CN115487112A - 用于皮肤抗炎舒缓的组合物 - Google Patents
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Abstract
本申请公开一种用于皮肤抗炎舒缓的组合物。用于皮肤抗炎舒缓的组合物包含如下重量份数的组分:抗炎舒缓活性物质,包含:甘草亭酸或其脂溶性衍生物、红没药醇、柑橘果皮提取物、白薇提取物,50份;促渗物质,包含氢化卵磷脂,10‑1670份;天然来源的皮肤免疫促进剂,包含羧甲基B‑葡聚糖盐,0.1‑1670份。甘草亭酸或其脂溶性衍生物、红没药醇、柑橘果皮提取物、白薇提取物可以协同增效,具有更好的抗炎舒缓效果,促进抑制炎性相关的细胞因子的产生,而达到舒敏的功效。促渗物质氢化卵磷脂能促进皮肤吸收,天然来源的皮肤免疫促进剂羧甲基B‑葡聚糖盐可以提高皮肤的免疫活性,与抗炎舒缓活性物质共同作用,降低了皮肤发炎和过敏的概率,有效保障了皮肤的健康。
Description
技术领域
本申请属于日用化妆品技术领域,具体涉及一种用于皮肤抗炎舒缓的组合物。
背景技术
皮肤容易受到光、热、空气污染、气候、细菌感染等外部因素或者是人体内分泌失调等内在因素,从而引起的炎症和过敏症状,给人们的生活带来很大的困扰。此外,炎症或过敏会导致毛孔粗大、红肿、刺痛,瘙痒,长粉刺、长痘痘等不良影响。
因此,针对炎症或过敏皮肤的人群研发具有抗炎、抗敏及舒缓功效的化妆品越来越受到行业和消费者的关注和青睐。
发明内容
鉴于此,本申请提供一种用于皮肤抗炎舒缓的组合物,旨在解决皮肤发炎和过敏的问题。
一方面,本申请实施例提供了一种用于皮肤抗炎舒缓的组合物,包含如下重量份数的组分:
抗炎舒缓活性物质,包含:甘草亭酸或其脂溶性衍生物、红没药醇、柑橘果皮提取物、白薇提取物,50份;
促渗物质,包含氢化卵磷脂,10-1670份;
天然来源的皮肤免疫促进剂,包含羧甲基B-葡聚糖盐,0.1-1670份。
根据本申请的一个方面的实施例,甘草亭酸或其脂溶性衍生物、红没药醇、柑橘果皮提取物、白薇提取物的质量比为1:(0.25-100):(0.25-100):(0.05-100)。
根据本申请的一个方面的实施例,甘草亭酸或其脂溶性衍生物、红没药醇、柑橘果皮提取物、白薇提取物、羧甲基B-葡聚糖盐的质量比为1:(0.25-100):(0.25-100):(0.05-100):(0.05-100)。
根据本申请的一个方面的实施例,用于皮肤抗炎舒缓的组合物还包括溶剂,溶剂选自有机醇、水、植物油脂或其组合。
根据本申请的一个方面的实施例,植物油脂选自霍霍巴油,向日葵籽油,蓖麻油,椰子油,葡萄籽油,乳木果油,白池花籽油,澳洲坚果油,橄榄油,棕榈油,角鲨烷,可可脂,霍霍巴脂,糖脂,辛基十二醇,辛酸癸酸甘油三酯,椰油醇-辛酸癸酸甘油三酯,油酸/亚油酸/亚麻酸聚甘油酯类和二辛基十二醇二聚亚油酸酯或其组合。
根据本申请的一个方面的实施例,有机醇选自甲基丙二醇、1,3-丙二醇、1,3-丁二醇、1,2-戊二醇,1,2-己二醇,辛甘醇、乙基己基甘油或其组合。
根据本申请的一个方面的实施例,用于皮肤抗炎舒缓的组合物还包含有机包裹剂、保湿剂、增稠剂、乳化剂、中和剂和防腐剂中的至少一种。
根据本申请的一个方面的实施例,保湿剂选自甘油、丁二醇、1,3-丙二醇、1,2-戊二醇、辛甘醇和透明质酸钠或其组合。
根据本申请的一个方面的实施例,增稠剂选自卡波姆、丙烯酸类与C10-C30烷醇丙烯酸酯交联的聚合物、黄原胶或其组合。
根据本申请的一个方面的实施例,植物乳化剂选自聚甘油-3二异硬脂酸酯,聚甘油2-二聚羟基硬脂酸酯,聚甘油-2异硬脂酸酯,聚甘油4-异硬脂酸酯,聚甘油3-聚蓖麻醇酸酯,聚甘油6-聚蓖麻醇酸酯,硬脂酸甘油酯,山梨坦异硬脂酸酯,山梨坦油酸酯和蔗糖椰油酸酯或其组合。
根据本申请的一个方面的实施例,中和剂选自氢氧化钠、氢氧化钾或其组合。
根据本申请的一个方面的实施例,苯氧乙醇、对羟基苯乙酮、1,2-戊二醇、1,2-己二醇、对茴香酸、辛甘醇、乙基己基甘油、苯甲酸、苯甲酸钠、辛酰羟肟酸或其组合。
第二方面,本申请提供了一种化妆品或药物组合物,包含第一方面的组合物和化妆品或药学可接受的赋形剂。与现有技术相比,本申请至少具有以下有益效果:
本申请提供的用于皮肤抗炎舒缓的组合物,甘草亭酸或其脂溶性衍生物、红没药醇、柑橘果皮提取物、白薇提取物可以协同增效,提升皮肤屏障、抑制炎症通路并抑制TRPV1基因的表达水平,相比现有的任意的甘草提取物、柑橘果皮提取物和白薇提取物与其他提取物搭配的组合相比,具有更好的抗炎舒缓效果,还可以促进抑制炎性相关的细胞因子的产生,而达到舒敏的功效。在体外皮肤模型中相对于使用现有技术的组合物具有更好的抗炎、抗敏及舒缓作用。此外,促渗物质氢化卵磷脂能促进皮肤吸收,和促使其他组分混合均匀。天然来源的皮肤免疫促进剂羧甲基B-葡聚糖盐可以提高皮肤的免疫活性,与抗炎舒缓活性物质共同作用,降低了皮肤发炎和过敏的概率,有效保障了皮肤的健康。
具体实施方式
为了使本申请的申请目的、技术方案和有益技术效果更加清晰,以下结合实施例对本申请进行进一步详细说明。应当理解的是,本说明书中描述的实施例仅仅是为了解释本申请,并非为了限定本申请。
为了简便,本申请仅明确地公开了一些数值范围。然而,任意下限可以与任何上限组合形成未明确记载的范围;以及任意下限可以与其它下限组合形成未明确记载的范围,同样任意上限可以与任意其它上限组合形成未明确记载的范围。此外,尽管未明确记载,但是范围端点间的每个点或单个数值都包含在该范围内。因而,每个点或单个数值可以作为自身的下限或上限与任意其它点或单个数值组合或与其它下限或上限组合形成未明确记载的范围。
在本申请的描述中,需要说明的是,除非另有说明,“以上”、“以下”为包含本数,“一种或多种”中的“多种”的含义是两种及其两种以上。
本申请的上述申请内容并不意欲描述本申请中的每个公开的实施方式或每种实现方式。如下描述更具体地举例说明示例性实施方式。在整篇申请中的多处,通过一系列实施例提供了指导,这些实施例可以以各种组合形式使用。在各个实例中,列举仅作为代表性组,不应解释为穷举。
发炎或敏感的皮肤越来越常见,因此,抗炎舒缓相关的化妆品越来越被具有发炎或过敏性皮肤的人士所需要。
现有的抗炎舒缓相关的化妆品种类繁多,化学药物因具有见效快而受到较多地使用,但其副作用日益显现。另外一类化妆品则主要是从常用食品、天然植物以及中药材中寻求能够拮抗化妆品刺激源的活性成分,因其作用温和,副作用小而受到大众的喜爱。
但现有的植物类抗敏舒缓相关的化妆品的功效还有待进一步提升。
经发明人研究发现,目前的抗炎组合物常用的有以下几种:
第一种是氧化锌+甘草提取物。但此种搭配的组合物不易稳定。且按照法规要求,当氧化锌作为防晒剂使用时,在配方中添加量不得超过25%。
第二种是尿囊素+甘草提取物。但由于传统工艺从天然动植物中提取天然尿囊素的含量很低、工艺复杂、成本太高,无法大规模运用,且采用化学合成法提取合成尿囊素,不能满足市场对于天然来源成分的需求。
第三种是红没药醇+姜根提取物。但该组合物是油溶性物质,需要辅助增溶剂才能在配方中稳定,且当来源于植物,价格昂贵。
经发明人研究发现,目前适于化妆品的抗炎机制主要包括以下几个方面:
1.靶向位于细胞表面的模式识别受体蛋白,如TLR;
2.抑制炎性相关的细胞因子的产生,主要选择的有IL 1α、IL 1β、TNFα、IL 6、IL8;
3.抑制炎症相关的通路蛋白的表达或炎性介质合成的相关酶,主要有NFκB和MAPKs,其中,MAPKs包括ERK1/2、p38和c Jun三个通路蛋白,主要检测的蛋白有NFκB、ERK1/2、p38。炎性介质合成的相关酶,如COX2和5LOX。
进一步研究发现,针对发炎、抗敏和舒缓功效,可以通过以下几种方式实现:
1.提升皮肤屏障,如促进三大脂质的合成以及调节三大脂质的平衡;
2.神经镇静作用,一方面通过抑制前列腺素E2(PGE2)、组胺等炎性介质的释放而达到镇静神经的作用,另一方面使用热感应受体如TRPV1的拮抗剂来达到镇静神经的作用;
3.抗炎作用,由于炎症是皮肤刺激、过敏以及敏感的主要症状,所以目前舒敏的主要手段是抗炎,通过抑制炎症因子如IL 1α、TNFα、IL 8、IL 6;炎性介质如地前列腺素E2(PGE2)以及组胺的产生而达到舒敏的功效。
发明人意外发现甘草亭酸或其脂溶性衍生物(如硬脂醇甘草亭酸酯)、红没药醇、柑橘果皮提取物能够与白薇提取物协同增效,从而提升皮肤屏障、抑制炎症通路并通过抑制PGE2、组胺等炎性介质的释放而达到镇静神经的作用,还可以促进抑制炎性相关的细胞因子的产生,而达到舒敏的功效。因此,发明人研发出一种包含甘草亭酸或其脂溶性衍生物(如硬脂醇甘草亭酸酯)、红没药醇、柑橘果皮提取物与白薇提取物的组合物,并通过氢化卵磷脂促进其与皮肤作用,并证实本申请的组合物具有更好的抗炎、抗敏及舒缓作用。
用于皮肤抗炎舒缓的组合物
本申请实施例一方面提供了一种用于皮肤抗炎舒缓的组合物,包含如下重量份数的组分:
抗炎舒缓活性物质,包含:甘草亭酸或其脂溶性衍生物、红没药醇、柑橘果皮提取物、白薇提取物,50份;
促渗物质,包含氢化卵磷脂,10-1670份;
天然来源的皮肤免疫促进剂,包含羧甲基B-葡聚糖盐,0.1-1670份。
根据本申请的实施例,甘草亭酸或其脂溶性衍生物、红没药醇、柑橘果皮提取物、白薇提取物可以协同增效,提升皮肤屏障、抑制炎症通路并抑制TRPV1基因的表达水平,相比现有的任意的甘草提取物、柑橘果皮提取物和白薇提取物与其他提取物搭配的组合相比,还可以促进抑制炎性相关的细胞因子的产生,而达到舒敏的功效。在体外皮肤模型中相对于使用现有技术的组合物具有更好的抗炎、抗敏及舒缓作用。此外,促渗物质氢化卵磷脂能促进皮肤吸收本申请的有益物质,天然来源的皮肤免疫促进剂羧甲基B-葡聚糖盐可以提高皮肤的免疫活性,与抗炎舒缓活性物质共同作用,降低了皮肤发炎和过敏的概率,有效保障了皮肤的健康。
上述用于皮肤抗炎舒缓的组合物同时兼顾了使肌肤祛红、止痒、抗炎、抑制刺痛的功效,改善了肌肤状况,是一种温和的护肤组合物。
在一些实施例中,用于皮肤抗炎舒缓的组合物为液态,氢化卵磷脂可以作为表面活性剂或乳化剂,促进其他组分的溶于溶剂中。
在一些实施例中,用于皮肤抗炎舒缓的组合物为固态,氢化卵磷脂可以沉积或附着于其他组分颗粒的至少部分表面,使用时促进其他组分与皮肤的渗透。
在一些实施例中,甘草亭酸或其脂溶性衍生物选自甘草亭酸、硬脂醇甘草亭酸酯。甘草亭酸或其脂溶性衍生物可具有抗炎抗过敏、抑制细菌繁殖等作用,应用于化妆品中可调节皮肤的免疫功能,增强皮肤的抗病能力,消除炎症、预防过敏、清洁皮肤。
在一些实施例中,甘草亭酸或其脂溶性衍生物、红没药醇、柑橘果皮提取物、白薇提取物的质量比为1:(0.25-100):(0.25-100):(0.05-100)。甘草亭酸或其脂溶性衍生物、红没药醇、柑橘果皮提取物、白薇提取物在上述质量比中,具有更优异的抗敏舒缓作用;一方面,上述质量比的组合物中的活性物质可以抑制炎症通路并通过抑制PGE2、组胺等炎性介质的释放而达到镇静神经的作用;另一方面,上述质量比的组合物中的活性物质可以促进抑制炎性相关的细胞因子的产生,而达到舒敏的功效。
在一些实施例中,甘草亭酸或其脂溶性衍生物、红没药醇、柑橘果皮提取物、白薇提取物、羧甲基B-葡聚糖盐的质量比为1:(0.25-100):(0.25-100):(0.05-100):(0.05-100)。上述质量比的组合物一方面可以通过提高皮肤免疫力提升皮肤活性,达到更好抗炎、抗敏作用。
在一些实施例中,促渗物质还可以包含脱乙酰壳多糖(俗称壳聚糖)、羟乙基脱乙酰壳多糖,氢化卵磷脂,卵磷脂脂质体或其组合。
上述促渗物质提高了抗炎舒缓活性物质渗入肌肤,避免了抗炎舒缓活性物质的原料采用多元醇提取或水提取,活性物浓度低,且由于其水溶性成分,亲脂性差,不容易渗透进入皮肤起作用,促进了抗炎舒缓活性物质到达需要起作用部位,提高了肌肤的活力,达到更好抗炎、抗敏作用。
在一些实施例中,天然来源的皮肤免疫促进剂还可以包括透明质酸钠、红没药醇、黄瓜果提取物、香檬提取物、矢车菊花提取物或其组合。上述皮肤免疫促进剂健康安全,可以提高皮肤免疫力。此外,羧甲基B-葡聚糖盐可以为羧甲基B-葡聚糖钠、羧甲基B-葡聚糖钾等。
在一些实施例中,用于皮肤抗炎舒缓的组合物还包括溶剂,溶剂选自有机醇、水、植物油脂或其组合。上述皮肤抗敏舒缓的组合物可以用于水溶性的介质中,也可以用于油溶性介质中,兼容性高,具有更普遍的使用场景。
在一些实施例中,植物油脂选自霍霍巴油,向日葵籽油,蓖麻油,椰子油,葡萄籽油,乳木果油,白池花籽油,澳洲坚果油,橄榄油,棕榈油,角鲨烷,可可脂,霍霍巴脂,糖脂,辛基十二醇,辛酸癸酸甘油三酯,椰油醇-辛酸癸酸甘油三酯,油酸/亚油酸/亚麻酸聚甘油酯类和二辛基十二醇二聚亚油酸酯或其组合。
根据本申请实施例,上述植物油脂可保证用于皮肤抗炎舒缓的组合物的安全性、滋润性、流动性以及均质性,并确保其保湿效果。其中,葡萄籽油、椰子油和向日葵籽油还具有抗氧化的效果,可提高对干裂肌肤的修复的效果,减轻紫外线的伤害。
在一些实施例中,有机醇选自甲基丙二醇、1,3-丙二醇、1,3-丁二醇、1,2-戊二醇,1,2-己二醇,辛甘醇、乙基己基甘油或其组合。用于皮肤抗炎舒缓的组合物溶于上述有机醇中,可以具有良好的互溶性,同时提高组合物的保湿效果。
在一些实施例中,用于皮肤抗炎舒缓的组合物还包含:可选的有机包裹剂、保湿剂、增稠剂、乳化剂、中和剂和防腐剂中的至少一种。添加上述任意一种或几种添加剂,可以使用于皮肤抗炎舒缓的组合物具有相应的功能,提高组合物的使用功效。
在一些实施例中,促渗物质可以以包裹不溶活性物质的方式存在,还可以具有其他有机包裹剂,如壳聚糖、卵磷脂脂质体、环糊精、麦芽糊精、阿拉伯胶树等或其组合。
在一些实施例中,保湿剂选自甘油、丁二醇、1,3-丙二醇、1,2-戊二醇、辛甘醇和透明质酸钠或其组合。上述保湿剂可以增强用于皮肤抗炎舒缓的组合物的保湿效果,且与各组分充分混合。
在一些实施例中,增稠剂选自卡波姆、丙烯酸类与C10-C30烷醇丙烯酸酯交联的聚合物、黄原胶或其组合。上述增稠剂对用于皮肤抗炎舒缓的组合物的增稠、稳定性和流变性具有重要作用;通过使用不同重量比例的增稠剂,可以使用于皮肤抗炎舒缓的组合物呈液态状态、浆状、或胶状,以适用于不同场景。本申请采用合适比例增稠剂,可使皮肤抗敏舒缓的组合物具有良好的稠度,以及优异的涂抹性和延展性。
在一些实施例中,植物乳化剂选自聚甘油-3二异硬脂酸酯,聚甘油2-二聚羟基硬脂酸酯,聚甘油-2异硬脂酸酯,聚甘油4-异硬脂酸酯,聚甘油3-聚蓖麻醇酸酯,聚甘油6-聚蓖麻醇酸酯,硬脂酸甘油酯,山梨坦异硬脂酸酯,山梨坦油酸酯和蔗糖椰油酸酯或其组合。上述植物乳化剂均为植物来源,绿色安全,对皮肤无刺激,适合敏感肌用户群体,具有较好的抗敏舒缓作用。其中,聚甘油硬脂酸酯可以在乳化体系中会形成层状液晶型胶体网络结构,提高乳化体系的稳定性。其中,聚甘油-3二异硬脂酸酯和聚甘油2-二聚羟基硬脂酸酯的乳化能力较强,能以较少的油相包裹住较多的水相,并具有很好的分散性和稳定性,与各种油包水体系的乳化剂配伍性较好。
在一些实施例中,中和剂选自氢氧化钠、氢氧化钾或其组合。通过添加上述中和剂,可以控制用于皮肤抗炎舒缓的组合物的pH,使其pH更适于不同使用者的肌肤。
在一些实施例中,防腐剂选自苯氧乙醇、对羟基苯乙酮、1,2-戊二醇、1,2-己二醇、对茴香酸、辛甘醇、乙基己基甘油、苯甲酸、苯甲酸钠、辛酰羟肟酸或其组合。上述防腐剂可以其他物质很好的相容,通过添加上述防腐剂,可以延长用于皮肤抗炎舒缓的组合物的使用期限,增长货架期。
根据本申请实施例,用于皮肤抗炎舒缓的组合物可以应用于水剂产品、乳化产品、油类产品等清洁、洗护以及护肤产品,或者用于油膏、底妆等相关彩妆产品中。
化妆品或药物组合物
本申请实施例第二方面提供了一种化妆品或药物组合物,包含第一方面的组合物和化妆品或药学可接受的赋形剂。
本申请的化妆品或药物组合物可以根据组合物的各种剂型添加各种所需的化妆品或药学可接受的赋形剂。例如,当本申请组合物制备成液体剂时,所述赋形剂可以选自水、生理盐水等;当本发明组合物制备成凝胶剂时,所述赋形剂可以选自纤维素衍生物、淀粉、明胶、琼脂、多糖等;当本申请组合物制备成霜剂时,所述赋形剂可以选自甘油、凡士林、石蜡等;当本申请组合物制备成泡沫剂时,所述赋形剂可以选自羟丙基甲基纤维素、聚乙二醇十二烷基硫酸钠、脂肪醇聚氧乙烯醚磺酸钠等;当本申请组合物制备成贴剂时,所述赋形剂可以选自纤维素衍生物、淀粉、明胶、琼脂、多糖等。
用于皮肤抗炎舒缓的组合物的制备方法
本申请另一方面还提供了一种用于皮肤抗炎舒缓的组合物的制备方法,包括:
将50份抗炎舒缓活性物质,10-1670份促渗物质,0.1-1670份天然来源的皮肤免疫促进剂在溶剂中混合均匀,
可选地加入其他助剂,可选地加热至40-80℃,制得用于皮肤抗炎舒缓的组合物。
在一些实施例中,以上原料在溶剂中通过高压微射流设备,混合均匀。使用高压微射流设备促进用于皮肤抗炎舒缓的组合物的均一性,且其粒径可以控制100nm以下,促进了肌肤的吸收,提高了有效作用率。
在一些实施例中,溶剂可以为有机醇、水、植物油脂或其组合,优选为甲基丙二醇与水的混合物。在一些实施例中,将在溶剂中的50份抗炎舒缓活性物质,10-1670份促渗物质,0.1-1670份天然来源的皮肤免疫促进剂进行干燥,以得到固态用于皮肤抗炎舒缓的组合物。
实施例
下述实施例更具体地描述了本申请公开的内容,这些实施例仅仅用于阐述性说明,因为在本申请公开内容的范围内进行各种修改和变化对本领域技术人员来说是明显的。除非另有声明,以下实施例中所报道的所有份、百分比、和比值都是基于重量计,而且实施例中使用的所有试剂都可商购获得或是按照常规方法进行合成获得,并且可直接使用而无需进一步处理,以及实施例中使用的仪器均可商购获得。
实施例1
本申请实施例提供了一种用于皮肤抗炎舒缓的组合物,包含如下质量百分数的组分:1%氢化卵磷脂、0.01%硬脂醇甘草亭酸酯、0.01%羧甲基B-葡聚糖钠、0.01%红没药醇、0.01%柑橘果皮提取物、0.01%白薇提取物、20%甲基丙二醇、余量为水。
皮肤抗炎舒缓的组合物的制备方法如下:将以上原料混合后,通过高压微射流设备,做成均一的状态,粒径控制100nm以下。
实施例2
本申请实施例提供了一种用于皮肤抗炎舒缓的组合物,包含如下质量百分数的组分:15%氢化卵磷脂、2%硬脂醇甘草亭酸酯、1%羧甲基B-葡聚糖钠、1%红没药醇、1%柑橘果皮提取物、1%白薇提取物、50%甲基丙二醇、余量为水。
实施例3
本申请实施例提供了一种用于皮肤抗炎舒缓的组合物,包含如下质量百分数的组分:8%氢化卵磷脂、1%硬脂醇甘草亭酸酯、0.51%羧甲基B-葡聚糖钠、0.5%红没药醇、0.5%柑橘果皮提取物、0.5%白薇提取物、35%甲基丙二醇、余量为水。
实施例4
本申请实施例提供了一种用于皮肤抗炎舒缓的组合物,包含如下质量百分数的组分:8%氢化卵磷脂、2%壳聚糖、0.5%环糊精、1%硬脂醇甘草亭酸酯、0.51%羧甲基B-葡聚糖钠、0.5%红没药醇、0.5%柑橘果皮提取物、0.5%白薇提取物、35%甲基丙二醇、余量为水。
对比例1
本申请对比例提供了一种用于皮肤抗炎舒缓的组合物,与实施例3的区别在于:不含有氢化卵磷脂,采用等量的环糊精替代氢化卵磷脂。
对比例2
本申请对比例提供了一种用于皮肤抗炎舒缓的组合物,与实施例3的区别在于:不含有氢化卵磷脂,采用等量的水替代氢化卵磷脂。
对比例3
本申请对比例提供了一种用于皮肤抗炎舒缓的组合物,与实施例3的区别在于:不含有氢化卵磷脂,采用等量的壳聚糖替代氢化卵磷脂。
测试部分
1)相关炎症因子抑制实验
采用SD大鼠炎症因子抑制作用测定方法检测本申请实施例和对比例的用于皮肤抗炎舒缓的组合物对(组胺、IL1a、TNF-a、IL6、IL8、PGE2)这些炎症因子的抑制作用。采用大鼠脊柱旁左、右两组复制大鼠炎症因子感染模型。
组胺:组胺感染组用40%四氯化碳油溶液皮下注射,同时辅以低蛋白、低胆碱、高脂肪、高醇饮食,得到组胺感染后具有慢性炎症的大鼠组
组胺测试方法:用分光光度计检测鼠皮重的组胺含量,因为组胺能与偶氮试剂发生反应显橙色,与标准系列进行比较定量。
IL-1α:IL-1α试剂用盐水稀释10%皮下注射到小鼠,同时辅以低蛋白、低胆碱、高脂肪、高醇饮食,得到IL-1α感染后具有炎症的大鼠组
检测:根据开曼公司的IL-1α试剂检测盒来检测皮下组织中小鼠IL-1α的含量。
TNF-α:TNF-α试剂用盐水稀释10%皮下注射到小鼠,同时辅以低蛋白、低胆碱、高脂肪、高醇饮食,得到TNF-α感染后具有炎症的大鼠组。
检测:上海通蔚TNF-α试剂盒检测
IL6:IL6试剂用盐水稀释10%皮下注射到小鼠,同时辅以低蛋白、低胆碱、高脂肪、高醇饮食,得到IL6感染后具有炎症的大鼠组。
检测:上海通蔚IL6试剂盒检测,或其他市售的检测试剂盒。
IL8:IL8试剂用盐水稀释10%皮下注射到小鼠,同时辅以低蛋白、低胆碱、高脂肪、高醇饮食,得到IL8感染后具有炎症的大鼠组。
检测:上海通蔚IL8试剂盒检测,或其他市售的检测试剂盒。
PEG2:PEG2试剂用盐水稀释10%皮下注射到小鼠,同时辅以低蛋白、低胆碱、高脂肪、高醇饮食,得到PEG2感染后具有炎症的大鼠组。
检测:上海莼试生物技术有限公司的PEG2检测试剂盒,或其他市售的检测试剂盒。使用本申请实施例和对比例的皮肤抗炎舒缓组合物,每天1次、连续3天后,使用上述方法或试剂盒分别测定炎症因子的抑制率并记录结果,如表1所示。
由上表可知,实施例的抗炎舒缓组合物对各种炎症因子都有抑制作用,远远高于对比例组的抑制效果。
2)TRPV1基因表达水平试验
实时定量荧光PCR即通过实时检测PCR每一个循环扩增产物相对应的荧光信号,来实现对起始模板进行定量及定性的分析,本实验采取SYBR荧光染料法,在PCR反应体系中,加入SYBR荧光染料,SYBR荧光染料特异性地掺入DNA双链后,发射荧光信号,而不掺入链中的SYBR染料分子不会发射任何荧光信号,从而保证荧光信号的增加与PCR产物的增加完全同步。荧光定量PCR检测基因半定量分析具体操作步骤如下:
RNA提取操作如下:
1.样品加1ml Trizol后,室温放置5min,充分裂解,可放入-80℃长期保存(如样本为组织,则需要液氮研磨,然后再加Trizol裂解)。
2. 12000g 4℃离心5min,将上清转移至新的1.5ml的离心管中。
3.按1/5氯仿/ml Trizol,加入氯仿,颠倒30s,室温放置5min,禁用振荡器,以免基因组DNA断裂。
4. 4℃,12000g离心15min。
5.尽可能多的吸取上层水相,置于另一离心管中(此处用1.5ml EP管)。注:千万勿吸取中间界面,若需要同时提取DNA和蛋白质,则保留下层液体于4℃。
6.按0.5-1倍异丙醇/ml Trizol,加入异丙醇,颠倒,室温10min。
7. 4℃,12000g离心10min,弃上清,RNA沉于管底。(离心过程中,将ep管盖大头端朝外,离心后RNA将贴到此面的底部,吸取上清时可以吸取另一面,避免RNA被吸走)
8.用于Trizol等量的75%乙醇清洗沉淀。7500g,4℃,离心5min.弃上清保留沉淀。
9.重复步骤8;
10.室温晾干或真空干燥5-10min。
11.可用适量的DEPC处理水溶解RNA样品。
使用反转录试剂将Trizol所提取的RNA反转录成为cDNA操作步骤如下:
1.按下列组分配制RT反应液(反应液配制在冰上进行)。
试剂使用量终浓度5×PrimeScript RT Master Mix(Perfect Real Time)2μl 1XTotal RNA-500ng RNase Free dH2O up to 10μl
2.轻柔混匀后进行反转录反应,条件如下:
37℃15min(反转录反应)
85℃5sec(反转录酶的失活反应)
4℃(保存)。
cDNA使用荧光定量PCR进行半定量检测,操作步骤如下:
荧光定量QPCR检测
上机使用的模板是稀释倍数:5倍
qPCR反应体系:
试剂使用量2ul TB Green Premix Ex Taq II(Tli RNaseH Plus)(2×)5PrimerF 0.4Primer R 0.4ROX Reference Dye(50×)0.2DNA Sample 1ddH2O 3Total Volume 10
qPCR反应条件:
95℃ 30s 1cycle
95℃ 5s 40cycles
60℃ 30s 40cycles
CT检测限:40个循环;
采用1mL细胞组织裂解液,该组织是由实施例1所制备得到的本发明抗炎舒缓组合物A2和对比例1-3抗炎舒缓组合物A4、A5和A6以及作为空白对照的水与人重组表皮模型共同培养获得。培养方法如下:实验分组和处理条件进行分组并标记。样品采用表面给药的方式进行处理,给药体积为25μL/模型。处理好的皮肤模型样品的6孔板置于37℃,5%CO2,相对湿度95%的培养箱中,孵育24h。孵育24h后,从培养箱中取出6孔板,将6孔板中培养基取出保存于-80℃用于下游luminex液相芯片定量实验,同时采用无菌PBS清洗不同实验组皮肤模型。每个模型清洗时间控制在1min左右,从而保证每个模型接触PBS的时间都相同。清洗15次以后,用无菌棉签轻轻吸去模型内外水分,后放置6孔板中,皮肤模型加入细胞裂解液进行核酸提取用于下游荧光定量PCR实验。
在上述荧光定量PCR结果我们发现,相对于对比例的抗炎舒缓组合物A4、A5和A6,本发明抗炎舒缓组合物导致调节神经镇静作用的热敏感受体TRPV1的显著降低。
3)修复检测
选用健康成年兔和刚离乳幼龄兔每组各4只,雌雄分别2只。每只动物分别在背部左右两侧标记两处完整皮肤和两处破损皮肤区域,破损皮肤区域用温水清洗并用碘伏消毒,用无菌针头在去毛区域画一个井号造成皮肤破损,采用2,4-二硝基氯苯(DNCB)均匀擦涂/涂抹方法致敏和激发动物皮炎模型使皮肤破损处周围出现红斑、痒、刺痛。左侧均涂抹去离子水,右侧依次涂抹实施例1-4和对比例1-3中的样品母液,涂抹面积为3*3平方厘米,持续4~6h,连续7d分别涂抹一次,每日于擦拭样品后1h观察记录红斑和水肿,末次给样品后30-60min,24h,48h,72h继续观察。按照皮肤刺激反应标准进行评分,计算平均分值,进行修复强度的评判。
无红斑、痒症、水肿=4分;
轻度红斑、痒症、水肿(勉强可见)=3分;
中度水肿、红斑(明显可见)=2分;
重度水肿(皮肤隆起1mm,轮廓清楚)、红斑=1分;
紫红色红斑到轻度焦痂形成、严重水肿(皮肤隆起1mm以上并有扩大)=0分;
各项评分取平均值:
0-0.49无效果;
0.5-2.99轻度有效;
3-5.99中度有效;
6-8重度有效。
将上述实施例1~4和对比例1~4的用于皮肤抗炎舒缓的组合物进行相关的性能测试,测试结果如下表3所示。
表3实施例1~4的全天然含水型唇釉的性能测试结果
样品 | 修复测试结果 |
实施例1 | 3只8分,1只雌兔6分 |
实施例2 | 3只8分,1只雌兔7分 |
实施例3 | 4只无红斑(8分) |
实施例4 | 4只无红斑(8分) |
对比例1 | 2只雄兔5.6分,2只雌兔4分 |
对比例2 | 1只雌兔6分,3只其它兔2分 |
对比例3 | 3只兔5.6分,1只雌兔2分 |
由上表3可知,去离子水对照组依旧出现红斑、痒、刺痛,实施例1~4的用于皮肤抗炎舒缓的组合物具有良好的祛红、止痒、抗炎、抑制刺痛效果。
以上所述,仅为本申请的具体实施方式,但本申请的保护范围并不局限于此,任何熟悉本技术领域的技术人员在本申请揭露的技术范围内,可轻易想到各种等效的修改或替换,这些修改或替换都应涵盖在本申请的保护范围之内。因此,本申请的保护范围应以权利要求的保护范围为准。
Claims (10)
1.一种用于皮肤抗炎舒缓的组合物,包含如下重量份数的组分:
抗炎舒缓活性物质,包含:甘草亭酸或其脂溶性衍生物、红没药醇、柑橘果皮提取物、白薇提取物,50份;
促渗物质,包含氢化卵磷脂,10-1670份;
天然来源的皮肤免疫促进剂,包含羧甲基B-葡聚糖盐,0.1-1670份。
2.根据权利要求1所述的用于皮肤抗炎舒缓的组合物,其特征在于,所述甘草亭酸或其脂溶性衍生物、所述红没药醇、所述柑橘果皮提取物、所述白薇提取物的质量比为1:(0.25-100):(0.25-100):(0.05-100)。
3.根据权利要求2所述的用于皮肤抗炎舒缓的组合物,其特征在于,所述甘草亭酸或其脂溶性衍生物、所述红没药醇、所述柑橘果皮提取物、所述白薇提取物、所述羧甲基B-葡聚糖盐的质量比为1:(0.25-100):(0.25-100):(0.05-100):(0.05-100)。
4.根据权利要求1-3中任一项所述的用于皮肤抗炎舒缓的组合物,其特征在于,所述用于皮肤抗炎舒缓的组合物还包括溶剂,所述溶剂选自有机醇、水、植物油脂或其组合。
5.根据权利要求4所述的用于皮肤抗炎舒缓的组合物,其特征在于,所述植物油脂选自霍霍巴油,向日葵籽油,蓖麻油,椰子油,葡萄籽油,乳木果油,白池花籽油,澳洲坚果油,橄榄油,棕榈油,角鲨烷,可可脂,霍霍巴脂,糖脂,辛基十二醇,辛酸癸酸甘油三酯,椰油醇-辛酸癸酸甘油三酯,油酸/亚油酸/亚麻酸聚甘油酯类和二辛基十二醇二聚亚油酸酯或其组合。
6.根据权利要求4所述的用于皮肤抗炎舒缓的组合物,其特征在于,所述有机醇选自甲基丙二醇、1,3-丙二醇、1,3-丁二醇、1,2-戊二醇,1,2-己二醇,辛甘醇、乙基己基甘油或其组合。
7.根据权利要求1-3中任一项所述的用于皮肤抗炎舒缓的组合物,其特征在于,所述用于皮肤抗炎舒缓的组合物还包含保湿剂、增稠剂、乳化剂、中和剂和防腐剂中的至少一种。
8.根据权利要求7所述的用于皮肤抗炎舒缓的组合物,其特征在于,
所述保湿剂选自甘油、丁二醇、1,3-丙二醇、1,2-戊二醇、辛甘醇和透明质酸钠或其组合;
所述增稠剂选自卡波姆、丙烯酸类与C10-C30烷醇丙烯酸酯交联的聚合物、黄原胶或其组合;
所述植物乳化剂选自聚甘油-3二异硬脂酸酯,聚甘油2-二聚羟基硬脂酸酯,聚甘油-2异硬脂酸酯,聚甘油4-异硬脂酸酯,聚甘油3-聚蓖麻醇酸酯,聚甘油6-聚蓖麻醇酸酯,硬脂酸甘油酯,山梨坦异硬脂酸酯,山梨坦油酸酯和蔗糖椰油酸酯或其组合。
9.根据权利要求7所述的用于皮肤抗炎舒缓的组合物,其特征在于,所述中和剂选自氢氧化钠、氢氧化钾或其组合;
所述防腐剂选自苯氧乙醇、对羟基苯乙酮、1,2-戊二醇、1,2-己二醇、对茴香酸、辛甘醇、乙基己基甘油、苯甲酸、苯甲酸钠、辛酰羟肟酸或其组合。
10.一种化妆品或药物组合物,包含权利要求1-9任一项所述的组合物和化妆品或药学可接受的赋形剂。
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