CN103316083B - 楮实子提取物的制备方法及其在皮肤美白中的用途 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种楮实子提取物的制备方法及其在皮肤美白中的用途,制备包括:取楮实子,加入重量5-30倍的有机溶剂(乙醇),在50-100℃下回流提取1-10个小时,提取液经过静置、过滤、浓缩,得到楮实子粗提物浸膏;浸膏用水分散后,用大孔吸附树脂柱进行分离纯化,洗脱液经浓缩、干燥,制得各部位的楮实子提取物。该提取物用于抑制酪氨酸酶活性和黑色素合成,制备皮肤美白的外用组合物,其用量按质量百分比计为0.01-15%。优点是:经各种美白功效测试表明:楮实子提取物具有较强的抑制酪氨酸酶活性和黑色素合成的效果,能够用于体外美白化妆品和外用医药品中,具有较高的安全性和良好的美白效果。
Description
技术领域
本发明涉及中药提取物,尤其是一种楮实子提取物的制备方法,以及该提取物作为活性成分在皮肤美白中的用途。
背景技术
黑色素是一种由黑色素细胞分泌的高分子量的生物色素,存在于皮肤基底层的细胞中间。当皮肤暴露于紫外线中时,会产生大量的黑色素,黑色素能够吸收紫外线,从而起到保护皮肤的作用。黑色素的形成原因很多,紫外线的辐射只是其中的重要原因之一。人体肤色的差异主要取决于皮肤中黑素的含量以及成熟期的黑素小体,抑制黑色素的合成,就能有效地改善皮肤的颜色,起到美白的效果。
酪氨酸酶是黑色素合成过程中的关键酶,是黑色素合成中必不可少的物质,它能够催化L-酪氨酸生成L-多巴,接着催化L-多巴进一步氧化生成多巴醌,多巴醌经过一系列的反应后,最终形成黑色素。抑制酪氨酸酶的活性,能够有效减少黑色素的合成,从而到达美白肌肤的效果。
据《中国药典》(2000版)记载,楮实子,为荨麻目桑科植物构树Broussoneriapapyrifera(L.)Vent.的干燥成熟果实。性寒,味甘,归肝经,肾经。补肾清肝、明目、利尿。用于腰膝酸软、虚劳骨蒸、砂晕目昏、目生翳膜、水肿胀满。据文献报道,楮实子总生物碱具有抗肿瘤的活性,楮实子油及红色素具有清除自由基、抗衰老的活性。临床上,楮实子主要用于治疗老年痴呆,慢性丙型肝炎及肝硬化,慢性肾炎,眼科疾病,不孕不育,斑秃等。而在化妆品中,楮实子主要用于抗衰老方面,其提取物具有美白的活性功效未见报道。
发明内容
本发明所要解决的技术问题在于提供一种楮实子提取物的制备方法。
本发明所要解决的另一技术问题在于提供上述楮实子提取物的用途。
本发明解决上述技术问题所采取的技术方案是提供一种楮实子提取物的制备方法,包括如下步骤:
步骤1:取楮实子,加入重量5~30倍的有机溶剂,在50~100℃下回流提取1~10个小时,提取液经过静置、过滤、浓缩,得到楮实子粗提物浸膏;
步骤2:浸膏用水分散后,用大孔吸附树脂柱进行分离纯化,洗脱液经浓缩、干燥,得各部位的楮实子提取物;
其中,所述的有机溶剂为甲醇、乙醇、丙酮中的一种或者多种的混合溶剂。但不限于这些溶剂。
需要指出的是,无论是步骤1得到的粗提物浸膏,还是步骤2得到的提取物,均包含在本发明的目标产物中,即楮实子提取物。无论是步骤1浓缩得到粗提物浸膏,还是步骤2浓缩得到各部位的提取物,对浓缩均无特殊要求,只是通过适当稀释以便进行测试。
在上述方案的基础上,所述分离纯化为依次用3~5倍树脂柱体积的水洗脱、4~6倍树脂柱体积的体积分数为20%~40%的有机溶剂-水溶液洗脱、3~7倍树脂柱体积的体积分数为50%~75%的有机溶剂-水溶液洗脱、3~7倍树脂柱体积的体积分数为80%~95%的有机溶剂-水溶液洗脱,得各部位的洗脱液。其中,用50%~75%的有机溶剂-水溶液洗脱得到的提取物效果最佳。
在上述方案的基础上,所述的楮实子为荨麻目桑科植物构树的干燥的成熟果实。
在上述方案的基础上,所述楮实子的果实在用有机溶剂浸泡提取之前经过清洗、干燥,除去灰白色膜状宿萼及杂质。
本发明解决上述技术问题所采取的另一技术方案是提供上述楮实子提取物的用途,用于抑制酪氨酸酶活性和黑色素合成,制备皮肤美白的外用组合物。
这里所述的“皮肤”不仅包括覆盖动物的脸或身体表面的组织,而且还包括头皮和毛发。
在上述方案的基础上,所述的楮实子提取物在外用组合物中的用量按质量百分比计为0.01~15%。具体用量可以为0.01、0.02、0.05、0.1、0.2、0.3、0.5、0.8、1、1.2、1.5、1.8、2、2.2、2.5、2.8、3、4、5、6、8、10、12、14或15%。
在上述方案的基础上,所述外用组合物为外用化妆品组合物或药品组合物。
对于外用化妆品组合物而言,可以为适于局部涂抹的任何剂型。例如,所述化妆品组合物可以为固体、溶液、乳液(水包油型乳液、油包水型乳液)、悬浮液、霜、凝胶、浆糊、泡沫或喷雾形式的组合物。这些剂型可以通过本领域所熟知的任何常用方法来制备。
在上述方案的基础上,所述化妆品组合物可以包含其他能够提高所述组合物主要效果且不影响主要效果的成分。具体的,所述的外用化妆品组合物中还包括除楮实子提取物之外的美白剂、抗衰老成分、抗氧化剂、维生素、多肽、多糖、鞘脂中的一种或多种。
此外,化妆品组合物还可以包含保湿剂、润肤剂、表面活性剂、紫外吸收剂、防腐剂、消毒剂、抗氧化剂、pH调节剂、有机和/或无机颜料、调味剂、冷却剂、止汗剂等。在不影响本发明的目的及效果的前提下,本领域的技术人员可容易地选择所述化妆品组合物中的上述组合物的含量。
对于外用药物组合物而言,亦可以为适于局部涂抹的任何剂型。例如,所述药物组合物可以为固体、溶液、乳液(水包油型乳液、油包水型乳液)、悬浮液、霜、凝胶、浆糊或喷雾形式的组合物,但不限于这些剂型。根据本领域所熟知的任何常用方法,可以通过使用表面活性剂、赋形剂、保湿剂、乳化剂、悬浮剂、用于渗透压的盐或缓冲剂、着色剂、调味剂、稳定剂、防腐剂或其他常用的添加剂来制备所述药物组合物的剂型。
本发明的有益效果是:
本发明的楮实子提取物能够有效抑制酪氨酸酶的活性及黑色素的合成,可作为美白活性原料用于皮肤外用化妆品中,达到改善皮肤色素沉淀和美白肌肤的效果。
具体实施方式
通过下述实施例将有助于进一步理解本发明的权利要求书,但并不限制本发明的内容。
实施例1:楮实子提取物的制备方法
取楮实子清洗、干燥,除去灰白色膜状宿萼及杂质,备用。
步骤1:称取一定量的楮实子,用15倍量的乙醇进行提取,60~80℃下提取4~6小时,提取液经过静置、过滤、浓缩,得到楮实子粗提物浸膏(提取物A);
步骤2:浸膏用水分散后,采用大孔吸附树脂柱进行分离纯化:依次用3倍树脂柱体积的水、4倍树脂柱体积的体积分数为20%的乙醇、3倍树脂柱体积的体积分数为50%的乙醇和3倍树脂柱体积的体积分数为80%的乙醇洗脱,分别收集各部位的洗脱液(用水洗脱得到的洗脱液标为提取物B,用20%的乙醇水溶液洗脱得到的洗脱液标为提取物C,用50%的乙醇水溶液洗脱得到的洗脱液标为提取物D,用80%的乙醇水溶液洗脱得到的洗脱液标为提取物E),浓缩,并将浓缩液真空干燥或冷冻干燥,得到各部位的楮实子提取物。
1、步骤1所得楮实子提取物A抑制蘑菇酪氨酸酶活性的评价
配制pH=6.8,0.1M的磷酸盐缓冲溶液。取1.770mLPBS,先后加入30μL不同浓度的提取物A与0.2mL(100U)的蘑菇酪氨酸酶溶液,混匀。30℃水浴10分钟,然后加入1mL加入0.1% L-DOPA溶液,水浴20分钟后,475nm下测定吸光度。评估结果见表一。
由表一可知,步骤(1)所得楮实子粗提物(提取物A)表现出一定的抑制酪氨酸酶的作用,因此可进一步分离,获得活性较高的楮实子提取物。
2、步骤2所得各部位的楮实子提取物B,C,D和E在B16细胞中的毒性评价
用胰蛋白酶消化对数期的单层细胞,将细胞收集至细胞培养液中。离心,弃上清。用培养液重新悬浮细胞,计数。调整细胞悬液的浓度至2.5×103~50×103个/mL。铺96孔板,于含有5%CO2的细胞培养箱中孵育24h。将楮实子提取物B,C,D和E以一定浓度稀释,加入细胞中,继续培养48h。配制5μg/mL的MTT溶液,每孔加入20μL,继续培养4h。弃上清,每孔加入150μL的DMSO溶解紫色结晶,放置15min。轻轻摇晃96孔板,使得紫色溶液混合均匀,用酶标仪于490nm下测定吸光度。所述提取物的细胞毒性结果如表二所示。
由表二可知,步骤2所得各楮实子提取物B,C,D和E在1、10和25μg/mL三个浓度下,对B16细胞没有细胞毒性。
3、步骤2所得各部位的楮实子提取物B,C,D和E抑制B16细胞酪氨酸酶活性的评价
用胰蛋白酶消化对数期的单层细胞,将细胞收集至细胞培养液中。离心,弃上清。用培养液重新悬浮细胞,计数。调整细胞悬液的浓度至2.5×103~50×103个/mL。铺96孔板,于含有5% CO2的细胞培养箱中孵育24h。将步骤2所得各部位楮实子提取物B,C,D和E以一定浓度稀释,加入细胞中,继续培养48h。PBS洗涤1遍。每孔加入0.5%脱氧胆酸钠溶液100μL,震荡10min,0℃。30min后升温至37℃,加入0.1% L-DOPA溶液10μL。孵育20min后,475nm下测定吸光度。所述提取物对酪氨酸酶活性的抑制率结果如表三所示。
由表三可知,步骤2所得各部位的楮实子提取物中,相同浓度下,提取物D对B16细胞酪氨酸酶活性的抑制最强。
4、步骤2所得各部位的楮实子提取物B,C,D和E抑制蘑菇酪氨酸酶活性的评价
根据实施例3的方法,评估步骤2所得楮实子提取物B,C,D和E抑制蘑菇酪氨酸酶活性,结果如表四所示。
由表四可知,步骤2所得楮实子提取物中,相同浓度下,提取物D对蘑菇酪氨酸酶活性的抑制最强,其IC50为68.3μg/mL。
5、步骤2所得各部位的楮实子提取物B,C,D和E抑制B16细胞黑色素合成的评价
将B16细胞接种在12孔细胞培养板内,每孔细胞密度为104个/mL,培养24小时后,更换为含有不同浓度楮实子提取物B,C,D和E的新鲜培养液,继续培养48小时,弃去培养液,PBS清洗1次,胰酶消化后,收集细胞离心,弃上清,将细胞溶于一定体积的1M NaOH中,475nm下测定吸光度,结果如表五所示。
由表五可知,步骤2所得楮实子提取物中,相同浓度下,提取物D对B16细胞黑色素合成的抑制最强。
测试实施例1:美白霜
将实施例1中的楮实子提取物D,按表六中的配比制备美白霜,用于测试。
1、皮肤安全性评估
按受试者入选标准选择30名参加试验的人员,15名男性,15名女性,平均年龄为31岁。将受试物放入斑试器内,用量约为0.020g~0.025g(固体或半固体)或0.020mL~0.025mL液体(液体)。对照孔为空白对照(不置任何物质),将加有受试物的斑试器用无刺激胶带贴敷于受试者的背部或前臂曲侧,用手掌轻压使之均匀地贴敷于皮肤上,持续24h。去除受试物斑试器后30min,待压痕消失后观察皮肤反应,按皮肤不良反应分级标准表划分不良反应等级。如结果为阴性,于斑贴试验后24h和48h分别再观察一次,结果如表七所示。
由表七可知,测试实施例1中的组合物,对皮肤没有产生刺激,因此可得出本发明的化妆品组合物对皮肤是安全的。
2、皮肤美白功效测试
选取30名18-40岁的成年女性,平均年龄33岁。采用双盲安慰剂对照原则,将测试实施例1中美白霜(含有50%乙醇部位的楮实子提取物)和对照组(不含楮实子提取物)分别均匀涂抹在两只胳膊的前臂上,每只胳膊涂抹一种样品,每天早晚各一次。测量黑色素含量的仪器为配有MX18探头的MPA580,在测试者前臂内侧相同位置选取一个半径为2cm的测试区域,分别在使用前和第二、三和四周测定黑色素的含量,测试结果如表八所示。
由表八可知,经过4周之后,涂抹了测试实施例1的美白霜的皮肤,黑色素含量明显降低;从视觉上观察,与对照组相比,皮肤更具有光泽。说明了测试实施例1的美白霜具有显著的美白效果。
应用实施例1:乳液
用下表九列出的成分根据常规方法配制应用实施例1的乳液。
应用实施例2:凝胶
用下表十列出的成分根据常规方法配制应用实施例2的凝胶。
应用实施例3:面膜
用下表十一列出的成分根据常规方法配制应用实施例3的面膜。
应用实施例4:水
用下表十二列出的成分根据常规方法配制应用实施例4的水。
应用实施例5:牛奶洗液
用下表十三列出的成分根据常规方法配制应用实施例5的牛奶洗液。
。
Claims (7)
1. 一种楮实子提取物制备皮肤美白的外用组合物的用途,所述提取物能抑制酪氨酸酶活性和黑色素合成,楮实子提取物的制备方法,包括如下步骤:
步骤1:取楮实子,加入重量5~30倍的有机溶剂,在50~100℃下回流提取1~10个小时,提取液经过静置、过滤、浓缩,得到楮实子粗提物浸膏;
步骤2:浸膏用水分散后,用大孔吸附树脂柱进行分离纯化,洗脱液经浓缩、干燥,得各部位的楮实子提取物;
其中,所述的有机溶剂为甲醇、乙醇、丙酮中的一种或者多种的混合溶剂。
2. 根据权利要求1所述的用途,其特征在于:楮实子提取物的制备方法中,所述分离纯化过程为依次用3~5倍树脂柱体积的水洗脱、4~6倍树脂柱体积的体积分数为20%~40%的有机溶剂-水溶液洗脱、3~7倍树脂柱体积的体积分数为50%~75%的有机溶剂-水溶液洗脱、3~7倍树脂柱体积的体积分数为80%~95%的有机溶剂-水溶液洗脱,得各部位的洗脱液。
3. 根据权利要求1所述的用途,其特征在于:楮实子提取物的制备方法中,所述的楮实子为荨麻目桑科植物构树的干燥的成熟果实。
4. 根据权利要求3所述的用途,其特征在于:楮实子提取物的制备方法中,所述的楮实子在用有机溶剂浸泡提取之前经过清洗、干燥,除去灰白色膜状宿萼及杂质。
5. 根据权利要求1所述的用途,其特征在于:所述的楮实子提取物在外用组合物中的用量按质量百分比计为0.01~15%。
6. 根据权利要求5所述的用途,其特征在于:所述外用组合物为外用化妆品组合物或药品组合物,剂型为溶液、乳液、悬浮液、霜、凝胶、泡沫或喷雾。
7. 根据权利要求6所述的用途,其特征在于:所述的外用化妆品组合物中还包括除楮实子提取物之外的美白剂、抗衰老成分、抗氧化剂、维生素、多肽、多糖、鞘脂中的一种或多种。
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CN105421099B (zh) * | 2015-11-30 | 2018-05-25 | 浙江辰鸿纺织品科技有限公司 | 一种天然染料对涤纶织物的染色方法 |
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CN106511472A (zh) * | 2016-12-07 | 2017-03-22 | 雷斌 | 一种皮肤病治疗用药物及其制备、使用方法 |
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Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
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CN1879600A (zh) * | 2006-05-10 | 2006-12-20 | 杨绪民 | 珍珠母展皱霜 |
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---|---|---|---|---|
CN1879600A (zh) * | 2006-05-10 | 2006-12-20 | 杨绪民 | 珍珠母展皱霜 |
CN101284047A (zh) * | 2007-04-09 | 2008-10-15 | 贵州三农楮桃产业开发有限公司 | 一种人参皂苷提取物及其提取方法 |
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