CN103351346A

CN103351346A - 盐酸苯达莫司汀杂质hp1的制备方法

Info

Publication number: CN103351346A
Application number: CN2013103213927A
Authority: CN
Inventors: 诸海滨
Original assignee: Southeast University
Current assignee: Southeast University
Priority date: 2013-07-29
Filing date: 2013-07-29
Publication date: 2013-10-16

Abstract

本发明公开了一种盐酸苯达莫司汀杂质HP1的制备方法，以[1-甲基-2-(4’-丁酸乙酯基)-5-氨基]-1H-苯并咪唑为起始原料制备[1-甲基-2-(4’-丁酸基)-5-N-(2’-羟基乙基)–N’-(2’-氯乙基)]-1H-苯并咪唑，即HP1。本发明方法制备盐酸苯达莫司杂质HP1，具有制备方法简单、所得产品纯度较高的优点，为盐酸苯达莫司汀的质量控制提供合格的对照品。

Description

盐酸苯达莫司汀杂质HP1的制备方法

技术领域

本发明属于药物化学领域，具体涉及一种盐酸苯达莫司汀杂质HP1的制备方法。

背景技术

盐酸苯达莫司汀(bendamustine hydrochloride)是由Merckle公司开发的烷化抗肿瘤药物,于2003年10月在德国上市,商品名为Ribomustin。Salmedix公司得到授权在美国和加拿大开发,商品名为Treanda(SDX2105),目前正处于Ⅲ期临床。

杂质HP1（式I）是盐酸苯达莫司汀中常见的杂质之一。除有文献（Monatsheftefür Chemie，1997,128,291-299。）报道利用原位水解盐酸苯达莫司汀来检测、分离和分析HP1的方法外，目前尚未见公开资料报道过杂质HP1的合成方法。对盐酸苯达莫司汀进行质量分析必须要有合格的式I化合物作为对照品。

发明内容

本发明为解决现有技术的不足，提供一种盐酸苯达莫司汀杂质HP1的制备方法。

本发明采用以下技术方案：

盐酸苯达莫司汀杂质HP1的制备方法，包括以下步骤：

第一步、以[1-甲基-2-(4’-丁酸乙酯基)-5-氨基]-1H-苯并咪唑为起始原料，以C1～C4的有机酸水溶液为溶剂，与环氧乙烷反应，反应结束调节pH、有机相萃取、洗涤、干燥、分离得到[1-甲基-2-(4’-丁酸乙酯基)-5-N-(2’-羟基乙基)]-1H-苯并咪唑：

；

第二步、以第一步所得产品[1-甲基-2-(4’-丁酸乙酯基)-5-N-(2’-羟基乙基)]-1H-苯并咪唑为起始原料，在有机溶剂中用氯化剂进行氯化，反应结束调节pH、有机相萃取、洗涤、干燥、分离得到[1-甲基-2-(4’-丁酸乙酯基)-5-N-(2’-氯乙基)]-1H-苯并咪唑：

第三步:以第二步所得产品[1-甲基-2-(4’-丁酸乙酯基)-5-N-(2’-氯乙基)]-1H-苯并咪唑为原料，在有机酸水溶液中，与环氧乙烷密闭体系反应，反应结束后调节pH、有机相萃取、洗涤、干燥、分离得到[1-甲基-2-(4’-丁酸乙酯基)-5-N-(2’-羟基乙基)–N’-(2’-氯乙基)]-1H-苯并咪唑：

第四步、以第三步得到的产品[1-甲基-2-(4’-丁酸乙酯基)-5-N-(2’-羟基乙基)–N’-(2’-氯乙基)]-1H-苯并咪唑为原料，以无机酸水溶液为溶剂，进行酸解反应，反应结束后脱色、干燥得到[1-甲基-2-(4’-丁酸基)-5-N-(2’-羟基乙基)–N’-(2’-氯乙基)]-1H-苯并咪唑：

进一步地，第一步反应中[1-甲基-2-(4’-丁酸乙酯基)-5-氨基]-1H-苯并咪唑与环氧乙烷的摩尔比为1:1-2，反应温度为-10℃-5℃，反应时间为1h-6h。

进一步地，第一步中C1～C4的有机酸选自甲酸、乙酸、丙酸、草酸或正丁酸中的一种。

进一步地，第二步反应中反应温度为0℃-80℃，反应时间为12h-18h。

进一步地，第二步中有机溶剂选自氯仿、二氯甲烷、四氯化碳、四氢呋喃、丙酮、乙腈、乙酸乙酯或1,4-二氧六环的一种。

进一步地，第二步中氯化剂选自氯化亚砜、三氯氧磷、五氯化磷、三氯化磷或草酰氯的一种。

进一步地，第三步反应中[1-甲基-2-(4’-丁酸乙酯基)-5-N-(2’-氯乙基)]-1H-苯并咪唑与环氧乙烷的摩尔比为1:1-15，反应温度为-10℃-5℃，反应时间为4h-6h，然后室温反应8～14h。

进一步地，第三步反应中有机酸选自甲酸、乙酸、丙酸、草酸或正丁酸中的一种。

进一步地，第四步反应温度为25℃-100℃，反应时间为3h-5h。

进一步地，第四步中无机酸选自盐酸、硫酸、硝酸或磷酸中的一种。

本发明的有益效果：本发明方法制备盐酸苯达莫司杂质HP1，具有制备方法简单、所得产品纯度较高的优点，为盐酸苯达莫司汀的质量控制提供合格的对照品。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明做更进一步的解释。下列实施例仅用于说明本发明，但并不用来限定本发明的实施范围。

盐酸苯达莫司汀杂质HP1的制备方法，包括以下步骤：

其中，[1-甲基-2-(4’-丁酸乙酯基)-5-氨基]-1H-苯并咪唑与环氧乙烷的摩尔比为1:1-2，优选1:1；C1～C4的有机酸选自甲酸、乙酸、丙酸、草酸或正丁酸中的一种，优选乙酸；溶剂优选体积比为1:1的乙酸水溶液；反应温度为-10℃-5℃，优选0℃-5℃；反应时间为1h-6h。

其中，有机溶剂选自氯仿、二氯甲烷、四氯化碳、四氢呋喃、丙酮、乙腈、乙酸乙酯或1,4-二氧六环的一种，优选二氯甲烷；氯化剂选自氯化亚砜、三氯氧磷、五氯化磷、三氯化磷或草酰氯的一种，优选氯化亚砜；应温度为0℃-80℃，优选0℃-50℃，反应时间为12h-18h。

其中，[1-甲基-2-(4’-丁酸乙酯基)-5-N-(2’-氯乙基)]-1H-苯并咪唑与环氧乙烷的摩尔比为1:1-15，优选1:1-10，更优选1:10；有机酸选自甲酸、乙酸、丙酸、草酸或正丁酸中的一种，优选乙酸；溶剂优选体积比为1:1的乙酸水溶液；反应温度为-10℃-5℃，优选0℃-5℃；反应时间为4h-6h，后室温反应8～14h。

其中，无机酸选自盐酸、硫酸、硝酸或磷酸中的一种，的；反应温度为25℃-100℃，优选80℃-100℃；反应时间为3h-5h。

实施例1

第一步：制备[1-甲基-2-(4’-丁酸乙酯基)-5-N-(2’-羟基乙基)]-1H-苯并咪唑

向200mL单口瓶中依次加入[1-甲基-2-(4’-丁酸乙酯基)-5-氨基]-1H-苯并咪唑10.0g、水50mL、乙酸50mL，冰浴下搅拌30分钟，随后加入环氧乙烷4.0mL，在冰水浴下反应4小时后，停止反应，用氨水调pH=7-8，反应液用二氯甲烷萃取（100mL×2），合并有机相。有机相用饱和氯化钠溶液洗涤（80mL×2），并用无水硫酸钠干燥。柱层析（洗脱剂：二氯甲烷:甲醇=100:2）分离得到产品2.2g（黄色油状液体）。

ESI-MS m/z:306.1[M+H⁺]⁺。

第二步：制备[1-甲基-2-(4’-丁酸乙酯基)-5-N-(2’-氯乙基)]-1H-苯并咪唑

向200mL单口瓶中加入[1-甲基-2-(4’-丁酸乙酯基)-5-N-(2’-羟基乙基)]-1H-苯并咪唑2.2g及二氯甲烷100mL，冰浴下搅拌混合30分钟后，加入氯化亚砜4.3g，然后回流反应15小时。旋转蒸发除去溶剂，加入30mL水，饱和碳酸氢钠溶液调pH=7-8，反应液用二氯甲烷萃取，合并有机相。饱和氯化钠溶液洗涤有机相，有机相无水硫酸钠干燥。柱层析分离（二氯甲烷:甲醇=100:1）得到产品1.8g。

ESI-MS m/z:324.1[M+H⁺]⁺。

第三步：制备[1-甲基-2-(4’-丁酸乙酯基)-5-N-(2’-羟基乙基)–N’-(2’-氯乙基)]-1H-苯并咪唑

向100mL单口瓶中依次加入[1-甲基-2-(4’-丁酸乙酯基)-5-N-(2’-氯乙基)]-1H-苯并咪唑1.0g、乙酸5mL、水5mL，冰浴下搅拌30分钟，加入环氧乙烷0.2mL，密闭体系冰浴反应6小时后，然后室温反应过夜。用饱和碳酸氢钠溶液调pH=7-8，用二氯甲烷萃取，合并有机相，并用饱和氯化钠溶液洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，旋转蒸发旋干溶剂进行柱层析（硅胶；洗脱剂：二氯甲烷:甲醇=100:2）分离，得微黄色油状液体0.68g。

ESI-MS m/z:368.2[M+H⁺]⁺。

第四步：制备[1-甲基-2-(4’-丁酸基)-5-N-(2’-羟基乙基)–N’-(2’-氯乙基)]-1H-苯并咪唑

向100mL单口瓶中加入[1-甲基-2-(4’-丁酸乙酯基)-5-N-(2’-羟基乙基)–N’-(2’-氯乙基)]-1H-苯并咪唑0.68g及25mL浓盐酸（质量分数为37%），加热至100℃反应3小时。旋转蒸发旋干溶剂，然后加入30mL1M盐酸、0.2g活性炭，脱色1小时，过滤，得淡黄色透明溶液，冷冻干燥后得到黄色固体。

¹H-NMR(d6-dmso,25oC)δ9.0～6.8(3H,br),7.709(1H,d),7.117(1H,d),6.924(1H,s),3.898(3H,s),3.771(4H,m),3.549(4H,m),3.166(2H,t),2.408(2H,t),2.016(2H,m).ESI-MS m/z:340.1[M+H⁺]⁺，HPLC纯度为96.4%。

实施例2

向200mL单口瓶中依次加入[1-甲基-2-(4’-丁酸乙酯基)-5-氨基]-1H-苯并咪唑10.0g、水50mL、甲酸50mL，-10℃下搅拌30分钟，随后加入环氧乙烷4.0mL，-10℃下反应1小时后，停止反应，用氨水调pH=7-8，反应液用二氯甲烷萃取（100mL×2），合并有机相。有机相用饱和氯化钠溶液洗涤（80mL×2），并用无水硫酸钠干燥。柱层析（洗脱剂：二氯甲烷:甲醇=100:2）分离得到产品（黄色油状液体）。

向200mL单口瓶中加入[1-甲基-2-(4’-丁酸乙酯基)-5-N-(2’-羟基乙基)]-1H-苯并咪唑2.2g及四氢呋喃100mL，50℃下搅拌混合30分钟后，加入三氯氧磷5.5g，然后回流反应12小时。旋转蒸发除去溶剂，加入30mL水，饱和碳酸氢钠溶液调pH=7-8，反应液用二氯甲烷萃取，合并有机相。饱和氯化钠溶液洗涤有机相，有机相无水硫酸钠干燥。柱层析分离（二氯甲烷:甲醇=100:1）得到产品。

向100mL单口瓶中依次加入[1-甲基-2-(4’-丁酸乙酯基)-5-N-(2’-氯乙基)]-1H-苯并咪唑1.0g、甲酸5mL、水5mL，-10℃下搅拌30分钟，加入环氧乙烷2.0mL，密闭体系冰浴反应4小时后，然后室温反应8h。用饱和碳酸氢钠溶液调pH=7-8，用二氯甲烷萃取，合并有机相，并用饱和氯化钠溶液洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，旋转蒸发旋干溶剂进行柱层析（硅胶；洗脱剂：二氯甲烷:甲醇=100:2）分离，得微黄色油状液体。

向100mL单口瓶中加入[1-甲基-2-(4’-丁酸乙酯基)-5-N-(2’-羟基乙基)–N’-(2’-氯乙基)]-1H-苯并咪唑0.68g及25mL硝酸（质量分数为67%），加热至25℃反应4小时。旋转蒸发旋干溶剂，然后加入30mL1M盐酸、0.2g活性炭，脱色1小时，过滤，得淡黄色透明溶液，冷冻干燥后得到黄色固体。

实施例3

本实施例与实施例2的区别在于，第一步反应中反应溶剂为水25ml、丙酸50ml，5℃下搅拌30分钟，随后加入环氧乙烷4.0mL，在5℃下反应6小时后，停止反应；第二步反应中有机溶剂为丙酮，80℃下搅拌混合30分钟后，加入五氯化磷7.5g，然后回流反应18h；第三步反应中环氧乙烷3.0mL，有机酸为丙酸，反应温度为5℃，反应时间为6h，后室温反应14h；第四步反应中无机酸为浓硫酸（质量分数为98%），加热到100℃反应5h。

实施例4

本实施例与实施例2的区别在于，第一步反应中反应溶剂为水50ml、草酸50ml；第二步反应中有机溶剂为乙腈，氯化剂为草酰氯4.6g；第三步反应中有机酸为草酸；第四步反应中无机酸为磷酸（质量分数为83%）。

实施例5

本实施例与实施例2的区别在于，第一步反应中反应溶剂为水50ml、正丁酸50ml；第二步反应中有机溶剂为乙酸乙酯，氯化剂为三氯化磷5.0g；第三步反应中有机酸为正丁酸；第四步反应中无机酸为磷酸（质量分数为98%）。

实施例6

本实施例与实施例2的区别在于，第二步反应中有机溶剂为1,4-二氧六环。

Claims

1.盐酸苯达莫司汀杂质HP1的制备方法，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的盐酸苯达莫司汀杂质HP1的制备方法，其特征在于，第一步反应中[1-甲基-2-(4’-丁酸乙酯基)-5-氨基]-1H-苯并咪唑与环氧乙烷的摩尔比为1:1-2，反应温度为-10℃-5℃，反应时间为1h-6h。

3.根据权利要求2所述的盐酸苯达莫司汀杂质HP1的制备方法，其特征在于，第一步中C1～C4的有机酸选自甲酸、乙酸、丙酸、草酸或正丁酸中的一种。

4.根据权利要求1所述的盐酸苯达莫司汀杂质HP1的制备方法，其特征在于，第二步反应中反应温度为0℃-80℃，反应时间为12h-18h。

5.根据权利要求1所述的盐酸苯达莫司汀杂质HP1的制备方法，其特征在于，第二步中有机溶剂选自氯仿、二氯甲烷、四氯化碳、四氢呋喃、丙酮、乙腈、乙酸乙酯或1,4-二氧六环的一种。

6.根据权利要求1所述的盐酸苯达莫司汀杂质HP1的制备方法，其特征在于，第二步中氯化剂选自氯化亚砜、三氯氧磷、五氯化磷、三氯化磷或草酰氯的一种。

7.根据权利要求1所述的盐酸苯达莫司汀杂质HP1的制备方法，其特征在于，第三步反应中[1-甲基-2-(4’-丁酸乙酯基)-5-N-(2’-氯乙基)]-1H-苯并咪唑与环氧乙烷的摩尔比为1:1-15，反应温度为-10℃-5℃，反应时间为4h-6h，然后室温反应8～14h。

8.根据权利要求1所述的盐酸苯达莫司汀杂质HP1的制备方法，其特征在于，第三步中有机酸选自甲酸、乙酸、丙酸、草酸或正丁酸中的一种。

9.根据权利要求1所述的盐酸苯达莫司汀杂质HP1的制备方法，其特征在于，第四步反应温度为25℃-100℃，反应时间为3h-5h。

10.根据权利要求1所述的盐酸苯达莫司汀杂质HP1的制备方法，其特征在于，第四步中无机酸选自盐酸、硫酸、硝酸或磷酸中的一种。