CN102188483B - 一种治疗咽喉炎的提取物及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种治疗咽喉炎的提取物，先按重量组分：荆芥1份、桔梗4份、生甘草2份准备药材；通过如下步骤制备得到：1)药材烘干，干燥温度为40～60℃，干燥时间3～4h；2)药材粉碎成粗粉；3)药材装进超临界萃取罐中，加入夹带剂乙醇或甲醇，萃取条件：一级减压分离压力为5～10MPa，温度为40～60℃，流量15～20L/h的条件下进行萃取3～4h；二级减压分离压力为5～10MPa，温度为35～50℃；4)提取物进行脱水，干燥。通过该超临界制备工艺，能有效地富集黄酮、皂苷、萜类成分。所述的提取物成分特征：按重量比计，甘草酸≥2.8％，甘草苷≥0.7％，桔梗皂苷D≥0.3％，薄荷酮≥0.04％。该提取物具有抗炎、镇痛作用。疗效更显著，制备工艺简单，提取率高，成本低等特点。

Description

一种治疗咽喉炎的提取物及其制备方法

技术领域

本发明涉及一种治疗咽喉炎提取物及其制备方法，具体涉及一种经典中药复方“荆芥汤”的提取物及其制备方法，以及该提取物在制备预防和/或治疗咽喉炎药物中的应用。

背景技术

咽炎，在祖国医学中属“喉痹”范畴。现代医学认为它是由溶血性链球菌、葡萄球菌、肺炎双球菌等病原菌感染引起的咽部粘膜的急性炎症。中医认为多因热邪毒侵袭咽喉，内伤于肺，相搏不去，致咽喉肿塞痹痛；或邪热壅盛，由肺卫传里，热邪循经灼伤咽喉肿痛而成喉痹。临床主要表现为咽部红肿、疼痛、干痒不适及异物感，常伴发热。本病是以咽喉疼痛，咽部红肿底或有颗粒突起，喉核肿胀不明显，全身有风热症状主要临床表现的咽部急性炎症。西医治疗多以抗生素为主但多有毒副作用，而且易耐药，而中医中药治疗病，具有疗效好，副作用小的特点。

传统中医认为：急性咽炎(急喉痹)分为风寒外侵、风热袭肺、肺胃热盛三型。临床则多见风热袭肺、肺胃热盛两型。风热袭肺型：咽痛，口微渴，发热，微恶寒，咽部，轻度充血，水肿，舌边尖红.苔薄白，脉浮数。治宜疏风清热，解毒利咽。肺胃热盛型：症见咽痛较剧，口渴多饮，咳嗽、疲粘稠，发热，大便偏于干。小便短赤，咽部充血较甚，舌质红，苔薄黄，脉数有力。治宜泻热解毒，利咽消肿。

荆芥汤载于宋代《太平惠民和剂局方》，原方为“荆芥穗半两，桔梗二两，甘草(炙)一两。”其功能主治为“治风热肺壅，咽喉肿痛，语声不出；其制法及用法为：“上为粗末。每服四钱，水一盏，姜三片，煎六分，去渣，食後温服”。历代主要方剂著作中均有该方剂记载，如明代《赤水玄珠》等。但所有记载，在制备工艺均为传统水煎方。可见，传统工艺粗糙，且服用、携带不方便，服用量大，也不适宜加工成其他剂型。更关键是通过加热水煎，低极性成分易挥发，使其确切疗效受到影响。

荆芥主要含挥发油1.8％，油中主成分为右旋薄荷酮(α-Menthone)、消旋薄荷酮、少量右旋柠檬烯(α-Limone)。荆芥地上部分含挥发油1.3％，穗含挥发油约4.11％；挥发油中主成分为d-薄荷酮(d-menthone)约42.9％，消旋薄荷酮、l-胡薄荷酮(l-pulegone)约33.9％及少量d-苎烯(d-limonene)，另尚含γ-蒎烯。而这些成分是很容易挥发的成分，传统工艺中，通过加热，很容易导致该类成分的损失。桔梗主要含桔梗皂甙(Platycodin)，水解产生皂甙元为三萜酸的混合物，其中一种为远志酸(Polygalacic acid)，另一种为桔梗皂甙元(Platy-codigenin)，尚含桔梗酸A、B及C(Platycogenic acid A、B、C)、菊糖、桔梗聚糖、葡萄糖及植物甾醇。如菠菜甾醇(α-Spinasterol)、α-菠菜甾醇-β-D-葡萄糖甙(α-Spinasteryl-β-D-glucoside)等。桔梗皂甙元水溶性差，因此，传统工艺也容易导致该类成分的损失。甘草中根和根茎主含三萜皂甙。其中主要的一种，谷称甘草甜素(glycyrrhizin)，系甘草的甜味成分，是1分子的18β-甘草次酸(18β-glycyrrhetic acid)和2分子的葡萄醛酸(glucuronic acid)结合生成的甘草酸(glycyrrhi zic acid)的钾盐和钙盐。其他的三萜皂甙有：乌拉尔甘草皂甙(uralsaponin)A、B和甘草皂甙(licoricesaponin)A3、B2、C2、D3、E2、F3、G2、H2、J2、K2。又含黄酮素类化合物：甘草甙元(liquiritigenin)，甘草甙(liquiritin)，异甘草甙元(isoliquiritigenin)，异甘草甙(isoliquirit in)，新甘草甙(neoliquiritin)，亲异甘草甙(neoisoliquiritin)，甘草西定(licoricidin)，甘草利酮(licoricone)，刺芒柄花素(formononetin)，5-O-甲基甘草本定(5-O-methyllicoricidin)，甘草甙元-4′-芹糖葡萄糖甙[liquiritigenin-4′-qpiofur-anosyl(1→2)glucopyranoside，apioliquiritin]，甘草甙元-7，4′-二葡萄糖甙(liquiritigenin-7，4′-diglucoside)，新西兰牡荆甙Ⅱ(vicenin II)即是6，8-二-葡萄糖基芹菜素、芒柄花甙(ononin)，异甘草黄酮醇(isolicoflanonol)，异甘草甙元-4′-芹糖葡萄甙。还含香豆精类化合物：甘草香豆精(glycycoum-arim)，甘草酚(glycyrol)，异甘草酚(isoglycyrol)。总之，原复方制备工艺通过直接水提方法，可提取部分水溶性成分，如桔梗皂苷类等，但对甘草中其他成分如黄酮类成分、低极性成分及皂苷苷元类成分，则很难提取出来，而这些损失的成分恰是该方剂的抗炎的主要活性成分，且中药发挥疗效为各成分的综合作用，因此，传统工艺对有效成分的保留很不合理，有必要进行深入研究，对其工艺进行革新。有关该方剂的现代制备及相关工艺研究均为空白，限制了该方剂的扩大应用。

发明内容

本发明的目的在于提供一种治疗咽喉炎的提取物。

本发明的进一步目的在于提供一种治疗咽喉炎的提取物的制备方法。解决直接水提方法存在的挥发性有效成分损失大的问题，有效地富集了各药材的主要成分。

本发明解决其技术问题所采用的技术方案是：一种治疗咽喉炎的提取物，先按重量组分：荆芥1份、桔梗4份、生甘草2份准备药材；再通过超临界制备工艺富集总黄酮、总皂苷、总萜类成分；其特征在于：所述的提取物中，按重量比计，甘草酸≥2.8％，甘草苷≥0.7％，桔梗皂苷D≥0.3％，薄荷酮≥0.04％。

上述抗咽喉炎的提取物的制备方法，先按重量组分准备药材；荆芥1份、桔梗4份、生甘草2份准备药材。并包括下述方法步骤：

1)药材烘干，干燥温度为40～60℃，干燥时间3～4h；

2)药材粉碎成粗粉；

3)药材装进超临界萃取罐中，加入夹带剂，萃取条件：一级减压分离压力为5～10Mpa，温度为40～60℃，流量15～20L/h的条件下进行萃取3～4h；二级减压分离压力为5～10Mpa，温度为35～50℃；

4)萃取出的提取物进行脱水，干燥。即得“抗咽炎”提取物。

进一步的，所述的步骤2)中粗粉粉碎粒度在60～200目之间。

更进一步的，所述的夹带剂选自甲醇、乙醇等有机溶剂；夹带剂与粗粉质量比为2～50∶100。

试验实施例1是各提取物的主成分含量分析，表明本发明所述的提取物，是指采用超临界制备方法，按传统药物复方组成比例进行制备而成，以黄酮类、皂苷、萜类成分为主要组分的提取物。

本发明的原理是，复方中荆芥主要为薄荷酮为主的萜类成分；甘草主要含甘草黄酮及甘草皂苷类成分；桔梗也主要含桔梗皂苷类成分；原复方制备工艺通过直接水提方法，可提取部分水溶性成分，如桔梗皂苷类等，而对脂溶性成分难以提出来，使荆芥挥发性成分及甘草三萜类成分，桔梗皂苷元能更多地富集损。因此，本发明通过超临界制备工艺，有效地富集了各药材的主要成分，体现了该复方的综合物质基础，同时，提取物很容易加成工各种剂型，同时使其实用性大大提高，改变了原方剂直接水提的单一用药的限制，扩大了其使用范围。

试验实施例2是提取物的抗炎实验研究，对超临界所制备的提取物，和原水提方剂进行比较，对抗炎、镇痛效果，均优于原方剂，表明提取物具有显著的抗炎作用。实施例3是提取物的镇通实验研究，表明提取物均有显著抑镇痛作用，保证了原方剂的疗效。

根据本发明的再一个目的，本发明所述的提取物在制备预防和/或治疗咽喉炎中药物的应用，包括：

上述药物的组合物均可以进一步包含药学上可接受的载体和/或赋形剂。例如，一种药物组合物可以是总黄酮提取物和药学上可接受的载体和/或赋形剂按照一定的配比混合而成；还可以是将总黄酮提取物、其它中药提取物和药学上可接受的载体和/或赋形剂按照一定的配比混合而成。

上述药物组合物可进一步按照常规制剂方法配制成可供给药的形式，包括经口或胃肠外给药形式。在可供给药的形式中，应包含治疗有效量的预防及治疗流感病毒提取物。所谓“治疗有效量“是指在该剂量下，本发明的提取物能够改善或减轻疾病症状，或能够抑制或阻断疾病的发展。

可供给药的组合物可以为片剂、胶囊剂、粉剂、颗粒剂、锭剂、栓剂、贴剂、凝胶剂、粉剂或液体制剂(如口服或无菌胃肠外溶液或悬浮液)。这些可供给药的组合物还可以根据需要制备成缓控释制剂或靶向制剂。

口服给药的形式可以为片剂、胶囊剂、粉剂、颗粒剂等，它们可以含有常规赋形剂如粘合剂像糖浆、阿拉伯胶、明胶、山梨醇、黄蓍胶、羟丙基甲基纤维素或聚乙烯吡咯烷酮；填充剂如乳糖、蔗糖、玉米淀粉、磷酸钙、山梨醇或甘氨酸；压片润滑剂如硬脂酸镁；崩解剂如淀粉、聚乙烯吡咯烷酮、交聚维酮、羟乙酸淀粉钠或微晶纤维素或药学上可接受的润湿剂如十二烷基硫酸钠。

液体组合物(如口服液体组合物)可以制备为乳液、糖浆剂或酏剂形式，或者将它们制备为干燥产物形式，在使用前，用水或其它适当的溶媒溶解。此类液体制剂可以含有常规的添加剂，如悬浮剂像山梨醇、糖浆、甲基纤维素、明胶、羟乙基纤维素、羧甲基纤维素、硬脂酸铝凝胶、氢化可食用脂肪；乳化剂如卵磷脂、脱水山梨醇单油酸酯或阿拉伯胶；非水溶性溶媒(可以包括食用油)如杏仁油、分馏椰子油、油性酯如甘油、丙二醇或乙醇的酯；防腐剂如对羟基苯甲酸甲酯或丙酯或山梨醇；并且如果需要可以含有常规的矫味剂或着色剂。

胃肠外组合物(如胃肠外给药组合物)可以含有所述活性化合物和无菌溶媒，根据使用的浓度，所述活性化合物可以悬浮于或溶解于该溶媒中。制备胃肠外给药的溶液时，可以将本发明的组合物溶于注射用水中，过滤除菌，然后灌装于适当的管制瓶或安瓿中并密封。最好将辅助剂如局部麻醉剂、防腐剂和缓冲剂溶解于所述溶媒中。为增加稳定性，可以将该组合物灌装于管制瓶中后冷冻并真空去除水分。以基本相同的方法可以制备胃肠外悬浮液，但是所述活性化合物是悬浮于溶媒中而不是溶解于溶媒中，并且除菌不能通过过滤进行。可以将所述化合物通过暴露于环氧乙烷中灭菌，然后将其悬浮于无菌溶媒中。最好该组合物中含有表面活性剂或润湿剂以有助于活性组分的均匀分布。

本发明的有益效果：本发明通过超临界制备工艺，能有效地富集总黄酮、总皂苷、总萜类成分。体现了原复方的综合物质基础。主要有效成分显著高于古方传统工艺所制备所得的成分，该提取物具有明显的抗炎镇痛的作用，其提取物与原汤剂相比，作用更显著。同时，提取物很容易加成工各种剂型，可直接应用于抗咽喉炎药物的开发。其实用性大大提高，改变了原方剂直接水提的单一用药的限制，扩大了其使用范围。具有制备工艺简单、提取率高、成本低等特点。

以下将结合实施例，对本发明进行较为详细的说明。

具体实施方式

实施例1“抗咽喉炎”提取物的制备

取中药材荆芥2公斤、桔梗8公斤、生甘草4公斤，在温度为40℃干燥3h；粉碎药材，粒度在200目左右。再加入夹带剂甲醇0.4公斤，超临界二氧化碳萃取的分离罐中进行萃取，萃取条件：一级减压分离压力为5Mpa，温度为40℃，流量为15～20L/h，萃取3～4h；二级减压分离压力为5Mpa，温度为35℃。收集提取物所得为样品1。

该工艺技术突出优点是：(1)提取效率高；(2)有效地富集了主要活性成分，特别是对于萜类成分等，得到有效地富集，而原汤剂在直接煎煮基础上，基本损失了大量的该类成分，使主药的应用效果，受到限制，且提取物体积小，提高了中药的内在质量；(3)充分祛除了其多糖类等杂质等；(4)减少了产品的吸潮性；(5)去除了大量的无机盐、粘液质等，从而增强了产品的稳定性；(6)容易制备成外观美观的各种剂型；(7)工艺成本低。

实施例2“抗咽喉炎”提取物的制备

取中药材荆芥2公斤、桔梗8公斤、生甘草4公斤，薄在温度为60℃干燥3h；药材粉碎，粒度在60目左右。将干粉放置于提取罐中，加入夹带剂乙醇15公斤，超临界二氧化碳萃取的分离罐中进行一级减压分离压力为10Mpa，温度为60℃；二级减压分离压力为10Mpa，温度为50℃。收集提取物所得为样品2。

实施例3“荆芥汤”按古方记载的传统方法制备

取中药材荆芥2公斤、桔梗8公斤、生甘草4公斤，按传统制备方法：加水，加热回流提取2次，提取液浓缩成干燥浸膏，作为样品3。供样品1，2比较使用。

实施例4片剂(胶囊)剂制备

将本发明制备实施例中样品1或样品2加入淀粉、微结晶纤维素，乳糖，糊精等辅料的一种或几种混合物，混匀，制粒，压片(填胶囊)，即为片剂或胶囊剂。作为治疗及预防流行性感冒药物。

试验实施例1各提取物的主成分含量分析

下列质量分析中所用样品包括：按实施例1的方法制备的样品1，按实施例2的方法制备的样品2，按实施例3的方法制备的样品3。各样品均低温干燥至提取物，按生药比折算计算含量。

测定方法：结果见表1。甘草酸，甘草苷含量大于0.7％，桔梗皂苷D，薄荷酮，均以中国药典连翘药材的高效液相分析方法测定的，结果见表1。

表1.各样品的含量测定结果

	萜类成分	甘草苷	甘草酸	桔梗皂苷D
					样品1	0.051％	0.75％	2.85％	0.33％
样品2	0.052％	0.72％	2.91％	0.32％
					样品3	0.036％	0.46％	1.95％	0.23％

各样品的含量测定结果表明，样品1、2中各成分均高于样品3，有效地富集了各成分的含量。

由此可见，与传统制备工艺比较，该抗咽喉炎的提取物，主要有效成分显著高于古方传统工艺所制备所得的成分，其成分特征重量比为：则甘草酸含量大于2.8％，甘草苷含量大于0.7％，桔梗皂苷D含量大于0.3％，薄荷酮含量大于0.04％。

试验实施例2提取物的抗炎实验研究

取昆明小鼠50只，分为空白组、阳性对照组(消炎通，广东华南制药厂生产)、样品1、样品2、样品3共五组。每组动物各10只，各组小鼠连续灌胃给药10天，末次给药后于小鼠右耳涂布二甲苯0.02ml/只，致炎。间隔3h后颈椎脱臼法处死小鼠，沿耳廓基线剪下双耳，用直径8mm打孔器在两耳同一部位打下耳片并称重。结果见表2。

与空白组相比，阳性对照组、样品1、2、3对小鼠耳肿胀度与阴性对照组有极显著差异(p＜0.01)；说明各样品显著的抗炎作用，同时，样品1和2抗炎效果均强于样品3。

表2.对二甲苯致小鼠耳肿胀的影响(

n＝10)

注：剂量为每天用量药

与空白组相比，*p＜0.05；**p＜0.01；***p＜0.001。

试验实施例3提取物的镇痛实验研究

取昆明小鼠50只，分为空白组、阳性对照组(消炎通，广东华南制药厂生产)、样品1、样品2、样品3共五组。每组动物各10只给药前将小鼠逐个置于55±0.2℃的金属热板上，测定痛阈值，取两次痛阈均值，小于6秒或大于30秒者剔除。取合格小鼠，按体重随机分组，给药10天，分别于末次给药后30min、60min、90min同上法测定痛阈值，与阴性对照组比较。如超过60秒仍无反应，则取出小鼠按60秒计。

表3对热板法致小鼠疼痛反应的影响(±s，n＝10)

注：剂量为每天用药量。

与阴性对照组相比，*p＜0.05；**p＜0.01；***p＜0.001。

与空白组相比，阳性对照组、样品1、2、3对小鼠镇痛作用与阴性对照组有极显著差异(p＜0.01)；说明各样品显著的镇痛效果，同时，样品1和2抗炎效果均强于样品3。

Claims (5)

1.一种治疗咽喉炎的提取物的制备方法，先按重量组分：荆芥1份、桔梗4份、生甘草2份准备药材；并包括如下步骤：

1）药材烘干，干燥温度为40～60℃，干燥时间3～4h；

2）药材粉碎成粗粉；

3）药材装进超临界萃取罐中，加入夹带剂，萃取条件：一级减压分离压力为5～10Mpa，温度为40～60℃，流量15～20L/h的条件下进行萃取3～4h；二级减压分离压力为5～10Mpa，温度为35～50℃；

4）萃取出的提取物进行脱水，干燥。

2.如权利要求1所述的治疗咽喉炎的提取物的制备方法，其特征在于：所述的步骤2）中粗粉粉碎粒度在60～200目之间。

3.如权利要求1所述的治疗咽喉炎的提取物的制备方法，其特征在于：所述的夹带剂选自甲醇或乙醇；夹带剂与粗粉质量比为2～50：100。

4.一种治疗咽喉炎的提取物，其特征是：采用如权利要求1至3任一所述的治疗咽喉炎的提取物的制备方法制得，所述的治疗咽喉炎的提取物中，按重量比计，甘草酸≥2.8%，甘草苷≥0.7%，桔梗皂苷D≥0.3%，薄荷酮≥0.04%。

5.如权利要求4所述的治疗咽喉炎的提取物的药物组合物，其特征在于，进一步包含药学上可接受的载体和/或赋形剂。