CN104619332B - 龙眼籽的醇提取物的用途 - Google Patents

Abstract

一种龙眼籽的醇提取物在制备治疗肾组织功能低下的药物中的用途。所述龙眼籽的醇提取物包含乙醇粗提取物，以及依次用乙酸乙酯、正丁醇萃取粗提取物得到的乙酸乙酯部分，正丁醇部分和剩余的水部分。优选地，龙眼籽的醇提取物的乙酸乙酯部分具有治疗肾组织功能低下的效果。

Description

龙眼籽的醇提取物的用途

技术领域

本发明涉及龙眼籽的醇提取物的用途；具体言之，用于治疗肾组织功能低下。

背景技术

肾脏位于人体内的腹腔后壁的脊椎两侧，即最后一根肋骨(第十二根)与脊椎相接的夹角处。肾脏的基本组成单位为肾元，每个肾脏包含约一百万个肾元，每个肾元则包含肾小球及肾小管。

肾元的功用为过滤身体的废物、水分及电解质，成为尿液，例如排除过多的水分；排除尿酸、尿毒、肌酸酐、药物等；及控制钠、钾、钙、磷及酸碱等电解质的稳定及平衡，维持体内环境的稳定。肾脏除制造尿液机能外，另可分泌：(1)红血球生成素，如肾损伤导致分泌不足，则产生贫血；(2)活化维生素D3，其为维持血中钙磷平衡的最重要成份，因此肾衰竭可能导致骨病变；(3)肾素及血管紧张素，其用于调节血压，许多高血压与肾脏病相关。

许多因素皆为造成肾组织功能低下的原因：(1)先天性肾脏病，如多囊性肾病、遗传性肾炎、尿道异常等；(2)肾丝球病变，如原发性肾丝球受损或继发性肾丝球受损，例如糖尿病、高血压、红斑性狼疮等；(3)肾小管间质肾病，如肾结石、肾肿瘤、尿道或输尿管狭窄等；(4)血管性肾脏病，如血管炎、高血压肾动脉硬化症；及(5)感染，如细菌感染而造成肾炎。另外，因老化、长期滥用药物、家族遗传及高盐饮食、肥胖、高血脂、酒精、吸烟等，亦皆为造成肾组织功能低下的原因。其临床症状包含尿液型态改变，如尿频(尤其夜间)、尿液带血、小便起泡(可能有蛋白尿)；包含身体不适，如眼睑浮肿或脸、手脚水肿、血压变高、贫血、皮肤搔痒、全身倦怠、心脏衰竭，肺水肿等。

然而，因导致肾组织功能低下的原因众多，现今并无有效的药物可有效治疗肾组织功能低下，如治疗继发性肾组织功能低下，通常需通过治疗其原发病灶而控制；治疗因感染而导致的肾组织功能低下，则需采用抗生素；治疗肾炎，不仅无法使用一般的抗发炎药物，且可能因使用一般的抗发炎药物使症状更严重，一般使用类固醇或免疫抑制剂，然其副作用极大。因此，当肾组织功能低下病程持续发展，需通过腹膜透析甚至移植肾脏等方式治疗，影响病人的生活及性命甚巨。

龙眼为无患子科(Sapindaceae)龙眼属(Dimocarpus)植物的果实，又名桂圆。龙眼能够入药。其肉甘温，滋补强壮；其核涩平，收敛止血；其叶淡平，解表。有壮阳益气、补血、补益心脾、养血安神、润肤美容等多种功效，可治疗贫血、心悸、失眠、健忘、神经衰弱及病后、产后身体虚弱等症。龙眼籽自古即被使用为外伤用药，据古书「全国中草药汇编」记载，龙眼核可用于治疗胃痛、烧烫伤、刀伤出血、疳气痛、外伤出血、疥癣、湿疮等。古人用于外伤，有好的止血定痛生肌之功效，素有「金刀独圣散」之称。近日与龙眼保健功效相关的研究已逐渐增加，特别是其抗氧化能力、有效成份及美白能力。多数研究均发现，龙眼的花、果实等含有高量的抗氧化物质，如没食子酸(Gallic acid)、鞣料云实素(Corilagin)及鞣花酸(Ellagic acid)等。然而，对于龙眼籽的研究仍相对较少。一般多在取得龙眼果肉后即将龙眼籽抛弃。

龙眼的许多用途虽已经报导，但龙眼籽的提取物的不同应用仍待开发。

发明内容

本发明提供一种龙眼籽的醇提取物的用途，其用于制造治疗肾组织功能低下的药物。

本发明又提供一种治疗肾组织功能低下的医药组合物，其包含治疗有效量的龙眼籽的醇提取物。

本发明再提供一种治疗肾组织功能低下的方法，其在个体中包含给予有效量的龙眼籽的醇提取物及视需要的医药上可接受的载体或赋形剂。

附图说明

图1显示根据本发明的龙眼籽的醇提取物的GS/MS图谱。

图2显示根据本发明的龙眼籽的醇提取物的快速柱色谱分离图谱。

图3显示根据本发明的龙眼籽的醇提取物的高效液相色谱图谱。

图4显示在用5/6肾切除的动物模型进行的药物测试中，实验动物的体重-时间关系图。实验中所使用的配药溶剂包含5％DMSO和10％叶绿素，药物给予为口服。数据表示为平均值(每组n＝3)。

图5显示在用5/6肾切除的动物模型进行的药物测试中，实验动物血清中的血尿素的浓度-时间关系图。数据表示为平均值(每组n＝3)。

图6显示在用5/6肾切除的动物模型进行的药物测试中，实验动物血清中的肌酸酐的浓度-时间关系图。数据表示为平均值(每组n＝3)。

图7显示在用5/6肾切除的动物模型进行的药物测试中，实验动物血清中的尿蛋白浓度/尿液肌酸酐浓度比值-时间关系图。数据表示为平均值(每组n＝3)。

图8显示在用5/6肾切除的动物模型进行的药物测试中，实验动物肾组织以H&E染色切片的组织病理观察结果。

具体实施方式

本发明提供一种龙眼籽的醇提取物的用途，其用于制造治疗肾组织功能低下的药物。包含龙眼籽的醇提取物的医药组合物可在个体中治疗肾组织功能低下，该医药组合物包含有效量的龙眼的醇提取物及视需要的医药上可接受的载体或赋形剂。

参考以下对本发明的各方案、实例及伴随相关描述的化学图式及表格的详细描述，可更容易地理解本发明。在揭示及描述本发明的用途及提取物之前，应理解，除非由权利要求书另外特别地指出，否则本发明不受限于特定制备方法、载体或制剂或将本发明化合物调配成用于局部、经口或非经肠给予的产物或组合物的特定模式，这是因为本领域技术人员非常清楚此等事情是可以加以变化的。亦应理解，本文所用的术语仅用于描述特定方案的目的而不意欲用于限制本发明的范围。

除非另外指出，否则如本发明所用的以下术语应解释为具有以下含义。

范围在本文中通常表述为「约」一个特定值及/或至「约」另一个特定值。当表述此类范围时，一个方案为包括一个特定值及/或至另一个特定值的范围。类似地，当值通过使用字「约」表述为近似值时，应理解特定值可形成另一个方案。另外应理解，每个范围的各端点皆有显著性，一个端点与另一个端点既有相关性，亦彼此独立。

「视情况」或「视情况地」意在表示随后所述的事件或状况可能发生或可能不发生，且该描述包括该事件或状况发生的情况及其未发生的情况。举例而言，「视情况包含药剂」意在表示该药剂可能存在或可能不存在。

必须指出，除非上下文另外清楚规定，否则如本说明书及随附权利要求书中所用的单数形式「一」及「该」包括复数个所指标的物。因此，除非上下文另外需要，否则单数术语应包括复数且复数术语应包括单数。

如本文所用的术语「个体」表示任何动物，优选为哺乳动物，且更优选为人类。个体的实例包括人类、非人类灵长类动物、啮齿动物、豚鼠、兔、绵羊、猪、山羊、牛、马、狗及猫。

术语如本文所提供的化合物的「有效量」意在表示该化合物的量足以提供对所需功能(诸如基因表达、蛋白质功能或诱导特定类型的反应)的所需调节。如下文所指出，实际的需要量将在个体之间有变化，其视个体的病症、身体状况、年龄、性别、物种及体重、组合物的特性及配方等而定。给药方案可经调整以诱导最佳治疗反应。举例而言，可每日给予若干分次剂量，或可依治疗情形的紧急程度按比例减少剂量。因此，很难指定实际的「有效量」。然而，本领域技术人员使用常规实验即可确定适当的有效量。

如本文所用的术语「治疗」表示逆转、减轻或改善此术语所适用的病症或病状或该病症或病状的一种或多种症状，或抑制其进展。

如本文所用的术语「载体」或「赋形剂」是指自身并不为治疗剂，而是用作用于将治疗剂递送至个体的载体及/或稀释剂及/或佐剂或媒介物，或添加至制剂中以改善制剂的处理或储存性质或允许或有助于组合物的剂量单位形成适于经口给予的剂量单位(诸如胶囊或锭剂)的任何物质。适合的载体或赋形剂为医药制剂或食品领域技术人员所熟知。载体或赋形剂可包括(举例而言但不限于)缓冲剂、稀释剂、崩解剂、黏合剂、黏着剂、湿润剂、聚合物、润滑剂、助流剂、为遮蔽或抵消不良味道或气味而添加的物质、调味剂、着色剂、芳香剂及为改善组合物的外观而添加的物质。可接受的载体或赋形剂包括柠檬酸盐缓冲剂、磷酸盐缓冲剂、乙酸盐缓冲剂、碳酸氢盐缓冲剂、硬脂酸、硬脂酸镁、氧化镁、磷酸及硫酸的钠盐及钙盐、碳酸镁、滑石、明胶、阿拉伯胶、海藻酸钠、果胶、糊精、甘露糖醇、山梨糖醇、乳糖、蔗糖、淀粉、明胶、纤维素物质(诸如烷酸的纤维素酯及纤维素烷基酯)、低熔点蜡、可可脂、氨基酸、尿素、醇类、抗坏血酸、磷脂、蛋白质(例如血清白蛋白)、乙二胺四乙酸(EDTA)、二甲亚砜(DMSO)、氯化钠或其它盐、脂质体、甘露糖醇、山梨糖醇、甘油或粉末、聚合物(诸如聚乙烯吡咯烷酮、聚乙烯醇及聚乙二醇)及其它医药学上可接受的物质。载体不应破坏治疗剂的药理学活性，且在以足以递送治疗量的药剂的剂量给予时应无毒性。

优选地，该龙眼籽的醇提取物包含在组合物中。根据本发明的组合物优选为食品组合物或医药组合物。

该龙眼籽的醇提取物可在食品制造过程中，添加到常用的食品组合物中(即可食用的食品或饮品或其前体)。几乎所有的食品组合物皆可添加根据本发明的该龙眼籽的醇提取物。可添加根据本发明的该龙眼籽的醇提取物的食品组合物包含但不限于糖果、烘焙食品、冰淇淋、乳制品、甜品及风味小点、小吃、肉类替代产品、快餐食品、汤类、面食、面条、罐头食品、冷冻食品、干制食品、冷藏食品、油脂、婴儿食品、软食物或面包涂酱或其混合物。

本发明的医药组合物可通过本发明领域中已知的任何方法局部或全身给予，包括但不限于通过肌肉内、皮内、静脉内、皮下、腹膜内、鼻内、经口、黏膜或外部途径给予。适当的给药途径、调配方法及给药时程可由本领域技术人员来决定。在本发明中，医药组合物可根据相应给药途径以多种方式调配，诸如液体溶液、悬浮液、乳液、糖浆、锭剂、丸剂、胶囊、持续释放制剂、散剂、颗粒、安瓿、注射液、输注液、试剂盒、软膏、洗剂、擦剂、乳膏或其组合。在必要时，其可经灭菌或与任何医药学上可接受的载体或赋形剂混合，其中有许多医药学上可接受的载体或赋形剂已为本领域技术人员所知，例如参见[实施方式]第10段。

本文中所言的「龙眼籽的醇提取物」一词是指以醇溶液提取龙眼籽所得的龙眼籽提取物。以溶液提取种子的方式为本发明所属技术领域中的技术人员所熟知。在本发明的一个优选具体实施例中，该龙眼籽被浸于醇溶液中以供提取。

在本发明的一个优选具体实施例中，对该龙眼籽的醇提取物进行气相色谱/质谱仪(Gas Chromatography/Mass Spectrometer，GS/MS)分析。此气相色谱以Trace GCUltra，thermo进行；该质谱仪为ITQ 900，thermo；该柱为VF-5ms 30m×0.25mm(I.D.0.25μm)。温度程序为在150℃保持5分钟；以5℃/分钟的速率加热至190℃，并保持20分钟。如图1所示，该图谱在下列保留时间包含峰：约5.56分钟、约10.36分钟、约14.90分钟、约27.52分钟、约28.16分钟、约35.51分钟、约35.93分钟及约37.56分钟。

本发明所言的龙眼籽并无特殊限定，优选地，本发明所言的龙眼又称桂圆、荔枝奴、亚荔枝、燕卵，为无患子科(Sapindaceae)龙眼属(Dimocarpus)植物的果实。更优选地，龙眼的学名为Dimocarpus longan、Dimocarpus longan Lour.或Dimocarpus longan FenKe。

该龙眼籽为龙眼果实的果核部分，实质上不具有外壳及果肉部分。自龙眼果实取得龙眼籽的方式为本发明所属技术领域中的技术人员所熟知。

在本发明的一个优选具体实施例中，该醇选自由甲醇、乙醇、正丙醇(n-propanol)、异丙醇(isopropanol)、正丁醇、异丁醇(iso-butanol)、仲丁醇(sec-butanol)、叔丁醇(tert-butanol)及乙酸乙酯及其水溶液所组成的群。优选地，该醇为乙醇、乙酸乙酯或正丁醇；最优选地，该醇为乙醇。该醇溶液优选为约20％至约99.9％的醇溶液。

在本发明的一个优选具体实施例中，该龙眼籽的醇提取物为龙眼籽的乙醇提取物。

在本发明的一个优选具体实施例中，该龙眼籽的醇提取物包含龙眼籽的醇提取物的乙酸乙酯(ethyl acetate)级份(fraction)。

在本发明的另一个优选具体实施例中，该龙眼籽的醇提取物包含龙眼籽的醇提取物经乙酸乙酯萃取后的水级份。

在本发明的再一个优选具体实施例中，该龙眼籽的醇提取物包含龙眼籽的醇提取物经乙酸乙酯萃取后的水级份的正丁醇次级份。

在本发明的又一个优选具体实施例中，该龙眼籽的醇提取物包含龙眼籽的醇提取物经乙酸乙酯萃取后的水级份经正丁醇萃取后的水次级份。

在本发明的一个更优选具体实施例中，该龙眼籽的醇提取物包含以快速柱色谱法分离的馏分，其中该快速柱色谱法的柱为40g Silica；流速为18mL/min；洗脱剂A为乙酸乙酯；洗脱剂B为甲醇；洗脱程序为0分钟至约30分钟时A洗脱剂100％，B洗脱剂为0％；约31分钟至约45分钟时A洗脱剂80％，B洗脱剂为20％；约46分钟至约65分钟时A洗脱剂50％，B洗脱剂为50％；约86分钟至约105分钟及约106分钟至约120分钟时A洗脱剂0％，B洗脱剂为100％；优选地，该龙眼籽的醇提取物包含前述以快速柱色谱法分离的馏分中，在洗脱程序为0分钟至约30分钟时A洗脱剂100％，B洗脱剂为0％收集而得。

在本发明的一个具体实施例中，经前述快速柱色谱法分离龙眼籽的醇提取物的乙酸乙酯级份后，结果示于图2，可得DL-P01-SI01：765.3mg；DL-P01-SI02：100.4mg；DL-P01-SI03：37.0mg；DL-P01-SI04：21.7mg；DL-P01-SI05：140.1mg；DL-P01-SI06：57.3mg；DL-P01-SI07：28.4mg；DL-P01-SI08：17.0mg；DL-P01-SI09：6.4mg；DL-P01-SI10：7.7mg。

在本发明的一个优选具体实施例中，该龙眼籽的醇提取物由包含下列步骤的制备方法所制备：

(a)提供龙眼籽；

(b)将该龙眼籽碎成小块；及

(c)以醇提取步骤(b)的小块以提供该提取物。

根据本发明的制备方法，在步骤(b)前该龙眼籽优选经干燥。

在本发明的一个优选具体实施例中，步骤(b)进一步包含将该小块搅碎为粉末。切块及/或搅碎的方式为本发明所属技术领域中的技术人员所熟知。

该龙眼籽及醇溶液的比例(w/v)并无特殊限制，可为约1∶1至约1∶10；优选地，约1∶3至约1∶8；优选地；约1∶5。

在本发明的一个优选具体实施例中，该制备方法的步骤(c)以醇提取步骤(b)的小块以提供该提取物是加热提取。优选地，该步骤(c)在约30℃至约90℃提取。

在本发明的另一个优选具体实施例中，该制备方法的步骤(c)包含：

(c1)以乙醇水溶液提取步骤(b)的小块，以获得粗提取液；

(c2)将步骤(c1)的粗提取液冷冻干燥；及

(c3)以乙酸乙酯萃取步骤(c2)的冷冻干燥产物，以获得乙酸乙酯级份及水级份。

优选地，该粗提取液先经过滤及浓缩后，再进行冷冻干燥。

在本发明的另一个更优选具体实施例中，该制备方法的步骤(c)进一步包含：

(c4)以正丁醇萃取该水级份，以获得正丁醇次级份及水次级份。

在本发明的一个优选具体实施例中，该龙眼籽的醇提取物的乙酸乙酯级份、水级份、正丁醇次级份或水次级份的制备为进一步提取龙眼籽的醇提取物。

在本发明的一个优选具体实施例中，该制备方法进一步包含以快速柱色谱法分离该乙酸乙酯级份，其中该快速柱色谱法的柱为40g Silica；流速为18mL/min；洗脱剂A为乙酸乙酯；洗脱剂B为甲醇；洗脱程序为0分钟至约30分钟时A洗脱剂100％，B洗脱剂为0％；约31分钟至约45分钟时A洗脱剂80％，B洗脱剂为20％；约46分钟至约65分钟时A洗脱剂50％，B洗脱剂为50％；约86分钟至约105分钟及约106分钟至约120分钟时A洗脱剂0％，B洗脱剂为100％。

优选地，该制备方法进一步包含步骤(d)自该提取物获得液体级份，并移除固体。移除固体部分以获得该液体级份的方法为本发明所属技术领域中的技术人员所熟知。

根据本发明的肾组织功能低下是指任何原因所引起的肾组织功能低下，优选地，该肾组织功能低下为肾组织坏死、高血压、免疫伤害、糖尿病、系统性红斑狼疮、老化、长期滥用药物、家族遗传、高盐饮食、肥胖、高血脂、酒精、吸烟或肾切除引起的肾组织功能低下。

检测肾组织功能是否正常可通过下述检验项目而诊断：(1)检验血中血液尿素氮(BUN)及血清肌酸酐(Cr)的数值，肾组织功能低下导致此二者的数值升高；(2)检验尿液中蛋白尿及血尿的指数，可计算肾丝球过滤率得知肾脏功能；(3)X-光检查：经由X-光检查检视肾脏外观，同时侦测有无肾结石和相对位置；及(4)超声波检查：可得知肾脏大小、有否肾结石和肿瘤等问题。

在本发明一个具体实施例中，肾组织功能低下是指经诊断检查，证实肾脏结构(病理组织学或影像学检查)或肾脏功能(血液或尿液检查)有异常发现，或肾丝球过滤率(GFR)小于每分钟60毫升(cc/min/1.73m²)。

在本发明实例中的动物模型中，在5/6肾切除的大鼠中，经给予根据本发明的龙眼籽的醇提取物可降低血清中及/或尿液中尿蛋白、降低血清中尿素氮、降低尿液中蛋白/尿素肌酸酐比例、降低血清中及/或尿液中肌酸激酶、降低血清中及/或尿液中乳酸脱氢酶及/或降低血清中及/或尿液中乳酸过高，并在组织切片中可观察到肾丝球肿胀硬化的情形改善。

在本发明的优选具体实施例中，该肾组织功能低下选自由血清中及/或尿液中尿蛋白过高、血清中尿素氮过高、尿液中蛋白/尿素肌酸酐比例过高、血清中及/或尿液中肌酸激酶过高、血清中及/或尿液中乳酸脱氢酶过高、血清中及/或尿液中乳酸过高及肾丝球肿胀硬化所组成的群。更优选地，该肾组织功能低下为肾炎；优选地，该肾组织功能低下为慢性肾炎。

以下非限制性的实例有助于本发明所属技术领域中的技术人员实施本发明。这些实例不应视为过度地限制本发明。本发明所属技术领域中的技术人员可在不背离本发明的主旨或范围的情况下对本文所讨论的实施例进行修改及变化，而仍在本发明的范围内。

实例

龙眼籽的醇提取物

将龙眼果实去壳及去除果肉后，取得龙眼籽，再将龙眼籽打碎，以温度为30℃至90℃的20％至95％的乙醇溶液浸泡打碎后的龙眼籽，并将温度维持在30℃至90℃1至3小时。取提取所得的溶液，经过滤、浓缩，再进行低温低压的冷冻干燥，取得粗提取物(DL)。

将该粗提取物以如表1所示的高效液相色谱条件分析后，其所得的结果如图3所示。

表1：

进一步以乙酸乙酯萃取粗提物(DL)，获得乙酸乙酯级份(DL-P01)及水级份，再以正丁醇萃取该水级份，获得正丁醇次级份(DL-P02)及水次级份(DL-P03)。龙眼籽粗提取物24.13g经分萃后，得DL-P01：1.44g(5.97％)；DL-P02：2.57g(10.65％)；DL-P03：19.11g(79.20％)。

进一步以快速柱色谱分离乙酸乙酯级份(DL-P01)。取DL-P01约1.1g用乙酸乙酯及甲醇溶解，用超声波洗净机加速溶解，加入适量硅胶(silica gel)，浓缩至干后，倒入放样品的空管中，另一方面将快速柱色谱用的正相柱(normal phase column，40g silica gel)装于仪器上，以乙酸乙酯洗至整支柱完全充满溶剂，并将样品装于仪器上，设定的条件如下：流速为18mL/min；洗脱剂A为乙酸乙酯；洗脱剂B为甲醇；洗脱程序为0分钟至约30分钟时A洗脱剂100％，B洗脱剂为0％；约31分钟至约45分钟时A洗脱剂80％，B洗脱剂为20％；约46分钟至约65分钟时A洗脱剂50％，B洗脱剂为50％；约86分钟至约105分钟及约106分钟至约120分钟时A洗脱剂0％，B洗脱剂为100％。

其结果示于图2，可得DL-P01-SI01：765.3mg；DL-P01-SI02：100.4mg；DL-P01-SI03：37.0mg；DL-P01-SI04：21.7mg；DL-P01-SI05：140.1mg；DL-P01-SI06：57.3mg；DL-P01-SI07：28.4mg；DL-P01-SI08：17.0mg；DL-P01-SI09：6.4mg；DL-P01-SI10：7.7mg。其中DL-P01-SI01为主要产物(69.86％)，其在洗脱程序为0分钟至约30分钟时A洗脱剂100％，B洗脱剂为0％收集而得。

将前述的DL-P01-SI01取6mg，加入0.6mL的甲醇震荡溶解过滤后，进行气相色谱/质谱仪分析。此气相色谱以Trace GC Ultra，thermo进行；该质谱仪为ITQ 900，thermo；该柱为VF-5ms 30m×0.25mm(I.D.0.25μm)。温度程序为在150℃保持5分钟；以5℃/分钟的速率加热至190℃，并保持20分钟。如图1所示，该图谱在下列保留时间包含峰：约5.56分钟、约10.36分钟、约14.90分钟、约27.52分钟、约28.16分钟、约35.51分钟、约35.93分钟及约37.56分钟。

龙眼籽的醇提取物治疗肾组织功能低下

本实例用5/6肾切除的肾炎动物模型(5/6 nephrectomized rat model)进行肾组织功能低下的体内药理活性测试与药效试验评估。

利用Sprague-Dawley大鼠，手术切除其右肾及2/3的左肾，手术一周后检测其尿液中的尿蛋白确认肾炎病征后分组进行给药试验。将肾炎动物随机分组，组别包含：伪手术组(伪手术动物+配药溶剂)、对照组(肾炎动物+配药溶剂)、实验组(肾炎动物+DL-P01-SI01，简称J-TK)，每个组别的大鼠数量不少于三；在给药前和在以药物处理后连续观察八周，每周由尾静脉采集血液样本及以代谢笼收集尿液检品一次，以有助于进行生理指标数据及尿液、血液生化分析的追踪调查，并在第九周处死前收集尿液，处死后收集血液、组织，进行生化分析。

主要生理、生化分析包含：尿蛋白、血尿素氮、肌酸酐、肌酸激酶、乳酸脱氢酶、乳酸浓度检测、血球计数等。

在此动物模型实验中，可观察到实验动物体重皆有正常平缓的上升趋势，如图4所示。

检测血清中血尿素氮、乳酸脱氢酶、乳酸、肌酸酐的生化指标，第二次手术后可发现手术动物血清中血尿素氮及肌酸酐均有明显的上升趋势，经给药治疗开始后则可在给药一周后观测到DL-P01-SI01(J-TK)具有明显减缓血清血尿素氮及肌酸酐上升的趋势，并在给药四周时J-TK对于血液中血尿素氮上升趋势达到27.2％的抑制率，此结果表示动物模型中有明显调节血尿素氮的功效，如图5及6所示。

由乳酸及乳酸脱氢酶的变化情形中可观测到本实验中动物生理状况并未受到非预期性疾病所影响，图未示。

尿液尿蛋白及肌酸酐的分析数据呈现法为单点尿蛋白浓度/尿液肌酸酐浓度的比值，结果显示肾切除手术后动物尿液中尿蛋白浓度/尿液肌酸酐浓度与伪手术组相比有明显的上升趋势，给药第三周时出现减缓尿蛋白浓度/尿液肌酸酐浓度比值上升趋势的效果，如图7所示。

以H&E染色试验动物的肾脏切片后可观测到经5/6肾切除的肾脏肾丝球肿胀硬化情况极为严重；经DL-P01-SI01(J-TK)治疗后有明显改善的情形，如图8所示。

由此5/6肾切除手术产生的动物模型结果可知，龙眼籽的醇提取物确有改善血清中及/或尿液中尿蛋白过高、血清中尿素氮过高、尿液中蛋白/尿素肌酸酐比例过高、血清中及/或尿液中肌酸激酶过高、血清中及/或尿液中乳酸脱氢酶过高、血清中及/或尿液中乳酸过高及肾丝球肿胀硬化的疗效。

上述实施例仅为说明本发明的原理及其功效，而非限制本发明。本领域技术人员对上述实施例所做的修改及变化仍不违背本发明的主旨。本发明的权利范围应如后述的权利要求书所列。

Claims (10)

1.一种龙眼籽的醇提取物的馏分的用途，其用于制造治疗肾组织功能低下的药物，其中该龙眼籽的醇提取物的馏分是以乙醇提取龙眼籽，并进一步以乙酸乙酯萃取获得乙酸乙酯级份，再以快速柱色谱法分离乙酸乙酯级份所得的馏分，其中该快速柱色谱法的柱为40gSilica；流速为18mL/min；洗脱剂A为乙酸乙酯；洗脱剂B为甲醇；洗脱程序包含0分钟至30分钟时A洗脱剂100％，B洗脱剂为0％，31分钟至45分钟时A洗脱剂80％，B洗脱剂为20％；46分钟至65分钟时A洗脱剂50％，B洗脱剂为50％；86分钟至105分钟及106分钟至120分钟时A洗脱剂0％，B洗脱剂为100％；且该龙眼籽的醇提取物的馏分是在洗脱程序为0分钟至30分钟时A洗脱剂100％，B洗脱剂为0％收集而得的产物。

2.如权利要求1的用途，其中该龙眼为Dimocarpus longan Lour.、Dimocarpus longan或Dimocarpus longan Fen Ke。

3.如权利要求1的用途，其中该龙眼籽的醇提取物由包含下列步骤的制备方法所制备：

(a)提供龙眼籽；

(b)将该龙眼籽碎成小块；及

(c)以醇提取步骤(b)的小块以提供该提取物。

4.如权利要求3的用途，其中步骤(c)在温度30℃至90℃提取。

5.如权利要求3的用途，其中该制备方法进一步包含步骤(d)自该提取物获得液体级份。

6.如权利要求3的用途，其中步骤(c)包含：

(c1)以乙醇水溶液提取步骤(b)的小块，以获得粗提取液；

(c2)将步骤(c1)的粗提取液冷冻干燥；及

(c3)以乙酸乙酯萃取步骤(c2)的冷冻干燥产物，以获得乙酸乙酯级份及水级份。

7.如权利要求6的用途，其中步骤(c)进一步包含：

(c4)以正丁醇萃取该水级份，以获得正丁醇次级份及水次级份。

8.如权利要求1的用途，其中该肾组织功能低下为肾组织坏死、高血压、免疫伤害、糖尿病、系统性红斑狼疮、老化、长期滥用药物、家族遗传、高盐饮食、肥胖、高血脂、酒精、吸烟或肾切除引起的肾组织功能低下。

9.如权利要求1的用途，其中该肾组织功能低下选自由血清中及/或尿液中尿蛋白过高、血清中尿素氮过高、尿液中蛋白/尿素肌酸酐比例过高、血清中及/或尿液中肌酸激酶过高、血清中及/或尿液中乳酸脱氢酶过高、血清中及/或尿液中乳酸过高及肾丝球肿胀硬化所组成的群。

10.如权利要求1的用途，其中该肾组织功能低下为肾炎。