BRPI0620427A2

BRPI0620427A2 - sistemas microparticulados para administração oral de substáncias biologicamente ativas

Info

Publication number: BRPI0620427A2
Application number: BRPI0620427-9A
Authority: BR
Inventors: Daniele Vigo; Massimo Faustini; Sarah Scocca; Eleonora Munari; Maria Luisa Torre; Ubaldo Conte; Simone Francesco De; Rita Patrizia Aquino; Maria Rosaria Lauro
Original assignee: Univ Degli Studi Milano; Univ Pavia; Univ Degli Studi Salerno
Priority date: 2005-12-22
Filing date: 2006-12-22
Publication date: 2011-11-08
Also published as: CN101365427A; US20090053317A1; WO2007072535A2; ITMI20052461A1; WO2007072535A8; EP1962809A2; WO2007072535A3

Abstract

SISTEMAS MICROPARTICULADOS PARA ADMINISTRAçãO ORAL DE SUBSTáNCIAS BIOLOGICAMENTE ATIVAS. A presente invenção refere-se aos sitemas microparticulados gastrorresistentes e enterossolúveis para encapsular susbstâncias biologicamente ativas selecionadas de: flavonóides, vitaminas, antioxidantes, imunoestim ulantes, polissacarídeos engomados e não engomados, probióticos, prebióticos, reguladores do trofismo intestinal, oligoelementos, enzimas e peptideos bioativos. Tais sistemas microparticulados permitem a administração das substâncias nutraceuticas mencionadas acima para animais tais como suínos, bovinos, caprinos, ovinos, eqúinos, canídeos, felinos, camelideos, lagomorfos, roedores, aves selvagens e outros mamíferos inclusive seres humanos, peixes e crustáceos, aumentando a biodisponibilidade.

Description

Relatório Descritivo da Patente de Invenção para "SISTEMAS MICROPARTICULADOS PARA ADMINISTRAÇÃO ORAL DE SUBSTÂN- CIAS BIOLOGICAMENTE ATIVAS"

CAMPO DA INVENÇÃO

A presente invenção refere-se aos sistemas microparticulados para a administração oral de substâncias biologicamente ativas tais como nutracêuticos e os processos relevantes para a preparação dos mesmos.

TÉCNICA ANTERIOR

Um "alimento funcional" é definido como um gênero alimentício ou um constituinte do mesmo com efeitos positivos sobre uma ou mais fun- ções corporais específicas, que vai além dos puros efeitos nutricionais, re- sultando na melhoria do estado de saúde ou bem-estar e/ou prevenção e tratamento de doenças. Um produto com uma estrutura química definida presente como um constituinte natural em um alimento funcional é definido como um "nutracêutico".

Alimentos funcionais ou nutracêuticos, incluindo gêneros alimen- tícios como eles são ou enriquecidos, têm benefícios de saúde potenciais se forem tomados em doses eficazes e tornados biodisponíveis, resultando em suas atividades biológicas.

O uso de nutracêuticos e alimentos funcionais tem sido larga- mente difundido entre seres humanos, mas seu uso racional na indústria de gêneros alimentícios está disseminado nos campos zootécnico e veterinário em conseqüência da redução progressiva do uso de fármacos tradicionais.

Os nutracêuticos usados na indústria de alimentos para a fabri- cação de alimento para suínos, bovinos, caprinos, ovinos, eqüinos, caní- deos, felinos, camelídeos, lagomorfos, roedores, aves e outros mamíferos, peixes e crustáceos são derivados de várias categorias, tais como flavonói- des, vitaminas, antioxidantes, estimulantes do sistema imunológico, polissa- carídeos ricos em amido e não-ricos em amido, probióticos, prebióticos, re- guladores de trofismo intestinal, oligoelementos, enzimas e peptídeos bioativos.

Tais nutracêuticos são caracterizados pela considerável instabi- lidade e são sensíveis aos fatores ambientais e ecológicos, tais como os processos digestivos gástricos, os quais resultam em perda significativa de atividade. No momento, tais nutracêuticos são suplementados aos alimentos para animais em doses adequadas, seguindo os processos tecnológicos convencionais, os quais não prevêem a proteção do nutracêuticos do ambi- ente externo.

De fato, uma das limitações no uso vitaminas e antioxidantes é sua estabilidade reduzida em ambientes ácidos, na presença de oxigênio ou outros agentes oxidantes. Esta instabilidade tem levado freqüentemente a resultados contraditórios com relação à sua eficácia eficaz, e a seu uso em doses extremamente altas.

O uso de vitaminas, tais como tocoferol, como substâncias nu- tracêuticas, foi recentemente indicado para melhorar a qualidade da carne, a estabilidades das fibrilas dos músculos, delicadeza aprimorada, palatabilida- de, aroma e sabor: em bovinos, elas garantem altos níveis de oximioglobina, com uma coloração vermelho vibrante, aprimorada do alimento, mesmo du- rante armazenamento, particularmente apreciada pelo mercado; em suínos, elas reduzem peroxidação do Iipfdio e níveis de malonaldeído, um indicador de peroxidação de lipídio.

Dos dados na literatura, parece que o uso de vitaminas e subs- tâncias nutracêuticas, se administradas corretamente, resulta em qualidade elevada da carne em coelhos, em frangos de corte e em peixe tal como carpa.

A administração de altas doses de tocoferol a várias espécies de bovinos melhora o desempenho reprodutivo pela regularização dos ciclos dos cios, e redução da incidência de retenção da placenta e mastite em bo- vinos que fornecem leite.

Outros nutracêuticos que podem ser usados em zootécnicas pertencem à classe dos flavonóides. Esta classe de moléculas é reconheci- da por ter atividades gastroprotetoras, antibacterianas, antiinflamatórias e imunoestimulatórias, seguindo a indução da produção de interferons. Outros efeitos que podem estar relacionados aos flavonóides incluem antioxidades e atividades de proteção à membrana de célula, efeitos broncodilatadores e opióides, com a modulação da atividade gastrointestinal e fluxo de eletrólito através da mucosa gastrointestinal (efeito antidiarréico). Um dos problemas associados ao uso de flavonóides é sua reduzida biodisponibilidade devido à absorção irregular seguindo administração oral.

Há numerosos e contínuos problemas não-resolvidos que inco- modam a criação tanto de suínos quanto de bovinos, e em muitos casos so- luções para superar as doenças que podem afetar o gado inteiro ou espé- cies individuais, com sérias perdas financeiras para o fazendeiro, ainda não foram encontradas.

Um dos principais problemas de saúde que atualmente afetam muitas fazendas inclui úlceras gastroesofageais em suínos durante cresci- mento e engorda. Na maioria dos animais afetados, a conseqüência desta doença é a morte do animal. Morte devido a úlceras também pode ser ob- servada (mesmo se menos comum) durante desmame e entre porcas (sows). Na manutenção do gado, os animais afetados parecem pálidos e crescem muito lentamente. A maioria deles não morre e a úlcera tem uma tendência à cura durante o tempo, mas o crescimento é comprometido, com repercussão financeira negativa para o fazendeiro.

Outra doença significativa que afeta espécies suínas, como filho- te de muitas outras espécies de animais, incluindo seres humanos, é a diar- réia causada pelo rotavírus. Infecções por rotavírus em porquinhos têm um período de incubação de 2 a 4 dias, dependendo da virulência da cepa viral, a idade do porquinho, o estado imune da porca e as condições ambientais e da pecuária. Sob condições naturais, diarréia também pode se manifestar em animais recém-nascidos, mas é mais freqüente em animais com 2 a 6 semanas de idade, no final do aleitamento ou nos primeiros dias após a a- mamentação. Porquinhos afetados tornam-se anoréxicos e deprimidos pou- cas horas antes do início da diarréia. Freqüentemente há vômito, mas este não é um sintoma típico do rotavírus. Geralmente, adultos afetados não a - presentam qualquer sintoma, embora diarréia seja freqüentemente observa- da em leitoas. A diarréia pode ser séria, e começa com fezes aquosas e cremosas tornando-se rapidamente líquida e abundante e amarelada ou verde em cor. A diarréia pode durar por 10 dias. O retorno à normalidade é gradual e pode levar de 1 a 2 semanas. Desidratação é mais evidente em animais que mamam e naqueles animais afetados por longos períodos de tempo. Morbidez usualmente excede 80%, afetando a fazenda inteira em apenas alguns dias. Mortalidade pode alcançar 20% e é maior em animais que mamam.

O uso de nutracêuticos na alimentação de animais resulta em uso reduzido de antibióticos, fármacos antiinflamatórios, analgésicos e pro- motores de crescimento. O problema apresentado pela presente invenção é aquele de melhorar a biodisponibilidade dos nutracêuticos administrados aos animais. Como explicado acima, nutracêuticos são atualmente adicionados à forragem. Isso leva à exposição de tais substâncias a fatores ambientais, por exemplo, oxigênio atmosférico, e fatores biológicos, tais como os processos digestivos gástricos. Tais fatores levam à degradação total ou parcial dos nutracêuticos adicionados à forragem, e assim resultam na pobre biodispo- nibilidade de tais substâncias uma vez administradas aos animais. Este pro- blemas é resolvido pelo sistema microparticulado e um processo para a pre- paração do mesmo, como definido nas reivindicações anexas.

DESCRIÇÃO DETALHADA

Foi descoberto agora de modo inesperado, e forma o assunto da presente invenção industrial, que a administração oral de substâncias nutra- cêuticas adequadamente protegidas, como será definido em detalhes em diante, melhora a biodisponibilidade dos próprios nutracêuticos, impedindo a pêra ou redução drástica da atividade durante os processos de preparação da forragem, durante o armazenamento da mesma e durante digestão e ab- sorção nos animais tratados.

Em particular, foi descoberto de forma inesperada que o uso de flavonóides adequadamente protegidos como nutracêuticos em espécies de suíno resulta em uma série de efeitos positivos que são explicados em uma variedade de formas. A administração de flavonóides microencapsulados, como eles são ou em forma de veículo a uma concentração adequada na forragem, tem um efeito protetor na mucosa gastrointestinal, prevenindo úl- ceras associadas com ação antibacteriana e inflamatória. Além disso, a es- timulação do sistema imune seguindo liberação elevada de interferons é ob- tida, junto com um efeito antioxidante e protetor em direção das membranas celulares.

Além disso, em espécies de suínos afetadas pelas doenças pulmonares, caracterizadas pelo broncoespamo agudo ou crônico, a admi- nistração de flavonóides adequadamente protegidos como nutracêuticos tem um efeito broncodilatador.

Outro efeito descoberto de forma inesperada do uso de flavonói- des adequadamente protegidos como nutracêuticos em espécies de suíno é o efeito "opióide", caracterizado pela modulação da mobilidade gastrointesti- nal (trânsito lento) e a regulação do fluxo de eletrólito através da mucosa intestinal. Este mecanismo resulta em atividade antidiarréica marcada, como será especificado adicionalmente nos exemplos seguintes do presente pedi- do de patente.

Um dos problemas com a administração dos flavonóides refere- se à sua biodisponibilidade reduzida seguindo administração oral.

De fato, flavonóides podem existir como agliconas ou como gli- cosídeos (isto é, agliconas ligadas a um açúcar). Geralmente, agliconas são pobremente solúveis e assim têm taxas de dissolução muita baixas em flui- dos biológicos. Uma taxa de dissolução baixa significa absorção irregular e pobre biodisponibilidade. O glicosídeo é mais solúvel que a aglicona, e então administração dos anteriores resulta em biodisponibilidade aumentada. De fato, a aglicona é apenas absorvida seguindo a hidrólise, que é geralmente lenta, da porção de açúcar do glicosídeo pelas glicosidases intestinais, para absorção na circulação periférica. A microencapsulação dos flavonóides de acordo com a presente invenção permite resolver o problema de sua pobre biodisponibilidade, conforme eles são distribuídos diretamente no intestino, onde eles são liberados e decompostos pelas glicosidases intestinais.

Outras substâncias nutracêuticas que podem ser encapsuladas dentro de sistemas microparticulados da presente invenção incluem: querce- tina e rutina (quercetina conjugada a ramnose e glicose).

Tais substâncias são veicularizadas em sistemas microparticula- dos constituídos por polímeros derivados de celulose tais como acetoftalato de celulose, trimelitato de celulose com solubilidade dependente do pH ou copolímeros metacrílicos ou etilacrilato conhecidos como Eudragit E, L, S, RL, RS com solubilidade dependente do pH.

Em particular, acetoftalato de celulose ou copolímeros de ácido acrílico e acrilato de etila, usados na preparação de microesferas e sistemas microparticulados ou granulados, descritos e reivindicados no presente pedi- do de patente, são insolúveis no ambiente gástrico ácido, mas muito solúvel em ambientes neutro-alcalinos. Tais formulações dão proteção mais ou me- nos completa das substâncias ativas no ambiente gástrico, e liberação rápi- da e completa do fármaco, substância nutracêutica ou ativa, como verificado em testes in vitro, em ambientes entéricos simulados.

Agora foi descoberto de forma inesperada que a administração de flavonóides microescapsulados de acordo com o processo reivindicado, permite anulação do início das doenças e permite eficácia nutricional e pro- dutiva melhorada com repercussões vantajosas óbvias para a saúde dos animais tratados, com vantagens financeiras indubitáveis para o fazendeiro.

Outro aspecto da invenção refere-se à suplementação simultâ- nea da forragem do animal com microcápsulas contendo nutracêuticos, de acordo com a invenção, e antioxidantes não-encapsulados. Então, o propósi- to dos antioxidantes não-encapsulados é de proteger e assim permitir seu armazenamento a longo prazo, enquanto os antioxidantes encapsulados são conduzidos diretamente dentro do intestino, e liberados aquela localização.

Os sistemas microparticulados da presente invenção são consti- tuídos por um polímero de matriz gastrorresistente, biocompatível e biode- gradável, compreendendo pelo menos um polímero gastrorresistente e ente- rossolúvel, pelo menos um sal de íon de metal monovalente, divalente ou trivalente de um polímero biocompatível e biodegradável tendo grupos áci- dos, pelo menos um polímero adicional biocompatível e biodegradável e substâncias biologicamente ativas. Entender-se pelo termo substâncias biologicamente ativas nu- tracêuticos, isto é, flavonóides, vitaminas, antioxidantes, imunoestimulantes, polissacarídeos rico em amido e não rico em amido, probióticos, prebióticos, reguladores de trofismo intestinal, oligoelementos, enzimas e peptídeos bi- oativos.

Tais sistemas microparticulados são usados para a administra- ção, preferencialmente oralmente, de substâncias biologicamente ativas a animais selecionados de: suínos, bovinos, caprinos, ovinos, eqüinos, caní- deos, felinos, camelídeos, lagomorfos, roedores e outros mamíferos, incluin- do seres humanos, aves, peixe e crustáceos. Animais preferidos são os fi- Ihores de tais espécies.

A composição especial de tais sistemas microparticulados permi- te a proteção de tais substâncias biologicamente ativas da degradação pelas proteases e ácido gástrico, permitindo sua liberação no intestino, onde elas podem desempenhar suas atividades.

Preferencialmente, tal, pelo menos um, polímero gastrorresisten- te e enterossolúvel é selecionado de: ésteres de celulose de ácido ftálico (por exemplo, acetoftalato de celulose, ftalato de hidroxipropilmetilcelulose), ésteres de celulose de ácido trimelítico (por exemplo, trimelitato de celulose, trimelitato de hidroxipropilcelulose, trimelitato de hidroxipropilmetilcelulose); acrilatos e polimetacrilatos. Polimetacrilatos são os mais preferidos.

O dito pelo menos um sal de íon de metal monovalente, divalen- te ou trivalente de um polímero biocompatível e biodegradável tendo grupos ácidos é um sal de sódio, potássio, lítio, cálcio, bário, estrôncio, zinco, alu- mínio, ferro ou cromo de ácido algínico, ácido hialurônico ou goma xantana.

O dito pelo menos um polímero biocompatível e biodegradável é selecionado do grupo constituído por: glucanos, escleroglucanos, mananos, galactomananos, gelanos, carrageninas, pectinas, polianidridos, poliaminoá- cidos, poliaminas, xantanas, goma tragacanto, goma guar, goma xantana, celuloses e derivados das mesmas, carboximetilcelulose, etilcelulose, metil- celulose, hidroxipropilcelulose, hidroxietilcelulose, hidroxipropilmetilcelulose, polivinilálcoois, polioxietilenos, carboxivinilpolímeros, amidos, colágenos, quitinas, quitosanas, copolímeros bloqueadores de polioxietileno - copolíme- ros bloqueadores de polioxipropileno conhecidos como poloxâmeros.

Carboximetilcelulose, etilcelulose, metilcelulose, hidroxipropilce- lulose, hidroxietilcelulose, hidroxipropilmetilcelulose, polivinilálcoois, polioxie- tilenos, carboxivinilpolímeros, amidos, colágenos, quitinas, quitosanas, copo- límeros bloqueadores de polioxietileno copolímeros bloqueadores de polioxi- propileno conhecidos como poloxâmeros são preferidos.

Os sistemas microparticulados descritos acima e obtidos pelo processo descrito abaixo, têm um diâmetro compreendido entre 1 e 300 mí- crons e preferencialmente entre 3 e 100 μιη.

A presente invenção também refere-se a um processo para a preparação de tais sistemas microparticulados gastrorresistentes.

Tal processo compreende os seguintes estágios:

a) preparar uma solução, suspensão ou emulsão compreenden- do pelo menos um polímero biocompatível e biodegradável e um tensoativo aniônico, catiônico, anfotérico ou não-iônico;

b) solubilizar ou dispersar pelo menos uma substância biologi- camente ativa na solução, suspensão ou emulsão da etapa a) (mistura A);

c) preparar uma solução aquosa de pelo menos um sal de íon de metal monovalente de um polímero biocompatível e biodegradável (mistura B);

d) adicionar a solução B na mistura A;

e) preparar uma solução ou uma dispersão de pelo menos um polímero gastro-resistente e enterossolúvel (mistura C);

f) adicionar a mistura C na mistura B;

g) submeter à nebulização ou extrudar a solução ou suspensão da etapa f) em uma solução aquosa de um sal de íon solúvel divalente ou trivalente;

A presença de íons divalentes e trivalentes leva à formação de uma matriz insolúvel constituída pelo, por exemplo, sal de alginato de cálcio e/ou bário e/ou algum outro cátion divalente ou trivalente. Isso leva à forma- ção de sistemas microparticulados contendo as substâncias biologicamente ativas.

h) alternativamente, na etapa g), a mistura da etapa f) pode ser submetida à nebulização e secada usando um secador por atomização, co- mo conhecido daqueles versados na técnica.

Mistura A obtida da etapa b) é preferencialmente uma emulsão ou uma suspensão que é obtida pela dissolução de uma quantidade igual ou diferente de um polímero bioeompatível - biodegradável e um tensoativo aniônico, catiônico, anfotérico ou não-iônico em água destilada, preferenci- almente à temperatura ambiente. As quantidades dos dois componentes mencionados acima são, respectivamente, compreendidas dentre: 0,1% e 50% em p/v, preferencialmente entre 0,4% e 30% em p/v.

À solução assim preparada é adicionada uma substância ativa, enquanto agitando continuamente até ser obtida uma solução, suspensão ou emulsão estável (mistura A), a quantidade da substância ativa adicionada é compreendida dentre 0,1% em p/v e 50% em p/v, preferencialmente entre 0,4% e 30% em p/v.

A mistura C é uma solução tampão a uma pH compreendido dentre 5 e 9, mas preferencialmente entre 7 e 8, compreende pelo menos um polímero gastrorresistente e enterossolúvel e uma quantidade dentre 10% e 50% em p/v, preferencialmente entre 5% e 25% em p/v.

Mistura B é adicionada à mistura A, em uma razão volumétrica preferida de 1:2, e a solução assim obtida é adicionada à mistura C em uma razão volumétrica de 3:1.

Na etapa g), nebulização ocorre com a ajuda de orifícios, bocais ou seringas tendo tamanhos variando de 10 μιτι a 5000 μιη, preferencial- mente de 300 μιη a 2000 μιτι. Extrusão ocorre com a ajuda de microencap- suladores automáticos ou semi-automáticos, bombas peristálticas ou de pis- tão ou alternativas, ou através de uma seringa, acionada manualmente e/ou automaticamente a uma velocidade para produzir de 10 a 250 gotas/minuto, preferencialmente de 20 a 120 gotas/minuto.

Nebulização ou extrusão resulta na formação de gotas muito pequenas que são coletadas em uma solução aquosa de um sal de íon inor- gânico solúvel divalente ou trivalente, mantidas em agitação a uma velocida- de de entre 10 e 200 rpm, preferencialmente 20 e 100 rpm. A razão volumé- trica entre a solução extrudada e a solução de sal inorgânico está entre 1:1 e 1:6, preferencialmente, a razão é 1:4.

Este sal inorgânico divalente ou trivalente é selecionado de: clo- reto de cálcio, bário, estrônio, zinco, alumínio, ferro ou cromo, preferencial- mente cloreto de cálcio, cloreto de bário ou cloreto de alumínio. Ainda mais preferencialmene, está o cloreto de cálcio. A concentração das ditas solu- ções de sal inorgânico está compreendida entre 0,1 M e 2,0 M, preferenci- almente entre 0,2 M e 0,8 M.

A presença de um sal de metal divalente ou trivalente leva à formação de uma matriz constituída por sais insolúveis do polímero biode- gradável e biocompatível, tendo grupos ácidos, com o metal divalente ou trivalente usado, e assim a obtenção de sistemas microparticulados de rápi- da sedimentação.

Tais sistemas microparticulados têm uma forma esférica e são insolúveis. Eles são separados da solução por aspiração ou filtração. Opcio- nalmente, eles podem ser lavados várias vezes com solução fisiológica (so- lução salina isotônica).

Em um aspecto preferido, os sistemas microparticulados assim obtidos podem ser submetidos a uma reticulação de superfície externa, por através de uma polimerização interfacial do polímero biodegradável e bio- compatível de sal de íon de metal divalente ou trivalente, usando agentes de reticulação tipo poliamina, tais como, por exemplo: sulfato ou fosfato de pro- tamina, bromidrato de poli-L-lisina (faixa de peso molecular de 1.000 Da a 80.000 Da), polivinilamina, quitosanas (faixa de peso molecular de 15.000 Da a 1.000.000 Da). Tais agentes de reticulação são preferencialmente usa- dos como soluções aquosas em concentrações compreendidas de entre 0,01% e 5% em p/v.

A reação de reticulação é realizada a uma temperatura compre- endida de entre 5 e 40°C, preferencialmente cerca de 25°C por períodos de tempo compreendidos entre 1 minuto e 120 minutos, preferencialmente entre 3 e 30 minutos.

A reação de reticulação leva ao endurecimento da membrana dos sistemas microparticulados, fazendo-os mais fáceis de manusear.

Em um aspecto preferido, tais sistemas microparticulados po- dem ser subseqüentemente submetidos à liofilização, usando técnicas co- nhecidas daqueles versados na técnica, ou secadas através de qualquer método conhecido na técnica que não seja prejudicial à atividade da subs- tância encapsulada biologicamente ativa.

Alternativamente, o processo de produção para as micropartícu- las da invenção pode encarar a formação de um granulado esferoidal. Neste caso, espessantes, por exemplo, amido de milho, lactose, etc., e um políme- ro biocompatível e biodegradável, são adicionados à mistura dos componen- tes. A massa úmida assim obtida é extrudada através de uma granulador adequado, como conhecido na técnica. Assim, grânulos esfeoidais, como uma distribuição granulométrica compreendida entre 50 e 1000 mícrons, e preferencialmente entre 150 e 500 mícrons, são obtidos. Tal granulado é então revestido com um polímero gastro-resistente e enterossolúvel para dar as micropartículas da invenção.

Tais sistemas microparticulados podem ser armazenados a tem- peraturas compreendidas entre -20-C e 40-C, preferencialmente entre 4-C e 40-C, possivelmente em uma atmosfera controlada, como conhecido da- queles versados na técnica.

Os sistemas microparticulados, formando o assunto da presente invenção, podem ser administrados oralmente, pela administração com uma dieta líquida ou como suplementos em alimento sólido.

Em um aspecto adicional, a presente invenção se refere aos a- Iimentos pré-embalados para animais, com os sistemas microparticulados da invenção adicionados, e alimentos assim suplementados ao qual antioxidan- tes não-encapsulados também são adicionados.

A invenção provê sistemas microparticulados tendo tais dimen- sões de modo a permitir dispersão máxima em alimentos sólidos e líquidos sem quaisquer problemas envolvendo as partículas agregando e, então, se- parando dos sólidos ou precipitando os líquidos. Isso permite fácil adminis- tração aos animais.

Os sistemas microparticulados gastrorresistentes da invenção podem ser administrados oralmente e proporcionar, em ambientes gástricos ácidos, proteção eficaz das substâncias biologicamente ativas "vehiculari- sed", e a rápida liberação das substâncias mencionadas acima, com alta atividade biológica, no ambiente entérico (intestino grosso ou fino).

Tais sistemas microparticulados gastro-resistentes têm potencial aplicação significativa no setor de gastroenterologia veterinária e nutrição, especialmente em espécies de animais monogástricos, mas também em não-ruminantes poligástricos e aqueles ruminantes com pré-estômagos não- funcionais.

Tais preparações podem ser classificadas entre os aditivos ali- metares zootécnicos (como descrito no 12 anexo do Reg. CE Ns 1831/2003).

Na criação de gado, a invenção resolve o problema essencial da administração de substâncias nutracêuticas ativas em quantidades suficien- tes para permitir seus efeitos benéficos a se manifestar.

EXEMPLO 1:

PREPARAÇÃO DE SISTEMAS MICROPARTICULADOS CONTENDO g- TOCOFEROL A 6%.

Emulsão A:

Quantidades idênticas de Poloxâmero (0,4% em p/v BASF, Lud- wigshafen, Alemanha) e Iauril sulfato de sódio (0,4% em p/v Sigma-AIdrich, Milão, Itália) são dissolvidas em água destilada à temperatura ambiente. À solução resultante é adicionado, com agitação constante, alfa-tocoferol (1,6% em p/v, Sigma-AIdrich, Milão, Itália) para dar uma emulsão estável e homogênea.

Solução B:

Uma solução aquosa a 2% de baixa viscosidade de alginato de sódio (250 cps, solução a 2%, 25 eC) (Sigma-AIdrich, Milão, Itália) é prepa- rada à temperatura ambiente. Solução C: Uma solução a 20% em p/v de polimetacrilato (Eudragit S100®, Rohm Pharma, GmbH, Darmstadt1 Alemanha) em tampão de fosfonato pH7,5.

Solução C é adicionada à solução B, em uma razão volumétrica de 1:2, com agitação constante, e a dita solução é adicionada à emulsão A, em uma razão volumétrica de 3:1, novamente com agitação constante.

A porcentagem da composição da emulsão resultante é:

• Polimetacrilato a 5%

• Alginato de sódio a 1%

• Poloxâmero a 0,1%

• Lauril sulfato de sódio a 0,1 %

• Alfa-tocoferol a 0,4%

Usando uma bomba peristáltica, a emulsão resultante é subme- tida à nebulização através de um secador por atomização (Büchi Mini Spray Dryer) ajustado com um bocal de 0,5 mm de diâmetro, com uma temperatura de entrada de ar de 120 9C, temperatura de saída de 100 9C, e uma pressão aplicada de 4 atm.

Sistemas microparticulados são obtidos, os quais são então a- dequadamente colhidos, como conhecido daqueles versados na técnica. Tais sistemas microparticulados aparecem como pó fino, insolúvel em água, com uma distribuição granulométrica compreendida entre 5 e 35 mícrons e com boas propriedades de umidade, fluxo e fluidez.

Determinação da quantidade de alfa-tocoferol contida foi de- sempenhada espectrofotometricamente a 291 nm, seguindo dissolução dos sistemas microparticulados em etanol absoluto. A titulação é 101+/- 3% com relação ao valor teórico.

Os sistemas microparticulados são subseqüentemente submeti- dos ao ensaio como prescrito na Farmacopéia (FUI XI) para formas farma- cêuticas gastrorresistentes, de modo a avaliar a estabilidade in vitro da vita- mina em ambientes ácidos, e liberação em ambientes entéricos simulados.

EXEMPLO 2:

PREPARAÇÃO DE SISTEMAS MICROPARTICULADOS CONTENDO a- TOCOFEROL A 22%.

Emulsão A:

Poloxâmero 407 (2% em p/v, BASF, Ludwigshafen, Alemanha) e lauril sulfato de sódio (2% em p/v, Sigma-AIdrich, Milão, Itália) são dissolvi- dos em água destilada à temperatura ambiente com agitação magnética constante a 100 rpm. Alfa-tocoferol (8% em p/v, Sigma-AIdrich, Milão, Itália) é adicionado à solução com agitação de turbina (Ultra Turrax) por 15 minu- tos: uma emulsão estável é obtida.

Solução B:

Uma solução aquosa de baixa viscosidade de alginato de sódio (250 cps, solução a 2%, 25 2C) (ácido algínico, sal de sódio, baixa viscosi- dade, Sigma-AIdrich, Milão, Itália) a uma concentração de 2% em p/v, é pre- parada com agitação magnética constante a 100 rpm à temperatura ambiente.

Solução C:

Uma solução de polimetacrilato a 20% em p/v (Eudragit S100®, Rohm Pharma, Darmstadt, Alemanha) em tampão de fosfato a pH 7,5 é pre- parado por agitação à temperatura ambiente.

Solução C é adicionada à solução B, em uma razão volumétrica de 1:2, com agitação magnética constante, e a dita solução é adicionada à emulsão A, em uma razão volumétrica de 3:1, com agitação de turbina cons- tante por 15 minutos. Usando uma bomba peristáltica, a emulsão resultante é submetida à nebulização por meio de um secador por atomização (Büchi Mini Spray Dryer) ajustada com um bocal de 0,5 mm de diâmetro, com uma temperatura de entrada de ar de 120 eC, temperatura de saída de 100 eC, e uma pressão aplicada de 4 atm.

São obtidos sistemas microparticulados que, em seguida, são apropriadamente colhidos, como conehcidos por aqueles versados na técnica.

Os produtos parecem como pós finos com boas propriedades de fluxo e fluidez.

A composição do produto, calculada da composição da solução submetida à nebulização, é como segue:

• Polimetacrilato a 55,56%

• Alginato de sódio a 11,11 %

• Poloxâmero a 5,56%

• Lauril sulfato de sódio a 5,56%

• Alfa-tocoferol a 22,22%

Os sistemas microparticulados, os quais são insolúveis em água, são caracterizados por distribuição granulométrica normal e diâmetro médio de 19+/-12,8 mícrons, como determinado através de difusão a laser (Coulter LS230, Beckman-Coulter, Fullerton1 CA, USA).

O pó tem boas propriedades de umidade e fluxo livre e é então particularmente adequado para ser adicionado a alimentos líquidos e sóli- dos, para obter misturas ou suspensões homogêneas.

Seguindo a preparação dos sistemas microparticulados, deter- minação da quantidade de alfa-tocoferol contida nos sistemas microparticu- lados foi determinada espectrofotometricamente a um comprimento de onda de 291 nm seguindo dissolução dos sistemas microparticulado em etanol absoluto. A titulação é igual a 102,0+/-1,84% (n=4).

Os sistemas microparticulados foram submetidos ao ensaio co- mo prescrito na Farmacopéia (FUI XI) para formas farmacêuticas gastrorre- sistentes, como relatado em detalhes acima, de modo a avaliar a estabilida- de in vitro da vitamina em ambientes ácidos, e liberação em ambientes enté- ricos simulados.

EXEMPLO 3:

PREPARAÇÃO DE SISTEMAS MICROPARTICULADOS CONTENDO RU- TINA A 6%.

Suspensão A:

Poloxâmero 407 (0,4% em p/v, BASF, Ludwigshafen, Alemanha) e Iauril sulfato de sódio (0,4% em p/v, Sigma-AIdrich, Milão, Itália) são dis- solvidos em água destilada à temperatura ambiente com agitação magnética constante a 100 rpm. Rutina (1,6% em p/v, Sigma-AIdrich, Milão, Itália) é adicionada à solução com agitação de turbina (Ultra Turrax) por 15 minutos: uma suspensão estável é obtida.

Solução B:

Uma solução aquosa de baixa viscosidade de alginato de sódio (250 csp, solução a 2%, 25 9C) (ácido algínico, sal de sódio, baixa viscosi- dade, Sigma-AIdrich, Milão, Itália) a uma concentração de 2% em p/v, é pre- parada com agitação magnética constante a 100 rpm à temperatura ambiente.

Solução C:

Uma solução de polimetacrilato a 20% em p/v (Eudragit S100®, Rohm Pharma1 Darmstadt, Alemanha) em tampão de fosfato a pH 7,5 é pre- parada por agitação à temperatura ambiente.

Solução C é adicionada à solução B, em uma razão volumétrica de 1:2, com agitação magnética constante; a dita solução é adicionada á suspensão A, em uma razão volumétrica de 3:1, com agitação de turbina constante (Ultra Turrax) por 15 minutos. Usando uma bomba peristáltica, a emulsão resultante é submetida à nebulização por meio de um secador por atomização (Büchi Mini Spray Dryer) ajustada com um bocal de 0,5 mm de diâmetro, com uma temperatura de entrada de ar de 120°C, temperatura de saída de 100°C, e uma pressão aplicada de 4 atm.

Sistemas microparticulados são obtidos, os quais são então a- dequadamente colhidos, como conhecidos daqueles versados na técnica.

Os produtos parecem como pós finos com boas propriedades de fluxo e fluidez.

• Polimetacrilato a 75,76%

• Alginato de sódio a 15,15%

• Poloxâmero a 1,52%

• Lauril sulfato de sódio a 1,52%

• Rutina a 6,06%

Os sistemas microparticulados, os quais são insolúveis em água, são caracterizados por distribuição granulométrica normal e diâmetro médio de 21,9+/-13.7 mícrons, como determinado através de difusão a laser (Coul- ter LS230, Beckman-Coulter Inc., Fullerton, CA, USA).

O pó tem boas propriedades de umidade e fluxo livre, e é então particularmente adequado para ser adicionado aos alimentos sólidos e líqui- dos, para obter misturas ou suspensões homogêneas.

Seguindo a preparação dos sistemas microparticulados, deter- minação da quantidade de rutina contida em sistemas microparticulados foi determinada espectrofotometricamente em um comprimento de onda de 367 nm seguido dissolução dos sistemas microparticulados em tampão de fosfa- to a pH 7,5. A titulação é igual a 108,0+/-1,84% (n=4) com relação ao valor teórico.

Os sistemas microparticulados foram subseqüentemente subme- tidos ao ensaio como prescrito na Farmacopéia (FUI XI) para formas farma- cêuticas gastro-resistentes, relatadas em detalhes acima, de modo a avaliar a estabilidade in vitro da rutina.

Em particular, em ambientes ácidos simulados, pH 1,0, menos de 20% da substância ativa são liberados após 120 minutos, e com permuta subseqüente a pH 7,5, a liberação completa da substância ativa vericulari- zadas nos sistemas microparticulados é obtida dentro de 15 minutos.

EXEMPLO 4:

PREPARAÇÃO DOS SISTEMAS MICROPARTICULADOS CONTENDO RUTINA A 11%.

Suspensão A:

O poloxâmero 407 (0,8% de p/v, BASF, Ludwigshafen1 Alema- nha) e o Iauril sulfato de sódio (0,8% de p/v, Sigma- Aldrich, Milão, Itália) são dissolvidos em água destilada a temperatura ambiente com agitação magné- tica constante a100 rpm. Adiciona-se rutina (3,2% de p/v, Sigma-AIdrich, Mi- lão, Itália) à solução com agitação através de turbinas (Ultra Turrax) durante 15 minutos: uma emulsão estável é obtida. Solução B:

Uma solução aquosa de alginato de sódio de baixa viscosidade (250 cps, solução a 2%, 25°C) (ácido algínico, sal de sódio, baixa viscosida- de, Sigma-Aldrich1 Milão, Itália), em uma concentração de 2% de p/v, é pre- parada com agitação magnética constante a 100 rpm à temperatura ambiente.

Solução C:

solução a 20% p/v de polimetacrilato (Eudragit SIOO®, Rohm Pharma, Darmstadt, Alemanha) em tampão de fosfato com pH de 7,5 é preparada através de agitação a temperatura ambiente.

A solução C é adicionada à solução B, em uma relação volumé- trica de 1:2, com agitação magnética constante; a dita solução é adicionada à emulsão A, em uma relação volumétrica de 3:1, com agitação constante através de turbinas durante 15 minutos.

Utilizando uma bomba peristáltica, a suspensão resultante é ne- bulizada por meio de um secador por aspersão (Büchi Mini Spray Dryer) e- quipado com um bico de 0,5 mm de diâmetro, com uma temperatura de en- trada de ar de 120°C, temperatura de saída de 100°C, e uma pressão de 4 atm.

São obtidos sistemas microparticulados que, em seguida, são apropriadamente colhidos, como é sabido por aqueles verados na técnica.

Os produtos aparecem na forma de pós finos com boas proprie- dades de fluxo e fluidez.

A composição do produto, calculada a partir da composição da solução nebulizada, é a seguinte:

69,44% de Polimetacrilato 13,89% de Alginato de sódio 2,78% de Poloxâmero 2,78% de Lauril sulfato de sódio 11,11% de rutina

Os sistemas microparticulados, que são insolúveis em água, ca- racterizam-se por uma distribuição granulométrica normal e por um diâmetro de 23,8 ± 14,3 mícrons, conforme determinado por meio de dispersão a laser (Coulter LS230, Beckman-Coulter Inc., Fullerton, CA, USA).

O pó tem boas propriedades de fluxo livre e de umidificação e, por conseguinte, é particularmente apropriado para ser adicionado a alimen- tos sólidos e líquidos, a fim de obter misturas homogêneas ou suspensões.

Após a preparação dos sistemas microparticulados, a determi- nação da quantidade de rutina contida nos sistemas microparticulados foi estabelecida espectrofotometricamente em um comprimento de onda de 367 nra após dissolução dos sistemas microparticulados em tampão de fosfato com pH de 7,5. O título é igual a 91,43 ± 10% (n = 4) em relação ao valor teórico.

Os sistemas microparticulados foram submetidos a ensaio, con- forme prescrito na Farmacopéia (FUI XI) para formas farmacêuticas gastror- resistentes, conforme relatado de modo detalhado acima, de modo a avaliar a estabilidade in vitro da rutina em ambientes ácidos, e a liberação em ambi- entes entéricos simulados.

Em particular, em ambientes ácidos simulados, com pH 1,0, me- nos de 15% da substância ativa são liberados depois de 120 minutos, e, com mudança subseqüente para um pH de 7,5, a liberação completa da substân- cia ativa veiculada nos sistemas microparticulados é obtida dentro de 15 mi- nutos.

EXEMPLO 5:

PREPARAÇÃO DOS SISTEMAS MICROPARTICULADOS CONTENDO 22% DE RUTINA.

Suspensão A

O poloxâmero 407 (2% de p/v, BASF, Ludwigshafen, Alemanha) e o Iauril sulfato de sódio (2% de p/v, Sigma- Aldrich, Milão, Itália) são dis- solvidos em água destilada à temperatura ambiente com agitação magnética constante a 100 rpm. Adiciona-se rutina (8% de p/v, Sigma-AIdrich, Milão, Itália) à solução com agitação através de turbinas (Ultra Turrax) durante 15 minutos: uma suspensão estável é obtida.

Solução B:

Uma solução aquosa de baixa viscosidade de alginato de sódio (250 cps, solução a 2%, 25°C) (ácido algínico, sal de sódio, baixa viscosida- de, Sigma-AIdrich, Milão, Itália) em uma concentração de 2% de p/v é prepa- rada com agitação magnética constante at 100 rpm a temperatura ambiente.

Solução C:

Uma solução de polimetacrilato a 20% p/v (Eudragit S100®, Rohm Pharma1 GmbH, Darmstadt, D) em tampão de fosfato com pH de 7,5 é preparada através de agitação a temperatura ambiente.

A solução C é adicionada à solução B, em uma relação volumé- trica de 1:2, com agitação magnética constante; a dita solução é adicionada à emulsão A, em uma relação volumétrica de 3:1, com agitação constante através de turbinas for durante 15 minutos.

Utilizando uma bomba peristáltica, a suspensão resultante é ne- bulizada por meio de um secador por aspersão (Büchi Mini Spray Dryer) e- quipado com um bico de 0,5 mm de diâmetro, com uma temperatura de en- trada de ar de 120°C, temperatura de saída de 100°C, e uma pressão apli- cada de 4 atm.

São obtidos sistemas microparticulados que, em seguida, são apropriadamente colhidos, como conhecido por aqueles especializados na técnica.

O produto aparece na forma de um pó fino, com boas proprieda- des de fluxo e fluidez.

55,56% de Polimetacrilato 11,11 % de Alginato de sódio 5,56% de Poloxâmero 5,56% de Lauril sulfato de sódio 22,22% de rutina

O sistema microparticulado obtido é insolúvel em água e carac- teriza-se por uma distribuição granulométrica normal e por um diâmetro mé- dio de 21,2 ± 12,7 mícrons, conforme determinado por meio de dispersão a laser (Coulter LS230, Beckman-Coulter, Fullerton, CA, USA).

Após preparação dos sistemas microparticulados, a determina- ção da quantidade de rutina contida dentro dos sistemas microparticulados foi efetuada por espectrofotometria em um comprimento de onda de 367 nm após dissolução dos sistemas microparticulados em etanol absoluto. O título foi igual a 102,4 ± 2,6% (n = 4).

Os sistemas microparticulados obtidos foram subseqüentemente submetidos a ensaio conforme prescrito na Farmacopéia (FUI XI) para for- mas farmacêuticas gastrorresistentes, conforme relatado acima detalhada- mente, de modo a avaliar a estabilidade in vitro da rutina em um ambiente ácido, e a liberação da mesma em um ambiente entérico simulado.

Em particular, em um ambiente ácido simulado, com pH de 1,0, menos de 10% da substância ativa são liberados dentro de 120 minutos, e com a mudança subseqüente para um pH de 7,5, a liberação completa da substância ativa veiculada dentro dos sistemas microparticulados é obtida em 15 minutos.

EXEMPLO 6:

PREPARAÇÃO DE SISTEMAS MICROPARTICULADOS CONTENDO 6% de QUERCETINA.

Suspensão A

O poloxâmero 407 (0,4% de p/v, BASF, Ludwigshafen, Alema- nha) e o lauril sulfato de sódio (0,4% de p/v, Sigma- Aldrich, Milão, Itália) são dissolvidos em água destilada à temperatura ambiente com agitação magné- tica constante a 100 rpm. A quercetina (1,6% de p/v, Sigma- Aldrich, Milão, Itália) foi adicionada à solução com agitação através de turbinas (Ultra Tur- rax) durante 15 minutos: uma suspensão estável é obtida. Solução B:

Uma solução aquosa de alginato de sódio de baixa viscosidade (250 cps, solução a 2%, 25°C) (ácido algínico, sal de sódio, baixa viscosida- de, Sigma-Aldrich, Milão, Itália) em uma concentração de 2% p/v é prepara- da com agitação magnética a 100 rpm à temperatura ambiente.

Solução C Uma solução de polimetacrilato a 20% p/v (Eudragit S100®, Rohm Pharma, Darmstadt, Alemanha) em tampão de fosfato com pH de 7,5 é preparada à temperatura ambiente com agitação constante.

A solução C é adicionada à solução B em uma relação volumé- trica de 1:2 e mantida em agitação utilizando um agitador magnético; a dita solução é então adicionada à suspensão A em uma relação volumétrica de 3:1 com agitação constante através de turbinas (Ultra Turrax) durante15 mi- nutos.

Utilizando uma bomba peristáltica, a solução resultante é nebuli- zada utilizando um secador por aspersão (Büchi Mini Spray Dryer) equipado com um bico de 0,5 mm de diâmetro, com uma temperatura de entrada de ar de 120°C, temperatura de saída de 100°C, com uma pressão aplicada de 4 atm.

São obtidos sistemas microparticulados que são apropriadamen- te colhidos como é sabido por aqueles especializados na técnica.

Os produtos aparecem na forma de um pó fino, com boas pro- priedades de fluxo e fluidez.

75,76% de Polimetacrilato

15,15% de Alginato de sódio

1,52% de Poloxâmero

1,52% de Lauril sulfato de sódio

6,06% de Quercetina

Os sistemas microparticulados, que são insolúveis em água, ca- racterizam-se por uma distribuição granulométrica normal e por um diâmetro médio de 21,3 ± 12,9 mícrons, conforme determinado por meio de dispersão a laser (Coulter LS230, Beckman-Coulter, Fullerton, CA, USA).

Após preparação dos sistemas microparticulados, a determina- ção da quantidade de quercetina contida dentro dos sistemas microparticu- Iados foi efetuada por espectrofotometria em um comprimento de onda de 366 nm após a dissolução dos sistemas microparticulados em tampão de fosfato com pH de 7,5. O título foi igual a 97,5 ± 11,5% (n = 4) em relação ao valor teórico.

Os sistemas microparticulados foram subseqüentemente subme- tidos a ensaio conforme prescrito na Farmacopéia (FUI XI) para formas far- macêuticas gastrorresistentes, conforme relatado acima de modo detalhado, de modo a avaliar a estabilidade in vitro da quercetina em um ambiente áci- do, e a liberação da mesma em um ambiente entérico simulado.

Em particular, em um ambiente ácido simulado, com pH de 1,0, menos de 15% da quercetina são liberados dentro de 120 minutos, e com uma mudança subseqüente para um pH 7,5, a liberação de não mais de 50% da substância ativa veiculada dentro dos sistemas microparticulados é obtida em 15-30 minutos.

EXEMPLO 7:

PREPARAÇÃO DE SISTEMAS MICROPARTICULADOS CONTENDO 11% DE QUERCETINA.

Suspensão A:

O poloxâmero 407 (0,8% de p/v, BASF, Ludwigshafen, Alema-

nha) e o Iauril sulfato de sódio (0,8% de p/v, Sigma- Aldrich, Milão, Itália) são dissolvidos em água destilada a temperatura ambiente com agitação magné- tica constante a 100 rpm. A quercetina (3,2% de p/v, Sigma- Aldrich, Milão, Itália) foi adicionada à solução com agitação através de turbinas (Ultra Tur- rax) durante 15 minutos: uma suspensão estável é obtida.

Solução B:

Uma solução aquosa de alginato de sódio de baixa viscosidade (250 cps, solução a 2%, 25°C) (ácido algínico, sal de sódio, baixa viscosida- de, Sigma-AIdrich, Milão, Itália) em uma concentração de 2% p/v é prepara- da com agitação magnética a 100 rpm à temperatura ambiente. Solução C:

Uma solução de polimetacrilato a 20% p/v (Eudragit S100®, Rohm Pharma GmbH, Darmstadt, Alemanha) em tampão de fosfato com pH de 7,5 é preparada à temperatura ambiente com agitação constante.

A solução C é adicionada à solução B em uma relação volumé- trica de 1:2 e mantida em agitação utilizando um agitador magnético; a dita solução é então adicionada à emulsão A em uma relação volumétrica de 3:1 com agitação constante através de turbinas (Ultra Turrax) durante 15 minutos.

Utilizando uma bomba peristáltica, a solução resultante é nebuli- zada utilizando um secador por aspersão (Büchi Mini Spray Dryer) equipado com um bico de 0,5 mm de diâmetro, em uma temperatura de entrada de ar de 120°C, temperatura de saída de 100°C, com uma pressão aplicada de 4 atm.

São obtidos sistemas microparticulados que são apropriadamen- te colhidos, como conhecido por aqueles especializados na técnica.

69,44% de Polimetacrilato

13,89% de Alginato de sódio

2,78% de Poloxâmero

2,78% de Lauril sulfato de sódio

11,11 % de Quercetina

O sistema microparticulado obtido é insolúvel em água e earac- teriza-se por uma distribuição granulométrica normal e por um diâmetro mé- dio de 27,1 + 6,0 mícrons, conforme determinado por meio de dispersão a laser (Coulter LS230, Beckman-Coulter Inc., Fullerton, CA, USA).

Após preparação, a determinação da quantidade de quercetina contida dentro dos sistemas microparticulados foi efetuada por espectrofo- tometria em um comprimento de onda de 366 nm após dissolução prévia em tampão de fosfato com pH de 7,5. O título foi igual a 100,7 + 15,8% (n = 4) em relação ao valor teórico.

Em particular, em um ambiente ácido simulado, com pH 1,0, menos de 5% da quercetina são liberados dentro de 120 minutos, e com uma mudança subseqüente para um pH de 7,5, a liberação de não mais de 60% da substância ativa veiculada dentro dos sistemas microparticulados é obtida em 15-30 minutos.

EXEMPLO 8:

PREPARAÇÃO DE SISTEMAS MICROPARTICULADOS CONTENDO 22% DE QUERCETINA.

Suspensão A:

O poloxâmero 407 (2% de p/v, BASF, Ludwigshafen, Alemanha) e o lauril sulfato de sódio (2% de p/v, Sigma- Aldrich, Milão, Itália) são dis- solvidos em água destilada a temperatura ambiente com agitação magnética constante a 100 rpm. A quercetina (8% de p/v, Sigma-AIdrich, Milão, Itália) foi adicionada à solução com agitação através de turbinas (Ultra Turrax) du- rante 15 minutos: uma suspensão estável é obtida.

Solução B:

Uma solução aquosa de alginato de sódio de baixa viscosidade (250 cps, solução a 2%, 25°C) (ácido algínico, sal de sódio, baixa viscosida- de, Sigma-AIdrich, Milão, Itália) em uma concentração de 2% p/v é prepara- da com agitação magnética a 100 rpm à temperatura ambiente.

Solução C:

Uma solução de polimetacrilato a 20% de p/v (Eudragit S100®, Rohm Pharma GmbH, Darmstadt, Alemanha) em tampão de fosfato com pH de 7,5 é preparada à temperatura ambiente com agitação constante. A solução C é adicionada à solução B em uma relação volumé- trica de 1:2 e mantida em agitação utilizando um agitador magnético, e a dita solução é, em seguida, adicionada à emulsão A em uma relação volumétrica de 3:1 com agitação constante através de turbinas (Ultra Turrax) durante 15 minutos.

São obtidos sistemas microparticulados que, são apropriada- mente colhidos, como conhecido por aqueles especializados na técnica.

A composição do produto, calculada a partir da composição da solução nebulizada, é a seguinte :

55,56% de Polimetacrilato

11,11 % de Alginato de sódio

5,56% de Poloxâmero

5,56% de Lauril sulfato de sódio

22,22% de Quercetina

O sistema microparticulado obtido é insolúvel em água e carac- teriza-se por uma distribuição granulométrica normal e por um diâmetro mé- dio de 27,3 mícrons, conforme determinado por meio de dispersão a laser (Coulter LS230, Beckman-Coulter Inc., Fullerton, CA7 USA).

Após preparação dos sistemas microparticulados, a determina- ção da quantidade de quercetina contida dentro dos sistemas microparticu- lados foi efetuada por espectrofotometria em um comprimento de onda de 367 nm após dissolução prévia dos sistemas microparticulados em etanol absoluto. O título foi igual a 98,7% (n = 4).

Em particular, em um ambiente ácido simulado, com pH de 1,0, menos de 10% da quercetina são liberados dentro de 120 minutos, e com uma mudança subseqüente para um pH de 7,5, a liberação de não mais do que 50% da substância ativa veiculada dentro dos sistemas microparticula- dos é obtida em 15-30 minutos.

EXEMPLO 9

PREPARAÇÃO DE UM GRANULADO CONTENDO RUTINA Granulado gastrorresistente

Quantidades apropriadas de poloxâmero 407 (BASF, Ludwig- shafen, Alemanha) e de Iauril sulfato de sódio (Sigma-AIdrich, Milão, Itália) são misturadas em um misturador apropriado de pó, juntamente com rutina (Sigma-AIdrich, Milão, Itália) e são adicionados amido de milho, Iactose e outros constituintes, tais como aqueles conhecidos por aqueles especializa- dos na técnica, para produzir uma mistura homogênea. A dita mistura é em- bebida utilizando uma solução de ligação consistindo em 10% de uma solu- ção aquosa de Polivinilpirrolidona (Kollidon 19-32 BASF). A massa úmida é extrudada através de um esferonizador de granulado apropriado para produ- zir um granulado esferoidal com uma distribuição granulométrica compreen- dida entre 50 e 1000 mícrons e, de preferência, entre 150 e 500 mícrons.

O dito granulado esferonizado é revestido, em uma bandeja de revestimento ou em um leito fluidizado através de aspersão de uma solução de acetoftalato de celulose (Sigma) ou de polimetacrilato (Eudragit S100®, Rohm Pharma GmbH, Darmstadt, Alemanha) em tampão de fosfato com pH de 7,5, suplementado com plastificantes de filmes, tais como aqueles conhe- cidos por aqueles especializados na técnica.

A operação prossegue até que o revestimento das partículas esferoidais seja completo e uniforme.

O granulado revestido foi subseqüentemente submetido a ensaio conforme prescrito na Farmacopéia (FUI XI) para formas farmacêuticas gas- trorresistentes, conforme relatado acima de modo detalhado, a fim de avaliar a estabilidade in vitro da rutina em um ambiente ácido, e a liberação da mesma em um ambiente entérico simulado.

Claims

1. Sistemas microparticulados consistindo em uma matriz de po- límero gastrorresistente, biocompatível e biodegradável contendo substân- cias biologicamente ativas em que a dita matriz compreende: • Pelo menos um polímero gastrorresistente e enterosolúvel se- lecionado de: ésteres de celulose de ácido itálico, ésteres de celulose de ácido trimelítico, acrilatos e polimetacrilatos ; • Pelo menos um tensoativo aniônico, catiônico, afotérico ou não- iônico; • Pelo menos um sal de íon de metal monovalente, divalente ou trivalente de um polímero biocompatível e biodegradável tendo grupos acídi- cos, selecionados de: sais de ácido algínico, de ácido hialurônico e goma de xantano; • Pelo menos um polímero adicional biocompatível e biodegra- dável selecionado de: glucanos, escleroglucanos, manás, galactomananas, gelans, carragenanos, pectinas, polianidridos, poliaminoácidos, poliaminas, xantanos, goma de tragacanto, goma de guar, goma de xantano, celuloses e derivados das mesmas, polivinilalcoóis, polioxietilenos, carboxivinilpolímeros, amidos, colágenos, quitinas, quitosanos, copolímeros de bloco de polioxieti- leno- polioxipropileno conhecidos como poloxâmeros, caracterizados pelo fato de que as ditas substâncias biologicamente ativas são selecionadas de: flavonóides, vitaminas, antioxidantes, imunoestimulantes, polissacarídeos engomados e não engomados, probióticos, prebióticos, reguladores do tro- fismo intestinal, oligoelementos, enzimas e peptídeos bioativos.

2. Sistemas microparticulados de acordo com a reivindicação 1, em que o dito pelo menos um polímero gastrorresistente e enterosolúvel é um polimetacrilato.

3. Sistema microparticulados de acordo com a reivindicação 1 ou -2, em que o dito sal de íon de metal monovalente, divalente ou trivalente de um polímero biocompatível e biodegradável tendo grupos acídicos é um sal de sódio, potássio, lítio, cálcio, bário, estrônio, zinco, alumínio, ferro ou cro- mo de ácido algínico, ácido hialurônico ou goma de xantano.

4. Sistemas microparticulados de acordo com qualquer uma das reivinidcações 1 a 3, em que o dito polímero adicional biocompatível e bio- degradável é um copolímero de bloco de polioxietileno-polioxipropileno co- nhecidos como poloxâmeros;

5. Sistemas microparticulados de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 4, tendo um diâmetro compreendido entre 1 e 300 e prefe- rivelmente entre 3 e 100 mícrons.

6. Uso de sistemas microparticulados de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 5, para a preparação de uma formulação farma- cêutica gastrorresistente para a administração de substâncias biologicamen- te ativas para animais.

7. Uso de acordo com a reivindicação 6, em que os ditos animais incluem: suínos, bovinos, caprinos, ovinos, eqüinos, caninos, felinos, drome- dários, lagomorfos, rodentes e outros mamíferos incluindo seres humanos, aves selvagens e peixe, preferivelmente os jovens das ditas espécies.

8. Uso de acordo com a reivindicação 6 ou 7, em que a dita ad- ministração é administração oral.

9. Uso de acordo com a reivindicação 8, em que, no caso de administração oral, os ditos sistemas microparticulados são combinados com uma dieta de líquidos ou sólidos, ou usados com suplementos para a alimen- tação do animal.

10. Uso dos sistemas microparticulados como definidos em qualquer uma das reivindicações 1 a 5 para a preparação de um medica- mento para administração para animais de acordo com a reivindicação 7, para a prevenção de úlceras; estimulação do sistema imune seguida de libe- ração aumentada de interferonas; tornar mais lento o trânsito e a motilidade gastrointestinal (o efeito opióide) com um efeito regulador sobre o fluxo de eletrólitos por toda a mucosa intestinal e conseqüente atividade antidiarréica; conteúdo de malonaldeído de peroxidação de lipídeo reduzido; desempenho reprodutor melhorado e regularizando os ciclos de estrose; incidência redu- zida de retenção placental; incidência reduzida de mastite; eficiência respira- tória melhorada.

11. Uso de acordo com a reivindicação 10, para a preparação de um nutracêutico ou um medicamento que tem ação antibacteriana, antinfla- matória, antioxidante e protetora da membrana da célula, para o tratamento de distúbios pulmonares caracterizados por broncoespasmo agudo ou crôni- co.

12. Uso de acordo com a reivindicação 10 ou 11, para melhorar a qualidade de características organoléticas da carne, mesmo durante o ar- mazenamento.

13. Alimentações animais suplementadas com os sistemas mi- croparticulados como definidos em qualquer uma das reivindicações 1 a 5.

14. Alimentação de animais suplementada com os sistemas mi- croparticulados como definidos em qualquer uma das reivindicações 1 a 5, e antioxidantes não encapsulados.

15. Processo de produção para os sistemas microparticulados compreendendo as etapas a seguir: a) Preparar uma solução, suspensão ou emulsão compreenden- do pelo menos um polímero biocompatível e biodegradável e um tensoativo aniônico, catiônico, anfotérico ou não-iônico; b) Solubilisar ou dispersar pelo menos uma substância biologi- camente ativa na solução, suspensão ou emulsão da etapa a) (mistura A); c) Preparar uma solução aquosa de pelo menos um sal de íon de metal monovalente ou um polímero biocompatível a biodegradável (mistu- ra B); d) Adicionar a solução B à mistura A; e) preparar uma solução ou uma dispersão de pelo menos um polímero gastrorresistente e enterossolúvel (mistura C); f) Adicionar a mistura C à mistura B; g) nebulizar ou extrusar a solução ou suspensão da etapa f) em uma solução aquosa de um sal de íon inorgânco divalente ou trivalente solú- vel; h) como uma alternativa para a etapa g), nebulisar e secar a mistura da etapa f) através de secador por spray.

16. Processo de acordo com a reivindicação 15, em que a dita mistura A é uma solução, suspensão ou emulsão compreendendo pelo me- nos um polímero biocompatível e biodegradável, um tensoativo aniônico, catiônico, anfotérico ou não-iônico e pelo menos uma substância biologica- mente ativa.

17. Processo de acordo com a reivindicação 16, em que a mistu- ra A obtida na etapa b) é preferivelmente uma emulsão ou uma suspensão que é obtida dissolvendo uma quantidade igual de um polímero biocompatí- vel e biodegradável e um tensoativo aniônico, catiônico, anfotérico ou não- iônico em água destilada, preferivelmente a temperatura ambiente, as quan- tidades dos dois componentes mencionados acima estando, respectivamen- te, compreendidas entre: 0,1% e 50% p/v, preferível entre 0,4% e 30% p/v.

18. Processo de acordo com as reivindicações precedentes, em que, à solução assim preparada é adicionada a substância ativa com agita- ção constante, que é continuada até uma solução, suspensão ou emulsão estável ser obtida (mistura A), a quantidade de substância ativa adicionada estando compreendida entre 0,1% p/v e 50% p/v, preferivelmente entre 0,4% e 30% p/v.

19. Processo de acordo com qualquer uma das reivindicações -15 a 18, em que a dita mistura B é uma solução aquosa de pelo menos um sal de íon de metal monovalente de um polímero biocompatível e biodegra- dável.

20. Processo de acordo com qualquer uma das reivindicações -15 a 19, em que a solução C é uma solução de tampão em um pH compre- endido entre 5 e 9, preferivelmente entre 7 e 8, e que compreende um polí- mero gastrorresistente e enterosolúvel em uma quantidade entre 10% e 30% p/v, preferivelmente entre 15% e 25% p/v.

21. Processo de acordo com qualquer uma das reivindicações -15 a 20, em que a solução B é adicionada à mistura A em uma relação vo- lumétrica de 1:2, e a solução assim obtida é adicionada à mistura C em uma relação volumétrica de 3:1.

22. Processo de acordo com qualquer uma das reivindicações - 15 a 21, em que na etapa g), a nebulisação ocorre através de orifícios, bicos, ou agulhas com dimensões entre 10 μπι e 5000 pm, preferivelmente entre - 300 pm e 2000 pm, e a extrusão ocorre por meio de microencapsuladores automáticos, semi- automáticos, peristálticos, pistão ou outras bombas, ou usando seringa automática a manualmente ativada e / ou automática ope- rando em uma velocidade tal para produzir 10 e 250 gotas / minuto, preferi- velmente de 20 a 120 gotas/minuto.

23. Processo de acordo com qualquer uma das reivindicações 15 a 22, em que, na etapa g), a dita solução de sal inorgânico de íon divalen- te ou trivalente é uma solução aquosa de cloretos de cálcio, bário, estrônio, zinco, alumínio, ferro ou cromo.

24. Processo de acordo com qualquer uma das reivindicações 15 a 23, em que a dita solução de sal inorgârnico tem uma concentração de entre 0,1 e 2,0 M, preferivelmente entre 0,2 e 0,8 M.

25. Processo de acordo com qualquer uma das reivindicações 15 a 24, adicionalmente compreendendo a etapa de ligação cruzada de su- perfícies externas dos sistemas microparticulados, através do uso de agen- tes de ligação cruzada tais como: sulfato ou fosfato de protamina, bromidrato de poli-L-lisina, polivinilamina, ou quitosanas.

26. Processo de acordo com a reivindicação 25, em que os ditos agentes de ligação cruzada são soluções aquosas em concentrações entre 0,1 e 5% p/v.

27. Processo de acordo com qualquer uma das reivindicações 15 a 26, adicionalmente compreendendo a etapa de liofilisação dos ditos sistemas microparticulados.

28. Processo de acordo com a reivindicação 15, em que à mistu- ra de componentes ativos, com excipientes conhecidos daqueles versados na técnica, são adicionados agentes de ligação e outros excipientes para dar uma massa úmida que é extrusada por meio de um granulador para dar grâ- nulos esferoidais.

29. Processo de acordo com a reivindicação 28, em que os ditos grânulos esferoidais têm uma distribuição granulométrica compreendida en- tre 50 e 1000 mícrons, e preferivelmente entre 150 e 500 mícrons.

30. Processo de acordo com a reivindicação 28 ou 29, em que os ditos grânulos esferoidais são revestidos com um polímero gastrorresis- tente e enterosolúvel.