CN105943575A - 一种从中药蛇床子中提取总香豆素的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种从中药蛇床子中提取总香豆素的方法，属于中药有效成分提取技术领域。包括以下步骤：将干燥的蛇床子粉碎，过筛，用质量浓度75‑90%乙醇加热回流提取，过滤，浓缩至稠膏；稠膏中加入蛇床子重量3～5倍的水，冷藏静置12～24h，离心得上清液；上清液以每克大孔吸附树脂加入1.5～2.5ml上清液的比例，通过大孔吸附树脂交换柱，先用蒸馏水洗涤，再用质量浓度50～70%乙醇洗脱，收集洗脱液，浓缩，干燥，得蛇床子总香豆素。本发明使用乙醇有机溶剂，对环境和人员安全，具有获得产品纯度高，无有机溶剂存留，分离步骤少、操作条件温和，操作简单，环境友好，易于工艺放大和连续操作等特点，是一种绿色环保的方法。
Description
技术领域
本发明属于中药有效成分提取技术领域，特别涉及一种从中药蛇床子中提取总香豆素的方法。
背景技术
中药蛇床子为伞形科蛇床属植物蛇床Cnidiummonnier(L) Cusson的干燥成熟果实，具有燥湿祛风、杀虫止痒、温肾壮阳之功效，临床用于阴痒带下，湿疹瘙痒，湿痹腰痛，肾虚阳痿，宫冷不孕等病症。蛇床子的有效成分可分为香豆素类和挥发油，其中香豆素类成分是蛇床子显示生理活性的主要成分，目前从蛇床子香豆素中已分离得到的单体化合物主要有六种，包括蛇床子素、欧芹属素乙、佛手柑内酯、异虎耳草素、花椒毒酚、花椒毒素等。现代药理实验表明：蛇床子总香豆素具有抗炎、抗氧化、抗突变、抗肿瘤、抗菌等多种生物活性，因而蛇床子总香豆素在临床上有着广泛的应用前景。
目前蛇床子香豆素的提取方法有：溶剂提取法、碱溶酸沉法、水蒸气蒸馏法、超临界萃取法、膜分离和双水相萃取法等。分离方法多采用柱层析、不同比例有机溶剂洗脱、收集洗脱液、回收溶剂等步骤。这些方法不同程度地存在有机溶剂用量大，处理时间长，环境污染严重的等缺点，而超临界萃取和膜分离等方法需要特殊或较为昂贵的设备才能进行，成本较高，工业放大生产受到一定限制。因此研究绿色环保、简单方便的中药成分提取分离方法已成为当今生物医药的热门课题之一。
发明内容
本发明要解决的技术问题是提供一种中药蛇床子中提取总香豆素的方法，该方法运用提取、浓缩、冷藏后通过大孔吸附树脂富集纯化后可得到蛇床子总香豆素，该方法使用的乙醇有机溶剂，对环境和人员安全，具有获得产品纯度高、无有机溶剂残留，分离步骤少、操作条件温和，操作简单，环境友好，易于工艺放大和连续操作等特点，克服现有技术的不足，是一种绿色环保的方法。
为解决上述技术问题，本发明所采取的技术方案是：一种从中药蛇床子中提取总香豆素的方法，该方法包括以下步骤：
a）将干燥的蛇床子粉碎，过20～40目筛，用质量百分比浓度为75-90%的乙醇加热回流提取，过滤，滤液浓缩至稠膏；
b）在上述稠膏中加入干燥的蛇床子重量3～5倍的水，搅匀，冷藏静置12～24h，离心，得上清液；
c）将制得的上清液，以每克大孔吸附树脂加入1.5～2.5ml上清液的比例，通过大孔吸附树脂交换柱，先用蒸馏水洗涤，再用质量百分比浓度为50～70%的乙醇洗脱，收集洗脱液，将洗脱液浓缩，得浓缩液。
d）干燥浓缩液，得蛇床子总香豆素提取物。
大孔吸附树脂优选为AB-8、DM130或D101型；干燥浓缩液方式为喷雾干燥或真空干燥。
步骤a）中回流提取的次数可为1-3次，每次提取时间为1-2小时，每次乙醇用量为蛇床子干重的6～12倍。优选回流提取3次，每次提取时间为1-2小时，三次乙醇用量范围分别为蛇床子干重的10～12倍（第一次），8～10倍（第二次），6～8倍（第三次）。提取后浓缩得到的稠膏在70℃时相对密度为1.05～1.15。步骤b）中冷藏静置的温度为4-6℃。
关键工艺参数的主要筛选过程如下：
试验、考察了不同类型大孔吸附树脂富集纯化银杏叶提取物的效果。
取7份1kg的干燥蛇床子，分别粉碎过20～40目筛，用质量百分比浓度为85%的乙醇加热回流提取三次，每次时间分别均是1.5小时，三次乙醇用量范围是：分别为蛇床子干重的12倍，10倍，8倍，提取液合并，滤过，减压浓缩至70℃时相对密度为1.05～1.15的稠膏后，加干燥蛇床子重量3倍的水，充分搅匀，4℃冷库冷藏静置24小时后，离心，上清液分别过不同的大孔吸附树脂柱，先用蒸馏水洗脱4个柱体积，再分别用5倍柱体积质量百分比浓度为50%的乙醇和8倍柱体积70%的乙醇按25ml/min速度洗脱，合并洗脱液，洗脱液浓缩，喷雾干燥，即得。含量测定采用高效液相色谱仪分析，以蛇床子素，欧前胡素和花椒毒素为检测指标，采用外标一点法测定总香豆素的含量。
结果如表1所示：
通过对比试验，发现不同的大孔吸附树脂对总香豆素的纯化效果存在差异，以D101、AB-8和DM130效果最好。
本发明的一种从中药蛇床子中提取总香豆素的方法，该方法运用提取、浓缩、冷藏后通过大孔吸附树脂富集纯化后可得到蛇床子总香豆素，获得纯化的蛇床子总香豆素含量〉90%。
采用上述技术方案所产生的有益效果在于：
1.本发明提供的蛇床子总香豆素树脂纯化方法操作简便、快捷；
2.所选的大孔吸附树脂具有吸附量大、解析率大的特点；
3.以乙醇为溶剂，无毒无污染；
4.用本发明方法提取纯化蛇床子，提取物总香豆素含量可达90%以上，且重现性好，树脂可重复使用。
具体实施方式
下面结合具体实施方式进一步说明本发明，但并不局限于下列实施方式。
实施例1：
干燥蛇床子1kg，粉碎，过20目筛，用质量百分比为80%乙醇回流提取三次，第一次加干燥蛇床子重量12倍量醇，提取2小时，第二、三次分别10、8倍量，均提取1.5小时，合并提取液，滤过，减压回收乙醇，浓缩至稠膏（70℃时相对密度1.10）。加入3L水，充分搅匀，于5℃冷库冷藏静置24时，离心，得上清液。以每克大孔吸附树脂加入2ml上清液的比例，通过已经处理好的DM130型大孔树脂，装柱径高比为1：6。先用蒸馏水洗涤3个柱体积，再分别用5倍柱体积质量百分比浓度为50%的乙醇和6倍柱体积质量百分比浓度为65%的乙醇按15ml/min速度洗脱，合并洗脱液，减压回收乙醇，得浓缩液。浓缩液于60℃以下真空干燥，得约41g蛇床子总香豆素提取物，提取物干粉得率为4.1%。按照《中国药典》（2015版）高效液相测定方法，以蛇床子素，欧前胡素和花椒毒素为检测指标，采用外标一点法测定总香豆素的含量。测得总香豆素含量为：91.6%。
实施例2：
干燥蛇床子3kg，粉碎，过40目筛，用质量百分比为90%乙醇回流提取三次，第一次加干燥蛇床子重量12倍量醇，提取1.5小时，第二、三次分别10、8倍量，均提取1小时，合并提取液，滤过，减压回收乙醇，浓缩至稠膏（70℃时相对密度1.05）。加入10L水，充分搅匀，于4℃冷库冷藏静置20小时，离心，得上清液。以每克大孔吸附树脂加入2.5ml上清液的比例，通过已经处理好的D101型大孔树脂，装柱径高比为1：5。先用蒸馏水洗涤4个柱体积，再分别用6倍柱体积质量百分比浓度为50%的乙醇和5倍柱体积质量百分比浓度为65%的乙醇按20ml/min速度洗脱，合并洗脱液，减压回收乙醇，得浓缩液。浓缩液喷雾干燥，得约116g蛇床子总香豆素提取物，提取物干粉得率为3.8%。按照《中国药典》（2015版）高效液相测定方法，以蛇床子素，欧前胡素和花椒毒素为检测指标，采用外标一点法测定总香豆素的含量。测得总香豆素含量为：91.1%。
实施例3：
干燥蛇床子5kg，粉碎，过30目筛，用质量百分比为75%乙醇回流提取三次，第一次加干燥蛇床子重量12倍量醇，提取1.5小时，第二、三次分别10、8倍量，均提取1.5小时，合并提取液，滤过，减压回收乙醇，浓缩至稠膏（70℃时相对密度1.15）。加入25L水，充分搅匀，于6℃冷库冷藏静置12时，离心，得上清液。以每克大孔吸附树脂加入1.5ml上清液的比例，通过已经处理好的AB-8型大孔树脂，装柱径高比为1：6。先用蒸馏水洗涤3个柱体积，再分别用5倍柱体积质量百分比浓度为50%的乙醇和5倍柱体积质量百分比浓度为70%的乙醇按20ml/min速度洗脱，合并洗脱液，减压回收乙醇，得浓缩液。浓缩液喷雾干燥，得约211g蛇床子总香豆素提取物，提取物干粉得率为4.2%。按照《中国药典》（2015版）高效液相测定方法，以蛇床子素，欧前胡素和花椒毒素为检测指标，采用外标一点法测定总香豆素的含量。测得总香豆素含量为：90.5%。
Claims (5)
1.一种从中药蛇床子中提取总香豆素的方法，其特征在于该方法包括以下步骤：
a）将干燥的蛇床子粉碎，过20～40目筛，用质量百分比浓度为75-90%的乙醇加热回流提取，过滤，滤液浓缩至稠膏；
b）在上述稠膏中加入干燥的蛇床子重量3～5倍的水，搅匀，冷藏静置12～24h，离心，得上清液；
c）将制得的上清液，以每克大孔吸附树脂加入1.5～2.5ml上清液的比例，通过大孔吸附树脂交换柱，先用蒸馏水洗涤，再用质量百分比浓度为50～70%的乙醇洗脱，收集洗脱液，将洗脱液浓缩，得浓缩液；
d）干燥浓缩液，得蛇床子总香豆素提取物。
2.根据权利要求1所述的一种从中药蛇床子中提取总香豆素的方法，其特征在于：步骤a）中所述的稠膏在70℃时相对密度为1.05～1.15。
3.根据权利要求1所述的一种从中药蛇床子中提取总香豆素的方法，其特征在于：步骤b）中所述的冷藏静置的温度为4-6℃。
4.根据权利要求1所述的一种从中药蛇床子中提取总香豆素的方法，其特征在于：步骤c）中大孔吸附树脂为DM130、AB-8或D101型。
5.根据权利要求1所述的一种从中药蛇床子中提取总香豆素的方法，其特征在于：步骤d）中所述的干燥为喷雾干燥或真空干燥。
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Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN108250171A (zh) * | 2016-12-29 | 2018-07-06 | 澳华达香精（广州）有限公司 | 一种分离天然香料中香豆素的方法 |
| CN112294884A (zh) * | 2020-11-05 | 2021-02-02 | 广州市中通生化制品有限公司 | 一种能快速舒缓皮肤痒感、痛感的植物组合物及其制备方法 |
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Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1724529A (zh) * | 2005-07-22 | 2006-01-25 | 中国医学科学院放射医学研究所 | 高纯度蛇床子素及其制备方法和以该化合物为活性成分的药物组合物 |
| CN101062069A (zh) * | 2007-06-18 | 2007-10-31 | 石任兵 | 白芷总香豆素提取物及其制备方法 |
| CN102908373A (zh) * | 2012-11-16 | 2013-02-06 | 中国人民解放军兰州军区乌鲁木齐总医院 | 一种中药蛇床子中总香豆素的提取方法 |
-
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Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1724529A (zh) * | 2005-07-22 | 2006-01-25 | 中国医学科学院放射医学研究所 | 高纯度蛇床子素及其制备方法和以该化合物为活性成分的药物组合物 |
| CN101062069A (zh) * | 2007-06-18 | 2007-10-31 | 石任兵 | 白芷总香豆素提取物及其制备方法 |
| CN102908373A (zh) * | 2012-11-16 | 2013-02-06 | 中国人民解放军兰州军区乌鲁木齐总医院 | 一种中药蛇床子中总香豆素的提取方法 |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN108250171A (zh) * | 2016-12-29 | 2018-07-06 | 澳华达香精（广州）有限公司 | 一种分离天然香料中香豆素的方法 |
| CN112294884A (zh) * | 2020-11-05 | 2021-02-02 | 广州市中通生化制品有限公司 | 一种能快速舒缓皮肤痒感、痛感的植物组合物及其制备方法 |
| CN115969891A (zh) * | 2022-10-13 | 2023-04-18 | 杨利平 | 一种蛇床子总提取物及其应用和图谱构建方法 |
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