CN103424497A - 一种氯甲酸异丁酯的检测方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了一种氯甲酸异丁酯的检测方法，所述检测方法包括采用气相色谱内标法测定氯甲酸异丁酯的含量，和采用酸碱滴定法对氯甲酸异丁酯样品中的游离酸进行测定，所述检测方法测定准确，灵敏度高，重复性好，能够有效控制氯甲酸异丁酯的质量。
Description
技术领域
本发明涉及一种氯甲酸异丁酯的检测方法，属于药品的技术领域。
背景技术
乙型病毒性肝炎，简称乙肝，是一种由乙型肝炎病毒（HBV）感染机体后所引起的疾病。乙型肝炎病毒是一种嗜肝病毒，主要存在于肝细胞内并损害肝细胞，引起肝细胞炎症、坏死、纤维化。抗乙肝药物Y101-Y是由贵州百灵企业集团制药股份有限公司投资，由贵州省·中科院天然产物化学重点实验室、天津药物研究院、解放军302医院联合攻关的抗乙肝国家一类新药。氯甲酸异丁酯（IBCF）是一种重要的有机化工原料，是抗乙肝药物Y101-Y中间体生产中用到的重要反应试剂。目前尚未见国内外采用毛细管气相色谱和酸碱滴定法对氯甲酸异丁酯进行质量控制的报道。为了更好地控制氯甲酸异丁酯的质量，确保抗乙肝药物Y101-Y的药效，本发明提供了氯甲酸异丁酯的质量检测方法。
本发明所述氯甲酸异丁酯的相关信息为：中文名称：氯甲酸异丁酯；英文名称：Isobutyl chloroformate；分子量：136.58；分子式：C5H9ClO2 ；
结构式：
发明内容
本发明所要解决的技术问题在于：提供一种氯甲酸异丁酯的检测方法；所述检测方法准确，灵敏度高，重复性好。
本发明所述氯甲酸异丁酯的检测方法是这样的：
一种氯甲酸异丁酯的检测方法，所述氯甲酸异丁酯的含量测定方法采用气相色谱内标法，以正辛烷为内标物测定，步骤如下：
①仪器设备及色谱条件：
仪器设备：Agilent 6890 Series GC System，配备FID检测器，Chemstation色谱工作站；色谱柱：以5%-苯基-甲基聚硅氧烷或二甲基聚硅氧烷为固定相的毛细管气相色谱柱；汽化温度：160-200℃；检测温度：160-200℃；柱温：40-60℃；载气：氮气1.0-1.5ml/min；燃气：氢气35-45ml/min；助燃气：空气380-420ml/min；分流比：30:1；进样量：1-10μl；
②溶液的制备：
正辛烷内标储备液的制备：取正辛烷，精密称定，以三氯甲烷配制成浓度为1-2mg/ml，即得；
标准溶液的制备：称取氯甲酸异丁酯对照品，以三氯甲烷配制成浓度为3.0-7.0mg/ml；精密量取此溶液0.5-1.0ml置10ml量瓶中，精密加入正辛烷内标储备液0.5-2ml，用三氯甲烷定容，摇匀，即得；
供试品溶液的制备：精密称取氯甲酸异丁酯样品，用三氯甲烷溶解制成相当于浓度为3.0-5.0mg/ml的溶液；分别精密量取此溶液和正辛烷内标储备液各1ml置同一10ml量瓶中，用三氯甲烷定容，摇匀，即得；
③测定法：分别取标准溶液和供试品溶液在色谱条件下进样1-10μl进样分析，按内标法以峰面积，计算即得。
具体地说，所述氯甲酸异丁酯的含量测定方法为：
①仪器设备及色谱条件：
仪器设备：Agilent 6890 Series GC System，配备FID检测器，Chemstation色谱工作站；色谱柱：以5%-苯基-甲基聚硅氧烷为固定相的毛细管气相色谱柱；汽化温度：180℃；检测温度：180℃；柱温：50℃；载气：氮气1.2ml/min；燃气：氢气40ml/min；助燃气：空气400ml/min；分流比：30:1；进样量：1μl；
②溶液的制备：
正辛烷内标储备液的制备：取正辛烷，精密称定，以三氯甲烷配制成浓度为1.6mg/ml，即得；
标准溶液的制备：称取氯甲酸异丁酯对照品，以三氯甲烷配制成浓度为5.0mg/ml；精密量取此溶液0.8ml置10ml量瓶中，精密加入正辛烷内标储备液1ml，用三氯甲烷定容，摇匀，即得；
供试品溶液的制备：精密称取氯甲酸异丁酯样品，用三氯甲烷溶解制成相当于浓度为4.0mg/ml的溶液；分别精密量取此溶液和正辛烷内标储备液各1ml置同一10ml量瓶中，用三氯甲烷定容，摇匀，即得；
③测定法：分别取标准溶液和供试品溶液在色谱条件下进样1μl进样分析，按内标法以峰面积，计算即得。
前述的氯甲酸异丁酯的检测方法，所述检测方法还包括：采用酸碱滴定法测定游离酸的含量，步骤如下：
取80-120ml无二氧化碳的水，加入1-4滴酚酞指示液，用0.05mol/L的氢氧化钠标准滴定溶液中和至溶液呈粉红色，保持20-40s，加入氯甲酸异丁酯样品10-30ml，置分液漏斗中振摇2-5min，静置60-80min，分离出40-60ml上层的水相，加入1-4滴酚酞指示液，用0.05mol/L的氢氧化钠标准滴定溶液滴定至溶液呈粉红色，保持30-60s；
结果计算：非水溶性样品的酸度以H+计质量摩尔浓度b1，数值以mmol/g表示，按下式计算：
式中：
V：氢氧化钠标准滴定溶液体积的数值，单位：ml；
C：氢氧化钠标准滴定溶液浓度的准确数值，单位：mol/L；
M：样品质量的数值，单位：g。
具体地说，前述的氯甲酸异丁酯的检测方法中，所述游离酸的含量测定步骤如下：
取100ml无二氧化碳的水，加入2滴酚酞指示液，用0.05mol/L的氢氧化钠标准滴定溶液中和至溶液呈粉红色，并保持30s，加入氯甲酸异丁酯样品20ml ，在分液漏斗中振摇3min，避免剧烈振摇，静置70min，立即分出50ml上层的水相，加入2滴酚酞指示液，用0.05mol/L的氢氧化钠标准滴定溶液滴定至溶液呈粉红色，并应至少保持30s；分出水相后必须尽快完成滴定；
结果计算：非水溶性样品的酸度以H+计质量摩尔浓度b1，数值以mmol/g表示，按下式计算：
式中：
V：氢氧化钠标准滴定溶液体积的数值，单位：ml；
C：氢氧化钠标准滴定溶液浓度的准确数值，单位：mol/L；
M：样品质量的数值，单位：g。
本发明所述检测方法是经过大量的筛选试验得到的最佳方案，以下实验研究为本发明的优选过程：
实验例1：氯甲酸异丁酯的含量测定方法研究
1.1仪器、色谱条件及试药：
Agilent 6890 Series GC System，配备FID检测器，Chemstation色谱工作站。色谱柱选用HP-5 30m×0.32mm×0.25μm毛细管柱（即5%-苯基-甲基聚硅氧烷为固定相的毛细血管柱）；汽化温度180℃；检测温度180℃；柱温50℃；载气：氮气1.2ml/min；燃气：氢气40ml/min；助燃气空气400ml/min；进样量1μl进样分析。
正辛烷（色谱纯）购于国药集团化学试剂有限公司；氯甲酸异丁酯样品三批（批号：20100226，20100626，20110226）购于上海翰鸿化工科技有限公司；三氯甲烷（分析纯）购于上海申博化工有限公司。
1.2气相色谱条件选择
1.2.1色谱柱选择：为使氯甲酸异丁酯具有良好的分离度和合适的保留时间，考察了三根不同型号的石英毛细管柱。结果显示HP-5毛细管柱（即5%-苯基-甲基聚硅氧烷为固定相的毛细血管柱）能对样品实现良好的分离且峰形对称性较佳。HP-1毛细管柱（即二甲基聚硅氧烷为固定相的毛细管气相色谱柱）对样品的分离效果及峰形对称性次佳。
表1色谱柱的选择
| 色谱柱 | 保留时间（min） | 主峰峰宽 | 主峰对称性 |
| HP-35 | 3.609 | 0.0229 | 1.145 |
| HP-5 | 4.908 | 0.0329 | 0.881 |
| HP-1 | 3.234 | 0.0284 | 0.815 |
1.2.2内标物选择：采用内标法测定样品含量，可以减少仪器误差及实验者的操作误差。色谱内标物应与被测组分的相对分子质量和沸点相近，且保留时间相近，但又能有效分离。考察了正壬烷和正辛烷作为内标物时与样品峰的分离情况，结果显示用正壬烷作内标物时，氯甲酸异丁酯样品主峰与正壬烷的峰之间有杂质峰，而用正辛烷作内标物时，与样品主峰保留时间相近且分离效果好。
表2内标物的选择
1.3溶液的制备
1.3.1正辛烷内标储备液的制备
称取正辛烷（峰面积归一化法按纯度99.51%计）适量置100ml量瓶中，用三氯甲烷定容，使成浓度为1.6018mg/ml的储备液。
1.3.2标准储备液的制备
称取氯甲酸异丁酯对照品（峰面积归一化法按纯度99.768%计）适量置50ml量瓶中，用三氯甲烷定容，使成浓度为5.0348mg/ml的储备液。
1.3.3供试品溶液的制备
称取氯甲酸异丁酯样品适量，精密称定，置10ml容量瓶中，用三氯甲烷配制成浓度约4.0mg/ml的样品储备液。精密量取氯甲酸异丁酯样品储备液1ml置10ml量瓶中，精密加入正辛烷内标储备液1ml，加三氯甲烷定容，摇匀，作为供试品溶液。
1.4方法学考察
1.4.1系统适应性试验
分别精密量取标准储备液及供试品溶液1μl进样，注入气相色谱仪，记录色谱图。结果表明理论板数按氯甲酸异丁酯计算不低于3×104，与三氯甲烷及正辛烷的分离度良好，与相邻色谱峰的分离度均大于3（见附图1、2）。
1.4.2标准曲线的绘制
精密量取标准储备液0.6、0.7、0.8、0.9、1.0ml，分别置10ml量瓶中，各精密加入正辛烷内标储备液1ml，用三氯甲烷稀释至刻度，摇匀，制成一系列质量浓度的对照品溶液，按选定的色谱条件进样测定，记录色谱图，以氯甲酸异丁酯对照品峰面积与正辛烷峰面积的比值为纵坐标Y，对照品浓度与正辛烷浓度的比值为横坐标X，进行线性回归计算。结果显示氯甲酸异丁酯在0.30288~0.49345μg范围内线性关系良好（见附图3）。回归方程：
Area Ratio = 0.41598806×AmtRatio + 0.0043452（γ=0.99991）。
表3 氯甲酸异丁酯线性关系考察
1.4.3检测限与定量限
取标准储备液，以三氯甲烷逐步稀释后取1μl进样。以信噪比（S/N）为3:1测定对照品的检测限，结果检测限为1.7ng（n=6）。以信噪比（S/N）为10:1测定对照品的定量限，结果定量限为5.8ng（n=6）。
表4 检测限与定量限测定结果
| 检测项目 | 检测结果（n=6） |
| 检测限 | 1.7ng |
| 定量限 | 5.8ng |
1.4.4系统重复性试验
精密量取标准储备液0.6ml、0.8ml、1.0ml分别置10ml量瓶中，精密加入正辛烷内标储备液1ml，用三氯甲烷定容。每样分别进样测定两次，测得平均校正因子为2.380，其RSD为0.80%（n=6）。
表5 系统重复性试验结果
1.4.5精密度试验
取线性项下的同一中间浓度的标准储备液，连续重复进样6次，氯甲酸异丁酯峰面积与正辛烷峰面积比值的RSD为0.16%，表明进样精密度良好。
表6 精密度试验结果
1.4.6重复性试验
精密称取同一批号的氯甲酸异丁酯（批号20110226）样品9份，置10ml容量瓶中，用三氯甲烷配制成浓度分别为3.2、4.0、4.8mg/ml的样品储备液（每个浓度水平平行备三份）。各量取样品储备液1ml置10ml量瓶中，各精密加入正辛烷内标储备液1ml，制成供试品溶液，进样测定，氯甲酸异丁酯样品的平均含量为97.39%，RSD为1.51%。
表7 重复性试验结果
1.4.7稳定性试验
取同一瓶氯甲酸异丁酯供试品溶液，在0、1.5、3、4.5、6.5、8h进样，按上述色谱条件测定，计算。氯甲酸异丁酯峰面积与正辛烷峰面积比值的RSD为0.62%。
表8 稳定性试验结果
1.4.8加样回收率试验
对照品储备液的制备：精密称取氯甲酸异丁酯对照品0.25298g（含量99.768%，氯甲酸异丁酯0.25239g）置50ml容量瓶中，结果浓度为5.0478mg/ml。
正辛烷内标储备液的制备：称取正辛烷适量置100ml量瓶中，用三氯甲烷稀释至刻度，使成浓度为1.5922mg/ml的储备液。
称取已知含量的样品适量置10ml量瓶中，共9份，分别精密加入80%，100%，120%的对照品储备液（分别为3.2ml，4.0ml，4.8ml），用三氯甲烷稀释至刻度。从中精密量取1ml置10ml量瓶中，精密加入正辛烷内标储备液1ml，用三氯甲烷稀释至刻度，即得加标回收率供试品溶液。在上述色谱条件下进样1μl测定。氯甲酸异丁酯对照品的平均回收率（n=9）为96.66%，RSD为1.20%。
表9 回收率测定结果
1.4.9样品含量测定
称取氯甲酸异丁酯样品适量置10ml容量瓶中，精密称定，用三氯甲烷制成浓度约为4.0mg/ml的样品储备液，从中精密量取1ml置10ml量瓶中，各精密加入正辛烷内标储备液1ml，制成样品供试品溶液。同法测定，3批氯甲酸异丁酯样品（批号：20100226，20100626，20110226）含量分别为97.29%、98.77%和97.65%。
表10 样品含量测定结果
1.4.10耐用性试验
对照品储备液的制备：精密称取氯甲酸异丁酯对照品0.12575g（含量99.768%，氯甲酸异丁酯0.12546g）置50ml容量瓶中，结果浓度为5.0196mg/ml。
正辛烷内标储备液的制备：称取正辛烷适量置100ml量瓶中，用三氯甲烷稀释至刻度，使成浓度为1.6018mg/ml的储备液。
校正因子测定：精密量取氯甲酸异丁酯对照品储备溶液0.8ml置10ml量瓶中，精密加入正辛烷内标储备液1ml，用三氯甲烷定容。每样分别进样测定，测得平均校正因子如下表。
表11 耐用性试验校正因子测定结果
含量测定：
供试品溶液的制备：分别精密称取氯甲酸异丁酯样品（批号20100226，20110226）各两份置10ml容量瓶中，用三氯甲烷定容，作为样品储备液。从中精密量取氯甲酸异丁酯样品储备液1ml置10ml量瓶中，各精密加入正辛烷内标储备液1ml，制成样品供试品溶液。在上述色谱条件的基础上，在不同的进样口温度、检测器温度、柱温及柱型等条件下分别测定其含量。结果见下表。
表12 耐用性试验含测结果
1.5结论：
氯甲酸异丁酯的含量测定方法研究中，线性试验表明，在一定浓度下，氯甲酸异丁酯的回归方程相关系数在0.999以上，线性关系良好，易于定量准确；检测限及定量限试验表明，检测限为1.7ng，定量限为5.8ng，最小检测量和最小定量均达到纳克级，灵敏度高；精密度试验测出相对标准偏差小于2%，表明方法重复性好。
实施例2 游离酸含量的测定
2.1主要实验仪器及试剂
METTLER TOLEDO FE20 pH计；滴定管（25ml，0.1ml）；滴定管夹。
氯甲酸异丁酯样品三批（上海翰鸿化工科技有限公司生产，批号分别为：20100626，20100226，20110226），对照品氯甲酸异丁酯（批号W20100402，购于国药集团化学试剂有限公司，标示含量不低于99.0%），冰醋酸（国药集团化学试剂有限公司），乙酸酐（成都市联合化工试剂研究所），酚酞（国药集团化学试剂有限公司），高氯酸（天津市鑫源化工有限公司）。
2.2标准曲线的绘制
取100ml无二氧化碳的水，加入2滴酚酞指示液，用0.1mol/L氢氧化钠标准滴定溶液中和至溶液呈粉红色，并保持30s。加入氯甲酸异丁酯样品20ml，在分液漏斗中振摇3min，静置分层，分出20ml水相，加入1滴酚酞指示液，用氢氧化钠标准滴定溶液滴定至溶液呈粉红色，并保持30s。静置约70min后分层明显，分出水层。立即开始滴定，用pH计检测。用消耗氢氧化钠液体积V(ml)为横坐标，pH值为纵坐标作图。见附图4。
表13 绘制标准曲线结果数据
| 序号 | 消耗氢氧化钠液体积V(ml) | pH值 |
| 1 | 0.2 | 2.51 |
| 2 | 0.4 | 2.52 |
| 3 | 0.6 | 2.55 |
| 4 | 0.8 | 2.58 |
| 5 | 1.0 | 2.62 |
| 6 | 1.2 | 2.67 |
| 7 | 1.4 | 2.71 |
| 8 | 1.6 | 2.79 |
| 9 | 1.8 | 2.91 |
| 10 | 2.0 | 3.05 |
| 11 | 2.2 | 3.36 |
| 12 | 2.3 | 3.86 |
| 13 | 2.4 | 9.17 |
| 14 | 2.5 | 10.27 |
| 15 | 2.6 | 10.64 |
| 16 | 2.7 | 10.84 |
| 17 | 2.8 | 10.97 |
| 18 | 2.9 | 11.08 |
| 19 | 3.0 | 11.15 |
| 20 | 3.1 | 11.23 |
| 21 | 3.3 | 11.36 |
| 22 | 3.5 | 11.44 |
| 23 | 3.7 | 11.51 |
| 24 | 3.9 | 11.57 |
| 25 | 4.0 | 11.60 |
| 26 | 4.2 | 11.64 |
| 27 | 4.6 | 11.72 |
| 28 | 4.8 | 11.75 |
| 29 | 5.0 | 11.79 |
2.3游离酸的含量测定
取100ml无二氧化碳的水，加入2滴酚酞指示液，用0.05mol/L的氢氧化钠标准滴定溶液中和至溶液呈粉红色，并保持30s。加入氯甲酸异丁酯样品20ml ，在分液漏斗中振摇3min（避免剧烈振摇），静置70min，立即分出50ml水相（上层），加入2滴酚酞指示液（按中国药典2010版二部附录XV E配制指示液），用0.05mol/L的氢氧化钠标准滴定溶液滴定至溶液呈粉红色，并应至少保持30s。（本操作中分出水相后必须尽可能快速完成滴定。）
表14 游离酸测定结果
本发明的有益效果在于：本法采用气相色谱内标法测定氯甲酸异丁酯的含量，并采用酸碱滴定法对氯甲酸异丁酯样品中的游离酸（以HCl计）进行测定，所述检测方法测定准确，灵敏度高，重复性好，能够有效控制氯甲酸异丁酯的质量，达到了发明目的。
附图说明：
下面结合附图对本发明技术方案进一步说明：
图1：氯甲酸异丁酯样品与正辛烷溶液的气相色谱图
图2：氯甲酸异丁酯对照品溶液的气相色谱图
图3：氯甲酸异丁酯对照品工作曲线图
图4：氯甲酸异丁酯中游离酸滴定曲线图。
具体实施方式
实施例1：
所述氯甲酸异丁酯的含量测定方法采用气相色谱内标法，以正辛烷为内标物测定，步骤如下：
①仪器设备及色谱条件：
仪器设备：Agilent 6890 Series GC System，配备FID检测器，Chemstation色谱工作站；色谱柱：以5%-苯基-甲基聚硅氧烷为固定相的毛细管气相色谱柱；汽化温度：180℃；检测温度：180℃；柱温：50℃；载气：氮气1.2ml/min；燃气：氢气40ml/min；助燃气：空气400ml/min；分流比：30:1；进样量：1μl；
②溶液的制备：
正辛烷内标储备液的制备：取正辛烷，精密称定，以三氯甲烷配制成浓度为1.6mg/ml，即得；
标准溶液的制备：称取氯甲酸异丁酯对照品，以三氯甲烷配制成浓度为5.0mg/ml；精密量取此溶液0.8ml置10ml量瓶中，精密加入正辛烷内标储备液1ml，用三氯甲烷定容，摇匀，即得；
供试品溶液的制备：精密称取氯甲酸异丁酯样品，用三氯甲烷溶解制成相当于浓度为4.0mg/ml的溶液；分别精密量取此溶液和正辛烷内标储备液各1ml置同一10ml量瓶中，用三氯甲烷定容，摇匀，即得；
③测定法：分别取标准溶液和供试品溶液在色谱条件下进样1μl进样分析，按内标法以峰面积,计算即得。
实施例2：
所述氯甲酸异丁酯中游离酸的含量测定方法采用酸碱滴定法，步骤如下：
取100ml无二氧化碳的水，加入2滴酚酞指示液，用0.05mol/L的氢氧化钠标准滴定溶液中和至溶液呈粉红色，并保持30s，加入氯甲酸异丁酯样品20ml ，在分液漏斗中振摇3min，避免剧烈振摇，静置70min，立即分出50ml上层的水相，加入2滴酚酞指示液，用0.05mol/L的氢氧化钠标准滴定溶液滴定至溶液呈粉红色，并应至少保持30s；分出水相后必须尽快完成滴定；
结果计算：非水溶性样品的酸度以H+计质量摩尔浓度b1，数值以mmol/g表示，按下式计算：
式中：
V：氢氧化钠标准滴定溶液体积的数值，单位：ml；
C：氢氧化钠标准滴定溶液浓度的准确数值，单位：mol/L；
M：样品质量的数值，单位：g。
实施例3：
所述氯甲酸异丁酯的含量测定方法采用气相色谱内标法，以正辛烷为内标物测定，步骤如下：
①仪器设备及色谱条件：
仪器设备：Agilent 6890 Series GC System，配备FID检测器，Chemstation色谱工作站；色谱柱：以二甲基聚硅氧烷为固定相的毛细管气相色谱柱；汽化温度：200℃；检测温度：200℃；柱温：60℃；载气：氮气1.5ml/min；燃气：氢气45ml/min；助燃气：空气420ml/min；分流比：30:1；进样量：10μl；
②溶液的制备：
正辛烷内标储备液的制备：取正辛烷，精密称定，以三氯甲烷配制成浓度为2mg/ml，即得；
标准溶液的制备：称取氯甲酸异丁酯对照品，以三氯甲烷配制成浓度为7.0mg/ml；精密量取此溶液1.0ml置10ml量瓶中，精密加入正辛烷内标储备液2ml，用三氯甲烷定容，摇匀，即得；
供试品溶液的制备：精密称取氯甲酸异丁酯样品，用三氯甲烷溶解制成相当于浓度为5.0mg/ml的溶液；分别精密量取此溶液和正辛烷内标储备液各1ml置同一10ml量瓶中，用三氯甲烷定容，摇匀，即得；
③测定法：分别取标准溶液和供试品溶液在色谱条件下进样10μl进样分析，按内标法以峰面积计算即得。
所述氯甲酸异丁酯中游离酸的含量测定方法采用酸碱滴定法，步骤如下：
取120ml无二氧化碳的水，加入4滴酚酞指示液，用0.05mol/L的氢氧化钠标准滴定溶液中和至溶液呈粉红色，保持40s，加入氯甲酸异丁酯样品30ml，置分液漏斗中振摇5min，避免剧烈振摇,静置80min，分离出60ml上层的水相，加入4滴酚酞指示液，用0.05mol/L的氢氧化钠标准滴定溶液滴定至溶液呈粉红色，保持60s；在分离出水相后必须立即完成滴定。
结果计算：非水溶性样品的酸度以H+计质量摩尔浓度b1，数值以mmol/g表示，按下式计算：
式中：
V：氢氧化钠标准滴定溶液体积的数值，单位：ml；
C：氢氧化钠标准滴定溶液浓度的准确数值，单位：mol/L；
M：样品质量的数值，单位：g。
实施例4：
所述氯甲酸异丁酯的含量测定方法采用气相色谱内标法，以正辛烷为内标物测定，步骤如下：
①仪器设备及色谱条件：
仪器设备：Agilent 6890 Series GC System，配备FID检测器，Chemstation色谱工作站；色谱柱：以5%-苯基-甲基聚硅氧烷为固定相的毛细管气相色谱柱；汽化温度：160℃；检测温度：160℃；柱温：40℃；载气：氮气1.0ml/min；燃气：氢气35ml/min；助燃气：空气380ml/min；分流比：30:1；进样量：5μl；
②溶液的制备：
正辛烷内标储备液的制备：取正辛烷，精密称定，以三氯甲烷配制成浓度为1mg/ml，即得；
标准溶液的制备：称取氯甲酸异丁酯对照品，以三氯甲烷配制成浓度为3.0mg/ml；精密量取此溶液0.5ml置10ml量瓶中，精密加入正辛烷内标储备液0.5ml，用三氯甲烷定容，摇匀，即得；
供试品溶液的制备：精密称取氯甲酸异丁酯样品，用三氯甲烷溶解制成相当于浓度为3.0mg/ml的溶液；分别精密量取此溶液和正辛烷内标储备液各1ml置同一10ml量瓶中，用三氯甲烷定容，摇匀，即得；
③测定法：分别取标准溶液和供试品溶液在色谱条件下进样5μl进样分析，按内标法以峰面积计算即得。
所述氯甲酸异丁酯中游离酸的含量测定方法采用酸碱滴定法，步骤如下：
取80ml无二氧化碳的水，加入1滴酚酞指示液，用0.05mol/L的氢氧化钠标准滴定溶液中和至溶液呈粉红色，保持20s，加入氯甲酸异丁酯样品10ml，置分液漏斗中振摇2min，避免剧烈振摇,静置60min，分离出40ml上层的水相，加入1滴酚酞指示液，用0.05mol/L的氢氧化钠标准滴定溶液滴定至溶液呈粉红色，保持30s；在分离出水相后必须立即完成滴定。
结果计算：非水溶性样品的酸度以H+计质量摩尔浓度b1，数值以mmol/g表示，按下式计算：
式中：
V：氢氧化钠标准滴定溶液体积的数值，单位：ml；
C：氢氧化钠标准滴定溶液浓度的准确数值，单位：mol/L；
M：样品质量的数值，单位：g。
Claims (4)
1.一种氯甲酸异丁酯的检测方法，其特征在于：所述氯甲酸异丁酯的含量测定方法采用气相色谱内标法，以正辛烷为内标物测定，步骤如下：
①仪器设备及色谱条件：
仪器设备：Agilent 6890 Series GC System，配备FID检测器，Chemstation色谱工作站；色谱柱：以5%-苯基-甲基聚硅氧烷或二甲基聚硅氧烷为固定相的毛细管气相色谱柱；汽化温度：160-200℃；检测温度：160-200℃；柱温：40-60℃；载气：氮气1.0-1.5ml/min；燃气：氢气35-45ml/min；助燃气：空气380-420ml/min；分流比：30:1；进样量：1-10μl；
②溶液的制备：
正辛烷内标储备液的制备：取正辛烷，精密称定，以三氯甲烷配制成浓度为1-2mg/ml，即得；
标准溶液的制备：称取氯甲酸异丁酯对照品，以三氯甲烷配制成浓度为3.0-7.0mg/ml；精密量取此溶液0.5-1.0ml置10ml量瓶中，精密加入正辛烷内标储备液0.5-2ml，用三氯甲烷定容，摇匀，即得；
供试品溶液的制备：精密称取氯甲酸异丁酯样品，用三氯甲烷溶解制成相当于浓度为3.0-5.0mg/ml的溶液；分别精密量取此溶液和正辛烷内标储备液各1ml置同一10ml量瓶中，用三氯甲烷定容，摇匀，即得；
③测定法：分别取标准溶液和供试品溶液在色谱条件下进样1-10μl进样分析，按内标法以峰面积，计算即得。
2.根据权利要求1所述氯甲酸异丁酯的检测方法，其特征在于：所述氯甲酸异丁酯的含量测定步骤如下：
①仪器设备及色谱条件：
仪器设备：Agilent 6890 Series GC System，配备FID检测器，Chemstation色谱工作站；色谱柱：以5%-苯基-甲基聚硅氧烷为固定相的毛细管气相色谱柱；汽化温度：180℃；检测温度：180℃；柱温：50℃；载气：氮气1.2ml/min；燃气：氢气40ml/min；助燃气：空气400ml/min；分流比：30:1；进样量：1μl；
②溶液的制备：
正辛烷内标储备液的制备：取正辛烷，精密称定，以三氯甲烷配制成浓度为1.6mg/ml，即得；
标准溶液的制备：称取氯甲酸异丁酯对照品，以三氯甲烷配制成浓度为5.0mg/ml；精密量取此溶液0.8ml置10ml量瓶中，精密加入正辛烷内标储备液1ml，用三氯甲烷定容，摇匀，即得；
供试品溶液的制备：精密称取氯甲酸异丁酯样品，用三氯甲烷溶解制成相当于浓度为4.0mg/ml的溶液；分别精密量取此溶液和正辛烷内标储备液各1ml置同一10ml量瓶中，用三氯甲烷定容，摇匀，即得；
③测定法：分别取标准溶液和供试品溶液在色谱条件下进样1μl进样分析，按内标法以峰面积，计算即得。
3.根据权利要求1或2所述氯甲酸异丁酯的检测方法，其特征在于：所述检测方法还包括：采用酸碱滴定法测定游离酸的含量，步骤如下：
取80-120ml无二氧化碳的水，加入1-4滴酚酞指示液，用0.05mol/L的氢氧化钠标准滴定溶液中和至溶液呈粉红色，保持20-40s，加入氯甲酸异丁酯样品10-30ml，置分液漏斗中振摇2-5min，静置60-80min，分离出40-60ml上层的水相，加入1-4滴酚酞指示液，用0.05mol/L的氢氧化钠标准滴定溶液滴定至溶液呈粉红色，保持30-60s；
结果计算：非水溶性样品的酸度以H+计质量摩尔浓度b1，数值以mmol/g表示，按下式计算：
式中：
V：氢氧化钠标准滴定溶液体积的数值，单位：ml；
C：氢氧化钠标准滴定溶液浓度的准确数值，单位：mol/L；
M：样品质量的数值，单位：g。
4.根据权利要求3所述氯甲酸异丁酯的检测方法，其特征在于：所述游离酸的含量测定步骤如下：
取100ml无二氧化碳的水，加入2滴酚酞指示液，用0.05mol/L的氢氧化钠标准滴定溶液中和至溶液呈粉红色，并保持30s，加入氯甲酸异丁酯样品20ml ，在分液漏斗中振摇3min，避免剧烈振摇，静置70min，立即分出50ml上层的水相，加入2滴酚酞指示液，用0.05mol/L的氢氧化钠标准滴定溶液滴定至溶液呈粉红色，并应至少保持30s；分出水相后必须尽快完成滴定；
结果计算：非水溶性样品的酸度以H+计质量摩尔浓度b1，数值以mmol/g表示，按下式计算：
式中：
V：氢氧化钠标准滴定溶液体积的数值，单位：ml；
C：氢氧化钠标准滴定溶液浓度的准确数值，单位：mol/L；
M：样品质量的数值，单位：g。
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| C14 | Grant of patent or utility model | ||
| GR01 | Patent grant |