gy共五天)并持续每天管喂前述的薏苡子麸皮萃取物直至实验结束。实验过程中每隔5天量测肿瘤大小、体重及采血。并以现行临床放射线治疗皮肤损伤药物Sulfasil为对照组。小鼠牺牲后针对肿瘤放射治疗部位组织进行组织病理切片进行表皮及毛囊组织切片病理学检测、运用TUNEL assay配合病理学判断表皮组织中表皮细胞及纤维母细胞的损伤情况，并利用免疫染色侦测NF-kB、COX-2、IL-1β、TNF-α等发炎反应相关分子的表现，其切片结果示于图4。

体重变化的结果如图5所示，给予肿瘤动物放射线治疗的同时给予试验样品，其体重变化在各组之间均无显著差异；而由图6得知，给予肿瘤动物放射线治疗的同时给予试验样品，其肿瘤体积相较于空白组均显著下降，在给予放射线治疗的各组之间不存在显著差异。

另一方面，200与400mg/kg的薏苡子胶囊(试验组，萃取物A：萃取物B为1:4)均显著降低放射线治疗引发的皮肤发炎反应，且可同时抑制放射线治疗引发的血清IL-1α(图7)、IL-1β(图8)、IL-6(图9)、TNF-α(图10)、IL-8(图11)、PGE2(图12)与CRP(图13)的上升；100mg/kg薏苡子胶囊则仅对当中某些指标具有显著抑制的效果。由以上结果可知，200与400mg/kg薏苡子胶囊具有显著抑制皮毛组织损伤与动物体内发炎因子指标的功效。

减轻放射线治疗引发皮肤及/或皮下疾病：进行步骤如前安全性评估所述，但研究过程中每隔7天评估肿瘤放射线治疗引发的活体表皮反应毒性分级，其中活体表皮反应毒性分级方法以临床治疗为最常使用于毒性评估的CTCAE系统(Common Terminology Criteria for Adverse Events v3.0)，分别以临床生理学肉眼观察及显微镜病理组织切片检查进行，以皮肤反应评分表进行量化评估。并于治疗部位做病理组织切片。其结果示于图14。

量化皮肤反应以CompuSyn(for Drug Combinations andfor GeneralDose-Effect Analysis)软件程序计算出实验材料减轻放射线治疗引发皮肤反应及毛皮组织损伤的加成作用条件组合，其结果示于表2：

表2：

组合系数(combination index，CI)，根据定义CI值<1为加成效应，CI值=1为独立效应，CI值>1为拮抗效应，表2中为实验中筛选所得四个最佳的组合(CI<0.8)，可显著抑制皮毛组织发炎效果，其中萃取物A：萃取物B的范围为3:1至1:4。

由表2及图14的结果可知，本实施例中动物肿瘤放射线模式中，动物所产生的发炎、毛囊损伤、脱发、放射线皮肤炎及/或手/足皮肤反应可获得改善，因此根据本发明的薏苡子麸皮的萃取物可用于治疗皮肤及/或皮下组织疾病，特别是发炎、毛囊损伤、脱发、放射线皮肤炎及/或手/足皮肤反应。

实施例2：减轻乳癌患者放疗副作用的人体试验

每日早晚餐后各服用薏苡子胶囊(试验组，萃取物A：萃取物B为1:4)或橄榄油胶囊(对照组)两粒(500mg/粒)，一天四粒。

本临床试验采用前瞻性、随机分组及双盲方式分为试验组及对照组设计，并分成两阶段进行：第一阶段先测试薏苡胶囊在一般人的反应，每日早晚餐后各服用两粒(500mg/粒)，一天四粒，连续使用四周。试验前接受血液检测：包括一般血液、肝功能(包括GOT、GPT)、肾功能(包括BUN、CRTN)、一般功能(包括胆固醇、HDL、LDL、TG、AC-sugar)等。连续使用四周后，再接受一次相同抽血检验，确定无重大副作用后，开始进行第二阶段试验：测试薏苡胶囊对于乳癌病患接受放射线治疗时，是否能有效减少放射线引起的皮肤反应，进而改善生活品质；并由血液检测，了解乳癌病患接受放射线治疗前后免疫功能的变化，是否薏苡胶囊能有效改善免疫功能，并与临床皮肤反应及生理学变化作统计分析。

第二阶段试验中合乎受试者条件的乳癌患者随机分为两组：一组为试验组，另一组为对照组。试验组于接受放射线治疗期间，每日早晚餐后各服用两粒薏苡胶囊(500mg/粒)，一天四粒，连续使用5至7周；对照组则给予外表包装一样的替代物(安慰剂，其内容物为橄榄油)，服用方式一样。两组治疗前后皆会接受血液检测，生活品质问卷调查、皮肤生理学检查。

病患数目：

第一阶段：10名一般人

第二阶段：试验组及对照组各80名乳癌患者。

两阶段共170名受试者。

评估方法：

第一阶段测试安全性：受试者抽血检测一般血液、肝、肾功能、一般功能，以测试服用薏苡胶囊是否有严重异常反应。第二阶段：乳癌病患在经过解释，同意接受此项试验并签署受试者同意书后，随机分配为试验组或对照组，皆会接受血液检测：包括一般血液、肝功能(包括GOT、GPT)、肾功能(包括BUN、CRTN)、细胞激素(包括IL-1，IL-6，IL-8)、一般功能(包括胆固醇、HDL、LDL、TG、AC-sugar)等，生活品质及疲倦问卷调查，皮肤生理学检查(项目包括：酸碱值、皮肤表面水分及油脂、保湿功能性、颜色、温度、弹性及皮肤血流超音波等)。开始接受放射线治疗后，每周记录病患疗程中皮肤反应及理学检查，包括胸壁治疗范围内皮肤反应及颜色变化。接受放射线治疗结束后，再接受一次与治疗前相同抽血检验及生活品质问卷调查、皮肤生理学检查。

放射线治疗：

每位乳癌病患会接受5至7周的放射线治疗，受试者每日须服用薏苡胶囊或替代物。放射线治疗会经由电脑断层定位，定出治疗范围及体积，并由电脑治疗运算系统，得知剂量分布情形及剂量均匀度，每周病患会回诊记录皮肤反应及其他副作用。

结果：

于服用试验产品前后进行抽血，连续使用四周，有1人觉得腹胀，未有任何不良事件或重大副作用后，开始进行第二阶段试验，受试者筛选数67人，收案数51人，受试者中16名没有意愿参与本计划的原因如：皮肤容易过敏、化学治疗导致下肢水肿不适、工作忙碌时间无法配合、没有意愿、已服用太多药物不克参与，进行签署同意书、抽血、皮肤生理检查、患部照相记录、问卷填写及给予试验产品等。

第二阶段有2人觉得腹胀，1人拉肚子；其中1人因腹胀等副作用中止、1人退出，治疗计划每人约为5-7周，计划预计收案160人。为了提高受试者参与本计划的意愿，以提高样本数，并增加资料搜集的可信度，已将试验组与对照组的比例由1∶1调整为2:1。其数据可分析的个案共有27例，其分析结果如表3至表6所示。

表3为第一阶段一般人接受薏苡胶囊服用前后抽血的平均值比较，试验组及对照组并没有服用前后的差异，可说明薏苡胶囊并不会影响肝肾功能。

表3：

表4为乳癌病患接受治疗的皮肤反应RTOG/EORTC指标分级，初步的分析结果可看出皮肤反应Grade＞1，试验组有3/14(21.4%)，对照组为6/13(46.2%)。

表4

0级：无反应

1级：出现滤泡、淡红斑、脱毛、减少出汗及干性脱皮

2级：出现中度的红斑及片状浸润的脱皮及水肿，大多数患者在皮肤皱折处更为明显

3级：出现浸润脱皮及外伤与磨损及流血

4级：出现坏死、溃疡及自发性流血等症状

5级：死亡

表5为完成薏苡胶囊的乳癌病患临床病理特征，试验组跟对照组分布上并没有差异。

表6为已完成放射线治疗的乳癌病患治疗前后的抽血数值变化，并无显著差异。

本实施例的结果显示，乳癌病患的干性肌肤、浸润、脱皮、脱屑、痤疮、多发性红斑、皮肤受损及/或溃疡可获得改善，因此根据本发明的薏苡子麸皮的萃取物可用于治疗皮肤及/或皮下组织疾病，特别是干性肌肤、浸润、脱皮、脱屑、痤疮、多发性红斑、皮肤受损及/或溃疡。

上述实施例仅为说明本发明的原理及其功效，而非限制本发明。熟知此技术的人士对上述实施例所做的修改及变化仍不违背本发明的精神。本发明的权利范围应如后述的权利要求所列。

Claims (12)

1.一种组合物，其包含薏苡子麸皮(bran)的萃取物，该薏苡子麸皮的萃取物包含薏苡子麸皮的具有1至7碳数的醇萃取物(A)及薏苡子麸皮的二氧化碳超临界流体萃取物(B)，其中该薏苡子麸皮的具有1至7碳数的醇萃取物(A)与该薏苡子麸皮的二氧化碳超临界流体萃取物(B)的重量比为自约3:1至约1:4。

2.根据权利要求1的组合物，其中该薏苡为Coix lcryma-jobiL.。

3.根据权利要求1的组合物，其中该具有1至7碳数的醇为乙醇。

4.根据权利要求1的组合物，其中该具有1至7碳数的醇为浓度自约49%至约99.9%的醇溶液。

5.根据权利要求1的组合物，其中该薏苡子麸皮的二氧化碳超临界流体萃取物(B)是于压力为自约150bar至约500bar及温度自约30℃至约80℃进行萃取。

6.根据权利要求1的组合物，其中该薏苡子麸皮的具有1至7碳数的醇萃取物(A)及薏苡子麸皮的二氧化碳超临界流体萃取物(B)的重量比为自约3:2至约1:2。

7.根据权利要求1的组合物，其为医药组合物、食品组合物或化妆品组合物。

8.一种根据权利要求1至7任何一项的组合物的用途，其用于制造治疗皮肤及/或皮下组织疾病的药物。

9.根据权利要求8的用途，其中该皮肤及/或皮下组织疾病选自发炎、毛囊损伤、皮肤萎缩(skin atrophy)、瘀伤(Bruising)、烧伤(Burn)、口唇炎(Cheilitis)、干性肌肤(Dry skin)、面红(Flushing)、脱发(alopecia)、色素沉着症(Hyperpigmentation)、色素过少症(Hypopigmentation)、浸润(Induration)、纤维化(Fibrosis)、注射部位反应(Injection site reaction)、化学药物外漏(extravasation change)、指甲改变(Nail change)、光敏感(Photosensitivity)、搔痒(Pruritus/Itching)、脱皮脱屑(Rash/Desquamation)、痤疮(Acne/Acneiform)、放射线皮肤炎(Dermatitis associated with radiation)、多发性红斑(Erythemamultiforme)、手/足皮肤反应(Hand-foot skin reaction)、皮肤受损(Skinbreakdown)、褥疮(Decubitus ulcer)、纹(Striae)、毛细血管扩张症(Telangiectasia)、溃疡(Ulceration)、荨麻疹(Urticaria)。

10.根据权利要求9的用途，其中该皮肤及/或皮下组织疾病为因放射线照射所引起的皮肤及/或皮下组织疾病。

11.根据权利要求10的用途，其中该放射线照射为肿瘤放射线治疗的放射线照射。

12.一种根据权利要求1至7任何一项的组合物的用途，其用于制造降低介白素(IL)-1α、介白素-1β、介白素-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α、介白素-8、前列腺素2(PGE2)及/或C反应蛋白(CRP)的药物。

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