CN103285022A - 用于制备治疗多囊卵巢综合征的中药单体组合物及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种用于制备治疗多囊卵巢综合征的中药单体组合物,其特征在于:所述的中药单体组合物包括质量百分比为2~4%的隐丹参酮、13~18%的黄芩苷、7~10%的槲皮素,65~80%的辅料,上述各成份的百分比之和为100%。体内实验表明,隐丹参酮、黄芩苷、槲皮素三种中药单体联合应用对多囊卵巢综合征大鼠模型具有明显的治疗作用,可显著改善其雄激素水平,促进卵泡成熟,诱导排卵。更重要的是,此三种中药单体均无肝、肾毒性,副作用小,具有无可比拟的安全性。因此,所述中药单体组合物可以用于制备治疗多囊卵巢综合征的药物,并且具有良好的前景。
Description
技术领域
本发明属制药领域,涉及一种用于制备治疗多囊卵巢综合征的中药单体组合物;此外,本发明还涉及该中药单体组合物的制备方法和医药用途。
背景技术
隐丹参酮(Cryptotanshinone),是从唇形科植物丹参干燥根及根茎中提取的一种脂溶性二萜类物质,其分子式为C19H20O3,分子量为:296.35,结构式为:
现代药理研究表明:隐丹参酮具有抑菌、抗氧化、抗衰老功能,对治疗冠心病、心绞痛、心肌损害有一定疗效。另有研究显示:隐丹参酮可抑制雄激素表达,可应用于治疗雄激素水平增高的相关性疾病。
黄芩苷(Baicalin)是从黄芩根中提取的一种黄酮类化合物,类属于葡萄糖醛酸苷类,是黄芩中含量最丰富的活性成分,也是黄芩中最具有药理活性的有效成分,其分子式为C21H18O11,分子量为446.35,结构式为:
现代药理研究表明,黄芩苷具有抑菌、抗炎、利尿、抑制钙离子内流、清除氧自由基等作用,并且具有较强的抗肿瘤效应,其临床主要应用于治疗传染性肝炎、急性胆道感染以及铅中毒等疾病。另有研究显示:黄芩苷可抑制人皮脂腺细胞内雄激素受体表达从而治疗痤疮。
槲皮素(Quercetin),又名栎精,槲皮黄素,可从多种植物中提取,如壳斗科植物伊比利亚栎皮和叶,小檗科植物红八角莲,金丝桃科植物红旱莲全草,蔷薇科植物山楂、山里红及野山楂的干燥成熟果实等。隶属于黄酮类物质,其分子式为C15H10O7,分子量为302.23,结构式为:
现代药理研究表明,槲皮素具有较好的祛痰、止咳、降血压、降血脂、增强毛细血管抵抗力等作用。临床主要用于治疗慢性支气管炎,对冠心病及高血压患者也有辅助治疗作用。近有研究显示槲皮素可以通过内分泌“去势”作用治疗前列腺癌。
多囊卵巢综合症(Polycystic Ovary Syndrome,PCOS)是以高雄激素血症(Hyperandrogenism HA)为主要特征的一种复杂的遗传异质性疾病。其临床表现多样,如月经不调、不孕、多毛、痤疮、黑棘皮症等,并可引起多种近远期并发症,如妊娠综合征(自然流产、妊娠高血压)、代谢综合征(肥胖、糖尿病)以及心血管疾病、肿瘤等。其发病率高达7-10%,而根据2003年鹿特丹会议制定的诊断标准,有更多的患者被纳入到PCOS的范畴当中,这就使得PCOS成为育龄期女性常见的一种内分泌、代谢紊乱性疾病。
目前,PCOS尚无理想的治疗方法。西医有卵巢楔形切除术、腹腔镜下卵巢穿刺术、药物促排卵以及药物抗雄激素等措施。手术创伤大且远期效果不理想,而药物治疗效果有限,对远期并发症的发生无积极的预防作用,且副作用大,不能长期服用,停药后复发率高。
因此,多囊卵巢综合征仍是当前妇科内分泌领域研究的热点和难点问题,积极探索有效的治疗方法及其作用机制具有十分重要的意义。
发明内容
本发明的目的是公开一种中药单体组合物(由隐丹参酮、黄芩苷、槲皮素组成)在制备治疗多囊卵巢综合征药物中的应用,以满足临床应用的需要,克服现有技术中多囊卵巢综合症尚无理想的治疗药物,药物毒副作用较大,无法长期使用,安全性较差的一些缺陷。
为了实现上述目的,本发明的技术方案是:一种用于制备治疗多囊卵巢综合征的中药单体组合物,其特征在于:所述的中药单体组合物包括质量百分比为2~4%的隐丹参酮、13~18%的黄芩苷、7~10%的槲皮素,65~80%的辅料,上述各成份的百分比之和为100%。
体内实验证明,隐丹参酮(27mg/kg)、黄芩苷(200mg/kg)、槲皮素(100mg/kg),三药联合应用,对多囊卵巢综合征大鼠模型具有明显的治疗作用,可显著降低其高雄激素水平,促进卵泡成熟,诱导排卵。更重要的是,三种中药单体副作用小,无肝、肾毒性,具有无可比拟的安全性。
因此,所述中药单体组合物可以用于制备治疗多囊卵巢综合征药物。
所述多囊卵巢综合征药物,包括治疗有效量的隐丹参酮、黄芩苷、槲皮素和药物学上可接受的载体,所述载体包括填充剂,如淀粉、微晶纤维素或糖粉、赋形剂,如甘露醇、乳糖或硫酸钙,崩解剂,如羧甲基淀粉钠、改良淀粉或低取代羟丙基纤维素;可采用本领域公知的方法,将所述药物组合物制备成为口服制剂,如片剂、硬胶囊、软胶囊、滴丸或颗粒剂等。
所述药物,可以通过口服途径施加于需要治疗的患者,剂量为2~4g/天·人(此剂量按不同种类动物等效用药量公式换算所得),具体可根据患者的病情、年龄等由医师决定。
本发明毒性较小,可以长期服用。
实验结果表明:隐丹参酮、黄芩苷、槲皮素三药联合应用可以逆转多囊卵巢综合征模型大鼠血清睾酮、促黄体生成素、促卵泡生成素的水平,从而改善其紊乱的性周期,对多囊卵巢综合征具有显著的治疗作用,且三种中药单体不具有肝肾毒性,具有无可比拟的安全性。
进一步研究结果显示:此三药单体组合物可明显下调雄激素合成通路中的CYP17、3β-HSD及AR基因表达,从而抑制雄激素的合成。
综上所述,隐丹参酮、黄芩苷、槲皮素三药联合应用可以通过调节雄激素合成代谢过程中相关基因的表达,抑制雄激素的合成,最终达到治疗多囊卵巢综合征的效果。因此可以得出:此三药组合物可以应用于制备治疗多囊卵巢综合征药物,并且具有良好的前景。
附图说明
图1示实施例1中药单体组合物对大鼠卵巢组织CYP17mRNA表达量影响的统计结果图:
图2示实施例1中药单体组合物对大鼠卵巢组织CYP19mRNA表达量影响的统计结果图:
图3示实施例1中药单体组合物对大鼠卵巢组织ARmRNA表达量影响的统计结果图:
图4示实施例1中药单体组合物对大鼠卵巢组织3β-HSDmRNA表达量影响的统计结果图:
具体实施方式
本发明所述的一种用于制备治疗多囊卵巢综合征的中药单体组合物,其与现有技术的区别在于:所述的中药单体组合物包括质量百分比为2~4%的隐丹参酮、13~18%的黄芩苷、7~10%的槲皮素,65~80%的辅料,上述各成份的百分比之和为100%。所述辅料为填充剂、粘合剂或崩解剂;所述的填充剂由重量百分比为75~82%的淀粉、15~23%的微晶纤维素(MCC)和1~3%硬脂酸镁混合而成,上述百分比之和为100%;所述的粘合剂由重量百分比为30~70%的乙醇、3~15%的聚维酮(PVP)和5~20%的羟丙基纤维素(HpC)混合而成,上述百分比之和为100%;所述的崩解剂由重量百分比为5~20%的改良淀粉、1~6%的羧甲基淀粉钠(CMS-Na)和2~5%的低取代羟丙基纤维素(L-HPC)混合而成,上述百分比之和为100%。
所述辅料为填充剂、粘合剂或崩解剂中的两种以上的混合物,其中填充剂占辅料重量百分比的50~70%,粘合剂占辅料重量百分比的的40~60%,崩解剂占辅料重量百分比的10~40%;所述的填充剂为淀粉、微晶纤维素(MCC)和硬脂酸镁混合而成;所述的粘合剂为乙醇、聚维酮(PVP)和羟丙基纤维素(HpC)混合而成;所述的崩解剂为改良淀粉、羧甲基淀粉钠(CMS-Na)和低取代羟丙基纤维素(L-HPC)混合而成。所述的填充剂由重量百分比为75~82%的淀粉、15~23%的微晶纤维素(MCC)和1~3%硬脂酸镁混合而成;所述的粘合剂由重量百分比为30~70%的乙醇、3~15%的聚维酮(PVP)和5~20%的羟丙基纤维素(HpC)混合而成;所述的崩解剂由重量百分比为5~20%的改良淀粉、1~6%的羧甲基淀粉钠(CMS-Na)和2~5%的低取代羟丙基纤维素(L-HPC)混合而成。
所述片剂制备方法如下:将中药单体复方2~4g、淀粉6~8g、微晶纤维素1~3g、硬脂酸镁0.1~0.3g置于饽荠形包衣机中,转动包衣机,喷加2~5g乙醇,继续转动15s~30min,制成湿颗粒后过10-40目筛,经20-80℃干燥后的颗粒经压片机压制成片型。所述的中药单体复方由隐丹参酮、黄芩苷和槲皮素混合而成,其中隐丹参酮0.2-0.4g、黄芩苷2-2.5g、槲皮素0.8-1.1g。
本发明所述的一种用于制备治疗多囊卵巢综合征的中药单体组合物的颗粒剂制备方法,其与现有技术的区别在于:所述颗粒剂制备方法如下:将中药单体复方2~4g、淀粉6~8g、羟丙基纤维素0.5~1.5g,羧甲基淀粉钠0.1~0.5g充分混匀,加入2~3g乙醇用混合机充分混合制成软材,将软材用机械挤压通过14~22目的筛网,制得湿颗粒,采用流式床干燥法加以干燥,除去水分,并采用过筛方法整粒和分级,过筛时先过12-14目筛网使大颗粒磨碎,再过60目筛网除去小颗粒和细粉,为达到稳定、控释或肠溶作用,可对颗粒剂进行包衣。所述的中药单体复方由隐丹参酮、黄芩苷和槲皮素混合而成,其中隐丹参酮0.2-0.4g、黄芩苷2-2.5g、槲皮素0.8-1.1g;流式床干燥法中干燥温度为60℃~80℃,干燥程度含水量小于等于2%。
本发明所述的一种用于制备治疗多囊卵巢综合征的中药单体组合物的滴丸剂制备方法,其与现有技术的在于:所述滴丸剂制备方法如下:将中药单体复方2~4g混匀,溶于硬脂酸甘油酯1~2g的基质内制成药液,将药液移入加料漏斗,保温80~90℃,选择乙醇2~5g做为冷凝液加入滴丸机的冷凝柱中,调节保温箱收集滴丸,清除附着的冷凝液,干燥、包装即得。所述的中药单体复方由隐丹参酮、黄芩苷和槲皮素混合而成,其中隐丹参酮0.2-0.4g、黄芩苷2-2.5g、槲皮素0.8-1.1g。
为进一步理解本发明,下面结合实施例对本发明进行详细说明。
实施例1
选用Wister大鼠制备多囊卵巢综合征动物模型,并对模型成功者进行药物干预。采用ELISA、RT-PCR等方法进行检测,采用统计软件SPSS16.0进行分析,以明确黄芩苷对多囊卵巢综合征动物模型的治疗作用及可能的作用机制。
1.材料
1.1实验动物
21日龄的SPF级雌性Wister大鼠190只,由上海斯莱克实验动物有限公司提供,饲养于第二军医大学海医系动物中心。25℃恒温(50%湿度)清洁级饲养,不加饲维生素制品,12h光照和12h黑暗周期性交替进行。
1.2主要试剂
脱氢表雄酮(DHEA)、芝麻油(sesame oil)、槲皮素(Quercetin)均购自Sigma公司,隐丹参酮(Cryptotanshinone)购自上海同田生物科技有限公司,黄芩苷(baicalin)购自日本TCI公司,螺内酯(Spironolactone)购自J&K公司,血清睾酮(T)、雌二醇(E2)、促卵泡生长激素(FSH)及促黄体生成激素(LH)酶联免疫ELISA检测试剂盒购自美国Novertaine公司。
1.3实验方法
1.3.1多囊卵巢综合征高雄激素血症动物模型的建立
21日龄Wister大鼠适应性喂养2天,于23日龄开始,对模型组大鼠每日颈背部皮下注射DHEA0.6mg/100g+0.2ml注射用芝麻油,连续注射20天后行阴道脱落细胞学检查10天,阴道上皮细胞持续呈角化状态的大鼠作为DHEA诱导的大鼠多囊卵巢综合征动物模型,进入后续实验,不典型者弃去不用。
1.3.2对实验组大鼠分组并进行药物干预:
正常组:灌胃,生理盐水——10ml/kg
模型组:灌胃,生理盐水——10ml/kg
中药组:灌胃,隐丹参酮(27mg/kg)、黄芩苷(200mg/kg)、槲
皮素(100mg/kg)+生理盐水——10ml/kg
西药组:灌胃,螺内酯(20mg/kg)+生理盐水——10ml/kg
以上四组,均在同等条件下饲养28天。
2.观察指标及结果
2.1大鼠动情周期
大鼠皮下注射DHEA20天后行阴道脱落细胞学检查10天,其阴道脱落细胞持续呈角化状态类似于多囊卵巢综合症的无排卵症状,表明造模成功,根据统计得出模型成功率为65.9%。
大鼠药物干预28天后行阴道脱落细胞学检查10天,按照大鼠性周期各阶段阴道涂片组织学特点,观察大鼠性周期变化情况,其性周期恢复率达到86.7%,与未进行药物干预的模型组相比,差异具有统计学意义,与西药螺内酯干预组(恢复率80%)相比无统计学差异。表明中药单体组合物对于多囊卵巢综合征大鼠模型性周期具有明显的改善作用,其作用与阳性对照药螺内酯无差别。
2.2大鼠体重及卵巢系数
药物干预结束后,各组大鼠禁食不禁水12h后称取体重,根据统计数据得出,各组大鼠体重差异不明显。表明DHEA制备多囊卵巢综合征动物模型对其体重影响较小,而各组药物干预对大鼠体重的影响亦不显著。
手术摘取大鼠双侧卵巢,电子天平称取湿重,计算卵巢系数。模型组大鼠卵巢湿重较正常组显著增加,而药物干预组卵巢湿重显著低于模型组。因此可以得出在体重基本相同的情况下DHEA造模成功的大鼠卵巢体积增大,湿重增加,而中药组和西药组均可以逆转这种情况,且两组之间差异不显著。
2.3大鼠肝肾及卵巢形态病理学观察
2.3.1肝脏
正常组与中药组:小叶结构完好,肝窦清晰,肝细胞呈放射状排列,大小均匀,单核,核浆比正常,胆管上皮呈立方形。
西药组:个别出现肝细胞脂肪样变性,胞浆透明度增加,细胞胞浆不清,部分细胞核崩解,肝板破坏,汇管区增粗。
2.3.2肾脏
各组均正常,肾盂上皮细胞呈假复层(适合功能要求),上皮完整。
2.3.3卵巢
正常组:卵巢颜色鲜艳,镜下可见多个黄体及不同发育期的卵泡,颗粒细胞层6-8层,形态完整,排列整齐。
模型组:卵巢颜色苍白,镜下可见多个囊性扩张的卵泡,颗粒细胞层1-2层,甚或消失,黄体减少。
药物组:卵巢颜色好转,镜下囊性扩张的卵泡减少,不同发育期的卵泡及黄体的数量增加,颗粒细细胞层数增加至3-6层。
2.4大鼠血清性激素ELISA检测
大鼠药物干预结束后,依据阴道脱落细胞学检查,将处于动情前期的大鼠腹主动脉取血,采用酶联免疫ELISA的方法对其血清性激素进行检测。检测结果如下表所示:
与A组比较:**P<0.05;与B组比较:△△P<0.05,差异具有统计学意义.
根据以上大鼠血清性激素ELISA检测结果可以看出,模型组大鼠血清除E2之外,T、LH水平及LH/FSH比值均显著高于正常组,FSH水平低于正常组,这与多囊卵巢综合征患者血清性激素水平相似,表明我们造模成功。而中药干预后可明显降低大鼠血清T、LH,增加FSH的含量,且对LH/FSH比值具有明显的逆转作用,与西药螺内酯药效比较无统计学差异。另外,中药组与西药组相比较,还可以显著增加E2的含量。因此可以得出:中药单体组合物对雄激素具有明显的抑制作用,对多囊卵巢综合症大鼠模型具有显著的治疗作用。
2.5大鼠卵巢组织相关基因RT-PCR检测
为进一步明确药物的作用机制,我们就文献《多囊卵巢综合症的相关基因研究进展》报道的雄激素合成代谢通路过程中的相关基因采用RT-PCR方法进行检测,检测结果见图1~4。
由RT-PCR检测结果我们得出,模型组大鼠与正常组大鼠卵巢组织相比,其CYP17mRNA、ARmRNA、3β-HSD mRNA表达量增加;而药物干预组(中药组和西药组)与模型组相比,其卵巢组织CYP17mRNA、ARmRNA、3β-HSD mRNA量均显著降低。这与我们之前的大鼠血清ELISA检测结果相吻合。其中中药组对CYP17基因的抑制作用不及西药组,但对AR,3β-HSD基因的抑制作用优于西药组。
结论
本课题从体内水平对中药单体组合物的作用及其机制进行探讨。
实验结果表明:中药单体组合物可以逆转多囊卵巢综合征模型大鼠血清睾酮、促黄体生成素、促卵泡生成素的水平,从而改善其紊乱的性周期,对多囊卵巢综合征具有显著的治疗作用,且中药单体隐丹参酮、黄芩苷、槲皮素均不具有肝肾毒性,安全性好。
进一步研究结果显示:中药单体组合物可明显下调雄激素合成通路中的CYP17、3β-HSD及AR基因表达,从而抑制雄激素的合成。
综上所述,中药单体组合物可以通过调节雄激素合成代谢过程中相关基因的表达,抑制雄激素的合成,最终达到治疗多囊卵巢综合征的效果。
因此可以得出:隐丹参酮、黄芩苷、槲皮素三种中药单体联合应用形成的组合物可以应用于制备治疗多囊卵巢综合征的药物,并且具有良好的前景。
实施例2
处方:取中药单体组合物:隐丹参酮0.3g、黄芩苷2.2g、槲皮素1.0g,加入淀粉8g,微晶纤维素2g,硬脂酸镁0.2g,混合均匀,采用本领域公知的方法,制成片剂、胶囊剂或颗粒剂。
以上实施例的说明只是用于帮助理解本发明的应用及其核心思想,应当指出,对于本技术领域的普通技术人员来说,在不脱离本发明原理的前提下,还可以对本发明进行若干改进和修饰,这些改进和修饰也落入本发明权利要求的保护范围内。
Claims (10)
1.一种用于制备治疗多囊卵巢综合征的中药单体组合物,其特征在于:所述的中药单体组合物包括质量百分比为2~4%的隐丹参酮 、13~18%的黄芩苷、7~10%的槲皮素,65~80%的辅料,上述各成份的百分比之和为100%。
2.根据权利要求1所述的一种用于制备治疗多囊卵巢综合征的中药单体组合物,其特征在于:所述辅料为填充剂、粘合剂或崩解剂;所述的填充剂由重量百分比为75~82%的淀粉、15~23%的微晶纤维素(MCC)和1~3%硬脂酸镁混合而成,上述百分比之和为100%;所述的粘合剂由重量百分比为30~70%的乙醇、3~15%的聚维酮(PVP)和5~20%的羟丙基纤维素(HpC)混合而成,上述百分比之和为100%;所述的崩解剂由重量百分比为5~20%的改良淀粉、1~6%的羧甲基淀粉钠(CMS-Na)和2~5%的低取代羟丙基纤维素(L-HPC)混合而成,上述百分比之和为100%。
3.根据权利要求1所述的一种用于制备治疗多囊卵巢综合征的中药单体组合物,其特征在于:所述辅料为填充剂、粘合剂或崩解剂中的两种以上的混合物,其中填充剂占辅料重量百分比的50~70%,粘合剂占辅料重量百分比的的40~60%,崩解剂占辅料重量百分比的10~40%;所述的填充剂为淀粉、微晶纤维素(MCC)和硬脂酸镁混合而成;所述的粘合剂为乙醇、聚维酮(PVP)和羟丙基纤维素(HpC)混合而成;所述的崩解剂为改良淀粉、羧甲基淀粉钠(CMS-Na)和低取代羟丙基纤维素(L-HPC)混合而成。
4.根据权利要求3所述的一种用于制备治疗多囊卵巢综合征的中药单体组合物,其特征在于:所述的填充剂由重量百分比为75~82%的淀粉、15~23%的微晶纤维素(MCC)和1~3%硬脂酸镁混合而成;所述的粘合剂由重量百分比为30~70%的乙醇、3~15%的聚维酮(PVP)和5~20%的羟丙基纤维素(HpC)混合而成;所述的崩解剂由重量百分比为5~20%的改良淀粉、1~6%的羧甲基淀粉钠(CMS-Na)和2~5%的低取代羟丙基纤维素(L-HPC)混合而成。
5.根据权利要求1所述的中药单体组合物的片剂制备方法,其特征在于:所述片剂制备方法如下:将中药单体复方2~4g、淀粉6~8g、微晶纤维素1~3g、硬脂酸镁0.1~0.3 g置于饽荠形包衣机中,转动包衣机,喷加2~5g乙醇,继续转动15s~30min,制成湿颗粒后过10-40目筛,经20-80℃干燥后的颗粒经压片机压制成片型。
6.根据权利要求5所述的中药单体组合物的片剂制备方法,其特征在于:所述的中药单体复方由隐丹参酮、黄芩苷和槲皮素混合而成,其中隐丹参酮0.2-0.4g、黄芩苷2-2.5g、槲皮素0.8-1.1g。
7.根据权利要求1所述的中药单体组合物的颗粒剂制备方法,其特征在于:所述颗粒剂制备方法如下:将中药单体复方2~4g、淀粉6~8g、羟丙基纤维素0.5~1.5g,羧甲基淀粉钠0.1~0.5g充分混匀,加入2~3g乙醇用混合机充分混合制成软材,将软材用机械挤压通过14~22目的筛网,制得湿颗粒,采用流式床干燥法加以干燥,除去水分,并采用过筛方法整粒和分级,过筛时先过12-14目筛网使大颗粒磨碎,再过60目筛网除去小颗粒和细粉,为达到稳定、控释或肠溶作用,可对颗粒剂进行包衣。
8.根据权利要求7所述的中药单体组合物的颗粒剂制备方法,其特征在于:所述的中药单体复方由隐丹参酮、黄芩苷和槲皮素混合而成,其中隐丹参酮0.2-0.4g、黄芩苷2-2.5g、槲皮素0.8-1.1g;流式床干燥法中干燥温度为60℃~80℃,干燥程度含水量小于等于2%。
9.根据权利要求1所述的中药单体组合物的滴丸剂制备方法,其特征在于:所述滴丸剂制备方法如下:将中药单体复方2~4g混匀,溶于硬脂酸甘油酯1~2g的基质内制成药液,将药液移入加料漏斗,保温80~90℃,选择乙醇2~5g做为冷凝液加入滴丸机的冷凝柱中,调节保温箱收集滴丸,清除附着的冷凝液,干燥、包装即得。
10.根据权利要求9所述的中药单体组合物的滴丸剂制备方法,其特征在于:所述的中药单体复方由隐丹参酮、黄芩苷和槲皮素混合而成,其中隐丹参酮0.2-0.4g、黄芩苷2-2.5g、槲皮素0.8-1.1g。
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CN103705501A (zh) * | 2013-12-23 | 2014-04-09 | 中国人民解放军第二军医大学 | 槲皮素在制备治疗多囊卵巢综合征药物中的应用 |
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2013
- 2013-04-19 CN CN201310139387.4A patent/CN103285022B/zh active Active
Patent Citations (1)
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