CN103520227A - 一种板蓝根注射用原位凝胶及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明属动物用药物制剂领域，涉及一种板蓝根注射用原位凝胶制剂及其制备方法，其包含以下组分：板蓝根提取液30.0-75.0重量份、泊洛沙姆40714.5-31.5重量份、泊洛沙姆1880.7-9.5重量份、高分子阻滞剂0.02-10.0重量份、增溶稳定剂0.01-10.0重量份、pH调节剂适量、防腐剂0.01-3.0重量份，所得制剂每毫升相当于原生药干燥品1.5-5.0克。本发明制剂室温为自由流动的液体，肌肉或皮下注射后形成半固体凝胶，缓慢释药，实现一个疗程仅给药一次，且制备简单、给药方便、疗效确切。本发明制剂有抗病毒、抗菌、抗内毒素及免疫调节等作用，适用于防治猪、牛、羊、犬、猫等动物疾病。

Description

一种板蓝根注射用原位凝胶及其制备方法

技术领域

本发明属动物用药物制剂领域，涉及一种具有适宜相变温度的板蓝根注射用原位凝胶及其制备方法。

技术背景

注射型原位凝胶(injectable in situ gel)是将药物和聚合物分散于适宜的溶剂中，局部肌肉或皮下注射，在给药部位生理条件下，聚合物凝固形成半固体或固体药物n凝胶贮库，并通过聚合物的不断降解，持续释放药物，达到缓释长效作用。

注射用温敏型原位凝胶使用前(环境温度下)为低黏度液体，在注射部位生理温度下发生胶凝，形成柔软、润滑、透明的固体或半固体凝胶，多以泊洛沙姆为基质材料。泊洛沙姆为非离子型表面活性剂，是聚氧乙烯(PEO)与聚氧丙烯(PPO)组成的ABA型嵌段共聚物，具有毒性低，刺激性小，生物相容性好，流变学特征良好的优点。其中泊洛沙姆407(P407)水溶液具有良好的反向热胶凝性质，即低温时为液体，升高一定温度时成为凝胶，且胶凝温度随体系中P407浓度增加而降低，体系中加入泊洛沙姆188(P188)，可提高溶液的胶凝温度，调整P407和P188的比例和浓度，能获得理想的胶凝温度。研究显示，该体系配合使用适当的高分子阻滞剂，可以调整体系溶液的黏度、机械强度和溶蚀速度，较有效地解决药物突释问题。

注射用温敏型原位凝胶既克服了普通乳剂、脂质体、微球等制备复杂、批次间差异较大、工业化较困难等不足，也避免了传统植入剂开刀植入的痛苦。注射用温敏型原位凝胶制备过程简单，给药量易于控制，生理相容性好，可延长释药周期、减少给药次数，提高了动物应用的顺应性，提高了经济效益。

板蓝根系常用传统中药，药材多以菘蓝干燥根入药，清热解毒、凉血利咽。现代药理学研究表明，其具有较强的抗病毒、抗菌、抗内毒素和免疫调节作用。

板蓝根对流感病毒、柯萨奇病毒、疹病毒、乙型脑炎病毒等有显著抑制作用，是公认抗病毒中药。其抗病毒作用体现在，能有效阻碍流感病毒核蛋白基因表达，抑制乙肝病毒核心抗原，灭活单纯疱疹病毒-I(HSV-I)等，保护细胞免受病毒吸附，而抑制病毒感染。板蓝根抗菌作用体现在，对金黄色葡萄球菌、肺炎双球菌、溶血性链球菌、脑膜炎球菌、大肠埃希菌、痢疾杆菌等数十种细菌有显著抗菌活性，能封闭宿主细胞上的细菌受体而阻止细菌侵袭。板蓝根免疫调节作用体现在，能显著增加动物免疫器官指数、白细胞和淋巴细胞总数，促进抗体产生、调节细胞因子释放，增强非特异性免疫和细胞免疫功能，这也提高了动物抗病毒、细菌感染能力。板蓝根既能直接破坏内毒素结构，也能阻断内毒素引起的信号传导通路，抑制机体炎性因子的过度释放，抑制膜结构伸展刺突蛋白和丝裂原活化蛋白激酶的表达而削弱内毒素毒性。

板蓝根在畜禽疾病防治中广泛应用。在猪病临床，板蓝根注射液常用药于防治猪流感、猪水泡性口炎，猪病毒性水泻等疾病，有报道其对猪黄痢治愈率达95％以上。板蓝根注射液用于防治犊牛腹泻、牛腮腺炎、牛流行热及羔羊痢疾、羊痘等，效果明显。宠物临床，板蓝根注射液常配合西药治疗犬瘟热、犬猫流行性感冒等。此外也用于治疗水貂阿留申病等。家禽疾病防治中，板蓝根相关制剂应用较多，如复方板蓝根治疗鸡传染性喉气管炎、传染性法氏囊病，防治小鹅瘟，与病毒灵联用于鸭病毒性肝炎、花肝病等，治疗禽败血霉形体感染、巴氏杆菌等细菌感染也有良效。

目前，板蓝根已批准的兽用产品剂型及规格有：①板蓝根注射液，规格：10mL相当于原生药5g；10mL相当于原生药10g；20mL相当于原生药20g。②板蓝根片，规格：0.2g；0.25g；0.3g；0.5g。此外还有板蓝根末、板蓝根当归散、七味板蓝根散、银翘板蓝根散及板蓝根大黄散等。

板蓝根已报道的剂型有：板蓝根冲剂、含片、颗粒剂、糖浆剂、咀嚼片、软胶囊剂、滴丸、冻干粉针剂及泡腾片等，未见板蓝根注射用原位凝胶剂型报道。

板蓝根已公开的相关专利有板蓝根VC片、无糖型板蓝根颗粒、发酵板蓝根饲料添加剂、复方板蓝根喷雾剂、板蓝根滴丸、板蓝根注射液、水溶性板蓝根膨化剂、复方板蓝根膨化剂、畜禽用板青颗粒、治疗仔猪副伤寒的复方板蓝根补液、板蓝根提取物口腔速崩片、板蓝根口服液等，未见板蓝根注射用原位凝胶的报道及公开专利。

在猪、羊、牛、犬、猫等疾病防治的一个疗程中，板蓝根注射液需重复多次注射给药，易造成血药浓度出现明显的“波峰波谷”，不利于抗病毒、抗菌及免疫调节等作用发挥，且频繁注射捉抓动物费时费力又易造成动物应激反而加重病情。当板蓝根制成注射用原位凝胶，一次注射给药，即可较长时间维持有效且相对稳定的血药浓度，增强疾病的防治效果。单次用药，降低动物应激等不利因素，减少动物保定次数，节约防治成本，提高了经济效益。

发明内容

本发明的目的是针对板蓝根已有兽用剂型给药的不足，提供一种板蓝根注射用原位凝胶。

本发明的另一目的是提供该板蓝根注射用原位凝胶的制备方法。

本发明的目的可通过如下技术方案实现：

板蓝根注射用原位凝胶包含如下组分：板蓝根提取液30.0-75.0重量份、泊洛沙姆40714.5-31.5重量份、泊洛沙姆1880.7-9.5重量份、高分子阻滞剂0.02-10.0重量份、增溶稳定剂0.01-10.0重量份、pH调节剂适量、防腐剂0.01-3.0重量份，所得制剂每毫升相当于原生药干燥品1.5-5.0克。

所述的凝胶基质选自泊洛沙姆108、124、188、237、338、407的任意一种或多种；优选泊洛沙姆40714.5-31.5重量份，泊洛沙姆1880.7-9.5重量份。

所述的高分子阻滞剂选自聚乙烯醇、聚维酮、甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素、羟乙基纤维素、羟丙基纤维素、羧甲基纤维素钠、卡波姆、透明质酸、黄原胶、壳聚糖、羧甲基壳聚糖、海藻酸钠、磷脂等的任意一种或多种；优选聚维酮1.0-7.5重量份、或羧甲基纤维素钠0.07-1.0重量份。

所述的增溶稳定剂选自吐温-20、吐温-60、吐温-80、丙二醇、正丁醇、异丙醇、异丁醇、聚乙二醇、甘油等的任意一种或多种；优选吐温-800.1-2.0重量份，丙二醇2.0-10.0重量份。

所述的pH调节剂选自枸橼酸及其钠盐、酒石酸及其钠盐、碳酸钠、碳酸氢钠、磷酸氢二钾及磷酸二氢钾、磷酸氢二钠及磷酸二氢钠、氢氧化钠、单乙醇胺等的任意一种或多种；优选氢氧化钠适量。

所述的防腐剂选自羟苯酯类、三氯叔丁醇、苯甲醇、醋酸洗必泰、苯扎溴铵、山梨酸钾、硫柳汞等的任意一种或多种；优选苯甲醇0.5-2.0重量份。

所述的板蓝根注射用原位凝胶的制备方法包含如下步骤：(a)常规水提醇沉法制备板蓝根提取液；(b)将选用的增溶稳定剂及防腐剂加入上述板蓝根提取液中，用注射用水稀释至适当浓度；(c)将处方量的凝胶基质和选用的高分子阻滞剂撒在上述溶液上，4℃左右冷藏24h，得到澄清、无团块、分散均匀的溶液，氢氧化钠调节pH为6.0-6.5，0.22μm微孔滤膜滤过；(d)将(c)所得溶液用注射用水定容，搅拌均匀，

即得。

本发明的优点在于：

本发明利用泊洛沙姆水溶液的温度敏感性质及不同型号泊洛沙姆组合，制备了具有适宜相变温度的板蓝根注射用原位凝胶，使其在室温条件下以液体状态存在，肌注或皮下注射给药时，在注射部位形成凝胶。所制的板蓝根注射用原位凝胶与常规板蓝根注射液相比释药缓慢，血药浓度平稳，持效时间大大延长；所用高分子材料生理相容性好，刺激性低。本发明板蓝根注射用原位凝胶制备工艺简单，给药方便，减少给药次数，能更好发挥板蓝根的功效。

附图说明

板蓝根注射用原位凝胶体外释放度曲线

具体实施方式

实施实例1：

板蓝根注射用原位凝胶(每1mL相当于原生药干燥品1.5g)

处方

制备方法：(a)取处方量板蓝根原生药(以干燥品计)，常规水提醇沉法制备板蓝根提取液；(b)将吐温-80、丙二醇和苯甲醇加入到板蓝根提取液中，之后加注射用水稀释至适当浓度；(c)再将处方量的凝胶基质和羧甲基纤维素钠撒在上述溶液上，4℃左右冷藏过夜，得到澄清、无团块、分散均匀的溶液，氢氧化钠调节pH为6.0-6.5，0.22μm微孔滤膜滤过；(d)将(c)用注射用水定容，搅拌均匀，即得。

将所制备的原位凝胶进行体外性能评价，包括胶凝温度、胶凝时间、热可逆性、释放度、黏度、pH值的测定等。各项目测定方法如下，其测定结果见表1，体外释放结果见附图。

凝胶温度测定(采用试管倒转法)取储存于冰箱中的凝胶溶液3～4mL至试管，将温度计插入凝胶溶液中。将试管置于水浴中(水浴液面高出试管内容凝胶溶液3cm)，缓慢升温，升温速率约为每1min～2min升高1℃。将试管倾斜90°，观察内容物不流动时的温度即定义为胶凝温度。每个样品测定3次，结果取其平均值。

胶凝时间测定原位凝胶溶液25℃放置0.5h，置于已预热至37℃的试管中并保温，记录相变时间。

热可逆性测定将凝胶加热至特定温度(30，35，40，45，50，55，60，70℃)，然后缓慢冷却至室温，即算作一次加热循环，检验直至凝胶不再具备温敏性或者成分发生改变，若重复10次仍具有温敏性，记做循环次数＞10。

释放度测定精密吸取10mL原位凝胶制剂，置于预先已称重的平底具塞刻度试管中，再行称重。将该试管置于37.3±0.2℃的恒温水浴振荡器中平衡10min，使聚合物溶液完全形成凝胶。小心加入经预热的37℃5mL缓冲液(pH7.4，含SDS0.5％，作为释放介质)中，恒温水浴振荡(95次／min)，分别在15、40、60min，1.33、2、3、5、8、12、24、48、60、72、84、96、104、120h立即倾出全部释放介质，将容器内外表面用滤纸吸干，迅速称量并纪录，然后重新放入恒温水浴振荡器中平衡10min，再补充释放介质5mL。如此反复操作，直至试验结束。

黏度测定使用旋转式黏度计测定室温(25℃)下凝胶的黏度。

pH值测定用酸度计测定原位凝胶溶液室温下的pH值。

实施实例2：

板蓝根注射用原位凝胶(每1mL相当于原生药干燥品2.5g)

处方

制备方法：(a)取处方量板蓝根原生药(以干燥品计)，常规水提醇沉法制备板蓝根提取液；(b)将吐温-80、丙二醇和苯甲醇加入到板蓝根提取液中，之后加注射用水稀释至适当浓度；(c)再将处方量的凝胶基质和聚维酮撒在上述板蓝根溶液水面上，4℃左右冷藏过夜，得到澄清、无团块、分散均匀的溶液，氢氧化钠调节pH为6.0-6.5，0.22μm微孔滤膜滤过；(d)将(c)用注射用水定容，搅拌均匀，即得。体外性能评价方法同实施1，结果见表1，体外释放结果见附图。

实施实例3：

板蓝根注射用原位凝胶(每1mL相当于原生药干燥品3.0g)

处方

制备方法：(a)取处方量板蓝根原生药(以干燥品计)，常规水提醇沉法制备板蓝根提取液；(b)将吐温-80、丙二醇和三氯叔丁醇加入到板蓝根提取液中，之后加注射用水稀释至适当浓度；(c)再将处方量的凝胶基质和海藻酸钠撒在上述板蓝根溶液水面上，4℃左右冷藏过夜，得到澄清、无团块、分散均匀的溶液，氢氧化钠调节pH为6.0-6.5，0.22μm微孔滤膜滤过；(d)将(c)用注射用水定容，搅拌均匀，即得。体外性能评价方法同实施1，结果见表1，体外释放结果见附图。

实施实例4：

板蓝根注射用原位凝胶(每1mL相当于原生药干燥品4.0g)

处方

制备方法：(a)取处方量板蓝根原生药(以干燥品计)，常规水提醇沉法制备板蓝根提取液；(b)将吐温-80、丙二醇和苯甲醇加入到板蓝根提取液中，之后加注射用水稀释至适当浓度；(c)再将处方量的凝胶基质和羟丙基甲基纤维素撒在上述板蓝根溶液水面上，4℃左右冷藏过夜，得到澄清、无团块、分散均匀的溶液，氢氧化钠调节pH为6.0-6.5，0.22μm微孔滤膜滤过；(d)将(c)用注射用水定容，搅拌均匀，即得。体外性能评价方法同实施1，结果见表1，体外释放结果见附图。

实施实例5：

板蓝根注射用原位凝胶(每1mL相当于原生药干燥品5.0g)

处方

制备方法：(a)取处方量板蓝根原生药(以干燥品计)，常规水提醇沉法制备板蓝根提取液；(b)将吐温-80、丙二醇和三氯叔丁醇加入到板蓝根提取液中，之后加注射用水稀释至适当浓度；(c)再将处方量的凝胶基质和甲基纤维素撒在上述板蓝根溶液水面上，4℃左右冷藏过夜，得到澄清、无团块、分散均匀的溶液，氢氧化钠调节pH为6.0-6.5，0.221μm微孔滤膜滤过；(d)将(c)用注射用水定容，搅拌均匀，即得。具体制备方法及体外评价方法同实施1。结果见表1，体外释放结果见附图。

表1.板蓝根注射用原位凝胶体外性能评价

Claims (7)

1.制备一种具有适宜相变温度的板蓝根注射用原位凝胶，其特征在于包含如下组分：板蓝根提取液30.0-75.0重量份、泊洛沙姆40714.5-31.5重量份、泊洛沙姆1880.7-9.5重量份、高分子阻滞剂0.02-10.0重量份、增溶稳定剂0.01-10.0重量份、pH调节剂适量、防腐剂0.01-3.0重量份，所得制剂每毫升相当于原生药干燥品1.5-5.0克。该凝胶具有适宜的相转化温度，能够在室温条件下以液体状态存在，给药后在机体内形成固体或半固体凝胶。

2.根据权利要求1所述的一种具有适宜相变温度的板蓝根注射用原位凝胶，其特征在于所述的制剂中温敏凝胶基质选自泊洛沙姆108、124、188、237、338、407的任意一种或多种；优选泊洛沙姆40714.5-31.5重量份，泊洛沙姆1880.7-9.5重量份，调节二者用量可控制该制剂的相变温度介于32℃-37℃之间。

3.根据权利要求1所述的一种具有适宜相变温度的板蓝根注射用原位凝胶，其特征在于所述的制剂中高分子阻滞剂选自聚乙烯醇、聚维酮、甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素、羟乙基纤维素、羟丙基纤维素、羧甲基纤维素钠、卡波姆、透明质酸、黄原胶、壳聚糖、羧甲基壳聚糖、海藻酸钠、磷脂等的任意一种或多种；优选聚维酮1.0-7.5重量份、或羧甲基纤维素钠0.07-1.0重量份。

4.根据权利要求1所述的一种具有适宜相变温度的板蓝根注射用原位凝胶，其特征在于所述的制剂中增溶稳定剂选自甘油、吐温-20、吐温-60、吐温-80、丙二醇、正丁醇、异丙醇、异丁醇、聚乙二醇等的任意一种或多种；优选吐温-800.1-2.0重量份，丙二醇2.0-10.0重量份。

5.根据权利要求1所述的一种具有适宜相变温度的板蓝根注射用原位凝胶，其特征在于所述的制剂中pH调节剂选自枸橼酸及其钠盐、酒石酸及其钠盐、碳酸钠、碳酸氢钠、磷酸氢二钾及磷酸二氢钾、磷酸氢二钠及磷酸二氢钠、氢氧化钠、单乙醇胺等的任意一种或多种；优选氢氧化钠适量。

6.根据权利要求1所述的一种具有适宜相变温度的板蓝根注射用原位凝胶，其特征在于所述的制剂中防腐剂选自羟苯酯类、三氯叔丁醇、苯甲醇、醋酸洗必泰、苯扎溴铵、山梨酸钾、硫柳汞等的任意一种或多种；优选苯甲醇0.5-2.0重量份。

7.根据权利要求1所述的一种具有适宜相变温度的板蓝根注射用原位凝胶的制备方法，其特征在于包含如下步骤：(a)常规水提醇沉法制备板蓝根提取液；(b)将选用的增溶稳定剂及防腐剂加入上述板蓝根提取液中，之后加注射用水稀释至适当浓度；(c)再将处方量的凝胶基质和选用的高分子阻滞剂撒在上述板蓝根溶液上，4℃左右冷藏24h，得到澄清、无团块、分散均匀的溶液，氢氧化钠调节pH为6.0-6.5，0.22μm微孔滤膜滤过；(d)将(c)所得溶液用注射用水定容，搅拌均匀，即得。

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