CN103494178A - 一种香菇总生物碱的提取方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种香菇总生物碱的提取方法：香菇粉末与硅藻土混和研磨均匀，转移至底部放有滤纸的萃取池中，且填满萃取池，进行加速溶剂萃取，设定加速溶剂萃取的参数为：提取溶剂：体积分数60～95%的乙醇，提取温度60～180℃、提取压力1000～3000psi，提取次数1～5次，提取时间5～30min、吹洗体积10～100%萃取池体积、吹洗时间80～300s，所得到的提取液过滤，经旋蒸仪蒸干之后用盐酸溶解，抽滤，滤液再用浓氨水调节pH值，将其移至分液漏斗中用氯仿萃取，取氯仿层，最后真空浓缩干燥。本发明采用快速溶剂萃取法提取香菇总生物碱，具有耗时少、消耗溶剂少、提取效率高、萃取残留少、操作过程简单自动化、操作模式多样化等优点。
Description
技术领域
本发明属于食品工业领域，特别涉及一种香菇总生物碱的提取方法。
背景技术
香菇是侧耳科的担子菌，是一种食药用菌，具有化痰理气、健脾开胃、治风破血及保肝等功能。随着近代生物化学和医药学的发展，以香菇为原料开发各种保健食品、饮品、调味品和药品，已引起国内外许多生命科学研究所或生物高科技公司的兴趣和重视。但一直以来，研究的较多的是香菇中的多糖类活性物质，而香菇生物碱的研究在我国并未见报道。
生物碱（Alkaloids）是一类重要的天然有机化合物，大多数生物碱均几乎不溶或难溶于水。能溶于氯仿、乙醚、酒精、丙酮、苯等有机溶剂。也能溶于稀酸的水溶液而成盐类。一些生物碱因其具有抗癌、抗肿瘤、抗炎、抗病毒、降血脂、降血压等作用，在食品、卫生、医药等方面有着巨大的应用潜力，近年来成为人们研究的热点。但是，尚有很多种生物碱未进行研究开发，有些植物的活性成分尚有待进一步研究。这就迫切需要从大量的含有生物碱的植物中提取、分离出生物碱，特别是利用现代微量、高效的分离手段对其进行系统研究。
目前，生物碱的常规提取方法主要有浸渍法、渗漉法、回流法、微波辅助萃取、超声波提取法、超临界流体萃取法等方法。传统的方法溶剂消耗量大，操作复杂，提取新技术如快速溶剂萃取法较传统法的提高效率有所提高，且保持了生物碱的品质和活性。
发明内容
本发明所要解决的问题是传统溶剂提取法提取时间长、提取效率低的问题，采用快速溶剂萃取法（ASE）进行了香菇总生物碱提取工艺条件研究，提高提取效率，缩短提取时间，有效降低成本。
ASE又称快速溶剂萃取，其原理是在密闭容器内，在较高温度(50～200℃)和压力(6.89～20.7MPa)的条件下，用溶剂萃取固体或半固体样品的新颖样品前处理方法。ASE技术较常规提取方法具有耗时少、消耗溶剂少、提取效率高、萃取残留少、操作过程简单自动化、操作模式多样化等优点，是提取工业中一种高效的提取方法。
为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：
一种香菇总生物碱的提取方法，所述方法包括以下步骤：
（1）预处理：香菇烘干后粉碎过筛，得香菇粉末，香菇粉末与硅藻土按质量比1：1～3混合，研磨均匀，得混合样品；
（2）将步骤（1）的混合样品转移至底部放有滤纸的萃取池中，且混合样品填满萃取池，进行加速溶剂萃取，设定加速溶剂萃取的参数为：提取溶剂：体积分数60～95%的乙醇，提取温度60～180℃、提取压力1000～3000psi，提取次数1～5次，提取时间5～30min、吹洗体积10～100%萃取池体积、吹洗时间80～300s；
（3）步骤（2）得到的提取液过滤，旋蒸仪蒸干，用质量分数1～5%（优选2%）的盐酸溶解，抽滤，滤液用浓氨水调pH值至10～11，再用氯仿萃取，取氯仿层减压浓缩、干燥，制得所述香菇总生物碱。
所述步骤（1）中，香菇粉末与硅藻土优选按质量比1：1.5～2混合。
所述步骤（1）中，香菇粉末通常为40～60目。
所述步骤（2）中，加速溶剂萃取的参数优选为：提取溶剂：体积分数80～95%的乙醇，提取温度100～140℃，提取压力1500psi，提取次数2次，提取时间10～15min，吹洗体积：90%萃取池体积；吹洗时间120s。
更优选的，所述加速溶剂萃取的参数优选为以下之一：
（a）以体积分数80%乙醇为提取溶剂，提取温度140℃、提取压力1500psi、提取2次、提取时间15min、吹洗体积90%萃取池体积、吹洗时间120s；
（b）以体积分数95%乙醇为提取溶剂，提取温度100℃、提取压力1500psi、提取2次、提取时间10min、吹洗体积90%萃取池体积、吹洗时间120s。
所述ASE提取利用ASE萃取仪，操作方法是公知的。萃取池底部提前加入滤纸，将萃取池放在圆盘式传送装置上将萃取的条件（温度、压力、时间、溶剂选择、循环萃取次数等）输入面板，以下步骤将完全自动先后进行：圆盘传送装置将萃取池送入加热炉腔并与相对编号的收集瓶联接，泵将溶剂输送入萃取池，萃取池在加热炉被加温和加压，在设定的温度和压力下静态萃取，多次少量向萃取池加入清洗溶剂，萃取液自动经过滤膜进入收集瓶，用N2吹洗萃取池和管道，萃取液全部进入收集瓶待分析。自动完成一次全过程仅需20min。
本发明的有益效果是：
采用快速溶剂萃取法提取香菇总生物碱，具有耗时少、消耗溶剂少、提取效率高、萃取残留少、操作过程简单自动化、操作模式多样化等优点。本发明优化了提取工艺，使香菇总生物碱的提取率显著提高。
附图说明
图1为本发明香菇总生物碱的提取工艺流程图。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明进一步描述，但本发明的保护范围并不仅限于此：
实施例1
香菇烘干后粉碎过筛，得60目的香菇粉末，取4g香菇粉末与6g硅藻土按质量比4：6混合，研磨均匀，得混合样品；萃取池底部提前加入滤纸，将混合样品移至萃取池，铺满，拧紧顶部池帽后将萃取池放在萃取池固定装置上。以体积分数80%乙醇为提取溶剂，设定ASE提取方法参数：提取温度140℃、提取压力1500psi、提取2次、萃取15min、吹洗体积90%、吹洗时间120s。启动加速溶剂萃取仪，提取完成后自动停止。提取液过滤，经旋蒸仪蒸干之后用20mL质量分数2％的盐酸溶解，真空泵抽滤，滤液再用浓氨水调节pH值至10～11，将其移至分液漏斗中用氯仿萃取3次，取氯仿层，最后用旋蒸仪真空浓缩、冷冻干燥，制得香菇总生物碱0.046g。用紫外分光光度仪测吸光度，根据标准品得到的回归方程计算产品中总生物碱含量为0.386%。
实施例2
香菇烘干后粉碎过筛，得60目的香菇粉末，取4g香菇粉末与6g硅藻土按质量比4：6混合，研磨均匀，得混合样品；萃取池底部提前加入滤纸，将混合样品移至萃取池，铺满，拧紧顶部池帽后将萃取池放在萃取池固定装置上。以体积分数95%乙醇为提取溶剂，设定ASE提取方法参数：提取温度100℃、提取压力1500psi、提取2次、萃取10min、吹洗体积90%、吹洗时间120s。启动加速溶剂萃取仪，提取完成后自动停止。粗提取液过滤，经旋蒸仪蒸干之后用20mL质量分数2％的盐酸溶解，真空泵抽滤，滤液再用浓氨水调节pH值至10～11，将其移至分液漏斗中用氯仿萃取3次，取氯仿层，最后用旋蒸仪真空浓缩、干燥，制得香菇总生物碱0.032g。用紫外分光光度仪测吸光度，根据标准品得到的回归方程计算产品中总生物碱含量为0.277%。
Claims (5)
1.一种香菇总生物碱的提取方法，其特征在于所述方法包括以下步骤：
（1）预处理：香菇烘干后粉碎过筛，得香菇粉末，香菇粉末与硅藻土按质量比1：1～3混合，研磨均匀，得混合样品；
（2）将步骤（1）的混合样品转移至底部放有滤纸的萃取池中，且混合样品填满萃取池，进行加速溶剂萃取，设定加速溶剂萃取的参数为：提取溶剂：体积分数60～95%的乙醇，提取温度60～180℃、提取压力1000～3000psi，提取次数1～5次，提取时间5～30min、吹洗体积10～100%萃取池体积、吹洗时间80～300s；
（3）步骤（2）得到的提取液过滤，旋蒸仪蒸干，用质量分数1～5%的盐酸溶解，抽滤，滤液用浓氨水调pH值至10～11，再用氯仿萃取，取氯仿层减压浓缩、干燥，制得所述香菇总生物碱。
2.如权利要求1所述的方法，其特征在于所述步骤（1）中，香菇粉末与硅藻土按质量比1：1.5～2混合。
3.如权利要求1所述的方法，其特征在于所述步骤（1）中，香菇粉末为40～60目。
4.如权利要求1所述的方法，其特征在于所述步骤（2）中，加速溶剂萃取的参数为：提取溶剂：体积分数80～95%的乙醇，提取温度100～140℃，提取压力1500psi，提取次数2次，提取时间10～15min，吹洗体积：90%萃取池体积；吹洗时间120s。
5.如权利要求1所述的方法，其特征在于所述步骤（2）中，所述加速溶剂萃取的参数为以下之一：
（a）以体积分数80%乙醇为提取溶剂，提取温度140℃、提取压力1500psi、提取2次、提取时间15min、吹洗体积90%萃取池体积、吹洗时间120s；
（b）以体积分数95%乙醇为提取溶剂，提取温度100℃、提取压力1500psi、提取2次、提取时间10min、吹洗体积90%萃取池体积、吹洗时间120s。
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