CN103588775A

CN103588775A - 普拉曲沙降解杂质及其制备方法

Info

Publication number: CN103588775A
Application number: CN201310559398.8A
Authority: CN
Inventors: 乔智涛; 董淑求; 周炳城
Original assignee: LIANYUNGANG HENGYUN MEDICAL TECHNOLOGY Co Ltd
Current assignee: Lianyungang Hengyun Pharmaceutical Co. Ltd.
Priority date: 2013-11-12
Filing date: 2013-11-12
Publication date: 2014-02-19
Anticipated expiration: 2033-11-12
Also published as: CN103588775B

Abstract

本发明涉及普拉曲沙降解杂质及其制备方法。具体而言，该普拉曲沙降解杂质为如下式（I）所示的N-[4-[1-[(2-氨基-4-羟基-6-蝶啶基)甲基]-3-丁炔-1-基]苯甲酰基]-L-谷氨酸。其合成通过将4-[1-[(2,4-二氨基-6-蝶啶基)甲基]-3-丁炔-1-基]苯甲酸化合物经取代、缩合、水解得到目标化合物。该方法首次通过化学合成得到式（I）化合物，且可以高效、快速分离得到目标化合物。

Description

普拉曲沙降解杂质及其制备方法

技术领域

本发明涉及一种N-[4-[1-[(2-氨基-4-羟基-6-蝶啶基)甲基]-3-丁炔-1-基]苯甲酰基]-L-谷氨酸及其制备方法，该化合物为普拉曲沙降解杂质。

背景技术

普拉曲沙（Pralatrexate，结构如下所示）最早由SRI公司合成，并与Memorial Sloan-Kettering（MSKCC）合作进行了其临床前和临床研究。2003年，Allos Therapeutics Inc.从SRI和MSKCC获得其全球开发权。2009年9月，FDA批准了普拉曲沙以孤儿药的状态用于外周T细胞淋巴瘤的新药申请，并于2009年10月在美国上市。

普拉曲沙是第一种获FDA批准的用于外周T细胞淋巴瘤治疗的药物。临床研究发现其能够缩小肿瘤体积，延长癌症患者生存期。

在普拉曲沙的合成工艺中，可能产生4位上的“氨基”被“羟基”取代的降解杂质（其可能的产生过程如下所示）。但是，由于反应程度及自身结构稳定性的局限，其又很难通过大量降解、分离得到。而文献中又未见该化合物的合成报道。故我们对该化合物的合成方法进行了研究，找到了一条较方便的合成路线。合成的该杂质可用于普拉曲沙的质量研究，有助于提高药品质量，降低用药风险。

发明内容

本发明的目的在于提供一种如式（I）所示的普拉曲沙降解杂质N-[4-[1-[(2-氨基-4-羟基-6-蝶啶基)甲基]-3-丁炔-1-基]苯甲酰基]-L-谷氨酸及其制备方法。

式（I）化合物的制备方法为由如式（II）所示的4-[1-[(2,4-二氨基-6-蝶啶基)甲基]-3-丁炔-1-基]苯甲酸经取代、缩合、水解后得到目标产物。

优选的，所述制备方法具体包括如下步骤：

1）取代：将式（II）化合物、碱、有机溶剂及水加入到反应瓶中，控温反应，监测反应完毕，加入异丙醇，冰乙酸调pH至5～6，析出固体，干燥得式（III）化合物；

2）缩合：将式（III）化合物、L-谷氨酸二甲酯盐酸盐、三乙胺、缩合剂及有机溶剂加入反应瓶中，反应完毕后，将反应液倒入水中，析出固体，过滤、干燥后柱层析得式（IV）化合物；

3）水解：将式（IV）化合物溶于有机溶剂及水的混合溶剂中，加入碱，升温反应，监测反应完毕，过滤，冰乙酸调pH至5～6，析出固体，干燥得目标产物。

优选的，所述步骤1）中的碱选自氢氧化钠、氢氧化钾或氢氧化钡，更优选氢氧化钠。

优选的，所述步骤1）中控温为60～65℃。

优选的，所述步骤2）中的缩合剂选自EDC/HOBt或BOP试剂，更优选EDC/HOBt。

优选的，所述步骤2）中的有机溶剂选自DMSO、DMA或NMP，更优选DMSO。

优选的，所述步骤3）中的有机溶剂选自甲醇、乙醇或异丙醇，更优选甲醇。

优选的，所述步骤3）中的碱选自氢氧化钠或氢氧化锂，更优选氢氧化钠。

特别优选的反应过程如下：

式（I）化合物是普拉曲沙降解杂质，目前无CAS号，尚未发现现有技术披露该化合物的制备和分离方法。本发明首先确定了能够高效、优质获得所需杂质的生产、分离工艺，为今后药品生产和质量控制起到重要作用。

附图说明

图1是实施例3中得到的N-[4-[1-[(2-氨基-4-羟基-6-蝶啶基)甲基]-3-丁炔-1-基]苯甲酰基]-L-谷氨酸的¹H-NMR图谱。

具体实施方式

应该理解，本领域技术人员基于此处公开的内容，可以对本发明进行各种不偏离本发明精神和范围内的各种修改和改进。它们应当都落在本申请的权利要求定义的专利保护范围内。此外，应该理解，此处提供的实施例仅用于说明本发明的目的，而不应解释为本发明的限制。

实施例1：

将化合物（II）（3.5g）、氢氧化钠（1.2g）、水（30ml）、DMSO（30ml）加入到250ml反应瓶中，升温至60～65℃反应，HPLC检测反应完毕，加入异丙醇（150ml），用冰乙酸调节pH至5～6，固体析出，搅拌打浆1小时后过滤，滤饼用水洗涤，真空干燥16小时，得化合物（III）2.6g，为黄色固体，收率74.1%。TLC点板检测为单点，TLC条件（展开剂为二氯甲烷:甲醇:乙酸=10:1:1，Rf=0.2）。

实施例2：

将化合物（III）（2.6g）、DMSO（14ml）加入到50ml反应瓶中，升温至25℃。加入L-谷氨酸二甲酯盐酸盐（1.9g）、HOBt（1.5g）、EDC（2.1g），加入三乙胺（4ml），TLC监测反应完毕，将反应液倒入水（200ml）中，固体析出，搅拌打浆1小时后过滤，滤饼用水洗涤，真空干燥16小时，经柱层析（二氯甲烷:甲醇=30:1）纯化得化合物（IV）2.2g，为淡红色固体，收率58.4%。经HPLC检测，纯度为97%。

实施例3：

将化合物（IV）（2.2g）、甲醇（7ml）、水（7ml）加入到25ml反应瓶中。加入氢氧化钠（0.5g），TLC监测反应完毕，过滤，滤液用冰乙酸调节pH至5～6，固体析出，搅拌打浆1小时后过滤，滤饼用水洗涤，真空干燥16小时，得目标化合物1.8g，为淡红色固体，收率86.6%。经HPLC检测，产品纯度为96%。

a、MS-ESI(m/z):477.23[M-H]-；

b、¹H-NMR(DMSO-d₆)δ:12.07(br,2H),8.49(d,J=7.6Hz,1H),8.35(d,J=2.4Hz,1H),7.77(d,J=8.0Hz,2H),7.37(d,J=7.6Hz,2H),6.98(s,2H),4.40-4.35(m,1H),3.45-3.42(m,1H),3.32-3.27(m,1H),3.20-3.14(m,1H),2.77(s,1H),2.61(d,J=5.6Hz,2H),2.35(t,J=7.4Hz,2H),2.10-2.07(m,1H),1.97-1.92(m,1H)。

Claims

1.如式（I）所示的普拉曲沙降解杂质，N-[4-[1-[(2-氨基-4-羟基-6-蝶啶基)甲基]-3-丁炔-1-基]苯甲酰基]-L-谷氨酸。

2.根据权利要求1所述的普拉曲沙降解杂质的制备方法，其特征在于，由如式（II）所示的4-[1-[(2,4-二氨基-6-蝶啶基)甲基]-3-丁炔-1-基]苯甲酸经取代、缩合、水解后得到目标产物。

3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述制备方法具体包括如下步骤：

2）缩合：将式（III）化合物、L-谷氨酸二甲酯盐酸盐、三乙胺、缩合剂及有机溶剂加入反应瓶中，反应完毕后，将反应液冲入水中，析出固体，过滤、干燥后柱层析得式（IV）化合物；

4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述步骤1）中的碱选自氢氧化钠、氢氧化钾或氢氧化钡，优选氢氧化钠。

5.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述步骤1）中控温为60～65℃。

6.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述步骤2）中的缩合剂选自EDC/HOBt或BOP试剂，优选EDC/HOBt。

7.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述步骤2）中的有机溶剂选自DMSO、DMA或NMP，优选DMSO。

8.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述步骤3）中的有机溶剂选自甲醇、乙醇或异丙醇，优选甲醇。

9.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述步骤3）中的碱选自氢氧化钠或氢氧化锂，优选氢氧化钠。