CN103585097B - 一种白及多糖载表皮生长因子复合物及其制备方法和应用 - Google Patents

Abstract

本发明属于中药复合物领域，公开了一种白及多糖载表皮生长因子复合物及其制备方法和应用。该表皮生长因子复合脂质体由下述按质量份数计的原料制备而成：表皮生长因子0.5～5份、灵芝10～50份、楮实子10～50份、白及多糖5～20份。本发明工艺简单、安全无毒，对皮肤刺激性小，性质平和，效果稳定。

Description

一种白及多糖载表皮生长因子复合物及其制备方法和应用

技术领域

本发明属于中药复合物领域，具体涉及一种白及多糖载表皮生长因子复合物及其制备方法和应用。

背景技术

表皮生长因子（EGF）是调节细胞增殖和分化的物质，具有延缓皮肤细胞老化、促使人皮肤细胞修复和生长的作用，使皮肤光滑细腻。但对酶、光、PH值等敏感，具有稳定性差、易失活、生物利用度低等特点，这使其实际应用受到很大限制，针对这些问题，经过多年的研究，将表皮生长因子与营养精华结合，形成一种相互的协同作用，并用白及多糖作为载体运用于化妆品中，使营养物和活性物的有效时间极大延长.将各种营养物和活性物渗入到细胞内被充分吸收利用，使化妆品不仅具有护肤、滋养和保护的功效，同时还能参与细胞的新陈代谢，从根本上使皮肤光润富有弹性，保持肌肤自然健康。

发明内容

为了解决现有技术中存在的不足之处，本发明的首要目的在于提供一种白及多糖载表皮生长因子复合物；

本发明的另一目的在于提供上述白及多糖载表皮生长因子复合物的制备方法；

本发明的再一目的在于提供上述白及多糖载表皮生长因子复合物的应用。

本发明的目的通过下述技术方案实现：一种白及多糖载表皮生长因子复合物，该白及多糖载表皮生长因子复合物由下列按质量份计的原料制备而成：

上述白及多糖载表皮生长因子复合物优选由下列按质量份计的原料制备而成：

上述的白及多糖载表皮生长因子复合物的制备方法，包括以下操作步骤：

（1）将10～50质量份灵芝和10～50质量份楮实子洗净干燥、粉碎过40目筛，得到粗粉；

（2）按罐组动态逆流提取工艺提取，以罐数3～5为一批次，将上述粗粉投入每罐中，加入粗粉10～20倍体积量的水，加热至75～100℃，保温提取30～60分钟，收集提取液到储罐；经过多级动态循环逆流提取后，合并提取液；

（3）提取液经离心过滤后，浓缩得浓缩液；

（4）将0.5～5质量份表皮生长因子和步骤（3）所得浓缩液溶于白及多糖水溶液中，混匀，即得白及多糖载表皮生长因子复合物；所述白及多糖水溶液是将50～200质量份的白及多糖溶于水中形成质量百分数10%的溶液。

步骤（3）所述浓缩液的相对密度为1.03～1.05。

上述的白及多糖载表皮生长因子复合物在制备护肤品中的应用。

所述白及多糖载表皮生长因子复合物在护肤品中的质量百分含量为0.1～20%；优选的，所述白及多糖载表皮生长因子复合物在护肤品中的质量百分含量为1～8%。

所述护肤品中含有美白剂、保湿剂、抗氧化剂、表面活性剂、醇类化合物或水。

所述护肤品为溶液、悬浮液、乳状液、霜剂、膏状、凝胶、奶液、护肤液、粉、香皂、油、干粉、粉底液、湿粉或喷剂。

各种原料的药理疗效如下：

表皮生长因子(EGF)对调节细胞生长、增殖和分化起着重要作用。现代研究发现，冻干鼠表皮生长因子能剌激外胚层和内胚层起源的各种细胞如角膜上皮和内皮细胞、表皮、真皮层细胞(如纤维母细胞)、乳腺腺泡及间质细胞等，使其增殖迁移，加快新陈代谢，达到嫩肤的效果。同时能促进各种蛋白质的生物合成，促进细胞外大分子的合成(如透明质酸、弹性纤维蛋白等)，增加皮肤含水量，进而增加皮肤弹性，滋润肌肤。促进细胞营养物质从细胞外主动运至细胞内，增加细胞内的营养，促进真皮层细胞分泌合成胶原纤维、多糖、糖蛋白等功能分子，使皮下真皮组织饱满、肌纤维排列整齐紧密，从而减少和消除皱纹。对表皮细胞的增殖有较强的促进作用，使表皮细胞变得年轻化，使得表皮组织中较少有色素及死亡细胞的残留等累积，使皮肤表现出嫩白无暇，消除色斑及色素沉着等异常皮肤表现，能有效遏制色斑的复发。

灵芝的药理成分非常丰富，其中有效成份可分为十大类，包括灵芝多糖、灵芝多肽、三萜类、16种氨基酸（其中含有七种人体必需氨基酸）、蛋白质、甾类、甘露醇、香豆精苷、生物碱、有机酸（主含延胡索酸），以及多种微量元素等。灵芝对人体具有双向的调节作用，扶正固本，增强免疫功能，提高机体抵抗力的作用巨大。从整体上双向调节人体机能平衡，调动机体内部活力，调节人体新陈代谢机能，提高自身免疫能力，促使全部的器官机能正常化。具有免疫调节、降血糖、降血脂、抗氧化、抗衰老及抗肿瘤作用。

楮实子为桑科植物构树的干燥成熟果实，资源丰富，具有悠久的药用历史，果实含皂甙、生物碱、维生素B及油脂等，具有清肝明目、补肺益肾功效。能改善血液循环，促进皮肤营养和氧供给，对酪氨酸酶同时有抑制和激活作用，促进人体衰老的脂褐质素加快排泄，防止黑色素在皮肤内慢性沉积，其中丰富的氨基酸和多种矿质元素,具有重要药理活性，对人体有直接参与新陈代谢过程的作用，容易被皮肤吸收，对防治皮肤干燥、粗糙及皱纹等有效，有显著的延缓衰老、抗氧化、去皱纹、悦皮肤等作用。

白及是兰科白及属植物的干燥块茎，千百年来一直作为传统中药使用，其主要功能是敛疮止血、补肺、消肿生肌等，白及茎中含有大量的水溶性多糖，其化学成分是葡萄甘露聚糖，是白及多糖的主要功能性成分。白及多糖又称白及胶，长久以来被认为是免疫系统中的非待定刺激物，通常会引起巨噬细胞活化，从而引起纤维原细胞和角化细胞的迁移，同时促进胶原蛋白和弹性蛋白的生成，从而改善皮肤外观，消除皱纹。且白及多糖对人体安全无毒，对皮肤无刺激性，无变态性反应和光毒反应，可生物降解，具有良好的生物相容性。实验研究证明，白及多糖不仅本身具有促进伤口愈合的作用，而且适宜作为载体，前人已有利用白及多糖作为药品、化妆品等的混悬剂、乳化剂和粘合剂的研究，此外，白及多糖还可以应用于日化产品中替代化学增稠剂，并具有减少刺激性、保护皮肤、调节免疫、延缓衰老等功能。

本发明的原理：

本发明所述的白及多糖载表皮生长因子复合物，由于白及多糖是一种胶质，与皮肤接触后，使表皮生长因子复合物的活性成分和皮肤的接触面积增大，可有效防止表皮生长因子复合物活性成分的流失，使其随白及多糖的溶解吸收而缓慢均匀的释放，从而延长了其作用于皮肤表面的时间，使白及多糖和表皮生长因子复合物的功效都得到最大限度地发挥。根据表皮生长因子复合物所具有的良好生理特性和白及多糖的特点，将白及多糖载表皮生长因子复合物作为化妆品的原料用于化妆品中，对细胞进行修复和调整，改善和更新代谢过程，促进皮肤细胞的生长，调节细胞中色素的平衡，合理调整皮肤结构，使皮肤细胞年轻化，从而达到滋润、抗皱、美白、嫩肤、祛痘斑等目的，通过细胞本身新陈代谢从根本上使皮肤光润富有弹性，保持肌肤自然健康。同时因纯天然的植物成分，安全、无毒，对皮肤刺激性小，性质稳定。白及多糖载表皮生长因子复合物作为一种新的包含活性成分的复合物应用于化妆品中，具有良好的推广应用前景。

本发明所用的罐组式动态逆流提取方法，其技术要点是：中药材的药液提取以数罐为一组，组内各罐药材依次循环提取数次；每次循环提取前，先对最后一次提取的罐内药材投入溶媒，其提取液作为其后罐药材的溶媒，其后各罐药材依次循环提取一次；最后一次提取的罐药材在排出药渣后，再投入干药材，作为下一轮罐组依次循环提取的最末罐；每罐药材每次的提取液在提取过程中均经过多次动态循环逆流提取后获得。与传统的提取工艺相比，其工艺提供了一种省工省力、节能降耗、提取周期短、收率高、质量便于控制和掌握的提取方法，具有科学性、先进性，有显著的经济效益和技术效果。

本发明相对于现有技术具有如下的优点及有益效果：本发明工艺简单、安全无毒，对皮肤刺激性小，性质平和，效果稳定。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明作进一步详细的描述，但本发明的实施方式不限于此。

实施例1

（1）将10质量份灵芝和10质量份楮实子洗净干燥、粉碎过40目筛，得到粗粉；

（2）按罐组动态逆流提取工艺提取，以罐数3为一批次，将上述粗粉投入每罐中，加入粗粉10倍体积量的水，加热至75℃，保温提取30分钟，收集提取液到储罐；经过多级动态循环逆流提取后，合并提取液；

（3）提取液经离心过滤后，浓缩至相对密度为1.03-1.05；得浓缩液；

（4）将0.5质量份表皮生长因子和步骤（3）所得浓缩液溶于白及多糖水溶液中，混匀，即得白及多糖载EGF复合物Ⅰ；所述白及多糖水溶液是将50质量份的白及多糖溶于水中形成质量百分数10%的溶液。

实施例2

（1）将20质量份灵芝和20质量份楮实子洗净干燥、粉碎过40目筛，得到粗粉；

（2）按罐组动态逆流提取工艺提取，以罐数3为一批次，将上述粗粉投入每罐中，加入粗粉12倍体积量的水，加热至80℃，保温提取35分钟，收集提取液到储罐；经过多级动态循环逆流提取后，合并提取液；

（3）提取液经离心过滤后，浓缩至相对密度为1.03-1.05；得浓缩液；

（4）将1质量份表皮生长因子和步骤（3）所得浓缩液溶于白及多糖水溶液中，混匀，即得白及多糖载EGF复合物Ⅱ；所述白及多糖水溶液是将80质量份的白及多糖溶于水中形成质量百分数10%的溶液。

实施例3

（1）将25质量份灵芝和25质量份楮实子洗净干燥、粉碎过40目筛，得到粗粉；

（2）按罐组动态逆流提取工艺提取，以罐数4为一批次，将上述粗粉投入每罐中，加入粗粉15倍体积量的水，加热至85℃，保温提取40分钟，收集提取液到储罐；经过多级动态循环逆流提取后，合并提取液；

（3）提取液经离心过滤后，浓缩至相对密度为1.03-1.05；得浓缩液；

（4）将2质量份表皮生长因子和步骤（3）所得浓缩液溶于白及多糖水溶液中，混匀，即得白及多糖载EGF复合物Ⅲ；所述白及多糖水溶液是将100质量份的白及多糖溶于水中形成质量百分数10%的溶液。

实施例4

（1）将30质量份灵芝和30质量份楮实子洗净干燥、粉碎过40目筛，得到粗粉；

（2）按罐组动态逆流提取工艺提取，以罐数4为一批次，将上述粗粉投入每罐中，加入粗粉15倍体积量的水，加热至90℃，保温提取45分钟，收集提取液到储罐；经过多级动态循环逆流提取后，合并提取液；

（3）提取液经离心过滤后，浓缩至相对密度为1.03-1.05；得浓缩液；

（4）将3质量份表皮生长因子和步骤（3）所得浓缩液溶于白及多糖水溶液中，混匀，即得白及多糖载EGF复合物Ⅳ；所述白及多糖水溶液是将150质量份的白及多糖溶于水中形成质量百分数10%的溶液。

实施例5

（1）将40质量份灵芝和40质量份楮实子洗净干燥、粉碎过40目筛，得到粗粉；

（2）按罐组动态逆流提取工艺提取，以罐数5为一批次，将上述粗粉投入每罐中，加入粗粉18倍体积量的水，加热至95℃，保温提取50分钟，收集提取液到储罐；经过多级动态循环逆流提取后，合并提取液；

（3）提取液经离心过滤后，浓缩至相对密度为1.03-1.05；得浓缩液；

（4）将4质量份表皮生长因子和步骤（3）所得浓缩液溶于白及多糖水溶液中，混匀，即得白及多糖载EGF复合物Ⅴ；所述白及多糖水溶液是将180质量份的白及多糖溶于水中形成质量百分数10%的溶液。

实施例6

（1）将50质量份灵芝和50质量份楮实子洗净干燥、粉碎过40目筛，得到粗粉；

（2）按罐组动态逆流提取工艺提取，以罐数5为一批次，将上述粗粉投入每罐中，加入粗粉20倍体积量的水，加热至100℃，保温提取60分钟，收集提取液到储罐；经过多级动态循环逆流提取后，合并提取液；

（3）提取液经离心过滤后，浓缩至相对密度为1.03-1.05；得浓缩液；

（4）将5质量份表皮生长因子和步骤（3）所得浓缩液溶于白及多糖水溶液中，混匀，即得白及多糖载EGF复合物Ⅵ；所述白及多糖水溶液是将200质量份的白及多糖溶于水中形成质量百分数10%的溶液。

对比例1

（1）将2质量份表皮生长因子溶于100质量份的质量百分数10%白及多糖水溶液中，混匀，即得白及多糖载EGF复合物A

对比例2

（1）将2质量份表皮生长因子溶于100质量份的质量百分数10%甘油溶液中，混匀，即得EGF复合物B

应用实施示例

（1）白及多糖载EGF复合物润肤霜的制备

本发明取上述白及多糖载mEGF复合物配制成润肤霜，配方如下（按质量百分比计）：

白及多糖载EGF复合物润肤霜的制作工艺如下：

（1）在油相锅里加入油相A中的霍霍巴油、牛油果树果脂、环聚二甲基硅氧烷、聚二甲基硅氧烷、甘油硬脂酸酯、鲸蜡硬脂醇、辛酸/葵酸甘油三酯、PEG-20甲基葡糖倍半硬脂酸酯、甲基葡糖倍半硬脂酸酯和四-（二丁基烃基氢化肉桂酸）季戊四醇酯，边搅拌边加热至85℃；

（2）在水相锅里加入水相B中的去离子水、卡波姆、泛醇、甘油和EDTA二钠，边搅拌边加热至85℃；

（3）对乳化锅进行抽真空后分别抽油相和水相到乳化锅匀质搅拌均；

（4）待温度降至65℃后加入C相三乙醇胺再均质，冷却至45℃后加入D相中的（日用）香精，甲基异噻唑啉酮，在搅拌状态下加入E相白及多糖载mEGF复合物；

（5）待温度降至36℃后停止搅拌，出料，得到白及多糖载mEGF复合物润肤霜。

润肤霜分别由实施例1-6制备的白及多糖载mEGF复合物I、II、III、IV、V、Ⅵ按照上述方法制得含白及多糖载mEGF复合物的润肤霜I、II、III、IV、V、Ⅵ。

对比润肤霜分别由对比例1-2制备的白及多糖载mEGF复合物A、B按照上述方法制得含白及多糖载mEGF复合物的对比润肤霜A、B。

将上述制备得到的白及多糖载mEGF复合物润肤霜进行临床试用观察。

观察对象：年龄20～45岁妇女。选面部有不同程度的黄褐斑、细纹、痤疮、损伤性皮肤等问题皮肤的女性100例。分为五组，每组20例

观察方法：每天晚上睡觉前清洁皮肤后，涂上上述EGF润肤霜。连续使用28天为一个疗程。

疗效标准：（1）显效：斑痘细纹减少、损伤性皮肤修复达90%以上，皮肤有明显的润泽光滑感；（2）有效：斑痘细纹减少、损伤性皮肤修复达50%以上，皮肤较润泽光滑；（3）无效：治疗前后无变化。结果如表1示：

表1白及多糖载mEGF复合物润肤霜临床试用效果

	显效	有效	无效	总有效率
					润肤霜I	15	2	3	85%
润肤霜II	16	2	2	90%
					润肤霜III	16	3	1	95%
润肤霜IV	18	1	1	95%
					润肤霜V	16	2	2	90%
润肤霜Ⅵ	17	1	2	90%
					对比润肤霜A	12	3	5	75%

对比润肤霜B

8

4

8

60%

（2）表皮生长因子（EGF）脂质体润肤乳的制备

本发明取上述表皮生长因子脂质体配制成润肤乳，配方如下（按质量百分比计）：

白及多糖载EGF复合物润肤乳的制作工艺如下：

A相和B相中的原料分别混匀后，加热至85℃，将C相加入B相，搅拌均匀，将A加入BC混合相中，均质后，冷却至45℃加入D相，在搅拌状态下加入E相表皮生长因子脂质体，36℃停止搅拌出料，得到白及多糖载mEGF复合物润肤乳。

润肤乳分别由实施例1-6制备的白及多糖载mEGF复合物I、II、III、IV、V、Ⅵ按照上述方法制得含白及多糖载mEGF复合物的润肤乳I、II、III、IV、V、Ⅵ。

对比润肤乳分别由对比例1-2制备的白及多糖载mEGF复合物A、B按照上述方法制得含白及多糖载mEGF复合物的对比润肤乳A、B。

将上述制备得到的白及多糖载mEGF复合物润肤乳进行临床试用观察。

观察对象：年龄20～45岁妇女。选面部有不同程度的色素沉淀、暗黄、干燥等问题皮肤的女性100例。分为五组，每组20例

观察方法：每天晚上睡觉前清洁皮肤后，涂上上述含表皮生长因子脂质体护肤乳。连续使用28天为一个疗程。

疗效标准：（1）显效：色素沉淀暗黄消退达90%以上，皮肤有明显的美白滋润；（2）有效：色素沉淀暗黄消退50%以上，皮肤较美白滋润；（3）无效：治疗前后无变化。结果如表2示：

表2白及多糖载EGF复合物润肤乳临床试用效果

	显效	有效	无效	总有效率
					润肤乳I	15	2	3	85%

润肤乳II	14	3	3	85%
					润肤乳III	17	1	2	90%
润肤乳IV	16	2	2	90%
					润肤乳V	16	2	2	90%
润肤乳Ⅵ	13	4	2	85%
					对比润肤乳A	7	6	7	65%
对比润肤乳B	6	2	12	40%

上述实验结果表明，本发明白及多糖载EGF复合物作为一种含活性营养成分的复合物添加于化妆品中，白及多糖作为载体与EGF复合物有正协同作用，使EGF复合物的活性成分和营养成分充分发挥，具有光滑滋润、美白保湿、抗衰老、修复损伤性皮肤、祛斑痘等作用，为皮肤提供全方位的护理。一般情况下，白及多糖载mEGF复合物在化妆品中的添加量为3%，对某些特殊皮肤的护理如抗衰老、减少细纹、修复损伤性皮肤等EGF脂质体在化妆品中的添加量为5%。具有广泛的应用价值和市场前景。

上述实施例为本发明较佳的实施方式，但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制，其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化，均应为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围之内。

Claims (7)

1.一种白及多糖载表皮生长因子复合物，其特征在于：所述白及多糖载表皮生长因子复合物由下列按质量份计的原料制备而成：

所述制备包括以下操作步骤：

(1)将10～50质量份灵芝和10～50质量份楮实子洗净干燥、粉碎过40目筛，得到粗粉；

(2)按罐组动态逆流提取工艺提取，以罐数3～5为一批次，将上述粗粉投入每罐中，加入粗粉10～20倍体积量的水，加热至75～100℃，保温提取30～60分钟，收集提取液到储罐；经过多级动态循环逆流提取后，合并提取液；

(3)提取液经离心过滤后，浓缩得浓缩液；

(4)将0.5～5质量份表皮生长因子和步骤(3)所得浓缩液溶于白及多糖水溶液中，混匀，即得白及多糖载表皮生长因子复合物；所述白及多糖水溶液是将50～200质量份的白及多糖溶于水中形成质量百分数10％的溶液；

步骤(3)所述浓缩液的相对密度为1.03～1.05。

2.根据权利要求1所述的白及多糖载表皮生长因子复合物，其特征在于：所述白及多糖载表皮生长因子复合物由下列按质量份计的原料制备而成：

3.根据权利要求1或2所述的白及多糖载表皮生长因子复合物在制备护肤品中的应用。

4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于：所述白及多糖载表皮生长因子复合物在护肤品中的质量百分含量为0.1～20％。

5.根据权利要求3所述的应用，其特征在于：所述白及多糖载表皮生长因子复合物在护肤品中的质量百分含量为1～8％。

6.根据权利要求3所述的应用，其特征在于：所述护肤品中含有美白剂、保湿剂、抗氧化剂、表面活性剂、醇类化合物或水。

7.根据权利要求3所述的应用，其特征在于：所述护肤品为溶液、悬浮液、乳状液、霜剂、膏状、凝胶、奶液、香皂、油、干粉、湿粉或喷剂。