CN103819571A - 一种银耳子实体多糖制备技术 - Google Patents
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Abstract
一种银耳子实体多糖制备技术，是一种结合逆流脱色、对辊挤压粉碎、生物酶脱蛋白工艺和高压提取、陶瓷膜分离工艺的银耳多糖提取技术。其特征在于银耳子实体经70%乙醇逆流脱色，对辊挤压粉碎，复合生物酶解脱胶脱蛋白后，用50-80倍水于105-121℃提取2-4小时，提取液经0.5-5.0微米陶瓷膜除杂，0.01微米陶瓷膜浓缩，乙醇沉淀、真空干燥得银耳多糖。应用该技术制备银耳子实体多糖提取率可达90%以上，所得多糖为酸性多糖和中性多糖混合物，多糖含量为85%-92%，灰分含量为5.4%-6.73%，蛋白含量为1.3%-1.5%，具有良好的乳化和保湿性能，可应用于食品、药品及日化领域。
Description
技术领域
本发明属于生物活性成分提取技术领域，具体涉及一种银耳多糖及其提取制备。
背景技术
银耳多糖是从银耳子实体或孢子中提取出来的一种活性多糖。现代结构分析证明银耳多糖是一种杂多糖，包括酸性杂多糖、中性杂多糖、胞壁多糖、胞外多糖和酸性低聚糖等多种组分。国内外大量研究证明，银耳多糖具有优异的提高人体免疫机能、抗病毒、抗肿瘤、抗溃疡、降血脂、降血糖、降胆固醇等生理作用及保湿、增稠、乳化等物化功能，近年来在食品、医药、日化等领域受到广泛的重视。
目前国内外耳多糖提取大多采用的是水溶剂回流提取、减压浓缩、Savage脱蛋白、醇沉干燥的传统工艺生产银耳多糖。经检索，近年来关于银耳多糖提取制备技术的相关文献专利也有相关公开报道，2005年刘桂云等申请了“银耳杂多糖及其提取物、制备方法和用途”的专利（申请号200510023427.4）；2007年侯建明申请了“一种银耳多糖酶法逆向提取工艺”的专利（专利申请号200710014978.3）；同时相关学术期刊也对银耳多糖的提取工艺有所报道，经过对比发现，本发明所用银耳子实体连续逆流脱色脱脂技术未见相关报道；本发明所涉及高温高压提取技术虽在部分文献中有所提及，但仅仅是作为方法比较，且为非优选条件而淘汰，并未形成可用技术；所涉及的超滤浓缩工艺文献有所报道，但所用滤膜为醋酸纤维素膜，本发明所用过滤膜为陶瓷膜，可以实施高温过滤，与醋酸纤维素膜相比，对银耳多糖的过滤具有不可比拟的优势和创新性。通过比较还发现，传统方法提取效率低、能耗大、多糖纯度低，而且在提取纯化过程中使用有机溶剂如：三氯甲烷、异戊醇或化学无机盐（如氢氧化钠、盐酸），存在化学溶剂残留、产品质量不稳定等缺陷，应用领域较窄。
本发明的目的在于克服现有银耳多糖提取技术过程中使用有毒有害化学试剂，产品存在化学试剂残留的和提取时间长，能耗大的缺点。通过实验比较表明：应用本发明研究团队研发的对辊挤压技术（已公开发表论文：挤压处理银耳子实体对多糖提取效果的影响，食品工业科技 2011年11期）处理后银耳子实体，与传统粉碎（即银耳干粉，过80目）方式相比，多糖浸出率增加了170%；经胰蛋白酶、果胶酶复合酶解后，多糖浸提得率可提高20%-30%；高温高压提取工艺可提高银耳多糖提取得率10-15%，缩短提取时间30-50%。利用本发明技术，银耳多糖浸提率达到84%-92.0%，粗多糖得率为30-40%，粗多糖纯度达85%-92%。且全过程不使用有毒有害的化学试剂，产品安全性大大提高，是一种安全的银耳多糖提取制备方法。
发明内容
本发明涉及一种以银耳子实体为原料提取制备银耳多糖及其制备技术，主要包括4个步骤。
（1）原料处理
逆流脱脂脱色：银耳子实体经过筛选去杂，剪去色泽深黄的基部，于连续逆流提取器内加入3-5倍重量的70-95%乙醇， 50-65℃条件下，逆流提取2-3小时，以脱去子实体内的色素和脂类及小分子物质；
挤压破壁：将经过逆流脱脂脱色处理的银耳子实体用滤布滤挤压除去残留乙醇，然后用10-15倍重量的清水浸泡2-6小时，控制子实体吸水重量达到干重的8-12倍时，用差速对辊挤压机进行挤压破壁处理，对辊挤压间隙度为0.01-0.05毫米，对辊挤压主辊转速为300-500转/分，副辊转速为100-200转/分，挤压为2-3遍，以充分破坏子实体的细胞、组织结构，利于多糖的溶出；
酶解脱胶脱蛋白：按挤压处理子实体湿重的2-3倍的量加入清水，加入子实体湿重0.5-1.0%的按照比例为5-8∶1混合的胰蛋白酶和果胶酶物， 48-53℃，酶解时间为4-6小时，然后用200-500目滤布过滤，除去酶解液，并用40℃-60℃温水洗涤2-3遍以除去残余的生物酶及酶解产物，即为多糖提取原料。
（2）多糖提取： 将上述所得多糖提取原料，加入原料湿重5-10倍清水，于蒸汽高压提取罐中进行提取，提取温度为105-115℃，压力为0.024-0.072MPa，提取时间为1- 2小时，所得提取液经300-500目滤布过滤，滤渣进行再次提取，过滤，滤液合并即为银耳多糖提取液。
（3）分离浓缩：将上述步骤2所得提取液，过孔径为0.5-5.0微米的陶瓷膜，以除去提取液中残留的固体颗粒和部分大分子物质，过膜温度为60-70℃，压力为0.12-0.16MPa；通过0.5-5.0微米陶瓷膜的率过液，直接用孔径为0.01微米的陶瓷膜进行过滤，过滤温度为60-80℃，压力为0.15-0.2MPa，得到料液重量比为1∶15-20的截留液，即为银耳多糖浓缩液。
（4）干燥制备：将上述步骤3所得的银耳多糖浓缩液直接进行冷冻干燥，或加入3-5倍的95%乙醇沉淀多糖，过滤分离后进行冷冻干燥或50-60℃真空干燥得银耳多糖。
具体实施方式：
实施案例 1
步骤1选取无杂质、剪去子实体基部颜色较深部分的市售朵形银耳1公斤，置于逆流萃取器中，加入5公斤，70%的乙醇，60℃逆流提取2小时后，用滤布过滤除去残留乙醇，用12公斤的清水浸泡3小时；将吸胀的银耳子实体用差速对辊挤压机进行挤压破壁处理，对辊挤压间隙度为0.05毫米，对辊挤压主辊转速为300转/分，副辊转速为100转/分，挤压为3遍。
步骤2向挤压处理过子实体中加水20公斤，并向浆液中加入胰蛋白酶10克，果胶酶1.5克，于53℃保温4小时进行酶解，酶解结束后用400目滤布过滤，除去酶解液，并用50℃温水洗涤3遍以除去残余的生物酶及酶解产物，即为多糖提取原料。
步骤3 多糖提取原料中加入60公斤清水，于蒸汽高压提取罐中进行提取，提取温度为110℃，提取时间为1.5小时后，将提取液趁热用400目滤布过滤，滤渣加入40公斤水，110℃提取1小时，提取液趁热用400目滤布过滤，将两次过滤所得滤液合并，过孔径为1.0微米的陶瓷膜，过膜温度为70℃，压力为0.14MPa；滤过液再用孔径为0.05微米的陶瓷膜进行过滤，过滤温度为80℃，压力为0.2MPa，到截留液体积为15公斤时结束，将所得截留液进行冷冻干燥得银耳多糖干品366克。
实施案例 2
步骤1 称取市售，银耳碎片2公斤，剔除杂色碎片、杂质，置于逆流萃取器中，加入8公斤，95%的乙醇，50℃逆流提取3小时后，用滤布过滤除去残留乙醇，用20公斤的清水浸泡2小时；将吸胀的银耳子实体用差速对辊挤压机进行挤压破壁处理，对辊挤压间隙度为0.02毫米，对辊挤压主辊转速为400转/分，副辊转速为200转/分，挤压为3遍。
步骤2 向挤压处理过子实体中加入50公斤水，并向浆液中加入胰蛋白酶20克，果胶酶3克，于50℃保温4小时进行酶解，酶解结束后用400目滤布过滤，除去酶解液，并用40℃温水洗涤遍以除去残余的生物酶及酶解产物，即为多糖提取原料。
步骤3 多糖提取原料中加入100公斤清水，于蒸汽高压提取罐中进行提取，提取温度为108℃，提取时间为2小时后，将提取液趁热用400目滤布过滤，滤渣加入80公斤水，105℃提取1小时，提取液趁热用400目滤布过滤，将两次过滤所得滤液合并，过孔径为1.0微米的陶瓷膜，过膜温度为70℃，压力为0.14MPa；滤过液再用孔径为0.01微米的陶瓷膜进行过滤，过滤温度为80℃，压力为0.2MPa，到截留液体积为25公斤时结束，加入75公斤95%乙醇沉淀，滤布过滤除去多余乙醇，沉淀于60℃真空干燥得银耳多糖干品723克。
Claims (5)
1.一种银耳子实体多糖制备技术，其特征在于该多糖生产过程包括：连续逆流脱脂脱色、对辊挤压粉碎、生物酶解处理、组合陶瓷膜高温分离浓缩过程，所得银耳多糖为酸性多糖和中性多糖混合物，多糖含量为85%-92%，灰分含量为5.4%-6.73%，蛋白含量为1.3%-1.5%，25℃下，0.5%溶液粘度为22.623mm2/s-45.8 mm2/s，1.0%水溶液pH6.52-6.73，外观为白色或浅灰白色粉末。
2.如权利1所述连续逆流脱脂脱色工艺所用设备为螺旋式连续逆流提取器，实施过程中，银耳子实体物料由进料口投入，萃取溶剂由溶剂进口加入，物料螺旋推进旋片转速为20-50转/分钟，物料由进料口到出料口行进时间为2-3小时，溶剂为体积百分比70-95%的乙醇，逆流温度为50-65℃，浓缩罐浓缩温度为70-85℃。
3.如权利1所述生物酶解处理，所用酶为胰蛋白酶和果胶酶的混合物，胰蛋白酶和果胶酶比例为5-8∶1，用量为银耳子实体重量的0.5-1.0%，酶解温度48-53℃，pH6.5-7.0，酶解时间为4-6小时。
4.如权利1所述高温高压提取所用提取溶剂为水，加水量为银耳子实体重量的50-80倍，提取温度为105-115℃，压力为0.024-0.072MPa，提取时间为1- 2小时，提取次数为1-2次。
5.如权利1所述，组合陶瓷膜高温分离浓缩所用分离膜孔径为0.5-5.0微米，分离温度为40-50℃，压力为0.12-0.16MPa；浓缩膜孔径为0.01微米，浓缩温度为60-80℃，压力为0.15-0.2MPa。
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