CN103330049A

CN103330049A - 一种微胶囊包埋大豆源抗氧化肽及其制备方法

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Publication number: CN103330049A
Application number: CN2013102965071A
Authority: CN
Inventors: 林松毅; 王佳; 刘静波; 王凯; 杨睿雯
Original assignee: Jilin University
Current assignee: Jilin University
Priority date: 2013-07-13
Filing date: 2013-07-13
Publication date: 2013-10-02
Anticipated expiration: 2033-07-13
Also published as: CN103330049B

Abstract

本发明属于农产品精深加工及其副产物综合利用的技术领域，公开了一种微胶囊包埋大豆源抗氧化肽及其制备方法，其特征在于是以蛋白质质量为40～60%的大豆蛋白粉为主要原料，借助于锐孔-凝固浴技术，经过酶解、超滤、真空冷冻干燥、锐孔－凝固浴技术微胶囊包埋、真空冷冻干燥处理过程，制备获得大豆源抗氧化肽微胶囊产品，其粒径为0.08～1.0mm、包埋率为85%以上、DPPH清除率为80%以上，所获得产品天然、安全、抗氧化活性高，能够为大豆的副产物增值增效提供新的途径。

Description

一种微胶囊包埋大豆源抗氧化肽及其制备方法

技术领域

本发明属于农产品精深加工及其副产物综合利用的技术领域，公开了一种微胶囊包埋大豆源抗氧化肽及其制备方法。

背景技术

大豆是世界上产量最大的食用和饲用蛋白资源，对其产品的开发具有资源丰富、易接受、营养安全和提高附加值的优势。大豆含有40%左右的蛋白质。根据世界卫生组织（WHO）建立的蛋白质推荐摄入量，大豆蛋白含有人体必需的所有氨基酸，其营养价值与动物蛋白相当，能够很好地满足人类的营养需要。大豆蛋白的消化吸收率高达84%～98%，其消化率和蛋白质功效比（PER）与牛奶、牛肉、鸡蛋接近，属于全价蛋白。开发大豆产品具有几大优势：大豆作为一种重要的经济作物，资源丰富、价格低廉，可满足大规模生产的要求；自古以来人们就有食用大豆制品的习惯，开发生产大豆产品容易为人们所接受；大豆产品安全可靠、营养丰富，可以作为日常保健食品常年食用；开发大豆产品可以大幅提高大豆制品的附加值，拓宽大豆的用途。因此，研究与开发大豆产品具有广阔的前景。

大豆肽产品的研发已被国内外学者认定为热点问题与焦点问题。大豆蛋白经过酶的不完全水解生成大豆肽后，抗原性低，更容易被人体消化吸收，还可促进人体对其他营养素如钙和铁的吸收。同时，大豆蛋白原有的许多功能性质，如乳化功能、起泡功能、吸水功能、增稠功能、粘着功能、营养价值、生理功能等均有了不同程度的改善。近年来，随着肽产品的不断开发与研究，大豆肽的产品开发如雨后春笋般蓬勃发展，如大豆肽冷冻饮品、液态奶制品、眼霜、口服液、饮料、奶粉等等。

大豆源抗氧化肽具有抗氧化活性，有助于减少体内过量自由基对人体的损伤。自1956年英国科学家Harman提出自由基理论以来，人们逐渐认识到人体内氧化产生的自由基与人的衰老和许多疾病有关。当机体处于氧化应激状态时，过量的自由基使构成细胞组织的各种物质如脂质、糖类、蛋白质、DNA等发生氧化反应，引起变性、交联、断裂等氧化伤害，从而引发各种疾病。具有抗氧化活性的大豆源抗氧化肽可通过清除自由基和抑制脂质过氧化，调整和改善人体生理功能，从而达到预防和治疗慢性疾病的目的。

微胶囊包埋大豆源抗氧化肽的关键技术亟待攻克。虽然大豆源抗氧化肽活性优良，但肽本身的稳定性较差，在室温条件下放置数分钟即会发生吸湿，粘度增大，继续放置可被微生物侵染，腐败变质，严重影响了抗氧化肽的应用。目前，对其活性的保护手段主要采用多种组分复配、添加蛋白保护剂等，但此类方法操作复杂，引入了多种食品添加剂，与大豆源抗氧化肽产品的天然、安全的特点背道而驰。微胶囊技术是利用成膜材料将固体、液体或气体囊于其中，形成直径几十微米至上千微米的微小容器的技术。该技术可实现对能物质的保护，使其免受环境影响，屏蔽味道、颜色、气味，改变物质重量、体积、状态或表面性能，隔离活性成分，降低挥发性和毒性，控制可持续释放等多种作用。虽然已有报道利用微胶囊法制备大豆源抗氧化肽，但在其过程中引入了具有强烈刺激性气味和一定毒性的甲醛，使其在食品中的应用受限。因此，开发一种微胶囊包埋大豆源抗氧化肽的技术亟待攻克。

借助于锐孔－凝固浴法进行微胶囊包埋大豆源抗氧化肽方法是完全可行性。锐孔-固浴法是采用溶于水或有机溶剂的聚合物作壁材，通过加入固化剂，热凝聚或利用带有不同电荷的聚合物络合来实现对成分的包埋。本专利是利用锐孔－凝固浴法将大豆源抗氧化肽和壁材海藻酸钠溶解在同一溶液中，然后借助于微孔装置，将此溶液滴加到固化剂氯化钙中，壁材可在固化剂中瞬间完成固化，其中壁材海藻酸钠是一种白色或淡黄色不定形粉末、无味、易溶于水、吸湿性强、持水性能好、不溶于酒精、氯仿等有机溶剂，是一种天然多糖，具有生物黏附性、生物相容性并可生物降解等特点，常在食品工业中作为作乳化稳定剂和增稠剂。固化剂氯化钙在食品加工中用作钙质强化剂、固化剂、螯合剂和干燥剂。因此，本专利利用锐孔－凝固浴法选用了海藻酸钠和氯化钙作为微胶囊包埋材料，具有来源广泛，食用安全可靠的特点。同时，经过微胶囊包埋后，大豆源抗氧化肽产品在口腔中不溶化，而在消化道中溶解，释放出内容物，发挥营养作用。

本发明的技术优势主要体现在以下两个方面：

第一，申请的专利技术是以锐孔－凝固浴技术为核心技术，其技术优势突出体现在：

（1）锐孔－凝固浴技术快速包埋大豆源抗氧化肽，可实现包埋率为85%以上，DPPH清除率为80%以上，粒径为0.08～1.0mm的微胶囊包埋效果；

（2）选用的微胶囊包埋材料安全，更适合大豆天然、高附加值产品开发的主题。

第二，申请的专利技术是以1～3kDa、DPPH清除率为80%以上的大豆源抗氧化肽组分为微胶囊包埋对象，可以由大豆粉经酶解、分离制备抗氧化肽，具有来源广泛，原料成本低廉，适于大豆的副产物增值增效技术应用。

综上所述，纵观国内外相关研究与技术报道，未见利用锐孔－凝固浴快速微胶囊包埋1～3kDa大豆肽组分的抗氧化活性，包埋率达到85%以上，DPPH清除率为80%以上，产品粒径为0.08～1.0mm的技术突破研究。

发明内容

申请发明所需要解决的技术问题是：公开一种利用锐孔－凝固浴技术，进行微胶囊包埋1～3kDa大豆源抗氧化肽，包埋率达到85%以上，DPPH清除率为80%以上，粒径为0.08～1.0mm的方法。

申请发明的技术方案是：

1．一种微胶囊包埋大豆源抗氧化肽的制备方法，其特征在于，以蛋白含量40～60%的大豆蛋白粉为原料，经过酶解、超滤、真空冷冻干燥、锐孔－凝固浴技术微胶囊包埋、真空冷冻干燥处理过程，制备出大豆源抗氧化肽微胶囊，产品粒径为0.08～1.0mm、包埋率为85%以上、DPPH清除率为80%以上；

所述的酶解过程，是指以蛋白含量40～60%大豆蛋白粉为原料，称取一定的质量，溶解于水中，配置蛋白质浓度为2～8%的溶液，调节高速均质机转速为500～1500r/min，均质10～15min，然后将溶液转移至带有搅拌装置的酶解装置中，加热至85～90℃，保持10～25min，然后冷却至30～60℃，用NaOH溶液调节pH值为9.50～11.50，加入蛋白质质量为2～14%的碱性蛋白酶，酶解2～5h，酶解过程中不断滴加NaOH溶液保持酶解过程中溶液pH值变化范围±0.05；酶解结束后，加热酶解液至85～95℃，保持10～25min后，冷却至2～6℃，调节离心机转速0.8～1×10⁴r/min进行离心，取上清液，用HCl调节上清液pH值为7.00±0.05；

所述的超滤过程，是指调节超滤装置回流出口压力5～10psi，使酶解液以恒定的流速依次通过30kDa、10kDa、3kDa和1kDa的超滤膜，收集1～3kDa超滤液，置于4℃冰箱备用；

所述的真空冷冻干燥过程，是指将1～3kDa超滤液，分装于冷冻盘中，厚度5～15mm，置于预冻温度为-75℃～-80℃冷冻库中，预冻时间为5～6h后，移至真空冷冻干燥机中，温度设定为-60℃～-50℃，冻干时间为10～24h，获得了1～3kDa大豆源抗氧化肽粉；

所述的锐孔－凝固浴技术微胶囊包埋过程，是以1～3kDa大豆源抗氧化肽粉为原料，按照干粉与水的比例为2.5:100g/mL～7.5:100g/mL范围内进行混合均匀，备用；以海藻酸钠固体为壁材原料，按照海藻酸钠与水的比例为0.7:100g/mL～2.3:100g/mL范围内进行混合均匀，备用；以氯化钙固体为固化剂原料，按照氯化钙与水的比例为1:100g/mL～5:100g/mL在适宜的温度范围内进行混合，制备固浴液，备用；将壁材海藻酸钠溶液和芯材大豆肽溶液按照质量比为1:2～2:1范围内进行混合均匀，备用；选用如附图1所示的锐孔－凝固浴技术微胶囊包埋的造粒机，并配备锐孔孔径为0.08～1.0mm，用50mL注射器吸取一定体积的一定质量配比的壁材芯材混合溶液，置于造粒机上，平衡5～10min后，开启推进，打开控制单元，设定注射泵流速为2.0～5.0mL/min，电极电压为250～2500V使颗粒在静电分散装置中分散合理，调节振动频率为40～6000Hz，打开磁力搅拌装置，使挤压成型的颗粒，均匀分散到固浴液中，保留0.5～3h后，过滤收集颗粒备用；

所述的真空冷冻干燥过程，是指将包埋好的颗粒，分装于冷冻盘中，厚度5～15mm，置于预冻温度为-75℃～-80℃冷冻库中，预冻时间为5～6h后，移至真空冷冻干燥机中，温度设定为-60～-50℃，冻干时间为10～24h，获得了包埋率为85%以上，DPPH清除率为80%以上的微胶囊包埋效果。

2．一种大豆源抗氧化肽微胶囊，其特征在于，产品粒径为0.08～1.0mm、包埋率为85%以上、DPPH清除率为80%以上。

3．根据权利要求1所述的碱性蛋白酶，其特征在于，所选用的碱性蛋白酶为固体或液体蛋白酶，酶比活力单位为20至150万U/g。

4．根据权利要求1所述的NaOH溶液，其特征在于，浓度范围为1～10mol/L。

5．根据权利要求1所述HCl溶液，其特征在于，浓度范围为1～10mol/L。

6．根据权利要求1所述的锐孔孔径，其特征在于，孔径范围为0.08～1.0mm。

7．根据权利要求1所述的固浴液，其特征在于，氯化钙与水的比例为1:100g/mL～5:100g/mL，调配温度为25～30℃。

申请发明技术效果：

（1）申请发明是以1～3kDa、DPPH清除率为80%大豆源抗氧化肽组分为芯材，海藻酸钠为壁材，氯化钙为固浴原料，利用锐孔－凝固浴快速微胶囊包埋1～3kDa大豆肽组分的抗氧化活性，包埋率达到85%以上，DPPH清除率为80%以上，粒径为0.08～1.0mm的微胶囊包埋效果；

（2）本发明设计的工艺路线简捷，设备投入少，工业化推广可行，是一种大豆综合利用和减少污染的有效方法。

附图说明

图1是锐孔－凝固浴技术微胶囊包埋的造粒机设备示意图。

具体实施方式

实施例1：

以蛋白含量40%大豆蛋白粉为原料，称取一定的质量，溶解于水中，配置蛋白质浓度为2%的溶液，调节高速均质机转速为1500r/min，均质10min，然后将溶液转移至带有搅拌装置的酶解装置中，加热至85℃，保持25min，然后冷却至30℃，用1mol/L NaOH溶液调节pH值为9.50，加入蛋白质质量为2%的固体碱性蛋白酶，酶比活力单位为20万U/g，酶解5h，酶解过程中不断滴加1mol/L NaOH溶液保持酶解过程中溶液pH值变化范围9.50±0.05；酶解结束后，加热酶解液至95℃，保持10min后，冷却至6℃，调节离心机转速0.8×10⁴r/min进行离心，取上清液，用10mol/L HCl调节上清液pH值为7.00±0.05；调节超滤装置回流出口压力5psi，使酶解液以恒定的流速依次通过30kDa、10kDa、3kDa和1kDa的超滤膜，收集1～3kDa超滤液，置于4℃冰箱备用；将1～3kDa超滤液，分装于冷冻盘中，厚度15mm，置于预冻温度为-75℃冷冻库中，预冻时间为6h后，移至真空冷冻干燥机中，温度设定为-50℃，冻干时间为24h，获得了1～3kDa大豆源抗氧化肽粉；以1～3kDa大豆源抗氧化肽粉为原料，按照干粉与水的比例为7.5:100g/mL范围内进行混合均匀，备用；以海藻酸钠固体为壁材原料，按照海藻酸钠与水的比例为0.7:100g/mL进行混合均匀，备用；以氯化钙固体为固化剂原料，按照氯化钙与水的比例为2:100g/mL在25℃进行混合，制备固浴液，备用；将壁材海藻酸钠溶液和芯材大豆肽溶液按照质量比为2:1范围内进行混合均匀，备用；选用锐孔－凝固浴技术微胶囊包埋的造粒机，并配备锐孔孔径为0.08mm，用50mL注射器吸取一定体积的一定质量配比的壁材芯材混合溶液，置于造粒机上，平衡5min后，打开控制单元，设定注射泵流速为2.0mL/min，电极电压为2500V，使颗粒在静电分散装置中分散合理，调节振动频率为40Hz，打开磁力搅拌装置，使挤压成型的颗粒，均匀分散到固浴液中，保留0.5h后，过滤收集颗粒备用；将包埋好的颗粒，分装于冷冻盘中，厚度5mm，置于预冻温度为-80℃冷冻库中，预冻时间为5h后，移至真空冷冻干燥机中，温度设定为-55℃，冻干时间为16h，获得了包埋率为85%以上，DPPH清除率为80%以上的微胶囊包埋效果。

实施例2：

以蛋白含量60%大豆蛋白粉为原料，称取一定的质量，溶解于水中，配置蛋白质浓度为2%的溶液，调节高速均质机转速为500r/min，均质15min，然后将溶液转移至带有搅拌装置的酶解装置中，加热至90℃，保持10min，然后冷却至60℃，用10mol/L NaOH溶液调节pH值为11.50，加入蛋白质质量为8%的固体碱性蛋白酶，酶比活力单位为80万U/g，酶解3h，酶解过程中不断滴加10mol/L NaOH溶液保持酶解过程中溶液pH值变化范围11.50±0.05；酶解结束后，加热酶解液至95℃，保持10min后，冷却至4℃，调节离心机转速0.9×10⁴r/min进行离心，取上清液，用1mol/L HCl调节上清液pH值为7.00±0.05；调节超滤装置回流出口压力10psi，使酶解液以恒定的流速依次通过30kDa、10kDa、3kDa和1kDa的超滤膜，收集1～3kDa超滤液，置于4℃冰箱备用；将1～3kDa超滤液，分装于冷冻盘中，厚度5mm，置于预冻温度为-80℃冷冻库中，预冻时间为5h后，移至真空冷冻干燥机中，温度设定为-60℃，冻干时间为10h，获得了1～3kDa大豆源抗氧化肽粉；以1～3kDa大豆源抗氧化肽粉为原料，按照干粉与水的比例为2.5:100g/mL范围内进行混合均匀，备用；以海藻酸钠固体为壁材原料，按照海藻酸钠与水的比例为2.3:100g/mL进行混合均匀，备用；以氯化钙固体为固化剂原料，按照氯化钙与水的比例为1:100g/mL在26℃进行混合，制备固浴液，备用；将壁材海藻酸钠溶液和芯材大豆肽溶液按照质量比为1:2范围内进行混合均匀，备用；选用锐孔－凝固浴技术微胶囊包埋的造粒机，并配备锐孔孔径为1.0mm，用50mL注射器吸取一定体积的一定质量配比的壁材芯材混合溶液，置于造粒机上，平衡10min后，打开控制单元，设定注射泵流速为5.0mL/min，电极电压为250V，使颗粒在静电分散装置中分散合理，调节振动频率为6000Hz，打开磁力搅拌装置，使挤压成型的颗粒，均匀分散到固浴液中，保留3h后，过滤收集颗粒备用；将包埋好的颗粒，分装于冷冻盘中，厚度15mm，置于预冻温度为-75℃冷冻库中，预冻时间为6h后，移至真空冷冻干燥机中，温度设定为-50℃，冻干时间为24h，获得了包埋率为85%以上，DPPH清除率为80%以上的微胶囊包埋效果。

实施例3：

以蛋白含量50%大豆蛋白粉为原料，称取一定的质量，溶解于水中，配置蛋白质浓度为6%的溶液，调节高速均质机转速为600r/min，均质14min，然后将溶液转移至带有搅拌装置的酶解装置中，加热至86℃，保持20min，然后冷却至50℃，用6mol/L NaOH溶液调节pH值为10.50，加入蛋白质质量为14%的固体碱性蛋白酶，酶比活力单位为50万U/g，酶解2h，酶解过程中不断滴加6mol/L NaOH溶液保持酶解过程中溶液pH值变化范围10.50±0.05；酶解结束后，加热酶解液至85℃，保持10min后，冷却至2℃，调节离心机转速1×10⁴r/min进行离心，取上清液，用4mol/L HCl调节上清液pH值为7.00±0.05；调节超滤装置回流出口压力8psi，使酶解液以恒定的流速依次通过30kDa、10kDa、3kDa和1kDa的超滤膜，收集1～3kDa超滤液，置于4℃冰箱备用；将1～3kDa超滤液，分装于冷冻盘中，厚度6mm，置于预冻温度为-79℃冷冻库中，预冻时间为5h后，移至真空冷冻干燥机中，温度设定为-55℃，冻干时间为15h，获得了1～3kDa大豆源抗氧化肽粉；以1～3kDa大豆源抗氧化肽粉为原料，按照干粉与水的比例为3.5:100g/mL范围内进行混合均匀，备用；以海藻酸钠固体为壁材原料，按照海藻酸钠与水的比例为2.0:100g/mL进行混合均匀，备用；以氯化钙固体为固化剂原料，按照氯化钙与水的比例为5:100g/mL在28℃进行混合，制备固浴液，备用；将壁材海藻酸钠溶液和芯材大豆肽溶液按照质量比为1:1范围内进行混合均匀，备用；选用锐孔－凝固浴技术微胶囊包埋的造粒机，并配备锐孔孔径为0.12mm，用50mL注射器吸取一定体积的一定质量配比的壁材芯材混合溶液，置于造粒机上，平衡8min后，打开控制单元，设定注射泵流速为4.5mL/min，电极电压为1000V，使颗粒在静电分散装置中分散合理，调节振动频率为800Hz，打开磁力搅拌装置，使挤压成型的颗粒，均匀分散到固浴液中，保留2.5h后，过滤收集颗粒备用；将包埋好的颗粒，分装于冷冻盘中，厚度12mm，置于预冻温度为-78℃冷冻库中，预冻时间为6h后，移至真空冷冻干燥机中，温度设定为-58℃，冻干时间为20h，获得了包埋率为85%以上，DPPH清除率为80%以上的微胶囊包埋效果。

实施例4:

以蛋白含量55%大豆蛋白粉为原料，称取一定的质量，溶解于水中，配置蛋白质浓度为4%的溶液，调节高速均质机转速为800r/min，均质12min，然后将溶液转移至带有搅拌装置的酶解装置中，加热至88℃，保持18min，然后冷却至55℃，用5mol/L NaOH溶液调节pH值为10.00，加入蛋白质质量为12%的固体碱性蛋白酶，酶比活力单位为150万U/g，酶解2.5h，酶解过程中不断滴加5mol/L NaOH溶液保持酶解过程中溶液pH值变化范围10.00±0.05；酶解结束后，加热酶解液至89℃，保持15min后，冷却至3℃，调节离心机转速0.85×10⁴r/min进行离心，取上清液，用6mol/L HCl调节上清液pH值为7.00±0.05；调节超滤装置回流出口压力9psi，使酶解液以恒定的流速依次通过30kDa、10kDa、3kDa和1kDa的超滤膜，收集1～3kDa超滤液，置于4℃冰箱备用；将1～3kDa超滤液，分装于冷冻盘中，厚度8mm，置于预冻温度为-76℃冷冻库中，预冻时间为5.5h后，移至真空冷冻干燥机中，温度设定为-59℃，冻干时间为12h，获得了1～3kDa大豆源抗氧化肽粉；以1～3kDa大豆源抗氧化肽粉为原料，按照干粉与水的比例为4.5:100g/mL范围内进行混合均匀，备用；以海藻酸钠固体为壁材原料，按照海藻酸钠与水的比例为1.0:100g/mL进行混合均匀，备用；以氯化钙固体为固化剂原料，按照氯化钙与水的比例为4:100g/mL在29℃进行混合，制备固浴液，备用；将壁材海藻酸钠溶液和芯材大豆肽溶液按照质量比为3:2范围内进行混合均匀，备用；选用锐孔－凝固浴技术微胶囊包埋的造粒机，并配备锐孔孔径为0.75mm，用50mL注射器吸取一定体积的一定质量配比的壁材芯材混合溶液，置于造粒机上，平衡7min后，打开控制单元，设定注射泵流速为4.2mL/min，电极电压为2000V，使颗粒在静电分散装置中分散合理，调节振动频率为1600Hz，打开磁力搅拌装置，使挤压成型的颗粒，均匀分散到固浴液中，保留1.5h后，过滤收集颗粒备用；将包埋好的颗粒，分装于冷冻盘中，厚度10mm，置于预冻温度为-77℃冷冻库中，预冻时间为5.5h后，移至真空冷冻干燥机中，温度设定为-56℃，冻干时间为21h，获得了包埋率为85%以上，DPPH清除率为80%以上的微胶囊包埋效果。

实施例5:

以蛋白含量46%大豆蛋白粉为原料，称取一定的质量，溶解于水中，配置蛋白质浓度为7%的溶液，调节高速均质机转速为1200r/min，均质11min，然后将溶液转移至带有搅拌装置的酶解装置中，加热至89℃，保持15min，然后冷却至45℃，用8mol/L NaOH溶液调节pH值为11.00，加入蛋白质质量为10%的固体碱性蛋白酶，酶比活力单位为100万U/g，酶解4h，酶解过程中不断滴加8mol/L NaOH溶液保持酶解过程中溶液pH值变化范围10.00±0.05；酶解结束后，加热酶解液至89℃，保持15min后，冷却至3℃，调节离心机转速0.85×10⁴r/min进行离心，取上清液，用3mol/L HCl调节上清液pH值为7.00±0.05；调节超滤装置回流出口压力7psi，使酶解液以恒定的流速依次通过30kDa、10kDa、3kDa和1kDa的超滤膜，收集1～3kDa超滤液，置于4℃冰箱备用；将1～3kDa超滤液，分装于冷冻盘中，厚度11mm，置于预冻温度为-77℃冷冻库中，预冻时间为5.5h后，移至真空冷冻干燥机中，温度设定为-57℃，冻干时间为17h，获得了1～3kDa大豆源抗氧化肽粉；以1～3kDa大豆源抗氧化肽粉为原料，按照干粉与水的比例为6.5:100g/mL范围内进行混合均匀，备用；以海藻酸钠固体为壁材原料，按照海藻酸钠与水的比例为0.9:100g/mL进行混合均匀，备用；以氯化钙固体为固化剂原料，按照氯化钙与水的比例为3:100g/mL在30℃进行混合，制备固浴液，备用；将壁材海藻酸钠溶液和芯材大豆肽溶液按照质量比为3:4范围内进行混合均匀，备用；选用锐孔－凝固浴技术微胶囊包埋的造粒机，并配备锐孔孔径为0.45mm，用50mL注射器吸取一定体积的一定质量配比的壁材芯材混合溶液，置于造粒机上，平衡6min后，打开控制单元，设定注射泵流速为4.8mL/min，电极电压为1500V，使颗粒在静电分散装置中分散合理，调节振动频率为3000Hz，打开磁力搅拌装置，使挤压成型的颗粒，均匀分散到固浴液中，保留1h后，过滤收集颗粒备用；将包埋好的颗粒，分装于冷冻盘中，厚度13mm，置于预冻温度为-78℃冷冻库中，预冻时间为6h后，移至真空冷冻干燥机中，温度设定为-57℃，冻干时间为18h，获得了包埋率为85%以上，DPPH清除率为80%以上的微胶囊包埋效果。

Claims

1.一种微胶囊包埋大豆源抗氧化肽的制备方法，其特征在于，以蛋白含量40～60%的大豆蛋白粉为原料，经过酶解、超滤、真空冷冻干燥、锐孔－凝固浴技术微胶囊包埋、真空冷冻干燥处理过程，制备出大豆源抗氧化肽微胶囊，产品粒径为0.08～1.0mm、包埋率为85%以上、DPPH清除率为80%以上；

所述的锐孔－凝固浴技术微胶囊包埋过程，是以1～3kDa大豆源抗氧化肽粉为原料，按照干粉与水的比例为2.5:100g/mL～7.5:100g/mL范围内进行混合均匀，备用；以海藻酸钠固体为壁材原料，按照海藻酸钠与水的比例为0.7:100g/mL～2.3:100g/mL范围内进行混合均匀，备用；以氯化钙固体为固化剂原料，按照氯化钙与水的比例为1:100g/mL～5:100g/mL在适宜的温度范围内进行混合，制备固浴液，备用；将壁材海藻酸钠溶液和芯材大豆肽溶液按照质量比为1:2～2:1范围内进行混合均匀，备用；选用锐孔－凝固浴技术微胶囊包埋的造粒机，并配备锐孔孔径为0.08～1.0mm，用50mL注射器吸取一定体积的一定质量配比的壁材芯材混合溶液，置于造粒机上，平衡5～10min后，开启推进，打开控制单元，设定注射泵流速为2.0～5.0mL/min，电极电压为250～2500V使颗粒在静电分散装置中分散合理，调节振动频率为40～6000Hz，打开磁力搅拌装置，使挤压成型的颗粒，均匀分散到固浴液中，保留0.5～3h后，过滤收集颗粒备用；

2.根据权利要求1所述的碱性蛋白酶，其特征在于，所选用的碱性蛋白酶为固体或液体蛋白酶，酶比活力单位为20至150万U/g。

3.根据权利要求1所述的NaOH溶液，其特征在于，浓度范围为1～10mol/L。

4.根据权利要求1所述HCl溶液，其特征在于，浓度范围为1～10mol/L。

5.根据权利要求1所述的锐孔孔径，其特征在于，孔径范围为0.08～1.0mm。

6.根据权利要求1所述的固浴液，其特征在于，氯化钙与水的比例为1:100g/mL～5:100g/mL，调配温度为25～30℃。

7.一种大豆源抗氧化肽微胶囊，其特征在于，产品粒径为0.08～1.0mm、包埋率为85%以上、DPPH清除率为80%以上。