CN103650917A - 一种缩短养菌时间的菌种制作方法 - Google Patents
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Abstract
本发明属于菌种栽培技术领域，具体涉及一种缩短养菌时间的菌种制作方法。所述菌种制作方法包括培养料称取、拌料、装瓶或装袋、灭菌、接种、培养的步骤，所述装瓶或装袋时，于培养基上打孔后，再封闭菌瓶或菌袋进行灭菌；接种时，于孔内分散接种；具体地，可用管子进行打孔，并将管子留于培养基内进行灭菌。该方法打好的孔不会因菌瓶或菌袋的搬动、挤压，以及灭菌过程中热流的扰动而塌陷或封闭，有利于灭菌过程中蒸汽进入培养基内部，灭菌彻底；孔内分散接种可使培养基各部分的营养均匀得到利用，菌种生产快，进一步缩短了养菌时间。该方法特别适合用于萌发菌菌种和蜜环菌菌种的制作。
Description
技术领域
本发明属于菌种栽培技术领域，具体涉及一种缩短养菌时间的菌种制作方法。
背景技术
菌种是指经人工培养并可供进一步繁殖或栽培使用的食用菌菌丝体，常常包括供菌丝体生长的基质在内，共同组成繁殖材料。食用菌的菌种类型主要分固体菌种和液体菌种两类，我国目前食用菌栽培中所用的菌种绝大部分为固体菌种。
食用菌的菌种分三级，即：1）母种：是具有结实性的菌丝体纯培养物，也称一级种或试管种；2）原种：是由母种转接到木屑、棉籽皮、麦草、谷粒等为主的培养基上扩大培养而成的菌丝体纯培养物，也称二级种；3）栽培种：是由原种转接、扩大到相同或相似的培养基上培养而成的菌丝体纯培养物，直接应用于生产，也称三级种。原种和栽培种的培养一般都在固体培养基上进行。以天麻的栽培种为例，先后要用到萌发菌菌种和蜜环菌菌种两种栽培种，萌发菌栽培种的制作一般需2-4个月，蜜环菌菌种的制作也需2个月左右。可见，食用菌及相关作物生产过程中，菌种的培养就耗费了较长时间，致使产品生产周期长，投入高。
常规的菌种制作过程中，一般在培养基灭菌后，再进行打孔、接种，对于体积较大的培养基，极有可能存在培养基灭菌不充分，以及接种后菌种生长缓慢的问题。
基于上述现有技术存在的问题，本发明对菌种的制作方法进行了改进，以期缩菌种制作的时间。
发明内容
有鉴于此，本发明提供一种缩短养菌时间的菌种制作方法。
为实现上述目的，本发明的技术方案为：
一种缩短养菌时间的菌种制作方法，所述菌种制作方法包括培养料称取、拌料、装瓶或装袋、灭菌、接种、培养的步骤，所述装瓶或装袋时，于培养基上打孔后，再封闭菌瓶或菌袋进行灭菌；接种时，于孔内分散接种。
所述制作的菌种属于固体菌种。所述的孔可为两个或两个以上，一般均布于培养基表面，如，当打的孔为一个时，一般从菌瓶或菌袋口的中央打入。本发明方法采用先打孔后灭菌的步骤，有利于灭菌过程中蒸汽进入培养基内部对其进行充分灭菌，后期养菌过程中，可减少杂菌对目标菌种的干扰，利于目标菌种快速生长；采用孔内分散接种的方式，可使培养基各部分的营养均匀得到利用，菌种生产快，进一步缩短养菌时间。
进一步，所述装瓶或装袋时，于培养基上插上管子，再封闭菌瓶或菌袋进行灭菌；所述管子为一端封闭、一端开口的中空管，插入的管子在培养基内形成一个未穿孔的小孔；接种时，将管子拔出，在孔的底部、中部和顶部分别接上一个点的菌种。通过插入管子的方式，一方面完成了打孔操作，另一方面，打好的孔不会因菌瓶或菌袋的搬动、挤压，以及灭菌过程中热流的扰动而塌陷或封闭；中空的管子也有导入和贮存热流的作用，使灭菌更彻底；于孔的底部、中部和顶部均匀分布进行接种，利于菌的快速生长。
进一步，所述孔的深度为培养基长度或高度的1/2-5/6。该深度能满足大多数菌种接种的要求，菌丝由内向外均匀生长，营养物质均匀利用，生长好，生长快。
进一步，所述管子在浓度为1×10-7-2×10-7mg/mL的三十烷醇溶液中浸润后插入培养基。三十烷醇是一种天然的长碳链植物生长调节剂，化学名称正三十烷醇，结构式CH3（CH2）28CH2OH，又称蜂花醇，是从蜜蜂蜡中纯化提取的天然生物产品，对人畜无害及副作用，对环境无污染。将其用于菌种的生长调节，可进一步缩短菌种的培养时间，提高生产效率。由于三十烷醇不溶于水，可将其制成混悬溶液进行浸润。此时，为使管子上附上三十烷醇，可采用毛糙的管子或者有一定吸附性的管子，或者将三十烷醇溶液配成粘性较大的溶液。
进一步，所述管子封闭端朝向培养基内部，其封闭端便于打孔，开口端便于灭菌蒸汽随管子进入孔内进行灭菌。
进一步，所述管子封闭端为圆尖形，这样使打孔易于进行。
进一步，所述管子长15cm，直径1.5cm。该规格的管子与大多数菌瓶或菌袋中培养基的长度或高度匹配。
进一步，所述管子为塑料管、钢化玻璃管或者竹筒，优选可重复使用又廉价的塑料管。
本发明缩短养菌时间的菌种制作方法适合大多数固体菌种的制作，特别是在萌发菌菌种和蜜环菌菌种制作中的应用，经实验证实，比常规养菌时间缩短一半以上。
本发明的有益技术效果是：
本发明采用先打孔后灭菌的步骤，并用管子对孔进行支撑，打好的孔不会因菌瓶或菌袋的搬动、挤压，以及灭菌过程中热流的扰动而塌陷或封闭；有利于灭菌过程中蒸汽进入培养基内部对其进行充分灭菌，后期养菌过程中，可减少杂菌对目标菌种的干扰，利于目标菌种快速生长；采用孔内分散接种的方式，培养基各部分的营养均匀得到利用，菌种生产快，进一步缩短了养菌时间。
具体实施方式
以下对本发明的优选实施例和对照例进行详细描述。本实施例和对照例中菌种的原种购买自河南农富康生物科技有限公司；其中未注明具体条件的实验方法，参照NY/T528-2010《食用菌菌种生产技术规程》标准要求进行。
实施例1萌发菌菌种的制作
按下列配比称取培养基：木屑70份、麸皮27份、磷肥（磷酸钙）1份、石膏粉1份和葡萄糖2份，木屑由1cm×1cm×0.3cm的阔叶树木屑和粒径0.3cm的杂木屑按重量比2:1组成。将阔叶树木屑放入1%的葡萄糖水溶液中浸润12小时，再与培养基的其它配料混合拌匀，控制培养基的含水量为60%。将拌匀的培养料装入菌种瓶，并在菌种瓶中央插入一中空的塑料管。塑料管一端封闭、一端开口，封闭端为圆尖形，管子封闭端朝向培养基插入，插入的深度为培养基装料高度的1/6处。于1.4kg/cm2高压灭菌1小时。按NY/T528-2010《食用菌菌种生产技术规程》标准要求进行接种培养等操作管理，具体接种时，将管子拔出，在孔的底部、中部和顶部分别接上一个点的萌发菌。于20-25℃背光培养，约25-28天，制作的该批菌种的菌丝均长满整个菌种瓶。
实施例2萌发菌菌种的制作
按下列配比称取培养基：木屑70份、麸皮27份、磷肥（磷酸钙）1份、石膏粉1份和葡萄糖2份，木屑由1cm×1cm×0.3cm的阔叶树木屑和粒径0.3cm的杂木屑按重量比2:1组成。将阔叶树木屑放入1%的葡萄糖水溶液中浸润12小时，再与培养基的其它配料混合拌匀，控制培养基的含水量为60%。将拌匀的培养料装入菌种瓶，并在菌种瓶中央插入一中空的塑料管。塑料管一端封闭、一端开口，封闭端为圆尖形，管子封闭端朝向培养基插入，插入的深度为培养基装料高度的1/6处。在插孔操作前，该塑料管已在浓度为1.5×10-7mg/mL的三十烷醇溶液中浸泡了1h。于1.4kg/cm2高压灭菌1小时。按NY/T528-2010《食用菌菌种生产技术规程》标准要求进行接种培养等操作管理，具体接种时，将管子拔出，在孔的底部、中部和顶部分别接上一个点的萌发菌。于20-25℃背光培养，约20-23天，制作的该批菌种的菌丝均长满整个菌种瓶。
实施例3蜜环菌菌种的制作
将直径为1-1.5cm的新鲜杂木树枝切成2-3cm长的小段9份（按干重计）、麸皮15份、玉米粉10份、黄豆粉3份、白糖1份、石膏粉1份和磷酸二氢钾1份，拌匀，控制含水量为60%。将混匀的培养料装入菌种瓶，并在菌种瓶中央插入一中空的塑料管。塑料管一端封闭、一端开口，封闭端为圆尖形，管子封闭端朝向培养基插入，插入的深度为培养基装料高度的1/2处。于100℃高温灭菌10小时。按NY/T528-2010《食用菌菌种生产技术规程》标准要求进行接种培养等操作管理，具体接种时，将管子拔出，在孔的底部、中部和顶部分别接上一个点的蜜环菌。于20-25℃下培养，约22-23天左右，制作的该批菌种的菌丝即长满整个菌种瓶。
实施例4蜜环菌菌种的制作
将直径为1-1.5cm的新鲜杂木树枝切成2-3cm长的小段9份（按干重计）、麸皮15份、玉米粉10份、黄豆粉3份、白糖1份、石膏粉1份和磷酸二氢钾1份，拌匀，控制含水量为60%。将混匀的培养料装入菌种瓶，并在菌种瓶中央插入一中空的塑料管。塑料管一端封闭、一端开口，封闭端为圆尖形，管子封闭端朝向培养基插入，插入的深度为培养基装料高度的1/2处。在插孔操作前，该塑料管已在浓度为1.5×10-7mg/mL的三十烷醇溶液中浸泡了1h。于100℃高温灭菌10小时。按NY/T528-2010《食用菌菌种生产技术规程》标准要求进行接种培养等操作管理，具体接种时，将管子拔出，在孔的底部、中部和顶部分别接上一个点的蜜环菌。于20-25℃下培养，约19-21天左右，制作的该批菌种的菌丝即长满整个菌种瓶。
对照例1萌发菌菌种的制作
按下列配比称取培养基：木屑70份、麸皮27份、磷肥（磷酸钙）1份、石膏粉1份和葡萄糖2份，木屑由1cm×1cm×0.3cm的阔叶树木屑和粒径0.3cm的杂木屑按重量比2:1组成。将阔叶树木屑放入1%的葡萄糖水溶液中浸润12小时，再与培养基的其它配料混合拌匀，控制培养基的含水量为60%。将拌匀的培养料装入菌种瓶，1.4kg/cm2高压灭菌1小时。按NY/T528-2010《食用菌菌种生产技术规程》标准要求进行接种培养等操作管理，具体地，用打孔器在菌种瓶中央打一个深入培养基装料高度1/2处的孔，在孔的底部接上一个点的萌发菌。于20-25℃背光培养，约57-63天，制作的该批菌种的菌丝均长满整个菌种瓶。
对照例2蜜环菌菌种的制作
将直径为1-1.5cm的新鲜杂木树枝切成2-3cm长的小段9份（按干重计）、麸皮15份、玉米粉10份、黄豆粉3份、白糖1份、石膏粉1份和磷酸二氢钾1份，拌匀，控制含水量为60%。将混匀的培养料装入菌种瓶，于100℃高温灭菌10小时。按NY/T528-2010《食用菌菌种生产技术规程》标准要求进行接种培养等操作管理，具体地，用打孔器在菌种瓶中央打一个深入培养基装料高度1/2处的孔，在孔的底部接上一个点的蜜环菌。于20-25℃下培养，约44-47天左右，制作的该批菌种的菌丝即长满整个菌种瓶。
最后说明的是，以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非限制，尽管参照较佳实施例对本发明进行了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的宗旨和范围，其均应涵盖在本发明的权利要求范围当中。
Claims (9)
1.一种缩短养菌时间的菌种制作方法，所述菌种制作方法包括培养料称取、拌料、装瓶或装袋、灭菌、接种、培养的步骤，其特征在于：所述装瓶或装袋时，于培养基上打孔后，再封闭菌瓶或菌袋进行灭菌；接种时，于孔内分散接种。
2.根据权利要求1所述的缩短养菌时间的菌种制作方法，其特征在于：所述装瓶或装袋时，于培养基上插上管子，再封闭菌瓶或菌袋进行灭菌；所述管子为一端封闭、一端开口的中空管，插入的管子在培养基内形成一个未穿孔的小孔；接种时，将管子拔出，在孔的底部、中部和顶部分别接上一个点的菌种。
3.根据权利要求1或2所述的缩短养菌时间的菌种制作方法，其特征在于：所述孔的深度为培养基长度或高度的1/2-5/6。
4.根据权利要求2所述的缩短养菌时间的菌种制作方法，其特征在于：所述管子在浓度为1×10-7-2×10-7mg/mL的三十烷醇溶液中浸润后插入培养基。
5.根据权利要求2所述的缩短养菌时间的菌种制作方法，其特征在于：所述管子封闭端朝向培养基内部。
6.根据权利要求2所述的缩短养菌时间的菌种制作方法，其特征在于：所述管子封闭端为圆尖形。
7.根据权利要求2所述的缩短养菌时间的菌种制作方法，其特征在于：所述管子长15cm，直径1.5cm。
8.根据权利要求2所述的缩短养菌时间的菌种制作方法，其特征在于：所述管子为塑料管、钢化玻璃管或者竹筒。
9.权利要求1或2所述的缩短养菌时间的菌种制作方法在萌发菌菌种和蜜环菌菌种制作中的应用。
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