CN103860472A - 丙泊酚脂质体及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种丙泊酚脂质体及其制备方法。一种丙泊酚脂质体，以丙泊酚或其前药、脂溶性衍生物、盐为活性成分，以磷脂作为骨架膜材和至少有胆固醇作为膜流动性调节剂，各成分比例为：磷脂、胆固醇与丙泊酚的重量比为1：0.1～0.25：0.05～0.2。丙泊酚脂质体采用被动载药方法制备。与现有丙泊酚乳剂相比，具有更好的稳定性，副作用减少，利于运输及贮存。包封率为63%~95%，载药率为47%~85%，平均粒径可达100nm以下。

Description

丙泊酚脂质体及其制备方法

技术领域

本发明属于医药技术领域，更具体地说涉及一种丙泊酚脂质体及其制备方法。

背景技术

丙泊酚（Propofol），化学名为2,6-二异丙基苯酚，分子式： C₁₂H₁₈O分子量：178.3 化学结构式：

丙泊酚是一种低分子的苯酚衍生物，是可注射的麻醉剂，可诱导和维持全身麻醉，具有起效快、消除迅速、比其他注射麻醉剂副作用少等优点，近年来广泛用于门诊短小手术、胃肠镜查、人工流产等无痛治疗。

然而丙泊酚难溶于水，很难将其直接配制成溶液后供静脉注射。目前，上市产品主要为丙泊酚乳剂，所用辅料包括大豆油、中链甘油三酯、纯化卵磷脂、油酸、氢氧化钠和注射用水。适应症为：全身麻醉诱导和维持；重症监护患者辅助通气治疗的镇静；单独或与局部麻醉药联合使用，用于诊断和手术过程中的镇静。是一种将丙泊酚溶解在植物油中，以磷脂为乳化剂，加入等渗剂和注射用水制备成水包油型乳剂，然而乳剂具有以下不足：

1、普通乳剂为非均相液体制剂，属于热力学和动力学不稳定体系；

2、在加工过程中的高温处理和长期贮存过程中，普通乳剂中药物、豆油和卵磷脂易产生降解和氧化；

3、长期放置过程中，乳滴粒子易于合并和出现粒径增大的现象；

4、脂肪乳剂静脉给药易引起高甘油三酯血症，尤其对长期接受输液的患者；

5、脂肪乳剂更难与其他静脉输注药物共用；

6、脂肪乳剂的任何物理变化（脂滴大小变化）都可导致药物药理学性质变化而引起副作用；

7、脂肪乳中的脂肪类物质在液态环境中试微生物生产良好的基质，因而在贮存和使用过程中存在细菌和真菌感染的风险；

8、脂肪乳剂应避免高低温贮存，不能经受剧烈振摇，给产品生产、运输、贮存和使用带来不便。

为解决上述难题，药剂学者进行了各项研究，比如加入注射用表面活性剂对其增溶，制备丙泊酚水溶液，但会导致过敏反应的副作用；制备成羟丙基β-环糊精的包合物，但存在一定安全性问题；制备成丙泊酚水溶性前药水溶液剂，安全性及稳定性有待提高。

脂质体（liposome）是一种人工膜。在水中磷脂分子亲水头部插入水中，脂质体疏水尾部伸向空气，搅动后形成双层脂分子的球形脂质体，直径25～1000nm不等。脂质体可用于转基因，或制备药物，利用脂质体可以和细胞膜融合的特点，将药物送入细胞内部。脂质体的生物学定义为：当两性分子如磷脂和鞘脂分散于水相时，分子的疏水尾部倾向于聚集在一起，避开水相，而亲水头部暴露在水相，形成具有双分子层结构的封闭囊泡，称为脂质体。脂质体的药剂学定义：系指将药物包封于类脂质双分子层内而形成的微型泡囊体。

发明内容

本发明的目的之一是为解决上述丙泊酚乳剂的不稳性提供了一种丙泊酚脂质体，克服现有技术的不足，提高制剂稳定性和安全性。

本发明的另一个目的是提供上述丙泊酚脂质体的制备方法。

本发明目的通过下述技术方案实现：一种丙泊酚脂质体，以丙泊酚或其前药、脂溶性衍生物、盐等为活性成分，以磷脂作为骨架膜材和至少有胆固醇作为膜流动性调节剂，各成分比例为：磷脂、胆固醇与丙泊酚的重量比为1：0.1～0.25：0.05～0.2。

在上述方案基础上，所述的其他赋形剂包括但不局限于膜流动性调节剂，还包括其他赋形剂，如：稳定剂、乳化剂、冻干赋形剂等中的一种或多种，其中，、稳定剂、乳化剂、冻干赋形剂。

所述的稳定剂选自维生素E、氨基酸类；

所述的乳化剂选自吐温80、阿拉伯胶、烷基苯磺酸钠、甘油脂肪酸酯、脂肪醇硫酸盐、聚乙二醇磷脂衍生物；

所述的冻干保护剂选自甘露醇、无水乳糖、蔗糖、β环糊精、麦芽糖、D(+)-海藻糖、右旋糖酐40、聚维酮K24、山梨醇、木糖醇、水溶性淀粉中的一种或几种。

所述的磷脂选自蛋黄卵磷脂，氢化蛋黄卵磷脂，大豆卵磷脂，氢化大豆卵磷脂，鞘磷脂，磷脂酰乙醇胺，二肉豆蔻酰磷脂酰胆碱，二棕榈酰磷脂酰胆碱，二硬酯酰磷脂酰胆碱，二油酰磷脂酰胆碱，二月桂酰磷脂酰胆碱中的一种或几种。

本发明提供所述丙泊酚脂质体的制备方法，采用被动载药法制备丙泊酚脂质体，包含薄膜分散法、注入法、反相蒸发法、复乳法、熔融法、冷冻干燥法等，在制备中，用有机溶剂配制油相，用缓冲液配制水相，油水相的体积比为1：20～1：40，其中，所述的缓冲液选自磷酸盐、琥珀酸盐、丁二酸盐、柠檬酸盐、甘氨酸盐、乳糖酸钠、甘氨酸、酒石酸盐、丁二酸、柠檬酸、乳糖酸、组氨酸中的一种或几种，浓度为0.01M-0.15M的缓冲系统；所述的有机溶剂，选自氯仿、乙醚、甲醇、二氯甲烷、乙醇或氯仿与乙醇混合物或二氯甲烷与乙醇混合物。

所述的薄膜分散法是将磷脂和胆固醇及丙泊酚溶于有机溶剂中得油相，然后将此溶液置于圆底烧瓶中旋转减压蒸干，磷脂在烧瓶内壁上会形成一层很薄的膜，然后加入缓冲溶液，充分振荡烧瓶使脂质膜水化脱落，制得丙泊酚脂质体。

所述的注入法是将磷脂、胆固醇和丙泊酚溶于有机溶剂中得油相，然后把油相均速注射到缓冲液中得水相，搅拌挥尽有机溶剂，再乳匀或超声，即得丙泊酚脂质体。

所述的反相蒸发法是将磷脂、胆固醇与丙泊酚溶解于有机溶剂中，再与一定比例的缓冲液混合、乳化，减压蒸发除去有机溶剂，即得丙泊酚脂质体。

所述的复乳法是将磷脂溶于有机溶剂，加入丙泊酚溶液，乳化得到水油（W/O）初乳，将W/O初乳加入到十倍体积的水中混合，乳化得到水/油/水（W/O/W）乳液，然后再在一定温度下去除有机溶剂，即得丙泊酚脂质体。

一种制备方法为：将制备好的包封有丙泊酚的脂质体进行冷冻即得。

所述的冷冻干燥法按配方量将磷脂、胆固醇与丙泊酚溶于适量有机溶剂中得油相，再将该油相快速注入含有乳化剂及冻干保护剂的水相中，300-500r/min搅拌匀浆，减压除去有机溶剂，0.22μm微孔滤膜过滤灭菌，将滤液灌装于西林瓶中，送入冻干机进行冷冻干燥，即得丙泊酚脂质体，其中，所述的乳化剂4%~8%；所述的冻干赋形剂2%～5%。

以下通过实验对比说明本发明：

图1.为丙泊酚与卵磷脂的质量比对丙泊酚脂质体包封率和载药率的影响，每对线条中，左侧为包封率，右侧为载药率。如图显示，可知，随丙泊酚与卵磷脂质量比的增加，丙泊酚脂质体的包封率增加而载药率逐渐下降； 

图2.为胆固醇与卵磷脂的质量比对脂质体包封率和载药率的影响，每对线条中，左侧为包封率，右侧为载药率。如图显示，可知，当胆固醇与卵磷脂质量比小于0.3时，脂质体包封率与载药率基本不变，而当质量比超过0.3时，脂质体包封率与载药率均下降。

通过实验对比，根据包封率及载药率优选各成分比例为：磷脂、胆固醇与丙泊酚的重量比为1：0.1～0.25：0.05～0.2，其他赋形剂的质量分数为：乳化剂4%～8%；冻干保护剂2%～5%；油水相体积比为1：20～1：40。

本发明的优越性在于：与现有丙泊酚乳剂相比，具有更好的稳定性，副作用减少，利于运输及贮存。包封率为63%~95%，载药率为47%~85%，平均粒径可达100nm以下。具体为：

1、增加体系稳定性；

2、防止药物产生降解和氧化；

3、脂质体粒子粒径稳定；

4、降低引发高甘油三酯血症的可能性；

5、减少副作用；

6、在贮存和使用过程中降低细菌和真菌感染的风险；

7、便于产品生产、运输、贮存，使用方便。

附图说明

图1为丙泊酚与卵磷脂的质量比对丙泊酚脂质体包封率和载药率的影响；

图2为胆固醇与卵磷脂的质量比对脂质体包封率和载药率的影响；

图3为实施例1~5脂质体包封率、载药率、平均粒径结果比较，每组线条中，左侧包封率、中间载药率、右侧为平均粒径；

图4为实施例5脂质体的粒径分布图。

具体实施方式

本发明的具体制备方法，由下列实施实例举例说明，但本发明的保护范围，不局限于此。

实施例1

处方：

薄膜分散法制备丙泊酚脂质体：称取处方量卵磷脂、胆固醇及丙泊酚，加入乙醇中溶解，将此溶液置于圆底烧瓶中旋转减压蒸干，形成磷脂膜，再加入适量磷酸盐缓冲溶液至圆底烧瓶中，充分振荡烧瓶水化，使脂质膜水化脱落，取出脂质体液体于烧杯中，置于磁力搅拌器上，搅拌30-60分钟，混匀，将脂质体过0.8μm微孔滤膜整粒，即得丙泊酚脂质体。包封率、载药率及平均粒径见图3。

实施例2

处方：

注入法制备丙泊酚脂质体：称取处方量的卵磷脂、胆固醇及丙泊酚，加入乙醇中溶解，然后使用注射器将该油相溶液均速注射到磷酸盐缓冲液中，搅拌除去乙醇，再乳匀，将脂质体过0.8μm微孔滤膜整粒，即得丙泊酚脂质体。包封率、载药率及平均粒径见图3。

实施例3

处方：

反相蒸发法制备丙泊酚脂质体：称取处方量的卵磷脂、胆固醇及丙泊酚，加入乙醇，溶解，再与一定比例的磷酸盐缓冲液混合、乳化20-30分钟，减压蒸发除去乙醇，将脂质体过0.8μm微孔滤膜整粒，即得丙泊酚脂质体。包封率、载药率及平均粒径见图3。

实施例4

处方：

复乳法制备丙泊酚脂质体：称取处方量的卵磷脂，溶于乙醇中，加入丙泊酚溶液，乳化得到W/O初乳，将初乳加入到10倍体积的磷酸盐缓冲液中混合，乳化得到W/O/W乳液，然后减压去除有机溶剂，即得丙泊酚脂质体。包封率、载药率及平均粒径见图3。

实施例5

处方：

冷冻干燥法制备丙泊酚脂质体：称取处方量的卵磷脂、胆固醇及丙泊酚，加入乙醇中，溶解，使用注射器快速将其注入含有甘露醇和吐温80的水相中， 300-500r/min搅拌匀浆10分钟，减压蒸干除去有机溶剂，0.22μm微孔滤膜过滤灭菌，将滤液灌装于西林瓶中，送入冻干机进行冷冻干燥，即得丙泊酚脂质体。包封率、载药率及平均粒径见图3，图4为本实施例5的脂质体粒径分布。

实施例6

处方：

冷冻干燥法制备丙泊酚脂质体：先将氯仿和乙醇按体积比9:1混合为有机溶剂备用，然后称取处方量的二棕榈酰磷脂酰胆碱、胆固醇及丙泊酚，加入该有机溶剂，溶解，使用注射器快速将其注入含有甘露醇山梨醇和吐温80的水相中， 300-500r/min搅拌匀浆10分钟，减压蒸干除去有机溶剂，0.22μm微孔滤膜过滤灭菌，将滤液灌装于西林瓶中，送入冻干机进行冷冻干燥，即得丙泊酚脂质体。

实施例7

冻融法制备丙泊酚脂质体：将制备好的包封有丙泊酚的脂质体进行冷冻即得。

实施例8

将实施例1~4制得的丙泊酚脂质体加入5%甘露醇，经0.22μm微孔滤膜过滤灭菌，将滤液灌装于西林瓶中，进行冷冻干燥，即得到丙泊酚脂质体前体。

实施例9

将实施例1~4制得的丙泊酚脂质体加入3%山梨醇，经0.22μm微孔滤膜过滤灭菌，将滤液灌装于西林瓶中，进行冷冻干燥，即得到丙泊酚脂质体前体。

图3为实施例1～5脂质体包封率、载药率、平均粒径结果比较，每组线条中，左侧包封率、中间载药率、右侧为平均粒径，粒径超过200nm，对载药率的影响较大，实施例5的包封率和载药率均较好。

图4为实施例5脂质体的粒径分布图，由图显示该脂质体粒径多数分布在100~150nm之间，平均粒径120nm。

Claims (10)

1.一种丙泊酚脂质体，其特征在于，以丙泊酚或其前药、脂溶性衍生物、盐为活性成分，以磷脂作为骨架膜材和至少有胆固醇作为膜流动性调节剂，各成分比例为：磷脂、胆固醇与丙泊酚的重量比为1：0.1～0.25：0.05～0.2。

2.根据权利要求1所述的丙泊酚脂质体，其特征在于，还包括其他赋形剂，所述的其他赋形剂为稳定剂、乳化剂、冻干赋形剂中的一种或多种，其中，所述的稳定剂选自维生素E、氨基酸类；所述的乳化剂选自吐温80、阿拉伯胶、烷基苯磺酸钠、甘油脂肪酸酯、脂肪醇硫酸盐、聚乙二醇磷脂衍生物；所述的冻干保护剂选自甘露醇、无水乳糖、蔗糖、β环糊精、麦芽糖、D(+)-海藻糖、右旋糖酐40、聚维酮K24、山梨醇、木糖醇、水溶性淀粉中的一种或几种。

3.根据权利要求1所述的丙泊酚脂质体，其特征在于，所述的磷脂选自蛋黄卵磷脂，氢化蛋黄卵磷脂，大豆卵磷脂，氢化大豆卵磷脂，鞘磷脂，磷脂酰乙醇胺，二肉豆蔻酰磷脂酰胆碱，二棕榈酰磷脂酰胆碱，二硬酯酰磷脂酰胆碱，二油酰磷脂酰胆碱，二月桂酰磷脂酰胆碱中的一种或几种。

4.根据权利要求1至3之任一项所述的丙泊酚脂质体的制备方法，采用被动载药法，包含薄膜分散法、注入法、反相蒸发法、复乳法、冻融法、冷冻干燥法，在制备中，以有机溶剂配制油相，以缓冲液配制水相，油水相的体积比为1：20～1：40，其中，所述的缓冲液选自磷酸盐、琥珀酸盐、丁二酸盐、柠檬酸盐、甘氨酸盐、乳糖酸钠、甘氨酸、酒石酸盐、丁二酸、柠檬酸、乳糖酸、组氨酸中的一种或几种，浓度为0.01M-0.15M；所述的有机溶剂，选自氯仿、乙醚、甲醇、二氯甲烷、乙醇或氯仿与乙醇混合物或二氯甲烷与乙醇混合物。

5.根据权利要求4所述的丙泊酚脂质体的制备方法，其特征在于：所述的薄膜分散法是将磷脂和胆固醇及丙泊酚溶于有机溶剂中得油相，然后将此溶液置于圆底烧瓶中旋转减压蒸干，磷脂在烧瓶内壁上会形成一层很薄的膜，然后加入缓冲溶液，充分振荡烧瓶使脂质膜水化脱落。

6.根据权利要求4所述的丙泊酚脂质体的制备方法，其特征在于：所述的注入法是将磷脂、胆固醇和丙泊酚溶于有机溶剂中得油相，然后把油相均速注射到缓冲液中得水相，搅拌挥尽有机溶剂，再乳匀或超声。

7.根据权利要求4所述的丙泊酚脂质体的制备方法，其特征在于：所述的反相蒸发法是将磷脂、胆固醇与丙泊酚溶解于有机溶剂中，再与一定比例的缓冲液混合、乳化，减压蒸发除去有机溶剂。

8.根据权利要求4所述的丙泊酚脂质体的制备方法，其特征在于：所述的复乳法是将磷脂溶于有机溶剂，加入丙泊酚溶液，乳化得到水油初乳，将水油初乳加入到十倍体积的水中混合，乳化得到水/油/水乳液，然后去除有机溶剂即得。

9.根据权利要求4所述的丙泊酚脂质体的制备方法，其特征在于：将制备好的包封有丙泊酚的脂质体进行冷冻即得。

10.根据权利要求4所述的丙泊酚脂质体的制备方法，其特征在于：所述的冷冻干燥法将磷脂、胆固醇与丙泊酚溶于适量有机溶剂中得油相，再将该油相快速注入含有乳化剂及冻干保护剂的水相中，300-500r/min搅拌匀浆，减压除去有机溶剂，0.22μm微孔滤膜过滤灭菌，将滤液灌装于西林瓶中，送入冻干机进行冷冻干燥，其中，所述的乳化剂4%~8%；所述的冻干赋形剂2%～5%。

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