CN103852528B - 一种泊沙康唑的检测方法 - Google Patents

Abstract

本发明提供了一种泊沙康唑的检测方法，包括以下步骤：a）提供待测样品的待测溶液；b）将所述待测溶液进行高效液相色谱图检测，得到待测溶液的高效液相色谱图；所述步骤b）中高效液相色谱检测的流动相包括第一有机溶剂、第二有机溶剂和缓冲溶液，所述第一有机溶剂和第二有机溶剂分别选自乙腈、甲醇、乙醇、正丙醇、异丙醇；所述缓冲溶液的pH值为3.5~6；c）根据所述待测溶液的高效液相色谱图和预定的标准品的高效液相色谱图，得到待测样品的检测结果。本发明提供的方法采用三元流动相，且流动相中缓冲溶液的pH值为3.5~6，在此流动相的作用下，避免了共存杂质对泊沙康唑检测的干扰，从而提高了对泊沙康唑检测的准确度。

Description

一种泊沙康唑的检测方法

技术领域

本发明涉及药品监测技术领域，尤其涉及一种泊沙康唑的检测方法。

背景技术

泊沙康唑（posaconazole）化学名为4-[4-[4-[4-[[(3R,5R)-5-(2,4-二氟苯基)-5-(1,2,4-三唑-1-基甲基)氧杂戊环-3-基]甲氧基]苯基]哌嗪-1-基]苯基]-2-[(2S,3S)-2-羟基戊-3-基]-1,2,4-三唑-3-酮，其是第二代三唑类抗真菌药物。泊沙康唑的抗菌谱广，对于念珠菌属、荚膜组织胞浆菌、塞多孢子菌、双极菌接合菌、镰刀菌、酵母菌，包括耐氟康唑的非白色念珠菌株、新型隐球菌和曲霉菌都有强大的抑制活性；尤其是对比较罕见、但威胁生命的真菌疾病（接合菌病、镰刀菌病和球孢子菌病等）也有效。本物质适用于多种对两性霉素不能耐受或难治性成人侵袭性真菌感染的治疗；可对高危患者进行预防用药，如用于13岁以上、免疫功能低下的患者，特别是患有移植物抗宿主病（graftversushostdisease，GVHD）的造血干细胞移植者、白血病患者和由于化疗而长期白细胞减少的患者。因此，泊沙康唑在临床上被广泛的应用。

由于泊沙康唑的广泛应用，要求泊沙康唑的合成能够满足对其用量的需求。现有技术中对于泊沙康唑的合成一般采用式（I）反应式所示的过程，以2-[(1S,2S)-1-乙基-2-苄氧基丙基]-2,4-二氢-4-[4-[4-(4-羟基苯基)-1-哌嗪基]苯基]-3H-1,2,4-三氮唑-3-酮（定义为化合物E）为原料，首先制备得到中间体2-[(1S,2S)-1-乙基-2-羟氧基丙基]-2,4-二氢-4-[4-[4-(4-羟基苯基)-1-哌嗪基]苯基]-3H-1,2,4-三氮唑-3-酮（定义为化合物F），再将化合物F与(3R,5R)-5-(2,4-二氟苯基)-5-(1,2,4-三唑-1-基甲基)氧杂戊环-3-基]甲基4-氯苯磺酸酯（定义为化合物A）进行反应，最终得到泊沙康唑。由以上反应过程可以看出，在泊沙康唑的化学合成过程中，会由于原料过量、中间体反应不完全等原因，使得到的最终产品中含有化合物E、化合物F和化合物A，这些物质的存在会影响泊沙康唑的品质，因此建立分析分离方法对其进行质量控制是非常必要的。

现有技术中公开的对泊沙康唑的高效液相色谱检测方法不能够将上述这些共存杂质与泊沙康唑分离开，泊沙康唑的色谱峰与共存杂质的色谱峰发生叠加，使得到的对泊沙康唑的检测结果不准确。

发明内容

本发明的目的在于提供一种泊沙康唑的检测方法，本发明提供的检测方法避免了泊沙康唑共存的杂质，如化合物E、化合物F和化合物A对其检测的干扰，提高了对泊沙康唑检测的准确度。

本发明提供了一种泊沙康唑的检测方法，包括以下步骤：

a）提供待测样品的待测溶液；

b）将所述待测溶液进行高效液相色谱图检测，得到待测溶液的高效液相色谱图；

所述步骤b）中高效液相色谱检测的流动相包括第一有机溶剂、第二有机溶剂和缓冲溶液，所述第一有机溶剂和第二有机溶剂分别选自乙腈、甲醇、乙醇、正丙醇或异丙醇；

所述缓冲溶液的pH值为3.5~6；

c）根据所述待测溶液的高效液相色谱图和预定的标准品的高效液相色谱图，得到待测样品的检测结果。

优选的，所述第一有机溶剂为甲醇；

所述第二有机溶剂为乙腈或乙醇。

优选的，所述第一有机溶剂、第二有机溶剂和缓冲溶液的体积比为（25~45）:（20~35）:（10~50）；

所述缓冲溶液的摩尔浓度为0.01mol/L~0.05mol/L。

优选的，所述第一有机溶剂、第二有机溶剂和缓冲溶液的体积比为（28~42）:（23~32）:（20~45）。

优选的，所述缓冲溶液为醋酸铵-醋酸缓冲溶液、磷酸二氢钠-磷酸缓冲溶液、磷酸二氢铵-磷酸缓冲溶液或四丁基硫酸氢铵-氨水缓冲溶液。

优选的，所述缓冲溶液的pH值为4~5。

优选的，所述步骤b）中高效液相色谱检测的柱温为25℃~40℃。

优选的，所述步骤b）中高效液相色谱检测的流动相流速为0.4mL/min~1.2mL/min。

优选的，所述步骤a）包括以下步骤：

a1）将待测样品溶于流动相中，得到待测溶液，所述待测溶液的质量浓度为0.1mg/mL~1mg/mL。

优选的，所述步骤b）中高效液相色谱检测的检测器为紫外检测器；

所述紫外检测器的检测波长为200nm~220nm。

本发明提供了一种泊沙康唑的检测方法，包括以下步骤：a）提供待测样品的待测溶液；b）将所述待测溶液进行高效液相色谱图检测，得到待测溶液的高效液相色谱图；所述步骤b）中高效液相色谱检测的流动相包括第一有机溶剂、第二有机溶剂和缓冲溶液，所述第一有机溶剂和第二有机溶剂分别选自乙腈、甲醇、乙醇、正丙醇、异丙醇；所述缓冲溶液的pH值为3.5~6；c）根据所述待测溶液的高效液相色谱图和预定的标准品的高效液相色谱图，得到待测样品的检测结果。本发明提供的方法在对待测样品进行高效液相色谱检测的过程中，采用三元流动相，且缓冲溶液的pH值为3.5~6，在此流动相的作用下，泊沙康唑容易地与其共存杂质分离，提高了对泊沙康唑检测的分离度，避免了共存杂质对泊沙康唑检测的干扰，从而提高了对泊沙康唑检测的准确度，有利于对其品质进行控制。实验结果表明，本发明提供的方法得到的检测结果中，泊沙康唑与化合物E、化合物F和化合物A的色谱峰之间均没有重叠，且其出峰时间相差较大，很好地实现了泊沙康唑与共存杂质的分离，提高了检测结果的准确度。

另外，本发明提供的方法还能够同时将共存的杂质分离开，确定影响泊沙康唑品质的因素，从而能够来调整泊沙康唑的生产工艺，减少最终产品中杂质的含量。

附图说明

图1为本发明实施例1得到的化合物F对照品的高效液相色谱图；

图2为本发明实施例1得到的化合物A对照品的高效液相色谱图；

图3为本发明实施例1得到的化合物E对照品的高效液相色谱图；

图4为本发明实施例1得到的泊沙康唑对照品的高效液相色谱图；

图5为本发明实施例2得到的高效液相色谱图；

图6为本发明实施例3得到的高效液相色谱图；

图7为本发明实施例4得到的高效液相色谱图；

图8为本发明实施例5得到的高效液相色谱图；

图9为本发明实施例6得到的高效液相色谱图；

图10为本发明实施例7得到的高效液相色谱图；

图11为本发明比较例1得到的高效液相色谱图；

图12为本发明比较例2得到的高效液相色谱图。

具体实施方式

本发明提供了一种泊沙康唑的检测方法，包括以下步骤：

a）提供待测样品的待测溶液；

b）将所述待测溶液进行高效液相色谱图检测，得到待测溶液的高效液相色谱图；

所述步骤b）中高效液相色谱检测的流动相包括第一有机溶剂、第二有机溶剂和缓冲溶液，所述第一有机溶剂和第二有机溶剂分别选自乙腈、甲醇、乙醇、正丙醇、异丙醇；

所述缓冲溶液的pH值为3.5~6；

c）根据所述待测溶液的高效液相色谱图和预定的标准品的高效液相色谱图，得到待测样品的检测结果。

本发明研究表明，现有技术采用的高效液相色谱法得到的检测结果中，泊沙康唑的色谱峰与共存杂质的色谱峰重叠的原因是泊沙康唑与共存杂质的极性较为接近，在同一色谱柱上要想达到各组分有效的分离是非常困难的，通过改变二元流动相比例、pH值、离子强度等方法结果均不理想。本发明在对待测样品进行高效液相色谱检测的过程中，采用C18柱、三元流动相、缓冲溶液的pH值为3.5~6、流动相的流速为0.4mL/min~1.2mL/min，三元流动相改变了单一有机溶剂的极性，使极性相近的化合物得以分离，提高了对泊沙康唑检测的准确度。

本发明提供一种泊沙康唑的检测方法，本发明提供一种对泊沙康唑的高效液相色谱法，在高效液相色谱检测的过程中采用三元流动相，且缓冲溶液的pH值为3.5~6，在此流动相的作用下，泊沙康唑与共存的杂质很好的分离开，提高了泊沙康唑与共存杂质之间的分离度，从而提高了对泊沙康唑检测的准确度。

本发明首先提供待测样品的待测溶液。本发明对所述待测溶液的获得没有特殊的限制，采用本领域技术人员熟知的采用高效液相色谱检测技术方案时待测溶液的配制技术方案即可。本发明优选将待测样品溶于流动相中，得到待测溶液。在本发明中，所述待测溶液的质量浓度优选为0.1mg/mL~1mg/mL，更优选为0.2mg/mL~0.8mg/mL，最优选为0.4mg/mL~0.6mg/mL，在本发明中，所述待测溶液的质量浓度是指待测溶液中泊沙康唑的质量含量。

得到待测溶液后，本发明将所述待测溶液进行高效液相色谱检测，得到待测溶液的高效液相色谱图。本发明对高效液相色谱检测时采用的仪器没有特殊的限制，采用本领域技术人员熟知的高效液相色谱仪即可，如可以采用Agilent（安捷伦）公司生产的型号为Agilent1260的高效液相色谱仪；检测器优选为紫外检测器，如可以采用型号为1260VWD的紫外检测器；所述检测器的检测波长优选为200nm~220nm，更优选为205nm~215nm，最优选为210nm；本发明在进行高效液相色谱检测过程中，可以采用型号为1260ALS的自动进样器；可以采用型号为1260Quatpump的四元低压梯度泵；色谱柱优选为C18色谱柱，如可以采用型号为WondaSilC18柱，其尺寸为250mm×4.6mm、5μm、

本发明将上述技术方案得到的待测溶液注入上述高效液相色谱仪中进行高效液相色谱检测，样品的进样体积优选为5μL~50μL，更优选为10μL~40μL，最优选为15μL~30μL；

在所述高效液相色谱检测过程中，流动相包括第一有机溶剂、第二有机溶剂和缓冲溶液，所述第一有机溶剂和第二有机溶剂分别选自乙腈、甲醇、乙醇、正丙醇或异丙醇，所述缓冲溶液的pH值为3.5~6；所述第一有机溶剂更优选为甲醇，所述第二有机溶剂更优选为乙腈或乙醇；所述缓冲溶液优选为醋酸铵-醋酸缓冲溶液、磷酸二氢钠-磷酸缓冲溶液、磷酸二氢铵-磷酸缓冲溶液或四丁基硫酸氢铵-氨水缓冲溶液，更优选为醋酸铵-醋酸缓冲溶液、磷酸二氢铵-磷酸缓冲溶液，最优选为磷酸二氢铵-磷酸缓冲溶液；所述缓冲溶液的pH值优选为4~5，更优选为4.5；本发明对上述pH值的获得没有特殊的限制，采用本领域技术人员熟知的配制缓冲溶液的方法即可，优选采用以下方法：以磷酸二氢铵-磷酸缓冲溶液为例，先配置摩尔浓度为0.01mol/L~0.05mol/L的磷酸二氢铵溶液，再用磷酸将溶液的pH值调至3.5~6，即可得到具有上述pH值的缓冲溶液；

在本发明中，所述流动相中，第一有机溶剂、第二有机溶剂和缓冲溶液的体积比优选为（25~45）:（20~35）:（10~50），更优选为（28~42）:（23~32）:（20~45），最优选为（31~39）:（25~29）:（25~40）；所述缓冲溶液的摩尔浓度优选为0.01mol/L~0.05mol/L，更优选为0.02mol/L~0.04mol/L，在本发明中，所述缓冲溶液包括碱性化合物和酸性化合物，所述摩尔浓度是指缓冲溶液中碱性化合物的摩尔浓度；

本发明采用上述三元流动相对泊沙康唑进行高效液相色谱检测，在上述流动相的作用下，泊沙康唑能够很好的与其共存杂质分离，提高了泊沙康唑与其共存杂质的分离度，避免了共存杂质对泊沙康唑检测的干扰，从而实现了对泊沙康唑的准确检测；

本发明在进行高效液相色谱检测的过程中，流动相的流速优选为0.4mL/min~1.2mL/min，更优选为0.6mL/min~1.0mL/min，最优选为1.0mL/min；所述色谱柱的柱温优选为25℃~40℃，即为室温；检测得到待测溶液的高效液相色谱图。

得到待测溶液的高效液相色谱图后，本发明将所述待测溶液的高效液相色谱与标准品的高效液相色谱图进行比较，得到检测结果。本发明对所述标准品的高效液相色谱图的获得没有特殊的限制，优选按照以下方法获得：

分别提供标准品的待测溶液；

将所述标准品的待测溶液进行高效液相色谱检测，得到标准品的高效液相色谱图，所述高效液相色谱检测中流动相包括第一有机溶剂、第二有机溶剂和缓冲溶液，所述第一有机溶剂和第二有机溶剂分别选自乙腈、甲醇、乙醇、正丙醇或异丙醇，所述缓冲溶液的pH值为3.5~6。

本发明首先配制标准品的待测溶液，本发明对所述标准品的来源没有特殊限制，采用本领域技术人员熟知的泊沙康唑、化合物A、化合物E和化合物F的市售商品即可，如化合物E可以采用ChengduVictorPharmaceuticalsCo.,Ltd（成都威克药业有限责任公司）生产的批号为20120521、纯度为99.2%的产品；化合物F可以采用成都威克药业有限公司生产的批号为20120307、纯度为98.5%的产品；化合物A可以采用成都威克药业有限公司生产的批号为20120423、纯度为98.5%的产品；泊沙康唑可以采用成都威克药业有限责任公司生产的批号为20120601、纯度为99.5%的产品。在本发明中，所述待测溶液的浓度优选为0.1mg/mL~1mg/mL，更优选为0.2mg/mL~0.8mg/mL，最优选为0.4mg/mL~0.6mg/mL。

得到标准品的待测溶液后，本发明将所述标准品的待测溶液进行高效液相色谱检测，分别得到标准品的高效液相色谱图。本发明对所述标准品待测溶液的高效液相色谱检测的技术方案没有特殊的限制，优选采用上述技术方案所述的对待测溶液的高效液相色谱检测的技术方案；

得到标准品的高效液相色谱图后，本发明根据上述技术方案得到的待测样品的高效液相色谱图和所述标准品的高效液相色谱图，得到待测样品的检测结果。本发明优选比较高效液相色谱图中各组分的相对保留时间，得到待测样品中含有的组分，从而实现了对待测样品的检测。

本发明提供了一种泊沙康唑的检测方法，包括以下步骤：a）提供待测样品的待测溶液；b）将所述待测溶液进行高效液相色谱图检测，得到待测溶液的高效液相色谱图；所述步骤b）中高效液相色谱检测的流动相包括第一有机溶剂、第二有机溶剂和缓冲溶液，所述第一有机溶剂和第二有机溶剂分别选自乙腈、甲醇、乙醇、正丙醇、异丙醇；所述缓冲溶液的pH值为3.5~6；c）根据所述待测溶液的高效液相色谱图和预定的标准品的高效液相色谱图，得到待测样品的检测结果。本发明提供的方法在对待测样品进行高效液相色谱检测的过程中，采用三元流动相，且缓冲溶液的pH值为3.5~6，在此流动相的作用下，泊沙康唑容易地与其共存杂质分离，提高了对泊沙康唑检测的分离度，避免了共存杂质对泊沙康唑检测的干扰，从而提高了对泊沙康唑检测的准确度，有利于对其品质进行控制。实验结果表明，本发明提供的方法得到的检测结果中，泊沙康唑与化合物E、化合物F和化合物A的色谱峰之间均没有重叠，且其出峰时间相差较大，很好地实现了泊沙康唑与共存杂质之间的分离。

为了进一步说明本发明，下面结合实施例对本发明提供的泊沙康唑的检测方法进行详细地描述，但不能将它们理解为对本发明保护范围的限定。

在以下实施例中，化合物E标准品的批号为20120521，纯度为99.2%；化合物F标准品的批号为20120307，纯度为98.5%；化合物A标准品的批号为20120423，纯度为98.5%；泊沙康唑的批号为20120601，纯为度99.5%，化合物E、化合物F、化合物A和泊沙康唑均购自成都威克药业有限公司；

在以下实施例中，采用型号为Agilent（安捷伦）1260的高效液相色谱仪进行检测，检测器为型号为1260VWD的紫外检测器；采用型号为1260ALS的自动进样器，1260Quatpump的四元低压梯度泵；色谱柱为WondaSilC18柱（250mm×4.6mm5μm）。

实施例1

将泊沙康唑、化合物A、化合物E和化合物F的标准品采用流动相溶解，得到质量浓度为0.1mg/mL的泊沙康唑、化合物A、化合物E和化合物F对照品的待测溶液，流动相为体积比为36:28:36的甲醇、乙腈和pH值为4.5的磷酸二氢铵-磷酸缓冲溶液，磷酸二氢铵-磷酸缓冲溶液的获得首先配制摩尔浓度为0.02mol/L的磷酸二氢铵溶液，采用磷酸将其pH值调至4.5；

将上述对照品的待测溶液注入高效液相色谱仪中，进样体积为20μL，流速为1.0mL/min，柱温为室温，检测波长为210nm，得到对照品的高效液相色谱图。

结果如图1~4所示，图1~4分别是本发明实施例1得到的化合物F、化合物A、化合物E和泊沙康唑对照品的高效液相色谱图，由图1~4可以看出，本发明提供的方法能够分别检测泊沙康唑及与其共存的共存杂质。

实施例2

将质量比为1:1:1:1的泊沙康唑、化合物A、化合物E和化合物F的对照品混合得到包含泊沙康唑和共存杂质的混合物，将得到的混合物用流动相溶解，得到混合物总质量浓度为1mg/mL的待测溶液，流动相为体积比为36:28:36的甲醇、乙腈和pH值为磷酸二氢铵-磷酸缓冲溶液，磷酸二氢铵-磷酸缓冲溶液的获得首先配制摩尔浓度为0.02mol/L的磷酸二氢铵溶液，采用磷酸将其pH值调至4.5；

将上述混合物的待测溶液注入高效液相色谱仪中，进样体积为20μL，流速为1.0mL/min，柱温为室温，检测波长为210nm，得到对照品的高效液相色谱图。

结果如图5所示，图5为本发明实施例2得到的高效液相色谱图，由图5可以看出，本发明提供的方法能够将泊沙康唑与其他共存杂质完全的分离，实现对泊沙康唑的准确检测。

实施例3

采用实施例2中的技术方案对质量比为1:1:1:1的泊沙康唑、化合物A、化合物E和化合物F的混合物进行检测，唯一不同的是本实施例中流动相为体积比为32:32:36的甲醇、乙腈和pH值为4.5的磷酸二氢铵-磷酸缓冲溶液，得到混合物的高效液相色谱。

结果如图6所示，图6为本发明实施例3得到的高效液相色谱图，由图6可以看出，采用本发明提供的方法能够很好的将泊沙康唑主峰与其他共存的共存杂质分离，实现对泊沙康唑的准确测定，从而利于对其品质的监控。

实施例4

采用实施例2的技术方案对质量比为1:1:1:1的泊沙康唑、化合物A、化合物E和化合物F的混合物进行检测，唯一不同的是本实施例中缓冲溶液的pH值为4.0，得到混合物的高效液相色谱图。

结果如图7所示，图7为本发明实施例4得到的高效液相色谱图，由图7可以看出，

由以上实施例可知，在本发明提供方法的pH值范围内，本发明提供的方法能够很好的将泊沙康唑与共存杂质分离，实现对泊沙康唑的准确测定。

实施例5

采用实施例2的技术方案对质量比为1:1:1:1的泊沙康唑、化合物A、化合物E和化合物F的混合物进行检测，唯一不同的是本实施例中缓冲溶液的pH值为5.5，得到混合物的高效液相色谱图。

结果如图8所示，图8为本发明实施例5得到的高效液相色谱图，由图8可以看出，在本发明提供方法的pH值范围内，本发明提供的方法能够很好的将泊沙康唑与共存杂质分离，实现对泊沙康唑的准确测定。

实施例6

采用实施例2的技术方案对质量比为1:1:1∶1的泊沙康唑、化合物A、化合物E和化合物F的混合物进行检测，不同的是本实施例中流动相为体积比为36:28:36的甲醇、乙腈和pH值为4.5的醋酸铵-醋酸缓冲溶液，醋酸铵-醋酸缓冲溶液的获得首先配制摩尔浓度为0.02mol/L的醋酸铵溶液，采用醋酸将其pH值调至4.5，检测得到混合物的高效液相色谱图。

结果如图9所示，图9为本发明实施例6得到的高效液相色谱图，由图9可以看出，采用本发明提供方法的流动相，能够很好的将泊沙康唑与共存杂质分离，实现对泊沙康唑的准确测定。

实施例7

采用实施例2的技术方案对质量比为1:1:1∶1的泊沙康唑、化合物A、化合物E和化合物F的混合物进行检测，不同的是本实施例中的流动相为体积比为36:28:36的甲醇、乙腈和pH值为4.5的磷酸二氢钠-磷酸缓冲溶液，磷酸二氢钠-磷酸缓冲溶液的获得首先配制摩尔浓度为0.02mol/L的磷酸二氢钠溶液，采用磷酸将其pH值调至4.5，检测得到混合物的高效液相色谱图。

结果如图10所示，图10为本发明实施例7得到的高效液相色谱图，由图10可以看出，采用发明提供的流动相，能够很好的将泊沙康唑与共存杂质分离，实现对泊沙康唑的准确测定。

比较例1

采用实施例2的技术方案对为质量比为1:1:1:1的泊沙康唑、化合物A、化合物E和化合物F的混合物进行检测，不同的是本比较例中流动相为体积比为60:40的乙腈和pH值为4.5的磷酸二氢铵-磷酸缓冲溶液，磷酸二氢铵-磷酸缓冲溶液的获得首先配制摩尔浓度为0.02mol/L的磷酸二氢铵溶液，采用磷酸将其pH值调至4.5，检测得到混合物的高效液相色谱图。

结果如图11所示，图11为本发明比较例1得到的高效液相色谱图，由图11可以看出，采用比较例提供的方法在对泊沙康唑与其共存杂质共存的待测物进行检测时，泊沙康唑与化合物E不能完全分离，化合物A的存在会干扰对泊沙康唑的检测，得到的检测结果不准确。

比较例2

采用实施例2的技术方案对质量比为1:1:1∶1的泊沙康唑、化合物A、化合物E和化合物F的混合物进行检测，不同的是本比较例中流动相为体积比为50:50的乙腈和水，采用醋酸将流动相的pH值调至4.5，检测得到混合物的高效液相色谱图。

结果如图12所示，图12为本发明比较例2得到的高效液相色谱图，由图12可以看出，采用本比较例提供的方法在对泊沙康唑与其共存杂质共同存在的待测物进行检测时，泊沙康唑与化合物E不能完全分离，化合物E的存在会对泊沙康唑的检测产生影响，使得到的检测结果不准确。

由以上实施例可知，本发明提供了一种泊沙康唑的检测方法，包括以下步骤：a）提供待测样品的待测溶液；b）将所述待测溶液进行高效液相色谱图检测，得到待测溶液的高效液相色谱图；所述步骤b）中高效液相色谱检测的流动相包括第一有机溶剂、第二有机溶剂和缓冲溶液，所述第一有机溶剂和第二有机溶剂分别选自乙腈、甲醇、乙醇、正丙醇、异丙醇；所述缓冲溶液的pH值为3.5~6；c）根据所述待测溶液的高效液相色谱图和预定的标准品的高效液相色谱图，得到待测样品的检测结果。本发明提供的方法在对待测样品进行高效液相色谱检测的过程中，采用三元流动相，且缓冲溶液的pH值为3.5~6，在此流动相的作用下，泊沙康唑容易地与其共存杂质分离，提高了对泊沙康唑检测的分离度，避免了共存杂质对泊沙康唑检测的干扰，从而提高了对泊沙康唑检测的准确度，有利于对其品质进行控制。实验结果表明，本发明提供的方法得到的检测结果中，泊沙康唑与化合物E、化合物F和化合物A的色谱峰之间均没有重叠，且其出峰时间相差较大，很好地实现了泊沙康唑与共存杂质之间的分离。

以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

Claims (9)

1.一种泊沙康唑的检测方法，包括以下步骤：

a)提供待测样品的待测溶液；所述待测样品由泊沙康唑、化合物A、化合物E和化合物F组成；所述化合物A为(3R,5R)-5-(2,4-二氟苯基)-5-(1,2,4-三唑-1-基甲基)氧杂戊环-3-基]甲基4-氯苯磺酸酯；所述化合物E为2-[(1S,2S)-1-乙基-2-苄氧基丙基]-2,4-二氢-4-[4-[4-(4-羟基苯基)-1-哌嗪基]苯基]-3H-1,2,4-三氮唑-3-酮；所述化合物F为2-[(1S,2S)-1-乙基-2-羟氧基丙基]-2,4-二氢-4-[4-[4-(4-羟基苯基)-1-哌嗪基]苯基]-3H-1,2,4-三氮唑-3-酮；

b)将所述待测溶液进行高效液相色谱图检测，得到待测溶液的高效液相色谱图；

所述步骤b)中高效液相色谱检测的流动相包括第一有机溶剂、第二有机溶剂和缓冲溶液；所述第一有机溶剂为甲醇；所述第二有机溶剂为乙腈或乙醇；所述第一有机溶剂、第二有机溶剂和缓冲溶液的体积比为(25～45):(20～35):(10～50)；

所述缓冲溶液的pH值为3.5～6；

c)根据所述待测溶液的高效液相色谱图和预定的标准品的高效液相色谱图，得到待测样品的检测结果。

2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述缓冲溶液的摩尔浓度为0.01mol/L～0.05mol/L。

3.根据权利要求2所述的检测方法，其特征在于，所述第一有机溶剂、第二有机溶剂和缓冲溶液的体积比为(28～42):(23～32):(20～45)。

4.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述缓冲溶液为醋酸铵-醋酸缓冲溶液、磷酸二氢钠-磷酸缓冲溶液、磷酸二氢铵-磷酸缓冲溶液或四丁基硫酸氢铵-氨水缓冲溶液。

5.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述缓冲溶液的pH值为4～5。

6.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述步骤b)中高效液相色谱检测的柱温为25℃～40℃。

7.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述步骤b)中高效液相色谱检测的流动相流速为0.4mL/min～1.2mL/min。

8.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述步骤a)包括以下步骤：

a1)将待测样品溶于流动相中，得到待测溶液，所述待测溶液的质量浓度为0.1mg/mL～1mg/mL。

9.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述步骤b)中高效液相色谱检测的检测器为紫外检测器；

所述紫外检测器的检测波长为200nm～220nm。