桑白皮制品及其制备方法
技术领域
本发明属于中药提取领域,具体涉及一种桑白皮制品及其制备方法。
背景技术
目前研究表明,黑色素生成的含量决定了皮肤的颜色。其中在色素的产生调节过程中酪氨酸酶被称为“关键酶”,首先酪氨酸在酪氨酸酶作用下形成多巴,多巴进一步氧化生成多巴醌,多巴醌经聚合及氧化反应生成多巴色素,此后经多种酶的作用下最终生成真黑色素,此外多巴醌在半胱氨酸参与下发生其他反应生成脱黑色素。酪氨酸酶不仅在色素的产生方面起着至关重要的作用,调节色素生成量也是通过酶氨酸酶实现的,可以把酪氨酸酶看作是色素工厂机器流水线的总开关。因此,通过抑制酪氨酸酶活性即可减少黑色素的生成,从而达到美白的效果。市场上的美白产品常用添加剂包括了氢醌,曲酸,熊果苷等,部分的化合物已被报道致敏,致癌等不良效果,长期使用会严重危害人体健康,因此寻找更安全,有效的美白添加剂有着极其重要的意义。
大量研究结果和临床实验证明了,中药及其提取物具有性质平和,耐受性好,毒副作用小,作用持久等独特优点,因此,植物来源的酪氨酸酶抑制剂迎合了人们的安全需求,适合作为新的安全有效的美白添加剂。
桑白皮为桑科植物桑(Morus alba L.)的干燥根皮,其中主要含有多种黄酮,生物碱和多糖类等有效成分,有泻肺平喘,利水消肿功效。现代药理研究表明它具有降压,利尿,镇静镇痛,抗炎,抗菌,抑制血小板聚集,降糖等作用。有文献报道桑白皮水提溶液具有一定酪氨酸酶抑制活性,但是未对桑白皮水提物进行进一步分离并研究其美白效果。如文献《桑白皮水提物美白机制研究》(2010,40(6):444-447)报道通过回流提取得到质量浓度为120mg/mL的桑白皮水提物,其质量浓度为12mg/mL时抑制酪氨酸酶的抑制率约为75%,其中阳性对照为1.42mg/mL的VC,其抑制率为90%;文献《白芍及桑白皮中酪氨酸酶抑制剂的筛选及其活性成分的抑制动力学研究》中将干燥桑白皮粉末室温下用15倍体积分数为70%乙醇将样品浸提3次,过滤,滤液在60℃恒温下减压浓缩得浸膏,并用蒸馏水分散依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇各萃取三次,分别减压浓缩,得到桑白皮石油醚相、氯仿相、乙酸乙酯相、正丁醇相以及萃取后剩余的水相,浓度为1.00g/mg时,乙酸乙酯萃取相对酪氨酸酶的抑制率30.55±0.06%,熊果苷的抑制率为23.21±0.06%。目前仍然需要对桑白皮提取物的酪氨酸酶抑制活性进行进一步研究,开发更优酪氨酸酶抑制效果的桑白皮提取物。
发明内容
本发明的目的是提供一种桑白皮制品的制备方法及根据该制备方法得到的桑白皮制品,该制备方法得到的桑白皮制品有强的氨酸酶抑制作用,具有更好的美白效果,更安全。
一方面,本发明提供一种桑白皮制品的制备方法,包括以下步骤:
(1)提取:桑白皮在水中提取得到桑白皮水提取物,其中提取温度为70℃-100℃;
2)分离:将步骤(1)中的桑白皮水提取物进行大孔吸附树脂分离;所述分离为用0-55%的乙醇水溶液对桑白皮水提取物进行等度洗脱或梯度洗脱,一起或分段收集0-55%的乙醇水洗脱液,得到桑白皮制品;
任选的,步骤(2)中分离后还包括对一起或分段收集的洗脱液进行浓缩步骤。
在一些实施方案中,所述浓缩步骤为:洗脱液进行减压蒸馏或常压蒸馏使洗脱液中溶剂大部分蒸发,其中所述溶剂包括乙醇和水。
在另一些实施方案中,所述浓缩步骤为:洗脱液先进行减压蒸馏或常压蒸馏使洗脱液中溶剂大部分蒸发至无醇味,然后将所得到的浓缩物进一步进行真空冷冻干燥得到桑白皮制品。
在一些实施方案中,所述分离为先用0%-35%乙醇水溶液对桑白皮水提取物进行等度洗脱或梯度洗脱,和再用40%-55%乙醇水溶液进行等度洗脱或梯度洗脱,一起或分段收集40%-55%乙醇水洗脱液,得到桑白皮制品。
在一些实施方案中,步骤(2)中,所述分离为先用0-15%乙醇水溶液对桑白皮水提取物进行等度洗脱或梯度洗脱,和再用25%-35%乙醇水溶液进行等度洗脱或梯度洗脱,一起或分段收集25%-35%乙醇水洗脱液,得到桑白皮制品。
在一些实施方案中,步骤(2)中,所述分离为先用水对桑白皮水提取物进行洗脱,和再用7-15%乙醇水溶液进行等度洗脱或梯度洗脱,一起或分段收集7-15%乙醇水洗脱液,得到桑白皮制品。
在一些实施方案中,步骤(2)中,所述分离为用水对桑白皮水提取物进行洗脱,收集水洗脱液,得到桑白皮制品;或
步骤(2)中,所述分离为先用水对桑白皮水提取物进行洗脱,和再用7%-15%乙醇水溶液进行等度洗脱或梯度洗脱,收集水洗脱液和/或7%-15%乙醇水洗脱液,得到桑白皮制品;或
步骤(2)中,所述分离为先用水对桑白皮水提取物进行洗脱,然后用7%-15%乙醇水溶液进行等度洗脱或梯度洗脱,再用25%-35%乙醇水溶液进行等度洗脱或梯度洗脱,收集水洗脱液、7%-15%乙醇水洗脱液和/或25%-35%乙醇水洗脱液,得到桑白皮制品;或
步骤(2)中,所述分离为先用水对桑白皮水提取物进行洗脱、然后用7%-15%乙醇水溶液进行等度洗脱或梯度洗脱、然后用25%-35%乙醇水溶液进行等度洗脱或梯度洗脱和再用40%-55%乙醇水溶液进行等度洗脱或梯度洗脱,收集水洗脱液、7%-15%乙醇水洗脱液、25%-35%乙醇水洗脱液和/或40%-55%乙醇水洗脱液,得到桑白皮制品。
在一些实施方案中,步骤(2)中,所述分离为用水对桑白皮水提取物进行洗脱,收集水洗脱液,得到桑白皮制品;或
步骤(2)中,所述分离为依次用水、10%乙醇水溶液对桑白皮水提取物进行洗脱,收集水洗脱液和/或10%乙醇水洗脱液,得到桑白皮制品;或
步骤(2)中,所述分离为依次用水、10%乙醇水溶液、30%乙醇水溶液对桑白皮水提取物进行洗脱,收集水洗脱液、10%乙醇水洗脱液和/或30%乙醇水洗脱液,得到桑白皮制品;或
步骤(2)中,所述分离为依次用水、10%乙醇水溶液、30%乙醇水溶液和50%乙醇水溶液对桑白皮水提取物进行洗脱,收集水洗脱液、10%乙醇水洗脱液、30%乙醇水洗脱液和/或50%乙醇水洗脱液,得到桑白皮制品。
在一些实施方案中,步骤(2)中的洗脱速度为(0.9-3.6)BV/h。
在一些实施方案中,步骤(2)中将桑白皮水提取物先配制成浓度为40-55mg/mL的水溶液,再进行大孔吸附树脂湿法装柱上样,吸附时间为2-6小时,然后进行分离。
在一些实施方案中,步骤(2)中,依次用水、10%乙醇水溶液、30%乙醇水溶液和50%乙醇水溶液对桑白皮水提取物进行洗脱的洗脱量各为5BV。
在一些实施方案中,步骤(1)中桑白皮为桑白皮粉末,提取时间为4-6小时,提取所用的水体积与桑白皮原料质量之比为20-50mL/g,提取温度为90℃-100℃。
在一些实施方案中,本发明所述的桑白皮制品的制备方法,包括以下步骤:
(1)提取:桑白皮粉末在水中提取4-6小时得到桑白皮水提取物,其中提取所用的水体积与桑白皮原料质量之比为20-50mL/g,提取温度为90℃-100℃;
(2)分离:将步骤(1)中的桑白皮提取物进行大孔吸附树脂湿法装柱上样;然后依次用纯水,10%乙醇水溶液,30%乙醇水溶液,50%乙醇水溶液对桑白皮水提取物以(0.9-3.6)BV/h的速度进行洗脱,收集10%乙醇水洗脱液、30%乙醇水洗脱液和/或50%乙醇水洗脱液,得到桑白皮制品。
另一方面,本发明提供一种根据本发明所述的桑白皮制品的制备方法得到的桑白皮制品。
在一些实施方案中,步骤(2)中,所述分离为先用水对桑白皮水提取物进行洗脱、然后用7%-15%乙醇水溶液进行等度洗脱或梯度洗脱、然后用25%-35%乙醇水溶液进行等度洗脱或梯度洗脱和再用40%-55%乙醇水溶液进行等度洗脱或梯度洗脱,一起或分段收集40%-55%乙醇水洗脱液,得到桑白皮制品。
在一些实施方案中,步骤(2)中,所述分离为依次用水、10%乙醇水溶液、30%乙醇水溶液和50%乙醇水溶液对桑白皮水提取物进行洗脱,收集50%乙醇水洗脱液,得到桑白皮制品。
在一些实施方案中,本发明提供一种桑白皮制品的制备方法,包括以下步骤:
(1a)干燥桑白皮药材粉碎,过筛,然后将过筛后的粉末进行水回流得回流提取液,其中提取时间为4h,提取所用的水体积与桑白皮原料质量之比为20-50mL/g;
(2a)将步骤(1)中的回流提取液真空冷冻干燥得到桑白皮提取液冻干品,真空冷冻干燥条件是:真空度0.1Mbar,温度-70℃;
(3a)D101大孔吸附树脂湿法装柱上样:将步骤(2a)中的桑白皮提取液冻干品配制成40-55mg/mL的冻干品水溶液,并采用大孔吸附树脂湿法装柱,以3.6BV/h流速上样,吸附2-6小时;
(4a)乙醇洗脱并浓缩:依次用纯水,10%乙醇溶液,30%乙醇溶液,50%乙醇溶液对步骤(3)中的大孔吸附树脂湿法装柱后的样品分别洗脱5BV,洗脱流速为(0.9-3.6)BV,依次合并相同溶剂比例的洗脱液并浓缩至无醇味;
(5a)将步骤(4a)中的浓缩后的样品分别真空冷冻干燥,得到纯水洗脱液的桑白皮冻干品、10%乙醇水洗脱液的桑白皮冻干品、30%乙醇水洗脱液的桑白皮冻干品、50%乙醇水洗脱液的桑白皮冻干品,其中真空冷冻干燥条件是:真空度0.1Mbar,温度-70℃。
相关术语定义说明
本发明中“%”表示含量百分比或者质量分数,例如,50%乙醇溶液表示乙醇质量占总乙醇水溶液质量的50%。
本发明中所述的乙醇溶液或乙醇水溶液均表示乙醇的水溶液。本发明中“mL/g”表示毫升/克,指1g样品配制成混合液所需的溶剂体积量是多少毫升,比如,本发明中30mL/g表示1g桑白皮提取液冻干品配制冻干品水溶液所需的水体积量为30mL,20-50mL/g表示1g桑白皮提取液冻干品配制冻干品水溶液所需的水体积量为20-50mL。
本发明中“mg/mL”表示毫克/毫升,指1mL溶剂所对应的溶质质量是多少毫克,比如,本发明中50mg/mL表示1mL水溶剂所对应的桑白皮水提取冻干粉质量是50mg,40-55mg/mL表示1mL水溶剂所对应的桑白皮水提取冻干粉质量是40-55mg。
本发明中“BV”代表树脂体积的相对值,比如在表达流量等数据时会使用BV,例如“BV/h”表示洗脱液每小时流量为树脂装填体积量的倍数,1.8BV/h表示洗脱液每小时流量为树脂装填体积量的1.8倍,0.9-3.6BV/h表示洗脱液每小时流量为树脂装填体积量的0.9-3.6倍。
本发明中“等度洗脱”指整个洗脱过程用同一个流动相进行洗脱。例如,本发明中“用40-55%的乙醇水溶液对桑白皮水提取物进行等度洗脱或梯度洗脱”,其中的“等度洗脱”表示可使用40%-55%乙醇水溶液之间的任意一个乙醇浓度溶液进行洗脱,保持整个洗脱过程中的乙醇浓度不变,即流动相不变。
本发明中“梯度洗脱”指整个洗脱过程中通过不断改变流动相的浓度配比来进行洗脱。例如,本发明中“用40-55%的乙醇水溶液对桑白皮水提取物进行等度洗脱或梯度洗脱”,其中的“梯度洗脱”表示整个洗脱过程中通过改变流动相乙醇水溶液的浓度配比进行洗脱,且流动相的浓度配比改变的范围为40%-55%。
术语“浓缩”,指对溶液或混合液通过减压蒸馏、常压蒸馏、冷冻干燥等方法使溶剂蒸发而提高溶液或混合液中有用成分的浓度。本发明中“浓缩”指提高洗脱液中桑白皮水提取物成分的浓度。在一些实施方案中,本发明“浓缩”指通过减压蒸馏、常压蒸馏、冷冻干燥等方法,或这些浓缩方法的组合使洗脱液中溶剂蒸发至几乎不存在从而得到桑白皮制品。在一些实施方案中,本发明“浓缩”指洗脱液先进行减压蒸馏或常压蒸馏使洗脱液中溶剂大部分蒸发,然后将所得到的浓缩物进一步进行真空冷冻干燥得到桑白皮制品。
在本发明的上下文中,本发明给定的数值或数值范围均表示在可接受的误差范围内,比如误差范围适当地在5%以内、4%以内、3%以内、2%以内、1%以内。每当公开一个具有N值的数字时,任何具有N+/–1%,N+/–2%,N+/–3%,N+/–5%以内的数字被明确地公开,其中“+/–”是指加或减。例如,本发明中用50%乙醇水溶液进行洗脱,指用45%-55%乙醇水溶液之间的任意一个浓度值进行洗脱均在本发明的包护范围内。
本发明中的“Mbar”表示压力单位毫巴,1Mbar=0.1KPa,即1毫巴=0.1千帕。
本发明中的“℃”表示摄氏度。
本发明的有益效果为:
本发明提供的一种桑白皮制品的制备方法得到桑白皮制品具有抑制酪氨酸酶的效果,且效果明显优于常见的天然酪氨酸酶抑制剂熊果苷;尤其50%乙醇洗脱得到的桑白皮制品对酪氨酸酶的IC50抑制效果可达到熊果苷对酪氨酸酶的IC50抑制效果的72倍,是Vc对酪氨酸酶的IC50抑制效果的11倍,该桑白皮制品可以为安全美白产品的开发提供参考。
具体实施方式
以下所述的是本发明的优选实施方式,本发明所保护的不限于以下优选实施方式。应当指出,对于本领域的技术人员来说在此发明创造构思的基础上,做出的若干变形和改进,都属于本发明的保护范围。实施例中所用的原料、仪器均可以通过商业途径获得。
本发明实施例中使用的D101型大孔树脂购买自天津南开合成科技有限公司,规格:净品级。
实施例1:
将干燥的桑白皮药材粉碎,过3号筛,取5g,采用纯水为提取溶剂,提取溶剂体积与桑白皮原料质量之比为30mL/g,回流提取温度为100℃,提取时间4小时,得提取液,将提取液在冷冻干燥机真空度0.1Mbar,冷肼温度-70℃条件下干燥,得桑白皮提取液冻干粉末。取冻干粉末加水溶剂,得50mg/mL浓度的溶液,采用D101大孔吸附树脂湿法装柱,以3.6BV/h流速上样,吸附4小时。随后以1.8BV/h流速,依次采用纯水,10%乙醇溶液,30%乙醇溶液,50%乙醇溶液分别洗脱5BV,合并相同溶剂比例洗脱液。分别将洗脱液浓缩至无醇味,在冷冻干燥机真空度0.1Mbar,冷肼温度-70℃条件下干燥,得到4个桑白皮洗脱液冻干样品(桑白皮-水洗脱液冻干粉末:1-1;桑白皮-10%乙醇洗脱冻干粉:1-2;桑白皮-30%乙醇洗脱冻干粉:1-3;桑白皮-50%乙醇洗脱冻干粉末:1-4)。
实施例2:
将干燥的桑白皮药材粉碎,过3号筛,取5g,采用纯水为提取溶剂,提取溶剂体积与桑白皮原料质量之比为30mL/g,回流提取温度为100℃,提取时间4小时,得提取液,将提取液在冷冻干燥机真空度0.1Mbar,冷肼温度-70℃条件下干燥,得桑白皮提取液冻干粉末。取冻干粉末加水溶剂,得50mg/mL浓度的溶液,采用D101大孔吸附树脂湿法装柱,以3.6BV/h流速上样,吸附2小时。随后以1.8BV/h流速,依次采用纯水,10%乙醇溶液,30%乙醇溶液,50%乙醇溶液分别洗脱5BV,合并相同溶剂比例洗脱液。分别将洗脱液浓缩至无醇味,在冷冻干燥机真空度0.1Mbar,冷肼温度-70℃条件下干燥,得到4个桑白皮洗脱液冻干样品(桑白皮-水洗脱液冻干样品:2-1;桑白皮-10%乙醇洗脱冻干样品:2-2;桑白皮-30%乙醇洗脱冻干样品:2-3;桑白皮-50%乙醇洗脱冻干样品:2-4)。
实施例3:
将干燥的桑白皮药材粉碎,过3号筛,取5g,采用纯水为提取溶剂,提取溶剂体积与桑白皮原料质量之比为30mL/g,回流提取温度为100℃,提取时间4小时,得提取液,将提取液在冷冻干燥机真空度0.1Mbar,冷肼温度-70℃条件下干燥,得桑白皮提取液冻干粉末。取冻干粉末加水溶剂,得50mg/mL浓度的溶液,采用D101大孔吸附树脂湿法装柱,以3.6BV/h流速上样,吸附6小时。随后以1.8BV/h流速,依次采用纯水,10%乙醇溶液,30%乙醇溶液,50%乙醇溶液分别洗脱5BV,合并相同溶剂比例洗脱液。分别将洗脱液浓缩至无醇味,在冷冻干燥机真空度0.1Mbar,冷肼温度-70℃条件下干燥,得到4个桑白皮洗脱液冻干样品(桑白皮-水洗脱液冻干样品:3-1;桑白皮-10%乙醇洗脱冻干样品:3-2;桑白皮-30%乙醇洗脱冻干样品:3-3;桑白皮-50%乙醇洗脱冻干样品:3-4)。
实施例4:
将干燥的桑白皮药材粉碎,过3号筛,取5g,采用纯水为提取溶剂,提取溶剂体积与桑白皮原料质量之比为30mL/g,回流提取温度为100℃,提取时间4小时,得提取液,将提取液在冷冻干燥机真空度0.1Mbar,冷肼温度-70℃条件下干燥,得桑白皮提取液冻干粉末。取冻干粉末加水溶剂,得50mg/mL浓度的溶液,采用D101大孔吸附树脂湿法装柱,以3.6BV/h流速上样,吸附4小时。随后以0.9BV/h流速,依次采用纯水,10%乙醇溶液,30%乙醇溶液,50%乙醇溶液分别洗脱5BV,合并相同溶剂比例洗脱液。分别将洗脱液浓缩至无醇味,在冷冻干燥机真空度0.1Mbar,冷肼温度-70℃条件下干燥,得到4个桑白皮洗脱液冻干样品(桑白皮-水洗脱液冻干样品:4-1;桑白皮-10%乙醇洗脱冻干样品:4-2;桑白皮-30%乙醇洗脱冻干样品:4-3;桑白皮-50%乙醇洗脱冻干样品:4-4)。
实施例5:
将干燥的桑白皮药材粉碎,过3号筛,取5g,采用纯水为提取溶剂,提取溶剂体积与桑白皮原料质量之比为30mL/g,回流提取温度为100℃,提取时间4小时,得提取液,将提取液在冷冻干燥机真空度0.1Mbar,冷肼温度-70℃条件下干燥,得桑白皮提取液冻干粉末。取冻干粉末加水溶剂,得50mg/mL浓度的溶液,采用D101大孔吸附树脂湿法装柱,以3.6BV/h流速上样,吸附4小时。随后以3.6BV/h流速,依次采用纯水,10%乙醇溶液,30%乙醇溶液,50%乙醇溶液分别洗脱5BV,合并相同溶剂比例洗脱液。分别将洗脱液浓缩至无醇味,在冷冻干燥机真空度0.1Mbar,冷肼温度-70℃条件下干燥,得到4个桑白皮洗脱液冻干样品(桑白皮-水洗脱液冻干样品:5-1;桑白皮-10%乙醇洗脱冻干样品:5-2;桑白皮-30%乙醇洗脱冻干样品:5-3;桑白皮-50%乙醇洗脱冻干样品:5-4)。
实施例6
取3个不同厂家桑白皮,将干燥的桑白皮药材粉碎,过3号筛,取5g,采用纯水为提取溶剂,提取溶剂体积与桑白皮原料质量之比为30mL/g,回流提取温度为100℃,提取时间4小时,得提取液,将提取液在冷冻干燥机真空度0.1Mbar,冷肼温度-70℃条件下干燥,得桑白皮提取液冻干粉末。取冻干粉末加水溶剂,得50mg/mL浓度的溶液,采用D101大孔吸附树脂湿法装柱,以3.6BV/h流速上样,吸附4小时。随后以1.8BV/h流速,依次采用纯水,10%乙醇溶液,30%乙醇溶液,50%乙醇溶液分别洗脱5BV,合并50%乙醇洗脱液,浓缩至无醇味,在冷冻干燥机真空度0.1Mbar,冷肼温度-70℃条件下干燥,得到3批桑白皮50%乙醇洗脱液冻干样品。
实施例7酪氨酸酶活力测定:
实验溶液:配制磷酸缓冲液(pH=6.50),5.0μmol/mL的酪氨酸溶液、200U/mL的酪氨酸酶溶液。将熊果苷分别配制成质量浓度为4.0,2.5,2.0,1.0,0.5mg/mL的5个梯度溶液;将Vc分别配制成质量浓度为0.2,0.1,0.05,0.02,0.01mg/mL的5个梯度溶液。
将实施例1-5获得的桑白皮水提冻干样品分别配制成质量浓度为2.0,1.0,0.8,0.4,0.2mg/mL的5个梯度溶液;将实施例1-5获得的桑白皮10%乙醇洗脱冻干样品分别配制成质量浓度为2.0,1.0,0.8,0.4,0.2mg/mL的5个梯度溶液;将实施例1-5获得的桑白皮30%乙醇洗脱冻干样品分别配制成质量浓度为1.0,0.8,0.6,0.4,0.2mg/mL的5个梯度溶液;将实施例1-5获得的桑白皮50%乙醇洗脱冻干样品分别配制成质量浓度为0.1,0.08,0.06,0.04,0.02mg/mL的5个梯度浓度;
上述溶液均使用磷酸缓冲液进行配制。
按表1依次加入酪氨酸溶液(5.0μmol/mL),磷酸缓冲液(pH=6.50),实施例1-5获得的桑白皮洗脱液冻干样品,酪氨酸酶溶液(200U/mL),混合均匀,置于25℃水浴反应50分钟,加入10μL甲酸溶液,混合均匀,移取反应溶液于475nm检测吸光值,计算抑制率,并换算为IC50值(mg/mL)。
表1反应溶液信息表
抑制率计算公式:
注:A供试品——桑白皮洗脱液冻干样品溶液的吸光值(桑白皮供试品是指实施例1-5获得的桑白皮洗脱液冻干样品溶液)
A供试品空白——桑白皮供试品空白反应溶液吸光值
A对照——酪氨酸对照品反应溶液吸光值
A对照空白——酪氨酸对照品空白反应溶液吸光值
实验结果:
表2实施例1酪氨酸酶活力测定结果
名称 |
IC50(mg/mL) |
桑白皮-水提冻干样品 |
0.364 |
桑白皮-10%乙醇洗脱冻干样品:1-2 |
0.293 |
桑白皮-30%乙醇洗脱冻干样品:1-3 |
0.172 |
桑白皮-50%乙醇洗脱冻干样品:1-4 |
0.014 |
熊果苷 |
1.013 |
Vc |
0.158 |
表3实施例2酪氨酸酶活力测定结果
名称 |
IC50(mg/mL) |
桑白皮-10%乙醇洗脱冻干样品:2-1 |
0.333 |
桑白皮-30%乙醇洗脱冻干样品:2-2 |
0.126 |
桑白皮-50%乙醇洗脱冻干样品:2-3 |
0.016 |
表4实施例3酪氨酸酶活力测定结果
名称 |
IC50(mg/mL) |
桑白皮-10%乙醇洗脱冻干样品:3-2 |
0.336 |
桑白皮-30%乙醇洗脱冻干样品:3-3 |
0.125 |
桑白皮-50%乙醇洗脱冻干样品:3-4 |
0.014 |
表5实施例4酪氨酸酶活力测定结果
名称 |
IC50(mg/mL) |
桑白皮-30%乙醇洗脱冻干样品:4-3 |
0.137 |
桑白皮-50%乙醇洗脱冻干样品:4-4 |
0.011 |
表6实施例5酪氨酸酶活力测定结果
名称 |
IC50(mg/mL) |
桑白皮-30%乙醇洗脱冻干样品:5-3 |
0.132 |
桑白皮-50%乙醇洗脱冻干样品:5-4 |
0.057 |
表7实施例6酪氨酸酶活力测定结果
名称 |
IC50(mg/mL) |
桑白皮(京皖)-50%乙醇洗脱冻干品 |
0.018 |
桑白皮(康德瑞琪)-50%乙醇洗脱冻干品 |
0.014 |
桑白皮(迎辉堂)-50%乙醇洗脱冻干品 |
0.016 |
结论:根据表2-7的结果,本发明桑白皮制品的制备方法所得的桑白皮制品具有明显的酪氨酸酶抑制活性,尤其本发明桑白皮制品的制备方法所得的50%乙醇水洗脱液的桑白皮冻干品相比熊果苷、Vc均具有更强的酪氨酸酶抑制活性。
在本说明书的描述中,参考术语“一些实施方案”、“一个实施例”、“一些实施例”、“示例”、“具体示例”或“一些示例”等的描述意指结合该实施例或示例描述的具体特征、结构、材料或者特点包含于本发明的至少一个实施例或示例中。在本说明书中,对上述术语的示意性表述不一定指的是相同的实施例或示例。而且,描述的具体特征、结构、材料或者特点可以在任何的一个或多个实施例或示例中以合适的方式结合。
当然,本发明还可有其它多种实施例,在不背离本发明精神及其实质的情况下,熟悉本领域的技术人员当可根据本发明作出各种相应的改变和变形,但这些相应的改变和变形都应属于本发明所附的权利要求的保护范围。