CN103520233B - 一种罗布麻叶总多酚的制备方法及用途 - Google Patents

一种罗布麻叶总多酚的制备方法及用途 Download PDF

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Abstract

本发明涉及一种罗布麻叶总多酚的制备方法及用途,该方法是将罗布麻叶干燥、提取、过滤、回收滤液、减压浓缩、回收乙醇,再将浓缩液通过大孔树脂进行纯化、真空干燥,得到罗布麻叶总多酚,其含量达到45-48%。通过本发明所述方法获得的罗布麻叶总多酚经初步的活性筛选试验证明:罗布麻叶总多酚具有蛋白酪氨酸磷酸酶(PTP1B)抑制剂作用,可用于治疗糖尿病的药物、保健品或食品的用途。

Description

一种罗布麻叶总多酚的制备方法及用途
技术领域
一种罗布麻叶总多酚的制备方法及用途。
背景技术
罗布麻(ApocynumvenetumL.)属于夹竹桃科罗布麻属植物,又称小花罗布麻、罗布红麻,据《中国植物志》记载,其又名野麻、野茶、红麻、茶叶花、泽漆麻、牛茶等。
罗布麻易于同大花罗布麻混淆,有人根据罗布麻与大花罗布麻植物学上的差异,将本属细分成两属三种,即罗布麻属和白麻属,罗布麻属有罗布麻(ApocynumvenetumL.),又称小花罗布麻、罗布红麻,也就是本发明的原材料;白麻属有两种植物:其一为大叶白麻(PoacynumHendersoniiWoodson),别名大花罗布麻,其二为白麻(PoacynumpictumSchrenkBaill),别名紫斑罗布麻。
罗布麻(ApocynumvenetumL.)作为中国传统中药,收载于2010版《中国药典》一部196页,“以其干燥叶入药,性味甘、苦、凉,归肝经,具有平肝安神,清热利水之功效,用于治疗肝阳眩晕,心悸失眠,神经衰弱,浮肿尿少,高血压,肾炎浮肿。”
罗布麻因其稀少珍贵,被称为“麻中极品”,是一种世界上稀有野生植物。罗布麻为夹竹桃科罗布麻属多年生宿根草本植物,直立半灌木,高一般1.5~3米,具有乳汁;枝条对生或互生,呈紫红或淡红色圆筒状,光滑无毛;叶对生,在分枝处为近生,具柄,叶柄基部及腋间具腺体;其叶质脆,其完整叶片呈椭圆状披针形或卵圆形状披针形,长1~5厘米,宽0.5~2厘米,颜色为淡绿或灰绿色,顶端急尖至钝,具有短尖头,两面均无毛,叶脉纤细于下表面突起,叶柄细,长约4毫米;花冠圆筒状钟形,花冠筒长约6-8毫米,直径3-2毫米,呈紫红色或粉红色。罗布麻分布于北纬36~55度之间的北美洲、欧洲及亚洲的温带地区。罗布麻主要生长在盐碱荒地、沙漠边缘、河流两岸、河泊周围、冲积平原及戈壁荒滩。在我国分布较广,西北、华北、华东及东北各省均有分布,但以新疆沙漠地区生长的罗布麻品质最佳。
罗布麻是一种具有非常优越的生态效益和社会效益的野生植物。罗布麻为多年生宿根草本植物,根系发达,可以生长在干旱的沙漠边缘和戈壁滩上,可以起到防风固沙,美化沙漠和戈壁的绿色生态植物,同时,罗布麻是一种开发潜力巨大的经济作物。罗布麻花小而多,芳香美丽,花期较长,一般花期在4~9月,是一种良好的蜜源植物;罗布麻嫩叶经蒸炒揉制加工后,制成罗布麻茶,以茶饮用,口感较好,不仅能解渴,还具有降血压、清凉去火、防头晕和中暑等功效。罗布麻以叶入药,收载于《中国药典》,具有多种药理活性。
根据对各地罗布麻化学成分研究,已定性的成分有黄酮类、鞣质类(单宁)、儿茶素类、脂肪酸醇酯类、醇类、香豆素类、有机酸类、糖类、氨基酸类、矿物元素等。近年来,大量的药理研究表明罗布麻叶提取物不仅具有降血压、降血脂、降糖、抗抑郁等药理活性,而且还具有抗过敏、抗癌、抗辐射、抗氧化和延缓衰老等保健功能。
Kim,D.W等研究了罗布麻叶的降血压机制,实验证明罗布麻叶提取液对给药后的大鼠自发性高血压心脏收缩压明显降低,钠、钾和蛋白质的排泄量均变化很小。张素琼等研究了罗布麻叶中的鞣质和黄酮类成分均可以调节血脂,改善动脉粥样硬化早期病变的作用。TakakoYokozawa等的研究表明,罗布麻中的酚类化合物对高级糖基化终产物的形成有抑制作用。郑梅竹等人通过经典抗抑郁评价模型小鼠强迫游泳实验,结果显示罗布麻总黄酮提取物具有明显的抗抑郁活性,其药效与氟西汀相似,并做了更进一步研究,结果显示罗布麻叶总黄酮提取物能够促进小鼠抗抑郁基因CREB、BDNF的表达。Fan,W.Z.等研究了罗布麻叶对肝脏的保护作用,结果发现罗布麻叶中的黄酮化合物对D-半乳糖胺和肿瘤坏死因子诱导的大鼠肝损伤显示出了强烈的抑制作用。其保护肝脏的作用机制可能为抑制血清中肿瘤坏死因子含量的增加。
罗布麻的主要成分是多酚类成分,主要包括鞣质类、黄酮类、儿茶素类,除此之外,氨基酸类等有效成分含量丰富,且均具有很好的生物活性。我国新疆是种植罗布麻的主要地区之一,对野生罗布麻进行大量的种植,种植面积广,并且由于新疆独特的地理位置、和气候条件,使得新疆产的罗布麻品质较好。因此,对罗布麻叶总多酚纯化富集工艺进行优化,利于更好的对其进行开发和利用,并为罗布麻相关产品的进一步开发提供物质基础,更好的发挥其药理作用和保健功效。本发明是通过溶剂提取的方法对罗布麻叶总多酚进行提取,再通过大孔树脂对其进行分离纯化,该方法简单、可行,便于工业放大。
发明内容
本发明目的在于,提供一种罗布麻叶总多酚的制备方法及用途,该方法是将罗布麻叶干燥、提取、过滤、回收滤液、减压浓缩、回收乙醇,再将浓缩液通过大孔树脂进行纯化、真空干燥,得到罗布麻叶总多酚,其含量达到45-48%。通过本发明所述方法获得的罗布麻叶总多酚经初步的活性筛选试验证明:罗布麻叶总多酚具有蛋白酪氨酸磷酸酶(PTP1B)抑制剂作用,可用于治疗糖尿病的药物或保健品的用途。
本发明所述的一种罗布麻叶总多酚的制备方法,按下列步骤进行:
a.取罗布麻干燥叶,用质量体积比10-30倍量的浓度为30-70%乙醇采用水浴加热提取,水浴温度为40-80℃,提取1-3次,每次提取时间1-3h,收集提取液,减压回收乙醇;
b.将步骤a提取液浓缩至总多酚浓度6.0mg/mL,再将浓缩液用大孔树脂进行纯化,吸附流速为1-3BV/h,先用水洗除杂,水洗体积为2-5BV,水洗流速为2-5BV/h进行脱除杂,再用浓度为30%-70%的乙醇洗脱,乙醇洗脱量为2-4BV,乙醇洗脱速度为2-4BV/h;
c.收集步骤b的乙醇洗脱液,真空干燥,即可得到罗布麻叶总多酚含量45-48%。
步骤b中提取液浓缩至总多酚浓度6.0mg/mL采用真空旋转蒸发仪,温度45℃。
步骤b中的大孔树脂型号为AB-8、D101、HPD-100、HPD-300、HPD-450、HPD-600或HPD-700。
所述方法获得的罗布麻叶总多酚在制备治疗降血糖的药物中的用途。
所述方法获得的罗布麻叶总多酚在制备治疗降血糖的保健品或食品添加剂中的用途。
本发明所述的罗布麻叶总多酚的制备方法,通过对不同型号的大孔树脂对纯化物总多酚含量的影响;大孔树脂不同上样液浓度对总多酚吸附率的影响;大孔树脂不同吸附速度对纯化物总多酚含量的影响;大孔树脂最大上样量,大孔树脂解吸剂对纯化物总多酚含量的影响;50%乙醇的动态解吸;大孔树脂除杂水用量;大孔树脂解吸测试如下:
10种大孔树脂对罗布麻叶总多酚的静态吸附与解吸试验:
取不同型号的相当于1g干树脂重量的各型号大孔树脂,95%乙醇浸泡过夜,纯水洗净,分别加入41mL一定质量浓度(ρ0)的提取液于250mL锥形瓶中,25℃震荡(90r/min)12h,取上清液,测得总多酚质量浓度ρe(mg/mL),滤去提取液后树脂经50mL纯水清洗,再加入50%乙醇50mL,于相同条件下进行解析,解吸3h后,过滤,测定解吸液中总多酚质量浓度为ρd(mg/mL),分别按下式计算吸附量、解吸量、解吸率,从中筛选出性能最好的大孔树脂进行后续实验,结果见图1;
吸附量(mg/g干树脂)=(ρ0e)×V0/m
解吸量(mg/g干树脂)=ρd×Vd/m
解吸率=解吸量×100%/吸附量
其中:ρ0—提取液中总多酚质量浓度(mg/mL),V0—提取液体积(mL),Vd—解吸液体积(mL),m—干树脂质量(g);
结果显示(图1),10种大孔树脂中,对罗布麻总多酚吸附量较高的是HPD-300、HPD-100和AB-8,但HPD-450的解吸量最大。综合考虑,最后选择吸附量最大,解吸量较好的HPD-300大孔树脂。
上样液浓度的筛选试验:
取13.4g(相当于4g干树脂)HPD-300大孔树脂,95%乙醇浸泡过夜,装柱,纯水洗净。将总多酚含量为12.36mg/mL的罗布麻叶总多酚提取液90ml,分别加水0、40ml,70ml、140ml水稀释(含量分别为12.4mg/mL、8.5mg/mL、6.0mg/mL、4.0mg/mL),以2BV/h的流速进行吸附,用纯水洗树脂至流出液无色,收集流出液,分别测定流出液中总多酚含量,计算不同上样液浓度下HPD-300树脂的吸附量。
如结果显示(图2),总多酚上样量相同,浓度不同的情况下,上样液浓度约为6.0mg/mL,吸附量达到最大,上样液浓度为4.0mg/mL时,其吸附量反而降低。因此,选择浓度6.0mg/mL为最佳上样液浓度。
吸附速率的筛选:
取13.4g(相当于4g干树脂)HPD-300大孔树脂,95%乙醇浸泡过夜,装柱,纯水洗净。取罗布麻叶提取液140ml(浓度为6.0mg/mL)4份,分别以1BV/h、2BV/h、3BV/h和4BV/h的流速进行吸附,用纯水洗树脂至流出液无色,收集流出液,分别测定流出液中总多酚含量,计算不同上样液浓度下HPD-300树脂的吸附量。
结果显示(图3),上样液流速从1至4BV/h,总多酚吸附量随着上样液流速的增加而减小,吸附速率为1BV/h时,总多酚吸附量最大,但考虑到工作效率,则选择2BV/为最佳上样流速。
泄露曲线考察试验:
取13.4(相当于4g干树脂)HPD-300大孔树脂,95%乙醇浸泡过夜,装柱,纯水洗净。取罗布麻叶提取液(总多酚浓度为6.0mg/mL),上HPD-300大孔树脂柱,以2BV/h流速进行吸附后,按照每次0.5BV收集残液,测定其总多酚含量,结果见图4:
从图4泄露曲线来看,上样量从8BV开始,总多酚泄露量增加明显,到9.5-10.5BV后趋于动态吸附平衡,10.5BV后泄露量又开始增加,确定上样量为8BV时,树脂柱达到吸附饱和。
解吸剂的筛选试验:
取13.4g(相当于4g干树脂)HPD-300大孔树脂,95%乙醇浸泡过夜,装柱,纯水洗净。取罗布麻提取液140mL(总多酚浓度为6.0mg/mL),5份,分别上HPD-300大孔树脂柱,以2BV/h流速进行吸附后,用纯水洗树脂至洗脱液无色,再分别用体积分数10%、30%、50%、70%和90%的乙醇溶液洗脱,流速为2BV/h,用量为6BV,收集解吸液,分别测定其总多酚含量,结果如图5:
从图5结果可以看出,总多酚解吸率与洗脱剂浓度的关系,用70%乙醇洗脱时,解吸率达到最大。70%乙醇与50%乙醇洗脱,解吸率相差很小,考虑到生产成本,则选择50%乙醇为洗脱剂。
解吸剂用量体积的筛选试验:
取13.4g(相当于4g干树脂)HPD-300大孔树脂,95%乙醇浸泡过夜,装柱,纯水洗净。取罗布麻叶提取液8BV(浓度为6.0mg/mL),上HPD-300大孔树脂柱,以1BV/h流速进行吸附后,用纯水洗树脂洗至流出液几近无色,以体积分数50%的乙醇溶液洗脱,按照每次0.5BV收集解吸液,测定其总多酚含量,结果见图6:
洗脱剂用量达到3BV时,洗脱下来的总多酚含量已经很少,继续增加洗脱剂的用量,趋势基本上稳定,由此确定洗脱剂的用量为3BV柱体积。
除杂水用量的筛选试验:
取13.4g(相当于4g干树脂)HPD-300大孔树脂,95%乙醇浸泡过夜,装柱,纯水洗净。取罗布麻叶提取液8BV(浓度为6.0mg/mL),上HPD-300大孔树脂柱,以2BV/h流速进行吸附后,用纯水洗树脂除杂,按照每次1BV收集流出液,测定其总多酚含量,结果见图7:
图7可以看出,用水量达到5BV时,流出液中总多酚的含量明显减少,且流出液接近无色,因此,除杂用水量选择5BV合适。
本发明所述的罗布麻叶总多酚的制备方法及用途,具有以下优点:
本发明所述的整个实验方法中,以食用乙醇和水作为溶剂,价格低廉、无毒,乙醇可回收再利用;采用的大孔树脂为目前国内医药行业常用的大孔树脂,安全性较高,价格较低,且可重复利用。通过本发明所述方法获得的罗布麻叶总多酚用Folin-Ciocalteu比色法测定总多酚含量,含量可达到45-48%。通过体外活性实验测定,具有良好的降血糖活性。
附图说明:
图1为本发明10种不同型号大孔树脂对纯化物总多酚吸附量和解吸量的影响图,其中—□—为吸附率,——为解吸率;
图2为本发明使用HPD-300大孔树脂,不同浓度上样液对纯化物总多酚含量的影响图;
图3为本发明使用HPD-300大孔树脂,不同吸附速度对纯化物总多酚含量的影响图;
图4为本发明使用HPD-300大孔树脂,吸附泄露曲线图;
图5为本发明使用HPD-300大孔树脂,不同浓度解吸剂对纯化物总多酚含量的影响图;
图6为本发明使用HPD-300大孔树脂,50%乙醇的动态解吸曲线图;
图7为本发明使用HPD-300大孔树脂,水洗除杂用量图。
具体实施方式:
本发明将结合具体实施例作进一步说明,但不限于本实施例范围;
实施例1.
a、取罗布麻干燥叶25g,用质量体积比10倍量的浓度为50%乙醇采用水浴加热回流,水浴温度为70℃,提取3次,时间2h,收集提取液,减压回收乙醇;
b、采用真空旋转蒸发仪,温度45℃,将步骤a提取液浓缩至总多酚浓度6.0mg/mL,再将浓缩液用型号为HPD-300大孔树脂进行纯化,上样液吸附速率为1BV/h,然后水洗,水洗脱体积为4BV,水洗流速为3BV/h,再用浓度为50%乙醇洗脱,乙醇洗脱量为4BV,乙醇洗脱速度为2BV/h;
c、收集步骤b的乙醇洗脱液,真空干燥,即可得到罗布麻叶总多酚含量为48%产品。
实施例2.
a、取罗布麻干燥叶25g,用质量体积比20倍量的浓度为40%乙醇采用水浴加热回流,水浴温度为60℃,提取2次,时间3h,收集提取液,减压回收乙醇;
b、采用真空旋转蒸发仪,温度45℃将步骤a提取液浓缩至质量浓度6.0mg/mL,再将浓缩液用型号为HPD-100大孔树脂进行纯化,上样液吸附速率为2BV/h,然后水洗,水洗脱体积为4BV,水洗流速为4BV/h,再用浓度为30%乙醇洗脱,乙醇洗脱量为3BV,乙醇洗脱速度为3BV/h;
c、收集步骤b的乙醇洗脱液,真空干燥,即可得到罗布麻叶总多酚46%产品。
实施例3.
a.取罗布麻干燥叶25g,用质量体积比25倍量的浓度为30%乙醇采用水浴加热回流,水浴温度为50℃,提取3次,时间2h,收集提取液,减压回收乙醇;
b.采用真空旋转蒸发仪,温度45℃将步骤a提取液浓缩至质量浓度6.0mg/mL,再将浓缩液用型号为HPD-450大孔树脂进行纯化,上样液吸附速率为1BV/h,然后水洗,水洗脱体积为3BV,水洗流速为2BV/h,再用浓度为40%乙醇洗脱,乙醇洗脱量为4BV,乙醇洗脱速度为2BV/h;
c.收集步骤b的乙醇洗脱液,真空干燥,即可得到罗布麻叶总多酚含量为47%产品。
实施例4.
a.取罗布麻干燥叶25g,用质量体积比15倍量的浓度为60%乙醇采用水浴加热回流,水浴温度为40℃,提取1次,时间3h,收集提取液,减压回收乙醇;
b.采用真空旋转蒸发仪,温度45℃将步骤a提取液浓缩至质量浓度6.0mg/mL,再将浓缩液用型号为HPD-600大孔树脂进行纯化,上样液吸附速率为3BV/h,然后水洗,水洗脱体积为2BV,水洗流速为5BV/h,再用浓度为40%乙醇洗脱,乙醇洗脱量为2BV,乙醇洗脱速度为3BV/h;
c.收集步骤b的乙醇洗脱液,真空干燥,即可得到罗布麻总多酚含量为45%产品。
实施例5.
a.取罗布麻干燥叶25g,用质量体积比10倍量的浓度为50%乙醇采用水浴加热回流,水浴温度为80℃,提取2次,时间2h,收集提取液,减压回收乙醇;
b.采用真空旋转蒸发仪,温度45℃将步骤a提取液浓缩至质量浓度6.0mg/mL,再将浓缩液用型号为HPD-700大孔树脂进行纯化,上样液吸附速率为3BV/h,然后水洗,水洗脱体积为4BV,水洗流速为3BV/h,再用浓度为50%乙醇洗脱,乙醇洗脱量为4BV,乙醇洗脱速度为4BV/h;
c.收集步骤b的乙醇洗脱液,真空干燥,即可得到罗布麻总多酚含量为45%产品。
实施例6.
a.取罗布麻干燥叶25g,用质量体积比30倍量的浓度为70%乙醇采用水浴加热回流,水浴温度为70℃,提取3次,时间2h,收集提取液,减压回收乙醇;
b.采用真空旋转蒸发仪,温度45℃将步骤a提取液浓缩至质量浓度6.0mg/mL,再将浓缩液用大孔树脂HPD-600进行纯化,上样液吸附速率为1BV/h,然后水洗,水洗脱体积为5BV,水洗流速为4BV/h,再用浓度为70%乙醇洗脱,乙醇洗脱量为3BV,乙醇洗脱速度为2BV/h;
c.收集步骤b的乙醇洗脱液,真空干燥,即可得到罗布麻叶总多酚含量为47%产品。
实施例7.
a.取罗布麻干燥叶25g,用质量体积比20倍量的60%乙醇采用水浴加热回流,水浴温度为60℃,提取1次,时间3h,收集提取液,减压回收乙醇;
b.采用真空旋转蒸发仪,温度45℃将步骤a提取液浓缩至质量浓度6.0mg/mL,再将浓缩液用型号为AB-8大孔树脂进行纯化,上样液吸附速率为2BV/h,然后水洗,水洗脱体积为3BV,水洗流速为3BV/h,再用浓度为60%乙醇洗脱,乙醇洗脱量为3BV,乙醇洗脱速度为3BV/h;
c.收集步骤b的乙醇洗脱液,真空干燥,即可得到罗布麻叶总多酚含量为46%产品。
实施例8.
a.取罗布麻干燥叶25g,用质量体积比15倍量的50%乙醇采用水浴加热回流,水浴温度为60℃,提取2次,时间3h,收集提取液,减压回收乙醇;
b.采用真空旋转蒸发仪,温度45℃将步骤a提取液浓缩至质量浓度6.0mg/mL,再将浓缩液用型号为D101大孔树脂进行纯化,上样液吸附速率为2BV/h,然后水洗,水洗脱体积为4BV,水洗流速为3BV/h,再用浓度为60%乙醇洗脱,乙醇洗脱量为4BV,乙醇洗脱速度为2BV/h;
c.收集步骤b的乙醇洗脱液,真空干燥,即可得到罗布麻叶总多酚含量为45%产品。
实施例9.
罗布麻叶总多酚不同洗脱物降血糖体外筛选——蛋白络氨酸磷酸酶1B(PTP1B)抑制实验:
a.取罗布麻干燥叶,用质量体积比15倍量的50%乙醇采用水浴加热回流,水浴温度为70℃,提取2次,时间3h,收集提取液,减压回收乙醇;
b.采用真空旋转蒸发仪,温度45℃将步骤a提取液浓缩至质量浓度为6.0mg/mL,取5份,分别将5份浓缩液上大孔树脂进行纯化,上样液吸附速率为1BV/h,然后水洗,水洗脱体积为5BV,水洗流速为4BV/h,再用浓度分别为10%、30%、50%、70%、90%的乙醇溶液洗脱,洗脱剂量均为4BV,洗脱速度均为2BV/h;
c.分别收集步骤b乙醇洗脱液,真空干燥,即分别得到组分为10%、30%、50%、70%和90%乙醇洗脱固形物。
将所得组分为10%、30%、50%、70%和90%乙醇洗脱物和粗提物进行降糖体外筛选,以上样品均用水溶解成10mg/mL、5mg/mL、2.5mg/mL、1.25mg/mL、0.62mg/mL,0.31mg/mL、0.15mg/mL、0.078mg/mL、0.039mg/mL、0.020mg/mL的溶液;阳性对照化合物为蛋白络氨酸磷酸酶1B(PTP1B)抑制剂为3-(3,5-二溴-4-羟基-苯甲酰基)-2-乙基-苯并呋喃-6-磺酸基-(4-(噻唑-2-胺磺酰)-苯基)-酰胺;取179μLPTP1B酶工作液加入96孔板,再加1μL样品为样品组;取179μLPTP1B酶工作液加入96孔板,再加1μL样品为样品组,20μLPBS缓冲液为样品空白组,取179μLPTP1B酶工作液加入96孔板,再加1μL水,20μLpNPP为酶活组;取179μLPTP1B酶工作液加入96孔板,再加1μL水,20μLPBS缓冲液为酶活空白组;震匀后反应5min。再放置5min后,加入20μLpNPP,震匀后室温避光反应30min;以酶标仪405nm处检测OD值,以不加底物为空白(用水代替),根据下式计算抑制率,用IC50计算软件得出样品和阳性对照的IC50值。
抑制率(%)=[1-(样品组OD值-空白组OD值)/(酶活组OD值-酶活空白组)]×100%;
结果显示:罗布麻叶总多酚不同洗脱物降糖体外活性筛选——蛋白络氨酸磷酸酶1B(PTP1B)抑制实验的IC50见表1:
表1
结果表明罗布麻总多酚不同洗脱物均具有较强的降糖活性,经树脂纯化后的总多酚对PTP1B抑制率明显高于纯化前的罗布麻提取物的活性,表明该纯化方法确实可行,可以用于开发具有降糖作用的药物、保健品和食品添加剂的原料。

Claims (2)

1.一种罗布麻叶总多酚的制备方法,其特征在于按下列步骤进行:
a.取罗布麻干燥叶,用质量体积比10-30倍量的浓度为30-70%乙醇采用水浴加热提取,水浴温度为40-80℃,提取1-3次,每次提取时间1-3h,收集提取液,减压回收乙醇;
b.将步骤a提取液浓缩至总多酚浓度6.0mg/mL,再将浓缩液用大孔树脂型号为D101、HPD-300进行纯化,吸附流速为1-3BV/h,先用水洗除杂,水洗体积为2-5BV,水洗流速为2-5BV/h进行脱除杂,再用浓度为30%-70%的乙醇洗脱,乙醇洗脱量为2-4BV,乙醇洗脱速度为2-4BV/h,其中取液浓缩至总多酚浓度6.0mg/mL采用真空旋转蒸发仪,温度45℃;
c.收集步骤b的乙醇洗脱液,真空干燥,即得到罗布麻叶总多酚含量45-48%。
2.如权利要求1中所述方法获得的罗布麻叶总多酚在制备治疗降血糖的药物中的用途。
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