CN103327988B

CN103327988B - 包含螨过敏原提取物的药品及其制备方法

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Publication number: CN103327988B
Application number: CN201180030212.9A
Authority: CN
Inventors: H·M·韦伯斯特; J·D·弗雷; T·L·雷普; C·T·格拉斯; D·罗尔斯; G·S·史密斯; D·B·埃尔南德斯; F·胡安比达莱斯; C·阿特亚加巴斯克斯; J·C·莫雷诺塞古拉; M·J·查莫罗萨利利亚斯
Original assignee: ALK Abello AS
Current assignee: ALK Abello AS
Priority date: 2010-06-03
Filing date: 2011-06-03
Publication date: 2016-06-08
Anticipated expiration: 2031-06-03
Also published as: ZA201300033B; RU2016121600A3; EP3266460B1; AU2011260233A1; AU2011260233B2; RU2593778C3; US20130280302A1; EP3266460A1; EP2575832A1; US10842866B2; CA2801125A1; KR20130121806A; CN105903012B; KR101936920B1; EP3662916A1; CN105903012A; JP2013533855A; KR20180097777A; US9259464B2; RU2012157737A

Abstract

本发明涉及一种用于治疗和/或预防由房尘螨引起的过敏和过敏性哮喘、包含过敏原提取物或其类过敏原的药品，所述提取物包含至少一种选自以下组a)-b)的螨体的提取物：a)Der？p螨体的提取物，b)Der？f螨体的提取物，以及至少一种选自以下组c)-g)的螨培养物的提取物：c)Der？p粪粒的提取物，d)Der？f粪粒的提取物，e)Der？f全螨培养物的提取物，f)Der？p全螨培养物的提取物，g)c)至f)的提取物的组合。

Description

包含螨过敏原提取物的药品及其制备方法

本发明涉及包含螨过敏原的、适于治疗和/或预防房尘螨过敏原和由房尘螨引起的过敏性哮喘的药品及其制备方法。

发明背景

在采用西方生活方式的国家中，过敏是一个主要的健康问题。而且，过敏性疾病在这些国家的流行日益增加。虽然一般来说不认为过敏是威胁生命的疾病，但哮喘每年就造成大量的死亡。在青少年中约30%的异常流行造成了在生活质量、工作日和金钱上的实质性损失，并确保其跻身西方世界的主要健康问题之列。

临床过敏现象和症状以数种方式呈现，可能由于致敏个体以及遭受的过敏而不同。常见症状为浮肿、瘙痒、眼鼻发红和流液（鼻炎和结膜炎）以及上下气道症状，如喘息、咳嗽、呼吸短促，皮肤病症，如湿疹、风疹和瘙痒。也经历如乏力或失眠的其它症状。对症治疗旨在降低或影响症状的严重性或者减少对平行施用的其它药物的需求。对症药物包括：抗组胺，如H₁和H₂受体拮抗剂；鼻内和全身皮质类固醇；非类固醇类抗炎药；鼻解充血药，如肾上腺素受体激动剂。治疗和缓解一种或多种过敏症状和/或减少对其它药物的需求是本发明的另一目的。

过敏原特异性免疫疗法（也称为过敏原免疫疗法、过敏免疫疗法、特异性过敏接种（SAV）、减敏或脱敏作用）为过敏性疾病的病因疗法。其影响基础免疫机制，从而永久性或长期改进患者的免疫状况。因此，与对症药物治疗相比，特异性过敏免疫接种的保护效果延伸至治疗期以外。某些接受该种治疗的患者得以治愈，此外，大多数患者在疾病的严重性或所经历的症状上得以缓解，或者至少阻滞疾病恶化。过敏原免疫疗法也具有预防效果，降低花粉热发展成哮喘的风险以及降低发展新的过敏性的风险。

通过多次施用在扩展的时期施用的过敏原来进行传统的过敏原免疫疗法。

长期存在的过敏原免疫疗法的使用通过注射途径进行（也称为SCIT、SIT或皮下免疫疗法）。一般而言，通过皮下途径以增加的剂量施用过敏原，直至达到维持剂量，但是也使用簇施用(clusteradministration)或无向上增量施用(up-dosing)的治疗方案。根据所应用的治疗进程的不同，在治疗完成或停止前，可以施用过敏原长达3年或更长的时期。

一种可选的施用途径为舌下（SLIT）施用，其对于患者更为方便，因为可以在家中进行施用。

用于免疫疗法的免疫治疗产品一般包含在患者中引起过敏的过敏原或其衍生物作为活性成分，根据所选的施用途径，可以多种方式配制，例如含水剂型、氢氧化铝悬液或类过敏原。所述活性成分可以是，例如，含有花粉过敏原的花粉的含水提取物和/或含有螨过敏原的螨的含水提取物。

属于房尘螨（Pyroglyphidae）科的最重要的房尘螨包括埋内宇尘螨(Euroglyphusmaynei)、屋尘螨(Dermatophagoidespteronyssinus)和粉尘螨(Dermatophagoidesfarinae)。这些发现于包括欧洲、美国、中国和很多其它国家的世界上大级分地区，并且由房尘螨引起的过敏和过敏性哮喘是影响25％人口的常见疾病。

一些患者被埋内宇尘螨、屋尘螨致敏，一些患者被粉尘螨致敏，而其他患者被两个物种均致敏。

患者通常被房尘螨中两种主要的过敏原致敏（尽管程度不同），即1型过敏原和/或2型过敏原。

房尘螨含有20种以上的不同过敏原。然而两种主要的过敏原1型和2型是最重要的过敏原，因为患者被这两种过敏原致敏的频繁性、在应答这些过敏原时产生的IgE的量及其在自然提取物中的含量。

在过敏原免疫疗法中，以患者被其致敏的过敏原治疗患者。过敏原引发IgE介导的免疫学应答的能力使得控制施用于过敏患者的过敏原提取物中的过敏原（特别是1型和2型过敏原）含量以避免负作用是重要的。

来自Derf和Derp的1型和2型过敏原密切相关但不相同，参见AllergensandAllergenImmunotherapy,ClinicalAllergyandImmunologySeries21,LockeyandLedfors,第4版,162-164页)。

以房尘螨过敏原对患者进行免疫疗法的当今市场上的所有产品包含含有1型和2型螨过敏原的含水过敏原提取物。很多产品含有屋尘螨和粉尘螨这两者的提取物。

螨过敏原提取物通过在合适的螨培养基中培养螨、然后提取整个螨培养物或提取其螨体级分进行制备，AllergensandAllergyImmunotherapy,第4版,ClinicalAllergyandImmunotherapy,Series21,R.F.LockeyandD.K.Ledfors,286页)。

在过敏原提取物的制备中，重要的是控制差异性并实现一致性和可重复性，以达到后续临床环境中的最佳安全性和功效。过敏原提取物的标准化是复杂的事宜，原则上涉及过程的整个生产链，包括建立强有力且可重复的制备步骤，参见AllergyMethodsandProtocols,JonesandLympany(2008),12和13章。由于过敏原提取物的IgE结合能力与一种或几种主要过敏原的含量相关，一般性的标准化策略通常涉及针对所选这些主要过敏原的含量、进而针对整体IgE结合能力和组成来标准化提取物。评价过敏原提取物的相关测定方法是本领域公知的，包括：免疫电泳测定，如CIE、CRIE、FRIE、CLIE；使用单－或多特异性抗体的定量法，如SRID、RIS、QIE；以及制备标准化参照的方法。在有限的程度上存在国际标准，一个实例为FDA；为提取物制备提供的CBER参照以标准化并标记其产品，得到AI或BAU（过敏单位或生物等效过敏单位）的生物效价。

在过敏原提取物中，1型和2型过敏原的重量存在批次间的显著差异，在这些过敏原提取物中，1型过敏原的重量一般高于2型过敏原的重量。

众所周知，房尘螨1型和2型过敏原在螨体以及培养过程中由螨产生的粪粒中均有发现。也已知1型过敏原与粪粒相关，而2型过敏原与螨体相关；参见Batardelal.IntArchAllergyImmunol2006,140,p.295-305。

如上所述，在全螨培养物提取物（包括螨体提取物）中螨1型和螨2型过敏原中存在批次间的显著差异，这使得很难制备具有恒定和预定水平的1型和2型过敏原的螨提取物。这当然是在工业或大规模生产药品中的严重问题，药品应在每一批次含有尽可能相同的量的活性成分。

因此，改进的方法和产品对于使生产效率最大化并提供对于终端使用者的功效和安全性高质量的产品是重要的。

发明概述

因此，本发明涉及一种包含过敏原提取物或其类过敏原的药品，其包含至少一种选自以下组a)-b)的螨体的提取物：

a)Derp螨体的提取物，

b)Derf螨体的提取物，

以及至少一种选自以下组c)-g)的螨培养物的提取物：

c)Derp粪粒的提取物，

d)Derf粪粒的提取物，

e)Derf全螨培养物的提取物，

f)Derp全螨培养物的提取物，

g)c)至f)的提取物的组合。

本发明还涉及一种包含过敏原提取物或其类过敏原的药品，其包含至少一种选自以下组a)-b)的螨体的提取物：

a)Derp螨体的提取物，

b)Derf螨体的提取物，

以及至少一种选自以下组c)-d)的螨粪粒的提取物：

c)Derp粪粒的提取物，

d)Derf粪粒的提取物。

本发明还涉及螨体级分，其包含70%v/v以上的螨体、更优选75%v/v以上的螨体、更优选80%v/v以上的螨体、优选85%v/v以上的螨体、优选90%v/v以上的螨体、优选95%v/v以上的螨体、最优选98%v/v以上的螨体。

本发明还涉及螨粪粒级分，其包含70%v/v以上的粪粒、优选75%v/v以上的粪粒、优选80%v/v以上的粪粒、优选85%v/v以上的粪粒、优选90%v/v以上的粪粒、更优选95%v/v以上的粪粒、最优选98%v/v以上的粪粒。

本发明还涉及制备包含Derp1和Derp2过敏原的螨过敏原提取物的方法，所述方法包括以下步骤：

a)从Derp螨的培养物分离Derp螨体的级分，其中所述级分包含70%v/v以上的Derp螨体、更优选75%v/v以上的Derp螨体、更优选80%v/v以上的Derp螨体、优选85%v/v以上的Derp螨体、优选90%v/v以上的Derp螨体、优选95%v/v以上的Derp螨体、最优选98%v/v以上的Derp螨体；

b)任选地组合数个所述Derp螨体的级分；以及

c)从如上所述步骤a)或步骤b)中获得的所述Derp螨体的级分提取过敏原，以获得所述螨过敏原提取物。

本发明还涉及制备包含Derf1和Derf2过敏原的螨过敏原提取物的方法，所述方法包括以下步骤：

a)从Derf螨的培养物分离Derf螨体的级分，其中所述级分包含70%v/v以上的Derf螨体、更优选75%v/v以上的Derf螨体、更优选80%v/v以上的Derf螨体、优选85%v/v以上的Derf螨体、优选90%v/v以上的Derf螨体、优选95%v/v以上的Derf螨体、最优选98%v/v以上的Derf螨体；

b)任选地组合数个所述Derf螨体的级分；以及

c)从如上所述步骤a)或步骤b)中获得的所述Derf螨体的级分提取过敏原，以获得所述螨过敏原提取物。

本发明还涉及制备用于治疗和/或预防房尘螨引起的过敏或过敏性哮喘的药物组合物的方法，所述药物组合物包含具有预定且受控量的选自Derf1、Derf2、Derp1和Derp2过敏原的过敏原提取物或其类过敏原，所述方法包括以下步骤：

a)从螨的Derp培养物分离Derp螨体的级分和/或Derp螨粪粒的级分，和/或从Derf螨培养物分离Derf螨体的级分和/或Derf螨粪粒的级分；任选地

b)组合Derp螨体的数个级分，任选地组合Derp粪粒的数个级分，任选地组合Derf螨体的数个级分，以及任选地组合Derf粪粒的数个级分；

c)从如上所述步骤a)或步骤b)中获得的螨体的级分提取过敏原和/或从如上所述步骤a)或步骤b)中获得的螨粪粒的级分提取过敏原；以及其后

d)测量如上所述步骤c)中获得的螨过敏原提取物中1型和2型过敏原的浓度(w/v)；以及任选地

e)混合如上所述步骤c)中获得的一种或多种螨体的提取物和一种或多种粪粒的提取物，以获得具有预定浓度(w/v)的1型比2型过敏原的过敏原提取物的混合物，以及任选地

f)将所述提取物转化为提取物的类过敏原。

本发明还涉及在用于治疗和/或预防由房尘螨引起的过敏和过敏性哮喘的药物过敏原产品中使用的一系列过敏原提取物的过敏原提取物，各过敏原提取物包含至少一种螨体提取物和至少一种螨粪粒提取物，或者来自具有低于70%v/v螨体的螨体的级分的螨体提取物或全螨培养物提取物，其中所述过敏原提取物具有预定比例的1型和2型过敏原，并且其中所述比例的方差系数对于系列提取物不超过25、20、15、10或7.5%。

本发明还涉及在用于诊断由房尘螨引起的过敏和过敏性哮喘的药物过敏原产品中使用的一系列过敏原提取物的过敏原提取物，各过敏原提取物包含至少一种螨体提取物和至少一种螨粪粒提取物，或者来自具有低于70%v/v螨体的螨体的级分的螨体提取物或全螨培养物提取物，其中所述过敏原提取物具有预定比例的1型和2型过敏原，并且其中所述比例的方差系数对于系列提取物不超过25、20、15、10或7.5%。

附图简述

图1显示了在实施例2中进一步描述的设置。

定义

本文中所用的“螨”表示房尘螨。这类螨的例子为粉尘螨和/或屋尘螨和/或埋内宇尘螨或其它属于房尘螨科的重要物种。

本文中所用的“Derp”表示“屋尘螨”，“Derp1”表示“Derp的1型过敏原”，而“Derp2”表示“Derp的2型过敏原”。

本文中所用的“Derf”表示“粉尘螨”，“Derf1”表示“Derf的1型过敏原”，而“Derf2”表示“Derf的2型过敏原”。

两个螨物种Derf和Derp的1型过敏原和2型过敏原在自然界存在多种同工型，参见，例如，www.allergen.org之过敏原来源(AnimaliaAnthropoda/Astigmata/Dermatophagoidesfarinae或Dermatophagoidesfarinae)。本文中所用的“1型过敏原”、“1型”、“2型过敏原”和“2型”包括各1型和2型过敏原的所有天然发生的同工型，包括在www.allergen.org上提及的那些。

本文中所用的“螨的培养物”或“螨培养物”、“全螨培养物”和“全培养物”、“Derp螨培养物”和“Derf螨培养物”或“Derp螨的培养物”和“Derf螨的培养物”表示在合适的培养基上培养Derp或Derf后所获得的物质，含有包括螨、螨的部分、粪粒、卵、螨培养基组分等的全培养物。

本文中所用的“螨培养介质或培养基”表示适于培养房尘螨的饮食。

本文中所用的“螨体的提取物”、“Derp螨体的提取物”和“Derf螨体的提取物”分别表示“螨体的一个级分或多个组合的级分的提取物”、“Derp螨体的一个级分或多个组合的级分的提取物”以及“Derf螨体的一个级分或多个组合的级分的提取物”。

本文中所用的“螨粪粒的提取物”、“粪粒的提取物”、“Derp粪粒的提取物”和“Derf粪粒的提取物”分别表示“螨粪粒的一个级分或多个组合的级分的提取物”、“粪粒的一个级分或多个组合的级分的提取物”、“Derp粪粒的一个级分或多个组合的级分的提取物”以及“Derf粪粒的一个级分或多个组合的级分的提取物”。

本文中所用的“过敏原提取物”和“过敏原提取物(I)”可互换使用，表示至少一种“螨体提取物”或“粪粒提取物”任选地与进一步的螨提取物任意组合的提取物。

本文中所用的“螨体的级分”表示含有50％v/v以上的螨体的螨培养物的一个级分或多个组合的级分，“Derp螨体的级分”表示含有50％v/v以上的Derp螨体的螨Derp培养物的一个级分或多个组合的级分，“Derf螨体的级分”表示含有50％v/v以上的Derf螨体的螨Derf培养物的一个级分或多个组合的级分。

本文中所用的“螨粪粒的级分”或“粪粒的级分”表示含有50％v/v以上的螨粪粒的螨培养物的一个级分或多个组合的级分，“Derp粪粒的级分”表示含有50％v/v以上的Derp粪粒的Derp螨培养物的一个级分或多个组合的级分，“Derf粪粒的级分”表示含有50％v/v以上的Derf粪粒的Derf螨培养物的一个级分或多个组合的级分。

本文中所用的作为词末的“(s)”表示该词为单数或复数形式。

本文中所用的“治疗”表示“治愈或减轻过敏症状”。

本文中所用的“速溶舌下片剂”表示压缩或非压缩剂型，其在口腔中在少于约90秒、优选少于约60秒、优选少于约30秒、更优选少于约20秒、甚至更优选少于约10秒分解，甚至更优选在口腔中舌下接收后在少于约5秒、最优选少于约2秒分解。此类速溶舌下片剂在WO04/77994中描述。

本文中所用的“CV”应表示以百分比表示的方差系数。

发明详述

本发明的药品适于治疗和/或预防房尘螨过敏和由房尘螨引起的过敏性哮喘。

如上所述，在全螨培养物提取物（包括螨体提取物）的批次中螨1型和螨2型过敏原中存在批次间的显著差异，这使得很难制备具有恒定和预定水平的1型和2型过敏原的螨提取物。

现已发现，通过对于每个批次的螨培养物制备数个、例如两个提取物，例如通过分离主要含有螨体的螨培养物的级分和主要含有螨粪粒的螨培养物的级分，然后分别提取螨体级分和螨粪粒级分，通过混合螨体提取物与螨粪粒提取物直至达到所需的重量比，提供在最终的过敏原提取物中控制1型与2型过敏原的比例的能力。

现亦已发现，如果纯化通过培养螨获得的螨培养物以制备含有70%v/v以上、或更优选80%v/v以上螨体的螨体级分，该纯化的螨体级分的提取通常将产生螨体提取物，其含有等重量的1型和2型过敏原或多于1型过敏原的2型过敏原。

含有在重量上比1型过敏原更多的2型过敏原的螨体提取物可以补充有螨粪粒的提取物，所述螨粪粒通常含有在重量上比2型过敏原更多的1型过敏原，以产生具有在重量上预定量或如果需要更等量的1型和2型过敏原的提取物的混合物。

通常含有在重量上比2型过敏原更多的1型过敏原且可用于补充的提取物的实例为全螨培养物的提取物或具有少于70%v/v螨体的体级分。

在重量上具有比1型过敏原更多的2型过敏原的螨体提取物也可以补充有全螨培养物的提取物或具有少于70%v/v螨体的螨体级分，两者通常均含有在重量上比2型过敏原更多的1型过敏原，以产生具有在重量上预定量或如果需要更等量的1型和2型过敏原的提取物的混合物。

可以混合螨体的提取物和其它级分、优选粪粒以获得提取物的混合物，所述混合物含有宽范围的1型与2型的重量比，例如从1:0.6至1：1.6、1：0.7至1：1.5、1：0.8至1：1.4、1：0.9至1：1.3、1：0.95至1：1.2、1：0.98至1：1.15，包括含有在重量上等量的1型过敏原和2型过敏原的混合物，即Derp1、Derp2、Derf1和Derf2的1：1：1：1混合物。

在一个方面，本发明涉及制备具有在重量上预定的、受控量的Derf1、Derf2、Derp1和Derp2过敏原的用于药品的螨过敏原提取物的混合物的方法。

本发明还涉及一种药品，其包含选自至少一种螨体的提取物和任选地至少一种螨粪粒的提取物的过敏原提取物，所述过敏原提取物选自：a)Derp螨体的提取物；b)Derp粪粒的提取物；c)Derf螨体的提取物；和d)Derf粪粒的提取物，其中主要的过敏原Derp1、Derp2、Derf1和/或Derf2以预定的、受控的量存在。

在一些实施方式中，本发明的提取物特征在于，与市场上的产品相比，含有在重量上更多的2型过敏原。本申请的发明人已经提供了用于制备螨过敏原提取物的工业或大规模方法，所述提取物具有该改变的1型和2型过敏原之间的重量比。

已发现，如果为两个螨物种的每一个制备螨体和螨粪粒的单独提取物，且充分纯的螨体级分（和螨粪粒级分）用于提取，可以产生对于每一螨物种而言1型和2型过敏原重量比在1:0.6至1:1.6的螨提取物。

通过组合两个物种的提取物，可以达到Derp1、Derp2、Derf1和Derf2之间的重量比为1:1:1:1。

这些产品是有益的，因为药品中过敏原的含量很好地被控制。

先前，通常含有在重量上比2型过敏原更多的1型过敏原的螨过敏原提取物可能引起对于2型过敏原尤其致敏的过敏患者治疗不佳。

根据本发明，已提供了用于制备在重量上比提取物中通常发现的1型过敏原更高量的2型过敏原的提取物的工业方法。

合适地，如上所述的药品包含选自如上a)-d)组的至少一种螨体提取物和至少一种螨粪粒提取物。

优选地，螨过敏原提取物包含Derp螨体的提取物、Derp粪粒的提取物、Derf螨体的提取物和Derf粪粒的提取物。

根据本发明进一步的实施方案，所述螨过敏原提取物包含：

-Derp螨体的提取物和Derp粪粒的提取物，任选地没有Derf螨体的提取物和Derf粪粒的提取物；或

-Derf螨体的提取物和Derf粪粒的提取物，任选地没有Derp螨体的提取物和Derp粪粒的提取物；或

-Derp螨体的提取物和Derf螨体的提取物，任选地没有螨粪粒的提取物；或

-Derp螨体的提取物，而没有Derf螨体的提取物，任选地没有螨粪粒的提取物；或

-Derf螨体的提取物，而没有Derp螨体的提取物，任选地没有螨粪粒的提取物。

在本发明的优选实施方案中，Derp螨体的提取物自Derp螨体的一或多个级分制备，其中Derp螨体的级分的提取产生包含在重量上等量的1型和2型过敏原或在重量上比1型过敏原更多的2型过敏原的提取物，和/或Derf螨体的提取物自Derf螨体的一或多个级分制备，其中Derf螨体的级分的提取产生包含在重量上等量的1型和2型过敏原或在重量上比1型过敏原更多的2型过敏原的提取物。

在优选实施方案中

-Derp螨体的提取物适宜地制备自Derp螨培养物的一个级分或组合的级分，所述级分包含70%v/v以上的Derp螨体、更优选75%v/v以上的Derp螨体、更优选80%v/v以上的Derp螨体、优选85%v/v以上的Derp螨体、优选90%v/v以上的Derp螨体、优选95%v/v以上的Derp螨体、最优选98%v/v以上的Derp螨体；和/或

-Derf螨体的提取物适宜地制备自Derf螨培养物的一个级分或组合的级分，所述级分包含70%v/v以上的Derf螨体、优选75%v/v以上的Derf螨体、优选80%v/v以上的Derf螨体、优选85%v/v以上的Derf螨体、优选90%v/v以上的Derf螨体、更优选95%v/v以上的Derf螨体、优选98%v/v以上的Derf螨体；和/或

-Derp粪粒的提取物适宜地制备自Derp螨培养物的一个级分或组合的级分，所述级分包含70%v/v以上的Derp粪粒、优选75%v/v以上的Derp粪粒、优选80%v/v以上的Derp粪粒、优选85%v/v以上的Derp粪粒、优选90%v/v以上的Derp粪粒、更优选95%v/v以上的Derp粪粒、最优选98%v/v以上的Derp粪粒；和/或

-Derf粪粒的提取物适宜地制备自Derf螨培养物的一个级分或组合的级分，所述级分包含70%v/v以上的Derf粪粒、优选75%v/v以上的Derf粪粒、优选80%v/v以上的Derf粪粒、优选85%v/v以上的Derf粪粒、优选90%v/v以上的Derf粪粒、优选95%v/v以上的Derf粪粒、更优选98%v/v以上的Derf粪粒。

在本发明的一个实施方案中，所述粪粒级分不如所述体级分纯。

在优选实施方案中，上述各级分或组合的级分包含低于10%v/v的螨培养基颗粒。

所述螨体级分或组合的螨体级分可以含有高至20%v/v的螨部分（腿、卵等）、培养基和粪粒（即不是螨体或污染物的任何物质），条件是培养基颗粒的量低于10%v/v。

所述螨粪粒级分或组合的螨粪粒级分可以含有高至20%v/v的螨部分（腿、卵等）和培养基颗粒（即不是螨粪粒或污染物的任何物质），条件是培养基颗粒的量低于10%v/v。

在进一步的实施方式中，各级分或组合的级分包含不超过总计1.0％w/w的可检测外源物质。螨粪粒、螨部分、螨体或螨培养基不视为外源物质。

通过显微镜确定螨体和颗粒的粪级分中螨体和螨粪粒的体积百分比。计数颗粒（例如螨体或粪粒）的数量并表示为%v/v乘以目标颗粒（例如螨体或粪粒）的平均体积的数字。

对螨体级分进行的显微计数

对样品称重并悬浮于含甘油的溶液中（25％甘油、5％Igepal）。在真空下将样品倾注至划分网格的过滤器上，以除去所述液体并将所述颗粒固定在所述过滤器上。然后干燥所述过滤器，以提高使用显微镜时的可见性。随机选择待计数的网格，并对所选网格内的所有颗粒进行计数。选择网格直到至少800个颗粒被计数。在数个（例如两个、三个、四个或五个）独立的样品上计数进行上述过程。当计算结果时，样品间的差异必须满足测定所需的可接受标准（例如，如高于80体积/体积%全螨体，和/或低于10体积/体积%的培养基颗粒），以确保样品间的一致性。如果来自样品的结果是一致的，那么取计数的平均值，给出测定结果。

通过使用对于螨体、粪和培养基颗粒预定的、分配的体积，将非体积计数转换为体积。

对粪粒级分进行的显微计数

对样品称重，置于划分网格的计数皿中并与石蜡油混合以得到均匀的层。随机选择待计数的网格，并对所选网格内的所有颗粒进行计数。选择网格，直至计数至少800个颗粒。在数个（例如两个、三个、四个或五个）独立的样品上进行上述过程。当计算结果时，样品间的差异必须满足测定所需的可接受标准（例如，如高于80体积/体积%全螨体，和/或低于10体积/体积%的培养基颗粒），以确保样品间的一致性。如果来自样品的结果是一致的，那么取计数的平均值，给出测定结果。通过使用对于螨体、粪和培养基颗粒预定的、分配的体积，将非体积计数转换为体积。

分配给螨体、粪粒、螨培养基颗粒的体积如下：

Derf螨体：21132000立方微米

Derp螨体：12926000立方微米

螨体级分中的螨培养基颗粒：6721000立方微米

粪级分中的螨培养基颗粒：10000立方微米

粪粒：19000立方微米

如上所述，本发明是基于如下发现：通过纯化螨体级分从而使其含有70%v/v以上的螨体、或更优选80%v/v以上的螨体，可以从所述螨体级分或组合的级分制备螨体提取物，其中所述提取物中以重量计1型过敏原的量低于以重量计2型过敏原的量，或者以重量计1型和2型过敏原的浓度相等。

根据优选实施方案，在螨体提取物中，以重量计1型过敏原的量低于以重量计2型过敏原的量，在螨粪粒提取物中，以重量计1型过敏原的量远高于以重量计2型过敏原的量。

适宜地，与用于其制备的螨粪粒提取物中1型与2型过敏原之间的重量比相比，过敏原提取物中1型与2型过敏原的重量比更接近于螨体提取物中1型过敏原与2型过敏原的重量比。

根据本发明，与制备1型和2型过敏原的螨体和螨粪粒提取物相比，可以改变所述提取物中1型与2型过敏原的重量比至以重量计更等量。这在先前是不可能的，先前典型批次的螨体和粪粒提取物均含有以重量计多于2型过敏原的1型过敏原。

提供本发明的药品，其包含过敏原提取物，所述过敏原提取物包含选自Derf1、Derf2、Derp1和Derp2的过敏原，且在所述过敏原提取物中以最低浓度（w/v）存在的过敏原以如下浓度存在：所述浓度高于以最高浓度（w/v）存在的选自Derf1、Derf2、Derp1和Derp2的过敏原的浓度的50％，更优选所述浓度高于以最高浓度（w/v）存在的选自Derf1、Derf2、Derp1和Derp2的过敏原的浓度的60％，更优选所述浓度高于以最高浓度（w/v）存在的选自Derf1、Derf2、Derp1和Derp2的过敏原的浓度的70％，更优选所述浓度高于以最高浓度（w/v）存在的选自Derf1、Derf2、Derp1和Derp2的过敏原的浓度的80％，更优选所述浓度高于以最高浓度（w/v）存在的选自Derf1、Derf2、Derp1和Derp2的过敏原的浓度的85％，更优选所述浓度高于以最高浓度（w/v）存在的选自Derf1、Derf2、Derp1和Derp2的过敏原的浓度的90％，更优选所述浓度高于以最高浓度（w/v）存在的选自Derf1、Derf2、Derp1和Derp2的过敏原的浓度的95％，优选所述浓度高于以最高浓度（w/v）存在的选自Derf1、Derf2、Derp1和Derp2的过敏原的浓度的98％，或者最优选所述浓度高于以最高浓度（w/v）存在的选自Derf1、Derf2、Derp1和Derp2的过敏原的浓度的99％。

本发明产品的一日剂量适宜地含有2－10μg或更优选3－8μgDerp1、3－8μgDerp2、3－8μgDerf1和3－8μgDerf2。

在优选实施方案中，本发明的舌下产品中1型和2型过敏原的日剂量是适宜地3－4μg、更优选约3.6μgDerp1、Derp2、Derf1和/或Derf2。

在另一实施方案中，本发明的舌下产品中1型和2型过敏原的日剂量适宜地6－8μg、更优选约7.2μgDerp1、Derp2、Derf1和/或Derf2。

如上所述的药品可以配制为压缩型或非压缩型舌下片剂（例如，如在WO04/77994中）、液态舌下产品（例如，如在WO07/051476中）、或任选地佐以氢氧化铝的用于注射的液态产品（例如，如在WO10/043675中）。优选地，所述药品为速溶舌下片剂。适宜地，所述片剂为片剂、胶囊、糖锭或囊片的形式。

所述过敏原提取物可以在上述药品以类过敏原的形式存在。

本发明还涉及制备用于药品的螨过敏原提取物的方法，所述提取物具有预定、受控量且如果需要时更等量的Derf1、Derf2、Derp1和/或Derp2过敏原。

本发明还涉及制备用于如上所述的药品的螨过敏原提取物或其类过敏原的方法，其中所述过敏原提取物具有以重量计预定、受控量的选自Derf1、Derf2、Derp1和Derp2过敏原的过敏原，所述方法包括以下步骤a)，和c)-d)，以及任选地b)、e)和/或f)：

a)从螨的Derp培养物分离Derp螨体的级分和/或Derp螨粪粒的级分，和/或从Derf螨培养物分离Derf螨体的级分和/或Derf螨粪粒的级分；

b)任选地组合Derp螨体的数个级分，任选地组合Derp螨粪粒的数个级分，任选地组合Derf螨体的数个级分，以及任选地组合Derf螨粪粒的数个级分；

c)从如上所述的步骤a)或步骤b)中获得的螨体的级分提取过敏原和/或从如上所述步骤a)或步骤b)中获得的螨粪粒的级分提取过敏原；以及其后

e)混合一种或多种如上所述步骤c)中获得的螨体的提取物和一种或多种螨粪粒提取物，以获得具有预定量和重量比的1型与2型过敏原的过敏原提取物的混合物，以及任选地

f)将所述过敏原提取物转化为其类过敏原。

根据本发明，螨体的级分的提取物与螨粪粒的级分的提取物可以组合或混合，然而螨体的级分从不与螨粪粒的级分组合。

适宜地，一个或多个螨体提取物与一个或多个螨粪粒提取物混合，以得到过敏原提取物的混合物。

优选地，所述螨过敏原提取物的混合物包含Derp螨体的提取物、Derp螨粪粒的提取物、Derf螨体的提取物和Derf2螨粪粒的提取物。

为了制备所述提取物，螨体的多于一个级分可以根据步骤b)的步骤进行组合，然后根据步骤c)进行提取。

并且，螨粪粒的多于一个级分可以根据步骤b)的步骤进行组合，然后根据步骤c)进行提取。

可选地，步骤a)获得的螨体的级分进行提取和/或步骤a)获得的螨粪粒的级分进行提取。

适宜地，步骤c)获得的一个或多个螨体提取物在步骤e)中与步骤c)中获得的一个或多个螨粪粒提取物进行混合。

适宜地，步骤c)获得的一个螨体提取物在步骤c)中与步骤e)中获得的一个螨粪粒提取物进行混合。

在如上所述的方法中，步骤c)获得的一个或多个螨体提取物可以在步骤e)中与步骤c)中获得的一个螨粪粒提取物进行混合。

可选地，步骤c)获得的一个螨体提取物可以在步骤e)中与步骤c)中获得的一个或多个螨粪粒提取物进行混合。

如本文中所用，“提取物的混合”既包括混合提取物的所有批次，也包括混合所有批次的部分。

根据本发明的优选实施方案，所述螨体提取物补充有粪粒提取物，所述粪粒提取物的量足以达到螨过敏原提取物的混合物中所需的1型过敏原与2型过敏原的重量比。

在本发明的另一优选实施方案中，所述螨体提取物已经具有以重量计几乎等量的1型和2型过敏原，而不需要与螨粪粒提取物进行混合。

方差系数（CV）计算为标准差σ与平均值μ的比值：

c_{v} = \frac{σ}{| μ |}

它有时表示为百分比，在这种情况下将CV乘以100。CV用于描述根据本发明的提取物和药品（治疗或诊断的）改进的批次间的一致性。

可以使用如95％的置信区间（CI）。

螨的培养：

很多适于培养螨的饮食是已知的，并且已有对于不同培养基成分的有效性的很多研究，如酵母、白蛋白、动物饲料、鱼饲料（Tetramin）、脱落的皮肤屑的衍生物、猪皮、盐水虾卵、麦芽、大鼠食物、犬食物、粉状的动物肝脏、乳蛋白的水解产物、维生素、矿物质、蛋白质水解产物和大豆粉。

螨的饮食例如描述于：InternationalJournalofAcarology,Vol.8,Issue3(1982),p.189-192,Rodriques,RecentAdvancesinAcarology,Vol.11(1979),211-216,Batardetal.,IntArchAllergyImmunol.140(2006)p.295-305,Yietal.;AsianPacificJournalofAllergyandImmunology,17(1999),p.189-194,Arlianetal.,J.Allergy.Clin.Immunol,No.3(1987),p.457-66和EP专利No.1236394。

包含酵母和干燥Daphnia的1:1混合物的用于培养螨的培养基的一个实例描述于MatthewColloff编著的DustMites(2009),p.270。用于培养螨的培养基的另一实例描述于EP专利No.1236394。

优选使用蛋白质裂解产物以及其它低过敏风险的组分，以降低过敏原致敏的患者中过敏反应的可能性。进一步优选使用不含动物或人类蛋白质的螨培养基。

适宜地，使用颗粒形式的螨培养基，所述颗粒具有足够的粒度和完整性，以经受下游处理的强力并可以通过初步筛选过程容易地除去。

两个螨物种Derp和Derf总是在分开的容器中培养，但可以在相同的螨培养基上培养。容器的实例包括合适大小和形状的玻璃或塑料容器，如蝇瓶。用于培养螨的一次性容器例如在WO2008/119762中描述。

螨在含培养基的容器中进行培养，并置于控制的环境中，在该环境中控制围绕培养螨培养基的环境的温度与湿度。Derp和Derf的适宜条件例如描述于很多文章中，例如Fain等(ISBN90-71868-12-5)以及Crowther:ExpApplAcarol.2007;41(1-2):61-86。

下表1a中提供了各螨物种培养条件的一组适宜的参数。

表1a

在培养过程中进行生长和成活的显微计数，以识别收获螨的最佳时间。

可以通过冷冻杀灭培养物。也可以通过，例如，以如丙酮进行窒息来杀灭螨。含有杀灭的螨的培养物的存贮容器存储于-20℃。

螨培养物的纯化：

解冻并干燥螨培养物，筛分以获得含有不同粒度的组分的螨培养物的级分。可以通过气流进行干燥，直至湿度低于20%、更优选15%。

可以使用分离技术进一步纯化螨培养物，分离螨体或粪级分，所述分离技术包括筛分（例如在筛－振荡器上使用1mm、500μm、250μm、100μm的目）、饱和氯化钠悬液和乙醇悬液，参见，例如，MatthewColloff(2009)编著的DustMites,p.271。

在一个实施方案中，通过筛分螨培养物可制备螨体的级分和螨粪粒的级分，以产生4个级分：

a)大中颗粒>350μm

b)螨体级分350-90μm

c)粪聚集体和螨部分90-50μm

d)粪粒<50μm

在这些粒度范围内，通常发现螨培养物的不同组分，如螨体、粪粒和培养基颗粒等。只要可以制备足够纯和足够量的螨体级分和粪粒，以不同于如上所述的粒度范围的粒度范围分离的螨培养物级分根据本发明也可以是有用的。

弃去级分a)和c)。级分d)可以在提取过程中直接使用，而级分b)则在提取前进行进一步的纯化。

螨体级分的纯化：

通过浮选在适宜的液体中从培养基颗粒纯化螨体的方法先前已有描述，GB专利号1318560，第3页。J.Med.Entomol.(1979),Vol.16,No.2,p.128-132描述了在酒精（乙醇）中浮选以从螨培养基颗粒分离螨体。

现已发现，在适宜的液体中螨体级分的重复密度离心产生高纯度的螨体级分，其在提取时产生比1型过敏原重量更多的2型过敏原，或者以重量计等量的1型和2型过敏原。

因此，本发明还涉及用于分离和纯化螨体的方法，其包括步骤：

i)从Derp和/或Derf螨培养物分离螨体级分；和

ii)对一个或多个Derp螨体级分或者一个或多个Derf螨体级分在第一液体培养基中进行密度离心，所述第一液体培养基在离心所用的温度具有iia)比螨体高的密度而比培养基低的密度；和

iii)从所述第一液体培养基的表面收集螨体并重复步骤ii)和iii)，直至达到所需的螨体纯度；任选地接着

iv)以第二液体洗涤螨体，除去所述第一液体，所述第二液体在洗涤步骤所用的温度不从螨体提取1型和2型过敏原。

优选地，上述过程中的所述第一和第二液体不含水（无水）以限制在所述原料纯化步骤中从原料提取过敏原。在另一实施方案中，用于分离和纯化螨体的方法步骤ii)对一个或多个Derp螨体级分或者一个或多个Derf螨体级分在第一液体培养基中进行密度离心，所述第一液体培养基在离心所用的温度具有iia)比螨体高的密度而比培养基低的密度并且iib)不从螨体提取1型和2型过敏原。

适宜的液体包括甲泛影酸衍生物（如碘海醇，（N-2,3-二羟丙基乙酰胺基-2,4,6-三碘-N-N-双(2,3-二羟丙基)）、聚丙二醇（例如（聚丙二醇4000））、硅基组合物（如）。

在以上离心过程中难以彻底避免从螨体的提取一些1型和2型过敏原。根据本发明，不从螨体提取1型和2型过敏原的液体为在如上步骤ii)和iv)中所用的温度不以严重影响终产率以及1型和2型过敏原的比例的量从螨体提取1型和2型过敏原的液体。

通过在低温例如冷冻温度下进行离心，可以减少离心过程中从螨体提取1型和2型过敏原。

在优选实施方案中，具有密度高于螨体而低于培养基颗粒的液体为无水液体，例如无水甘油。

通过以乙醇、优选无水乙醇进行洗涤，可以从螨体除去甘油。

重复合适的步骤ii)和iii)一次，或者重复在甘油中进行离心，直至所得的螨体级分由至少70%v/v的螨体、更优选75%v/v以上的螨体、更优选80%v/v以上的螨体、优选85%v/v以上的螨体、优选90%v/v以上的螨体、优选95%v/v以上的螨体、最优选98%v/v以上的螨体组成，并且所述螨体级分含有低于20%v/v的螨部分、粪粒、培养基颗粒和低于10%v/v的培养基颗粒。

不用如步骤ii)和iii)中所述的采用甘油的密度离心，可以通过以饱和NaCl作为第一液体纯化螨体级分，直至螨体级分由至少70%v/v的螨体、更优选75%v/v以上的螨体、更优选80%v/v以上的螨体、优选85%v/v以上的螨体、优选90%v/v以上的螨体、优选95%v/v以上的螨体、最优选98%v/v以上的螨体组成，并且所述螨体级分含有低于20%v/v的螨部分、粪粒、培养基颗粒和低于10%v/v的培养基颗粒，无需实施步骤iv)。

不用密度离心，可以通过筛分纯化螨体级分，直至螨体级分由至少70%v/v的螨体、更优选75%v/v以上的螨体、更优选80%v/v以上的螨体、优选85%v/v以上的螨体、优选90%v/v以上的螨体、优选95%v/v以上的螨体、最优选98%v/v以上的螨体组成，并且所述螨体级分含有低于20%v/v的螨部分、粪粒、培养基颗粒和低于10%v/v的培养基颗粒。

螨体可以在一个维度上长度大于400μm，然而当它们在筛分前被干燥时能够通过300μm和400μm筛。

螨体具有腿和毛，可以水平线环式运动在筛式振荡器中从螨培养基颗粒中分离。该方法利用了螨在筛上水平运动时，与其毛和腿形成缠结的能力。在水平环式运动的筛分塔中，螨体被捕获在200、300和/或400μm目筛的顶部，并以这种方式与其它粒度在150－300μm的螨培养基颗粒分离。

因此，作为离心法的备选，以上在筛分过程中分离的90－350μm的螨体富集级分可以通过如下方法进行分离：

1)在带有300、150和80μm目筛的塔的振动型筛式振荡器中筛分Derf或Derp螨培养物，然后分离150μm－300μm的螨体富集级分和低于80μm的螨粪粒富集级分，然后

2)在具备水平和环式运动并带有200、300和/或400μm目筛的塔的筛式振荡器中筛分螨体富集级分（150μm－300μm），分离由200、300和/或400μm目筛捕获的体富集级分，然后

3)在具有3D投掷运动和300、200、150和100目筛的筛式振荡器中筛分体富集级分，以产生150μm－300μm目的螨级分和低于100μm的螨粪粒提取物；以及

任选地，组合来自振动型筛的低于80μm的粪粒级分和来自具有3D投掷运动的筛的低于100μm的粪粒级分，并对组合的粪级分在具有3D投掷运动和100、80、50μm目筛的塔的筛中进行筛分。

上述获得的螨体级分b)也可以通过上述方法中的步骤2和3进行纯化。

提取

以大致相同的方式、但在单独的过程中提取螨体和螨粪粒的级分，因为提取螨体的最佳条件与提取螨粪粒的最佳条件不同。

为了从螨体和粪粒提取过敏原，需要破裂这些体以释放过敏原。可以通过向螨体的浆施加外力来实现破裂。

根据本发明，发现高剪切力搅拌器特别有效地破裂螨体和粪粒并从螨体和螨粪粒释放过敏原。

因此，根据本发明的一个实施方案，通过以高剪切力搅拌器将螨体或螨粪粒悬浮于缓冲液中（一般15－30分钟），然后在无搅拌的情况下使提取继续进行（一般1－6小时），进行过敏原的提取。

对于螨体和粪粒，过敏原的释放不同。粪粒中的过敏原在1小时的提取后进行提取，而需要至少3小时来从螨体提取过敏原。

用于提取螨过敏原的缓冲液是本领域公知的。

所述过敏原原料（螨体和/或螨粪粒）可以，例如，使用包含0.15MNaCl、0.012MNaHCO₃和NaOH/HCl/水的提取缓冲液以调节pH，进行提取。使用提取缓冲液与过敏原原料之间1:10（w/w）的比例、pH7-8、4-12℃的温度和1－6小时的提取时间，适宜地进行所述提取。

这些提取物在它们用于药品之前进行进一步的纯化。

剩余的不溶物质可以，例如，通过离心和澄清从螨粪粒的提取物除去。然后，螨粪粒提取物可进行超滤，以三个步骤进行：首先，通过切向流过滤除去水和其它小分子而进行浓缩，然后通过渗滤除去小分子和盐，其后进行干物质调节。

其后，可以通过澄清化过滤使过敏原提取物澄清。

进一步的螨体的纯化适宜地包括以下过程：使用渗滤进行分离，在膜上留下不溶物质，在膜的另一侧上向提取物连续加水。其后对提取物进行如上所述超滤和澄清。

可以通过如WO05/058474中所述，通过形成提取物的冷冻球（冰粒(cryogranule)稳定提取物。

螨体和螨粪粒的提取物中1型和2型过敏原的浓度可以通过很多常规用于测量过敏原含量的方法进行测量，包括，例如，ELISA、RID/SRID（单向辐射状免疫扩散）或MS（质谱，例如，如WO2007/031080），也参见上文。

RID法的原理是在环形孔中施用的蛋白质（抗原）向外扩散，在含有相应抗体的琼脂凝胶中形成浓度梯度。该方法中所用的抗体为单特异性（即，仅抗一种特异性抗原）和多克隆的，使其形成抗原－抗体复合物的沉淀物。所述抗体过量存在，抗原的扩散将继续，直至达到等价点并形成抗原－抗体沉淀物的环。然后，染色沉淀物环。测量所述沉淀物的面积，未知样品中抗原的浓度现在可以从参照标准产生的校准曲线进行标定。相对于参照标准，确定主要过敏原含量（参见，例如，AllergyMethodsandProtocols,JonesandLympany(2008),p.138-141,p.152-153和p.159-161)。

不同的夹心式－ELISA（酶联免疫吸附测定）方法可用于确定Derp和Derf中主要过敏原含量。一种用于测定Derf1，一种用于测定Derp1，并且一种用于测定Der2型，因为两个2型主要过敏原是免疫化学相同的。

对主要抗原（Derf1、Derp1、Der2型）特异的单克隆抗体吸附于96－孔微滴定板的孔上。mAb识别主要过敏原上的表位并结合样品中存在的过敏原。洗涤结合的抗体-抗原，并加入过氧化物酶标记的兔抗主要过敏原IgG抗体。通过加入酶底物，将发生显色反应，与结合的主要过敏原的含量成正比。也在分析中分析标准曲线，将主要过敏原活性标定在校准曲线上。除了使用内标，FDA下属的生物评价和研究中心使用如PotencyLimitsforStandardizedDustMiteandGrassAllergenVaccines:Arevisedprotocol.2000(http://www.fda.gov/BiologicsBloodVaccines/GuidanceComplianceRegulatoryInformation/Guidances/Allergenics/ucm071931.htm)所述的竞争ELISA进行过敏原产品的效价标记。

在另一优选实施方案中，通过MS（质谱）测量1型和2型过敏原的浓度，如WO2007/031080所述，使用如下校准标准肽：

TNACSINGNAPAEIDLR(Derp1)SEQIDNO:1,

NSWDTTWGDSGYGYFQAGNNLMMIEQYPYVVIM(Derf1)SEQIDNO:2,

VLVPGCHGSEPCIIHR(Derp2)SEQIDNO:3.

GKPFTLEALFDANQNTK(Derf2)SEQIDNO:4,和

GIEYIQQNGVVEER(Derf1)SEQIDNO:5。

当已确定很多螨提取物的1型和2型过敏原的浓度后，混合螨体提取物和粪粒提取物，以达到所需的1型和2型过敏原重量比。

确定何种提取物以及待混合的所述提取物的重量为迭代过程，其中确定来自待用的不同批次的提取物的以重量计的量，并针对Derf填充下式，直至达到所需比例：

主要过敏原比例=总1型/总2型=mf1xCf1grp1+mb1xCb1grp1+mf2xCf2grp1+………/mf1xCf1grp2+mb1xCb1grp2+mf2xCf2grp2+………

其中mf1为所用的第一Derf粪粒提取物的质量，mf2为所用的第二Derf粪提取物的质量，等等…Cf1grp1为mf1中1型过敏原的浓度，Cf2grp1为所用的第二粪提取物中1型过敏原的浓度，mb1为所用的第一螨体提取物，Cb1grp1为mb1中1型过敏原的浓度。Cf1grp2为mf1中2型过敏原的浓度，Cb1grp2为mb1中过敏原的浓度，Cf2grp2为mf2中2型过敏原的浓度，等等...........

对于Derp，使用类似的公式确定混合何种和多少提取物，以形成具有所需的1型和2型过敏原比例的提取物。

解冻各提取物，并根据上式进行混合。

过敏原提取物的混合物可以稳定化并存储为冷冻小滴，如WO05/0058474中所述，或者直接用于制剂中。

在其释放用于剂型前，通常对所述提取物进行其它标准化过程，包括很多测试，例如，效能测试。

螨过敏原提取物的混合物可用作用于舌下施用的固体剂型中的活性成分，如WO04/77994中所述。

备选地，过敏原提取物的混合物可以配制为液体剂型，以滴进行舌下施用。这类剂型一般包含约50％甘油、NaCl和NaOH。

所述混合物也可以配制为液体剂型用于皮下注射。所述提取物可以作为无佐剂的含水液体剂型施用，也可以作为带有如氢氧化铝的佐剂的含水液体剂型施用。

可以通过交联提取物和交联剂制备类过敏原，所述交联剂一般为醛，例如戊二醛。制备类过敏原的方法是本领域已知的。

根据本发明的进一步的实施方案：

实施方案1.一种包含过敏原提取物或其类过敏原的药品，其包含至少一种选自以下组a)-b)的螨体的提取物：

a)Derp螨体的提取物，

b)Derf螨体的提取物，

以及至少一种选自以下组c)-g)的螨培养物的提取物：

c)Derp粪粒的提取物，

d)Derf粪粒的提取物，

e)Derf全螨培养物的提取物，

f)Derp全螨培养物的提取物，

g)c)至f)的提取物的组合。

实施方案2.一种包含过敏原提取物或其类过敏原的药品，其包含至少一种选自以下组a)-b)的螨体的提取物：

a)Derp螨体的提取物，

b)Derf螨体的提取物，

以及至少一种选自以下组c)-d)的螨粪粒的提取物：

c)Derp粪粒的提取物，

d)Derf粪粒的提取物。

实施方案3.根据实施方案1－2任一项的药品，

其中Derp螨体的提取物从螨培养物的一个级分或组合的级分制备，所述级分包含70%v/v以上的Derp螨体、更优选75%v/v以上的Derp螨体、更优选80%v/v以上的Derp螨体、优选85%v/v以上的Derp螨体、优选90%v/v以上的Derp螨体、优选95%v/v以上的Derp螨体、最优选98%v/v以上的Derp螨体，和/或

Derf螨体的提取物从螨培养物的一个级分或组合的级分制备，所述级分包含70%v/v以上的Derf螨体、优选75%v/v以上的Derf螨体、优选80%v/v以上的Derf螨体、优选85%v/v以上的Derf螨体、优选90%v/v以上的Derf螨体、优选95%v/v以上的Derf螨体、优选98%v/v以上的Derf螨体。

实施方案4.包含过敏原提取物的药品，其包含选自Derf1、Derf2、Derp1和Derp2的过敏原，且在所述过敏原提取物中以最低浓度（w/v）存在的过敏原以如下浓度存在：所述浓度高于以最高浓度（w/v）存在的选自Derf1、Derf2、Derp1和Derp2的过敏原的浓度的50％，更优选所述浓度高于以最高浓度（w/v）存在的选自Derf1、Derf2、Derp1和Derp2的过敏原的浓度的60％，更优选所述浓度高于以最高浓度（w/v）存在的选自Derf1、Derf2、Derp1和Derp2的过敏原的浓度的70％，更优选所述浓度高于以最高浓度（w/v）存在的选自Derf1、Derf2、Derp1和Derp2的过敏原的浓度的80％，更优选所述浓度高于以最高浓度（w/v）存在的选自Derf1、Derf2、Derp1和Derp2的过敏原的浓度的85％，更优选所述浓度高于以最高浓度（w/v）存在的选自Derf1、Derf2、Derp1和Derp2的过敏原的浓度的90％，更优选所述浓度高于以最高浓度（w/v）存在的选自Derf1、Derf2、Derp1和Derp2的过敏原的浓度的95％，优选所述浓度高于以最高浓度（w/v）存在的选自Derf1、Derf2、Derp1和Derp2的过敏原的浓度的98％，或者最优选所述浓度高于以最高浓度（w/v）存在的选自Derf1、Derf2、Derp1和Derp2的过敏原的浓度的99％。

实施方案5.根据实施方案1－4任一项的药品，其包含Derp螨体的提取物和Derp粪粒的提取物。

实施方案6.根据实施方案1－4任一项的药品，其包含Derf螨体的提取物和Derf粪粒的提取物。

实施方案7.根据实施方案1－4任一项的药品，其包含Derp螨体的提取物和Derf螨体的提取物。

实施方案8.根据实施方案1－7任一项的药品，其包含Derp螨体的提取物、Derp粪粒的提取物、Derf螨体的提取物和Derf2粪粒的提取物。

实施方案9.根据实施方案4－8任一项的药品，其中Derp螨体的提取物从螨培养物的一个级分或组合的级分制备，所述级分包含70%v/v以上的Derp螨体、更优选75%v/v以上的Derp螨体、更优选80%v/v以上的Derp螨体、优选85%v/v以上的Derp螨体、优选90%v/v以上的Derp螨体、优选95%v/v以上的Derp螨体、最优选98%v/v以上的Derp螨体，和/或

实施方案10.根据实施方案1－9任一项的药品，其中Derp螨体的提取物从一个Derp螨体级分或组合的Derp螨体级分制备，其中螨体的所述级分的提取产生包含在重量上等量的1型和2型过敏原或在重量上比1型过敏原更多的2型过敏原的提取物，和/或Derf螨体的提取物从一个Derf螨体级分或多个组合的Derf螨体级分制备，其中螨体的所述级分的提取产生包含在重量上等量的1型和2型过敏原或在重量上比1型过敏原更多的2型过敏原的提取物。

实施方案11.根据实施方案1－10任一项的药品，其中Derp螨体的提取物从螨培养物的一个级分或组合的级分制备，所述级分包含70%v/v以上的Derp螨体、更优选75%v/v以上的Derp螨体、更优选80%v/v以上的Derp螨体、优选85%v/v以上的Derp螨体、优选90%v/v以上的Derp螨体、优选95%v/v以上的Derp螨体、最优选98%v/v以上的Derp螨体，和/或

Derf瞒体的提取物从螨培养物的一个级分或组合的级分制备，其中所述级分包含70%v/v以上的Derf螨体、优选75%v/v以上的Derf螨体、优选80%v/v以上的Derf螨体、优选85%v/v以上的Derf螨体、优选90%v/v以上的Derf螨体、优选95%v/v以上的Derf螨体、优选98%v/v以上的Derf螨体。

实施方案12.根据实施方案1－11任一项的药品，其中

Derp粪粒的提取物从螨培养物的一个级分或组合的级分制备，所述级分包含70%v/v以上的Derp粪粒、优选75%v/v以上的Derp粪粒、优选80%v/v以上的Derp粪粒、优选85%v/v以上的Derp粪粒、优选90%v/v以上的Derp粪粒、更优选95%v/v以上的Derp粪粒、最优选98%v/v以上的Derp粪粒，和/或

Derf粪粒的提取物从螨培养物的一个级分或组合的级分制备，其中所述级分包含70%v/v以上的Derf粪粒、优选75%v/v以上的Derf粪粒、优选80%v/v以上的Derf粪粒、优选85%v/v以上的Derf粪粒、优选90%v/v以上的Derf粪粒、优选95%v/v以上的Derf粪粒、更优选98%v/v以上的Derf粪粒。

实施方案13.根据实施方案12的药品，其中螨体的一个级分或组合的级分和/或其中螨粪粒的一个级分或组合的级分各包含低于10%v/v的螨培养基。

实施方案14.根据实施方案13的药品，其中螨体级分或组合的螨体级分包含最高20%v/v的螨部分（例如，腿）、粪粒和螨培养基。

实施方案15.根据实施方案12－14任一项的药品，其中螨粪粒级分或组合的粪粒级分包含最高20%v/v的螨部分（例如，腿）和螨培养基。

实施方案16.根据实施方案1－15任一项的药品，其中在螨体提取物中，以重量计1型过敏原的量低于以重量计2型过敏原的量，在螨粪粒提取物中，以重量计1型过敏原的量高于以重量计2型过敏原的量。

实施方案17.根据实施方案1－16任一项的药品，其包含过敏原，所述过敏原包含选自Derf1、Derf2、Derp1和Derp2的过敏原，且在所述过敏原提取物中以最低浓度（w/v）存在的过敏原以如下浓度存在：所述浓度高于以最高浓度（w/v）存在的选自Derf1、Derf2、Derp1和Derp2的过敏原的浓度的50％，更优选所述浓度高于以最高浓度（w/v）存在的选自Derf1、Derf2、Derp1和Derp2的过敏原的浓度的60％，更优选所述浓度高于以最高浓度（w/v）存在的选自Derf1、Derf2、Derp1和Derp2的过敏原的浓度的70％，更优选所述浓度高于以最高浓度（w/v）存在的选自Derf1、Derf2、Derp1和Derp2的过敏原的浓度的80％，更优选所述浓度高于以最高浓度（w/v）存在的选自Derf1、Derf2、Derp1和Derp2的过敏原的浓度的85％，更优选所述浓度高于以最高浓度（w/v）存在的选自Derf1、Derf2、Derp1和Derp2的过敏原的浓度的90％，更优选所述浓度高于以最高浓度（w/v）存在的选自Derf1、Derf2、Derp1和Derp2的过敏原的浓度的95％，优选所述浓度高于以最高浓度（w/v）存在的选自Derf1、Derf2、Derp1和Derp2的过敏原的浓度的98％，或者最优选所述浓度高于以最高浓度（w/v）存在的选自Derf1、Derf2、Derp1和Derp2的过敏原的浓度的99％。

实施方案18.根据实施方案1－17任一项的药品，其中所述药品为包含提取物或自提取物制备的类过敏原的压缩型或非压缩型舌下片剂、包含提取物或自提取物制备的类过敏原的液态舌下产品、或包含提取物或自提取物制备的类过敏原的用于注射的液态产品。

实施方案19.根据实施方案18的药品，其中所述药品为包含提取物的速溶舌下片剂。

实施方案20.根据实施方案1－19任一项的药品，进一步包含全螨培养物的提取物或具有少于70%v/v螨体的体级分。

实施方案21.根据实施方案1－20任一项的药品，用于治疗和/或预防房尘螨引起的过敏和过敏性哮喘和/或用于诊断过敏。

实施方案22.根据实施方案1－21任一项的药品用于制备用于治疗和/或预防房尘螨引起的过敏和过敏性哮喘和/或用于诊断过敏的医学产品的用途。

实施方案23.螨体级分，其包含70%v/v以上的螨体、更优选75%v/v以上的螨体、更优选80%v/v以上的螨体、优选85%v/v以上的螨体、优选90%v/v以上的螨体、优选95%v/v以上的螨体、最优选98%v/v以上的螨体。

实施方案24.根据实施方案23的螨体级分，其中所述螨体为Derp螨体或Derf螨体。

实施方案25.根据实施方案23－24任一项的螨体级分，含有低于10%v/v的培养基颗粒。

实施方案26.根据实施方案23－25任一项的螨体级分，包含低于20%v/v的螨部分、粪粒和螨培养基。

实施方案27.用于药品的如实施方案23－26任一项定义的螨体级分的提取物，所述药品用于治疗和/或预防由房尘螨引起的过敏和过敏性哮喘。

实施方案28.螨粪粒级分，其包含70%v/v以上的粪粒、优选75%v/v以上的粪粒、优选80%v/v以上的粪粒、优选85%v/v以上的粪粒、优选90%v/v以上的粪粒、更优选95%v/v以上的粪粒、最优选98%v/v以上的粪粒。

实施方案29.根据实施方案28的螨粪粒级分，其中所述粪粒为Derp粪粒或Derf粪粒。

实施方案30.根据实施方案28－29任一项的粪粒级分，包含最高20%v/v的螨部分（例如，腿）和螨培养基。

实施方案31.用于药品的如实施方案28－30任一项定义的螨粪粒级分的提取物，所述药品用于治疗和/或预防由房尘螨引起的过敏和过敏性哮喘。

实施方案32.根据实施方案27和31任一项的提取物用于制备药品的用途，所述药品用于治疗和/或预防由房尘螨引起的过敏和过敏性哮喘。

实施方案33.制备包含Derp1和Derp2过敏原的螨过敏原提取物的方法，所述方法包括以下步骤：

b)任选地组合数个所述Derp螨体的级分；以及

实施方案34.制备包含Derf1和Derf2过敏原的螨过敏原提取物的方法，所述方法包括以下步骤：

b)任选地组合数个所述Derf螨体的级分；以及

实施方案35.根据实施方案33－34任一项的方法，所述方法进一步包括以下步骤：混合实施方案33的一个或多个螨过敏原提取物与实施方案34的一个或多个螨过敏原提取物，以获得包含Derp1、Derp2、Derf1、Derf2过敏原的螨过敏原提取物的混合物。

实施方案36.根据实施方案33－35任一项的方法，所述方法进一步包括以下步骤：

a.从Derp螨的培养物分离Derp螨粪粒的级分；

b.任选地组合数个所述Derp螨粪粒的级分；

c.从如上步骤a)或步骤b)中获得的Derp螨粪粒级分提取过敏原；以及

d.混合实施方案33－35任一项的一个或多个螨过敏原提取物与一个或多个如上步骤c)中获得的粪粒的提取物，以获得螨过敏原提取物的混合物。

实施方案37.根据实施方案33－36任一项的方法，所述方法进一步包括以下步骤：

a.从Derf螨的培养物分离Derf螨粪粒的级分；

b.任选地组合数个所述Derf螨粪粒的级分；

c.从如上步骤a)或步骤b)中获得的Derf螨粪粒级分提取过敏原；以及

实施方案38.根据实施方案33－37任一项的方法，所述方法进一步包括以下步骤：混合实施方案33和实施方案34的一个或多个螨过敏原提取物与实施方案36的步骤c和实施方案37的步骤c的一个或多个螨过敏原提取物，以获得包含Derp1、Derp2、Derf1和Derf2过敏原的螨过敏原提取物的混合物。

实施方案39.根据实施方案33－38任一项的方法，其中获得的螨过敏原提取物转化为其类过敏原。

实施方案40.根据实施方案33－39任一项的方法，所述方法包括进一步的步骤：

a.测量实施方案33－34和36－37任一项的步骤c)的螨过敏原提取物中1型和2型过敏原的浓度(w/v)。

实施方案41.根据实施方案40的方法，所述方法包括进一步的步骤：

e)混合一个或多个实施方案33－34任一项的步骤c)的螨体的提取物与一个或多个实施方案36-37任一项的步骤c)的粪粒的提取物，以获得以重量计预定量的1型和2型过敏原的螨过敏原提取物的混合物。

实施方案42.根据实施方案33－41任一项的方法，其中所述螨过敏原提取物的混合物包含Derp螨体的提取物、Derp粪粒的提取物、Derf螨体的提取物和Derf2粪粒的提取物。

实施方案43.根据实施方案33－42任一项的方法，其中多于一个螨体级分根据步骤b)进行组合，然后根据实施方案33和/或34的步骤c)进行提取。

实施方案44.根据实施方案33－43任一项的方法，其中多于一个粪粒级分根据步骤b)进行组合，然后根据实施方案36和/或37的步骤c)进行提取。

实施方案45.根据实施方案33－44任一项的方法，其中实施方案33和/或34的步骤c)中获得的一个或多个螨体提取物与实施方案36和/或37的步骤c)中获得的一个或多个螨粪粒提取物在步骤e)中进行混合。

实施方案46.根据实施方案33－45任一项的方法，其中实施方案33和/或34的步骤c)中获得的一个或多个螨体提取物与实施方案36和/或37的步骤c)中获得的一个螨粪粒提取物在步骤e)中进行混合。

实施方案47.根据实施方案33－46任一项的方法，其中实施方案33和/或34的步骤c)中获得的一个螨体提取物与实施方案36和/或37的步骤c)中获得的一个或多个螨粪粒提取物在一步骤中进行混合。

实施方案48.根据实施方案33－47任一项的方法，其中螨体提取物补充有以重量计的量的粪粒提取物、低于70%v/v的来自体级分的体提取物或全培养物提取物，所述量足以达到螨过敏原提取物的混合物中所需的1型过敏原与2型的重量比。

实施方案49.根据实施方案33－48任一项的方法，其中

实施方案36的步骤c)中Derp粪粒的提取物从螨培养物的一个级分或组合的级分制备，所述级分包含70%v/v以上的Derp粪粒、优选75%v/v以上的Derp粪粒、优选80%v/v以上的Derp粪粒、优选85%v/v以上的Derp粪粒、优选90%v/v以上的Derp粪粒、更优选95%v/v以上的Derp粪粒、最优选98%v/v以上的Derp粪粒，和/或

实施方案37的步骤c)中Derf粪粒的提取物从螨培养物的一个级分或组合的级分制备，所述级分包含70%v/v以上的Derf粪粒、优选75%v/v以上的Derf粪粒、优选80%v/v以上的Derf粪粒、优选85%v/v以上的Derf粪粒、优选90%v/v以上的Derf粪粒、优选95%v/v以上的Derf粪粒、更优选98%v/v以上的Derf粪粒。

实施方案50.根据实施方案33－49任一项的方法，其中实施方案33和/或34的步骤a)中螨体的级分或步骤b)中组合的螨体的级分和/或其中实施方案36和/或37的步骤a)中粪粒的级分或步骤b)中组合的螨粪粒的级分各包含低于10%v/v的螨培养基。

实施方案51.根据实施方案50的方法，其中实施方案33和/或34步骤a)中螨体级分或步骤b)中组合的螨体级分包含最高20%v/v的螨部分（例如，腿）、粪粒和螨培养基。

实施方案52.根据实施方案50的方法，其中实施方案36和/或37的步骤a)中螨粪粒级分或步骤b)中组合的粪粒级分包含最高20%v/v的螨部分（例如，腿）和螨培养基。

实施方案53.根据实施方案33－52任一项的方法，其中通过筛分Derp和/或Derf螨培养物从螨培养物分离实施方案33和/或34的螨体的级分和实施方案36和/或37的步骤a)中螨粪粒的级分，以产生螨体级分b)和螨粪粒级分d)。

实施方案54.根据实施方案33－53任一项的方法，其中通过筛分Derp和/或Derf螨培养物来获得螨体的级分和螨粪粒的级分，以产生4个级分：

a.大中颗粒>350μm

b．螨体级分350-90μm

c．粪聚集体和螨部分90-50μm

d．粪粒<50μm

e．弃去级分a)和c)，任选地对级分d)和b)进行进一步纯化或直接用于提取。

实施方案55.根据实施方案54的方法，其中螨体级分b)：

ii)在第一液体培养基中进行密度离心，所述第一液体培养基具有比螨体高的密度而比培养基低的密度；然后

iii)从所述第一液体培养基收集螨体并重复步骤ii)和iii)，直至达到所需的螨体纯度；任选地接着

iv)以第二液体洗涤螨体，除去所述第一液体。

实施方案56.一种分离和纯化螨体的方法，所述方法包括步骤：

i)从Derp或Derf螨培养物分离螨体级分；和

ii)在第一液体培养基中对一个或多个Derp螨体级分或者一个或多个Derf螨体级分进行密度离心，所述第一液体培养基具有比螨体高的密度而比培养基颗粒低的密度；和

iv)以第二液体洗涤螨体，除去所述第一液体。

实施方案57.根据实施方案55－56任一项的方法，其中所述第一和第二液体为无水的，优选药学可接受的液体。

实施方案58.根据实施方案55－57任一项的方法，其中所述第一液体为无水甘油。

实施方案59.根据实施方案55－58任一项的方法，其中所述第二液体为无水乙醇。

实施方案60.根据实施方案55－59任一项的方法，其中重复步骤ii)和iii)一次。

实施方案61.根据实施方案55－60任一项的方法，其中重复步骤ii)和iii)，直至获得的螨体级分包含至少70%v/v的螨体、更优选75%v/v以上的螨体、更优选80%v/v以上的螨体、优选85%v/v以上的螨体、优选90%v/v以上的螨体、优选95%v/v以上的螨体、最优选98%v/v以上的螨体。

实施方案62.实施方案55－61的方法，其中继续螨体级分的纯化，直至螨体级分含有低于10%v/v的培养基颗粒。

实施方案63.实施方案62的方法，其中继续螨体级分的纯化，直至存在低于20%v/v的螨部分、粪粒和螨培养基。

实施方案64.实施方案33－63任一项的方法，其中实施方案33－34和36－37任一项的步骤a)中Derf螨体的级分、Derp螨体的级分、Derp粪粒的级分和/或Derf粪粒的级分通过筛分方法进行分离，所述方法包括：

2)在具备水平和环式运动并带有200、300和/或400μm目筛的塔的筛式振荡器中筛分螨体富集级分（150μm－300μm），分离由200、300和/或400μm目筛捕获的体级分，然后

3)在具有3D投掷运动和300、200、150和100目筛的筛式振荡器中筛分体富集级分，以产生150μm－300μm目的螨体级分和低于100μm的螨粪粒提取物；以及

4)任选地，组合来自振动型筛的低于80μm的粪粒级分和来自具有3D投掷运动的筛的低于100μm的粪粒级分，并对组合的粪级分在筛中进行筛分，所述筛具有3D投掷运动和100、80、50μm目筛的塔，并分离低于50μm的粪粒富集级分。

实施方案65.根据实施方案33－64任一项的方法，其中获得的提取物或提取物的混合物配制于药品中，例如，包含提取物或由提取物制备的类过敏原的压缩型或非压缩型舌下片剂，包含提取物或由提取物制备的类过敏原的液态舌下产品，或包含提取物或由提取物制备的类过敏原的用于注射的液态产品。

实施方案66.根据实施方案65的方法，其中所述药品为包含提取物的速溶舌下片剂。

实施方案67.根据实施方案33－67任一项定义的方法制备的药品。

实施方案68.根据实施方案67的药品，用于治疗和/或预防由房尘螨引起的过敏和过敏性哮喘。

实施方案69.一种在用于治疗和/或预防由房尘螨引起的过敏和过敏性哮喘的药物过敏原产品中使用的一系列过敏原提取物的过敏原提取物，各过敏原提取物包含至少一种螨体提取物和至少一种螨粪粒提取物，或者来自具有低于70%v/v螨体的螨体级分的螨体提取物或全螨培养物提取物，其中所述过敏原提取物具有预定比例的1型和2型过敏原，并且其中所述比例的方差系数对于系列提取物不超过25、20、15、10或7.5%。

实施方案70.一种在用于诊断由房尘螨引起的过敏的药物过敏原产品中使用的一系列过敏原提取物的过敏原提取物，各过敏原提取物包含至少一种螨体提取物和至少一种螨粪粒提取物，或者来自具有低于70%v/v螨体的螨体级分的螨体提取物或全螨培养物提取物，其中所述过敏原提取物具有预定比例的1型和2型过敏原，并且其中所述比例的方差系数对于系列提取物不超过25、20、15、10或7.5%。

实施方案71.根据实施方案69－70任一项的过敏原提取物，其中在螨体提取物中，以重量计1型过敏原的量低于以重量计2型过敏原的量，在螨粪粒提取物中，以重量计1型过敏原的量高于以重量计2型过敏原的量。

实施方案72.根据实施方案69－71任一项的过敏原提取物，其中所述过敏原提取物如实施方案1－32任一项中定义。

实施方案73.根据实施方案69－71任一项的过敏原提取物，其中所述过敏原提取物如实施方案33－66任一项中定义进行制备。

根据本发明的进一步的实施方案：

实施方案1.一种用于治疗和/或预防房尘螨引起的过敏或过敏性哮喘的包含过敏原提取物(I)或其类过敏原的药品，其包含选自以下组a)-d)的至少一种螨体的提取物和任选地至少一种螨粪粒的提取物：

a)Derp螨体的提取物，

b)Derp粪粒的提取物，

c)Derf螨体的提取物，和

d)Derf粪粒的提取物。

实施方案2.一种用于治疗和/或预防房尘螨引起的过敏或过敏性哮喘的包含过敏原提取物(I)的药品，其包含选自Derf1、Derf2、Derp1和Derp2的过敏原，且在所述过敏原提取物(I)中以最低浓度（w/v）存在的过敏原以如下浓度存在：所述浓度高于以最高浓度（w/v）存在的选自Derf1、Derf2、Derp1和Derp2的过敏原的浓度的50％，更优选所述浓度高于以最高浓度（w/v）存在的选自Derf1、Derf2、Derp1和Derp2的过敏原的浓度的60％，更优选所述浓度高于以最高浓度（w/v）存在的选自Derf1、Derf2、Derp1和Derp2的过敏原的浓度的70％，更优选所述浓度高于以最高浓度（w/v）存在的选自Derf1、Derf2、Derp1和Derp2的过敏原的浓度的80％，更优选所述浓度高于以最高浓度（w/v）存在的选自Derf1、Derf2、Derp1和Derp2的过敏原的浓度的85％，更优选所述浓度高于以最高浓度（w/v）存在的选自Derf1、Derf2、Derp1和Derp2的过敏原的浓度的90％，更优选所述浓度高于以最高浓度（w/v）存在的选自Derf1、Derf2、Derp1和Derp2的过敏原的浓度的95％，更优选所述浓度高于以最高浓度（w/v）存在的选自Derf1、Derf2、Derp1和Derp2的过敏原的浓度的98％，或者最优选所述浓度高于以最高浓度（w/v）存在的选自Derf1、Derf2、Derp1和Derp2的过敏原的浓度的99％。

实施方案3.根据实施方案1－2任一项的药品，其包含至少一种螨体的提取物和至少一种螨粪粒的提取物。

实施方案4.根据实施方案3的药品，其包含Derp螨体的提取物、Derp粪粒的提取物、Derf螨体的提取物和Derf2粪粒的提取物。

实施方案5.根据实施方案1－2任一项的药品，其包含Derp螨体的提取物和Derp粪粒的提取物，没有Derf螨体的提取物且没有Derf粪粒的提取物。

实施方案6.根据实施方案1－2任一项的药品，其包含Derf螨体的提取物和Derf粪粒的提取物，没有Derp螨体的提取物且没有Derp粪粒的提取物。

实施方案7.根据实施方案1－2任一项的药品，其包含Derp螨体的提取物和Derf螨体的提取物，没有螨粪粒的提取物。

实施方案8.根据实施方案1－2任一项的药品，其包含Derp螨体的提取物，而没有Derf螨体的提取物且没有螨粪粒的提取物。

实施方案9.根据实施方案1－2任一项的药品，其包含Derf螨体的提取物，没有Derp螨体的提取物且没有螨粪粒的提取物。

实施方案10.根据实施方案1－9任一项的药品，其中

Derp螨体的提取物自一个Derp螨体级分或组合的Derp螨体级分制备，其中螨体的所述级分的提取产生包含在重量上等量的1型和2型过敏原或在重量上比1型过敏原更多的2型过敏原的提取物，和/或

Derf螨体的提取物自一个Derf螨体级分或组合的Derf螨体级分制备，其中螨体的所述级分的提取产生包含在重量上等量的1型和2型过敏原或在重量上比1型过敏原更多的2型过敏原的提取物。

实施方案11.根据实施方案1－10任一项的药品，其中

Derp螨体的提取物从螨培养物的一个级分或组合的级分制备，所述级分包含70%v/v以上的Derp螨体、更优选75%v/v以上的Derp螨体、更优选80%v/v以上的Derp螨体、优选85%v/v以上的Derp螨体、优选90%v/v以上的Derp螨体、优选95%v/v以上的Derp螨体、最优选98%v/v以上的Derp螨体，

Derf螨体的提取物从螨培养物的一个级分或组合的级分制备，所述级分包含70%v/v以上的Derf螨体、优选75%v/v以上的Derf螨体、优选80%v/v以上的Derf螨体、优选85%v/v以上的Derf螨体、优选90%v/v以上的Derf螨体、更优选95%v/v以上的Derf螨体、优选98%v/v以上的Derf螨体，

Derf粪粒的提取物从螨培养物的一个级分或组合的级分制备，所述级分包含70%v/v以上的Derf粪粒、优选75%v/v以上的Derf粪粒、优选80%v/v以上的Derf粪粒、优选85%v/v以上的Derf粪粒、优选90%v/v以上的Derf粪粒、优选95%v/v以上的Derf粪粒、更优选98%v/v以上的Derf粪粒。

实施方案12.根据实施方案11的药品，其中所述螨体级分或组合的螨体级分和/或其中螨粪粒的级分或组合的级分包含低于10%v/v的螨培养基。

实施方案13.根据实施方案12的药品，其中所述螨体级分或组合的螨体级分包含最高20%v/v的螨部分（例如，腿）、粪粒和螨培养基。

实施方案14.根据实施方案12的药品，其中所述螨粪粒级分或组合的粪粒级分包含最高20%v/v的螨部分（例如，腿）和螨培养基。

实施方案15.根据实施方案1－14任一项的药品，其中在螨体提取物中，以重量计1型过敏原的量低于以重量计2型过敏原的量，在螨粪粒提取物中，以重量计1型过敏原的量高于以重量计2型过敏原的量。

实施方案16.用于治疗和/或预防房尘螨引起的过敏或过敏性哮喘的包含过敏原提取物(I)的根据实施方案1、3－15任一项的药品，其包含选自Derf1、Derf2、Derp1和Derp2的过敏原，且在所述过敏原提取物(I)中以最低浓度（w/v）存在的过敏原以如下浓度存在：所述浓度高于以最高浓度（w/v）存在的选自Derf1、Derf2、Derp1和Derp2的过敏原的浓度的50％，更优选所述浓度高于以最高浓度（w/v）存在的选自Derf1、Derf2、Derp1和Derp2的过敏原的浓度的60％，更优选所述浓度高于以最高浓度（w/v）存在的选自Derf1、Derf2、Derp1和Derp2的过敏原的浓度的70％，更优选所述浓度高于以最高浓度（w/v）存在的选自Derf1、Derf2、Derp1和Derp2的过敏原的浓度的80％，更优选所述浓度高于以最高浓度（w/v）存在的选自Derf1、Derf2、Derp1和Derp2的过敏原的浓度的85％，更优选所述浓度高于以最高浓度（w/v）存在的选自Derf1、Derf2、Derp1和Derp2的过敏原的浓度的90％，更优选所述浓度高于以最高浓度（w/v）存在的选自Derf1、Derf2、Derp1和Derp2的过敏原的浓度的95％，更优选所述浓度高于以最高浓度（w/v）存在的选自Derf1、Derf2、Derp1和Derp2的过敏原的浓度的98％，或者最优选所述浓度高于以最高浓度（w/v）存在的选自Derf1、Derf2、Derp1和Derp2的过敏原的浓度的99％。

实施方案17.根据实施方案1－16任一项的药品，其中所述药品为包含固态的提取物(I)或由提取物(I)制备的类过敏原的压缩型或非压缩型舌下片剂，包含提取物(I)或由提取物(I)制备的类过敏原的液态舌下产品或用于注射的液态产品，优选所述药品为包含固态的提取物(I)的速溶舌下片剂。

实施方案18.一种制备用于实施方案1－10和15－16任一项的药品的螨过敏原提取物(I)或其类过敏原的方法，所述过敏原提取物(I)具有以重量计预定且受控量的选自Derf1、Derf2、Derp1和Derp2过敏原的过敏原，所述方法包括以下步骤：

e)混合如上所述步骤c)中获得的一种或多种螨体的提取物和一种或多种粪粒的提取物，以获得以重量计具有预定量的1型至2型过敏原的过敏原提取物(I)的混合物，以及任选地

f)将所述提取物(I)转化为其类过敏原。

实施方案19.根据实施方案18的方法，其中混合螨体的一个或多个提取物和螨粪粒的一个或多个提取物，以得到过敏原提取物(I)的混合物。

实施方案20.根据实施方案18－19的方法，其中所述螨过敏原提取物(I)的混合物包含Derp螨体的提取物、Derp粪粒的提取物、Derf螨体的提取物和Derf2粪粒的提取物。

实施方案21.根据实施方案18－20任一项的方法，其中多于一个级分的螨体根据步骤b)进行组合，然后根据步骤c)进行提取。

实施方案22.根据实施方案18－21任一项的方法，其中粪粒的多于一个级分可以根据步骤b)进行组合，然后根据步骤c)进行提取。

实施方案23.根据实施方案18－22任一项的方法，其中步骤c)获得的一个或多个螨体提取物可以在步骤e)中与步骤c)中获得的一个或多个螨粪粒提取物进行混合。

实施方案24.根据实施方案18－23任一项的方法，其中步骤c)获得的一个或多个螨体提取物可以在步骤e)中与步骤c)中获得的一个螨粪粒提取物进行混合。

实施方案25.根据实施方案18－24任一项的方法，其中步骤c)获得的一个螨体提取物在步骤e)中与步骤c)中获得的一个或多个螨粪粒提取物进行混合。

实施方案26.根据实施方案18－25任一项的方法，其中所述螨体提取物补充有粪粒提取物，以重量计所述粪粒提取物的量足以达到螨过敏原提取物(I)的混合物中所需的1型过敏原与2型过敏原的重量比。

实施方案27.根据实施方案14－26任一项的方法，其中

步骤c)中Derp螨体的提取物从螨培养物的一个级分或组合的级分制备，所述级分包含70%v/v以上的Derp螨体、更优选75%v/v以上的Derp螨体、更优选80%v/v以上的Derp螨体、优选85%v/v以上的Derp螨体、优选90%v/v以上的Derp螨体、优选95%v/v以上的Derp螨体、最优选98%v/v以上的Derp螨体，

步骤c)中Derf螨体的提取物从螨培养物的一个级分或组合的级分制备，所述级分包含70%v/v以上的Derf螨体、优选75%v/v以上的Derf螨体、优选80%v/v以上的Derf螨体、优选85%v/v以上的Derf螨体、优选90%v/v以上的Derf螨体、更优选95%v/v以上的Derf螨体、优选98%v/v以上的Derf螨体，

步骤c)中Derp粪粒的提取物从螨培养物的一个级分或组合的级分制备，所述级分包含70%v/v以上的Derp粪粒、优选75%v/v以上的Derp粪粒、优选80%v/v以上的Derp粪粒、优选85%v/v以上的Derp粪粒、优选90%v/v以上的Derp粪粒、更优选95%v/v以上的Derp粪粒、最优选98%v/v以上的Derp粪粒，和/或

步骤c)中Derf粪粒的提取物从螨培养物的一个级分或组合的级分制备，其中所述级分包含70%v/v以上的Derf粪粒、优选75%v/v以上的Derf粪粒、优选80%v/v以上的Derf粪粒、优选85%v/v以上的Derf粪粒、优选90%v/v以上的Derf粪粒、优选95%v/v以上的Derf粪粒、更优选98%v/v以上的Derf粪粒。

实施方案28.根据实施方案27的方法，其中步骤a)中螨体的级分或步骤b)中组合的螨体的级分和/或其中步骤a)中粪粒的级分或步骤b)中组合的螨粪粒的级分各包含低于10%v/v的螨培养基。

实施方案29.根据实施方案28的方法，其中步骤a)中螨体级分或步骤b)中组合的体级分包含最高20%v/v的螨部分（例如，腿）、粪粒和螨培养基。

实施方案30.根据实施方案29的方法，其中步骤a)中螨粪粒级分或步骤b)中组合的粪粒级分包含最高20％v/v的螨部分(例如，腿)和螨培养基。

实施方案31.根据实施方案18－30任一项的方法，其中通过筛分Derp和/或Derf螨培养物来分离实施方案18步骤a)中螨体的级分和螨粪粒的级分，以产生螨体级分b)和螨粪粒级分b)。

实施方案32.根据实施方案31的方法，其中通过筛分Derp和/或Derf螨培养物来获得螨体的级分和螨粪粒的级分，以产生4个级分：

a.大中颗粒>350μm

b.螨体级分350-90μm

c.制备的粪聚集体和螨部分90-50μm

d.粪粒<50μm

弃去级分a)和c)，直接使用级分d)用于提取，而级分b)进行进一步纯化。

实施方案33.一种分离和纯化螨体的方法，所述方法包括步骤：

i)从Derp或Derf螨培养物分离螨体级分；和

ii)在第一液体培养基中对一个或多个Derp螨体级分或者一个或多个Derf螨体级分进行密度离心，所述第一液体培养基具有iia)比螨体高的密度而比培养基颗粒低的密度和iib)不从所述螨体提取1型和2型过敏原；和

iv)采用第二液体洗涤螨体，以除去所述第一液体，所述第二液体不从所述螨体提取1型和2型过敏原。

实施方案34.根据实施方案31－32任一项的方法，其中螨体级分b)：

ii)在第一液体培养基中进行密度离心，所述第一液体培养基具有iia)比螨体高的密度而比培养基颗粒低的密度和iib)不从所述螨体提取1型和2型过敏原；然后

实施方案35.根据实施方案33或34任一项的方法，其中所述第一和第二液体为无水的，优选药学可接受的液体。

实施方案36.根据实施方案35的方法，其中所述第一液体为无水甘油。

实施方案37.根据实施方案36的方法，其中所述第二液体为无水乙醇。

实施方案38.根据实施方案33－37任一项的方法，其中重复步骤ii)和iii)一次。

实施方案39.实施方案33－37任一项的方法，其中重复步骤ii)和iii)，直至获得的螨体级分包含至少70%v/v的螨体、更优选75%v/v以上的螨体、更优选80%v/v以上的螨体、优选85%v/v以上的螨体、优选90%v/v以上的螨体、优选95%v/v以上的螨体、最优选98%v/v以上的螨体。

实施方案40.实施方案31－33和38－39的方法，其中继续螨体级分的纯化，直至螨体级分含有低于10%v/v的培养基颗粒。

实施方案41.实施方案40的方法，其中继续螨体级分的纯化，直至存在低于20%v/v的螨部分、粪粒和螨培养基。

实施方案42.一种螨体级分，其包含70%v/v以上的螨体、更优选75%v/v以上的螨体、更优选80%v/v以上的螨体、优选85%v/v以上的螨体、优选90%v/v以上的螨体、优选95%v/v以上的螨体、最优选98%v/v以上的螨体。

实施方案43.根据实施方案42的螨体级分，其含有低于10%v/v的培养基颗粒。

实施方案44.根据实施方案43的螨体级分，其含有低于20%v/v的螨部分、粪粒和螨培养基。

实施方案45.实施方案18－30任一项的方法，其中步骤18a)中Derf螨体的级分、Derp螨体的级分、Derp粪粒的级分和/或Derf粪粒的级分通过筛分方法进行分离，所述方法包括：

4)任选地，组合来自振动型筛的低于80μm的粪粒级分和来自具有3D投掷运动的筛的低于100μm的粪粒级分，并对组合的粪级分在具有3D投掷运动和100、80、50μm目筛的塔的筛中进行筛分，并分离低于50μm的粪粒富集级分。

实施方案46.根据实施方案18－41、45任一项的方法，其中获得的提取物(I)的混合物配制为：包含固态的提取物(I)或由提取物(I)制备的类过敏原的压缩型或非压缩型舌下片剂，包含提取物(I)或由提取物(I)制备的类过敏原的液态舌下产品或用于注射的液态产品，优选所述药品为包含固态的提取物(I)的速溶舌下片剂。

实验部分

实施例1：

1.0螨的培养

在含培养基颗粒的适宜的培养基上分开培养Derp和Derf螨，所述颗粒具有足够的粒度和完整性，以经受下游处理的强力并可以通过初步筛选过程容易地除去。所述螨培养基适宜地含有蛋白质源、碳水化合物、矿物质、油、维生素和防腐剂。

当达到最佳生长时，通过于-20℃±5℃冷冻杀灭螨。

1.1螨体和螨粪粒的纯化

干燥螨培养物(Derp或Derf)，至湿度低于15%，筛分产生4个级分：

a)大中颗粒>350μm

b)螨体级分350-90μm

c)粪聚集体和螨部分90-50μm

d)粪粒<50μm

使用自动化筛分单元来筛分干燥的螨培养物。筛分器使用设定的角度和速度的旋转，以获得级分。在筛分过程中，可以双盲地（de-blind）产生上述级分1、2和3的筛选。在所述筛分单元的底盘中收集细小颗粒（级分4）。

弃去级分1中的大中颗粒和级分3中的粪聚集体和螨部分。

测试级分4中粪粒的质量（以确保该级分主要含有粪粒并满足释放规格），并决定所述级分是否适于提取Derp或Derf过敏原。

通过样品的显微术观察测量总螨体、螨体部分、粪粒、螨培养基和污染物的v/v%，见第13-14页。

可以在提取前合并数个螨粪级分。

1.2使用甘油通过离心纯化螨体级分2

在（BeckmanJ6MI离心机）中进行级分2的离心。

将不超过900克的级分2缓慢加入USP无水甘油（99.0-101.0%纯），无水甘油的量为级分2重量的5倍。

将与无水甘油混合的螨培养物倾注到离心杯中，使所有杯含有相同的体积。将杯置于转子中，并于-5℃以3000rpm离心所述杯7分钟。从无水甘油的表面移去形成的螨体饼(plug)，并称重。将螨体与无水甘油混合，所述无水甘油的量为螨体级分的重量的3倍。

小心地从无水甘油的表面移去形成的螨体饼(plug)，并称重。将螨体的重量乘以2.5，来确定形成浆所需的无水乙醇的以重量计的最小量。在装有低剪切刃的混合容器中将螨体和乙醇浆混合5分钟。将所述浆倾注在带有收集盘的两个106微米筛上。

从所述筛刮取螨体，并记录螨的重量。以乙醇重复最后的纯化步骤1次以上，并使用真空干燥螨体，或使螨体在通风橱中于所述106微米筛上干燥。

通过样品的显微术观察测量全螨体、螨体部分、粪粒、螨培养基和污染物的v/v%，参见第13－14页。达到的螨体级分一般包含98-99v/v%的全螨体。

可以混合来自于不同螨培养物的螨体级分。

1.3用饱和NaCl通过离心纯化螨体级分2

将螨体级分2与饱和NaCl（量为级分2重量的5倍）混合成浆。所述浆于3.000RPM离心7分钟（15℃，Sorvall离心机中）。小心地从表面除去螨体饼(plug)，重悬于量为所述重量5倍的NaCl中，重复离心。通过样品的显微术测量全螨体、螨体部分、粪粒、螨培养基和污染物的v/v%，参见第13－14页。

达到的螨体级分一般包含98-99v/v%的全螨体。

表1b:

#1和2为饱和盐水1离心（spin），#3和4为饱和盐水2离心（spin）

表1b

实施例2

2.0纯化螨体和螨粪粒

将冷冻培养物置于纯化室内的托盘上。确保所述培养物在托盘上以均匀层铺开，并使培养物解冻，于环境条件干燥4－14日。

然后流化所述培养物以使其干燥，并将其分为2级分，参见图1。在一侧连接真空泵而在另一侧连接空气入口，施加气流。

图1中的玻璃容器自左至右命名为：“A”，全螨培养物；“B”，富含体颗粒；和“C”，粪粒。

分离两个级分(B)和(C)，并进行筛分。

2.1螨体的纯化

2.1.1大筛

将级分B加入连续装料工业振动式FiltraFT500筛式振荡器。筛具有3种目的塔：300、150和80μm，于1500rpm工作。

大于300μm的物质主要是食物颗粒，被弃去。

小于80μm的物质以小筛进一步纯化，以分离粪级分。

小于300μm而大于150μm的物质分离为体富集级分，并在以下的中筛中进行筛分。

2.1.2中筛

螨的形状不规则，在一个维度上可达400μm，然而在干燥形式通常更小。螨具有腿和毛，当在筛分过程中使用水平环式运动时，水平导向螨体，强制形成绞缠。仅有少量未形成绞缠级分的未被导向的颗粒或较小的颗粒进入筛，筛没有如此快地被堵塞。

所用的筛为具有400、300和200μm目的塔的RetschAS400筛式振荡器。使用水平环式筛分模式，筛分过程利用粒度大于200、300和/或400μm的螨绞缠的形成。

将来自大筛的物质分为150－200g的级分，并加入第二筛（中筛）。

筛于210－240rpm的速度下运作，每个批次筛分1－2分钟。

大于200和300μm的级分再处理2－6次。

通过对所述级分的显微镜检来确定在200、300和/或400μm目筛上捕获的螨体的含量，分离螨体级分，进一步进行如下所述的筛分。

2.1.3小筛

然后对从中筛回收的体富集级分在使用3-D投掷运动的小筛（RetschAS200）中进行筛分。加载到所述筛中的体富集级分的平均值为60g，使用300、200、150和100目的塔。

速度设置为240－260rpm，振幅设为30秒，各加载筛分5－15分钟。各加载再处理1-6次。

过程控制：在筛分过程中，使用显微镜检测所述级分的筛分过程纯度。

低于100μm的级分分离为粪粒级分，其如下所述进行纯化。

将大于100μm和150μm的级分分离为螨体级分。

2.2粪级分的纯化

组合在先前步骤中获得的粪富集级分（预处理步骤的级分C，大筛式振荡器的<80μm级分和小筛式振荡器的<100μm级分）。

使用具有100、80和50μm目的塔的小筛式振荡器（RetschAS200），操作条件与如上对于该筛所描述的条件相同。

低于50μm的级分分离为粪级分。

过程控制：在筛分过程中，使用显微镜估计所述级分的纯度级别。

实施例3

3.0提取螨体

使用高剪切力搅拌器悬浮螨体（20分钟）。在8℃的温度在含有0.012MNaHCO₃、0.154MNaCl、pH7.5的缓冲液中提取3小时。待缓冲的螨体为1+10(w/w)。

3.0.1分离

通过离心从提取物溶液分离剩余的不溶原料。

离心后，从固体级分倾析所得的离心物，通过过滤器澄清至滤液。过滤过敏原提取物后，用提取缓冲液洗涤过滤器，并富集以提高收率。

3.0.2超滤

以三个步骤进行超滤：浓缩步骤、渗滤步骤和干物质调节步骤。第一，通过切向流过滤除去水和其它小分子来浓缩滤液。第二，通过纯净水渗滤从过敏原提取物除去小分子和盐。第三，通过进一步浓缩或添加纯净水调节过敏原提取物的干物质(DM)浓度。在超滤过程中，监控温度和跨膜压(TMP)，并保持在可接受标准内。

过程控制：

温度：3-15℃

跨膜压：≤3巴

DM浓度：40-60mg/ml

3.0.3澄清过滤

通过0.2μm过滤器澄清过敏原提取物溶液。

3.0.4稳定化

过滤后，将提取物作为自由落体小滴分配到填充液氮的容器中，其中所述小滴立即冷冻。然后使液氮挥发。在稳定化过程中，将填料流（产物流）控制在可接受标准内。

过程控制：产物流：8-12ml/分/分配孔

3.1粪粒

使用高剪切力搅拌器悬浮螨粪粒（20分钟）。在8℃的温度在含有0.012MNaHCO₃、0.154MNaCl、pH7.5的缓冲液中提取1小时。待缓冲的螨体率为1+10(w/w)。

3.1.1分离

提取后，通过渗滤步骤从过敏原溶液分离不溶性原料。使用振动式膜过滤系统（TFF技术）进行渗滤。过敏原提取物作为渗透物通过膜，而不溶原料被膜滞留。在渗滤过程中，以相同速率向再循环提取物溶液连续添加预定体积的纯净水，同时从膜的另一侧收集过敏原提取物（渗透物）。

过程控制：

渗透物流：18－22升/m2/小时

温度：4－12℃

3.1.2超滤

以三个步骤进行超滤：浓缩步骤、渗滤步骤和干物质调节步骤。第一，通过切向流过滤除去水和其它小分子来浓缩滤液。第二，通过纯净水渗滤从过敏原提取物除去小分子和盐。第三，通过进一步浓缩或添加纯净水调节过敏原提取物的干物质(DM)浓度。在超滤过程中，监控温度和跨膜压(TMP)作为过程控制，并保持在可接受标准内。

过程控制：

温度：3-15℃

跨膜压：3巴

DM浓度：40-60mg/ml

3.1.3澄清过滤

通过0.2μm过滤器澄清过敏原性溶液。

3.1.4稳定化

过滤后，将过敏原提取物作为自由落体小滴分配到填充液氮的容器中，其中所述小滴立即冷冻。然后使液氮挥发。在稳定化过程中，将填料流（产物流）控制在可接受标准内。

过程控制：

产物流：8-12ml/分钟/分配孔

实施例4

通过MS（质谱）测量1型和2型过敏原的含量，如WO2007/031080所述，使用如下校准标准肽：

TNACSINGNAPAEIDLR(Derp1)SEQIDNO:1,

NSWDTTWGDSGYGYFQAGNNLMMIEQYPYVVIM(Derf1)SEQIDNO:2,

VLVPGCHGSEPCIIHR(Derp2)SEQIDNO:3,

GKPFTLEALFDANQNTK(Derf2)SEQIDNO:4,和

GIEYIQQNGVVEER(Derf1)SEQIDNO:5

实施例5

5.0混合提取物

将螨体提取物的冷冻球加入粪粒提取物的冷冻球，以达到1型和2型过敏原的所需比例。

确定使用冷冻球的哪些批次以及使用冷冻球的数量为迭代过程。

通过计算以重量计1型过敏原的量来产生具有所述比例的混合物，所述混合物将来自于混合来自至少一个批次的螨体提取物和至少一个批次的螨粪粒的许多球。以重量计1型过敏原的量计算为：以重量计任一批次的量×所述批次中1型过敏原的浓度。来自混合相同批次的2型过敏原的以重量计的量以同样的方式进行计算。

按照27页所述的计算添加或除去更多的批次或批次的部分，直至达到所需的比例。

实例：

表2

来自每个批次的提取物的量计算为140克mf1和966克mb1

主要过敏原比例=1=总的1型/总的2型=mf1xCf1grp1+mb1xCb1grp1/mf1xCf1grp2+mb1xCb1grp2=2393·140+991·966/792·140+1223·966=1

其后，解冻所需的冷冻球并混合，任选地再次冷冻为球。可以在配制过程中使用解冻的混合物。

实施例6

如实施例5所述测定1型和2型过敏原。

批次	FAR1	FAR2	FAR3	FAR4	FAR5	FAR5	FAR6	FAR7	CV(%)*
										比例(Der 1/Der 2)	0,96	0.97	1.00	0.95	0.89	0.88	0.95	0.95	6

批次	PTE1	PTE2	PTE3	PTE4	PTE5	PTE6	PTE7	PTE7	CV(%)*
										比例(Der 1/Der 2)	1.04	1.17	0.94	1.01	1.00	1.03	1.10	1.01	6.5

*CV=相对标准差(SD/平均值),95%CI

实施例7

6.1制备含有提取物的速溶药物组合物

在冻干过程中升华水前房尘螨片剂的组成：

表3

制备片剂：

混合明胶、甘露醇和纯净水，将所得的预混合液加热至合适的温度。冷却后，使用氢氧化钠溶液（~6%w/w）调节溶液的pH。向预混合液加入作为冰冻小滴的药物物质。如果必要，检测并调节混合物的pH。使用所述制备式计算完成配方所需的额外量的纯净水，并转移至混合物溶液。将所述溶液配量至预形成的泡状托盘。定量（dosing）后，将填充的泡状包装通过液氮冷冻通道。立即将所有冷冻产品置于冰箱橱内，用于冻干前的冷冻存储。冻干单元并在受控的湿度环境内储存于干燥储藏柜，直至密封。然后用箔密封冻干单元。

Claims

1.一种制备用于药品的螨过敏原提取物(I)或其类过敏原的方法，所述药品包含过敏原提取物(I)或其类过敏原，所述过敏原提取物(I)或其类过敏原包含选自以下组a)-d)的至少一种螨体提取物和至少一种螨粪粒提取物：

a)Derp螨体的提取物，

b)Derf螨体的提取物，

c)Derp粪粒的提取物，

d)Derf粪粒的提取物，

具有以重量计预定且受控量的选自Derf1、Derf2、Derp1和Derp2过敏原的过敏原，所述方法包括以下步骤：

c)从如上所述的步骤a)或步骤b)中获得的螨体级分提取过敏原和/或从如上所述步骤a)或步骤b)中获得的螨粪粒级分提取过敏原；以及其后

e)混合如上所述步骤c)中获得的一种或多种螨体提取物和一种或多种粪粒提取物，以获得按重量计具有预定量的1型至2型过敏原的过敏原提取物(I)的混合物，以及任选地

f)将所述提取物(I)转化为其类过敏原，

其中步骤c)中的Derp螨体的提取物制备自螨培养物的一个级分或组合的级分，所述级分包含70％v/v以上的Derp螨体，

步骤c)中的Derf螨体的提取物制备自螨培养物的一个级分或组合的级分，所述级分包含70％v/v以上的Derf螨体，

步骤c)中的Derp粪粒的提取物制备自螨培养物的一个级分或组合的级分，所述级分包含70％v/v以上的Derp粪粒，和/或

步骤c)中的Derf粪粒的提取物制备自螨培养物的一个级分或组合的级分，所述级分包含70％v/v以上的Derf粪粒。

2.根据权利要求1的方法，其中混合一个或多个螨体提取物和一个或多个螨粪粒提取物，以得到过敏原提取物(I)的混合物。

3.根据权利要求1－2任一项的方法，其中步骤c)中的Derp螨体的提取物从螨培养物的一个级分或组合的级分制备，所述级分包含70％v/v以上的Derp螨体，

步骤c)中的Derf螨体的提取物从螨培养物的一个级分或组合的级分制备，所述级分包含70％v/v以上的Derf螨体，

步骤c)中的Derp粪粒的提取物从螨培养物的一个级分或组合的级分制备，所述级分包含70％v/v以上的Derp粪粒，和

步骤c)中的Derf粪粒的提取物从螨培养物的一个级分或组合的级分制备，所述级分包含70％v/v以上的Derf粪粒。

4.根据权利要求1的方法，其中步骤a)中螨体的级分或步骤b)中组合的螨体级分和/或其中步骤a)中粪粒的级分或步骤b)中组合的螨粪粒级分各自包含低于10％v/v的螨培养基。

5.根据权利要求1的方法，其中步骤a)中螨体级分或步骤b)中组合的螨体级分包含最高20％v/v的螨部分、粪粒和螨培养基。

6.根据权利要求1的方法，其中步骤a)中螨粪级分或步骤b)中组合的粪级分包含最高20％v/v的螨部分和螨培养基。

7.根据权利要求1的方法，其中通过筛分Derp和/或Derf螨培养物从螨培养物分离权利要求1的步骤a)中螨体的级分和螨粪粒的级分，以产生步骤b)中的螨体级分和步骤b)中的螨粪粒级分。

8.根据权利要求1的方法，其中所述药物组合物具有1型与2型螨过敏原的重量比从1:0.6至1:1.6。

9.根据权利要求1的方法，其中权利要求1的步骤a)中螨体的级分或步骤b)中组合的螨体级分

i)在第一液体培养基中进行密度离心，所述第一液体培养基具有ia)比螨体高的密度而比培养基颗粒低的密度和ib)不从所述螨体提取1型和2型过敏原；然后

ii)从所述第一液体培养基的表面收集螨体并重复步骤i)和ii)，直至达到所需的螨体纯度；任选地接着

iii)采用第二液体洗涤螨体，以除去所述第一液体，所述第二液体不从所述螨体提取1型和2型过敏原。

10.根据权利要求9的方法，其中所述第一液体为无水甘油。

11.根据权利要求9的方法，其中所述第二液体为无水乙醇。

12.根据权利要求1的方法，其中所述螨过敏原提取物(I)的混合物包含Derp螨体的提取物、Derp粪粒的提取物、Derf螨体的提取物和Derf粪粒的提取物。

13.根据权利要求1的方法，其中所述获得的提取物(I)的混合物配制为包含固体形式的提取物(I)或自提取物(I)制备的类过敏原的压缩型或非压缩型舌下片剂、包含提取物(I)或自提取物(I)制备的类过敏原的液态舌下产品或用于注射的液态产品。

14.根据权利要求1的方法，其中所述药品为包含固体形式的提取物(I)的速溶舌下片剂。

15.根据权利要求1－14任一项定义的方法制备的药品。

16.根据权利要求15的药品，用于治疗和/或预防由房尘螨引起的过敏和过敏性哮喘。