CN103221403A - 杂环化合物及其用途 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及用于治疗以下疾病的取代的双环杂芳基化合物以及含有所述化合物的组合物：一般炎症、关节炎、风湿性疾病、骨关节炎、炎性肠病、炎性眼病、炎症性或不稳定性膀胱病症、牛皮癣、含炎症性成分的皮肤病、慢性炎症性病状，包括但不限于自身免疫性疾病如系统性红斑狼疮(SLE)、重症肌无力、类风湿性关节炎、急性播散性脑脊髓炎、特发性血小板减少性紫癜、多发性硬化、舍格伦综合征（Sjoegren’ssyndrome）及自身免疫性溶血性贫血、包括所有形式的过敏症在内的过敏性病状。本发明还使用于治疗P110活性介导、依赖于P110活性或与P110活性相关的癌症的方法成为可能，所述癌症包括但不限于白血病，如急性骨髓性白血病(AML)、骨髓增生异常综合征(MDS)、脊髓增生性疾病(MPD)、慢性骨髓性白血病(CML)、T-细胞急性成淋巴细胞白血病(T-ALL)、B-细胞急性成淋巴细胞白血病(B-ALL)、非霍奇金淋巴瘤(NHL)、B-细胞淋巴瘤和实体肿瘤，如乳腺癌。

Description

杂环化合物及其用途
本申请要求2010年4月2日提交的美国临时申请第61/320,378号的权益，该临时申请据此以引用的方式并入本文。
本发明一般地涉及磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)，更具体地涉及PI3K活性的选择性抑制剂以及使用此类材料的方法。
发明背景
经由3′-磷酸化磷酸肌醇磷脂的细胞信号传导参与多种细胞过程，例如，恶性转化、生长因子信号传导、炎症，和免疫(综述可参见Rameh等人，J.Biol Chem，274：8347-8350(1999))。负责产生这些磷酸化信号传导产物的酶，即磷脂酰肌醇3-激酶(PI 3-激酶；PI3K)最初被鉴定为与病毒癌蛋白质和生长因子受体酪氨酸激酶有关的活性物(activity)，所述活性物在肌醇环的3′-羟基上将磷脂酰肌醇(PI)及其磷酸化衍生物磷酸化(Panayotou等人，Trends Cell Biol 2：358-60(1992))。
在用多种刺激物处理细胞后，PI 3-激酶活化的主要产物，即磷脂酰肌醇-3，4，5-三磷酸酯(PIP3)的含量将增加。这包括经由大多数生长因子受体以及许多炎症性刺激物、激素、神经递质和抗原进行的的信号传导，且因而PI3K的活化代表一种(如果不是最普遍的)与哺乳动物细胞表面受体活化有关的信号传导事件(Cantley，Science296：1655-1657(2002)；Vanhaesebroeck等人，Annu.Rev.Biochem，70：535-602(2001))。因此，PI 3-激酶活化涉及包括细胞生长、迁移、分化和凋亡在内的广泛范围的细胞反应(Parker等人，Current Biology，5：577-99(1995)；Yao等人，Science，267：2003-05(1995))。虽然在PI 3-激酶活化之后产生的磷酸化脂质的下游靶还没有被充分表征，但是已知含有血小板-白细胞C激酶底物同源(PH)结构域和FYVE-指结构域的蛋白在与各种磷脂酰肌醇脂质结合时被活化(Sternmark等人，J CellSci，112：4175-83(1999)；Lemmon等人，Trends Cell Biol，7：237-42(1997))。已在免疫细胞信号传导情况下研究了两组含有PH-结构域的PI3K效应子，即酪氨酸激酶TEC家族以及AGC家族的丝氨酸/苏氨酸激酶的成员。含有对PtdIns(3，4，5)P3具有明显的选择性的PH结构域的Tec家族的成员包括Tec、Btk、Itk和Etk。PH与PIP3的结合对于Tec家族成员的酪氨酸激酶活性是至关重要的(Schaeffer andSchwartzberg，Curr.Opin.Immunol.12：282-288(2000))。受PI3K调节的AGC家族成员包括磷酸肌醇磷脂依赖性激酶(PDK1)、AKT(也称作PKB)以及蛋白激酶C(PKC)和S6激酶的某些同种型。存在三种AKT同种型，并且AKT的活化与PI3K依赖性增殖及存活信号密切相关。AKT的活化取决于PDK1的磷酸化，PDK1还具有3-磷酸肌醇磷脂选择性PH结构域以将其募集至膜上，在膜上PDK1与AKT相互作用。其他重要的PDK1底物是PKC和S6激酶(Deane and Fruman，Annu.Rev.Immunol.22563-598(2004))。在体外，蛋白激酶C(PKC)的一些同种型直接被PIP3活化(Burgering等人，Nature，376：599-602(1995))。
目前，将PI 3-激酶家族基于其底物特异性分为三个类别。第I类PI3K可以磷酸化磷脂酰肌醇(PI)、磷脂酰肌醇-4-磷酸酯及磷脂酰肌醇-4，5-二磷酸酯(PIP2)，从而分别产生磷脂酰肌醇-3-磷酸酯(PIP)、磷脂酰肌醇-3，4-二磷酸酯和磷脂酰肌醇-3，4，5-三磷酸酯。第II类PI3K磷酸化PI和磷脂酰肌醇-4-磷酸酯，而第III类PI3K仅可以磷酸化PI。
对PI 3-激酶的初始纯化和分子克隆揭示PI 3-激酶是由p85和p110亚基组成的异质二聚体(Otsu等人，Cell，65：91-104(1991)；Hiles等人，Cell，70：419-29(1992))。自此以后，已经鉴定了4种不同类别的第I类PI3K，命名为PI3K α、β、δ和γ，每种均由不同的110kDa催化亚基和调节亚基组成。更具体地说，其中的三个催化亚基，即p110α、p110β和p110δ，各自与相同的调节亚基p85相互作用；而p110γ与不同的调节亚基p101相互作用。如下面所述，这些PI3K中的每种在人细胞和组织中的表达模式也是不同的。虽然总的来说最近已经累积了有关PI 3激酶的细胞功能的大量信息，但是各个同种型所起的作用还没有被完全理解。
已经描述了牛p110α的克隆。这种蛋白质被鉴定为与酿酒酵母蛋白质：Vps34p相关，Vps34p是涉及液泡蛋白质加工的一种蛋白质。重组p110α产物也被证明与p85α缔合，从而在转染的COS-1细胞中产生PI3K活性。参见Hiles等人，Cell，70，419-29(1992)。
命名为p110β的第二种人p110同种型的克隆描述于Hu等人，Mol Cell Biol，13：7677-88(1993)中。这种同种型据说可与细胞中的p85缔合，并且被广泛地表达，因为p110βmRNA已经在许多人和小鼠组织中，以及在人脐静脉内皮细胞、Jurkat人白血病T细胞、293人胚胎肾脏细胞、小鼠3T3成纤维细胞、HeLa细胞和NBT2大鼠膀胱癌细胞中被发现。此种广泛表达表明这种同种型在信号传导路径中十分重要。
PI 3-激酶的p110δ同种型的鉴定描述于Chantry等人，J Biol Chem，272：19236-41(1997)中。据观察，人p110δ同种型是以组织受限的方式表达的。它在淋巴细胞和淋巴样组织中以高水平表达，并且已被证明其在免疫系统中由PI 3-激酶介导的信号传导中起关键作用(Al-Alwan等人JI 178：2328-2335(2007)；Okkenhaug等人JI，177：5122-5128(2006)；Lee等人PNAS，103：1289-1294(2006))。P110δ也被证明在乳腺细胞、黑色素细胞及内皮细胞中以较低的水平表达(Vogt等人Virology，344：131-138(2006)，并且此后参与给乳腺癌细胞赋予选择性迁移特性(Sawyer等人Cancer Res.63：1667-1675(2003))。有关P110δ同种型的细节也可以见于美国专利第5,858,753号、第5,822,910号，和第5,985,589号。还可参见Vanhaesebroeck等人，Proc Nat.Acad Sci USA，94：4330-5(1997)，以及国际专利公布WO 97/46688。
在PI3Kα、β和δ亚型中的每一种中，p85亚基的作用是通过其SH2结构域与靶蛋白内磷酸化的酪氨酸残基(以合适的序列存在)相互作用而将PI 3-激酶定位于质膜中(Rameh等人，Cell，83：821-30(1995))。已经鉴定出被3种基因编码的p85的5种同种型(p85α、p85β、p55γ、p55α和p50α)。Pik3rl基因的替代转录体编码p85α、p55α和p50α蛋白(Deane and Fruman，Annu.Rev.Immunol.22：563-598(2004))。p85α被广泛地表达，而p85β主要在脑和淋巴样组织中被发现(Volinia等人，Oncogene，7：789-93(1992))。p85亚基与PI 3-激酶p110α、β，或δ催化亚基的缔合似乎是这些酶的催化活性及稳定性所需要的。另外，Ras蛋白质的结合还上调PI 3-激酶活性。
p110γ的克隆还进一步揭示PI3K酶家族内的复杂性(Stoyanov等人，Science，269：690-93(1995))。p110γ同种型与p110α和p110β密切相关(在催化结构域中具有45-48％的同一性)，但是正如所指出的，p110γ同种型没有利用P85作为靶向亚基。相反，p110γ结合p101调节亚基，p101调节亚基还结合至异三聚体G蛋白的βγ亚基。PI3Kγ的p101调节亚基最初是在猪体内被克隆的，并且随后鉴定出人直系同源基因(Krugmann等人，J Biol Chem，274：17152-8(1999))。已知，p101的N-末端区域与p110γ的N-末端区域之间的相互作用经由Gβγ活化PI3Kγ。最近，已鉴定出p101-同系物，p84或p87PIKAP(87kDa的PI3Kγ衔接蛋白)，其结合p110γ(Voigt等人JBC，281：9977-9986(2006)，Suire等人Curr.Biol.15：566-570(2005))。p87PIKAP与结合p110γ和Gβγ的区域中的p101是同源的，并且还介导G蛋白偶联受体下游的p110γ的活化。与p101不同，p87PIKAP在心脏中高度表达，并且对于PI3Kγ心脏功能可能是至关重要的。
组成型活性PI3K多肽描述于国际公开WO 96/25488中。该公开披露了嵌合融合蛋白的制备，其中将p85中被称作间插-SH2(iSH2)区域的102-残基片段通过连接子区与鼠类p110的N-末端融合。p85iSH2结构域明显能够以与完整P85相当的方式活化PI3K活性(Klippel等人，Mol Cell Biol，14：2675-85(1994))。
因此，PI 3-激酶可以通过其氨基酸同一性或者通过其活性来定义。这个生长中的基因家族的其他成员包括相关性较远的脂质和蛋白激酶，包括酿酒酵母的Vps34TOR1，和TOR2(及其哺乳动物同系物如FRAP和mTOR)、共济失调毛细血管扩张基因产物(ATR)以及DNA依赖性蛋白激酶(DNA-PK)的催化亚基。一般参见Hunter，Cell，83：1-4(1995)。
PI 3-激酶还涉及白血球活化的许多方面。P85相关的PI 3-激酶活性已被证明与CD28的细胞质结构域以物理方式缔合，CD28是活化T细胞对抗原反应的重要共刺激分子(Pages等人，Nature，369：327-29(1994)；Rudd，Immunity，4：527-34(1996))。通过CD28活化T细胞将降低抗原活化的阀值，并且增加增殖反应的级数和持续时间。这些影响与许多基因的转录的增加相关，所述基因包括白介素-2(IL2)，一种重要的T细胞生长因子(Fraser等人，Science，251：313-16(1991))。CD28的突变使得它不能够再与PI 3-激酶相互作用，导致不能引发IL2的产生，揭示PI 3-激酶在T细胞活化中起着关键作用。
针对酶家族的各个成员的特异性抑制剂提供了解密每种酶的功能的非常宝贵的工具。两种化合物(LY294002和渥曼青霉素(wortmannin))已被广泛用作PI 3-激酶抑制剂。然而，这些化合物是非特异性PI3K抑制剂，因为它们不能辨别第I类PI 3-激酶的四个成员。例如，渥曼青霉素对各种I类PI 3-激酶中的每种的IC50值在1-10nM范围内。类似地，LY294002对这些PI 3-激酶中的每种的IC50值为约1μM(Fruman等人，Ann Rev Biochem，67：481-507(1998))。因此，这些化合物在研究各个第I类PI 3-激酶的作用中所起的作用是有限的。
基于使用渥曼青霉素的研究，有证据表明PI 3-激酶功能也是白血球通过G蛋白偶联受体的信号传导的某些方面所必需的(Thelen等人，Proc Natl Acad Sci USA，91：4960-64(1994))。而且，已经证明渥曼青霉素和LY294002阻断嗜中性粒细胞迁移及过氧化物释放。然而，因为这些化合物不能分辨PI3K的各个同种型，所以从这些研究中仍然不清楚哪一种或哪些特别的PI3K同种型涉及这些现象，以及不同的第I类PI3K酶的哪些功能一般会在正常和患病组织中起作用。直到最近，数种PI3K同种型在大多数组织中的共表达具有用于分离每种酶的活性的混杂作用(confounded effort)。
最近，随着研究允许进行同种型特异性敲除小鼠和激酶死亡基因敲入小鼠的基因改造，以及研发针对一些不同同种型的选择性更强的抑制剂，在分离各种PI3K同工酶活性的活性方面已经取得了进展。已经产生P110α和p110β基因敲除小鼠，且这些小鼠都是胚致死的，几乎没有从这些小鼠获得有关p110α和β的表达和功能的信息(Bi等人Mamm.Genome，13：169-172(2002)；Bi等人J.Biol.Chem.274：10963-10968(1999))。最近，已经用削弱激酶活性但是保留突变体p110α激酶的表达的ATP结合袋(p110αD933A)的DFG基元中的单点突变产生p110α激酶死亡基因敲入小鼠。与基因敲除小鼠相反，基因敲入法保留了信号传导的复杂化学计量、支架功能，并且比基因敲除小鼠更真实地模拟小分子方法。与p110αKO小鼠类似，p110αD933A纯合子小鼠是胚致死的。然而，杂合子小鼠能存活并且能繁殖，但是呈现明显减弱的经由胰岛素受体底物(IRS)蛋白(胰岛素、胰岛素样生长因子-1和瘦素作用的关键调节剂)进行得信号传导。对这些激素的缺陷反应导致高胰岛素血症、葡萄糖耐受不良、食欲过盛、肥胖增加和杂合子综合生长降低(Foukas等人，Nature，441：366-370(2006))。这些研究揭示p110α作为IGF-1、胰岛素和瘦素信号传导的中间体的确定的非冗余作用，这种作用是无法被其他同种型替代的。我们必须等待对p110β激酶死亡基因敲入小鼠的描述以进一步了解这种同种型的功能(已经产生小鼠，但是尚未公布；Vanhaesebroeck)。
已经产生P110γ基因敲除和激酶死亡基因敲入小鼠，该小鼠总体表现出类似且轻度的表型，该表型具有先天免疫系统的细胞迁移初始缺陷以及T细胞胸腺发育缺陷(Li等人Science，287：1046-1049(2000)，Sasaki等人Science，287：1040-1046(2000)，Patrucco等人Cell，118：375-387(2004))。
与P110γ类似，已经产生PI3Kδ基因敲除和激酶死亡基因敲入小鼠，该小鼠能存活，并具有轻度以及类似表型。p110δD910A突变基因敲入小鼠证实了δ在B细胞发育和功能(几乎检测不到边缘区域B细胞和CD5+B1细胞)以及B-和T细胞抗原受体信号传导中的重要作用(Clayton等人J.Exp.Med.196：753-763(2002)；Okkenhaug等人Science，297：1031-1034(2002))。已经对p110δD910A小鼠进行了广泛研究，并且解释了δ在免疫系统中所起的各种不同的作用。T细胞依赖性和T细胞非依赖性免疫反应在p110δD910A中被严重削弱，并且TH1(INF-γ)和TH2细胞因子(IL-4，IL-5)的分泌减少(Okkenhaug等人J.Immunol.177：5122-5128(2006))。最近还描述了具有p110δ突变的人患者。具有先前未知病因的原发性B细胞免疫缺陷和γ-低球蛋白血症的一名台湾男孩在p110δ的外显子24中的密码子1021中存在单碱基对置换，m.3256G替换为A。这种突变导致在位于p110δ蛋白高度保守催化结构域中的密码子1021上发生错义氨基酸置换(E替换为K)。据研究，该患者没有其他确认的突变，并且他的表型与小鼠中的P110δ缺陷是一致的(Jou等人Int.J.Immunogenet.33：361-369(2006))。
已经开发出同种型选择性小分子化合物，其对所有I类PI3激酶同种型有不同的成效(Ito等人J.Pharm.Exp.Therapeut.，321：1-8(2007))。针对α的抑制剂是需要的，因为已经在数种实体肿瘤中鉴定出p110α的突变；例如，α的倍增突变与50％的卵巢癌、宫颈癌、肺癌和乳腺癌关联，并且已被描述了在50％以上的肠癌和25％以上的乳腺癌中的活化突变(Hennessy等人Nature Reviews，4：988-1004(2005))。Yamanouchi已经开发出同等强力地抑制α和δ并且相对于β和γ分别具有8和28倍选择性的化合物YM-024(Ito等人J.Pharm.Exp.Therapeut.，321：1-8(2007))。
P110β涉及血栓形成(Jackson等人Nature Med.11：507-514(2005))，并且对这种同种型有特异性的小分子抑制剂之后被认为适合于治疗凝血病症(TGX-221：对于β是0.007uM；选择性是δ的14倍，选择性超过γ和α的500倍)(Ito等人J.Pharm.Exp.Therapeut.，321：1-8(2007))。
数个小组正在开发作为用于自身免疫性疾病的免疫抑制剂的针对p110γ的选择性化合物(Rueckle等人Nature Reviews，5：903-918(2006))。值得注意的是，AS 605240已被证明在小鼠类风湿性关节炎的模型中是有效的(Camps等人Nature Medicine，11：936-943(2005))，并且在系统性红斑狼疮的模型中延迟疾病的发作(Barber等人NatureMedicine，11：933-935(205))。
δ-选择性抑制剂最近已被描述。选择性最强的化合物包括喹唑啉酮嘌吟抑制剂(PIK39和IC87114)。IC87114在高纳摩尔范围(三位数)内抑制p110δ，并且选择性大于针对p110α的选择性的100倍，是针对p110β的选择性的52倍，但是对p110γ缺乏选择性(大约8倍)。它对测试的任何蛋白激酶都不显示活性(Knight等人Cell，125：733-747(2006))。使用δ-选择性化合物或遗传基因改造小鼠(p110δD910A)证明，除了在B和T细胞活化中起关键作用以外，δ还部分涉及嗜中性粒细胞迁移和致敏嗜中性粒细胞呼吸爆发，并且导致抗原-IgE介导的肥大细胞脱粒的部分阻断(Condliffe等人Blood，106：1432-1440(2005)；Ali等人Nature，431：1007-1011(2002))。因此，p110δ是作为许多关键炎症性反应的重要调节剂出现的，所述炎症性反应还已知参与异常炎症性病状，包括但不限于自身免疫性疾病和过敏症。为了证实这一观点，已经从使用基因工具和药剂的研究中获得不断增加的p110δ靶标验证数据。因此，使用δ-选择性化合物IC 87114和p110δD910A小鼠，Ali等人(Nature，431：1007-1011(2002))已经证明δ在鼠类过敏性疾病模型中起着关键作用。在不存在功能δ的情况下，被动皮肤过敏反应(PCA)显著减少并且可以归因于抗原-IgE诱导的肥大细胞活化和脱粒的减少。另外，在使用卵清蛋白诱导的气道炎症的鼠类哮喘模型中，用IC 87114抑制δ已被证明显著改善炎症和疾病(Lee等人FASEB，20：455-465(2006)。不同组使用相同的p110δD910A突变小鼠过敏气道炎症模型中证实了利用化合物的这些数据(Nashed等人Eur.J.Immunol.37：416-424(2007))。
需要进一步表征PI3Kδ在炎症环境和自身免疫性环境中的功能。而且，我们对PI3Kδ的理解要求进一步弄清p110δ与其调节亚基以及与该细胞中的其他蛋白质的结构相互作用。还需要更具效力和选择性或特异性的PI3Kδ抑制剂，以便避免与同工酶p110α(胰岛素信号传导)和β(血小板活化)的活性相关的潜在毒性。特别地，需要选择性或特异性PI3Kδ抑制剂来进一步探索这种同工酶的作用以及开发调节这种同工酶的活性的优良药物。
发明概要
本发明包含具有如下通式的一类新化合物：
Figure BDA00002500618800091
其适用于抑制人PI3Kδ的生物活性。本发明的另一方面在于提供选择性地抑制PI3Kδ，同时对其他PI3K同种型具有相对低的抑制效力的化合物。本发明的另一方面在于提供表征人PI3Kδ的功能的方法。本发明的另一方面在于提供选择性地调节人PI3Kδ活性，并由此促进由PI3Kδ功能障碍介导的疾病的医学治疗的方法。本领域普通技术人员将很容易明了本发明的其他方面和优点。
详述
本发明的一方面涉及具有如下结构的化合物：
Figure BDA00002500618800101
或其任何药学上可接受的盐，其中：
X1为C(R10)或N；
X2为C(R12)或N；
X3为C或N；
X4为C或N；
X5为C或N；
X6为C或N；其中X3、X4、X5和X6中的至少两个是C；
Y为N(R8)、O或S；
Z为S、O，或NR11；
n为0、1、2或3；
R1为直接键接、C1-4烷基连接、OC1-2烷基连接、C1-2烷基O连接或O-连接的饱和、部分饱和或不饱和的3-、4-、5-、6-或7-元单环或者8-、9-、10-或11-元双环，所述环含有0、1、2、3或4个选自N、O和S的原子，但是含有不超过一个的O或S原子，并且所述环被0、1、2或3个独立地选自以下的取代基取代：卤代、C1-6烷基、C1-4卤代烷基、氰基、硝基、-C(＝O)Ra、-C(＝O)ORa、-C(＝O)NRaRa、-C(＝NRa)NRaRa、-ORa、-OC(＝O)Ra、-OC(＝O)NRaRa、-OC(＝O)N(Ra)S(＝O)2Ra、-OC2-6烷基NRaRa、-OC2-6烷基ORa、-SRa、-S(＝O)Ra、-S(＝O)2Ra、-S(＝O)2NRaRa、-S(＝O)2N(Ra)C(＝O)Ra、-S(＝O)2N(Ra)C(＝O)ORa、-S(＝O)2N(Ra)C(＝O)NRaRa、-NRaRa、-N(Ra)C(＝O)Ra、-N(Ra)C(＝O)ORa、-N(Ra)C(＝O)NRaRa、-N(Ra)C(＝NRa)NRaRa、-N(Ra)S(＝O)2Ra、-N(Ra)S(＝O)2NRaRa、-NRaC2-6烷基NRaRa和-NRaC2-6烷基ORa；其中该环的可用碳原子另外被0、1或2个氧代或硫代基团取代；并且其中该环另外被0或1个饱和5-或6-元单环取代，所述饱和5-或6-元单环含有1、2、3或4个选自N、O和S的原子，但是含有不超过一个的O或S原子，并且所述饱和5-或6-元单环被0、1、2或3个独立地选自卤代、C1-6烷基、C1-4卤代烷基和氰基的取代基取代；或者R1为被1或2个选自以下的取代基取代的C1-4烷基：氰基、硝基、-C(＝O)Ra、-C(＝O)ORa、-C(＝O)NRaRa、-C(＝NRa)NRaRa、-ORa、-OC(＝O)Ra、-OC(＝O)NRaRa、-OC(＝O)N(Ra)S(＝O)2Ra、-OC2-6烷基NRaRa、-OC2-6烷基ORa、-SRa、-S(＝O)Ra、-S(＝O)2Ra、-S(＝O)2NRaRa、-S(＝O)2N(Ra)C(＝O)Ra、-S(＝O)2N(Ra)C(＝O)ORa、-S(＝O)2N(Ra)C(＝O)NRaRa、-NRaRa、-N(Ra)C(＝O)Ra、-N(Ra)C(＝O)ORa、-N(Ra)C(＝O)NRaRa、-N(Ra)C(＝NRa)NRaRa、-N(Ra)S(＝O)2Ra、-N(Ra)S(＝O)2NRaRa、-NRaC2-6烷基NRaRa和-NRaC2-6烷基ORa；
R2选自H、卤代、C1-6烷基、C1-4卤代烷基、氰基、硝基、ORa、NRaRa、-C(＝O)Ra、-C(＝O)ORa、-C(＝O)NRaRa、-C(＝NRa)NRaRa、-S(＝O)Ra、-S(＝O)2Ra、-S(＝O)2NRaRa、-S(＝O)2N(Ra)C(＝O)Ra、-S(＝O)2N(Ra)C(＝O)ORa、-S(＝O)2N(Ra)C(＝O)NRaRa；
R3选自H、卤代、硝基、氰基、C1-4烷基、OC1-4烷基、OC1-4卤代烷基、NHC1-4烷基、N(C1-4烷基)C1-4烷基、C1-4卤代烷基、-C(＝O)ORa、-C(＝O)NRaRa、-C(＝NRa)NRaRa、-ORa、-OC(＝O)Ra、-OC(＝O)NRaRa、-OC(＝O)N(Ra)S(＝O)2Ra、-OC2-6烷基NRaRa、-OC2-6烷基ORa、-SRa、-S(＝O)Ra、-S(＝O)2Ra、-S(＝O)2NRaRa、-S(＝O)2N(Ra)C(＝O)Ra、-S(＝O)2N(Ra)C(＝O)ORa、-S(＝O)2N(Ra)C(＝O)NRaRa、-NRaRa、-N(Ra)C(＝O)Ra、-N(Ra)C(＝O)ORa、-N(Ra)C(＝O)NRaRa、-N(Ra)C(＝NRa)NRaRa、-N(Ra)S(＝O)2Ra、-N(Ra)S(＝O)2NRaRa、-NRaC2-6烷基NRaRa和-NRaC2-6烷基ORa；或者R3为不饱和5-、6-或7-元单环，所述环含有0、1、2、3或4个选自N、O和S的原子，但是含有不超过一个的O或S，并且所述环被0、1、2或3个选自以下的取代基取代：卤代、C1-4烷基、C1-3卤代烷基、-OC1-4烷基、-NH2、-NHC1-4烷基、-N(C1-4烷基)C1-4烷基；
R4在各情况下均独立地为卤代、硝基、氰基、C1-4烷基、OC1-4烷基、OC1-4卤代烷基、NHC1-4烷基、N(C1-4烷基)C1-4烷基或C1-4卤代烷基；
R5在各情况下均独立地为H、卤代、C1-6烷基、C1-4卤代烷基，或被1、2或3个选自以下的取代基取代的C1-6烷基：卤代、氰基、OH、OC1-4烷基、C1-4烷基、C1-3卤代烷基、OC1-4烷基、NH2、NHC1-4烷基、N(C1-4烷基)C1-4烷基；或者两个R5基团一起形成被0、1、2或3个选自以下的取代基取代的C3-6螺烷基：卤代、氰基、OH、OC1-4烷基、C1-4烷基、C1-3卤代烷基、OC1-4烷基、NH2、NHC1-4烷基、N(C1-4烷基)C1-4烷基；
R6为H、卤代、NHR9或OH；
R7选自H、卤代、C1-4卤代烷基、氰基、硝基、-C(＝O)Ra、-C(＝O)ORa、-C(＝O)NRaRa、-C(＝NRa)NRaRa、-ORa、-OC(＝O)Ra、-OC(＝O)NRaRa、-OC(＝O)N(Ra)S(＝O)2Ra、-OC2-6烷基NRaRa、-OC2-6烷基ORa、-SRa、-S(＝O)Ra、-S(＝O)2Ra、-S(＝O)2NRaRa、-S(＝O)2N(Ra)C(＝O)Ra、-S(＝O)2N(Ra)C(＝O)ORa、-S(＝O)2N(Ra)C(＝O)NRaRa、-NRaRa、-N(Ra)C(＝O)Ra、-N(Ra)C(＝O)ORa、-N(Ra)C(＝O)NRaRa、-N(Ra)C(＝NRa)NRaRa、-N(Ra)S(＝O)2Ra、-N(Ra)S(＝O)2NRaRa、-NRaC2-6烷基NRaRa、-NRaC2-6烷基ORa和C1-6烷基，其中该C1-6烷基被0、1、2或3个选自以下的取代基取代：卤代、C1-4卤代烷基、氰基、硝基、-C(＝O)Ra、-C(＝O)ORa、-C(＝O)NRaRa、-C(＝NRa)NRaRa、-ORa、-OC(＝O)Ra、-OC(＝O)NRaRa、-OC(＝O)N(Ra)S(＝O)2Ra、-OC2-6烷基NRaRa、-OC2-6烷基ORa、-SRa、-S(＝O)Ra、-S(＝O)2Ra、-S(＝O)2NRaRa、-S(＝O)2N(Ra)C(＝O)Ra、-S(＝O)2N(Ra)C(＝O)ORa、-S(＝O)2N(Ra)C(＝O)NRaRa、-NRaRa、-N(Ra)C(＝O)Ra、-N(Ra)C(＝O)ORa、-N(Ra)C(＝O)NRaRa、-N(Ra)C(＝NRa)NRaRa、-N(Ra)S(＝O)2Ra、-N(Ra)S(＝O)2NRaRa、-NRaC2-6烷基NRaRa和-NRaC2-6烷基ORa，并且该C1-6烷基另外被0或1个饱和、部分饱和或不饱和的5-、6-或7-元单环取代，所述环含有0、1、2、3或4个选自N、O和S的原子，但是含有不超过一个的O或S，其中该环的可用碳原子被0、1或2个氧代或硫代基团取代，其中该环被0、1、2或3个独立地选自以下的取代基取代：卤代、硝基、氰基、C1-4烷基、OC1-4烷基、OC1-4卤代烷基、NHC1-4烷基、N(C1-4烷基)C1-4烷基和C1-4卤代烷基；或者R7和R8一起形成-C＝N-桥，其中该碳原子被H、卤代、氰基、或者含有0、1、2、3或4个选自N、O和S的原子，但是含有不超过一个的O或S的饱和、部分饱和或不饱和的5-、6-或7-元单环取代，其中该环的可用碳原子被0、1或2个氧代或硫代基团取代，其中该环被0、1、2、3或4个选自以下的取代基取代：卤代、C1-6烷基、C1-4卤代烷基、氰基、硝基、-C(＝O)Ra、-C(＝O)ORa、-C(＝O)NRaRa、-C(＝NRa)NRaRa、-ORa、-OC(＝O)Ra、-OC(＝O)NRaRa、-OC(＝O)N(Ra)S(＝O)2Ra、-OC2-6烷基NRaRa、-OC2-6烷基ORa、-SRa、-S(＝O)Ra、-S(＝O)2Ra、-S(＝O)2NRaRa、-S(＝O)2N(Ra)C(＝O)Ra、-S(＝O)2N(Ra)C(＝O)ORa、-S(＝O)2N(Ra)C(＝O)NRaRa、-NRaRa、-N(Ra)C(＝O)Ra、-N(Ra)C(＝O)ORa、-N(Ra)C(＝O)NRaRa、-N(Ra)C(＝NRa)NRaRa、-N(Ra)S(＝O)2Ra、-N(Ra)S(＝O)2NRaRa、-NRaC2-6烷基NRaRa和-NRaC2-6烷基ORa；或者R7和R9一起形成-N＝C-桥，其中该碳原子被H、卤代、C1-6烷基、C1-4卤代烷基、氰基、硝基、ORa、NRaRa、-C(＝O)Ra、-C(＝O)ORa、-C(＝O)NRaRa、-C(＝NRa)NRaRa、-S(＝O)Ra、-S(＝O)2Ra、-S(＝O)2NRaRa取代；
R8为H或C1-6烷基；
R9为H、C1-6烷基或C1-4卤代烷基；
R10为H、卤代、C1-3烷基、C1-3卤代烷基或氰基；
R11为H或C1-4烷基；
R12为H或C1-4烷基；
Ra在各情况下均独立地为H或Rb；以及
Rb在各情况下均独立地为苯基、苄基或C1-6烷基，该苯基、苄基和C1-6烷基被0、1、2或3个选自以下的取代基取代：卤代、C1-4烷基、C1-3卤代烷基、-OC1-4烷基、-NH2、-NHC1-4烷基、-N(C1-4烷基)C1-4烷基。
在另一个实施方案连同上述和下述实施方案中，该结构是：
Figure BDA00002500618800141
在另一个实施方案连同上述和下述实施方案中，该结构是：
Figure BDA00002500618800151
在另一个实施方案连同上述和下述实施方案中，该结构是：
在另一个实施方案连同上述和下述实施方案中，X3为C；X4为C；X5为C；并且X6为C。
在另一个实施方案连同上述和下述实施方案中，X3为N；X4为C；X5为C；并且X6为C。
在另一个实施方案连同上述和下述实施方案中，X3为C；X4为N；X5为C；并且X6为C。
在另一个实施方案连同上述和下述实施方案中，X3为C；X4为C；X5为N；并且X6为C。
在另一个实施方案连同上述和下述实施方案中，X3为C；X4为C；X5为C；并且X6为N。
在另一个实施方案连同上述和下述实施方案中，R1为直接键接、C1-4烷基连接、OC1-2烷基连接、C1-2烷基O-连接或O-连接的饱和、部分饱和或不饱和的3-、4-、5-、6-或7-元单环或者8-、9-、10-或11-元双环，所述环含有0、1、2、3或4个选自N、O和S的原子，但是含有不超过一个的O或S原子，并且所述环被0、1、2或3个独立地选自以下的取代基取代：卤代、C1-6烷基、C1-4卤代烷基、氰基、硝基、-C(＝O)Ra、-C(＝O)ORa、-C(＝O)NRaRa、-C(＝NRa)NRaRa、-ORa、-OC(＝O)Ra、-OC(＝O)NRaRa、-OC(＝O)N(Ra)S(＝O)2Ra、-OC2-6烷基NRaRa、-OC2-6烷基ORa、-SRa、-S(＝O)Ra、-S(＝O)2Ra、-S(＝O)2NRaRa、-S(＝O)2N(Ra)C(＝O)Ra、-S(＝O)2N(Ra)C(＝O)ORa、-S(＝O)2N(Ra)C(＝O)NRaRa、-NRaRa、-N(Ra)C(＝O)Ra、-N(Ra)C(＝O)ORa、-N(Ra)C(＝O)NRaRa、-N(Ra)C(＝NRa)NRaRa、-N(Ra)S(＝O)2Ra、-N(Ra)S(＝O)2NRaRa、-NRaC2-6烷基NRaRa和-NRaC2-6烷基ORa；其中该环的有用碳原子另外被0、1或2个氧代或硫代基团取代；并且其中该环另外被0或1个饱和5-或6-元单环取代，所述饱和5-或6-元单环含有1、2、3或4个选自N、O和S的原子，但是含有不超过一个的O或S原子，并且所述饱和5-或6-元单环被0、1、2或3个独立地选自以下的取代基取代：卤代、C1-6烷基、C1-4卤代烷基和氰基。
在另一个实施方案连同上述和下述实施方案中，R1为直接键接、C1-4烷基连接、OC1-2烷基连接、C1-2烷基O-连接或O-连接的饱和、部分饱和或不饱和3-、4-、5-、6-或7-元单环或者8-、9-、10-或11-元双环，该环含有0、1、2、3或4个选自N、O和S的原子，但是含有不超过一个的O或S原子，并且该环被0、1、2或3个独立地选自以下的取代基取代：卤代、C1-6烷基、C1-4卤代烷基、氰基、硝基、-C(＝O)Ra、-C(＝O)ORa、-C(＝O)NRaRa、-C(＝NRa)NRaRa、-ORa、-OC(＝O)Ra、-OC(＝O)NRaRa、-OC(＝O)N(Ra)S(＝O)2Ra、-OC2-6烷基NRaRa、-OC2-6烷基ORa、-SRa、-S(＝O)Ra、-S(＝O)2Ra、-S(＝O)2NRaRa、-S(＝O)2N(Ra)C(＝O)Ra、-S(＝O)2N(Ra)C(＝O)ORa、-S(＝O)2N(Ra)C(＝O)NRaRa、-NRaRa、-N(Ra)C(＝O)Ra、-N(Ra)C(＝O)ORa、-N(Ra)C(＝O)NRaRa、-N(Ra)C(＝NRa)NRaRa、-N(Ra)S(＝O)2Ra、-N(Ra)S(＝O)2NRaRa、-NRaC2-6烷基NRaRa和-NRaC2-6烷基ORa；其中该环的有用碳原子另外被0、1或2个氧代或硫代基团取代；并且其中该环另外被饱和5-或6-元单环取代，所述饱和5-或6-元单环含有1、2、3或4个选自N、O和S的原子，但是含有不超过一个的O或S原子，并且所述饱和5-或6元单环被0、1、2或3个独立地选自以下的取代基取代：卤代、C1-6烷基、C1-4卤代烷基和氰基。
在另一个实施方案连同上述和下述实施方案中，R1为直接键接、C1-4烷基连接、OC1-2烷基连接、C1-2烷基O-连接或O-连接的饱和、部分饱和或不饱和3-、4-、5-、6-或7-元单环或者8-、9-、10-或11-元双环，该环含有0、1、2、3或4个选自N、O和S的原子，但是含有不超过一个的O或S原子，并且该环被0、1、2或3个独立地选自以下的取代基取代：卤代、C1-6烷基、C1-4卤代烷基、氰基、硝基、-C(＝O)Ra、-C(＝O)ORa、-C(＝O)NRaRa、-C(＝NRa)NRaRa、-ORa、-OC(＝O)Ra、-OC(＝O)NRaRa、-OC(＝O)N(Ra)S(＝O)2Ra、-OC2-6烷基NRaRa、-OC2-6烷基ORa、-SRa、-S(＝O)Ra、-S(＝O)2Ra、-S(＝O)2NRaRa、-S(＝O)2N(Ra)C(＝O)Ra、-S(＝O)2N(Ra)C(＝O)ORa、-S(＝O)2N(Ra)C(＝O)NRaRa、-NRaRa、-N(Ra)C(＝O)Ra、-N(Ra)C(＝O)ORa、-N(Ra)C(＝O)NRaRa、-N(Ra)C(＝NRa)NRaRa、-N(Ra)S(＝O)2Ra、-N(Ra)S(＝O)2NRaRa、-NRaC2-6烷基NRaRa和-NRaC2-6烷基ORa；其中该环的有用碳原子另外被0、1或2个氧代或硫代基团取代；并且其中该环另外被苯基或吡啶基取代，该苯基或吡啶基中的任一者均被0、1、2或3个独立地选自以下的取代基取代：卤代、C1-6烷基、C1-4卤代烷基和氰基。
在另一个实施方案连同上述和下述实施方案中，R1为直接键接的苯基或吡啶基，该苯基或吡啶基中的任一者均被0、1、2或3个独立地选自以下的取代基取代：卤代、C1-6烷基、C1-4卤代烷基、氰基、硝基、-C(＝O)Ra、-C(＝O)ORa、-C(＝O)NRaRa、-C(＝NRa)NRaRa、-ORa、-OC(＝O)Ra、-OC(＝O)NRaRa、-OC(＝O)N(Ra)S(＝O)2Ra、-OC2-6烷基NRaRa、-OC2-6烷基ORa、-SRa、-S(＝O)Ra、-S(＝O)2Ra、-S(＝O)2NRaRa、-S(＝O)2N(Ra)C(＝O)Ra、-S(＝O)2N(Ra)C(＝O)ORa、-S(＝O)2N(Ra)C(＝O)NRaRa、-NRaRa、-N(Ra)C(＝O)Ra、-N(Ra)C(＝O)ORa、-N(Ra)C(＝O)NRaRa、-N(Ra)C(＝NRa)NRaRa、-N(Ra)S(＝O)2Ra、-N(Ra)S(＝O)2NRaRa、-NRaC2-6烷基NRaRa和-NRaC2-6烷基ORa。
在另一个实施方案连同上述和下述实施方案中，R1为直接键接的苯基或吡啶基，该苯基或吡啶基中的任一个均被1、2或3个独立地选自以下的取代基取代：卤代、C1-6烷基、C1-4卤代烷基、氰基、硝基、-C(＝O)Ra、-C(＝O)ORa、-C(＝O)NRaRa、-C(＝NRa)NRaRa、-ORa、-OC(＝O)Ra、-OC(＝O)NRaRa、-OC(＝O)N(Ra)S(＝O)2Ra、-OC2-6烷基NRaRa、-OC2-6烷基ORa、-SRa、-S(＝O)Ra、-S(＝O)2Ra、-S(＝O)2NRaRa、-S(＝O)2N(Ra)C(＝O)Ra、-S(＝O)2N(Ra)C(＝O)ORa、-S(＝O)2N(Ra)C(＝O)NRaRa、-NRaRa、-N(Ra)C(＝O)Ra、-N(Ra)C(＝O)ORa、-N(Ra)C(＝O)NRaRa、-N(Ra)C(＝NRa)NRaRa、-N(Ra)S(＝O)2Ra、-N(Ra)S(＝O)2NRaRa、-NRaC2-6烷基NRaRa和-NRaC2-6烷基ORa。
在另一个实施方案连同上述和下述实施方案中，R1为直接键接的苯基或吡啶基。
在另一个实施方案连同上述和下述实施方案中，R1为直接键接的苯基或吡啶基，该苯基或吡啶基中的任一个均被1、2或3个独立地选自以下的取代基取代：卤代、-SRa、-S(＝O)Ra和-S(＝O)2Ra。
在另一个实施方案连同上述和下述实施方案中，R1为直接键接的苯基或吡啶基，该苯基或吡啶基中的任一者均被1、2或3个独立地选自以下的取代基取代：卤代、C1-6烷基、C1-4卤代烷基、氰基、硝基、-C(＝O)Ra、-C(＝O)ORa、-C(＝O)NRaRa、-C(＝NRa)NRaRa、-ORa、-OC(＝O)Ra、-OC(＝O)NRaRa、-OC(＝O)N(Ra)S(＝O)2Ra、-OC2-6烷基NRaRa、-OC2-6烷基ORa、-SRa、-S(＝O)Ra、-S(＝O)2Ra、-S(＝O)2NRaRa、-S(＝O)2N(Ra)C(＝O)Ra、-S(＝O)2N(Ra)C(＝O)ORa、-S(＝O)2N(Ra)C(＝O)NRaRa、-NRaRa、-N(Ra)C(＝O)Ra、-N(Ra)C(＝O)ORa、-N(Ra)C(＝O)NRaRa、-N(Ra)C(＝NRa)NRaRa、-N(Ra)S(＝O)2Ra、-N(Ra)S(＝O)2NRaRa、-NRaC2-6烷基NRaRa和-NRaC2-6烷基ORa。
在另一个实施方案连同上述和下述实施方案中，R1为被1或2个选自以下的取代基取代的C1-4烷基：氰基、硝基、-C(＝O)Ra、-C(＝O)ORa、-C(＝O)NRaRa、-C(＝NRa)NRaRa、-ORa、-OC(＝O)Ra、-OC(＝O)NRaRa、-OC(＝O)N(Ra)S(＝O)2Ra、-OC2-6烷基NRaRa、-OC2-6烷基ORa、-SRa、-S(＝O)Ra、-S(＝O)2Ra、-S(＝O)2NRaRa、-S(＝O)2N(Ra)C(＝O)Ra、-S(＝O)2N(Ra)C(＝O)ORa、-S(＝O)2N(Ra)C(＝O)NRaRa、-NRaRa、-N(Ra)C(＝O)Ra、-N(Ra)C(＝O)ORa、-N(Ra)C(＝O)NRaRa、-N(Ra)C(＝NRa)NRaRa、-N(Ra)S(＝O)2Ra、-N(Ra)S(＝O)2NRaRa、-NRaC2-6烷基NRaRa和-NRaC2-6烷基ORa。
在另一个实施方案连同上述和下述实施方案中，R1为被-ORa取代的C2-4烷基。
在另一个实施方案连同上述和下述实施方案中，R1为直接键接、C1-4烷基连接、OC1-2烷基连接、C1-2烷基O-连接或O-连接的环丙基，该环丙基被0、1、2或3个独立地选自以下的取代基取代：卤代、C1-6烷基、C1-4卤代烷基、氰基、硝基、-C(＝O)Ra、-C(＝O)ORa、-C(＝O)NRaRa、-C(＝NRa)NRaRa、-ORa、-OC(＝O)Ra、-OC(＝O)NRaRa、-OC(＝O)N(Ra)S(＝O)2Ra、-OC2-6烷基NRaRa、-OC2-6烷基ORa、-SRa、-S(＝O)Ra、-S(＝O)2Ra、-S(＝O)2NRaRa、-S(＝O)2N(Ra)C(＝O)Ra、-S(＝O)2N(Ra)C(＝O)ORa、-S(＝O)2N(Ra)C(＝O)NRaRa、-NRaRa、-N(Ra)C(＝O)Ra、-N(Ra)C(＝O)ORa、-N(Ra)C(＝O)NRaRa、-N(Ra)C(＝NRa)NRaRa、-N(Ra)S(＝O)2Ra、-N(Ra)S(＝O)2NRaRa、-NRaC2-6烷基NRaRa和-NRaC2-6烷基ORa；其中该环的有用碳原子另外被0、1或2个氧代或硫代基团取代；并且其中该环另外被0或1个饱和5-或6-元单环取代，所述饱和5-或6-元单环含有1、2、3或4个选自N、O和S的原子，但是含有不超过一个的O或S原子，并且所述饱和5-或6-元单环被0、1、2或3个独立地选自以下的取代基取代：卤代、C1-6烷基、C1-4卤代烷基和氰基。
在另一个实施方案连同上述和下述实施方案中，R1为环丙基。
在另一个实施方案连同上述和下述实施方案中，R1为环丙基甲基。
在另一个实施方案连同上述和下述实施方案中，X1为N。
在另一个实施方案连同上述和下述实施方案中，X2为N。
在另一个实施方案连同上述和下述实施方案中，X2为C(R12)。
在另一个实施方案连同上述和下述实施方案中，Y为N(R8)。
在另一个实施方案连同上述和下述实施方案中，R1为直接键接的饱和、部分饱和或不饱和5-、6-或7-元单环或者8-、9-、10-或11-元双环，该环含有0、1、2、3或4个选自N、O和S的原子，但是含有不超过一个的O或S原子，并且该环被0、1、2或3个独立地选自以下的取代基取代：卤代、C1-6烷基、C1-4卤代烷基、氰基、硝基、-C(＝O)Ra、-C(＝O)ORa、-C(＝O)NRaRa、-C(＝NRa)NRaRa、-ORa、-OC(＝O)Ra、-OC(＝O)NRaRa、-OC(＝O)N(Ra)S(＝O)2Ra、-OC2-6烷基NRaRa、-OC2-6烷基ORa、-SRa、-S(＝O)Ra、-S(＝O)2Ra、-S(＝O)2NRaRa、-S(＝O)2N(Ra)C(＝O)Ra、-S(＝O)2N(Ra)C(＝O)ORa、-S(＝O)2N(Ra)C(＝O)NRaRa、-NRaRa、-N(Ra)C(＝O)Ra、-N(Ra)C(＝O)ORa、-N(Ra)C(＝O)NRaRa、-N(Ra)C(＝NRa)NRaRa、-N(Ra)S(＝O)2Ra、-N(Ra)S(＝O)2NRaRa、-NRaC2-6烷基NRaRa和-NRaC2-6烷基ORa，其中该环的有用碳原子另外被0、1或2个氧代或硫代基团取代。
在另一个实施方案连同上述和下述实施方案中，R1为直接键接的不饱和6-元单环，该环含有0、1、2、3或4个选自N、O和S的原子，但是含有不超过一个的O或S原子，并且该环被0、1、2或3个独立地选自以下的取代基取代：卤代、C1-6烷基、C1-4卤代烷基、氰基、硝基、-C(＝O)Ra、-C(＝O)ORa、-C(＝O)NRaRa、-C(＝NRa)NRaRa、-ORa、-OC(＝O)Ra、-OC(＝O)NRaRa、-OC(＝O)N(Ra)S(＝O)2Ra、-OC2-6烷基NRaRa、-OC2-6烷基ORa、-SRa、-S(＝O)Ra、-S(＝O)2Ra、-S(＝O)2NRaRa、-S(＝O)2N(Ra)C(＝O)Ra、-S(＝O)2N(Ra)C(＝O)ORa、-S(＝O)2N(Ra)C(＝O)NRaRa、-NRaRa、-N(Ra)C(＝O)Ra、-N(Ra)C(＝O)ORa、-N(Ra)C(＝O)NRaRa、-N(Ra)C(＝NRa)NRaRa、-N(Ra)S(＝O)2Ra、-N(Ra)S(＝O)2NRaRa、-NRaC2-6烷基NRaRa和-NRaC2-6烷基ORa。
在另一个实施方案连同上述和下述实施方案中，R1为苯基、吡啶基或嘧啶基，它们都被0、1、2或3个独立地选自以下的取代基取代：卤代、C1-6烷基、C1-4卤代烷基、氰基、硝基、-C(＝O)Ra、-C(＝O)ORa、-C(＝O)NRaRa、-C(＝NRa)NRaRa、-ORa、-OC(＝O)Ra、-OC(＝O)NRaRa、-OC(＝O)N(Ra)S(＝O)2Ra、-OC2-6烷基NRaRa、-OC2-6烷基ORa、-SRa、-S(＝O)Ra、-S(＝O)2Ra、-S(＝O)2NRaRa、-S(＝O)2N(Ra)C(＝O)Ra、-S(＝O)2N(Ra)C(＝O)ORa、-S(＝O)2N(Ra)C(＝O)NRaRa、-NRaRa、-N(Ra)C(＝O)Ra、-N(Ra)C(＝O)ORa、-N(Ra)C(＝O)NRaRa、-N(Ra)C(＝NRa)NRaRa、-N(Ra)S(＝O)2Ra、-N(Ra)S(＝O)2NRaRa、-NRaC2-6烷基NRaRa和-NRaC2-6烷基ORa。
在另一个实施方案连同上述和下述实施方案中，R1为苯基，该苯基被0、1、2或3个独立地选自以下的取代基取代：卤代、C1-6烷基、C1-4卤代烷基、氰基、硝基、-C(＝O)Ra、-C(＝O)ORa、-C(＝O)NRaRa、-C(＝NRa)NRaRa、-ORa、-OC(＝O)Ra、-OC(＝O)NRaRa、-OC(＝O)N(Ra)S(＝O)2Ra、-OC2-6烷基NRaRa、-OC2-6烷基ORa、-SRa、-S(＝O)Ra、-S(＝O)2Ra、-S(＝O)2NRaRa、-S(＝O)2N(Ra)C(＝O)Ra、-S(＝O)2N(Ra)C(＝O)ORa、-S(＝O)2N(Ra)C(＝O)NRaRa、-NRaRa、-N(Ra)C(＝O)Ra、-N(Ra)C(＝O)ORa、-N(Ra)C(＝O)NRaRa、-N(Ra)C(＝NRa)NRaRa、-N(Ra)S(＝O)2Ra、-N(Ra)S(＝O)2NRaRa、-NRaC2-6烷基NRaRa和-NRaC2-6烷基ORa。
在另一个实施方案连同上述和下述实施方案中，R1为苯基、吡啶基或嘧啶基，它们都被1、2或3个独立地选自卤代、C1-6烷基和C1-4卤代烷基的取代基取代。
在另一个实施方案连同上述和下述实施方案中，R1为苯基，该苯基被1、2或3个独立地选自卤代、C1-6烷基和C1-4卤代烷基的取代基取代。
在另一个实施方案连同上述和下述实施方案中，R2为H。
在另一个实施方案连同上述和下述实施方案中，R3选自H和卤代。
在另一个实施方案连同上述和下述实施方案中，R3选自卤代、硝基、氰基、C1-4烷基、OC1-4烷基、OC1-4卤代烷基、NHC1-4烷基、N(C1-4烷基)C1-4烷基、C1-4卤代烷基、-C(＝O)ORa、-C(＝O)NRaRa、-C(＝NRa)NRaRa、-ORa、-OC(＝O)Ra、-OC(＝O)NRaRa、-OC(＝O)N(Ra)S(＝O)2Ra、-OC2-6烷基NRaRa、-OC2-6烷基ORa、-SRa、-S(＝O)Ra、-S(＝O)2Ra、-S(＝O)2NRaRa、-S(＝O)2N(Ra)C(＝O)Ra、-S(＝O)2N(Ra)C(＝O)ORa、-S(＝O)2N(Ra)C(＝O)NRaRa、-NRaRa、-N(Ra)C(＝O)Ra、-N(Ra)C(＝O)ORa、-N(Ra)C(＝O)NRaRa、-N(Ra)C(＝NRa)NRaRa、-N(Ra)S(＝O)2Ra、-N(Ra)S(＝O)2NRaRa、-NRaC2-6烷基NRaRa和-NRaC2-6烷基ORa。
在另一个实施方案连同上述和下述实施方案中，R5在各情况下均独立地为H、卤代、C1-6烷基，和C1-4卤代烷基。
在另一个实施方案连同上述和下述实施方案中，一个R5为H，而另一个R5为C1-6烷基。
在另一个实施方案连同上述和下述实施方案中，一个R5为H，而另一个R5为甲基。
在另一个实施方案连同上述和下述实施方案中，一个R5为H，而另一个R5为(R)-甲基。
在另一个实施方案连同上述和下述实施方案中，一个R5为H，而另一个R5为(S)-甲基。
在另一个实施方案连同上述和下述实施方案中，R6为NHR9。
在另一个实施方案连同上述和下述实施方案中，R7为氰基。
在另一个实施方案连同上述和下述实施方案中，R7和R8一起形成-C＝N-桥，其中该碳原子被H、卤代、氰基，或者含有0、1、2、3或4个选自N、O和S的原子，但是含有不超过一个的O或S的饱和、部分饱和或不饱和的5-、6-或7-元单环取代，其中该环的可用碳原子被0、1或2个氧代或硫代基团取代，其中该环被0、1、2、3或4个选自以下的取代基取代：卤代、C1-6烷基、C1-4卤代烷基、氰基、硝基、-C(＝O)Ra、-C(＝O)ORa、-C(＝O)NRaRa、-C(＝NRa)NRaRa、-ORa、-OC(＝O)Ra、-OC(＝O)NRaRa、-OC(＝O)N(Ra)S(＝O)2Ra、-OC2-6烷基NRaRa、-OC2-6烷基ORa、-SRa、-S(＝O)Ra、-S(＝O)2Ra、-S(＝O)2NRaRa、-S(＝O)2N(Ra)C(＝O)Ra、-S(＝O)2N(Ra)C(＝O)ORa、-S(＝O)2N(Ra)C(＝O)NRaRa、-NRaRa、-N(Ra)C(＝O)Ra、-N(Ra)C(＝O)ORa、-N(Ra)C(＝O)NRaRa、-N(Ra)C(＝NRa)NRaRa、-N(Ra)S(＝O)2Ra、-N(Ra)S(＝O)2NRaRa、-NRaC2-6烷基NRaRa和-NRaC2-6烷基ORa。
在另一个实施方案连同上述和下述实施方案中，R7和R9一起形成-N＝C-桥，其中该碳原子被H、卤代、C1-6烷基、C1-4卤代烷基、氰基、硝基、ORa、NRaRa、-C(＝O)Ra、-C(＝O)ORa、-C(＝O)NRaRa、-C(＝NRa)NRaRa、-S(＝O)Ra、-S(＝O)2Ra、-S(＝O)2NRaRa取代。
在另一个实施方案连同上述和下述实施方案中，R7和R9一起形成-N＝C-桥，其中该碳原子被H或卤代取代。
在另一个实施方案连同上述和下述实施方案中，该结构具有如下通式：
Figure BDA00002500618800241
在另一个实施方案连同上述和下述实施方案中，该结构具有如下通式：
Figure BDA00002500618800242
在另一个实施方案连同上述和下述实施方案中，该结构具有如下通式：
Figure BDA00002500618800243
在另一个实施方案连同上述和下述实施方案中，该结构具有如下通式：
在另一个实施方案连同上述和下述实施方案中，该结构具有如下通式：
Figure BDA00002500618800252
在另一个实施方案连同上述和下述实施方案中，该结构具有如下通式：
Figure BDA00002500618800253
在另一个实施方案连同上述和下述实施方案中，该结构具有如下通式：
Figure BDA00002500618800261
在另一个实施方案连同上述和下述实施方案中，该结构具有如下通式：
Figure BDA00002500618800262
本发明的另一方面涉及治疗PI3K-介导的病状或病症的方法。
在某些实施方案中，PI3K-介导的病状或病症选自类风湿关节炎、关节强硬性脊椎炎、骨关节炎、牛皮癣关节炎、牛皮癣、炎症性疾病、和自身免疫性疾病。在其他实施方案中，PI3K-介导的病状或病症选自心脑血管疾病、动脉粥样硬化、高血压、深静脉血栓形成、中风、心肌梗死、不稳定型心绞痛、血栓栓塞、肺栓塞、溶栓疾病、急性动脉缺血、外周血栓性闭塞(peripheral thrombotic occlusion)，和冠状动脉疾病。在另一些其他实施方案中，PI3K-介导的病状或病症选自癌症、结肠癌、成胶质细胞瘤、子宫内膜癌、肝细胞癌、肺癌、黑素瘤、肾细胞癌、甲状腺癌、细胞淋巴瘤、淋巴组织增生性病症、小细胞肺癌、鳞状细胞肺癌、神经胶质瘤、乳腺癌、前列腺癌、卵巢癌、宫颈癌，和白血病。在又一个实施方案中，PI3K-介导的病状或病症选自II型糖尿病。在另一些其他实施方案中，PI3K-介导的病状或病症选自呼吸道疾病、支气管炎、哮喘，和慢性阻塞性肺疾病。在某些实施方案中，受试者是人。
本发明的另一方面涉及类风湿关节炎、关节强硬性脊椎炎、骨关节炎、牛皮癣关节炎、牛皮癣、炎症性疾病或自身免疫性疾病的治疗，所述治疗包括施用根据上述实施方案中的任一个实施方案的化合物的步骤。
本发明的另一方面涉及以下疾病的治疗：类风湿关节炎、关节强硬性脊椎炎、骨关节炎、牛皮癣关节炎、牛皮癣、炎症性疾病和自身免疫性疾病、炎性肠病、炎性眼病、炎症性或不稳定性膀胱病症、含炎症性成分的皮肤病、慢性炎症性病状、自身免疫性疾病、系统性红斑狼疮(SLE)、重症肌无力、类风湿关节炎、急性播散性脑脊髓炎、特发性血小板减少性紫癜、多发性硬化、舍格伦综合征(Sjoegren’ssyndrome)和自身免疫性溶血性贫血、过敏性病状和过敏症(hypersensitivity)，所述治疗包括施用根据上述或下述实施方案中的任一个实施方案的化合物的步骤。
本发明的另一方面涉及p110δ活性介导、依赖于p110δ活性或者与p110δ活性相关的癌症的治疗，所述治疗包括施用根据上述或下述实施方案中的任一个实施方案的化合物的步骤。
本发明的另一方面涉及选自以下的癌症的治疗：急性骨髓性白血病、骨髓增生异常综合征、脊髓增生性疾病、慢性骨髓性白血病、T-细胞急性成淋巴细胞白血病、B-细胞急性成淋巴细胞白血病、非霍奇金淋巴瘤、B-细胞淋巴瘤、实体瘤和乳腺癌，所述治疗包括施用根据上述或下述实施方案中的任一个实施方案的化合物的步骤。
本发明的另一方面涉及药物组合物，其包含根据上述实施方案中的任一个实施方案的化合物和药学上可接受的稀释剂或载体。‘
本发明的另一方面涉及根据上述实施方案中的任一个实施方案的化合物作为药剂的用途。
本发明的另一方面涉及根据上述实施方案中的任一个实施方案的化合物在制造用于治疗类风湿关节炎、关节强硬性脊椎炎、骨关节炎、牛皮癣关节炎、牛皮癣、炎症性疾病，和自身免疫性疾病的药剂中的用途。
本发明化合物一般可以具有数个不对称中心并且通常被描述为外消旋混合物形式。本发明意在包括外消旋混合物、部分外消旋混合物以及单独的对映体和非对映体。
除非另外说明，否则以下定义适用于存在于说明书和权利要求书中的术语：
“Cα-β烷基”意指包含处于支链、环状或直链关系或者这三种的任何组合的形式的最少α个、最多β个碳原子的烷基，其中α和β代表整数。在本章中描述的烷基也可以含有一个或两个双键或三键。C1-6烷基的实例包括，但不限于以下：
Figure BDA00002500618800281
“苯并基团”单独或组合时意指二价基C4H4＝，该二价基的一个表示法是-CH＝CH-CH＝CH-，当邻接另一个环时形成苯状环——例如四氢萘、吲哚等。
术语“氧代”和“硫代”分别代表基团＝O(如在羰基中)和＝S(如在硫代羰基中)。
“卤代”或“卤素”意指选自F、Cl、Br和I的卤素原子。
“CV-W卤代烷基”意指如上文描述的烷基，其中连接至烷基链的任何数目(至少一个)的氢原子被F、Cl、Br或I取代。
“杂环”意指包含至少一个碳原子和至少一个选自N、O和S的其他原子的环。存在于权利要求书中的杂环的实例包括，但不限于以下：
Figure BDA00002500618800291
“可用氮原子”是作为杂环的一部分并且通过两个单键连接(例如哌啶)，使得一个外部的键(external bond)能够被例如H或CH3取代的那些氮原子。
“药学上可接受的盐”意指通过常规方式制备的并且是本领域技术人员熟知的盐。该“药学上可接受的盐”包括无机酸和有机酸的碱式盐，所述无机酸和有机酸包括但不限于盐酸、氢溴酸、硫酸、磷酸、甲烷磺酸、乙烷磺酸、苹果酸、乙酸、草酸、酒石酸、柠檬酸、乳酸、富马酸、琥珀酸、马来酸、水杨酸、苯甲酸、苯乙酸、扁桃酸等。当本发明化合物包括酸性官能团(如羧基)时，那么适于羧基的药学上可接受的阳离子对是本领域技术人员熟知的，并且包括碱、碱土、铵和季铵阳离子等。对于“药学上可接受的盐”的另外的实例，参见下文和Berge等人，J.Pharn.Sci.66：1(1977)。
“饱和、部分饱和或不饱和”包括被氢饱和的取代基、完全未被氢饱和的取代基以及被氢部分饱和的取代基。
“离去基团”一般是指易于被诸如胺、硫醇或醇之类的亲核试剂置换的基团。此类离去基团是本领域熟知的。此类离去基团的实例包括，但不限于，N-羟基琥珀酰亚胺、N-羟基苯并三唑、卤化物、三氟甲磺酸酯、甲苯磺酸酯等。在适当的情况下本文指明优选的离去基团。
“保护基”一般是指用来防止选定的反应基(如羧基、氨基、羟基、巯基等)进行不希望的反应(如亲核反应、亲电反应、氧化反应、还原反应)的本领域熟知的基团。在适当的情况下本文指明优选的保护基。氨基保护基的实例包括，但不限于芳烷基、取代的芳烷基、环烯基烷基和取代的环烯基烷基、烯丙基、取代的烯丙基、酰基、烷氧基羰基、芳烷氧基羰基、甲硅烷基等。芳烷基的实例包括，但不限于可以任选被卤素、烷基、烷氧基、羟基、硝基、酰基氨基、酰基等取代的苄基、邻甲基苄基、三苯甲基和二苯甲基，以及盐如磷鎓盐和铵盐。芳基的实例包括苯基、萘基、茚满基(indanyl)、蒽基、9-(9-苯基芴基)、菲基、杜烯基(durenyl)等。环烯基烷基或取代的环烯基烷基的实例优选具有6-10个碳原子，包括但不限于环己烯基甲基等。适宜的酰基、烷氧基羰基和芳烷氧基羰基包括苄氧基羰基、叔丁氧基羰基、异丁氧基羰基、苯甲酰基、取代的苯甲酰基、丁酰基、乙酰基、三氟乙酰基、三氯乙酰基、邻苯二甲酰基等。混合的保护基可以用来保护相同的氨基，例如伯氨基可以用芳烷基和芳烷氧基羰基来保护。氨基保护基也可以与其连接的氮一起形成杂环，例如1，2-双(亚甲基)苯、邻苯二甲酰亚氨基、琥珀酰亚氨基、马来酰亚氨基等，并且其中这些杂环基可以进一步包含邻接的芳基和环烷基环。另外，该杂环基可以是单取代、二取代或三取代的，例如硝基邻苯二甲酰亚氨基。通过形成加成盐如盐酸盐、甲苯磺酸盐、三氟乙酸盐等，也可以保护氨基避免进行不希望的反应。许多氨基保护基也适合于保护羧基、羟基和巯基。例如，芳烷基。烷基也是用于保护羟基和巯基的合适基团，例如叔丁基。
甲硅烷基保护基是任选被一个或多个烷基、芳基和芳烷基取代的硅原子。适宜的甲硅烷基保护基包括，但不限于三甲基甲硅烷基、三乙基甲硅烷基、三异丙基甲硅烷基、叔丁基二甲基甲硅烷基、二甲基苯基甲硅烷基、1，2-双(二甲基甲硅烷基)苯、1，2-双(二甲基甲硅烷基)乙烷和二苯基甲基甲硅烷基。氨基的甲硅烷化提供单甲硅烷基氨基或二-甲硅烷基氨基。氨基醇化合物的甲硅烷化可以产生N，N，O-三甲硅烷基衍生物。通过以不连续的反应步骤或者在与醇基原位反应过程中用例如金属氢氧化物或氟化铵试剂处理，可以轻易地从甲硅烷基醚官能团中除去甲硅烷基官能团。适宜的甲硅烷基化剂是例如三甲基氯硅烷、叔丁基二甲基氯硅烷、苯基二甲基氯硅烷、二苯基甲基氯硅烷或其与咪唑或DMF的组合产品。胺的甲硅烷基化和除去甲硅烷基保护基的方法是本领域技术人员熟知的。由相应的氨基酸、氨基酸酰胺或氨基酸酯制备这些胺衍生物的方法是包括氨基酸/氨基酸酯或氨基醇化学在内的有机化学领域技术人员熟知的。
保护基是在不影响分子的剩余部分的条件下除去的。这些方法是本领域熟知的并且包括酸解和氢解等。优选的方法涉及除去保护基，例如通过在适宜的溶剂系统(例如醇、乙酸等或其混合物)中使用钯/碳氢解来除去苄氧基羰基。可以在适宜的溶剂系统(如二噁烷或二氯甲烷)中，使用无机酸或有机酸(例如HC1或三氟乙酸)，来除去叔丁氧基羰基保护基。可以容易地将所得氨基盐中和从而获得游离胺。可以在本领域技术人员熟知的水解和氢解条件下，除去羧基保护基(例如甲基、乙基、苄基、叔丁基、4-甲氧基苯基甲基等)。
应注意，本发明化合物可以含有可以互变异构形式存在的基团，例如环状和非环状的脒和胍基、杂原子取代的杂芳基(Y′＝O，S，NR)等，将其在以下实例中举例说明：
Figure BDA00002500618800321
本文虽然命名、描述、显示/或要求保护一种形式，但是意图在此种命名、描述、显示和/或权利要求中固有地包括所有互变异构形式。
本发明还涵盖本发明化合物的前药。前药是在将其施用给患者后，通过体内生理作用(例如水解、代谢等)而被化学修饰为本发明化合物的活性或无活性化合物。有关制备和使用前药的适用性和技术是本领域技术人员熟知的。对于涉及酯类的前药的一般论述参见Svensson and Tunek Drug Metabolism Reviews 165(1988)andBundgaard Design of Prodrugs，Elsevier(1985)。掩蔽的羧酸根阴离子的实例包括各种酯例如烷基(例如甲基、乙基)、环烷基(例如环己基)、芳烷基(例如苄基、对甲氧基苄基)和烷基羰基氧基烷基(例如新戊酰氧基甲基)。胺被封闭为芳基羰基氧基甲基取代的衍生物，其在体内被酯酶裂解而释放出游离药物和甲醛(Bungaard J.Med.Chem.2503(1989))。同样，含有酸性NH基团的药物例如咪唑、酰亚胺、吲哚等被N-酰基氧基甲基掩蔽(Bundgaard Design of Prodrugs，Elsevier(1985))。羟基被掩蔽为酯和醚。EP 039,051(Sloan and Little，4/11/81)公开了曼尼希碱异羟肟酸前药、其制备方法和应用。
说明书和权利要求书含有使用措辞“选自......和......”以及“是......或......”列出的基团(有时称为马库什基团)。当这种措辞在本申请中使用时，除非另有说明，否则它意指包括作为整体的基团，或其任何单个成员，或其任何亚组。使用这种措辞紧紧是为了简写的目的，而不是以任何方式限制根据需要排除单个元素或亚组。
本发明还包括同位素标记的化合物，其与本文列举的那些化合物相同，但是事实上一个或多个原子被具有不同于通常在自然界发现的原子质量或质量数的原子质量或质量数的原子所替代。可以掺入到本发明化合物中的同位素实例包括氢、碳、氮、氧、磷、氟和氯的同位素，如2H、3H、13C、14C、15N、16O、17O、31P、32P、35S、18F，和36Cl。
含有前述同位素和/或其他原子的其他同位素的本发明化合物在本发明的范围内。本发明的某些同位素标记的化合物，例如其中掺入有放射性同位素如3H和14C的那些可用于药物和/或底物组织分布测定。氚化，即，3H同位素，和碳-14，即14C同位素是特别优选的，因为它们容易制备和检测。进一步地，用较重同位素如氘，即2H取代可以提供由较高的代谢稳定性带来的某些治疗优势，例如，体内半衰期增加或剂量要求减少，因此可能在一些环境中是优选的。本发明的同位素标记的化合物一般可以通过用容易获得的同位素标记试剂代替非同位素标记试剂来制备。
实验
使用以下缩略语：
AcOH-     冰乙酸
aq.-      含水的
BINAP-    2，2’-双(二苯基膦基)-1，1’-联萘
concd.-   浓缩的
DCM-      二氯甲烷
DIEA-     N，N-二异丙基乙胺
DMF-      N，N-二甲基甲酰胺
DMS-      二甲基硫醚
EDC.HCl   N-(3-二甲基氨丙基)-N’-乙基碳二亚胺盐酸盐
eqv.-     当量
Et2O-        二乙醚
EtOAc-       乙酸乙酯
EtOH-        乙醇
h-           小时
min-         分钟
MeOH-        甲醇
MsCl-        甲烷磺酰氯
NaOAc-       乙酸钠
rt-          室温
satd.-       饱和的
TFA-         三氟乙酸
THF-         四氢呋喃
一般描述
下面使用的试剂和溶剂可以从商业来源获得。1H-NMR谱是在Bruker 400MHz和500MHz NMR波谱仪上记录的。显著峰以下列顺序列表：多重性(s，单峰；d，双峰；t，三重峰；q，四重峰；m，多重峰；brs，宽单峰)，偶合常数(以赫兹(Hz)为单位)和质子数。质谱结果以质量与电荷的比例记录，后面是每一离子的相对丰度(在括号中)。电喷雾离子化(ESI)质谱分析是在Agilent 1100系列LC/MSD电喷雾质谱仪上记录的。所有化合物都可以以ESI正模式使用含有0.1％甲酸的乙腈∶水作为输送溶剂来分析。反相分析HPLC使用Agilent 1200系列在作为固定相的Agilent Eclipse XDB-C185μm柱(4.6x 150mm)上进行，并且使用含有0.1％TFA的乙腈∶水进行洗脱。反相半制备HPLC使用Agilent 1100系列在作为固定相的PhenomenexGeminiTM 10μm C18柱(250x 21.20mm)上进行，并且使用含有0.1％TFA的乙腈∶水进行洗脱。半制备超临界流体色谱分析(SFC)使用Thar350SFC利用作为固定相的DaicelTM AD-H柱(250x 30mm)进行，并且使用作为流动相的甲醇(20mM NH3)∶CO2进行洗脱。
一般程序
(S)-4-溴-3-氧代丁烷-2-基氨基甲酸苄基酯(A)的制备
Figure BDA00002500618800351
向-20℃的N-{(苄氧基)羰基}L-丙氨酸(20g，89.64mmol)在THF(400mL)中的溶液中加入NMM(13.5g，133.2mmol)，接着加入氯甲酸异丁酯(14.6g，107mmol)。在-20℃下搅拌1.5小时后，在冷却下过滤这种混合物，并且在搅拌条件下用过量的新制备的重氮甲烷/Et2O溶液(由30.0gN-甲基亚硝基脲、200mL 40％KOH/100mL Et20制备)处理滤液直至黄色持续存在。让该混合物升温至0℃，然后将该溶液升温至室温并搅拌1小时，再冷却至0℃并用HBr(45％水溶液)/AcOH(1/1(v/v)，50mL)溶液处理30分钟，用TLC监测反应，并在反应完成后用EtOAc(500mL)和水(200mL)稀释反应物料。分离有机相，用水洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并浓缩。粗产物通过硅胶柱色谱法使用己烷/EtOAc(2∶1)作为洗脱剂来进行纯化，从而获得期望的产物(S)-4-溴-3-氧代丁烷-2-基氨基甲酸苄基酯：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ7.35-7.38(m，5H)，δ5.4(bs，1H)，δ5.0-5.1(s，2H)，δ4.6-4.7(q，1H)，δ4.01-4.09(q，2H)，δ1.41-1.43(d，3H)；LC-MS(ESI)m/z 300.11[M+H(79Br)]+和302.12[M+H(81Br)]+。
4-氨基-6-氯-5-嘧啶甲腈(B)的制备
Figure BDA00002500618800352
4，6-二氯代-5-嘧啶甲醛
Figure BDA00002500618800353
将在0℃下的DMF(64mL)和POCl3(200mL)的混合物搅拌1小时，用4，6-嘧啶二醇(50.0g，446mmol)处理，并在室温下搅拌0.5小时，然后回流3小时。在减压下除去挥发物，将残余物倒入冰水中并用Et2O萃取六次。用NaHCO3饱和水溶液和水洗涤有机相，经Na2SO4干燥，浓缩并使其结晶(EtOAc-石油醚)从而获得4，6-二氯代-5-嘧啶甲醛；LC-MS(ESI)m/z 177[M+H]+。
4，6-二氯代-5-嘧啶甲醛肟
Figure BDA00002500618800361
将4，6-二氯代-5-嘧啶甲醛(8.00g，44.8mmol)、NaOAc(3.7g，1.0当量)和NH2OH.HCl(3.1g，1.0当量)在EtOH(320mL)中的混合物在室温下搅拌2小时。过滤反应混合物，浓缩并通过硅胶柱色谱法(干法上样，首先DCM，然后DCM/EtOAc，1/9)纯化从而获得4，6-二氯代-5-嘧啶甲醛肟，为白色固体。
4，6-二氯代-5-嘧啶甲腈
Figure BDA00002500618800362
将4，6-二氯代-5-嘧啶甲醛肟(8g)溶解在CHCl3(40mL)中并在室温下用SOCl2(6mL)处理2小时。除去溶剂并用DCM(5mL)研磨残余物从而获得白色固体，滤出该白色固体并用DCM(5mL)洗涤。在减压下浓缩滤液，并通过硅胶柱色谱法(干法上样，DCM/己烷，3/1)纯化从而获得白色固体。合并这两份固体从而获得4，6-二氯代-5-嘧啶甲腈。
4-氨基-6-氯-5-嘧啶甲腈(B)
Figure BDA00002500618800363
在500mL圆底烧瓶中将该白色固体4，6-二氯代-5-嘧啶甲腈(5.82g，33.5mmol)溶解在THF(66.9mL)中，并在搅拌条件下每隔10分钟通入3分钟氨气(0.570g，33.5mmol)，持续50分钟。形成白色沉淀(氯化铵)。滤出沉淀并用THF(100mL)洗涤。向滤液中加入硅胶并在减压下浓缩。该混合物通过柱色谱法在120g Redi-Sep柱上进行纯化，使用0％至100％的在己烷中的EtOAc作为洗脱剂梯度洗脱超过27分钟，然后使用100％的在己烷中的EtOAc作为洗脱剂等度洗脱20分钟，从而获得4-氨基-6-氯嘧啶-5-甲腈，为灰白色固体。将该灰白色固体悬浮在EtOAc-己烷(1∶1，20mL)中，过滤，用EtOAc-己烷(1∶1，30mL)洗涤，并干燥从而获得4-氨基-6-氯-5-嘧啶甲腈(B)，为白色固体：1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δppm 7.91-8.77(3H，m)；LC-MS(ESI)m/z 154.9[M+H]+。
咪唑并吡啶类似物的一般程序C
Figure BDA00002500618800371
步骤C1：C-2的合成：将(S)-4-溴-3-氧代丁烷-2-基氨基甲酸苄基酯(23.32mmol)与C-1(23.32mmol)在EtOH中的混合物加热至回流过夜。在反应完成后，将该混合物冷却至室温。在减压下除去EtOH并将残余物溶解在EtOAc中。用NaHCO3饱和水溶液洗涤有机层，用Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩。粗残余物通过硅胶(100-200目)柱色谱法纯化，使用0％至8％的在DCM中的MeOH作为洗脱剂梯度洗脱，从而获得C-2。
步骤C2：C-3的合成：向C-2(12.11mmol)在乙腈中的溶液中加入N-碘代琥珀酰亚胺(12.11mmol)。将反应混合物在室温下搅拌过夜。在根据TLC判断反应完成后，用水稀释该混合物并用EtOAc萃取。用NaHCO3饱和水溶液洗涤有机层，用Na2SO4干燥，过滤并浓缩。获得的粗残余物通过硅胶(100-200目)柱色谱法纯化，使用0％至50％的在己烷中的EtOAc作为洗脱剂梯度洗脱，从而获得为固体的C-3。
步骤C3a：Stille偶联：C-4的合成：将C-3(1当量)、锡试剂(1.2当量)，和Pd(PPh3)4(0.1当量)在1，4-二噁烷中的混合物在110℃下搅拌过夜。在根据TLC判断反应完成后，将反应混合物冷却至室温，并在减压下浓缩从而获得褐色液体。该褐色液体使用BiotageCompanionTM利用100g硅胶柱纯化，使用0％至40％的在己烷中的EtOAc梯度洗脱，从而获得为固体的C-4。
步骤C3b：Suzuki反应：C-4的合成：将硼酸(0.854mmol)、C-3(0.569mmol)、Pd(Ph3P)4(0.028mmol)，和Na2CO3(1.138mmol)在乙腈-水(3∶1)中的混合物在100℃下加热2小时。将该反应混合物在水和EtOAc之间进行分配。分离有机层，用Na2SO4干燥，过滤并浓缩。将残余物溶解在DCM中并上样到硅胶管上。通过柱色谱法在12gRedi-SepTM柱上纯化该化合物，使用0％至70％的在己烷中的EtOAc作为洗脱剂进行梯度洗脱。合并期望的级分并进行浓缩从而获得发粘的琥珀酸残余物C-4。
步骤C4：C-5的合成：
将C-4(1.16mmol)和DMS(0.4mL，在TFA(1.6mL)中)的混合物在室温下搅拌过夜。在根据TLC判断反应完成后，在真空下浓缩该混合物，将其溶解在EtOAc(100mL)中，并用NaHCO3饱和水溶液洗涤。用Na2SO4干燥有机层，过滤并浓缩从而获得粗产物C-6，其以粗品的形式用于下一步骤而无需纯化。
步骤C5：C-6的合成：
将4-氨基-6-氯嘧啶-5-甲腈(B)(1.0当量)、C-5(1.0当量)和DIEA(3.0当量)在正丁醇中的混合物在110℃下搅拌过夜。根据TLC监测反应，在反应完成后，在减压下浓缩反应混合物。残余物通过硅胶柱色谱法纯化，使用0％至10％的在DCM中的MeOH作为洗脱剂梯度洗脱，从而获得C-6。
苯并咪唑类似物的一般程序D
Figure BDA00002500618800391
步骤D1：D-2的合成：在130℃下搅拌D-1(16.02mmol)和取代苯胺(16.02mmol)的混合物。在92小时后，将该混合物冷却至室温，有黑色固体形式。将含有黑色固体的混合物溶解在DCM(50mL)中并用NaHCO3饱和水溶液(30mL x 1)洗涤。用MgSO4干燥有机层，过滤并在减压下浓缩。残余物通过柱色谱法在120g Redi-SepTM柱上进行纯化，使用0％至50％的在己烷中的EtOAc作为洗脱剂梯度洗脱超过27分钟，然后使用50％的在己烷中的EtOAc作为洗脱剂等度洗脱27分钟从而获得D-2。
步骤D2：D-3的合成：在搅拌条件下在回流下加热D-2(2.80mmol)和氯化锡(II)二水合物(14.00mmol)在EtOAc(18.67mL)中的混合物。在5小时后，将该混合物冷却至室温，并倒入10M NaOH水溶液(50mL)中。用EtOAc(50mL x 2)萃取该混合物。合并的有机层用水(50mL x 2)和盐水(50mL x 1)洗涤，用Mg2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩。残余物通过柱色谱法在40g Redi-SepTM柱上进行纯化，使用0％至20％的在己烷中的EtOAc作为洗脱剂梯度洗脱超过14分钟，然后使用20％的在己烷中的EtOAc作为洗脱剂等度洗脱14分钟从而获得D-3。
步骤D3：D-4的合成：向Boc-L-Ala-OH(0.965g，5.10mmol)和N-甲基吗啉(0.589mL，5.35mmol)在DCM(12.75mL)中的-10℃溶液(NaCl-冰浴)中加入氯甲酸异丁酯(0.667mL，5.10mmol)。在-10℃下搅拌所得混浊无色混合物。在1小时后，将D-3(2.55mmol)在DCM(12.75mL)中的溶液加入到该混合物中。在-10℃下搅拌所得混合物40分钟，然后让其升温至室温。在24小时后，将NH4Cl饱和水溶液(50mL)加入到该混合物中并分离有机层。用DCM(50mL x 1)萃取该含水混合物。合并的有机层用MgSO4干燥，过滤并在减压下浓缩从而获得粉红色固体。该粉红色固体通过柱色谱法在40g Redi-SepTM柱上进行纯化，使用0％至20％的在己烷中的EtOAc作为洗脱剂梯度洗脱超过14分钟，然后使用20％的在己烷中的EtOAC作为洗脱剂等度洗脱14分钟，然后使用20％至50％的在己烷中的EtOAc作为洗脱剂梯度洗脱超过14分钟，然后使用50％的在己烷中的EtOAC作为洗脱剂等度洗脱14分钟从而获得D-4。
步骤D4：D-5a或D-5b的合成：在100℃下在搅拌下加热D-4(2.485mmol)在AcOH(8.28mL)中的溶液。在92小时后，将该混合物冷却至室温并倒入DCM(50mL)和NaHCO3饱和水溶液(50mL)中。分离水层。有机层用NaHCO3饱和水溶液(50mL x 1)洗涤，并用水(50mL x 1)和盐水(50mL x1)洗涤，用MgSO4干燥，过滤并在减压下浓缩从而获得D-5a或D-5b。在环化期间发生差向异构化，在该反应期间使Boc-保护基脱去并用乙酰基重新保护游离胺从而获得D-5b。
步骤D5a：D-6的合成：在100℃下加热D-5a(2.117mmol)和2N HCl(16.94mL，33.9mmol)的溶液。在22小时后，将该混合物冷却至室温。用DCM(30mL x 2)洗涤该酸性含水混合物从而除去有机杂质，然后用10N NaOH(3.5mL)碱化至～pH 10，并用DCM(50mL x3)萃取。合并的有机层用水(100mL x 1)、盐水(100mL x 1)洗涤，并用MgSO4干燥，过滤并在减压下浓缩从而获得D-6。该粗产物D-6用于下一步骤而无需纯化。
步骤D5b：D-6的合成：在室温下在搅拌下向D-5b(1.589mmol)在DCM(10.59mL)中的混合物中逐滴加入TFA(138mmol)。该反应混合物变得澄清，将该溶液在室温下搅拌1.5小时。然后在减压下浓缩该混合物从而获得黄色浆料。将该浆料溶解在DCM(50mL)中，用NaHCO3饱和水溶液(50mL x 1)、水(50mL x 1)、盐水(50mL x 1)洗涤，用MgSO4干燥，过滤并在减压下浓缩从而获得D-6。粗产物D-6以粗品的形式用于下一步骤而无需纯化。
步骤D6：D-7的合成：在120℃下搅拌4-氨基-6-氯嘧啶-5-甲腈(B)(0.257g，1.662mmol)、D-6(1.662mmol)，和DIEA(0.868mL，4.99mmol)在正丁醇(16.62mL)中的混合物。在24小时后，移除热源并放置在室温下。冷却后，在减压下浓缩该混合物从而获得棕色固体，将该棕色固体悬浮在水(50mL)中，予以超声处理，过滤，并用水(100mL)洗涤从而获得棕褐色固体。将该棕褐色固体悬浮在EtOAc-己烷(1∶4，20mL)中，过滤，用EtOAc-己烷(1∶4，20mL)洗涤，并干燥从而获得D-7，为外消旋混合物。
实施例1：4-氨基-6-((1-(6-氟-1-(3-(甲基磺酰基)苯基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈、4-氨基-6-(((1R)-1-(6-氟-1-(3-(甲基磺酰基)苯基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，和4-氨基-6-(((1S)-1-(6-氟-1-(3-(甲基磺酰基)苯基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈的制备
5-氟-N-(3-(甲基磺酰基)苯基)-2-硝基苯胺
根据一般程序D中的步骤D1使用2，4-二氟硝基苯(0.571mL，5.20mmol)和3-(甲基磺酰基)苯胺(0.891g，5.20mmol)制备，从而获得5-氟-N-(3-(甲基磺酰基)苯基)-2-硝基苯胺，为亮黄色固体：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 9.65(1H，s)，8.25(1H，dd，J＝9.6，6.1Hz)，7.85-7.89(1H，m)，7.64-7.75(3H，m)，6.98(1H，dd，J＝11.4，2.6Hz)，6.79-6.87(1H，m)，3.24(3H，s)；LC-MS(ESI)m/z 311.0[M+H]+
5-氟-N1-(3-(甲基磺酰基)苯基)苯-1，2-二胺
根据一般程序D中的步骤D2使用5-氟-N-(3-(甲基磺酰基)-苯基)-2-硝基苯胺(0.805g，2.59mmol)制备，从而获得5-氟-N1-(3-(甲基磺酰基)苯基)苯-1，2-二胺，为无色浆料：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 7.82(1H，s)，7.36-7.43(1H，m)，7.18-7.25(2H，m)，7.01(1H，ddd，J＝8.2，2.2，1.1Hz)，6.83-6.89(1H，m)，6.71-6.79(2H，m)，4.71(2H，s)，3.14(3H，s)；LC-MS(ESI)m/z 281.0[M+H]+
(S)-1-(4-氟-2-(3-(甲基磺酰基)苯基氨基)苯基氨基)-1-氧代丙烷-2-基氨基甲酸叔丁酯
Figure BDA00002500618800431
根据一般程序D中的步骤D3使用5-氟-N1-(3-(甲基磺酰基)-苯基)苯-1，2-二胺制备，从而获得(S)-1-(4-氟-2-(3-(甲基磺酰基)-苯基氨基)苯基氨基)-1-氧代丙烷-2-基氨基甲酸叔丁酯，为固体：1HNMR(500MHz，DMSO-d6)δppm 9.40(1H，s)，7.86(1H，s)，7.48(2H，q，J＝8.0Hz)，7.40(1H，br.s.)，7.35(1H，d，J＝7.3Hz)，7.23(1H，d，J＝7.8Hz)，7.13(1H，d，J＝6.4Hz)，7.09(1H，dd，J＝10.5，2.7Hz)，6.87(1H，td，J＝8.2，1.5Hz)，4.05-4.11(1H，m)，3.16(3H，s)，1.35(9H，s)，1.16-1.21(3H，m)；LC-MS(ESI)正模式m/z 452.1[M+H]+和负模式m/z 450.1[M-H]-.
N-(1-(6-氟-1-(3-(甲基磺酰基)苯基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基)-乙酰胺
Figure BDA00002500618800432
根据一般程序D  中的步骤D4使用(S)--1-(4-氟-2-(3-(甲基磺酰基)苯基氨基)苯基氨基)-1-氧代丙烷-2-基氨基甲酸叔丁酯(0.9788g，2.168mmol)制备，从而获得N-(1-(6-氟-1-(3-(甲基磺酰基)苯基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基)乙酰胺，为粉红色固体：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.40(1H，d，J＝8.0Hz)，8.07-8.14(1H，m)，8.04(1H，br.s.)，7.89(2H，d，J＝4.5Hz)，7.75(1H，dd，J＝8.8，4.9Hz)，7.15(1H，ddd，J＝9.9，8.9，2.5Hz)，7.01(1H，dd，J＝9.0，2.3Hz)，4.98-5.13(1H，m)，3.32(3H，s)，1.59(3H，s)，1.45(3H，d，J＝6.8Hz)；LC-MS(ESI)m/z 376.0[M+H]+在环化期间发生差向异构化。
1-(6-氟-1-(3-(甲基磺酰基)苯基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙胺
Figure BDA00002500618800441
根据一般程序D  中的步骤D5a  使用(S)--N-(1-(6-氟-1-(3-(甲基磺酰基)苯基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基)乙酰胺(0.6713g，1.788mmol)制备，从而获得1-(6-氟-1-(3-(甲基磺酰基)-苯基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙胺，为白色固体：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.16-8.20(1H，m)，8.09-8.15(1H，m)，7.97-8.03(1H，m)，7.89-7.95(1H，m)，7.71(1H，dd，J＝8.8，4.9Hz)，7.12(1H，ddd，J＝10.0，8.8，2.5Hz)，7.01(1H，dd，J＝9.0，2.3Hz)，3.96(1H，q，J＝6.7Hz)，3.35(3H，s)，1.95(2H，br.s.)，1.36(3H，d，J＝6.7Hz)；LC-MS(ESI)m/z 334.0[M+H]+
4-氨基-6-((-1-(6-氟-1-(3-(甲基磺酰基)苯基)-1H-苯并咪唑-2-基)-乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈
Figure BDA00002500618800442
根据一般程序D  中的步骤D6使用(S)--1-(6-氟-1-(3-(甲基磺酰基)苯基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙胺(0.2992g，0.897mmol)制备，从而获得4-氨基-6-(1-(6-氟-1-(3-(甲基磺酰基)-苯基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基氨基)嘧啶-5-甲腈，为棕褐色固体：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.14(1H，t，J＝1.9Hz)，8.03(1H，dt，J＝7.8，1.4Hz)，7.87-7.96(1H，m)，7.84(1H，s)，7.72-7.83(3H，m)，7.09-7.25(3H，m)，6.97(1H，dd，J＝8.9，2.4Hz)，5.50(1H，quin，J＝7.0Hz)，3.26(3H，s)，1.55(3H，d，J＝6.8Hz)；LC-MS(ESI)m/z 452.0[M+H]+.
4-氨基-6-(((1R)-1-(6-氟-1-(3-(甲基磺酰基)苯基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，和4-氨基-6-(((1S)-1-(6-氟-1-(3-(甲基磺酰基)苯基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈
Figure BDA00002500618800451
使用制备SFC在AD-H柱上分离外消旋混合物(190.63mg)从而获得两种级分：
在OD-H柱上的第一峰：(R)--4-氨基-6-(1-(6-氟-1-(3-(甲基磺酰基)苯基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基氨基)嘧啶-5-甲腈，为浅黄色固体：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.14(1H，t，J＝2.0Hz)，8.03(1H，ddd，J＝8.0，1.3，1.1Hz)，7.91(1H，d，J＝7.2Hz)，7.84(1H，s)，7.80(1H，t，J＝7.9Hz)，7.71-7.78(2H，m)，7.08-7.25(3H，m)，6.97(1H，dd，J＝8.9，2.4Hz)，5.45-5.55(1H，m)，3.26(3H，s)，1.55(3H，d，J＝6.8Hz)；LC-MS(ESI)m/z 452.0[M+H]+.
在OD-H柱上的第二峰：(S)--4-氨基-6-(1-(6-氟-1-(3-(甲基磺酰基)苯基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基氨基)嘧啶-5-甲腈，为浅黄色固体：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.14(1H，t，J＝1.9Hz)，8.00-8.05(1H，m)，7.91(1H，d，J＝7.4Hz)，7.84(1H，s)，7.80(1H，t，J＝7.9Hz)，7.72-7.78(2H，m)，7.10-7.24(3H，m)，6.97(1H，dd，J＝8.7，2.4Hz)，5.50(1H，qd，J＝6.9，6.7Hz)，3.26(3H，s)，1.55(3H，d，J＝6.8Hz)；LC-MS(ESI)m/z 452.0[M+H]+.
实施例2：4-氨基-6-(((1S)-1-(6-氟-3-(3-(甲基磺酰基)苯基)咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈的制备
Figure BDA00002500618800461
根据一般程序C制备从而获得4-氨基-6-(((1S)-1-(6-氟-3-(3-(甲基磺酰基)苯基)咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈：1HNMR(400MHz，MeOH-d4)δppm 8.31(s，1H)8.13-8.16(m，1H)8.07-8.11(m，1H)8.00(s，1H)7.87-7.90(m，1H)7.79-7.85(m，1H)7.62-7.67(m，1H)7.34-7.41(m，1H)5.61(q，J＝7.30Hz，1H)3.21(s，3H)1.63(d，J＝7.04Hz，3H)；LC-MS(ESI)m/z 452.0[M+H]+.
实施例3：4-氨基-6-((1-(5-氟-1-(3-(甲硫基)苯基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈、4-氨基-6-(((1R)-1-(5-氟-1-(3-(甲硫基)苯基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，和4-氨基-6-(((1S)--1-(5-氟-1-(3-(甲硫基)苯基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈的制备
5-氟-N-(3-(甲硫基)苯基)-2-硝基苯胺
Figure BDA00002500618800462
根据一般程序D中的步骤D1使用1，4-二氟-2-硝基苯(3.251g，20.43mmol)和3-(甲硫基)苯胺(2.52mL，20.43mmol)制备，从而获得5-氟-N-(3-(甲硫基)苯基)-2-硝基苯胺，为橙色固体：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 9.17(1H，s)，7.93(1H，dd，J＝9.2，3.1Hz)，7.49(1H，ddd，J＝9.4，7.5，3.2Hz)，7.25-7.34(2H，m)，7.17(1H，t，J＝2.0Hz)，7.01-7.07(2H，m)，2.47(3H，s)；LC-MS(ESI)m/z 277.0[M-H]-.
4-氟-N1-(3-(甲硫基)苯基)苯-1，2-二胺
根据一般程序D中的步骤D2使用4-氟-N-(3-(甲硫基)苯基)--2-硝基苯胺(1.7261g，6.20mmol)制备，从而获得4-氟-N1-(3-(甲硫基)苯基)苯-1，2-二胺，为橙色浆料状固体：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 7.13(1H，s)，7.03(1H，t，J＝7.9Hz)，6.93(1H，dd，J＝8.4，6.3Hz)，6.46-6.55(3H，m)，6.37(1H，ddd，J＝8.1，2.2，1.0Hz)，6.31(1H，td，J＝8.5，2.9Hz)，5.08(2H，s)，2.38(3H，s)；LC-MS(ESI)m/z 249.1[M+H]+.
(S)-1-(5-氟-2-(3-(甲硫基)苯基氨基)苯基氨基)-1-氧代丙烷-2-基氨基甲酸叔丁酯
Figure BDA00002500618800472
根据一般程序D中的步骤D3使用4-氟-N1-(3-(甲硫基)苯基)-苯-1，2-二胺(1.0765g，4.34mmol)制备，从而获得(S)--1-(5-氟-2-(3-(甲硫基)苯基氨基)苯基氨基)-1-氧代丙烷-2-基氨基甲酸叔丁酯，为灰白色浆料状固体：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm9.31(1H，br.s.)，7.76(1H，dd，J＝10.9，2.2Hz)，7.34(1H，s)，7.15-7.26(2H，m)，7.08(1H，t，J＝7.9Hz)，6.95(1H，td，J＝8.5，3.0Hz)，6.60-6.66(1H，m)，6.57(1H，br.s.)，6.42-6.49(1H，m)，4.06-4.15(1H，m，J＝7.3，7.0，6.9，6.9Hz)，2.38(3H，s)，1.33(9H，s)，1.12-1.19(3H，m)；LC-MS(ESI)m/z 420.1[M+H]+.
1-(5-氟-1-(3-(甲硫基)苯基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基氨基甲酸叔丁酯
Figure BDA00002500618800481
根据一般程序D中的步骤D4使用(S)-1-(5-氟-2-(3-(甲硫基)-苯基氨基)苯基氨基)-1-氧代丙烷-2-基氨基甲酸叔丁酯(1.6781g，4.00mmol)制备，从而获得1-(5-氟-1-(3-(甲硫基)苯基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基氨基甲酸叔丁酯，为灰白色固体：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 7.48-7.57(2H，m)，7.39-7.46(2H，m)，7.36(1H，d，J＝7.4Hz)，7.26(1H，d，J＝7.8Hz)，7.02-7.10(2H，m)，4.79(1H，dq，J＝7.1，6.9Hz)，2.52(3H，s)，1.38(3H，d，J＝6.7Hz)，1.29(9H，s)；LC-MS(ESI)m/z 402.1[M+H]+.在环化期间发生差向异构化。
1-(5-氟-1-(3-(甲硫基)苯基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙胺
Figure BDA00002500618800482
根据一般程序D中的步骤D5b使用1-(5-氟-1-(3-(甲硫基)苯基)--1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基氨基甲酸叔丁酯(0.2878g，0.717mmol)制备，从而获得1-(5-氟-1-(3-(甲硫基)苯基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙胺，为浅黄色浆料：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 7.56(1H，t，J＝8.0Hz)，7.43-7.52(3H，m)，7.33(1H，d，J＝7.6Hz)，7.02-7.14(2H，m)，3.95(1H，q，J＝6.7Hz)，2.53(3H，s)，1.96(2H，s)，1.34(3H，d，J＝6.7Hz)；LC-MS(ESI)m/z 302.0[M+H]+.该浅黄色浆料以粗品形式用于下一步骤而无需纯化。
4-氨基-6-((1-(5-氟-1-(3-(甲硫基)苯基)-1H-苯并咪唑-2-基)N-乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈
根据一般程序D中的步骤D6使用1-(5-氟-1-(3-(甲硫基)苯基)--1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙胺(0.1816g，0.603mmol)制备，从而获得4-氨基-6-(1-(5-氟-1-(3-(甲硫基)苯基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)-乙基氨基)嘧啶-5-甲腈，为灰白色固体：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)-δppm 7.86(1H，s)，7.68(1H，d，J＝7.4Hz)，7.54(1H，ddd，J＝9.6，2.2，0.8Hz)，7.44(1H，t，J＝7.9Hz)，7.39(1H，t，J＝1.9Hz)，7.32(1H，d，J＝8.2Hz)，7.24-7.28(1H，m)，7.03-7.22(4H，m)，5.54(1H，t，J＝6.7Hz)，2.48(3H，s)，1.52(3H，d，J＝6.8Hz)；LC-MS(ESI)m/z 420.1[M+H]+.
4-氨基-6-(((1R)-1-(5-氟-1-(3-(甲硫基)苯基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，和4-氨基-6-(((1S)-1-(5-氟-1-(3-(甲硫基)苯基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈
Figure BDA00002500618800492
使用制备SFC在IA柱上分离外消旋混合物(127.49mg)从而获得两种级分：
在IA柱上的第一峰：(R)-4-氨基-6-(1-(5-氟-1-(3-(甲硫基)苯基)--1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基氨基)嘧啶-5-甲腈，为棕褐色固体：1HNMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 7.86(1H，s)，7.69(1H，d，J＝7.4Hz)，7.55(1H，ddd，J＝9.7，2.1，0.8Hz)，7.44(1H，t，J＝7.9Hz)，7.39(1H，t，J＝1.9Hz)，7.32(1H，d，J＝7.4Hz)，7.26(1H，d，J＝7.4Hz)，7.17(2H，br.s.)，7.04-7.12(2H，m)，5.49-5.59(1H，m)，2.48(3H，s)，1.52(3H，d，J＝6.7Hz)；LC-MS(ESI)m/z 420.1[M+H]+.
在IA柱上的第二峰：(S)-4-氨基-6-(1-(5-氟-1-(3-(甲硫基)苯基)--1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基氨基)嘧啶-5-甲腈，为棕褐色固体：1HNMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 7.86(1H，s)，7.69(1H，d，J＝7.4Hz)，7.55(1H，ddd，J＝9.6，2.1，0.7Hz)，7.44(1H，t，J＝7.8Hz)，7.39(1H，t，J＝1.8Hz)，7.32(1H，d，J＝7.4Hz)，7.26(1H，d，J＝7.6Hz)，7.17(2H，br.s.)，7.04-7.12(2H，m)，5.50-5.59(1H，m)，2.48(3H，s)，1.52(3H，d，J＝6.7Hz)；LC-MS(ESI)m/z 420.1[M+H]+.
实施例4：4-氨基-6-((-1-(5-氟-1-(3-(甲基磺酰基)苯基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈、4-氨基-6-(((1R)-1-(5-氟-1-(3-(甲基磺酰基)苯基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，和4-氨基-6-(((1S)-1-(5-氟-1-(3-(甲基磺酰基)苯基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈
1-(5-氟-1-(3-(甲基磺酰基)苯基)-
-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基氨基甲酸叔丁酯的制备
Figure BDA00002500618800501
向1-(5-氟-1-(3-(甲硫基)苯基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)-乙基氨基甲酸叔丁酯(0.7397g，1.842mmol)在THF(13.82mL)和水(4.61mL)中的混合物中加入过硫酸氢钾(oxone)(2.83g，4.61mmol)，并在室温下搅拌该混合物。在3小时后，将水(50mL)加入到该混合物中，并用DCM(50mL x 2)萃取。合并的有机层用Na2SO4干燥，过滤，并在减压下浓缩从而获得白色固体，该白色固体通过柱色谱法在24g Redi-SepTM Gold柱上进行纯化，使用0％至50％的在己烷中的EtOAc作为洗脱剂梯度洗脱超过5分钟，然后使用50％的EtOAC作为洗脱剂等度洗脱20分钟从而获得1-(5-氟-1-(3-(甲基磺酰基)苯基)--1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基氨基甲酸叔丁酯，为白色固体。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.05-8.15(2H，m)，7.90(2H，d，J＝4.9Hz)，7.56(1H，dd，J＝9.5，2.2Hz)，7.35(1H，d，J＝8.0Hz)，7.06-7.18(2H，m)，4.82-4.95(1H，m)，3.33(3H，s)，1.44(3H，d，J＝6.8Hz)，1.23(9H，s)；LC-MS(ESI)m/z 434.0[M+H]+.
1-(5-氟-1-(3-(甲基磺酰基)苯基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙胺
Figure BDA00002500618800511
根据一般程序D中的步骤D5b使用1-(5-氟-1-(3-(甲基磺酰基)-苯基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基氨基甲酸叔丁酯(0.6889g，1.589mmol)制备，从而获得1-(5-氟-1-(3-(甲基磺酰基)苯基)--1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙胺，为白色固体：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.18(1H，t，J＝1.7Hz)，8.11-8.15(1H，m)，7.98-8.03(1H，m)，7.93(1H，t，J＝7.8Hz)，7.53(1H，dd，J＝9.7，2.4Hz)，7.13-7.19(1H，m)，7.05-7.12(1H，m)，3.96(1H，q，J＝6.7Hz)，3.35(3H，s)，1.98(2H，s)，1.37(3H，d，J＝6.7Hz)；LC-MS(ESI)m/z 334.0[M+H]+。该白色固体以粗品的形式用于下一步骤而无需纯化。
4-氨基-6-((-1-(5-氟-1-(3-(甲基磺酰基)苯基)-1H-苯并咪唑-2-基)-乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈
Figure BDA00002500618800512
根据一般程序D  中的步骤D6使用1-(5-氟-1-(3-(甲基磺酰基)苯基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙胺(0.4657g，1.397mmol)制备，从而获得棕色固体。将该棕色固体悬浮在EtOAc-己烷(1∶4，10mL)中，过滤，用EtOAc-己烷(1∶4，20mL)洗涤，并干燥从而获得4-氨基-6-((-1-(5-氟-1-(3-(甲基磺酰基)苯基)--1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，为棕褐色固体：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.15(1H，t，J＝1.9Hz)，8.04(1H，dt，J＝7.8，1.4Hz)，7.93(1H，d，J＝7.4Hz)，7.75-7.87(3H，m)，7.58(1H，dt，J＝9.2，1.3Hz)，7.06-7.27(4H，m)，5.50(1H，qd，J＝6.9，6.7Hz)，3.26(3H，s)，1.56(3H，d，J＝6.8Hz)；LC-MS(ESI)m/z 452.0[M+H]+。
4-氨基-6-(((1R)-1-(5-氟-1-(3-(甲基磺酰基)苯基)--1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，和4-氨基-6-(((1S)--1-(5-氟-1-(3-(甲基磺酰基)苯基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)--5-嘧啶甲腈
Figure BDA00002500618800521
使用制备SFC在AD-H柱上分离外消旋混合物(367.3mg)从而获得两种级分：
在AD-H柱上的第一峰：(R)--4-氨基-6-(1-(5-氟-1-(3-(甲基磺酰基)苯基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)-乙基氨基)嘧啶-5-甲腈，为棕色固体：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.15(1H，t，J＝1.9Hz)，8.04(1H，dt，J＝7.9，1.4Hz)，7.92(1H，d，J＝7.0Hz)，7.74-7.86(3H，m)，7.55-7.60(1H，m)，7.07-7.26(4H，m)，5.50(1H，qd，J＝7.0，6.8Hz)，3.26(3H，s)，1.56(3H，d，J＝6.8Hz)；LC-MS(ESI)m/z 452.0[M+H]+.
在AD-H柱上的第二峰：(S)-4-氨基-6-(1-(5-氟-1-(3-(甲基磺酰基)-苯基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基氨基)嘧啶-5-甲腈，为棕色固体：1HNMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.15(1H，t，J＝1.9Hz)，8.01-8.06(1H，m)，7.92(1H，d，J＝7.6Hz)，7.74-7.86(3H，m)，7.54-7.60(1H，m)，7.05-7.27(4H，m)，5.50(1H，quin，J＝6.8Hz)，3.26(3H，s)，1.56(3H，d，J＝6.8Hz)；LC-MS(ESI)m/z 452.0[M+H]+.
实施例5：4-氨基-6-(((1S)-1-(3-(3，5-二氟苯基)-6-氟咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈的制备
Figure BDA00002500618800531
根据一般程序C制备从而获得4-氨基-6-(((1S)--1-(3-(3，5-二氟苯基)-6-氟咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基)乙基)氨基)--5-嘧啶甲腈：1H NMR(400MHz，MeOH-d4)δppm 8.40-8.47(m，1H)8.01(s，1H)7.88-7.94(m，1H)7.79-7.86(m，1H)7.20-7.33(m，3H)5.68(d，J＝7.04Hz，1H)1.71(d，J＝7.24Hz，3H)；LC-MS(ESI)410.0[M+H]+。
实施例6：4-氨基-6-(((1S)-1-(6-氟-3-(4-氟苯基)咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈的制备
根据一般程序C  制备从而获得4-氨基-6-(((1S)--1-(6-氟-3-(4-氟苯基)咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈：1H NMR(400MHz，MeOH-d4)δppm 8.00-8.05(m，1H)7.92(s，1H)7.59-7.64(m，1H)7.50-7.57(m，2H)7.27-7.36(m，3H)5.58(q，J＝7.04Hz，1H)1.61(d，J＝6.85Hz，3H)；LC-MS(ESI)392.2[M+H]+.
实施例7：4-氨基-6-((-1-(1-(3，5-二氟苯基)--6-氟-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈、4-氨基-6-(((1R)--1-(1-(3，5-二氟苯基)-6-氟-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，和4-氨基-6-(((1S)-1-(1-(3，5-二氟苯基)-6-氟-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)-氨基)-5-嘧啶甲腈的制备
N-(3，5-二氟苯基)-5-氟-2-硝基苯胺
Figure BDA00002500618800541
根据一般程序D中的步骤D1使用2，4-二氟硝基苯(1.757mL，16.02mmol)和3，5-氟苯胺(2.069g，16.02mmol)制备，从而获得N-(3，5-氟苯基)-5-氟-2-硝基苯胺，为橙色固体：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 9.48(1H，s)，8.23(1H，dd，J＝9.4，6.1Hz)，7.05-7.17(3H，m)，6.99(1H，tt，J＝9.4，2.3Hz)，6.84-6.91(1H，m)；LC-MS(ESI)m/z 267.0[M-H]-.
N1-(3，5-二氟苯基)-5-氟苯-1，2-二胺
Figure BDA00002500618800542
根据一般程序D中的步骤D2使用N-(3，5-二氟苯基)--5-氟-2-硝基苯胺(0.7511g，2.80mmol)制备，从而获得N1-(3，5-氟苯基)-5-氟苯-1，2-二胺，为浅黄色浆料：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 7.85(1H，s)，6.85(1H，dd，J＝10.0，2.3Hz)，6.72-6.81(2H，m)，6.41(1H，tt，J＝9.4，2.3Hz)，6.24-6.33(2H，m)，4.71(2H，s)；LC-MS(ESI)m/z 239.1[M+H]+.
(S)-1-(2-(3，5-二氟苯基氨基)-4-氟苯基氨基)-
-1-氧代丙烷-2-基氨基甲酸叔丁酯
根据一般程序D中的步骤D3使用N1-(3，5-二氟苯基)--5-氟苯-1，2-二胺(0.6074g，2.55mmol)制备，从而获得(S)--1-(2-(3，5-二氟苯基氨基)-4-氟苯基氨基)-1-氧代丙烷-2-基氨基甲酸叔丁酯，为白色固体：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 9.41(1H，br.s.)，7.87(1H，br.s.)，7.50(1H，dd，J＝8.6，6.5Hz)，7.07-7.20(2H，m)，6.87-6.96(1H，m)，6.43-6.62(3H，m)，3.95-4.13(1H，m)，1.37(9H，s)，1.17(3H，d，J＝7.0Hz)；LC-MS(ESI)m/z 410.2[M+H]+。
N-(1-(1-(3，5-二氟苯基)-6-氟-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基)乙酰胺
Figure BDA00002500618800552
根据一般程序D中的步骤D4使用(S)-1-(2-(3，5-二氟苯基氨基)--4-氟苯基氨基)-1-氧代丙烷-2-基氨基甲酸叔丁酯(1.0173g，2.485mmol)制备，从而获得N-(1-(1-(3，5-二氟苯基)--6-氟-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基)乙酰胺，为棕色固体：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.38(1H，d，J＝7.4Hz)，7.72(1H，dd，J＝8.8，4.9Hz)，7.51(1H，tt，J＝9.5，2.3Hz)，7.41(2H，dd，J＝7.9，1.7Hz)，7.13(1H，ddd，J＝9.8，8.8，2.5Hz)，7.03-7.09(1H，m)，5.07(1H，qd，J＝7.1，6.8Hz)，1.64(3H，s)，1.44(3H，d，J＝6.8Hz)；LC-MS(ESI)m/z 334.1[M+H]+.在环化期间发生差向异构化。
1-(1-(3，5-二氟苯基)-6-氟-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙胺
Figure BDA00002500618800561
根据一般程序D中的步骤D5a使用N-(1-(1-(3，5-二氟苯基)--6-氟-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基)乙酰胺(0.7057g，2.117mmol)制备，从而获得1-(1-(3，5-二氟苯基)-6-氟-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙胺，为粉红色固体：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 7.69(1H，dd，J＝8.8，4.9Hz)，7.49-7.58(3H，m)，7.04-7.15(2H，m)，4.01(1H，q，J＝6.6Hz)，1.95(2H，br.s.)，1.36(3H，d，J＝6.5Hz)；LC-MS(ESI)m/z 292.0[M+H]+.该粉红色固体以粗品的形式使用而无需纯化。
4-氨基-6-((-1-(1-(3，5-二氟苯基)-6-氟-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)-氨基)-5-嘧啶甲腈
Figure BDA00002500618800562
根据一般程序D中的步骤D6使用1-(1-(3，5-二氟苯基)--6-氟-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙胺(0.4841g，1.662mmol)制备，从而获得4-氨基-6-((-1-(1-(3，5-二氟苯基)-6-氟-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)-氨基)-5-嘧啶甲腈，为棕褐色固体：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 7.87(1H，s)，7.68-7.77(2H，m)，7.29-7.41(3H，m)，7.09-7.25(3H，m)，7.05(1H，dd，J＝9.0，2.3Hz)，5.59-5.70(1H，m)，1.56(3H，d，J＝6.8Hz)；LC-MS(ESI)m/z 410.0[M+H]+.
4-氨基-6-(((1R)-1-(1-(3，5-二氟苯基)-6-氟-1H-苯并咪唑-2-基)-乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，和4-氨基-6-(((1S)-1-(1-(3，5-二氟苯基)--6-氟-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈
Figure BDA00002500618800571
使用制备SFC在IA柱上分离外消旋混合物(471mg)从而获得两种级分：
在IA柱上的第一峰和在OD-H柱上的第二峰：4-氨基-6-(((1R)--1-(1-(3，5-二氟苯基)-6-氟-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，为灰白色固体：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 7.87(1H，s)，7.68-7.78(2H，m)，7.29-7.40(3H，m)，7.09-7.25(3H，m)，7.05(1H，dd，J＝8.9，2.4Hz)，5.60-5.69(1H，m，J＝7.1，7.1，6.9，6.7Hz)，1.56(3H，d，J＝6.8Hz)；LC-MS(ESI)m/z 410.0[M+H]+.
在IA柱上的第一峰和在OD-H柱上的第二峰：4-氨基-6-(((1S)--1-(1-(3，5-二氟苯基)-6-氟-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，为灰白色固体：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 7.87(1H，s)，7.68-7.78(2H，m)，7.29-7.40(3H，m)，7.09-7.24(3H，m)，7.05(1H，dd，J＝8.9，2.4Hz)，5.59-5.69(1H，m)，1.56(3H，d，J＝6.8Hz)；LC-MS(ESI)m/z 410.0[M+H]+.
实施例8：4-氨基-6-(((8-氯-3-苯基咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基)甲基)氨基)-5-嘧啶甲腈的合成
3-溴-8-氯-2-(氯甲基)咪唑并[1，2-a]吡啶
Figure BDA00002500618800572
将乙腈(8.5ml)加入到8-氯-2-(氯甲基)咪唑并[1，2-a]吡啶(341mg，1.7mmol)中。加入N-溴代琥珀酰亚胺(302mg，1.7mL)并在室温下搅拌该混合物直至完成。将该反应混合物在EtOAc与饱和水NaHCO3溶液之间进行分配。有机层用Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩。将残余物溶解在DCM中，并通过色谱法在23g硅胶柱上进行纯化，使用0％至70％的在己烷中的EtOAc梯度洗脱。合并期望的级分并在减压下浓缩从而获得3-溴-8-氯-2-(氯甲基)咪唑并[1，2-a]吡啶，为白色结晶固体。
2-((3-溴-8-氯咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基)甲基)异吲哚啉-1，3-二酮
Figure BDA00002500618800581
将DMF(4.6ml)加入到3-溴-8-氯-2-(氯甲基)咪唑并[1，2-a]吡啶(258mg，0.922mmol)、邻苯二甲酰亚胺(136mg，0.922mmol)和K2CO3(55.6μL，0.922mmol)的混合物中。在80℃下加热该反应液。在反应完成后，最初将该混合物在EtOAc与水之间进行分配，但是产物不容易溶解。通过过滤该混合物收集产物，从而获得2-((3-溴-8-氯咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基)甲基)异吲哚啉-1，3-二酮，为白色固体。
(8-氯-3-苯基咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基)甲胺
Figure BDA00002500618800582
根据一般程序C中的步骤C3b，使2-((3-溴-8-氯咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基)甲基)异吲哚啉-1，3-二酮与苯基硼酸偶联。在该反应条件下观察到邻苯二甲酰亚胺的部分水解。用DCM和TFA处理粗中间体一周。在减压下浓缩该反应混合物并通过反相半制备HPLC纯化。将含有期望产物的级分冻干。将冻干物在饱和水NaHCO3溶液与EtOAc之间进行分配。用EtOAc萃取aq.层三次。合并的有机层用Na2SO4干燥，过滤，并在减压下浓缩从而获得(8-氯-3-苯基咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基)甲胺。
4-氨基-6-(((8-氯-3-苯基咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基)甲基)氨基)-5-嘧啶甲腈
Figure BDA00002500618800591
根据一般程序C中的步骤C5，由(8-氯-3-苯基咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基)甲胺制备4-氨基-6-(((8-氯-3-苯基咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基)甲基)-氨基)-5-嘧啶甲腈：1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δppm 4.69(d，J＝5.38Hz，2H)6.88(t，J＝7.09Hz，1H)7.18(br.s.，2H)7.47-7.51(m，2H)7.53-7.59(m，2H)7.59-7.65(m，3H)7.92(s，1H)8.15(dd，J＝7.09，0.98Hz，1H)；LC-MS(ESI)m/z 376.1[M+H]+.
实施例9：4-氨基-6-(((1S)-1-(3-(4-氯苯基)-6-氟咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈的制备
Figure BDA00002500618800592
根据一般程序C制备从而获得4-氨基-6-(((1S)-1-(3-(4-氯苯基)-6-氟咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ8.2(m，1H)，7.9(s，1H)，7.71-7.74(m，1H)，7.6(s，4H)，7.3-7.4(m，1H)，7.2(bs，2H)，6.9(d，1H)，5.4(m，1H)，1.5(d，3H)；LC-MS(ESI)m/z 407.11[M+H]+.
实施例10：4-氨基-6-(((1S)-1-(6-氟-3-(2-(甲基磺酰基)苯基)咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈的制备
Figure BDA00002500618800601
根据包括介于步骤C3a和步骤C4之间的过硫酸氢钾氧化的一般程序C制备从而获得4-氨基-6-(((1S)-1-(6-氟-3-(2-(甲基磺酰基)苯基)咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，其为阻转异构体混合物，该混合物可以使用制备SFC在ChiralpakTM OJ柱上进行分离从而获得两种级分：
在OJ柱上的第一峰：1H NMR(500MHz，MeOH-d4)δppm 8.18-8.23(1H，m)，7.75-7.82(3H，m)，7.68-7.71(1H，m)，7.64(1H，dd，J＝9.9，5.0Hz)，7.52-7.55(1H，m)，7.35(1H，ddd，J＝10.0，7.9，2.3Hz)，5.65(1H，q，J＝7.0Hz)，2.92(3H，s)，1.65(3H，d，J＝6.8Hz)；
在OJ柱上的第一峰：1H NMR(500MHz，MeOH-d4)δppm 8.25-8.30(1H，m)，7.88(1H，s)，7.76-7.82(1H，m)，7.59-7.69(3H，m)，7.37(1H，ddd，J＝10.0，7.9，2.4Hz)，7.25(1H，dd，J＝7.6，1.2Hz)，5.58(1H，q，J＝7.1Hz)，2.87(3H，s)，1.70(3H，d，J＝7.1Hz)；LC-MS(ESI)m/z452.0[M+H]+.
实施例11：4-氨基-6-((-1-(6-氟-1-(4-氟苯基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈、4-氨基-6-(((1R)-1-(6-氟-1-(4-氟苯基)--1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，和4-氨基-6-(((1S)--1-(6-氟-1-(4-氟苯基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈的制备
5-氟-N-(4-氟苯基)-2-硝基苯胺
Figure BDA00002500618800602
根据一般程序D中的步骤D1使用2，4-二氟硝基苯(2.068mL，18.86mmol)和4-氟苯胺(1.811mL，18.86mmol)制备从而获得5-氟-N-(4-氟苯基)-2-硝基苯胺，为橙色固体：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 9.56(1H，s)，8.24(1H，dd，J＝9.5，6.2Hz)，7.36-7.44(2H，m)，7.25-7.33(2H，m)，6.67-6.74(1H，m)，6.64(1H，dd，J＝11.8，2.6Hz)；LC-MS(ESI)m/z 251.1[M+H]+.
5-氟-N1-(4-氟苯基)苯-1，2-二胺
Figure BDA00002500618800611
根据一般程序D中的步骤D2使用5-氟-N-(4-氟苯基)--2-硝基苯胺(3.7432g，14.96mmol)制备从而获得5-氟-N1-(4-氟苯基)-苯-1，2-二胺，为棕色浆料：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 7.18(1H，s)，6.98-7.07(2H，m)，6.81-6.90(2H，m)，6.65-6.76(2H，m)，6.54-6.62(1H，m)，4.61(2H，s)；LC-MS(ESI)m/z 221.1[M+H]+.
(S)-1-(4-氟-2-(4-氟苯基氨基)苯基氨基)-1-氧代丙烷-2-基氨基甲酸(9H-芴-9-基)甲酯
向Fmoc-L-Ala-OH(4.45g，14.30mmol)和N-甲基吗啉(1.573mL，14.30mmol)在DCM(34.1mL)中的-10℃溶液(NaCl-冰浴)中加入氯甲酸异丁酯(1.782mL，13.62mmol)。将所得混浊无色混合物在-10℃下搅拌30分钟。然后向该混合物中加入5-氟-N1-(4-氟苯基)-苯-1，2-二胺(1.500g，6.81mmol)在DCM(12.75mL)中的溶液。将所得混合物在-10℃下搅拌1小时，向该冷混合物中加入饱和水NH4Cl溶液(100mL)。通过过滤收集沉淀并用水(100mL)洗涤从而获得(S)--1-(4-氟-2-(4-氟苯基氨基)苯基氨基)-1-氧代丙烷-2-基氨基甲酸(9H-芴-9-基)甲酯，为灰白色固体：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 9.42(1H，s)，7.89(2H，d，J＝7.6Hz)，7.63-7.78(3H，m)，7.22-7.46(6H，m)，6.96-7.14(4H，m)，6.83(1H，dd，J＝11.2，2.7Hz)，6.67(1H，td，J＝8.5，2.8Hz)，4.11-4.33(4H，m)，1.28(3H，d，J＝7.0Hz)；LC-MS(ESI)m/z 514.2[M+H]+.该灰白色固体以粗品形式使用而无需纯化。
(S)-1-(6-氟-1-(4-氟苯基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基氨基甲酸(9H-芴-9-基)甲酯
Figure BDA00002500618800621
在100℃下在搅拌下加热(S)-1-(4-氟-2-(4-氟苯基氨基)-苯基氨基)-1-氧代丙烷-2-基氨基甲酸(9H-芴-9-基)甲酯(3.500g，6.82mmol)在乙酸(45.4mL)中的异质混合物。在26小时后，将该混合物冷却至室温并倒入DCM(100mL)和饱和水NaHCO3溶液(100mL)中。移出aq.层，有机层用饱和水NaHCO3溶液(100mL x 1)、水(100mL x1)和盐水(100mL x1)洗涤，用MgSO4干燥，过滤并在减压下浓缩从而获得(S)-1-(6-氟-1-(4-氟苯基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基氨基甲酸(9H-芴-9-基)甲酯，为深棕色浆料：LC-MS(ESI)m/z 496.1[M+H]+.在环化期间发生差向异构化并且该深棕色浆料以粗品形式使用而无需进一步纯化。
1-(6-氟-1-(4-氟苯基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙胺
Figure BDA00002500618800622
向1-(6-氟-1-(4-氟苯基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基氨基甲酸(9H-芴-9-基)甲酯(3.38g，6.82mmol)在DCM(34.1mL)中的溶液中加入哌啶(0.809mL，8.19mmol)，并且在室温下搅拌该混合物。在4天后，在减压下浓缩该混合物从而获得棕色固体。该棕色固体通过柱色谱法在120g Redi-Sep柱上进行纯化，使用0％至100％的在DCM中的DCM∶MeOH∶NH4OH(89∶9∶1)作为洗脱剂梯度洗脱超过27分钟，然后使用100％的DCM∶MeOH∶NH4OH(89∶9∶1)作为洗脱剂等度洗脱5分钟，从而用三个步骤获得1-(6-氟-1-(4-氟苯基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙胺，为粉红色浆料状固体。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 7.67(3H，td，J＝8.8，5.0Hz)，7.48(2H，t，J＝8.8Hz)，7.09(1H，ddd，J＝9.8，8.8，2.5Hz)，6.88(1H，dd，J＝9.0，2.3Hz)，3.93(1H，q，J＝6.8Hz)，1.92(2H，br.s.)，1.33(3H，d，J＝6.7Hz)；LC-MS(ESI)m/z 274.0[M+H]+.
4-氨基-6-((-1-(6-氟-1-(4-氟苯基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)--5-嘧啶甲腈
Figure BDA00002500618800631
根据一般程序D中的步骤D6使用1-(6-氟-1-(4-氟苯基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙胺(0.8570g，3.14mmol)制备从而获得4-氨基-6-((-1-(6-氟-1-(4-氟苯基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)--5-嘧啶甲腈，为灰白色固体：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 7.86(1H，s)，7.72(1H，dd，J＝8.8，4.9Hz)，7.67(1H，d，J＝7.2Hz)，7.54-7.63(2H，m)，7.36(2H，t，J＝8.8Hz)，7.19(2H，br.s.)，7.10(1H，ddd，J＝9.8，8.9，2.4Hz)，6.86(1H，dd，J＝8.9，2.4Hz)，5.46(1H，quin，J＝6.9Hz)，1.52(3H，d，J＝6.8Hz)；LC-MS(ESI)m/z 392.0[M+H]+.
4-氨基-6-(((1R)-1-(6-氟-1-(4-氟苯基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)-氨基)-5-嘧啶甲腈，和4-氨基-6-(((1S)-1-(6-氟-1-(4-氟苯基)--1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈
使用制备SFC在AD-H柱上分离外消旋混合物(953.8mg)从而获得两种级分：
在SFC AD-H柱上的第一峰和在分析AD-H柱上的第二峰：4-氨基-6-(((1R)-1-(6-氟-1-(4-氟苯基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)--5-嘧啶甲腈，为灰白色固体：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm7.86(1H，s)，7.72(1H，dd，J＝8.8，4.9Hz)，7.67(1H，d，J＝7.4Hz)，7.54-7.63(2H，m)，7.36(2H，t，J＝8.8Hz)，7.19(2H，br.s.)，7.10(1H，ddd，J＝9.9，8.9，2.5Hz)，6.86(1H，dd，J＝8.9，2.4Hz)，5.46(1H，quin，J＝6.9Hz)，1.52(3H，d，J＝6.8Hz)；LC-MS(ESI)m/z 392.0[M+H]+.
在SFC AD-H柱上的第二峰和在分析AD-H柱上的第一峰：4-氨基-6-(((1S)-1-(6-氟-1-(4-氟苯基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)--5-嘧啶甲腈，为灰白色固体：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm7.86(1H，s)，7.72(1H，dd，J＝8.8，4.9Hz)，7.67(1H，d，J＝7.2Hz)，7.55-7.63(2H，m)，7.36(2H，t，J＝8.8Hz)，7.19(2H，br.s.)，7.10(1H，ddd，J＝9.7，8.9，2.5Hz)，6.86(1H，dd，J＝8.9，2.4Hz)，5.46(1H，quin，J＝6.9Hz)，1.52(3H，d，J＝6.8Hz)；LC-MS(ESI)m/z 392.0[M+H]+.
实施例12：4-氨基-6-(((1S)-1-(6-氟-3-(2-吡啶基)咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈的制备
根据一般程序C制备从而获得4-氨基-6-(((1S)--1-(6-氟-3-(2-吡啶基)咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，为白色固体：1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)：δppm 9.1(d，1H)，8.8(d，1H)，8.0(m，2H)，7.7-7.8(m，2H)，7.5(m，2H)，7.3(bs，2H)，6.8(m，1H)，5.7(m，1H)，1.49(d，3H)：LC-MS(ESI)m/z 374.14[M+H]+.
实施例13：4-氨基-6-(((1S)-1-(3-(3-氯-5-氟苯基)--6-氟咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈的制备
Figure BDA00002500618800651
根据一般程序C制备从而获得4-氨基-6-(((1S)--1-(3-(3-氯-5-氟苯基)-6-氟咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基)乙基)氨基)--5-嘧啶甲腈：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ8.4(d，1H)，7.9(s，1H)，7.71-7.74(m，1H)，7.4-7.5(m，4H)，7.3(bs，2H)，7.0(d，1H)，5.4(m，1H)，1.5(d，3H)；LC-MS(ESI)m/z 425.12[M+H]+。
实施例14：4-氨基-6-(((1S)-1-(3-(4-氯苯基)咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈的制备
Figure BDA00002500618800652
根据一般程序C制备从而获得4-氨基-6-(((1S)-1-(3-(4-氯苯基)-咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：(400MHz，DMSO-d6)：δ8.16(d，1H)，7.9(s，1H)，7.57-7.67(m，5H)，7.3(dd，1H)，7.2(bs，2H)，6.8(m，2H)，5.4(m，1H)，1.4(d，3H)；LC-MS(ESI)m/z 389.12[M+H]+。
实施例15：4-氨基-6-((-1-(6-氟-1-(3-(2-吡啶基)苯基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈、4-氨基-6-(((1R)-1-(6-氟-1-(3-(2-吡啶基)苯基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，和4-氨基-6-(((1S)-1-(6-氟-1-(3-(2-吡啶基)苯基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)--5-嘧啶甲腈的制备
4-氨基-6-((-1-(6-氟-1-(3-(2-吡啶基)苯基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈
Figure BDA00002500618800661
根据一般程序D制备从而获得4-氨基-6-((-1-(6-氟-1-(3-(2-吡啶基)苯基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈：1H NMR(400MHz，氯仿-d)δppm 8.70(1H，d，J＝4.5Hz)，8.17(2H，d，J＝7.6Hz)，7.98(1H，s)，7.65-7.84(4H，m)，7.48(1H，d，J＝7.4Hz)，7.30(1H，ddd，J＝6.7，4.9，1.7Hz)，7.02-7.10(1H，m)，6.87(1H，dd，J＝8.4，2.3Hz)，6.23(1H，d，J＝7.8Hz)，5.63(1H，quin，J＝7.1Hz)，5.37(2H，br.s.)，1.62(3H，d，J＝6.8Hz)；LC-MS(ESI)m/z 451.33[M+H]+。
4-氨基-6-(((1R)-1-(6-氟-1-(3-(2-吡啶基)苯基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，和4-氨基-6-(((1S)-1-(6-氟-1-(3-(2-吡啶基)苯基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈
Figure BDA00002500618800662
使用制备SFC在AD-H柱上分离外消旋混合物(29mg)从而获得两种级分：
在SFC AD-H柱上的第一峰和在ChiralpakTM MAD-H柱上的第二峰：4-氨基-6-(((1R)-1-(6-氟-1-(3-(2-吡啶基)苯基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，为灰白色固体：1H NMR(400MHz，氯仿-d)δppm 8.70(1H，d，J＝4.5Hz)，8.17(2H，d，J＝7.6Hz)，7.98(1H，s)，7.65-7.84(4H，m)，7.48(1H，d，J＝7.4Hz)，7.30(1H，ddd，J＝6.7，4.9，1.7Hz)，7.02-7.10(1H，m)，6.87(1H，dd，J＝8.4，2.3Hz)，6.23(1H，d，J＝7.8Hz)，5.63(1H，quin，J＝7.1Hz)，5.37(2H，br.s.)，1.62(3H，d，J＝6.8Hz)；LC-MS(ESI)m/z 451.1[M+H]+。
在SFC AD-H柱上的第二峰和在ChiralpakTM MAD-H柱上的第一峰：4-氨基-6-(((1S)-1-(6-氟-1-(3-(2-吡啶基)苯基)-1H-苯并咪唑-2-基)-乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，为灰白色固体：1H NMR(400MHz，氯仿-d)-δppm 8.70(1H，d，J＝4.7Hz)，8.17(2H，d，J＝7.6Hz)，7.98(1H，s)，7.66-7.84(4H，m)，7.48(1H，d，J＝7.2Hz)，7.30(1H，ddd，J＝6.7，4.9，1.7Hz)，7.06(1H，td，J＝9.2，2.3Hz)，6.87(1H，dd，J＝8.6，2.3Hz)，6.24(1H，d，J＝7.6Hz)，5.63(1H，quin，J＝7.0Hz)，5.38(2H，br.s.)，1.62(3H，d，J＝6.8Hz)；LC-MS(ESI)m/z 451.1[M+H]+。
实施例16：4-氨基-6-(((1S)-1-(6-氟-1-苯基-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈的制备
(S)-1-(6-氟-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基氨基甲酸叔丁酯
Figure BDA00002500618800671
将Boc-L-Ala-OH(3.00g，15.86mmol)和3，4-二氨基-1-氟苯(2.00g，15.86mmol)混合在吡啶(52.9mL)中。加入EDC HCl(9.12g，47.6mmol)并将该混合物在环境温度下搅拌20分钟。用EtOAc稀释该反应混合物，并用水、1.0N HCl和盐水洗涤。用Na2SO4干燥有机层，过滤并浓缩。粗残余物通过柱色谱法在120g Redi-SepTM柱上进行纯化，使用0％至100％的在己烷中的EtOAc作为洗脱剂梯度洗脱。合并期望的级分并在减压下浓缩从而获得粗酰胺中间体。将该酰胺溶解在AcOH(26.9mL)中并在70℃的油浴中加热约30分钟。用EtOAc稀释该反应混合物，并小心地用K2CO3水溶液中和。用NaCl洗涤有机层，用Na2SO4干燥，并过滤。将滤液浓缩至干从而产生(S)-1-(6-氟-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基氨基甲酸叔丁酯：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 12.23(1H，br.s.)，7.15-7.61(3H，m)，6.98(1H，t，J＝8.5Hz)，4.78-4.89(1H，m)，1.46(3H，d，J＝7.0Hz)，1.40(9H，s)；LC-MS(ESI)m/z 280.1[M+H]+。
(S)-1-(6-氟-1-苯基-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基氨基甲酸叔丁酯和(S)-1-(5-氟-1-苯基-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基氨基甲酸叔丁酯
Figure BDA00002500618800681
将(S)-1-(6-氟-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基氨基甲酸叔丁酯(200mg，0.716mmol)、苯基硼酸(175mg，1.432mmol)、DCM(9.5mL)和吡啶(116μL，1.432mmol)加入到玻璃小瓶中。加入乙酸铜(II)(104μL，1.074mmol)，并让松散地盖住的小瓶在室温下搅拌5天。将该反应混合物在NH4Cl饱和水溶液和DCM之间进行分配。用NH4Cl饱和水溶液洗涤有机层并在减压下浓缩。将残余物溶解在MeOH中并通过反相半制备HPLC纯化。合并含有期望产物的级分从而在冻干后获得38mg产品。使用制备SFC在AD-H柱上分离该区域异构体从而获得两种级分：
基于这两种级分的NOESY光谱，第一级分被指定为(S)-1-(6-氟-1-苯基-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基氨基甲酸叔丁酯。在减压下浓缩该级分从而获得12mg白色固体：1H NMR(500MHz，MeOH-d4)δppm7.66(m，3H)7.58-7.64(m，1H)7.52(br.s.，2H)7.07(m，1H)6.78(dd，J＝8.68，2.32Hz，1H)1.45(d，J＝7.09Hz，3H)1.37(s，9H).次甲基信号被参考峰掩盖。
在减压下浓度第二级分从而获得12mg(S)-1-(5-氟-1-苯基-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基氨基甲酸叔丁酯：1H NMR(500MHz，MeOH-d4)δppm 7.58-7.68(m，3H)7.53(br.s.，2H)7.38(dd，J＝9.29，1.71Hz，1H)7.00-7.08(m，2H)1.45(d，J＝6.85Hz，3H)1.33-1.41(m，9H).次甲基信号被参考峰掩盖。
(S)-1-(6-氟-1-苯基-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙胺
Figure BDA00002500618800691
将在1，4-二噁烷(1.0mL)中的4.0M HCl加入到(S)-1-(6-氟-1-苯基-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基氨基甲酸叔丁酯(12mg，0.034mmol)在DCM(1mL)中的溶液中。在～2小时后，在减压下将该反应混合物浓缩至干。将所得固体在DCM和NaHCO3饱和水溶液之间进行分配。用DCM萃取水层。合并有机层，用Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩从而获得(S)-1-(6-氟-1-苯基-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙胺：LC-MS(ESI)m/z 256.1[M+H]+。该产物以粗品的形式使用而无需纯化。
4-氨基-6-(((1S)-1-(6-氟-1-苯基-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈
Figure BDA00002500618800692
根据一般程序D中的步骤D6使用(S)-1-(6-氟-1-苯基-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙胺制备，从而获得4-氨基-6-(((1S)-1-(6-氟-1-苯基-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈：1H NMR(500MHz，MeOH-d4)δppm 7.86(s，1H)7.67(br.s.，1H)7.56-7.62(m，2H)7.46-7.56(m，3H)7.07(td，J＝9.17，2.45Hz，1H)6.79(dd，J＝8.68，2.57Hz，1H)5.59(q，J＝7.01Hz，1H)1.62(d，J＝7.09Hz，3H)；LC-MS(ESI)m/z 374.1[M+H]+。
实施例17：4-氨基-6-(((1S)-1-(5-氟-1-苯基-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈的制备
Figure BDA00002500618800701
根据实施例16的程序使用(S)-1-(5-氟-1-苯基-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基氨基甲酸叔丁酯制备，从而获得4-氨基-6-(((1S)-1-(5-氟-1-苯基-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈：1H NMR(500MHz，MeOH-d4)δppm 7.86(s，1H)7.57-7.62(m，2H)7.46-7.57(m，3H)7.38(dd，J＝8.93，1.83Hz，1H)7.00-7.09(m，2H)5.56(q，J＝6.93Hz，1H)1.62(d，J＝7.09Hz，3H)；LC-MS(ESI)m/z 374.1[M+H]+.
实施例18：4-氨基-6-((1-(1-(3，5-二氟苯基)-4-氟-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈、4-氨基-6-(((1R)-1-(1-(3，5-二氟苯基)-4-氟-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，和4-氨基-6-(((1S)--1-(1-(3，5-二氟苯基)-4-氟-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈的制备
4-氨基-6-((1-(1-(3，5-二氟苯基)-4-氟-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈
Figure BDA00002500618800702
根据一般程序D制备从而获得4-氨基-6-((1-(1-(3，5-二氟苯基)-4-氟-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 7.87(1H，s)，7.77(1H，d，J＝7.6Hz)，7.32-7.42(3H，m)，7.14-7.27(3H，m)，7.07-7.14(1H，m)，7.02(1H，dd，J＝8.0，0.6Hz)，5.64(1H，quin，J＝7.0Hz)，1.59(3H，d，J＝6.8Hz)；LC-MS(ESI)m/z 410.1[M+H]+。
4-氨基-6-(((1R)-1-(1-(3，5-二氟苯基)-4-氟-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，和4-氨基-6-(((1S)-1-(1-(3，5-二氟苯基)-4-氟-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈
使用制备SFC在AD-H柱上分离外消旋混合物(208mg)从而获得两种级分：
在SFC AD-H柱上的第一峰、在ChiralpakTM MAD-H柱上的第一峰，和在ChiralcelTM OD-H柱上的第二峰：4-氨基-6-(((1R)-1-(1-(3，5-二氟苯基)-4-氟-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，为棕褐色固体：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 7.87(1H，s)，7.77(1H，d，J＝7.6Hz)，7.32-7.42(3H，m)，7.14-7.27(3H，m)，7.07-7.14(1H，m)，7.02(1H，dd，J＝8.0，0.6Hz)，5.64(1H，quin，J＝7.0Hz)，1.59(3H，d，J＝6.8Hz)；LC-MS(ESI)m/z 410.0[M+H]+。
在SFC AD-H柱上的第二峰、在ChiralpakTM MAD-H柱上的第二峰，和在ChiralcelTM OD-H柱上的第一峰：4-氨基-6-(((1S)-1-(1-(3，5-二氟苯基)-4-氟-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，为棕褐色固体：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 7.87(1H，s)，7.77(1H，d，J＝7.8Hz)，7.32-7.42(3H，m)，7.14-7.27(3H，m)，7.07-7.14(1H，m)，7.02(1H，dd，J＝8.2，0.8Hz)，5.64(1H，quin，J＝7.0Hz)，1.59(3H，d，J＝6.7Hz)；LC-MS(ESI)m/z 410.0[M+H]+。
实施例19：4-氨基-6-((1-(6-氟-1-(2-(甲基磺酰基)苯基)--1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈、4-氨基-6-(((1R)--1-(6-氟-1-(2-(甲基磺酰基)苯基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)--5-嘧啶甲腈，和4-氨基-6-(((1R)-1-(6-氟-1-(2-(甲基磺酰基)苯基)--1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈的制备
5-氟-N-(2-(甲硫基)苯基)-2-硝基苯胺
Figure BDA00002500618800721
根据一般程序D中的步骤D1使用2，4-二氟硝基苯(3.46mL，31.5mmol)和2-(甲硫基)苯胺(3.88mL，31.5mmol)制备，从而获得5-氟-N-(2-(甲硫基)苯基)-2-硝基苯胺，为橙色固体：1H NMR](400MHz，DMSO-d6)δppm 9.52(1H，s)，8.26(1H，dd，J＝9.4，6.1Hz)，7.34-7.45(3H，m)，7.26-7.32(1H，m)，6.67-6.75(1H，m)，6.35(1H，dd，J＝11.6，2.6Hz)，2.43(3H，s)；LC-MS(ESI)m/z 279.0[M+H]+在2.176分钟；m/z 277.0[M-H]-在2.169分钟。
5-氟-N1-(2-(甲硫基)苯基)苯-1，2-二胺
Figure BDA00002500618800722
根据一般程序D中的步骤D2使用5-氟-N-(2-(甲硫基)苯基)--2-硝基苯胺(3.7956g，13.64mmol)制备，从而获得5-氟-N1-(2-(甲硫基)苯基)苯-1，2-二胺，为淡黄色浆料：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 7.35(1H，dd，J＝7.7，1.5Hz)，7.11(1H，td，J＝7.7，1.5Hz)，6.91(1H，td，J＝7.5，1.2Hz)，6.78(1H，dd，J＝8.0，1.4Hz)，6.71(1H，dd，J＝8.6，5.9Hz)，6.65(1H，s)，6.52-6.62(2H，m)，4.61(2H，s)，2.40(3H，s)；LC-MS(ESI)m/z 249.0[M+H]+在2.275分钟。
(S)-1-(4-氟-2-(2-(甲硫基)苯基氨基)苯基氨基)-1-氧代丙烷-2-基氨基甲酸叔丁酯
Figure BDA00002500618800723
根据一般程序D中的步骤D3使用5-氟-N1-(2-(甲硫基)苯基)-苯-1，2-二胺(3.0658g，12.35mmol)制备，从而获得(S)-1-(4-氟-2-(2-(甲硫基)苯基氨基)苯基氨基)-1-氧代丙烷-2-基氨基甲酸叔丁酯，为白色固体：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 9.56(1H，br.s.)，7.36(1H，dd，J＝7.8，1.4Hz)，7.26(1H，dd，J＝8.6，6.3Hz)，7.12-7.19(1H，m)，7.10(1H，d，J＝6.8Hz)，6.97-7.07(3H，m)，6.70(1H，td，J＝8.2，2.3Hz)，6.61(1H，d，J＝11.0Hz)，4.14(1H，quin，J＝6.8Hz)，2.37(3H，s)，1.34(9H，s)，1.26(3H，d，J＝7.2Hz)；LC-MS(ESI)m/z 420.1[M+H]+在2.506分钟。
N-(1-(6-氟-1-(2-(甲硫基)苯基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基)乙酰胺
Figure BDA00002500618800731
根据一般程序D中的步骤D4使用(S)-1-(4-氟-2-(2-(甲硫基)-苯基氨基)苯基氨基)-1-氧代丙烷-2-基氨基甲酸叔丁酯(4.8685g，11.61mmol)制备，从而获得N-(1-(6-氟-1-(2-(甲硫基)苯基)--1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基)乙酰胺，为粉红色固体：LC-MS(ESI)]m/z344.0[M+H]+。
N-(1-(6-氟-1-(2-(甲基磺酰基)苯基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基)-乙酰胺
Figure BDA00002500618800732
向N-(1-(6-氟-1-(2-(甲硫基)苯基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基)-乙酰胺(1.1697g，3.41mmol)在THF(25.5mL)和水(8.52mL)中的混合物中加入过硫酸氢钾(5.23g，8.52mmol)，并在室温下搅拌该混合物。在48小时后，向该混合物中加入水(50mL)，并用DCM(50mL x 2)萃取。合并的有机层用Na2SO4干燥，过滤，并将其与白色固体合并在一起，并在减压下浓缩从而获得N-(1-(6-氟-1-(2-(甲基磺酰基)-苯基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基)乙酰胺，为橙色固体：LC-MS(ESI)-m/z 376.0[M+H]+。该橙色固体以粗品的形式使用而无需纯化。
1-(6-氟-1-(2-(甲基磺酰基)苯基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙胺
Figure BDA00002500618800741
根据一般程序D  中的步骤D5a  使用N-(1-(6-氟-1-(2-(甲基磺酰基)苯基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基)-乙酰胺(1.2419g，3.31mmol)制备，从而获得包括其阻转异构体在内的1-(6-氟-1-(2-(甲基磺酰基)苯基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙胺，为棕褐色固体：LC-MS(ESI)m/z 334.0[M+H]+。
4-氨基-6-((1-(6-氟-1-(2-(甲基磺酰基)苯基)-1H-苯并咪唑-2-基)-乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈
Figure BDA00002500618800742
根据一般程序D中的步骤D6使用1-(6-氟-1-(2-(甲基磺酰基)-苯基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙胺(0.5316g，1.595mmol)制备，从而获得4-氨基-6-((1-(6-氟-1-(2-(甲基磺酰基)苯基)-1H-苯并咪唑-2-基)-乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，为黄色固体，其是阻转异构体和立体异构体的混合物。1H NMR (400MHz，DMSO-d6)，1H-NMR显示出两组峰，因为存在两种阻转异构体；LC-MS(ESI)m/z 452.0[M+H]+。
4-氨基-6-(((1R)-1-(6-氟-1-(2-(甲基磺酰基)苯基)--1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，和4-氨基-6-(((1R)--1-(6-氟-1-(2-(甲基磺酰基)苯基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)--5-嘧啶甲腈
Figure BDA00002500618800751
使用制备SFC在AD-H柱上分离阻转异构体和立体异构体的混合物(403.9mg)从而获得四种级分：
在SFC  AD-H  柱上的第一峰：4-氨基-6-(((1R)--1-(6-氟-1-(2-(甲基磺酰基)苯基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)--5-嘧啶甲腈，为棕色固体：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.05-8.11(1H，m)，7.78(1H，dd，J＝8.8，4.9Hz)，7.66-7.73(2H，m)，7.60-7.65(2H，m)，7.44-7.52(1H，m)，7.04-7.18(3H，m)，6.89(1H，dd，J＝8.9，2.4Hz)，5.63-5.72(1H，m)，2.85(3H，s)，1.56(3H，d，J＝6.7Hz)；LC-MS(ESI)m/z 452.0[M+H]+。
在SFC  AD-H  柱上的第二峰：4-氨基-6-(((1S)--1-(6-氟-1-(2-(甲基磺酰基)苯基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)--5-嘧啶甲腈，为棕色固体：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.05-8.11(1H，m)，7.78(1H，dd，J＝8.8，4.9Hz)，7.66-7.73(2H，m)，7.60-7.66(2H，m)，7.45-7.51(1H，m)，7.13(3H，ddd，J＝9.8，8.9，2.4Hz)，6.88(1H，dd，J＝8.8，2.5Hz)，5.62-5.72(1H，m)，2.85(3H，s)，1.56(3H，d，J＝6.8Hz)；LC-MS(ESI)m/z 452.0[M+H]+。
在SFC  AD-H  柱上的第三峰：4-氨基-6-(((1R)--1-(6-氟-1-(2-(甲基磺酰基)苯基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)--5-嘧啶甲腈，为棕色固体：1H NMR](400MHz，DMSO-d6)δppm 8.20(1H，dd，J＝7.7，1.7Hz)，7.87-7.99(3H，m)，7.75-7.83(2H，m)，7.32(2H，br.s.)，7.15(1H，ddd，J＝9.8，8.9，2.4Hz)，6.92(1H，dd，J＝8.9，2.4Hz)，6.86(1H，d，J＝7.2Hz)，5.36(1H，quin，J＝6.6Hz)，2.88(3H，s)，1.43(3H，d，J＝6.8Hz)；LC-MS(ESI)m/z 452.0[M+H]+。
在SFC  AD-H  柱上的第四峰：4-氨基-6-(((1S)--1-(6-氟-1-(2-(甲基磺酰基)苯基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)--5-嘧啶甲腈，为棕色固体：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.20(1H，dd，J＝7.7，1.7Hz)，7.86-8.00(3H，m)，7.74-7.84(2H，m)，7.32(2H，br.s.)，7.10-7.20(1H，m)，6.92(1H，dd，J＝9.0，2.3Hz)，6.86(1H，d，J＝5.5Hz)，5.36(1H，quin，J＝6.1Hz)，2.88(3H，s)，1.43(3H，d，J＝6.7Hz)；LC-MS(ESI)m/z 452.0[M+H]+。
实施例20：2-((1S)-1-((6-氨基-5-氰基-4-嘧啶基)氨基)乙基)-1-环丙基-N-甲基-1H-苯并咪唑-7-甲酰胺的制备
2-(环丙基氨基)-N-甲基-3-硝基苯甲酰胺
Figure BDA00002500618800761
向2-溴-3-硝基苯甲酸(0.974g，3.96mmol)在DMF(3mL)中的溶液中加入2.Om甲胺在四氢呋喃中的溶液(2.97mL，5.94mmol)、1，1′-二甲基三乙胺(1.38mL，7.92mmol)和(1H-苯并[d][1，2，3]三唑-1-基氧)-三吡咯烷-1-基磷鎓六氟磷(V)酸盐(2.47g，4.75mmol)，并将所得混合物在室温下搅拌2小时。用EtOAc稀释该反应混合物，用水和盐水洗涤，用MgSO4干燥，并在减压下浓缩。残余物通过柱色谱法在硅胶柱上使用DCM/EtOAc-DCM(1∶1)作为洗脱剂来进行纯化，从而获得2-溴-N-甲基-3-硝基苯甲酰胺：LC-MS(ESI)m/z 261.0[M+H]+。
将2-溴-N-甲基-3-硝基苯甲酰胺(830mg，3.20mmol)、环丙胺(666μL，9.61mmol)在THF(10mL)中的混合物在N2下在60℃下加热18小时。用EtOAc稀释该反应混合物，用水和盐水洗涤，用MgSO4干燥，并在减压下浓缩。残余物通过柱色谱法在硅胶柱上使用DCM-EtOAc(1∶1)作为洗脱剂来进行纯化，从而获得2-(环丙基氨基)--N-甲基-3-硝基苯甲酰胺：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.54-8.47(m，2H)，7.95(dd，J＝8，4Hz，1H)，7.64(dd，J＝8，4Hz，1H)，6.77(dd，J＝8，4Hz，1H)，2.76(d，J＝8Hz，3H)，2.68-2.62(m，1H)，0.67-0.60(m，2H)，0.44-0.40(m，2H)；LC-MS(ESI)m/z 236.1[M+H]+。
3-氨基-2-(环丙基氨基)-N-甲基苯甲酰胺
Figure BDA00002500618800771
在N2下向2-(环丙基氨基)-N-甲基-3-硝基苯甲酰胺(1.76g，7.48mmol)在MeOH(25mL)中的溶液中加入10wt％的负载于碳的钯(180mg，75μmol)。在用N2吹扫烧瓶2分钟后，将该溶液在H2气囊下搅拌3小时。LC-MS显示反应完成。过滤反应混合物，收集并用MeOH冲洗滤液并进行浓缩。残余物通过柱色谱法在硅胶柱上使用EtOAc∶DCM(1∶1)作为洗脱剂来进行纯化，从而获得3-氨基-2-(环丙基氨基)-N-甲基苯甲酰胺：1H NMR(400MHz，CDCl3)δ6.85-6.80(m，3H)，6.20(br，1H)，5.94(br，1H)，4.07(br，1H)，2.98(d，J＝4Hz，3H)，2.63-2.55(m，1H)，0.65-0.53(m，4H)；LCMS(ESI)m/z 206.1[M+H]+。
(S)-1-(2-(环丙基氨基)-3-(甲基氨基甲酰基)苯基氨基)-1-氧代丙烷-2-基氨基甲酸叔丁酯
Figure BDA00002500618800772
向3-氨基-2-(环丙基氨基)-N-甲基苯甲酰胺(1.31g，6.38mmol)在DMF(3mL)中的溶液中加入Boc-L-Ala-OH(1.21g，6.38mmol)、1，1′-二甲基三乙胺(2.22mL，12.8mmol)和(1H-苯并[d][1，2，3]三唑-1-基氧)三吡咯烷-1-基磷鎓六氟磷(V)酸盐(3.99g，7.66mmol)，并将所得混合物在室温下搅拌2小时。用EtOAc稀释该反应混合物，用水、盐水洗涤，并用硫酸镁干燥。在减压下浓缩之后，残余物通过柱色谱法在硅胶柱上使用EtOAc∶DCM(1∶1)作为洗脱剂来进行纯化，从而获得(S)-1-(2-(环丙基氨基)-3-(甲基氨基甲酰基)苯基氨基)-1-氧代丙烷-2-基氨基甲酸叔丁酯：1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.56(br，1H)，8.14(d，J＝8Hz，1H)，7.18(d，J＝8Hz，1H)，6.99(dd，J＝8，8Hz，1H)，6.24(br，1H)，6.01(br，1H)，4.38(br，1H)，3.00(d，J＝4Hz，3H)，2.58(br，1H)，1.60(s，3H)，1.48(s，9H)，0.64-0.59(m，2H)，0.54-0.49(m，2H)；LC-MS(ESI)m/z 377.2[M+H]+。
(S)-2-(1-氨基乙基)-1-环丙基-N-甲基-1H-苯并[d]咪唑-7-甲酰胺
Figure BDA00002500618800781
将搅拌着的(S)-1-(2-(环丙基氨基)-3-(甲基氨基甲酰基)苯基氨基)-1-氧代丙烷-2-基氨基甲酸叔丁酯(1.1g，2.9mmol)在AcOH(30mL)中的溶液在65℃下加热2小时，然后冷却至室温。在减压下浓缩之后，用在1，4-二噁烷(20mL)中的4M HCl处理残余物，并将其在室温下搅拌40分钟。在减压下浓缩该混合物并将其溶解在用1NNaOH碱化至pH 9.5的水(5mL)中。浓缩该混合物并用MeOH-CDM(1∶1)研磨。粗产物通过柱色谱法在硅胶柱上使用DCM-MeOH-NH4OH(9∶1∶0.05)作为洗脱剂来进行纯化，从而获得(S)-2-(1-氨基乙基)-1-环丙基-N-甲基-1H-苯并[d]咪唑-7-甲酰胺：1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.80(d，J＝8Hz，1H)，7.33(d，J＝8Hz，1H)，7.23(dd，J＝8，8Hz，1H)，6.09(br，1H)，4.61(t，J＝8Hz，1H)，3.53-3.46(m，1H)，3.11(d，J＝4Hz，3H)，1.63(d，J＝8Hz，3H)，1.22-1.07(m，2H)，1.02-0.94(m，1H)，0.90-0.83(m，1H)；LC-MS(ESI)m/z 259.1[M+H]+。
2-((1S)-1-((6-氨基-5-氰基-4-嘧啶基)氨基)乙基)-1-环丙基-N-甲基-1H-苯并咪唑-7-甲酰胺
Figure BDA00002500618800782
将(S)-2-(1-氨基乙基)-1-环丙基-N-甲基-1H-苯并[d]咪唑-7-甲酰胺(95mg，0.37mmol)、4-氨基-6-氯嘧啶-5-甲腈(56.8mg，0.368mmol)和1，1′-二甲基三乙胺(128μL，0.74mmol)在正丁醇(2mL)中的混合物在120℃搅拌5小时。在冷却至室温后，在减压下浓缩该混合物。残余物通过柱色谱法在硅胶柱上进行纯化，使用0％至10％的在DCM-EtOAc(1∶1)中的MeOH作为洗脱剂梯度洗脱，从而获得2-((1S)--1-((6-氨基-5-氰基-4-嘧啶基)氨基)乙基)-1-环丙基-N-甲基-1H-苯并咪唑-7-甲酰胺：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.45-8.40(m，1H)，8.05(s，1H)，7.66(d，J＝8Hz，1H)，7.62(d，J＝4Hz，1H)，7.31(br，2H)，7.24(d，J＝8Hz，1H)，7.19(dd，J＝8，8Hz，1H)，5.89-5.81(m，1H)，2.83(d，J＝4Hz，3H)，1.62(d，J＝8Hz，3H)，1.12-1.04(m，2H)，0.95-0.79(m，2H)；LC-MS(ESI)m/z 377.2[M+H]+。
实施例21：2-((1S)-1-((6-氨基-5-(4-(甲基磺酰基)苯基)-4-嘧啶基)-氨基)乙基)-1-环丙基-N-甲基-1H-苯并咪唑-7-甲酰胺的制备
6-氯-5-碘嘧啶-4-胺
Figure BDA00002500618800791
向6-氯嘧啶-4-胺(5.29g，40.8mmol)和三氟甲烷磺酸(40mL，452mmol)的悬浮液中加入N-碘代琥珀酰亚胺(9.19g，40.8mmol)。将该混合物在室温下搅拌3小时。在搅拌下将该混合物倒入50mL含有15gNaOH的冰中放置10分钟。过滤所得沉淀，用水洗涤，在DCM中研磨并通过过滤收集从而获得6-氯-5-碘嘧啶-4-胺：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.11(s，1H)；LC-MS(ESI)m/z 255.9[M+H]+。
(S)-2-(1-(6-氨基-5-碘嘧啶-4-基氨基)乙基)-1-环丙基-N-甲基-1H-苯并[d]咪唑-7-甲酰胺
Figure BDA00002500618800792
在120℃搅拌(S)-2-(1-氨基乙基)-1-环丙基-N-甲基-1H-苯并[d]咪唑-7-甲酰胺(在实施例20中制备，190mg，0.74mmol)、6-氯-5-碘嘧啶-4-胺(188mg，0.736mmol)和1，1′-二甲基三乙胺(256μL，1.47mmol)在正丁醇(2mL)中的混合物。在18小时后，将该混合物冷却至室温并在减压下进行浓缩。残余物通过柱色谱法在硅胶柱上进行纯化，使用0％至10％的在DCM-EtOAc(1∶1)中的MeOH作为洗脱剂梯度洗脱来，获得(S)-2-(1-(6-氨基-5-碘嘧啶-4-基氨基)乙基)-1-环丙基-N-甲基-1H-苯并[d]咪唑-7-甲酰胺：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.46-8.40(m，1H)，7.87(s，1H)，7.67(d，J＝8Hz，1H)，7.24(d，J＝8Hz，1H)，7.20(dd，J＝8，8Hz，1H)，6.46(m，1H)，6.37(d，J＝8Hz，1H)，5.82-5.75(m，1H)，2.84(d，J＝4Hz，3H)，1.60(d，J＝8Hz，3H)，1.14-1.04(m，2H)，0.93-0.90(m，1H)，0.85-0.76(m，1H)；LC-MS(ESI)m/z 478.0[M+H]+。
2-((1S)-1-((6-氨基-5-(4-(甲基磺酰基)苯基)-4-嘧啶基)氨基)乙基)--1-环丙基-N-甲基-1H-苯并咪唑-7-甲酰胺
Figure BDA00002500618800801
在N2下将(S)-2-(1-(6-氨基-5-碘嘧啶-4-基氨基)乙基)-1-环丙基-N-甲基-1H-苯并[d]咪唑-7-甲酰胺(在实施例20中制备，50.4mg，0.106mmol)、1，1′-双(二苯基膦基)二茂铁-二氯化钯(17.25mg，0.021mmol)、Na2CO3(0.026ml，0.634mmol)、4-(甲烷磺酰基)苯硼酸(52.8mg，0.264mmol)在无水1，2-二甲氧基乙烷(5mL)和水(1mL)中的混合物加热至80℃。在1小时后，将该混合物冷却至室温并过滤。在减压下浓缩滤液，并通过柱色谱法在硅胶柱上进行纯化，使用0％至10％的在DCM-EtOAc(1∶1)中的MeOH作为洗脱剂梯度洗脱，从而获得2-((1S)--1-((6-氨基-5-(4-(甲基磺酰基)苯基)-4-嘧啶基)氨基)乙基)-1-环丙基-N-甲基-1H-苯并咪唑-7-甲酰胺：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.42-8.37(m，1H)，8.06(d，J＝8Hz，2H)，8.01(s，1H)，7.61(d，J＝8Hz，2H)，7.56(d，J＝8Hz，1H)，7.20(d，J＝8Hz，1H)，7.15(dd，J＝8，8Hz，1H)，5.85-5.75(m，2H)，3.28(s，3H)，2.83(d，J＝4Hz，3H)，1.49(d，J＝8Hz，3H)，1.18-1.08(m，2H)，0.98-0.92(m，1H)，0.83-0.75(m，1H)；LC-MS(ESI)m/z 506.0[M+H]+。
实施例22：4-氨基-6-((1-(6-氟-1-(3-氟苯基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈、4-氨基-6-(((1R)-1-(6-氟-1-(3-氟苯基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，和4-氨基-6-(((1S)-1-(6-氟-1-(3-氟苯基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈的制备
5-氟-N-(3-氟苯基)-2-硝基苯胺
Figure BDA00002500618800811
在氩气下向3-氟苯胺(1.813mL，18.86mmol)和2，4-二氟-1-硝基苯(1.723mL，15.71mmol)在DMF(26.2mL)中的溶液中加入叔丁醇钾(3.53g，31.4mmol)。将该溶液在室温下搅拌过夜，并倒入水中，并用DCM萃取。合并的有机萃取物通过柱色谱法在硅胶柱上进行纯化，使用5％至10％的在己烷中的EtOAc作为洗脱剂梯度洗脱，从而获得橙色固体，将该橙色固体在EtOAc∶己烷(1∶1)中进行研磨并过滤从而获得5-氟-N-(3-氟苯基)-2-硝基苯胺，为橙色固体：LC-MS(ESI)，m/z251.1[M+H]+。
5-氟-N1-(3-氟苯基)苯-1，2-二胺
Figure BDA00002500618800812
根据一般程序D中的步骤D2使用5-氟-N-(3-氟苯基)-2-硝基苯胺(0.820g，3.28mmol)制备，从而获得5-氟-N1-(3-氟苯基)苯-1，2-二胺，为橙色油状物：LC-MS(ESI)，m/z 221.1[M+H]+。
(S)-1-(4-氟-2-(3-氟苯基氨基)苯基氨基)-1-氧代丙烷-2-基氨基甲酸叔丁酯
Figure BDA00002500618800821
根据一般程序D中的步骤D3使用5-氟-N1-(3-氟苯基)苯-1，2-二胺(0.501g，2.275mmol)制备，从而获得(S)-1-(4-氟-2-(3-氟苯基氨基)-苯基氨基)-1-氧代丙烷-2-基氨基甲酸叔丁酯，为白色固体：LC-MS(ESI)，m/z 390.1[M+H]+。
N-(1-(6-氟-1-(3-氟苯基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基)乙酰胺
根据一般程序D中的步骤D4使用(S)-1-(4-氟-2-(3-氟苯基氨基)-苯基氨基)-1-氧代丙烷-2-基氨基甲酸叔丁酯(0.830g，2.126mmol)制备，从而获得N-(1-(6-氟-1-(3-氟苯基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基)乙酰胺，为粉红色固体：LC-MS(ESI)m/z 316.1[M+H]+。
1-(6-氟-1-(3-氟苯基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙胺
Figure BDA00002500618800823
根据一般程序D中的步骤D5a使用N-(1-(6-氟-1-(3-氟苯基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基)乙酰胺(0.670g，2.125mmol)制备，从而获得1-(6-氟-1-(3-氟苯基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙胺，为灰白色固体(0.47g，两个步骤的产率为81％)：LC-MS(ESI)，m/z 274.1[M+H]+。
4-氨基-6-(((1R)-1-(6-氟-1-(3-氟苯基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，和4-氨基-6-(((1S)-1-(6-氟-1-(3-氟苯基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈
Figure BDA00002500618800831
向微波容器中加入在正丁醇(3.66mL)中的4-氨基-6-氯嘧啶-5-甲腈(B)(0.057g，0.366mmol)、DIEA(0.192mL，1.098mmol)，和1-(6-氟-1-(3-氟苯基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙胺(0.100g，0.366mmol)。将该溶液在微波辐照下在120℃搅拌2小时，然后通过柱色谱法在硅胶柱上进行纯化，使用0％至10％的在DCM中的MeOH作为洗脱剂梯度洗脱，从而获得外消旋混合物4-氨基-6-((1-(6-氟-1-(3-氟苯基)--1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，为灰白色固体：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.54(d，J＝6.65Hz，3H)5.56(qd，J＝6.91，6.65Hz，1H)6.93(dd，J＝9.00，2.35Hz，1H)7.08-7.15(m，1H)7.17(br.s.，2H)7.31(td，J＝8.41，2.15Hz，1H)7.35-7.40(m，1H)7.48(d，J＝9.59Hz，1H)7.56(td，J＝8.12，6.65Hz，1H)7.69(d，J＝7.63Hz，1H)7.73(dd，J＝8.80，4.89Hz，1H)7.86(s，1H)；LC-MS(ESI)m/z 392.1[M+H]+。使用SFC通过手性分离来分离该外消旋混合物(0.085g)从而获得两种级分：
在AD-H柱上的第一洗脱对映体：4-氨基-6-(((1R)-1-(6-氟-1-(3-氟苯基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，为灰白色固体(0.020g，47％产率)：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.54(d，J＝6.85Hz，3H)1.59-1.59(m，0H)5.56(quin，J＝6.94Hz，1H)6.94(dd，J＝8.90，2.45Hz，1H)7.13(td，J＝9.83，8.95，2.54Hz，1H)7.18(br.s.，2H)7.31(td，J＝8.56，2.45Hz，1H)7.38(dd，J＝7.92，0.88Hz，1H)7.48(d，J＝9.59Hz，1H)7.57(td，J＝8.12，6.65Hz，1H)7.70(d，J＝7.43Hz，1H)7.74(dd，J＝8.80，4.89Hz，1H)7.86(s，1H)；LC-MS(ESI)m/z 392.2[M+H]+。
在AD-H柱上的第二洗脱对映体：4-氨基-6-(((1S)-1-(6-氟-1-(3-氟苯基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，为灰白色固体(0.024g，57％产率)：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.54(d，J＝6.85Hz，3H)5.57(quin，J＝6.94Hz，1H)6.94(dd，J＝8.90，2.45Hz，1H)7.13(td，J＝9.34，2.45Hz，1H)7.18(br.s.，2H)7.31(td，J＝8.51，2.35Hz，1H)7.38(d，J＝7.83Hz，1H)7.49(d，J＝9.39Hz，1H)7.53-7.62(m，1H)7.70(d，J＝7.43Hz，1H)7.74(dd，J＝8.80，4.89Hz，1H)7.87(s，1H)；LC-MS(ESI)m/z 392.2[M+H]+。
实施例23：N-((1R)-1-(6-氟-1-(3-氟苯基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)-9H-嘌呤-6-胺，和N-((1S)-1-(6-氟-1-(3-氟苯基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)-9H-嘌呤-6-胺的制备
Figure BDA00002500618800841
向微波容器中加入在正丁醇(3.66mL)中的6-氯嘌呤(0.113g，0.732mmol)、1-(6-氟-1-(3-氟苯基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙胺(在实施例22中制备，0.200g，0.732mmol)，和DIEA(0.256mL，1.46mmol)。将该溶液在120℃搅拌3小时，过滤并用EtOAc∶己烷(1∶4)洗涤所得沉淀从而获得灰白色固体。该固体通过柱色谱法在硅胶柱上进行纯化，使用10％至90％的在DCM中的DCM∶MeOH∶NH4OH(90∶10∶1)作为洗脱剂梯度洗脱，从而获得灰白色固体。在EtOAc∶己烷(1∶3)中研磨这种材料并过滤悬浮液从而获得N-(1-(6-氟-1-(3-氟苯基)--1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基)-9H-嘌呤-6-胺，为灰白色固体：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.60(d，J＝6.65Hz，3H)5.57(br.s.，1H)6.94(dd，J＝8.90，2.25Hz，1H)7.11(td，J＝9.39，2.35Hz，1H)7.29(t，J＝7.04Hz，1H)7.40-7.47(m，1H)7.47-7.63(m，2H)7.70(dd，J＝8.80，4.89Hz，1H)7.94(s，1H)8.07(s，1H)8.12(s，1H)12.78(br.s.，1H)；LC-MS(ESI)m/z 392.1[M+H]+。
使用SFC通过手性分离来分离该外消旋混合物(0.090g)从而获得两种级分：在AD-H柱上的第一洗脱对映体：N-((1R)-1-(6-氟-1-(3-氟苯基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)-9H-嘌呤-6-胺，为白色固体：1HNMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.59(d，3H)5.56(br.s.，1H)6.93(d，J＝8.41Hz，1H)7.10(t，J＝8.71Hz，1H)7.28(br.s.，1H)7.43(d，1H)7.47-7.60(m，2H)7.69(dd，J＝8.51，4.79Hz，1H)7.94(s，1H)8.01-8.21(m，2H)12.88(br.s.，1H)；LC-MS(ESI)m/z 392.2[M+H]+。
在AD-H柱上的第二洗脱峰：N-((1S)-1-(6-氟-1-(3-氟苯基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)-9H-嘌呤-6-胺，为白色固体：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.61(d，J＝6.85Hz，3H)5.58(br.s.，1H)6.95(dd，J＝8.80，2.35Hz，1H)7.04-7.19(m，1H)7.29(t，J＝6.26Hz，1H)7.44(d，J＝8.00Hz，1H)7.48-7.63(m，2H)7.71(dd，J＝8.80，4.89Hz，1H)7.98(br.s.，1H)8.08(s，1H)8.13(br.s.，1H)12.89(br.s.，1H)质谱(ESI)m/z 392.1[M+H]+。
实施例24：4-氨基-6-(((1R)-1-(6-氯-1-(3，5-二氟苯基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，和4-氨基-6-(((1S)-1-(6-氯-1-(3，5-二氟苯基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈的制备
5-氯-N-(3，5-二氟苯基)-2-硝基苯胺
Figure BDA00002500618800851
在氩气下向4-氯-2-氟-1-硝基苯(2.500g，14.24mmol)和3，5-二氟苯胺(2.206g，17.09mmol)在DMF(22.61mL)中的溶液中加入叔丁醇钾(3.20g，28.5mmol)，并将该溶液在室温下搅拌过夜。将该溶液倒入水中并用DCM萃取，有机萃取物通过柱色谱法在硅胶柱上进行纯化，使用5％至10％的在己烷中的EtOAc作为洗脱剂梯度洗脱，从而获得5-氯-N-(3，5-二氟苯基)-2-硝基苯胺，为橙色固体：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 6.98(tt，J＝9.34，2.20Hz，1H)7.02-7.11(m，3H)7.35(d，J＝2.15Hz，1H)8.14(d，J＝9.00Hz，1H)9.40(s，1H)。
5-氯-N1-(3，5-二氟苯基)苯-1，2-二胺
Figure BDA00002500618800852
根据一般程序D中的步骤D2使用5-氯-N-(3，5-二氟苯基)-2-硝基苯胺(0.890g，3.13mmol)制备从而获得5-氯-N1-(3，5-二氟苯基)苯-1，2-二胺，为浅紫色固体：LC-MS(ESI)m/z 355.1.1[M+H]+。
(S)-1-(4-氯-2-(3，5-二氟苯基氨基)苯基氨基)-1-氧代丙烷-2-基氨基甲酸叔丁酯
根据一般程序D中的步骤D3使用5-氯-N1-(3，5-二氟苯基)苯-1，2-二胺(0.780g，3.06mmol)制备从而获得(S)-1-(4-氯-2-(3，5-二氟苯基氨基)苯基氨基)-1-氧代丙烷-2-基氨基甲酸叔丁酯，为白色固体(1.12g，86％产率)：LC-MS(ESI)，m/z 424.0[M+H]+。
N-(1-(6-氯-1-(3，5-二氟苯基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基)乙酰胺
Figure BDA00002500618800862
根据一般程序D中的步骤D4使用(S)-1-(4-氯-2-(3，5-二氟苯基氨基)苯基氨基)-1-氧代丙烷-2-基氨基甲酸叔丁酯(1.118g，2.63mmol)制备，从而获得N-(1-(6-氯-1-(3，5-二氟苯基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基)-乙酰胺，为白色固体：LC-MS(ESI)m/z 350.0[M+H]+。
1-(6-氯-1-(3，5-二氟苯基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙胺
根据一般程序D中的步骤D5a使用N-(1-(6-氯-1-(3，5-二氟苯基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基)乙酰胺(0.920g，2.63mmol)制备，从而获得1-(6-氯-1-(3，5-二氟苯基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙胺，为灰白色固体：LC-MS(ESI)m/z 308.0[M+H]+。
4-氨基-6-(((1R)-1-(6-氯-1-(3，5-二氟苯基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，和4-氨基-6-(((1S)-1-(6-氯-1-(3，5-二氟苯基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈
根据一般程序D中的步骤D6使用1-(6-氯-1-(3，5-二氟苯基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙胺(0.200g，0.650mmol)制备，从而获得4-氨基-6-((1-(6-氯-1-(3，5-二氟苯基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，为灰白色固体：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.58(d，3H)-5.64(qd，J＝7.04，6.85Hz，1H)7.20(br.s.，2H)7.25-7.44(m，5H)7.75(t，J＝7.83Hz，2H)7.88(s，1H)：LC-MS(ESI)m/z 426.0[M+H]+。
使用SFC通过手性分离来分离外消旋混合物(0.116g)从而获得两种级分：
在AD-H柱上的第一洗脱对映体：4-氨基-6-(((1R)-1-(6-氯-1-(3，5-二氟苯基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈(0.041g，71％产率)，为灰白色固体：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.58(d，J＝6.85Hz，3H)5.63(q，J＝6.90Hz，1H)7.18(br.s，2H)7.26-7.41(m，5H)7.70-7.78(m，2H)7.88(s，1H)；LC-MS(ESI)m/z 426.2[M+H]+。
在AD-H柱上的第二洗脱对映体：4-氨基-6-(((1S)-1-(6-氯-1-(3，5-二氟苯基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，为灰白色固体：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.56(d，3H)5.63(quin，J＝6.90Hz，1H)7.15(br.s.，2H)7.24-7.43(m，5H)7.67-7.77(m，2H)7.86(s，1H)；LC-MS(ESI)，m/z 426.2[M+H]+。
实施例25：4-氨基-6-((1-(1-(3，5-二氟苯基)-7-氟-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈、4-氨基-6-(((1R)-1-(1-(3，5-二氟苯基)-7-氟-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，和4-氨基-6-(((1S)--1-(1-(3，5-二氟苯基)-7-氟-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈的制备
4-氨基-6-((1-(1-(3，5-二氟苯基)-7-氟-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈
Figure BDA00002500618800881
根据一般程序D制备从而获得4-氨基-6-((1-(1-(3，5-二氟苯基)-7-氟-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 7.86(1H，s)，7.72(1H，d，J＝7.0Hz)，7.58(2H，dd，J＝8.0，0.6Hz)，7.14-7.37(5H，m)，7.04-7.12(1H，m)，5.56(1H，quin，J＝6.5Hz)，1.57(3H，d，J＝6.8Hz)；LC-MS(ESI)]m/z 410.25[M+H]+。
4-氨基-6-(((1R)-1-(1-(3，5-二氟苯基)-7-氟-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，和4-氨基-6-(((1S)-1-(1-(3，5-二氟苯基)-7-氟-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈
Figure BDA00002500618800882
使用制备SFC在AD-H柱上分离外消旋混合物(329mg)从而获得两种级分：
在SFC AD-H柱上的第一峰：4-氨基-6-(((1R)-1-(1-(3，5-二氟苯基)-7-氟-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，为棕褐色固体：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 7.86(1H，s)，7.72(1H，d，J＝7.2Hz)，7.58(2H，dd，J＝8.1，0.7Hz)，7.14-7.38(5H，m)，7.04-7.12(1H，m)，5.56(1H，quin，J＝6.6Hz)，1.57(3H，d，J＝6.8Hz)；LC-MS(ESI)m/z 410.0[M+H]+。
在SFC AD-H柱上的第二峰：4-氨基-6-(((1S)-1-(1-(3，5-二氟苯基)-7-氟-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，为棕褐色固体：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 7.86(1H，s)，7.72(1H，d，J＝7.0Hz)，7.58(2H，dd，J＝8.0，0.6Hz)，7.14-7.37(5H，m)，7.04-7.12(1H，m)，5.56(1H，quin，J＝6.5Hz)，1.57(3H，d，J＝6.8Hz)；LC-MS(ESI)]m/z 410.0[M+H]+。
实施例26：4-氨基-6-(((1S)-1-(1-(环丙基甲基)-6-氟-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，和4-氨基-6-(((1S)-1-(1-(环丙基甲基)-5-氟-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈的制备
(S)-1-(1-(环丙基甲基)-6-氟-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基氨基甲酸叔丁酯，和(S)-1-(1-(环丙基甲基)-5-氟-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基氨基甲酸叔丁酯
Figure BDA00002500618800891
向(S)-1-(6-氟-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基氨基甲酸叔丁酯(在实施例16中制备，0.500g，1.790mmol)在无水DMF(8.95mL)中的溶液中加入碳酸铯(1.167g，3.58mmol)。加入(溴甲基)环丙烷(0.208mL，2.148mmol)并将该溶液在室温下搅拌2小时。将该溶液倒入水中并用DCM萃取。浓缩有机层并通过柱色谱法在硅胶柱上进行纯化，使用10％至60％的在己烷中的EtOAc作为洗脱剂梯度洗脱，从而获得混合区域异构体(S)-1-(1-(环丙基甲基)-6-氟-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基氨基甲酸叔丁酯，和(S)-1-(1-(环丙基甲基)-5-氟-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基氨基甲酸叔丁酯，为白色固体。
(S)-1-(1-(环丙基甲基)-6-氟-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙胺，和(S)--1-(1-(环丙基甲基)-5-氟-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙胺
Figure BDA00002500618800901
根据一般程序D中的步骤D5b使用混合区域异构体(S)-1-(1-(环丙基甲基)-6-氟-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基氨基甲酸叔丁酯和(S)--1-(1-(环丙基甲基)-5-氟-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基氨基甲酸叔丁酯(0.514g，1.542mmol)制备，从而获得(S)-1-(1-(环丙基甲基)-6-氟-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙胺和(S)-1-(1-(环丙基甲基)-5-氟-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙胺的混合物，为浅黄色油状物：LC-MS(ESI)，m/z 234.2[M+H]+。
4-氨基-6-(((1S)-1-(1-(环丙基甲基)-6-氟-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，和4-氨基-6-(((1S)-1-(1-(环丙基甲基)-5-氟-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈
Figure BDA00002500618800902
向微波容器中加入(S)-1-(1-(环丙基甲基)-6-氟-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙胺和(S)-1-(1-(环丙基甲基)-5-氟-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙胺(0.280g，1.20mmol)在丁烷-1-醇(6.0mL)中的混合物、4-氨基-6-氯嘧啶-5-甲腈(0.186g，1.200mmol)，以及DIEA(0.252mL，1.44mmol)。将所得溶液在微波辐照下在120℃搅拌3小时，并通过柱色谱法在硅胶柱上纯化该混合物，使用0％至10％的在DCM中的MeOH作为洗脱剂梯度洗脱，从而获得区域异构体4-氨基-6-(((1S)-1-(1-(环丙基甲基)-6-氟-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈和4-氨基-6-(((1S)-1-(1-(环丙基甲基)-5-氟-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈的混合物，为白色固体：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm0.29-0.59(m，8H)1.17-1.32(m，2H)1.62(d，J＝6.85Hz，6H)4.04-4.23(m，4H)5.64-5.79(m，2H)6.97-7.15(m，2H)7.32(br.s.，4H)7.43(dd，J＝9.78，2.54Hz，1H)7.52(dd，J＝9.49，2.45Hz，1H)7.59-7.67(m，2H)7.76(d，J＝2.74Hz，1H)7.78(d，J＝2.54Hz，1H)8.06(s，1H)8.06(s，1H)；LC-MS(ESI)m/z 352.2[M+H]+。
使用制备SFC分离该外消旋混合物(320mg)从而获得两种级分：
在该柱上的第一洗脱对映体：4-氨基-6-(((1S)-1-(1-(环丙基甲基)-6-氟-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈(0.112g，81％产率)，为白色固体：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 0.31-0.57(m，4H)1.18-1.32(m，1H)1.62(d，J＝6.65Hz，3H)4.05-4.21(m，2H)5.73(quin，J＝6.26Hz，1H)7.04(ddd，J＝9.88，8.90，2.54Hz，1H)7.32(br.s.，2H)7.52(dd，J＝9.49，2.45Hz，1H)7.62(dd，J＝8.80，4.89Hz，1H)7.76(d，J＝6.65Hz，1H)8.06(s，1H)；LC-MS(ESI)，m/z 352.2[M+H]+。
在该柱上的第二洗脱对映体：4-氨基-6-(((1S)-1-(1-(环丙基甲基)-5-氟-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈(0.102g，73％产率)：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 0.29-0.60(m，4H)1.12-1.34(m，1H)1.62(d，J＝6.85Hz，3H)4.07-4.25(m，2H)5.64-5.80(m，1H)7.10(td，J＝9.29，2.54Hz，1H)7.31(br.s.，2H)7.43(dd，J＝9.78，2.54Hz，1H)7.63(dd，J＝8.80，4.89Hz，1H)7.77(d，J＝3.91Hz，1H)8.06(s，1H)；LC-MS(ESI)m/z 352.2[M+H]+。
实施例27：2-((1S)-1-((6-氨基-5-(三氟甲基)-4-嘧啶基)氨基)乙基)--1-环丙基-N-甲基-1H-苯并咪唑-7-甲酰胺的制备
Figure BDA00002500618800911
在120℃下搅拌(S)-2-(1-氨基乙基)-1-环丙基-N-甲基-1H-苯并[d]咪唑-7-甲酰胺(在实施例20中制备，150mg，0.581mmol)、6-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-4-胺(172mg，0.871mmol)和1，1′-二甲基三乙胺(202μL，1.161mmol)在正丁醇(2mL)中的混合物。在42小时后，将该混合物冷却至室温并在减压下浓缩。残余物通过柱色谱法在硅胶柱上进行纯化，使用0％至10％的在含有0.2％NH4OH的DCM-EtOAc(1∶1)中的MeOH作为洗脱剂梯度洗脱，从而获得2-((1S)-1-((6-氨基-5-(三氟甲基)-4-嘧啶基)氨基)乙基)-1-环丙基-N-甲基-1H-苯并咪唑-7-甲酰胺：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.50-8.41(m，1H)，8.05(s，1H)-，7.66(d，J＝8Hz，1H)，7.28-7.18(m，2H)，6.90-6.78(m，2H)，5.89-5.81(m，1H)，3.40-3.33(m，1H)，2.82(d，J＝4Hz，3H)，1.60(d，J＝8Hz，3H)，1.16-1.03(m，2H)，0.95-0.75(m，2H)；LC-MS(ESI)m/z 420.1[M+H]+。
实施例28：N-((1R)-1-(6-氯-1-(3，5-二氟苯基)-1H-苯并咪唑-2-基)-乙基)-9H-嘌呤-6-胺，和N-((1S)-1-(6-氯-1-(3，5-二氟苯基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)-9H-嘌呤-6-胺的制备
Figure BDA00002500618800921
根据实施例23中的程序使用1-(6-氯-1-(3，5-二氟苯基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙胺(在实施例24中制备，0.143g，0.465mmol)制备，从而获得N-(1-(6-氯-1-(3，5-二氟苯基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基)--9H-嘌呤-6-胺(混合异构体)，为浅粉色固体(0.083g，42％产率)：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.64(d，3H)5.65(br.s.，1H)7.18-7.34(m，3H)7.41(d，J＝6.26Hz，2H)7.72(d，J＝8.61Hz，1H)8.01(br.s.，1H)8.06(s，1H)8.08(s，1H)12.89(s，1H)：LC-MS(ESI)m/z 426.2[M+H]+。
使用SFC通过手性分离来分离外消旋混合物(0.083g)从而获得两种级分：
在AD-H柱上的第一洗脱对映体：N-((1R)-1-(6-氯-1-(3，5-二氟苯基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)-9H-嘌呤-6-胺，为白色固体：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.64(d，J＝6.85Hz，3H)5.65(br.s.，1H)7.20-7.33(m，3H)7.41(d，J＝6.85Hz，2H)7.71(d，J＝8.61Hz，1H)7.97(br.s.，1H)8.06(s，1H)8.10(s，1H)12.75(br.s.，1H)；LC-MS(ESI)m/z 426.1[M+H]+。
在AD-H柱上的第二洗脱对映体：N-((1S)-1-(6-氯-1-(3，5-二氟苯基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)-9H-嘌呤-6-胺，为白色固体：1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δppm 1.64(d，J＝6.60Hz，3H)5.65(br.s.，1H)7.17-7.35(m，3H)7.41(d，J＝6.11Hz，2H)7.71(d，J＝8.56Hz，1H)7.97(br.s.，1H)8.06(s，1H)8.11(s，1H)12.87(br.s.，1H)。质谱(ESI)，m/e＝426.2[M+H]+。
实施例29：2-((1S)-1-((6-氨基-5-(甲基磺酰基)-4-嘧啶基)氨基)乙基)-1-环丙基-N-甲基-1H-苯并咪唑-7-甲酰胺的制备
Figure BDA00002500618800931
在N2下向三氟甲磺酸铜(II)(7.6mg，0.021mmol)、甲烷亚磺酸钠(25.7mg，0.251mmol)、(S)-2-(1-(6-氨基-5-碘嘧啶-4-基氨基)乙基)-1-环丙基-N-甲基-1H-苯并[d]咪唑-7-甲酰胺(在实施例21中制备，100mg，0.210mmol)的混合物中N，N′-二甲基乙二胺(4.52μL，0.042mmol)和DMSO(1mL)。将该混合物放在110℃的油浴中。在110℃下搅拌18小时后，将该混合物冷却至室温，用EtOAc稀释，并通过硅胶垫过滤。用水、盐水洗涤滤液，干燥并在减压下浓缩。残余物通过柱色谱法在硅胶柱上进行纯化，使用0％至10％的在DCM-EtOAc(1∶1)0.2％NH4OH中的MeOH作为洗脱剂梯度洗脱，从而获得2-((1S)--1-((6-氨基-5-(甲基磺酰基)-4-嘧啶基)氨基)乙基)-1-环丙基-N-甲基-1H-苯并咪唑-7-甲酰胺：1H NMR(400MHz，CDCl3)8.02-7.97(m，2H)，7.65(d，J＝8Hz，1H)，7.22(d，J＝8Hz，1H)，7.12(dd，J＝8，8Hz，1H)，6.01-5.92(m，2H)，3.45-3.40(m，2H)，3.16(s，3H)，3.01(d，J＝4Hz，3H)，1.61(d，J＝4Hz，3H)，1.22-1.10(m，2H)，1.04-0.96(m，1H)，0.80-0.73(m，1H)；LC-MS(ESI)m/z 430.1[M+H]+。
实施例30：4-氨基-6-(((1S)-1-(1-环丙基-6-氟-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，和4-氨基-6-(((1S)-1-(1-环丙基-5-氟-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈的制备
(S)-1-(1-环丙基-6-氟-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基氨基甲酸叔丁酯，和(S)-1-(1-环丙基-5-氟-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基氨基甲酸叔丁酯
Figure BDA00002500618800941
向(S)-1-(6-氟-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基氨基甲酸叔丁酯(0.500g，1.790mmol)、环丙基硼酸(0.308g，3.58mmol)，和碳酸铯(1.167g，3.58mmol)在二氯乙烷(5.97mL)中的溶液中加入2，2′-联吡啶(0.280g，1.790mmol)和乙酸铜(II)(0.173mL，1.790mmol)。将该溶液在70℃下搅拌90分钟，然后在室温下搅拌过夜。将该溶液倒入10％NH4Cl水溶液中并用DCM萃取。合并的有机萃取物通过柱色谱法进行纯化，在硅胶柱上使用0％至10％的在DCM中的MeOH作为洗脱剂梯度洗脱，从而获得(S)-1-(1-环丙基-5-氟-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基氨基甲酸叔丁酯和(S)-1-(1-环丙基-6-氟-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基氨基甲酸叔丁酯的混合物，为棕褐色固体。
(S)-1-(1-环丙基-6-氟-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙胺，和(S)-1-(1-环丙基-5-氟-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙胺：
根据一般程序D中的步骤D5b使用(S)-1-(1-环丙基-6-氟-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基氨基甲酸叔丁酯和(S)-1-(1-环丙基-5-氟-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基氨基甲酸叔丁酯(混合区域异构体，0.220g，0.688mmol)制备，从而获得(S)-1-(1-环丙基-6-氟-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙胺和(S)-1-(1-环丙基-5-氟-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙胺的混合物，为棕褐色固体：LC-MS(ESI)m/z 220.1[M+H]+。
4-氨基-6-(((1S)-1-(1-环丙基-6-氟-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)--5-嘧啶甲腈，和4-氨基-6-(((1S)-1-(1-环丙基-5-氟-1H-苯并咪唑-2-基)-乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈
Figure BDA00002500618800951
向微波容器中加入(S)-1-(1-环丙基-6-氟-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙胺和(S)-1-(1-环丙基-5-氟-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙胺(混合区域异构体，0.142g，0.648mmol)在正丁醇(2.159mL)中的混合物，接着加入DIEA(0.136mL，0.777mmol)和4-氨基-6-氯嘧啶-5-甲腈(0.100g，0.648mmol)。将悬浮液在微波辐照下在120℃下搅拌3小时并通过柱色谱法在硅胶柱上进行纯化，使用0％至8％的在DCM中的MeOH作为洗脱剂梯度洗脱，从而获得4-氨基-6-(((1S)-1-(1-环丙基-6-氟-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈和4-氨基-6-(((1S)-1-(1-环丙基-5-氟-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈的混合物，为白色固体：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 0.96-1.28(m，8H)1.62(d，J＝6.85Hz，6H)3.34-3.40(m，2H)5.73-5.87(m，2H)6.99-7.15(m，2H)7.30(br.s.，4H)7.37(dd，J＝9.39，2.54Hz，1H)7.42(dd，J＝9.68，2.45Hz，1H)7.53-7.64(m，2H)7.70(d，J＝7.24Hz，2H)8.05(s，1H)8.05(s，1H)；LC-MS(ESI)m/z 338.2[M+H]+。
实施例31：4-氨基-6-((1-(6-氟-1-(2-吡啶基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈和4-氨基-6-((1-(5-氟-1-(2-吡啶基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，4-氨基-6-(((1R)-1-(6-氟-1-(2-吡啶基)--1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈、4-氨基-6-(((1R)-1-(5-氟-1-(2-吡啶基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈、4-氨基-6-(((1S)-1-(6-氟-1-(2-吡啶基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，和4-氨基-6-(((1S)-1-(5-氟-1-(2-吡啶基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈的制备
1-(6-氟-1-(吡啶-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙胺和1-(5-氟-1-(吡啶-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙胺
Figure BDA00002500618800961
向微波小瓶中加入(S)-1-(6-氟-1H-苯并[d]咪唑-2-基)-乙基氨基甲酸叔丁酯(在实施例16中制备，0.5126g，1.835mmol)、N，N-二甲基乙酰胺(4.08mL)、2-氟吡啶(0.189mL，2.202mmol)，和碳酸铯(1.196g，3.67mmol)。将该混合物在微波反应器(温度：150℃。压力：92～94psi，功率：8～10W)中加热40分钟。此时，将该混合物倒入EtOAc(100mL)中，过滤，然后在高真空下浓缩从而除去大部分DMA。残余物通过硅胶柱色谱法在40g Redi-SepTM柱上进行纯化，使用0％至20％的在己烷中的EtOAc作为洗脱剂梯度洗脱超过14分钟，然后使用20％的在己烷中的EtOAc作为洗脱剂洗脱14分钟，然后使用20％至50％的在己烷中的EtOAc作为洗脱剂梯度洗脱超过14分钟，然后使用50％的在己烷中的EtOAc作为洗脱剂洗脱14分钟，从而获得两个区域异构体，1-(6-氟-1-(吡啶-2-基)--1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙胺和1-(5-氟-1-(吡啶-2-基)--1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙胺，以及每个区域异构体的两个立体异构体的四个异构体的混合物(0.1486g，0.580mmol，31.6％产率)，为黄色浆料：LC-MS(ESI)m/z 257.0[M+H]+。
4-氨基-6-((1-(6-氟-1-(2-吡啶基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)--5-嘧啶甲腈，和4-氨基-6-((1-(5-氟-1-(2-吡啶基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈
Figure BDA00002500618800971
根据一般程序D中的步骤D6使用1-(6-氟-1-(吡啶-2-基)--1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙胺和1-(5-氟-1-(吡啶-2-基)--1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙胺(0.1428g，0.557mmol)的混合物制备，从而获得4-氨基-6-((1-(6-氟-1-(2-吡啶基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)--5-嘧啶甲腈和4-氨基-6-((1-(5-氟-1-(2-吡啶基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈的四个异构体的混合物(0.1038g，0.277mmol，49.8％产率)，为浅黄色固体：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm8.58-8.63(2H，m)，8.06(2H，tdd，J＝7.7，7.7，4.5，2.0Hz)，7.86(2H，d，J＝3.3Hz)，7.67-7.78(5H，m)，7.57(1H，dd，J＝9.5，2.4Hz)，7.48-7.54(2H，m)，7.35(1H，dd，J＝8.9，4.8Hz)，7.08-7.24(7H，m)，5.76-5.87(2H，m)，1.53(6H，dd，J＝6.7，4.6Hz)，两个区域异构体的比率为～1∶1；LC-MS(ESI)]m/z 375.1[M+H]+。两个区域异构体在LC-MS和HPLC上的保留时间相同。
4-氨基-6-(((1R)-1-(6-氟-1-(2-吡啶基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈、4-氨基-6-(((1R)-1-(5-氟-1-(2-吡啶基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈、4-氨基-6-(((1S)-1-(6-氟-1-(2-吡啶基)--1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，和4-氨基-6-(((1S)-1-(5-氟-1-(2-吡啶基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈
Figure BDA00002500618800972
使用制备SFC在AD-H柱上分离该外消旋混合物(94mg)从而获得三种级分：1a、2a，和3a，然后将含有两个异构体的级分1a在OJ柱上进一步分离，从而获得两个级分1c和2c。
级分1c(来自1a)：在SFC AD-H柱上的第一峰和在SFC OJ-H柱上的第一峰：(R)-4-氨基-6-(1-(6-氟-1-(吡啶-2-基)-1H-苯并-[d]咪唑-2-基)乙基氨基)嘧啶-5-甲腈，为棕褐色固体：1H NMR](400MHz，DMSO-d6)δppm 8.58-8.62(1H，m)，8.06(1H，td，J＝7.8，1.9Hz)，7.86(1H，s)，7.75(1H，dd，J＝8.7，4.8Hz)，7.70(2H，d，J＝8.0Hz)，7.50(1H，ddd，J＝7.5，4.9，0.9Hz)，7.11-7.22(4H，m)，5.82(1H，quin，J＝7.0Hz)，1.53(3H，d，J＝6.8Hz)；LC-MS(ESI)]m/z 375.1[M+H]+；
级分2c(来自1a)：在SFC AD-H柱上的第二峰和在SFC OJ-H柱上的第二峰：(R)-4-氨基-6-(1-(5-氟-1-(吡啶-2-基)-1H-苯并-[d]咪唑-2-基)乙基氨基)嘧啶-5-甲腈(0.01796g，0.048mmol，19.11％产率)，为棕褐色固体：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.59-8.63(1H，m)，8.07(1H，td，J＝7.7，2.0Hz)，7.85(1H，s)，7.70(2H，dd，J＝7.8，2.3Hz)，7.57(1H，dd，J＝9.6，2.3Hz)，7.51(1H，ddd，J＝7.5，4.9，0.9Hz)，7.35(1H，dd，J＝8.8，4.7Hz)，7.10-7.21(3H，m)，5.80(1H，quin，J＝7.0Hz)，1.54(3H，d，J＝6.8Hz)；LC-MS(ESI)m/z 375.1[M+H]+；
级分2a：在SFC  AD-H  柱上的第二峰：(S)--4-氨基-6-(1-(6-氟-1-(吡啶-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基氨基)嘧啶-5-甲腈(0.0217g，0.058mmol，23.09％产率)，为棕褐色固体：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.60(1H，dt，J＝3.8，1.0Hz)，8.06(1H，td，J＝7.7，2.0Hz)，7.86(1H，s)，7.75(1H，dd，J＝8.7，4.8Hz)，7.70(2H，d，J＝8.0Hz)，7.50(1H，ddd，J＝7.5，4.9，0.9Hz)，7.10-7.25(4H，m)，5.82(1H，quin，J＝7.0Hz)，1.53(3H，d，J＝6.8Hz)；LC-MS(ESI)]m/z 375.1[M+H]+；
级分3a：在SFC  AD-H  柱上的第三峰：(S)--4-氨基-6-(1-(5-氟-1-(吡啶-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基氨基)嘧啶-5-甲腈(0.01998g，0.053mmol，21.26％产率)，为棕褐色固体：1HNMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.61(1H，dd，J＝4.8，1.3Hz)，8.07(1H，td，J＝7.7，1.8Hz)，7.85(1H，s)，7.67-7.74(2H，m)，7.57(1H，dd，J＝9.6，2.3Hz)，7.51(1H，ddd，J＝7.5，4.9，0.9Hz)，7.35(1H，dd，J＝8.9，4.8Hz)，7.08-7.26(3H，m)，5.80(1H，quin，J＝7.0Hz)，1.54(3H，d，J＝6.8Hz)；LC-MS(ESI)m/z 375.1[M+H]+；
[注意]：每个异构体的区域选择性通过HSQC、NOESY，和COSYNMR证实。
实施例32：1-环丙基-N-甲基-2-((1S)-1-(9H-嘌呤-6-基氨基)乙基)--1H-苯并咪唑-7-甲酰胺的制备
Figure BDA00002500618800991
根据实施例23中的程序使用(S)-2-(1-氨乙基)-1-环丙基-N-甲基-1H-苯并[d]咪唑-7-甲酰胺(在实施例20中制备，91.8mg，0.355mmol)制备，从而获得1-环丙基-N-甲基-2-((1S)-1-(9H-嘌呤-6-基氨基)乙基)-1H-苯并咪唑-7-甲酰胺(45mg，0.120mmol，33.6％产率)：1H NMR(400MHz，MeOH-d4)δ8.13(s，1H)，8.01(s，1H)，7.56(d，J＝8Hz，1H)，7.24(d，J＝8Hz，1H)，7.15(dd，J＝8，8Hz，1H)，3.43-3.35(m，1H)，2.88(s，3H)，1.70(d，J＝8Hz，3H)，1.38-1.30(m，1H)，1.16-0.98(m，2H)，0.92-0.83(m，1H)；LC-MS(ESI)m/z 377.0[M+H]+。
实施例33：4-氨基-6-((1-(6-氟-1-(5-氟-3-吡啶基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈的制备
5-氟-N-(4-氟-2-硝基苯基)吡啶-3-胺
Figure BDA00002500618800992
向2，4-二氟-1-硝基苯(1.723mL，15.71mmol)和3-氨基-5-氟吡啶(1.468g，13.10mmol)在DMF(21.83mL)中的溶液中加入叔丁醇钾(2.94g，26.2mmol)。将该溶液在氩气下在室温下搅拌过夜。将该溶液倒入水中并用EtOAc萃取，有机萃取物用硫酸镁干燥并浓缩至棕色固体。该棕色固体通过柱色谱法在硅胶柱上进行纯化，使用5％至30％的在己烷中的EtOAc作为洗脱剂梯度洗脱，从而获得5-氟-N-(4-氟-2-硝基苯基)吡啶-3-胺，为橙色固体：LC-MS(ESI)m/z 252.2[M+H]+。
4-氟-N1-(5-氟吡啶-3-基)苯-1，2-二胺
Figure BDA00002500618801001
根据一般程序D中的步骤D2使用5-氟-N-(4-氟-2-硝基苯基)吡啶-3-胺(1.17g，4.66mmol)制备，从而获得4-氟-N1-(5-氟吡啶-3-基)苯-1，2-二胺，为黄色固体。
(S)-1-(4-氟-2-(5-氟吡啶-3-基氨基)苯基氨基)-1-氧代丙烷-2-基氨基甲酸叔丁酯
根据一般程序D中的步骤D3使用4-氟-N1-(5-氟吡啶-3-基)苯-1，2-二胺(0.752g，3.40mmol)制备，从而获得(S)-1-(4-氟-2-(5-氟吡啶-3-基氨基)苯基氨基)-1-氧代丙烷-2-基氨基甲酸叔丁酯(1.274g，98％产率)，为橙色固体：LC-MS(ESI)m/z 393.2[M+H]+。
N-(1-(6-氟-1-(5-氟吡啶-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基)乙酰胺
Figure BDA00002500618801003
根据一般程序D中的步骤D4使用(S)-1-(4-氟-2-(5-氟吡啶-3-基氨基)苯基氨基)-1-氧代丙烷-2-基氨基甲酸叔丁酯(1.27g，3.24mmol)制备，从而获得N-(1-(6-氟-1-(5-氟吡啶-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基)乙酰胺，为粉红色固体：LC-MS(ESI)m/z 317.2[M+H]+。
1-(6-氟-1-(5-氟吡啶-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙胺
根据一般程序D中的步骤D5a使用N-(1-(6-氟-1-(5-氟吡啶-3-基)--1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基)乙酰胺(0.520g，1.644mmol)制备，从而获得1-(6-氟-1-(5-氟吡啶-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙胺，为粉红色泡沫状物：LC-MS(ESI)m/z 275.2[M+H]+。
4-氨基-6-((1-(6-氟-1-(5-氟-3-吡啶基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈
Figure BDA00002500618801012
向微波容器中加入在正丁醇(2.315mL)中的4-氨基-6-氯嘧啶-5-甲腈(0.075g，0.486mmol)、DIEA(0.162mL，0.926mmol)，和1-(6-氟-1-(5-氟吡啶-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙胺(0.127g，0.463mmol)。将该溶液在微波辐照下在120℃搅拌4小时，然后通过柱色谱法在硅胶柱上进行纯化，使用0％至10％的在DCM中的MeOH作为洗脱剂梯度洗脱，从而获得4-氨基-6-((1-(6-氟-1-(5-氟-3-吡啶基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.59(d，J＝6.85Hz，3H)5.60(qd，J＝7.04，6.85Hz，1H)7.08(dd，J＝9.00，2.35Hz，1H)7.15(td，J＝9.78，8.90，2.45Hz，1H)7.25(br.s.，2H)7.69-7.81(m，2H)7.84(s，1H)8.08(d，J＝9.00Hz，1H)8.63(s，1H)8.67(d，J＝2.54Hz，1H)；LC-MS(ESI)m/z 393.0[M+H]+。
实施例34：N-(1-(6-氟-1-(5-氟吡啶-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基)-9H-嘌呤-6-胺的制备
Figure BDA00002500618801021
根据实施例23中的程序使用1-(6-氟-1-(5-氟吡啶-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙胺(在实施例33中制备，0.160g，0.583mmol)制备，从而获得N-(1-(6-氟-1-(5-氟吡啶-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基)--9H-嘌呤-6-胺，为白色固体：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.66(d，3H)5.61(br.s.，1H)7.05(d，J＝9.00Hz，1H)7.14(t，J＝9.19Hz，1H)7.73(dd，J＝8.71，4.79Hz，1H)7.98-8.16(m，4H)8.56(br.s.，1H)8.64(s，1H)12.89(br.s.，1H)；LC-MS(ESI)m/z 393.1[M+H]+。
实施例35：N-((1S)-1-(7-氟-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)-9H-嘌呤-6-胺的制备
3-氟苯-1，2-二胺
Figure BDA00002500618801022
在N2下向2-氟-6-硝基苯胺(2g，12.8mmol)在MeOH(15mL)中的溶液中加入10wt％的负载于碳的钯(180mg，75μmol)。在用N2吹扫烧瓶2分钟后，在H2气囊下搅拌该溶液。在6小时后，将该混合物通过硅藻土垫(celite pad)过滤，用MeOH冲洗并在减压下浓缩。残余物通过柱色谱法在硅胶柱上使用EtOAc∶DCM(1∶1)作为洗脱剂来进行纯化，从而获得3-氟苯-1，2-二胺：LC-MS(ESI)m/z 127.2[M+H]+。
N-((1S)-1-(7-氟-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)-9H-嘌呤-6-胺
Figure BDA00002500618801023
向3-氟苯-1，2-二胺(1.53g，12.1mmol)在DMF(3mL)中的溶液中加入Boc-L-Ala-OH(2.29g，12.1mmol)、1，1′-二甲基三乙胺(4.22mL，24.3mmol)和(1H-苯并[d][1，2，3]三唑-1-基氧)三吡咯烷-1-基磷鎓六氟磷(V)酸盐(6.31g，12.1mmol)，并将所得混合物在室温下搅拌2小时。用EtOAc稀释该反应混合物，用水和盐水洗涤，用MgSO4干燥，并在减压下浓缩。残余物通过柱色谱法在硅胶柱上使用EtOAC∶DCM(1∶1)作为洗脱剂来进行纯化，从而获得N-((1S)-1-(7-氟-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)-9H-嘌呤-6-胺：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.31(br，1H)，7.12(d，J＝8Hz，1H)，7.00(d，J＝8Hz，1H)，6.94-6.87(m，1H)，6.58-6.52(m，1H)，4.83(br，1H)，4.17-4.05(m，1H)，1.40(s，9H)，1.28(d，J＝8Hz，3H).
(S)-1-(7-氟-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙胺
将搅拌着的(S)-1-(2-氨基-3-氟苯基氨基)-1-氧代丙烷-2-基氨基甲酸叔丁酯(2.08g，7.00mmol)在AcOH(30mL)中的溶液在65℃下加热2小时，然后冷却至室温。在减压下浓缩之后，用4M在1，4-二噁烷中的HCl(20mL)处理残余物。将所得混合物在室温下搅拌40分钟。在减压下浓缩该混合物并将其溶解在水(10mL)中，然后用1N NaOH碱化至pH 9.5。在减压下浓缩该混合物。残余物用MeOH-DCM(1∶1)研磨。粗产物通过柱色谱法在硅胶柱上使用DCM-MeOH-NH4OH(9∶1∶0.05)作为洗脱剂来进行纯化，从而获得(S)-1-(7-氟-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙胺：LC-MS(ESI)m/z 180.1[M+H]+。
N-((1S)-1-(7-氟-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)-9H-嘌呤-6-胺
Figure BDA00002500618801032
根据实施例23中的程序使用(S)-1-(7-氟-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙胺(113.0mg，0.631mmol)制备，从而获得N-((1S)-1-(7-氟-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)-9H-嘌呤-6-胺：1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.26(s，1H)，8.15(s，1H)，7.30(d，J＝8Hz，1H)，7.20-7.14(m，1H)，6.92-6.80(m，1H)，1.84(d，J＝8Hz，3H)；LC-MS(ESI)m/z 298.0[M+H]+。
实施例36：4-氨基-6-(((1S)-1-(7-氟-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈的制备
根据一般程序D中的步骤D6使用(S)-1-(7-氟-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙胺(在实施例35中制备，178.8mg，0.998mmol)制备，从而获得4-氨基-6-(((1S)-1-(7-氟-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ12.5(br，1H)，8.03(s，1H)，7.74(d，J＝8Hz，1H)，7.28(d，J＝8Hz，1H)，7.16-7.10(m，1H)，6.97-6.92(m，1H)，5.65-5.57(m，1H).1.64(d，J＝8Hz，3H)；LC-MS(ESI)m/z 298.1[M+H]+。
实施例37：4-氨基-6-(((1S)-1-(1-环丙基-7-氟-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈的制备
N-环丙基-2-氟-6-硝基苯胺
Figure BDA00002500618801042
将2-溴-1-氟-3-硝基苯(2.0g，9.1mmol)、环丙胺(1.26mL，18.2mmol)在THF(10mL)中的混合物在N2下在60℃下加热4天。用EtOAc稀释该反应混合物，用水和盐水洗涤，用MgSO4干燥，并在减压下浓缩。残余物通过柱色谱法在硅胶柱上使用己烷-EtOAc(8.5∶1.5)作为洗脱剂来进行纯化，从而获得N-环丙基-2-氟-6-硝基苯胺。
N1-环丙基-6-氟苯-1，2-二胺
Figure BDA00002500618801051
在N2下向N-环丙基-2-氟-6-硝基苯胺(650mg，3.31mmol)在MeOH(15mL)中的溶液中加入10wt％的负载于碳的钯(176mg，0.166mmol)。在用N2吹扫烧瓶2分钟后，在H2气囊下搅拌该溶液。6小时后，将该混合物通过硅藻土垫过滤，用MeOH，冲洗并在减压下浓缩。残余物通过柱色谱法在硅胶柱上使用EtOAc∶DCM(1∶1)作为洗脱剂来进行纯化，从而获得N1-环丙基-6-氟苯-1，2-二胺：LC-MS(ESI)m/z 167.1[M+H]+。
(S)-1-(2-(环丙基氨基)-3-氟苯基氨基)-1-氧代丙烷-2-基氨基甲酸叔丁酯
Figure BDA00002500618801052
向N1-环丙基-6-氟苯-1，2-二胺(392.7mg，2.363mmol)在DMF(3mL)中的溶液中加入Boc-L-Ala-OH(447mg，2.363mmol)、1，1′-二甲基三乙胺(822μL，4.73mmol)和(1H-苯并[d][1，2，3]三唑-1-基氧)三吡咯烷-1-基磷鎓六氟磷(V)酸盐(1.23mg，2.36mmol)，并将所得混合物在室温下搅拌4小时。用EtOAc稀释该反应混合物，用水和盐水洗涤，用MgSO4干燥，并在减压下浓缩。残余物通过柱色谱法在硅胶柱上使用EtOAc∶DCM(1∶1)作为洗脱剂来进行纯化，从而获得(S)-1-(2-(环丙基氨基)-3-氟苯基氨基)-1-氧代丙烷-2-基氨基甲酸叔丁酯：LC-MS(ESI)m/z 338.2[M+H]+。
(S)-1-(1-环丙基-7-氟-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙胺
将搅拌着的(S)-1-(2-(环丙基氨基)-3-氟苯基氨基)-1-氧代丙烷-2-基氨基甲酸叔丁酯(651.7mg，1.932mmol)在AcOH(20mL)中的溶液在60℃下加热30分钟，在减压下浓缩之后，用4M在1，4-二噁烷中的HCl(20mL)处理残余物。将所得混合物在室温下搅拌40分钟。在减压下浓缩该混合物并将其溶解在水(5mL)中，然后用1N NaOH碱化至pH 9.5。在减压下浓缩该混合物并用MeOH-CDM(1∶1)研磨。粗产物通过柱色谱法在硅胶柱上使用DCM-MeOH-NH4OH(9∶1∶0.05)作为洗脱剂来进行纯化，从而获得(S)-1-(1-环丙基-7-氟-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙胺：LC-MS(ESI)m/z 220.0[M+H]+。
4-氨基-6-(((1S)-1-(1-环丙基-7-氟-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)--5-嘧啶甲腈
Figure BDA00002500618801062
根据一般程序D中的步骤D6使用(S)-1-(1-环丙基-7-氟-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙胺(176.5mg，0.805mmol)制备，从而获得4-氨基-6-(((1S)-1-(1-环丙基-7-氟-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈：1H NMR(400MHz，MeOH-d4)δ8.03(s，1H)，7.41(d，J＝8Hz，1H)，7.22-7.16(m，1H)，7.05-7.00(m，1H)，6.00-5.95(m，1H)，3.60-3.55(m，1H)，1.73(d，J＝8Hz，3H)，1.52-1.45(m，1H)，1.35-1.15(m，3H)；LC-MS(ESI)m/z 338.2[M+H]+。
实施例38：4-氨基-6-(((1S)-1-(4-氟-1-甲基-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，和4-氨基-6-(((1S)-1-(7-氟-1-甲基-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈的制备
将4-氨基-6-(((1S)-1-(7-氟-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈(在实施例36中制备，110mg，0.370mmol)、碘甲烷(0.023mL，0.370mmol)和碳酸钾(51.1mg，0.370mmol)在DMF(2mL)中的混合物在室温下在塞紧的烧瓶中搅拌24小时。用EtOAc稀释该反应混合物，用水、盐水洗涤，用MgSO4干燥，并在减压下浓缩。残余物通过柱色谱法在硅胶柱上进行纯化，使用0％至10％的在含有0.2％NH4OH的DCM-EtOAc(1∶1)中的MeOH作为洗脱剂梯度洗脱，从而获得4-氨基-6-(((1S)-1-(4-氟-1-甲基-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈和4-氨基-6-(((1S)-1-(7-氟-1-甲基-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)-氨基)-5-嘧啶甲腈的混合物：1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.05(d，J＝8Hz，2H)，7.43(d，J＝8Hz，1H)，7.34(d，J＝8Hz，1H)，7.29-7.23(m，1H)，7.22-7.16(m，1H)，7.04-6.95(m，2H)，5.84-5.74(m，2H).4.09(s，3H)，3.93(s，3H)，1.72(d，J＝8Hz，6H)；LC-MS(ESI)m/z 312.1[M+H]+。
实施例39：4-氨基-6-(((1S)-1-(4-氟-1-(2-甲氧基乙基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈和4-氨基-6-(((1S)-1-(7-氟-1-(2-甲氧基乙基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈的制备
Figure BDA00002500618801072
根据实施例38中的程序使用4-氨基-6-(((1S)-1-(7-氟-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈(在实施例36中制备，104mg，0.350mmol)和2-溴乙基甲基醚(0.033ml，0.351mmol)制备，从而获得4-氨基-6-(((1S)-1-(4-氟-1-(2-甲氧基乙基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)--5-嘧啶甲腈和4-氨基-6-(((1S)-1-(7-氟-1-(2-甲氧基乙基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈的混合物：1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.07(d，J＝8Hz，2H)，7.46(d，J＝8Hz，1H)，7.37(d，J＝8Hz，1H)，7.29-7.19(m，2H)，7.06-6.95(m，2H)，5.86-5.78(m，2H)，4.88-4.78(m，2H)，4.62-4.53(m，1H)，4.52-4.33(m，1H)，3.82-3.73(m，4H)，3.30(s，6H)，1.73(d，J＝8Hz，6H)；LC-MS(ESI)m/z 356.0[M+H]+。
实施例40：4-氨基-6-((1-(1-(3，5-二氟苯基)-4，6-二氟-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈的制备
Figure BDA00002500618801081
根据一般程序D制备从而获得4-氨基-6-((1-(1-(3，5-二氟苯基)-7-氟-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 7.86(1H，s)，7.75(1H，d，J＝7.0Hz)，7.29-7.43(3H，m)，7.17(3H，td，J＝10.6，2.2Hz)，6.97(1H，dd，J＝8.4，2.2Hz)，5.63(1H，quin，J＝6.6Hz)，1.57(3H，d，J＝6.8Hz)；LC-MS(ESI)]m/z 427.84[M+H]+。
实施例41：4-氨基-6-((1-(3-苯基-1-苯并噻吩-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈的制备
Figure BDA00002500618801091
1-(3-溴苯并[b]噻吩-2-基)乙酮
Figure BDA00002500618801092
经由注射器在一分钟内向用冰浴冷却的3-溴硫茚(Sigma-AldrichChemical Company，2.000mL，9.39mmol)和氯化铝(1.002mL，9.39mmol)在DCM(50mL)中的混合物中加入乙酰氯(0.667mL，9.39mmol)。将所得鲜橙色反应溶液在室温下搅拌1小时。将该反应液倒入冰中并在水和DCM之间进行分配。水层用DCM萃取，合并的萃取物用50mL 5％的氢氧化钠水溶液、50mL盐水洗涤，并在无水硫酸镁上搅拌，过滤并在减压下浓缩从而获得1-(3-溴苯并[b]噻吩-2-基)-乙酮，为浅黄色固体。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ2.77(s，3H)，7.57-7.65(m，2H)，7.95(dd，J＝7.7，1.1Hz，1H)，8.10(dd，J＝7.1，1.3Hz，1H)；LC-MS(ESI)]m/z 254.9[M+H]+。
1-(3-苯基苯并[b]噻吩-2-基)乙酮
Figure BDA00002500618801093
用氮气吹扫反式-二氯二(三苯基膦)钯(ii)(0.138g，0.196mmol)、苯基硼酸(0.717g，5.88mmol)、1-(3-溴苯并[b]噻吩-2-基)乙酮(0.50g，1.960mmol)和2.0N含水碳酸钠(2.94mL，5.88mmol)在甲苯(10mL)中的混合物，并将其加热至110℃过夜。在16h后，将该反应混合物在EtOAc与水之间进行分配。在MgSO4上搅拌有机层，过滤并在减压下浓缩从而获得红色油状物。该产物通过柱色谱法在硅胶柱上进行纯化，使用20％至40％的在己烷中的EtOAc作为洗脱剂梯度洗脱，从而获得1-(3-苯基苯并[b]噻吩-2-基)乙酮，为无色油状物：1H NMR(400MHz，CDCl3)δ2.12(s，3H)7.30-7.35(m，1H)7.38-7.42(m，2H)7.42-7.49(m，2H)7.52-7.58(m，3H)7.87(d，J＝8.2Hz，1H)；LC-MS(ESI)]m/z 253.1[M+H]+。
1-(3-苯基苯并[b]噻吩-2-基)乙醇
Figure BDA00002500618801101
在室温下向搅拌着的溶解在MeOH(5mL)中的1-(3-苯基苯并[b]噻吩-2-基)乙酮(430mg，1.704mmol)溶液中加入硼氢化钠(0.093mL，2.64mmol)。在5分钟后，无原料剩余。将该反应液在水与EtOAc之间进行分配，并用EtOAc萃取水层。合并的有机层用盐水洗涤，然后在MgSO4上搅拌，过滤，并在减压下浓缩从而获得1-(3-苯基苯并[b]噻吩-2-基)乙醇，为无色结晶固体：1H NMR(400MHz，CDCl3)δ1.46(d，J＝6.3Hz，3H)，2.19(br.s.，1H)，5.09(q，J＝6.5Hz，1H)，7.16-7.40(m，8H)，7.70-7.77(m，1H)。
2-(1-(3-苯基苯并[b]噻吩-2-基)乙基)异吲哚啉-1，3-二酮
Figure BDA00002500618801102
经由注射器在1分钟内向用冰浴冷却的溶解在THF(12mL)中的三苯基膦(0.401mL，1.730mmol)溶液中加入偶氮二甲酸二异丙酯(0.340mL，1.730mmol)。使该溶液平衡至室温，有无色沉淀形成。在20分钟后，再次冷却该反应混合物至冰浴温度，并相继加入1-(3-苯基苯并[b]噻吩-2-基)乙醇(400mg，1.573mmol)和邻苯二甲酰亚胺(255mg，1.730mmol)。移除冷浴并使反应液平衡至室温。让该反应液搅拌过夜，然后在减压下浓缩。期望产物2-(1-(3-苯基苯并[b]噻吩-2-基)乙基)异吲哚啉-1，3-二酮通过柱色谱法在硅胶柱上进行分离，使用2％至5％的在DCM中的MeOH作为洗脱剂梯度洗脱，从而获得2-(1-(3-苯基苯并[b]噻吩-2-基)乙基)异吲哚啉-1，3-二酮：1H NMR(400MHz，CDCl3)δ1.94(d，J＝7.2Hz，3H)，5.92(d，J＝7.2Hz，1H)，7.27-7.53(m，8H)，7.67(dd，J＝5.6，3.03Hz，2H)，7.73-7.79(m，2H)，7.84(d，J＝8.0Hz，1H)；LC-MS(ESI)]m/z 406.1[M+Na]+。
1-(3-苯基苯并[b]噻吩-2-基)乙胺
Figure BDA00002500618801111
将2-(1-(3-苯基苯并[b]噻吩-2-基)乙基)异吲哚啉-1，3-二酮(170mg，0.443mmol)和一水合肼(0.215mL，4.43mmol)在EtOH(5mL)中的混合物加热至50℃过夜。在18小时后，沉淀已形成。通过过滤除去沉淀，用EtOH冲洗，并在减压下浓缩。将浓缩物溶解在DCM中，使其吸附在硅胶上，并通过柱色谱法使用10％的在DCM中的MeOH作为洗脱剂来进行纯化，从而获得1-(3-苯基苯并[b]噻吩-2-基)乙胺，为无色结晶固体：1H NMR(400MHz，CDCl.3)δ1.51(d，J＝6.5Hz，3H)-，1.74(br.s.，2H)，4.55(q，J＝6.5Hz，1H)，7.30-7.38(m，2H)，7.41-7.57(m，6H)，7.87-7.91(m，1H)；LC-MS(ESI)]m/z 237.1[M-16]-。
4-氨基-6-((1-(3-苯基-1-苯并噻吩-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈
Figure BDA00002500618801121
根据一般程序D中的步骤D6使用1-(3-苯基苯并[b]噻吩-2-基)乙胺(56mg，0.221mmol)制备，从而获得4-氨基-6-((1-(3-苯基-1-苯并噻吩-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ1.47(d，J＝7.0Hz，3H)，5.63(t，J＝6.9Hz，1H)，7.24(br.s.，2H)，7.32-7.37(m，3H)，7.43-7.48(m，1H)，7.50-7.58(m，4H)，7.84(d，J＝6.8Hz，1H)，7.93(s，1H)，7.94-7.98(m，1H)；LC-MS(ESI)]m/z 372.0[M+H]+.
实施例42：4-氨基-6-((1-(3-(3，5-二氟苯基)-1-苯并噻吩-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈的制备
Figure BDA00002500618801122
(E)-N-(1-(3-溴苯并[b]噻吩-2-基)亚乙基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺
Figure BDA00002500618801123
将乙醇钛(IV)(2.272mL，10.97mmol)、2-甲基-2-丙烷-亚磺酰胺(0.665g，5.49mmol)和1-(3-溴苯并[b]噻吩-2-基)乙酮(1.40g，5.49mmol)在THF(15mL)中的混合物加热至回流过夜。在24小时后，使该反应液平衡至室温，并将其倒入100mL盐水中。通过经由硅藻土过滤除去固体，并用100mL EtOAc冲洗该硅藻土垫。在MgSO4上搅拌有机层，过滤并在减压下浓缩从而获得橙色油状物。该产物通过柱色谱法在硅胶柱上进行纯化，使用20％至40％的EtOAc-己烷作为洗脱剂梯度洗脱，从而获得(E)-N-(1-(3-溴苯并[b]噻吩-2-基)亚乙基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺，为橙色油状物：1H NMR(400MHz，CDCl3)δ1.34(s，9H)，2.98(s，3H)，7.35-7.45(m，2H)，7.65-7.73(m，1H)，7.83(dd，J＝7.3，2.1Hz，1H)。
N-(1-(3-溴苯并[b]噻吩-2-基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺
Figure BDA00002500618801131
向用水-冰浴冷却的溶解在THF(30mL)和水(0.612mL)中的(E)--N-(1-(3-溴苯并[b]噻吩-2-基)亚乙基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(1.35g，3.77mmol)溶液中加入硼氢化钠(0.265mL，7.54mmol)，所有硼氢化钠一次性加入。将该反应液在低温下搅拌30分钟，并被判断已完成。向该反应溶液中加入NaHCO3饱和水溶液并剧烈搅拌所得混合物直至气体析出停止。水层用EtOAc萃取，用盐水洗涤，在MgSO4上搅拌，过滤并在减压下浓缩从而获得红色油状物。该产物通过柱色谱法在硅胶柱上进行分离，使用30％至70％的在己烷中的EtOAc作为洗脱剂梯度洗脱，从而获得N-(1-(3-溴苯并[b]噻吩-2-基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺，为浅黄色油状物：1H NMR(400MHz，CDCl3)δ1.24(s，10H)，1.63(d，J＝6.5Hz，3H)，3.85(d，J＝2.9Hz，1H)，5.16(dd，J＝6.7，3.5Hz，1H)，7.35(t，J＝7.7Hz，1H)，7.41(t，J＝7.7Hz，1H)，7.76(t，J＝7.0Hz，2H)。
N-(1-(3-(3，5-二氟苯基)苯并[b]噻吩-2-基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺
用N2吹扫3，5-二氟苯基硼酸(292mg，1.848mmol)、磷酸钾(0.204mL，2.464mmol)、2-双环己基膦基-2′，6′-二甲氧基-1，1′-联苯(126mg，0.308mmol)、乙酸钯(II)(27.7mg，0.123mmol)和N-(1-(3-溴苯并[b]噻吩-2-基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(444mg，1.232mmol)在甲苯(10mL)中的混合物2分钟，然后加热至110℃过夜。在19小时后，将该反应液在水与EtOAc之间进行分配。在MgSO4上搅拌有机层，过滤并在减压下浓缩从而获得琥珀色油状物。该产物通过柱色谱法在硅胶柱上进行纯化，使用20％至40％的在己烷中的EtOAc作为洗脱剂梯度洗脱，从而获得N-(1-(3-(3，5-二氟苯基)苯并[b]噻吩-2-基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺，为无色玻璃状固体：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ1.13(s，9H)，1.50(d，J＝6.7Hz，3H)，4.64-4.73(m，1H)，5.91(d，J＝4.7Hz，1H)，7.21(dd，J＝8.4，2.3Hz，2H)，7.34-7.45(m，4H)，8.02(ddd，J＝7.5，1.4，1.1Hz，1H)；LC-MS(ESI)]m/z 394.0[M+H]+。
1-(3-(3，5-二氟苯基)苯并[b]噻吩-2-基)乙胺
在室温下向N-(1-(3-(3，5-二氟苯基)苯并[b]噻吩-2-基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(392mg，0.996mmol)在THF(7mL)中的溶液中加入HCl(1.0mL，11.85mmol)。将该反应液在环境温度下搅拌10分钟，此后LC-MS指示无原料剩余。将该反应液倒入NaHCO3饱和水溶液中并用EtOAc萃取两次。在MgSO4上搅拌合并的有机萃取物，过滤并在减压下浓缩从而获得1-(3-(3，5-二氟苯基)苯并[b]噻吩-2-基)乙胺，为无色油状物：1H NMR(500MHz，CDCl3)δ1.35(d，J＝6.7Hz，3H)，1.60(br.s.，2H)，4.39(q，J＝6.6Hz，1H)，6.73-6.86(m，3H)，7.19-7.24(m，2H)，7.30-7.36(m，l H)，7.71-7.77(m，1H)；LC-MS(ESI)]m/z 273.0[M+H]+。
4-氨基-6-((1-(3-(3，5-二氟苯基)-1-苯并噻吩-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈
Figure BDA00002500618801151
根据一般程序D中的步骤D6使用1-(3-(3，5-二氟苯基)苯并[b]噻吩-2-基)乙胺(280mg，0.968mmol)制备，从而获得4-氨基-6-((1-(3-(3，5-二氟苯基)-1-苯并噻吩-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈：1HNMR(400MHz，DMSO-d6)δ1.52(d，J＝7.0Hz，3H)，5.62(quin，J＝6.9Hz，1H)，7.17-7.42(m，8H)，7.88-7.94(m，2H)，7.95-8.01(m，1H)；LC-MS(ESI)]m/z 408.0[M+H]+。
实施例43：4-氨基-6-((1-(3-(3，5-二氟苯基)-3H-咪唑并[4，5-b]吡啶-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈的制备
根据一般程序D制备从而获得4-氨基-6-((1-(1-(3，5-二氟苯基)-7-氟-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.28(1H，dd，J＝4.7，1.4Hz)，8.16(1H，dd，J＝8.0，1.4Hz)，7.89(1H，s)，7.75(1H，d，J＝7.8Hz)，7.28-7.39(4H，m)，7.19(2H，br.s.)，5.72(1H，quin，J＝7.0Hz)，1.58(3H，d，J＝6.8Hz)；LC-MS(ESI)m/z 393.1[M+H]+。
实施例44：4-氨基-6-(((1S)-1-(1-环丙基-6-氟-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，和4-氨基-6-(((1S)-1-(1-环丙基-5-氟-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈
Figure BDA00002500618801161
通过SFC纯化混合区域异构体(104mg)从而获得两种级分。第一洗脱峰：通过反相分析HPLC再纯化(使用10-60％的在含有0.1％TFA的水中的MeCN梯度洗脱)，从而获得4-氨基-6-(((1S)-1-(1-环丙基-6-氟-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，为白色固体。1HNMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 0.97-1.29(m，4H)1.62(d，J＝6.65Hz，3H)3.34-3.40(m，1H)5.81(quin，J＝6.94Hz，1H)7.06-7.16(m，1H)7.30(br.s.，2H)7.40-7.45(m，1H)7.57(dd，J＝8.80，4.70Hz，1H)7.70(d，J＝7.24Hz，1H)8.05(s，1H).LC-MS(ESI)m/z 336.1[M-H]-。第二洗脱峰：4-氨基-6-(((1S)-1-(1-环丙基-5-氟-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，为灰白色固体。1HNMR(500MHz，DMSO-d6)δppm1.04-1.34(m，4H)1.68(d，J＝6.85Hz，3H)3.41-3.44(m，1H)5.87(quin，J＝6.91Hz，1H)7.11(ddd，J＝9.90，8.80，2.57Hz，1H)7.37(br.s.，2H)7.44(dd，J＝9.29，2.45Hz，1H)7.67(dd，J＝8.80，4.89Hz，1H)7.77(d，J＝7.09Hz，1H)8.12(s，1H).LC-MS(ESI)m/z 338.2[M+H]+。
实施例45：4-氨基-6-(((1S)-1-(6-氟-1-(5-氟-3-吡啶)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，和4-氨基-6-(((1R)-1-(6-氟-1-(5-氟-3-吡啶基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈
Figure BDA00002500618801171
对于合成参见实施例33。使用制备SFC在AD-H柱上分离外消旋混合物(100mg)从而获得两种级分：在OD-H柱上的第一峰：产生白色固体，将该白色固体在水中研磨并过滤从而获得4-氨基-6-(((1S)-1-(6-氟-1-(5-氟-3-吡啶基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，为白色固体：1HNMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.59(d，J＝6.65Hz，3H)5.60(quin，J＝6.99Hz，1H)7.08(dd，J＝9.00，2.54Hz，1H)7.15(ddd，J＝9.78，8.80，2.54Hz，1H)7.20(br.s.，2H)7.71-7.81(m，2H)7.84(s，1H)8.08(d，J＝8.61Hz，1H)8.63(s，1H)8.67(d，J＝2.54Hz，1H)；LC-MS(ESI)m/z 393.0[M+H]+。在OD-H柱上的第二峰：4-氨基-6-(((1R)-1-(6-氟-1-(5-氟-3-吡啶基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，为白色固体：1HNMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.59(d，J＝6.65Hz，3H)5.60(quin，J＝6.94Hz，1H)7.08(dd，J＝9.00，2.35Hz，1H)7.15(td，J＝9.29，2.54Hz，1H)7.21(br.s.，2H)7.72-7.80(m，2H)7.83(s，1H)8.08(d，J＝7.63Hz，1H)8.62(s，1H)8.67(d，J＝2.74Hz，1H)；LC-MS(ESI)m/z 383.1[M+H]+。
实施例46：N-((1R)-1-(6-氟-1-(5-氟-3-吡啶基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)-9H-嘌呤-6-胺，和N-((1S)-1-(6-氟-1-(5-氟-3-吡啶基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)-9H-嘌呤-6-胺
Figure BDA00002500618801172
对于合成参见实施例34。使用制备SFC在AD-H柱上分离外消旋混合物(78mg)从而获得两种级分：在OD-H柱上的第一峰：N-((1R)-1-(6-氟-1-(5-氟-3-吡啶基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)-9H-嘌呤-6-胺，为灰白色固体。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δppm 1.66(d，J＝6.85Hz，3H)5.61(br.s.，1H)7.06(dd，J＝9.05，2.45Hz，1H)7.13(td，J＝9.29，2.45Hz，1H)7.73(dd，J＝8.80，4.89Hz，1H)7.93-8.05(m，2H)8.09(br.s.，2H)8.58(br.s.，1H)8.64(s，1H)12.77(br.s.，1H).MS(ESI)m/z 393.1[M+H]+。在OD-H柱上的第二峰：N-((1S)-1-(6-氟-1-(5-氟-3-吡啶基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)-9H-嘌呤-6-胺，为灰白色固体。1HNMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.66(d，J＝6.65Hz，3H)5.61(br.s.，1H)7.06(dd，J＝9.00，2.54Hz，1H)7.14(ddd，J＝9.78，8.80，2.54Hz，1H)7.74(dd，J＝8.90，4.79Hz，1H)7.99(br.s.，1H)8.02(s，1H)8.05-8.17(m，2H)8.58(d，J＝1.57Hz，1H)8.64(s，1H)12.75(br.s.，1H).LC-MS(ESI)m/z 393.1[M+H]+。
实施例47：2-((1S)-1-((6-氨基-5-氰基-4-嘧啶基)氨基)乙基)-N-环戊基-1-环丙基-1H-苯并咪唑-7-甲酰胺的制备
2-(环丙基氨基)-3-硝基苯甲酸
Figure BDA00002500618801181
将2-溴-3-硝基苯甲酸(1.0g，4.1mmol)、环丙胺(0.85mL，12.2mmol)在THF(10mL)中的混合物在N2下在60℃加热1天。用EtOAc稀释该反应混合物，用水、盐水洗涤，并用硫酸镁干燥。在真空中浓缩有机相。残余物为粗2-(环丙基氨基)-3-硝基苯甲酸：LC-MS(ESI)m/z 223.0[M+H]+。该粗产物用于下一步反应而无需进一步纯化。
2-(环丙基氨基)-3-硝基苯甲酸甲酯
Figure BDA00002500618801191
将粗2-(环丙基氨基)-3-硝基苯甲酸(0.90g，4.1mmol)溶解在MeOH(15mL)中，并加入2mL H2SO4(98％)。将该混合物加热至回流18小时。冷却该混合物，在真空中浓缩，并通过柱色谱法在硅胶柱上使用DCM作为洗脱剂来进行纯化，从而获得2-(环丙基氨基)-3-硝基苯甲酸甲酯：LC-MS(ESI)m/z 237.1[M+H]+。
3-氨基-2-(环丙基氨基)苯甲酸甲酯
Figure BDA00002500618801192
在N2下向2-(环丙基氨基)-3-硝基苯甲酸甲酯(1.1g，4.5mmol)在MeOH(4mL)中的溶液中加入10wt％的负载于碳的钯(0.24g，0.23mmol)。在用N2冲洗烧瓶数次之后，将该溶液在H2气囊下搅拌6小时。LCMS显示该反应已完成。在过滤该反应混合物并用MeOH冲洗之后，收集滤液并在真空中浓缩。残余物通过快速色谱法在硅胶柱上进行纯化，使用0％-20％的在DCM中的DCM-MeOH-NH4OH(9∶1∶0.05)作为洗脱剂梯度洗脱，从而获得3-氨基-2-(环丙基氨基)苯甲酸甲酯：LC-MS(ESI)m/z 207.1[M+H]+。
(S)-3-(2-(叔丁氧基羰基氨基)丙酰胺基)-2-(环丙基氨基)苯甲酸甲酯
Figure BDA00002500618801193
向3-氨基-2-(环丙基氨基)苯甲酸甲酯(510mg，2.5mmol)在DMF(3mL)中的溶液中加入boc-l-丙氨酸(470mg，2.5mmol)、1，1′-二甲基三乙胺(0.87mL，5.0mmol)和PYBOP(1.3g，2.5mmol)。将所得混合物在室温下搅拌2h。用EtOAc稀释该混合物，用水、盐水洗涤，用硫酸镁干燥，并在真空中浓缩。残余物通过柱色谱法在硅胶柱上进行纯化，使用0％至50％的在DCM中的EtOAc∶DCM(1∶1)作为洗脱剂梯度洗脱，从而获得(S)-3-(2-(叔丁氧基羰基氨基)丙酰胺基)-2-(环丙基氨基)苯甲酸甲酯：1H NMR(400MHz，CDCl3)δppm 8.43(1H，s)，8.15(1H，d，J＝8.0Hz)，7.74(1H，d，J＝8.0Hz)，7.09(1H，s)，6.91(1H，t，J＝8.0Hz)，5.03(1H，br)，4.39(1H，br)，3.88(3H，s)，2.71(1H，m)，1.50(3H，d，J＝8.0Hz)，1.48(9H，s)，0.74-0.68(2H，m)，0.63-0.55(2H，m)；LC-MS(ESI)m/z378.1[M+H]+。
(S)-2-(1-氨基乙基)-1-环丙基-1H-苯并[d]咪唑-7-甲酸甲酯
Figure BDA00002500618801201
将搅拌着的(S)-3-(2-(叔丁氧基羰基氨基)丙酰胺基)-2-(环丙基氨基)苯甲酸甲酯(600mg，1.6mmol)在HOAc(20mL)中的溶液在60℃下加热1.5小时，然后冷却至室温。在真空中浓缩该混合物之后，用4M在二噁烷中的HCl(10mL)处理残余物并将其在室温下搅拌40分钟。在真空中浓缩该混合物，将其溶解在水(5mL)中并用1N NaOH碱化至pH9.5。浓缩该混合物并将MeOH-DCM(1∶1)加入到残余物中从而使期望的产物成为溶液。在真空中浓缩该溶液，残余物通过柱色谱法在硅胶柱上使用DCM-MeOH-NH4OH(9∶1∶0.05)作为洗脱剂来进行纯化，从而获得(S)-2-(1-氨基乙基)-1-环丙基-1H-苯并[d]咪唑-7-甲酸甲酯：1HNMR(400MHz，CDCl3)δ7.86(1H，d，J＝8.0Hz)，7.63(1H，d，J＝8.0Hz)，7.27(1H，t，J＝8.0Hz)，4.62(1H，q，J＝8.0Hz)，4.01(3H，s)，3.58-3.50(3H，m)，1.65(3H，d，J＝8.0Hz)，1.22-1.06(2H，m)，0.95-0.65(2H，m)；LC-MS(ESI)m/z 260.0[M+H]+。
(S)-2-(1-(6-氨基-5-氰基嘧啶-4-基氨基)乙基)-1-环丙基-1H-苯并[d]咪唑-7-甲酸甲酯
Figure BDA00002500618801211
在120℃下搅拌(S)-2-(1-氨基乙基)-1-环丙基-1H-苯并[d]咪唑-7-甲酸甲酯(140mg，0.54mmol)、4-氨基-6-氯嘧啶-5-甲腈(83mg，0.54mmol)和1，1′-二甲基三乙胺(190μL，1.1mmol)在正丁醇(3mL)中的混合物。在18小时后，将该混合物冷却至室温并在真空中浓缩。残余物通过硅胶柱色谱法进行纯化，使用0％至10％的在含有0.2％NH4OH的DCM-EtOAc(1∶1)中的MeOH作为洗脱剂梯度洗脱，从而获得(S)-2-(1-(6-氨基-5-氰基嘧啶-4-基氨基)乙基)-1-环丙基-1H-苯并[d]咪唑-7-甲酸甲酯：LC-MS(ESI)m/z 378.1[M+H]+。
(S)-2-(1-(6-氨基-5-氰基嘧啶-4-基氨基)乙基)-1-环丙基-1H-苯并[d]咪唑-7-甲酸
Figure BDA00002500618801212
将(S)-2-(1-(6-氨基-5-氰基嘧啶-4-基氨基)乙基)-1-环丙基-1H-苯并[d]咪唑-7-甲酸甲酯(137mg，0.36mmol)和碘化锂(146mg，1.1mmol)在吡啶(5mL)中的溶液在100℃下加热至回流48小时。加入另一部分的碘化锂(146mg，1.1mmol)并将该混合物再在100℃下加热48小时。在真空中浓缩该混合物，将其用于下一步骤而无需进一步纯化：LC-MS(ESI)m/z 364.1[M+H]+。
2-((1S)-1-((6-氨基-5-氰基-4-嘧啶基)氨基)乙基)-N-环戊基-1-环丙基-1H-苯并咪唑-7-甲酰胺
Figure BDA00002500618801221
向粗(S)-2-(1-(6-氨基-5-氰基嘧啶-4-基氨基)乙基)-1-环丙基-1H-苯并[d]咪唑-7-甲酸(132mg，0.36mmol)在DMF(3mL)中的溶液中加入环戊胺(0.10mL，1.0mmol)、N-乙基-N-异丙基丙-2-胺(0.060mL，0.36mmol)和1h-苯并三唑-1-基-氧三吡咯烷基磷鎓(190mg，0.36mmol)。将所得混合物在室温下搅拌2小时。用EtOAc稀释该反应混合物，用水、盐水洗涤，用硫酸镁干燥，并在真空中浓缩。残余物通过硅胶快速色谱法纯化，使用0％至10％的在含有0.2％NH4OH的DCM-EtOAc(1∶1)中的MeOH作为洗脱剂梯度洗脱，从而获得2-((1S)-1-((6-氨基-5-氰基-4-嘧啶基)氨基)乙基)-N-环戊基-1-环丙基-1H-苯并咪唑-7-甲酰胺：1H NMR(400MHz，MeOH-d4)δ8.03(1H，s)，7.70(1H，d，J＝8.0Hz)，7.37(1H，d，J＝8.0Hz)，7.28(1H，t，J＝8.0Hz)，6.03(1H，q，J＝8.0Hz)，4.45-4.38(1H，m)，4.11(1H，dd，J＝8.0，4.0Hz)，3.53-3.44(1H，m)，2.15-2.05(2H，m)，1.88-1.78(2H，m)，1.75-1.60(4H，m)，1.38-1.10(3H，m)，1.00-0.92(1H，m)；LC-MS(ESI)m/z 431.2[M+H]+。
实施例48：2-((1S)-1-((6-氨基-5-氰基-4-嘧啶基)氨基)乙基)-N，1-二环丙基-1H-苯并咪唑-7-甲酰胺的制备
N-环丙基-2-(环丙基氨基)-3-硝基苯甲酰胺
Figure BDA00002500618801231
向2-溴-3-硝基苯甲酸(500mg，2.03mmol)在DMF(3mL)中的溶液中加入环丙胺(0.14mL，2.03mmol)、N-乙基-N-异丙基丙-2-胺(0.34mL，2.03mmol)和(1H-苯并[d][1，2，3]三唑-1-基氧)三吡咯烷-1-基磷鎓六氟磷(V)酸盐(1.27g，2.44mmol)。将所得混合物在室温下搅拌24h。用EtOAc稀释该反应混合物，用水、盐水洗涤，用硫酸镁干燥，并在真空中浓缩。残余物在硅胶柱上经受快速色谱法处理，使用0％至100％的在DCM中的EtOAC∶DCM(1∶1)作为洗脱剂梯度洗脱，获到粗产物混合物。向在THF(10mL)中的粗混合物中加入环丙胺(0.141mL，2.03mmol)，并将所得混合物在N2在60℃下加热18小时。用EtOAc稀释该反应混合物，用水、盐水洗涤，并用硫酸镁干燥。在真空中浓缩之后，残余物通过硅胶快速色谱法纯化，使用0％至100％的在DCM中的EtOAC∶DCM(1∶1)作为洗脱剂梯度洗脱，从而获得N-环丙基-2-(环丙基氨基)-3-硝基苯甲酰胺：1H NMR  (400MHz，CDCl3)δ8.27(1H，s)，8.01(1H，d，J＝8.0Hz)，7.45(1H，d，J＝8.0Hz)，6.62(1H，t，J＝8.0Hz)，5.98(1H，s)，2.90-2.65(2H，m)，0.90-0.78(2H，m)，0.75-0.65(2H，m)，0.58-0.50(2H，m)，0.48-0.40(2H，m)；LC-MS(ESI)m/z 262.1[M+H]+。
3-氨基-N-环丙基-2-(环丙基氨基)苯甲酰胺
Figure BDA00002500618801232
采用实施例47中的3-氨基-2-(环丙基氨基)苯甲酸甲酯的一般合成程序，使用N-环丙基-2-(环丙基氨基)-3-硝基苯甲酰胺制备3-氨基-N-环丙基-2-(环丙基氨基)苯甲酰胺：1H NMR(400MHz，CDCl3)δ6.85-6.77(3H，m)，6.31(1H，br)，5.97(1H，br)，4.07(2H，br)，2.93-2.85(1H，m)，2.65-2.57(1H，m)，0.92-0.85(2H，m)，0.86-0.54(6H，m)；LC-MS(ESI)m/z 232.1[M+H]+。
(S)-1-(2-(环丙基氨基)-3-(环丙基氨基甲酰基)苯基氨基)-1-氧代丙烷-2-基氨基甲酸叔丁酯
Figure BDA00002500618801241
采用实施例47中的(S)-3-(2-(叔丁氧基羰基氨基)-丙酰胺基)-2-(环丙基氨基)苯甲酸甲酯的一般合成程序，使用3-氨基-N-环丙基-2-(环丙基氨基)苯甲酰胺制备(S)-1-(2-(环丙基氨基)-3-(环丙基氨基甲酰基)苯基氨基)-1-氧代丙烷-2-基氨基甲酸叔丁酯：1HNMR(400MHz，MeOH-d4)δ7.39(1H，d，J＝8.0Hz)，7.24(1H，d，J＝8.0Hz)，6.82(1H，t，J＝8.0Hz)，4.18(1H，q，J＝4.0Hz)，2.88-2.82(1H，m)，2.74-2.67(1H，m)，1.50(9H，s)，1.43(3H，d，J＝8.0Hz)，0.84-0.79(2H，m)，0.64-0.42(6H，m)；LC-MS(ESI)m/z 403.1[M+H]+。
(S)-2-(1-氨基乙基)-N，1-二环丙基-1H-苯并[d]咪唑-7-甲酰胺
Figure BDA00002500618801242
采用实施例47中的(S)-2-(1-氨基乙基)-1-环丙基-1H-苯并[d]咪唑-7-甲酸甲酯的一般合成程序，使用(S)-1-(2-(环丙基氨基)-3-(环丙基氨基甲酰基)苯基氨基)-1-氧代丙烷-2-基氨基甲酸叔丁酯制备(S)-2-(1-氨基乙基)-N，1-二环丙基-1H-苯并[d]咪唑-7-甲酰胺：1H NMR(400MHz，MeOH-d4)δ7.72(1H，d，J＝8.0Hz)，7.35(1H，d，J＝8.0Hz)，7.29(1H，t，J＝8.0Hz)，4.69(1H，q，J＝8.0Hz)，3.49-3.43(1H，m)，3.03-2.96(1H，m)，1.60(3H，d，J＝4.0Hz)，1.25-1.18(2H，m)，1.08-1.02(1H，m)，0.97-0.82(3H，m)，0.74-0.67(2H，m)；LC-MS(ESI)m/z 285.1[M+H]+。
2-((1S)-1-((6-氨基-5-氰基-4-嘧啶基)氨基)乙基)-N，1-二环丙基-1H-苯并咪唑-7-甲酰胺
Figure BDA00002500618801251
采用实施例47中的(S)-2-(1-(6-氨基-5-氰基嘧啶-4-基氨基)乙基)-1-环丙基-1H-苯并[d]咪唑-7-甲酸甲酯的一般合成程序，使用(S)-2-(1-氨基乙基)-N，1-二环丙基-1H-苯并[d]咪唑-7-甲酰胺制备2-((1S)-1-((6-氨基-5-氰基-4-嘧啶基)氨基)乙基)-N，1-二环丙基-1H-苯并咪唑-7-甲酰胺：1H NMR(400MHz，MeOH-d4)δ8.03(1H，s)，7.70(1H，d，J＝8.0Hz)，7.35(1H，d，J＝8.0Hz)，7.27(1H，t，J＝8.0Hz)，6.03(1H，q，J＝8.0Hz)，3.53-3.43(1H，m)，3.03-2.96(1H，m)，1.74(3H，d，J＝4.0Hz)，1.40-1.30(1H，m)，1.30-1.15(2H，m)，1.00-0.93(1H，m)，0.90-0.83(2H，m)，0.74-0.67(2H，m)；LC-MS(ESI)m/z 403.1[M+H]+。
实施例49：2-((1S)-1-((6-氨基-5-氰基-4-嘧啶基)氨基)乙基)-N-叔丁基-1-环丙基-1H-苯并咪唑-7-甲酰胺的制备
2-溴-N-叔丁基-3-硝基苯甲酰胺
Figure BDA00002500618801252
向2-溴-3-硝基苯甲酸(500mg，2.03mmol)在DMF(3mL)中的溶液中加入叔丁基胺(0.22mL，2.04mmol)、1，1′-二甲基三乙胺(0.71mL，4.1mmol)和(1H-苯并[d][1，2，3]三唑-1-基氧)三吡咯烷-1-基磷鎓六氟磷(V)酸盐(1.27g，2.44mmol)。将所得混合物在室温下搅拌2小时。用EtOAc稀释该反应混合物，用水、盐水洗涤，用硫酸镁干燥并在真空中浓缩。残余物通过硅胶快速色谱法纯化，使用0％至100％的在DCM中的EtOAC∶DCM(1∶1)作为洗脱剂梯度洗脱，从而获得2-溴-N-叔丁基-3-硝基苯甲酰胺：1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.74(1H，dd，J＝8.0，4.0Hz)，7.62(1H，d，J＝8.0Hz)，7.51(1H，t，J＝8.0Hz)，5.62(1H，br)，1.52(9H，s)；LC-MS(ESI)m/z 301.0[M+H]+。
N-叔丁基-2-(环丙基氨基)-3-硝基苯甲酰胺
Figure BDA00002500618801261
将2-溴-N-叔丁基-3-硝基苯甲酰胺(460mg，1.52mmol)和环丙胺(350μL，4.55mmol)在THF(10mL)中的混合物在60℃下加热18小时。用EtOAc稀释该反应混合物，用水、盐水洗涤，用硫酸镁干燥并在真空中浓缩。残余物通过硅胶快速色谱法使用EtOAC∶DCM(1∶1)作为洗脱剂来进行纯化，从而获得N-叔丁基-2-(环丙基氨基)-3-硝基苯甲酰胺：1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.26(1H，br)，8.09(1H，dd，J＝8.0，4.0Hz)，7.57(1H，d，J＝8.0Hz)，6.72(1H，t，J＝8.0Hz)，5.81(1H，br)，2.98-2.92(1H，m)，1.49(9H，s)，0.82-0.76(2H，m)，0.58-0.52(2H，m)；LC-MS(ESI)m/z 278.2[M+H]+。
3-氨基-N-叔丁基-2-(环丙基氨基)苯甲酰胺
Figure BDA00002500618801271
采用实施例47中的3-氨基-2-(环丙基氨基)苯甲酸甲酯的一般合成程序，使用N-叔丁基-2-(环丙基氨基)-3-硝基苯甲酰胺制备3-氨基-N-叔丁基-2-(环丙基氨基)苯甲酰胺：LC-MS(ESI)m/z 248.2[M+H]+。
(S)-1-(3-(叔丁基氨基甲酰基)-2-(环丙基氨基)苯基氨基)-1-氧代丙烷-2-基氨基甲酸叔丁酯
Figure BDA00002500618801272
采用实施例47中的(S)-3-(2-(叔丁氧基羰基-氨基)丙酰胺基)-2-(环丙基氨基)苯甲酸甲酯的一般合成程序，使用3-氨基-N-叔丁基-2-(环丙基氨基)苯甲酰胺制备(S)-1-(3-(叔丁基氨基甲酰基)-2-(环丙基氨基)苯基氨基)-1-氧代丙烷-2-基氨基甲酸叔丁酯：LC-MS(ESI)m/z 419.2[M+H]+。
(S)-2-(1-氨基乙基)-N-叔丁基-1-环丙基-1H-苯并[d]咪唑-7-甲酰胺
采用实施例47中的(S)-2-(1-氨基乙基)-1-环丙基-1H-苯并[d]咪唑-7-甲酸甲酯的一般合成程序，使用(S)-1-(3-(叔丁基氨基甲酰基)-2-(环丙基氨基)苯基氨基)-1-氧代丙烷-2-基氨基甲酸叔丁酯制备(S)-2-(1-氨基乙基)-N-叔丁基-1-环丙基-1H-苯并[d]咪唑-7-甲酰胺：1H NMR(400MHz，MeOH-d4)δ7.70(1H，d，J＝8.0Hz)，7.38(1H，d，J＝8.0Hz)，7.28(1H，t，J＝8.0Hz)，4.69(1H，q，J＝8.0Hz)，3.49-3.43(1H，m)，1.60(3H，d，J＝8.0Hz)，1.53(9H，s)，1.32-1.15(2H，m)，1.10-1.02(1H，m)，0.99-0.92(1H，m)；LC-MS(ESI)m/z 301.1[M+H]+。
2-((1S)-1-((6-氨基-5-氰基-4-嘧啶基)氨基)乙基)-N-叔丁基-1-环丙基-1H-苯并咪唑-7-甲酰胺
Figure BDA00002500618801281
采用实施例47中的(S)-2-(1-(6-氨基-5-氰基嘧啶-4-基氨基)乙基)-1-环丙基-1H-苯并[d]咪唑-7-甲酸甲酯的一般合成程序，使用(S)-2-(1-氨基乙基)-N-叔丁基-1-环丙基-1H-苯并[d]咪唑-7-甲酰胺制备2-((1S)-1-((6-氨基-5-氰基-4-嘧啶基)氨基)乙基)-N-叔丁基-1-环丙基-1H-苯并咪唑-7-甲酰胺：1H NMR(400MHz，MeOH-d4)δ8.03(1H，s)，7.68(1H，d，J＝8.0Hz)，7.38(1H，d，J＝8.0Hz)，7.27(1H，t，J＝8.0Hz)，6.04(1H，q，J＝8.0Hz)，3.55-3.43(1H，m)，3.03-2.96(1H，m)，1.73(3H，d，J＝4.0Hz)，1.53(9H，s)，1.40-1.30(1H，m)，1.30-1.15(2H，m)，1.10-0.93(1H，m)；LC-MS(ESI)m/z 419.2[M+H]+。
实施例50：4-氨基-6-(((1S)-1-(1-(3，5-二氟苯基)-4，6-二氟-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，和4-氨基-6-(((1R)-1-(1-(3，5-二氟苯基)-4，6-二氟-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈的制备
N-(3，5-二氟苯基)-3，5-二氟-2-硝基苯胺
Figure BDA00002500618801282
向2，4，6-三氟硝基苯(1.37g，7.74mmol)和3，5-二氟苯胺(1g，7.74mmol)在THF(23mL)中的溶液中加入叔丁醇钾(1.3g，11.6mmol)，并将该反应混合物在室温下搅拌4小时。在反应完成后，加入水(50mL)并用EtOAc(200mL)萃取有机相，用硫酸钠干燥，并通过柱色谱法使用100-200目硅胶和0-10％的在己烷中的EtOAc来进行纯化，从而获得N-(3，5-二氟苯基)-3，5-二氟-2-硝基苯胺：LC-MS(ESI)m/z 284.9[M+H]+。
N1-(3，5-二氟-苯基)-3，5-二氟-苯-1，2-二胺
Figure BDA00002500618801291
向N-(3，5-二氟苯基)-3，5-二氟-2-硝基苯胺(1g，3.49mmol)在AcOH(10.5mL)中的溶液中加入铁粉(585mg，10.48mmol)，并将该反应混合物加热至100℃达1小时。将该反应混合物冷却至室温并加入水。用EtOAc萃取有机层并通过使用碳酸氢钠饱和溶液碱化。用硫酸钠干燥有机相并在真空中浓缩从而获得N1-(3，5-二氟-苯基)-3，5-二氟-苯-1，2-二胺。该粗产物可直接使用而无需进一步纯化。
(S)-1-(2-(3，5-二氟苯基氨基)-4，6-二氟苯基氨基-1-氧代丙烷-2-基氨基甲酸叔丁酯
Figure BDA00002500618801292
将Boc-L-Ala-OH(1g，5.46mmol)和氯甲酸异丁酯(0.745g，5.46mmol)悬浮在DCM(5mL)中，并在-10℃下在搅拌下加入N-甲基吗啉(0.58g，5.73mmol)。在30分钟后，向该混合物中加入在DCM(2mL)中的N1-(3，5-二氟-苯基)-3，5-二氟-苯-1，2-二胺(0.7g，2.73mmol)。将该反应混合物在-10℃下搅拌30分钟并在室温下搅拌过夜。在反应完成后，加入水并用DCM萃取有机层，用硫酸钠干燥并在真空中浓缩从而获得粗产物。该粗产物通过柱色谱法使用100-200目硅胶和30％的在己烷中的EtOAc来进行纯化，从而获得(S)-1-(2-(3，5-二氟苯基氨基)-4，6-二氟苯基氨基-1-氧代丙烷-2-基氨基甲酸叔丁酯：LC-MS(ESI)m/z 428.1[M+H]+。
1-(1-(3，5-二氟苯基)-4，6-二氟-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基氨基甲酸叔丁酯
Figure BDA00002500618801301
将(S)-1-(2-(3，5-二氟苯基氨基)-4，6-二氟苯基氨基-1-氧代丙烷-2-基氨基甲酸叔丁酯(0.5g，1.16mmol)在AcOH(3.5mL)中的溶液在100℃下搅拌过夜。在反应完成后，将该混合物冷却至室温并通过使用碳酸氢钠饱和溶液碱化。用EtOAc(75mL)萃取有机层，用硫酸钠干燥，浓缩从而获得1-(1-(3，5-二氟苯基)-4，6-二氟-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基氨基甲酸叔丁酯。该粗产物可直接使用而无需进一步纯化。
1-(1-(3，5-二氟苯基)-4，6-二氟-1H-苯并[d]咪唑-2-基]-乙胺
Figure BDA00002500618801302
将1-(1-(3，5-二氟苯基)-4，6-二氟-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基氨基甲酸叔丁酯(0.4g)溶液在2N HCl(4mL)中在120℃下搅拌4小时。将该反应混合物冷却至室温并用碳酸氢钠饱和溶液(20mL)碱化。用EtOAc萃取有机层，用硫酸钠干燥并在真空中浓缩从而获得1-(1-(3，5-二氟苯基)-4，6-二氟-1H-苯并[d]咪唑-2-基]-乙胺。该粗产物可直接使用而无需进一步纯化。
4-氨基-6-(1-(1-(3，5-二氟苯基)-4，6-二氟-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基氨基)嘧啶-5-甲腈
Figure BDA00002500618801311
将1-(1-(3，5-二氟苯基)-4，6-二氟-1H-苯并[d]咪唑-2-基]-乙胺(0.25g，0.8mmol)和4-氯-嘧啶-5-甲腈(0.125g，0.8mmol)溶解在正丁醇(8mL)中，并向该混合物中加入二异丙基乙胺(0.313g，2.42mmol)。将该反应混合物在120℃下加热过夜。将该反应混合物冷却至室温并加入水。用EtOAc萃取该混合物，用硫酸钠干燥并在真空中浓缩。该粗产物通过柱色谱法使用100-200目硅胶和0-50％的在己烷中的EtOAc来进行纯化，从而获得4-氨基-6-(1-(1-(3，5-二氟苯基)-4，6-二氟-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基氨基)嘧啶-5-甲腈：1H NMR(400MHz，DMSO-d6with D2O)δ1.570(d，J＝6.8Hz，3H)，5.578-5.628(m，1H)，6.924(dd，J＝2Hz，J＝8Hz，1H)，7.109-7.166(m，1H)，7.275-7.316(m，3H)，7.838(s，1H)；LC-MS(ESI)m/z 428.0[M+H]+。
4-氨基-6-(((1S)-1-(1-(3，5-二氟苯基)-4，6-二氟-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，和4-氨基-6-(((1R)-1-(1-(3，5-二氟苯基)-4，6-二氟-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈
Figure BDA00002500618801312
使用制备SFC在IC柱上分离该外消旋混合物4-氨基-6-(1-(1-(3，5-二氟苯基)-4，6-二氟-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基氨基)嘧啶-5-甲腈(0.185g)从而获得两种级分：
在SFC IC柱上的第一峰(在Chiralcel OD-H柱上的第一峰和在Chiralpak AD-H柱上的第二峰)：4-氨基-6-(((1S)-1-(1-(3，5-二氟苯基)-4，6-二氟-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈(0.083g，44.9％产率)，为白色固体：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 7.86(1H，s)，7.75(1H，d，J＝7.2Hz)，7.30-7.42(3H，m)，7.17(3H，td，J＝10.5，2.2Hz)，6.97(1H，dd，J＝8.6，2.2Hz)，5.63(1H，quin，J＝6.7Hz)，1.57(3H，d，J＝6.8Hz)；LC-MS(ESI)m/z 428.0[M+H]+。在SFC IC柱上的第二峰(在Chiralcel OD-H柱上的第二峰和在Chiralpak AD-H柱上的第一峰)：4-氨基-6-(((1R)-1-(1-(3，5-二氟苯基)-4，6-二氟-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，为白色固体：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 7.86(1H，s)，7.75(1H，d，J＝7.0Hz)，7.29-7.43(3H，m)，7.17(3H，td，J＝10.6，2.2Hz)，6.97(1H，dd，J＝8.4，2.2Hz)，5.63(1H，quin，J＝6.6Hz)，1.57(3H，d，J＝6.8Hz)；LC-MS(ESI)m/z 428.0[M+H]+。采用实施例47中的(S)-2-(1-氨基乙基)-1-环丙基-1H-苯并[d]咪唑-7-甲酸甲酯的一般合成程序，使用(S)-1-(3-(叔丁基氨基甲酰基)-2-(环丙基氨基)苯基氨基)-1-氧代丙烷-2-基氨基甲酸叔丁酯制备(S)-2-(1-氨基乙基)-N-叔丁基-1-环丙基-1H-苯并[d]咪唑-7-甲酰胺：1H NMR(400MHz，MeOH-d4)δ7.70(1H，d，J＝8.0Hz)，7.38(1H，d，J＝8.0Hz)，7.28(1H，t，J＝8.0Hz)，4.69(1H，q，J＝8.0Hz)，3.49-3.43(1H，m)，1.60(3H，d，J＝8.0Hz)，1.53(9H，s)，1.32-1.15(2H，m)，1.10-1.02(1H，m)，0.99-0.92(1H，m)；LC-MS(ESI)m/z 301.1[M+H]+。
2-((1S)-1-((6-氨基-5-氰基-4-嘧啶基)氨基)乙基)-N-叔丁基-1-环丙基-1H-苯并咪唑-7-甲酰胺
采用实施例47中的(S)-2-(1-(6-氨基-5-氰基嘧啶-4-基氨基)乙基)-1-环丙基-1H-苯并[d]咪唑-7-甲酸甲酯的一般合成程序，使用(S)-2-(1-氨基乙基)-N-叔丁基-1-环丙基-1H-苯并[d]咪唑-7-甲酰胺制备2-((1S)-1-((6-氨基-5-氰基-4-嘧啶基)氨基)乙基)-N-叔丁基-1-环丙基-1H-苯并咪唑-7-甲酰胺：1H NMR(400MHz，MeOH-d4)δ8.03(1H，s)，7.68(1H，d，J＝8.0Hz)，7.38(1H，d，J＝8.0Hz)，7.27(1H，t，J＝8.0Hz)，6.04(1H，q，J＝8.0Hz)，3.55-3.43(1H，m)，3.03-2.96(1H，m)，1.73(3H，d，J＝4.0Hz)，1.53(9H，s)，1.40-1.30(1H，m)，1.30-1.15(2H，m)，1.10-0.93(1H，m)；LC-MS(ESI)m/z 419.2[M+H]+。
实施例51：4-氨基-6-(((1S)-1-(7-(甲基磺酰基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈的制备
3-(甲基磺酰基)-2-硝基苯胺
Figure BDA00002500618801331
在N2下向三氟甲磺酸铜(II)(0.83g，2.3mmol)、甲烷亚磺酸钠(2.8g，27.6mmol)、3-溴-2-硝基苯胺(5.0g，23mmol)的混合物中加入DIEA(0.50mL，4.6mmol)和DMSO(10mL)。将搅拌着的混合物在预热的110℃油浴中加热18小时。将该混合物冷却至室温，用EtOAc稀释，并通过CeliteTM垫过滤。用水、盐水洗涤滤液，干燥并在真空中浓缩。残余物通过硅胶快速色谱法纯化，使用0％至10％的在含有0.2％NH4OH的DCM中的MeOH作为洗脱剂梯度洗脱，从而获得3-(甲基磺酰基)-2-硝基苯胺：1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.44(1H，dd，J＝8.0，4.0Hz)，7.35(1H，t，J＝8.0Hz)，7.02(1H，dd，J＝8.0，4.0Hz)，5.04(2H，br)，3.36(3H，s)；LC-MS(ESI)m/z 217.0[M+H]+。
3-(甲基磺酰基)苯-1，2-二胺
Figure BDA00002500618801332
采用实施例47中的3-氨基-2-(环丙基氨基)苯甲酸甲酯的一般合成程序，使用3-(甲基磺酰基)-2-硝基苯胺制备3-(甲基磺酰基)苯-1，2-二胺：LC-MS(ESI)m/z 187.0[M+H]+。
(S)-1-(2-氨基-3-(甲基磺酰基)苯基氨基)-1-氧代丙烷-2-基氨基甲酸叔丁酯
Figure BDA00002500618801341
采用实施例47中的(S)-3-(2-(叔丁氧基羰基-氨基)丙酰胺)-2-(环丙基氨基)苯甲酸甲酯的一般合成程序，使用3-(甲基磺酰基)苯-1，2-二胺制备(S)-1-(2-氨基-3-(甲基磺酰基)苯基氨基)-1-氧代丙烷-2-基氨基甲酸叔丁酯：1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.90(1H，s)，7.70(1H，dd，J＝8.0，4.0Hz)，7.51(1H，d，J＝8.0Hz)，6.84(1H，t，J＝8.0Hz)，5.46(2H，br)，5.06(1H，d，J＝8.0Hz)，4.29-4.21(2H，m)，3.08(3H，s)，1.50(9H，s)，1.48(3H，d，J＝8.0Hz)；LC-MS(ESI)m/z358.1[M+H]+。
(S)-1-(7-(甲基磺酰基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙胺
采用实施例47中的(S)-2-(1-氨基乙基)-1-环丙基-1H-苯并[d]咪唑-7-甲酸甲酯的一般合成程序，使用(S)-1-(2-氨基-3-(甲基磺酰基)苯基氨基)-1-氧代丙烷-2-基氨基甲酸叔丁酯制备(S)-1-(7-(甲基磺酰基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙胺：LC-MS(ESI)m/z 240.1[M+H]+。
4-氨基-6-(((1S)-1-(7-(甲基磺酰基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈
Figure BDA00002500618801343
采用实施例47中的(S)-2-(1-(6-氨基-5-氰基-嘧啶-4-基氨基)乙基)-1-环丙基-1H-苯并[d]咪唑-7-甲酸甲酯的一般合成程序，使用(S)-1-(7-(甲基磺酰基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙胺制备4-氨基-6-(((1S)-1-(7-(甲基磺酰基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ12.79(0.8H，s)，12.60(0.2H，s)，8.03(0.8H，d，J＝8.0Hz)，7.97(0.2H，d，J＝8.0Hz)，7.81(1H，t，J＝8.0Hz)，7.73-7.65(1H，m)，7.45-7.25(3H，m)，5.78-5.60(1H，m)，3.50(3H，s)，1.69(3H，d，J＝8.0Hz)，1.62(1H，d，J＝8.0Hz)；LC-MS(ESI)m/z 358.0[M+H]+。
实施例52：4-氨基-6-(((1R)-1-(3-(3，5-二氟苯基)-3H-咪唑并[4，5-b]吡啶-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，和4-氨基-6-(((1S)-1-(3-(3，5-二氟苯基)-3H-咪唑并[4，5-b]吡啶-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈的制备
N-(3，5-二氟-苯基)-3-硝基-吡啶-2-胺
Figure BDA00002500618801351
向脱气的2-氯-3-硝基-吡啶(2.7g，17.03mmol)和3，5-二氟苯胺(2.0g，15.5mmol)在二甲基乙酰胺(50mL)中的溶液中加入碳酸铯(10g，30.98mmol)，并进一步用氮气脱气10分钟。向该混合物中加入4，5-双二苯基膦-9，9-二甲基氧杂蒽(xanthophos)(448mg，0.77mmol)和Pd2(dba)3(851mg，0.92mmol)并在100℃下搅拌16小时。在反应完成后，加入水(100mL)并用EtOAc(500mL)萃取该混合物。用硫酸钠干燥有机相并浓缩从而获得粗料，该粗料通过柱色谱法使用0-5％的在己烷中的EtOAc来进行纯化，从而产生N-(3，5-二氟-苯基)-3-硝基-吡啶-2-胺：LC-MS(ESI)m/z 250.1[M-H]-。
N1-(3，5-二氟苯基)-吡啶-2，3-二胺
Figure BDA00002500618801352
向N-(3，5-二氟-苯基)-3-硝基-吡啶-2-胺(2.0g，7.96mmol)在AcOH(24mL)中的溶液中加入铁粉(1.33g，23.8mmol)，并将该反应混合物加热至100℃达1小时。将该反应混合物冷却至室温并加入水(70mL)。用EtOAc(350mL)萃取有机层，并通过使用碳酸氢钠饱和溶液(150mL)碱化，用硫酸钠干燥并在真空中浓缩从而获得N1-(3，5-二氟-苯基)-吡啶-2，3-二胺。该粗产物可直接使用而无需进一步纯化。
(S)-1-(2-(3，5-二氟苯基氨基)吡啶-3-基氨基)-1-氧代丙烷-2-基氨基甲酸叔丁酯
Figure BDA00002500618801361
将Boc-L-Ala-OH(2.05g，10.8mmol)和氯甲酸异丁酯(1.4g，10.8mmol)溶解在DCM(20mL)中，并在-10℃下加入N-甲基吗啉(1.14g，11.3mmol)并搅拌30分钟。向该混合物中加入溶解在DCM(10mL)中的N1-(3，5-二氟-苯基)-吡啶-2，3-二胺(1.2g，5.42mmol)。将该反应混合物在-10℃下搅拌30分钟，并然后在室温下搅拌过夜。在反应完成后，加入水(100mL)并用DCM(200mL)萃取有机层，用硫酸钠干燥并浓缩从而获得粗产物，该粗产物通过柱色谱法使用100-200目硅胶和35％的在己烷中的EtOAc来进行纯化，从而获得(S)-1-(2-(3，5-二氟苯基氨基)吡啶-3-基氨基)-1-氧代丙烷-2-基氨基甲酸叔丁酯：LC-MS(ESI)m/z 393.2[M+H]+。
1-(3-(3，5-二氟苯基)-3H-咪唑并[4，5-b]吡啶-2-基)-乙基氨基甲酸叔丁酯
将(S)-1-(2-(3，5-二氟苯基氨基)吡啶-3-基氨基)-1-氧代丙烷-2-基氨基甲酸叔丁酯(1.7g，4.33mmol)在AcOH(12mL)中的溶液在100℃下搅拌过夜。在反应完成后，将该混合物冷却至室温并用碳酸氢钠饱和溶液(60mL)碱化。然后用EtOAc(150mL)萃取有机层，用硫酸钠干燥并在真空中浓缩，从而获得1-(3-(3，5-二氟苯基)-3H-咪唑并[4，5-b]吡啶-2-基)-乙基氨基甲酸叔丁酯。该粗产物可直接使用而无需进一步纯化。
1-(-(3，5-二氟苯基)-3H-咪唑并[4，5-b]吡啶-2-基)乙胺
Figure BDA00002500618801371
将1-(3-(3，5-二氟苯基)-3H-咪唑并[4，5-b]吡啶-2-基)-乙基氨基甲酸叔丁酯(1.10g，2.94mmol)溶液在HCl甲醇溶液(100mL)中在室温下搅拌5小时。在反应完成后，在真空中除去溶剂并将所得固体溶解在水中。用EtOAc(100mL)萃取该溶液，用碳酸氢钠饱和溶液、盐水洗涤，用硫酸钠干燥并在真空中浓缩从而获得1-(-(3，5-二氟苯基)-3H-咪唑并[4，5-b]吡啶-2-基)乙胺：LC-MS(ESI)m/z 275.1[M+H]+。该粗产物可直接使用而无需进一步纯化。
4-氨基-6-(1-(3-(3，5-二氟苯基)-3H-咪唑并[4，5-b]吡啶-2-基)-乙基氨基)嘧啶-5-甲腈
Figure BDA00002500618801372
将1-(-(3，5-二氟苯基)-3H-咪唑并[4，5-b]吡啶-2-基)乙胺(600mg，2.18mmol)和4-氯-嘧啶-5-甲腈(300mg，2.18mmol)溶解在正丁醇(30mL)中。在加入DIPEA(422mg，3.28mmol)后，将该反应混合物在120℃下加热过夜。将该混合物冷却至室温并加入水(50mL)。用EtOAc(300mL)萃取该混合物，用硫酸钠干燥并在真空中浓缩从而获得粗产物。该粗产物通过柱色谱法使用100-200目硅胶和0-50％的在己烷中的EtOAc来进行纯化，从而获得4-氨基-6-(1-(3-(3，5-二氟苯基)-3H-咪唑并[4，5-b]吡啶-2-基)-乙基氨基)嘧啶-5-甲腈：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ1.580(d，J＝6.8Hz，3H)，5.683-5.753(m，1H)，7.205(br s，2H)，7.307-7.367(m，4H)，7.768(d，J＝8Hz，1H)，7.888(s，1H)，8.149-8.172(m，1H)，8.276-8.292(m，1H)；LC-MS(ESI)m/z 393.0[M+H]+。
4-氨基-6-(((1R)-1-(3-(3，5-二氟苯基)-3H-咪唑并[4，5-b]吡啶-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，和4-氨基-6-(((1S)-1-(3-(3，5-二氟苯基)-3H-咪唑并[4，5-b]吡啶-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈
Figure BDA00002500618801381
使用制备SFC  在AD-H  柱上分离外消旋4-氨基-6-(1-(3-(3，5-二氟苯基)-3H-咪唑并[4，5-b]吡啶-2-基)乙基氨基)嘧啶-5-甲腈(0.427g，1.09mmol)从而获得两种级分：在SFC AD-H柱上的第一峰(在Chiralcel OD-H柱上的第二峰和在Chiralpak AD-H柱上的第二峰)：4-氨基-6-(((1R)-1-(3-(3，5-二氟苯基)-3H-咪唑并[4，5-b]吡啶-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈(0.1809g，42.4％产率)，为棕褐色固体：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.28(1H，dd，J＝4.7，1.4Hz)，8.16(1H，dd，J＝8.0，1.4Hz)，7.89(1H，s)，7.75(1H，d，J＝7.8Hz)，7.28-7.39(4H，m)，7.19(2H，br.s.)，5.72(1H，quin，J＝7.0Hz)，1.58(3H，d，J＝6.8Hz)；LC-MS(ESI)m/z 393.1[M+H]+。在SFC AD-H柱上的第二峰(在Chiralcel OD-H柱上的第一峰和在Chiralpak AD-H柱上的第一峰)：4-氨基-6-(((1S)-1-(3-(3，5-二氟苯基)-3H-咪唑并[4，5-b]吡啶-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈(0.144g，33.8％产率)，为灰白色固体：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.28(1H，dd，J＝4.8，1.5Hz)，8.16(1H，dd，J＝8.0，1.4Hz)，7.89(1H，s)，7.75(1H，d，J＝7.6Hz)，7.28-7.39(4H，m)，7.19(2H，br.s.)，5.66-5.77(1H，m)，1.58(3H，d，J＝6.7Hz)；LC-MS(ESI)m/z 393.1[M+H]+。
实施例53：6-氟-N-(5-氟-2-硝基苯基)吡啶-2-胺
Figure BDA00002500618801391
根据一般程序D中的步骤D1使用6-氟吡啶-2-胺(1.762g，15.71mmol)制备，从而获得6-氟-N-(5-氟-2-硝基苯基)吡啶-2-胺，为橙色固体。LC-MS(ESI)m/z 251.9[M+H]+。
5-氟-N1-(6-氟吡啶-2-基)苯-1，2-二胺
根据一般程序D中的步骤D2使用6-氟-N-(5-氟-2-硝基苯基)吡啶-2-胺(3.95g，15.73mmol)制备，从而获得5-氟-N1-(6-氟吡啶-2-基)苯-1，2-二胺，为黄色固体。LC-MS(ESI)m/z 222.1[M+H]+。
1-(4-氟-2-(6-氟吡啶-2-基氨基)苯基氨基)-1-氧代丙烷-2-基氨基甲酸叔丁酯
Figure BDA00002500618801393
根据一般程序D中的步骤D3使用5-氟-N1-(6-氟吡啶-2-基)苯-1，2-二胺(1.200g，5.42mmol)制备，从而获得1-(4-氟-2-(6-氟吡啶-2-基氨基)苯基氨基)-1-氧代丙烷-2-基氨基甲酸叔丁酯，为灰白色固体。LC-MS(ESI)m/z 393.2[M+H]+。
N-(1-(6-氟-1-(6-氟吡啶-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基)乙酰胺
根据一般程序D中的步骤D4使用1-(4-氟-2-(6-氟吡啶-2-基氨基)苯基氨基)-1-氧代丙烷-2-基氨基甲酸叔丁酯(2.10g，5.35mmol)制备，从而获得N-(1-(6-氟-1-(6-氟吡啶-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基)乙酰胺，为粉红色固体。LC-MS(ESI)m/z 317.1[M+H]+。
1-(6-氟-1-(6-氟吡啶-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙胺
根据一般程序D中的步骤D5a使用N-(1-(6-氟-1-(6-氟吡啶-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基)乙酰胺(1.200g，3.79mmol)制备，从而获得1-(6-氟-1-(6-氟吡啶-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙胺，为粉红色固体。LC-MS(ESI)m/z 275.1[M+H]+。
4-氨基-6-(1-(6-氟-1-(6-氟吡啶-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基氨基)嘧啶-5-甲腈
根据一般程序D中的步骤D6使用1-(6-氟-1-(6-氟吡啶-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙胺(0.300g，1.094mmol)制备，从而获得4-氨基-6-(1-(6-氟-1-(6-氟吡啶-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基氨基)嘧啶-5-甲腈，为白色固体：1HNMR(500MHz，DMSO-d6)δppm 1.60(d，J＝6.85Hz，3H)5.85(quin，J＝7.03Hz，1H)7.17(td，J＝9.23，2.57Hz，3H)7.27(ddd，J＝11.43，8.86，2.20Hz，2H)7.64(dd，J＝7.46，1.10Hz，1H)7.73(d，J＝7.83Hz，1H)7.77(dd，J＝8.80，4.89Hz，1H)7.87(s，1H)8.20(q，J＝8.23Hz，1H).LC-MS(ESI)m/z 393.1[M+H]+。
4-氨基-6-(((1S)-1-(6-氟-1-(6-氟-2-吡啶基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，和4-氨基-6-(((1R)-1-(6-氟-1-(6-氟-2-吡啶基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈
Figure BDA00002500618801411
使用制备SFC在AD-H柱上分离外消旋混合物(261mg)从而获得两种级分：在OD-H柱上的第一峰：4-氨基-6-(((1R)-1-(6-氟-1-(6-氟-2-吡啶基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，为白色固体：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.60(d，J＝6.85Hz，3H)5.86(br.s.，1H)7.17(ddd，J＝9.78，8.80，2.35Hz，3H)7.23-7.32(m，2H)7.65(dd，J＝7.53，1.47Hz，1H)7.73(br.s.，1H)7.77(dd，J＝8.90，4.99Hz，1H)7.87(s，1H)8.21(q，J＝8.22Hz，1H).LC-MS(ESI)m/z 393.0[M+H]+。在OD-H柱上的第二峰：4-氨基-6-(((1S)-1-(6-氟-1-(6-氟-2-吡啶基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，为白色固体：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.59(d，J＝6.85Hz，3H)5.85(quin，J＝6.99Hz，1H)7.17(td，J＝9.24，2.45Hz，3H)7.27(td，J＝8.95，2.45Hz，2H)7.64(dd，J＝7.53，1.47Hz，1H)7.71-7.81(m，2H)7.86(s，1H)8.20(q，J＝8.22Hz，1H).LC-MS(ESI)m/z 393.0[M+H]+。
实施例54：4-氨基-6-(((1S)-1-(1-环戊基-4-(甲基磺酰基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈的制备
Figure BDA00002500618801421
将4-氨基-6-(((1S)-1-(7-(甲基磺酰基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈(110mg，0.31mmol)和碳酸铯(100mg，0.31mmol)的混合物在DMF(2mL)中在室温下搅拌30分钟。此时加入溴代环戊烷(92μL，0.62mmol)。将该混合物在密封烧瓶中在110℃下搅拌18小时。将该混合物冷却至室温并在减压下浓缩。残余物通过硅胶快速色谱法纯化，使用0％至10％的在含有0.2％NH4OH的DCM-EtOAc(1∶1)中的MeOH  作为洗脱剂梯度洗脱，从而获得4-氨基-6-(((1S)-1-(1-环戊基-4-(甲基磺酰基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.09(1H，s)，7.95(1H，s)，7.94(1H，d，J＝8.0Hz)，7.72(1H，d，J＝8.0Hz)，7.43(1H，t，J＝8.0Hz)，7.35(2H，br)，5.93-5.85(1H，m)，5.03-4.95(1H，m)，3.54(3H，s)，2.70-2.66(1H，m)，2.35-2.32(1H，m)，2.18-1.94(6H，m)，1.67(3H，d，J＝8.0Hz)；LC-MS(ESI)m/z 426.1[M+H]+。
实施例55：N-(5-氟-2-硝基苯基)吡啶-3-胺
Figure BDA00002500618801422
根据一般程序D中的步骤D1使用吡啶-3-胺(1.479g，15.71mmol)制备，从而获得N-(5-氟-2-硝基苯基)吡啶-3-胺，为橙色固体。LC-MS(ESI)m/z 234.1[M+H]+。
5-氟-N1-(吡啶-3-基)苯-1，2-二胺
Figure BDA00002500618801431
根据一般程序D中的步骤D2使用N-(5-氟-2-硝基苯基)吡啶-3-胺(1.24g，5.32mmol)制备，从而获得5-氟-N1-(吡啶-3-基)苯-1，2-二胺，为深色油状物。LC-MS(ESI)m/z 204.2[M+H]+。
1-(4-氟-2-(吡啶-3-基氨基)苯基氨基)-1-氧代丙烷-2-基氨基甲酸叔丁酯
Figure BDA00002500618801432
根据一般程序D中的步骤D3使用5-氟-N1-(吡啶-3-基)苯-1，2-二胺(0.810g，3.99mmol)制备，从而获得1-(4-氟-2-(吡啶-3-基氨基)苯基氨基)-1-氧代丙烷-2-基氨基甲酸叔丁酯，为黄色油状物。LC-MS(ESI)-m/z 375.2[M+H]+。
N-(1-(6-氟-1-(吡啶-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基)乙酰胺
Figure BDA00002500618801433
根据一般程序D中的步骤D4使用1-(4-氟-2-(吡啶-3-基氨基)苯基氨基)-1-氧代丙烷-2-基氨基甲酸叔丁酯(0.610g，1.63mmol)制备，从而获得N-(1-(6-氟-1-(吡啶-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基)乙酰胺，为棕色玻璃状物。LC-MS(ESI)m/z 299.1[M+H]+。
1-(6-氟-1-(吡啶-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙胺
Figure BDA00002500618801441
根据一般程序D中的步骤D5a使用N-(1-(6-氟-1-(吡啶-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基)乙酰胺(0.486g，1.63mmol)制备，从而获得1-(6-氟-1-(吡啶-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙胺，为棕褐色油状物。LC-MS(ESI)m/z 257.1[M+H]+。
4-氨基-6-(1-(6-氟-1-(吡啶-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基氨基)嘧啶-5-甲腈
Figure BDA00002500618801442
根据一般程序D中的步骤D6使用1-(6-氟-1-(吡啶-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙胺(0.160g，0.624mmol)制备，从而获得4-氨基-6-(1-(6-氟-1-(吡啶-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基氨基)-嘧啶-5-甲腈，为棕褐色固体。1HNMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.57(d，J＝6.65Hz，3H)5.49(quin，J＝6.94Hz，1H)6.95(dd，J＝9.00，2.35Hz，1H)7.08-7.17(m，1H)7.19(br.s.，2H)7.57(dd，J＝7.92，4.60Hz，1H)7.68-7.80(m，2H)7.83(s，1H)8.01(d，J＝8.22Hz，1H)8.66(dd，J＝4.79，1.47Hz，1H)8.74(d，J＝2.35Hz，1H).LC-MS(ESI)m/z 375.1[M+H]+。
4-氨基-6-(((1R)-1-(6-氟-1-(3-吡啶基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，和4-氨基-6-(((1S)-1-(6-氟-1-(3-吡啶基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈
Figure BDA00002500618801451
使用制备SFC在AD-H柱上分离外消旋混合物(160mg)从而获得两种级分。在OD-H柱上的第一峰：4-氨基-6-(((1R)-1-(6-氟-1-(3-吡啶基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，为灰白色固体：1HNMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.63(d，J＝6.85Hz，3H)5.56(quin，J＝6.99Hz，1H)7.01(dd，J＝8.90，2.45Hz，1H)7.21(ddd，J＝9.88，8.90，2.54Hz，1H)7.25(br.s.，2H)7.63(ddd，J＝8.12，4.79，0.78Hz，1H)7.75-7.86(m，2H)7.89(s，1H)8.08(dt，J＝8.31，1.71Hz，1H)8.72(dd，J＝4.79，1.47Hz，1H)8.81(d，J＝2.15Hz，1H).LC-MS(ESI)m/z 375.1[M+H]+。在OD-H柱上的第二峰：4-氨基-6-(((1S)-1-(6-氟-1-(3-吡啶基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，为灰白色固体：1HNMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.57(d，J＝6.85Hz，3H)5.50(quin，J＝6.94Hz，1H)6.95(dd，J＝8.90，2.45Hz，1H)7.14(ddd，J＝9.78，8.80，2.54Hz，1H)7.19(br.s.，2H)7.54-7.61(m，1H)7.76(dd，J＝8.80，5.09Hz，2H)7.83(s，1H)8.01(dt，J＝8.31，1.71Hz，1H)8.66(dd，J＝4.79，1.47Hz，1H)8.75(d，J＝2.15Hz，1H).LC-MS(ESI)m/z 375.1[M+H]+。
实施例56：4-氨基-6-(((1R)-1-(1-(2-吡啶基)-1H-咪唑并[4，5-b]吡啶-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，和4-氨基-6-(((1S)-1-(1-(2-吡啶基)-1H-咪唑并[4，5-b]吡啶-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈的制备
N-(2-硝基吡啶-3-基)吡啶-2-胺
Figure BDA00002500618801452
向3-氟-2-硝基吡啶(3.32g，23.38mmol)和2-氨基吡啶(2.0g，21.25mmol)在DMF(35.4mL)中的溶液中加入叔丁醇钾(4.77g，42.5mmol)。将该溶液在氮气下在室温下搅拌过夜。在22小时后，将该混合物倒入水(100mL)中并用EtOAc(2x 100mL)萃取。在用MgSO4干燥后，过滤该溶液并在真空中浓缩从而获得粗料，为橙色固体。该橙色固体通过色谱法经由Redi-SepTM预装填硅胶柱(80g)纯化，使用0％至50％的在己烷中的EtOAc梯度洗脱，从而获得N-(2-硝基吡啶-3-基)吡啶-2-胺，为橙色固体：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 9.53(1H，s)，8.58(1H，dd，J＝8.4，1.6Hz)，8.15(1H，dd，J＝4.3，1.4Hz)，8.10-8.14(1H，m)，7.66-7.76(2H，m)，7.05(1H，dt，J＝8.4，0.8Hz)，6.93(1H，ddd，J＝7.2，5.0，0.9Hz)；LC-MS(ESI)m/z 217.0[M+H]+。
N3-(吡啶-2-基)吡啶-2，3-二胺
Figure BDA00002500618801461
在搅拌条件下在回流下加热N-(2-硝基吡啶-3-基)吡啶-2-胺(2.46g，11.38mmol)和氯化锡(II)二水合物(12.84g，56.9mmol)在EtOAc(76mL)中的异质混合物。在5小时后，将该混合物冷却至室温。向冷却的混合物中加入10M aq.NaOH溶液(100mL)。用EtOAc(3x 50mL)萃取该混合物。有机萃取物用水(1x 100mL)、饱和NaCl(1x 100mL)洗涤，并用MgSO4干燥。过滤并在真空中浓缩该溶液从而获得棕色固体。残余物通过硅胶柱色谱法在80g Redi-SepTM柱上进行纯化，使用0％至50％的在DCM中的DCM∶MeOH∶NH4OH(89∶9∶1)作为洗脱剂梯度洗脱超过25分钟，然后使用50％的在DCM中的DCM∶MeOH∶NH4OH(89∶9∶1)作为洗脱剂等度洗脱20分钟，从而获得N3-(吡啶-2-基)吡啶-2，3-二胺，为棕色固体：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.03-8.09(1H，m)，7.92(1H，s)，7.79(1H，dd，J＝7.6，1.6Hz)，7.69(1H，dd，J＝4.9，1.6Hz)，7.48-7.56(1H，m)，6.66-6.74(2H，m)，6.56(1H，dd，J＝7.7，4.8Hz)，5.67(2H，s)；LC-MS(ESI)m/z187.1[M+H]+。
(S)-1-氧代-1-(3-(吡啶-2-基氨基)吡啶-2-基氨基)丙烷-2-基氨基甲酸叔丁酯
Figure BDA00002500618801471
向Boc-L-Ala-OH(1.214g，6.42mmol)和N-甲基吗啉(0.741mL，6.74mmol)在DCM(16.04mL)中的-10℃溶液(NaCl-冰浴)中加入氯甲酸异丁酯(0.839mL，6.42mmol)。在-10℃下搅拌所得混浊的浅黄色混合物。在-10℃下15分钟后，然后在-10℃下在搅拌下向该混合物中加入N3-(吡啶-2-基)吡啶-2，3-二胺(0.5974g，3.21mmol)在DCM(16mL)中的溶液。在搅拌下让所得混合物升温至室温。在室温下15.5小时后，向该混合物中加入饱和NH4Cl(50mL)。分离出有机层。用DCM(50mL x 1)萃取含水混合物。用MgSO4干燥合并的有机层，过滤并在真空中浓缩。残余物通过硅胶柱色谱法在40gRedi-SepTM柱上进行纯化，使用0％至50％的在己烷中的EtOAc作为洗脱剂梯度洗脱超过14分钟，然后使用50％的在己烷中的EtOAC作为洗脱剂等度洗脱14分钟，然后使用50％至100％的在己烷中的EtOAc作为洗脱剂梯度洗脱超过14分钟，然后使用100％的EtOAC作为洗脱剂等度洗脱30分钟，从而获得(S)-1-氧代-1-(3-(吡啶-2-基氨基)吡啶-2-基氨基)丙烷-2-基氨基甲酸叔丁酯，为浅粉色泡沫状固体：LC-MS(ESI)m/z 358.1[M+H]+。
1-(1-(吡啶-2-基)-1H-咪唑并[4，5-b]吡啶-2-基)乙基氨基甲酸叔丁酯
Figure BDA00002500618801472
在100℃在搅拌下加热(S)-1-氧代-1-(3-(吡啶-2-基氨基)吡啶-2-基氨基)丙烷-2-基氨基甲酸叔丁酯(0.5432g，1.520mmol)在AcOH(5.07mL)中的溶液。在3天后，在真空中浓缩该混合物从而获得1-(1-(吡啶-2-基)-1H-咪唑并[4，5-b]吡啶-2-基)乙基氨基甲酸叔丁酯，为棕色浆料：LC-MS(ESI)m/z 340.1[M+H]+。发生差向异构化。粗产物可直接使用而无需进一步纯化。
1-(1-(吡啶-2-基)-1H-咪唑并[4，5-b]吡啶-2-基)乙胺
Figure BDA00002500618801481
在室温下在搅拌下向1-(1-(吡啶-2-基)-1H-咪唑并[4，5-b]吡啶-2-基)乙基氨基甲酸叔丁酯(0.516g，1.520mmol)在DCM(10.14mL)中的混合物中逐滴加入TFA(10.14mL，132mmol)。在50分钟后，在真空中浓缩该混合物并将其与三乙胺和MeOH共蒸发。中和的粗混合物通过色谱法经由Redi-SepTM预装填硅胶柱(40g)纯化，使用0％至100％的在DCM中的DCM∶MeOH∶NH4OH  (89∶9∶1)梯度洗脱，从而获得1-(1-(吡啶-2-基)-1H-咪唑并[4，5-b]吡啶-2-基)乙胺，为棕色浆料：1HNMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.68-8.76(1H，m)，8.49(1H，dd，J＝4.7，1.6Hz)，8.19(1H，td，J＝7.7，2.0Hz)，7.79-7.92(2H，m)，7.63(1H，ddd，J＝7.6，4.8，0.9Hz)，7.32(1H，dd，J＝8.1，4.8Hz)，4.47(1H，q，J＝6.7Hz)，1.45(3H，d，J＝6.8Hz)；LC-MS(ESI)m/z 240.1[M+H]+。
4-氨基-6-(1-(1-(吡啶-2-基)-1H-咪唑并[4，5-b]吡啶-2-基)乙基氨基)嘧啶-5-甲腈
Figure BDA00002500618801491
在120℃下搅拌4-氨基-6-氯嘧啶-5-甲腈(0.235g，1.521mmol)、1-(1-(吡啶-2-基)-1H-咪唑并[4，5-b]吡啶-2-基)乙胺(0.364g，1.521mmol)和DIEA(1.325mL，7.61mmol)在丁-1-醇(15.21mL)中的混合物。在17.5小时后，将该混合物从热源上移开。冷却该混合物并在真空中浓缩从而获得棕色固体：将该棕色固体悬浮在水(50mL)中并用DCM(50mL)萃取。有机相用水(30mL)洗涤，MgSO4干燥，过滤并在真空中浓缩从而获得棕色固体。残余物通过柱色谱法在40gRedi-SepTM柱上进行纯化，使用0％至100％的在DCM中的DCM∶MeOH∶NH4OH(89∶9∶1)作为洗脱剂梯度洗脱超过14分钟，然后使用100％的DCM∶MeOH∶NH4OH(89∶9∶1)作为洗脱剂等度洗脱30分钟，从而获得棕色固体。将该棕色固体悬浮在EtOAc-己烷(1∶1)中并过滤从而获得4-氨基-6-(1-(1-(吡啶-2-基)-1H-咪唑并[4，5-b]吡啶-2-基)乙基氨基)嘧啶-5-甲腈，为棕褐色固体：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.63(1H，dd，J＝4.9，1.2Hz)，8.48(1H，dd，J＝4.7，1.4Hz)，8.09(1H，td，J＝7.8，1.9Hz)，7.85(1H，s)，7.80(1H，dd，J＝8.1，1.5Hz)，7.77(1H，d，J＝7.6Hz)，7.73(1H，d，J＝8.0Hz)，7.50-7.57(1H，m)，7.30(1H，dd，J＝8.1，4.8Hz)，7.20(2H，br.s.)，5.84(1H，quin，J＝6.9Hz)，1.58(3H，d，J＝6.8Hz)；LC-MS(ESI)m/z 358.1[M+H]+。
4-氨基-6-(((1R)-1-(1-(2-吡啶基)-1H-咪唑并[4，5-b]吡啶-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，和4-氨基-6-(((1S)-1-(1-(2-吡啶基)-1H-咪唑并[4，5-b]吡啶-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈
Figure BDA00002500618801501
使用制备SFC在AD-H柱上分离上述外消旋混合物(227.63mg)从而获得两种级分：在SFC AD-H柱上的第一峰(在ChiralcelTM OD-H柱上的第二峰和在ChiralpakTM AD-H柱上的第一峰)：4-氨基-6-(((1R)-1-(1-(2-吡啶基)-1H-咪唑并[4，5-b]吡啶-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，为浅黄色固体：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm8.60-8.66(1H，m)，8.48(1H，dd，J＝4.7，1.6Hz)，8.09(1H，td，J＝7.7，2.0Hz)，7.85(1H，s)，7.80(1H，dd，J＝8.2，1.6Hz)，7.77(1H，d，J＝7.4Hz)，7.73(1H，d，J＝8.0Hz)，7.53(1H，ddd，J＝7.6，4.8，0.9Hz)，7.30(1H，dd，J＝8.1，4.8Hz)，7.20(2H，br.s.)，5.84(1H，quin，J＝7.0Hz)，1.58(3H，d，J＝6.8Hz)；LC-MS(ESI)]m/z 358.1[M+H]+。在SFC AD-H柱上的第二峰(在ChiralcelTMOD-H柱上的第一峰和在ChiralpakTMAD-H    柱上的第二峰)：4-氨基-6-(((1S)-1-(1-(2-吡啶基)-1H-咪唑并[4，5-b]吡啶-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，为浅黄色固体：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm8.60-8.65(1H，m)，8.48(1H，dd，J＝4.7，1.6Hz)，8.09(1H，td，J＝7.7，2.0Hz)，7.85(1H，s)，7.80(1H，dd，J＝8.2，1.6Hz)，7.76(1H，d，J＝7.6Hz)，7.73(1H，d，J＝8.0Hz)，7.53(1H，ddd，J＝7.6，4.9，1.0Hz)，7.30(1H，dd，J＝8.1，4.8Hz)，7.20(2H，br.s.)，5.84(1H，quin，J＝7.0Hz)，1.58(3H，d，J＝6.8Hz)；LC-MS(ESI)]m/z 358.1[M+H]+。
实施例57：4-氨基-6-(((1R)-1-(1-(3，5-二氟苯基)-1H-咪唑并[4，5-b]吡啶-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，和4-氨基-6-(((1S)-1-(1-(3，5-二氟苯基)-1H-咪唑并[4，5-b]吡啶-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈的制备
(3，5-二氟-苯基)-(2-硝基-吡啶-3-基)-胺
Figure BDA00002500618801511
向脱气的3-氯-2-硝基-吡啶(135g，8.51mmol)和3，5-二氟苯胺(1.0g，7.74mmol)在二甲基乙酰胺(23.2mL)中的溶液中加入碳酸铯(6.34g，19.35mmol)，并进一步用氮气给该反应混合物脱气15分钟。将4，5-双二苯基膦-9，9-二甲基氧杂蒽(267mg，0.46mmol)和Pd2(dba)3(212mg，0.23mmol)加入到该反应混合物中，并在100℃下搅拌12小时。在完成后，用水(50mL)稀释该反应混合物并用乙酸乙酯(2x 25mL)萃取。用硫酸钠干燥有机层并在真空中浓缩从而获得粗料，该粗料通过柱色谱法使用硅胶(100-200目)和0-30％的在己烷中的EtOAc来进行纯化，从而获得(3，5-二氟-苯基)-(2-硝基-吡啶-3-基)-胺：1HNMR(DMSO-d6，400MHz)δ6.856-6.980(m，3H)，7.659-7.691(m，1H)，8.017(dd，J＝1.6Hz，J＝1.6Hz，1H)，8.126-8.140(m，1H)，9.094(s，1H)；LC-MS(ESI)m/z 252.0[M+H]+。
N3-(3，5-二氟-苯基)-吡啶-2，3-二胺
向(3，5-二氟-苯基)-(2-硝基-吡啶-3-基)-胺(900mg，3.58mmol)在EtOH(10.7mL)中的溶液中加入氯化亚锡二水合物(3.23g，14.33mmol)和35％HCl(0.5mL)。当使用氨水碱化反应混合物时将该反应混合物在75℃下搅拌2小时，并用EtOAc萃取。有机层用硫酸钠干燥并在真空中浓缩从而获得N3-(3，5-二氟-苯基)-吡啶-2，3-二胺：1HNMR(400MHz，DMSO-d6)δ5.703(br s，2H)，6.227-6.289(m，2H)，6.383-6.442(m，1H)，6.564-6.595(m，1H)，7.333(dd，J＝1.6Hz，J＝1.6Hz，1H)，7.784-7.791(m，2H)；LC-MS(ESI)m/z 222.0[M+H]+。
{1-[3-(3，5-二氟-苯基氨基)-吡啶-2-基氨基甲酰基]-乙基}-氨基甲酸叔丁基酯
将N3-(3，5-二氟-苯基)-吡啶-2，3-二胺(750mg，3.39mmol)、Boc-L-Ala-OH(640mg，3.39mmol)和HATU(2.57g，6.78mmol)悬浮在DCM-DMF(1∶1)(10.2mL)中。将DIEA(874.6mg，6.78mmol)加入到该反应混合物中并在室温下搅拌8小时。在完成后，用水稀释反应混合物并用EtOAc萃取。有机层用硫酸钠干燥并在真空中浓缩。粗产物通过柱色谱法使用硅胶(100-200目)和0-10％的在DCM中的MeOH来进行纯化，从而获得{1-[3-(3，5-氟-苯基氨基)-吡啶-2-基氨基甲酰基]-乙基}-氨基甲酸叔丁基酯：LC-MS(ESI)m/z 393.2[M+H]+。
{1-[1-(3，5-二氟-苯基)-1H-咪唑并[4，5-b]吡啶-2-基]-乙基}-氨基甲酸叔丁基酯
Figure BDA00002500618801522
将{1-[3-(3，5-二氟-苯基氨基)-吡啶-2-基氨基甲酰基]-乙基}-氨基甲酸叔丁基酯(500mg，1.27mmol)在AcOH(4.0mL)中的溶液在100℃下搅拌过夜。在反应完成后，将反应混合物冷却至室温，使用碳酸氢钠饱和溶液(25mL)碱化并用EtOAc萃取。有机层用硫酸钠干燥并在真空中浓缩从而获得{1-[1-(3，5-二氟-苯基)-1H-咪唑并[4，5-b]吡啶-2-基]-乙基}-氨基甲酸叔丁基酯和N-{1-[1-(3，5-二氟-苯基)-1H-咪唑并[4，5-b]吡啶-2-基]-乙基}-乙酰胺的混合物。
1-[1-(3，5-二氟-苯基)-1H-咪唑并[4，5-b]吡啶-2-基]-乙胺
Figure BDA00002500618801531
将{{1-[1-(3，5-二氟-苯基)-1H-咪唑并[4，5-b]吡啶-2-基]-乙基}-氨基甲酸叔丁酯和N-{1-[1-(3，5-二氟-苯基)-1H-咪唑并[4，5-b]吡啶-2-基]-乙基}-乙酰胺(300mg)的粗品混合物悬浮在HCl甲醇溶液(3mL)中。将反应混合物在70℃下搅拌12小时。在反应完成后，在真空下除去溶剂。将残余物悬浮在水中并使用碳酸氢钠饱和溶液碱化并用EtOAc萃取。有机层用硫酸钠干燥并在真空中浓缩从而获得1-[1-(3，5-二氟-苯基)-1H-咪唑并[4，5-b]吡啶-2-基]-乙胺：LC-MS(ESI)m/z 275.1[M+H]+。该粗产物可直接使用而无需进一步纯化。
4-氨基-6-{1-[1-(3，5-二氟-苯基)-1H-咪唑并[4，5-b]吡啶-2-基]乙基氨基}-嘧啶-5-甲腈
在室温下向1-[1-(3，5-二氟-苯基)-1H-咪唑并[4，5-b]吡啶-2-基]-乙胺(200mg，0.729mmol)和4-氯-嘧啶5-甲腈(112mg，0.729mmol)在正丁醇(2.18mL)中的溶液中加入DIEA(282mg，2.187mmol)。将反应混合物在120℃下加热过夜。在完成后，用EtOAc稀释该反应混合物并通过过滤收集所得固体从而获得4-氨基-6-{1-[1-(3，5-二氟-苯基)-1H-咪唑并[4，5-b]吡啶-2-基]乙基氨基}-嘧啶-5-甲腈：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ1.597(d，J＝6.8Hz，3H)，5.631-5.698(m，1H)，7.201(brs，2H)，7.255-7.287(m，1H)，7.363-7.409(m，3H)，7.663(d，J＝7.6Hz，1H)，7.759(d，J＝7.6Hz，1H)，7.882(s，1H)，8.462(d，J＝3.6Hz，1H)；LC-MS(ESI)m/z 393.1[M+H]+。
实施例58：4-氨基-6-(((1R)-1-(1-(3，5-二氟苯基)-1H-咪唑并[4，5-c]吡啶-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，和4-氨基-6-(((1S)-1-(1-(3，5-二氟苯基)-1H-咪唑并[4，5-c]吡啶-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈的制备
Figure BDA00002500618801541
根据实施例57制备从而获得4-氨基-6-((1-(1-(3，5-二氟苯基)-1H-咪唑并[4，5-c]吡啶-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ1.597(d，J＝6.8Hz，3H)，5.669-5.738(m，1H)，7.194(br s，2H)，7.274(d，J＝5.6Hz，1H)，7.344-7.389(m，3H)，7.752(d，J＝7.6Hz，1H)，7.874(s，1H)，8.347(d，J＝5.6Hz，1H)，9.022(s，1H)。
实施例59：4-氨基-6-(((1S)-1-(1-(4-氟苄基)-4-(甲基磺酰基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈的制备
将4-氨基-6-(((1S)-1-(7-(甲基磺酰基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈(36mg，0.10mmol)、碳酸钾(21mg，0.15mmol)和4-氟苄基溴(15μL，0.12mmol)在DMF(3mL)中的混合物在密封烧瓶中在室温下搅拌18小时。用EtOAc稀释该反应混合物，用水、盐水洗涤，用硫酸镁干燥，并在减压下浓缩。残余物通过硅胶快速色谱法使用2.5％的在DCM中的MeOH作为洗脱剂来进行纯化，获得4-氨基-6-(((1S)-1-(1-(4-氟苄基)-4-(甲基磺酰基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈：1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.08(1H，s)，7.88(1H，d，J＝8.0Hz)，7.44(1H，d，J＝8.0Hz)，7.31(1H，t，J＝8.0Hz)，6.93(4H，t，J＝8.0Hz)，6.19(1H，t，J＝8.0Hz)，5.80-5.71(1H，m)，5.52(1H，d，J＝16.0Hz)，5.50(1H，d，J＝16.0Hz)，5.31(2H，br)，3.47(3H，s)，1.62(3H，d，J＝8.0Hz)；LC-MS(ESI)m/z 466.0[M+H]+。
实施例60：4-氨基-6-(((1S)-1-(1-(4-氟苄基)-7-(甲基磺酰基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈的制备
(S)-1-(2-(4-氟苄基氨基)-3-(甲基磺酰基)苯基氨基)-1-氧代丙烷-2-基氨基甲酸叔丁酯
Figure BDA00002500618801551
采用实施例59中的4-氨基-6-(((1S)-1-(1-(4-氟苄基)-4-(甲基磺酰基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈的一般合成程序，使用(S)-1-(2-氨基-3-(甲基磺酰基)苯基氨基)-1-氧代丙烷-2-基氨基甲酸叔丁酯(在实施例51制备的)制备(S)-1-(2-(4-氟苄基氨基)-3-(甲基磺酰基)苯基氨基)-1-氧代丙烷-2-基氨基甲酸叔丁酯：LC-MS(ESI)m/z 466.1[M+H]+。
(S)-1-(1-(4-氟苄基)-7-(甲基磺酰基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙胺
Figure BDA00002500618801552
采用实施例47中的(S)-2-(1-氨基乙基)-1-环丙基-1H-苯并[d]咪唑-7-甲酸甲酯的一般合成程序，使用(S)-1-(2-(4-氟苄基氨基)-3-(甲基磺酰基)苯基氨基)-1-氧代丙烷-2-基氨基甲酸叔丁酯制备(S)-1-(1-(4-氟苄基)-7-(甲基磺酰基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙胺：LC-MS(ESI)m/z 348.1[M+H]+。
4-氨基-6-(((1S)-1-(1-(4-氟苄基)-7-(甲基磺酰基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈
采用实施例47中的(S)-2-(1-(6-氨基-5-氰基嘧啶-4-基氨基)乙基)-1-环丙基-1H-苯并[d]咪唑-7-甲酸甲酯的一般合成程序，使用(S)-1-(1-(4-氟苄基)-7-(甲基磺酰基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙胺制备4-氨基-6-(((1S)-1-(1-(4-氟苄基)-7-(甲基磺酰基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5嘧啶甲腈：1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.16(1H，d，J＝8.0Hz)，8.15(1H，s)，8.05(1H，dd，J＝8.0，4.0Hz)，7.50(1H，t，J＝8.0Hz)，7.05-6.98(2H，m)，6.88-6.81(2H，m)，6.32(1H，d，J＝16.0Hz)，6.20(1H，br)，6.14(1H，d，J＝16.0Hz)，5.80-5.71(1H，m)，5.57(2H，br)，2.70(3H，s)，1.67(3H，d，J＝8.0Hz)；LC-MS(ESI)m/z 466.0[M+H]+。
实施例61：4-氨基-6-(((1S)-1-(1-(3，5-二氟苄基)-7-(甲基磺酰基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈的制备
(S)-1-(2-(3，5-二氟苄基氨基)-3-(甲基磺酰基)苯基氨基)-1-氧代丙烷-2-基氨基甲酸叔丁酯
Figure BDA00002500618801562
采用实施例59中的4-氨基-6-(((1S)-1-(1-(4-氟苄基)-4-(甲基磺酰基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈的一般合成程序，使用(S)-1-(2-氨基-3-(甲基磺酰基)苯基氨基)-1-氧代丙烷-2-基氨基甲酸叔丁酯(在实施例51中制备的)制备(S)-1-(2-(3，5-二氟苄基氨基)-3-(甲基磺酰基)苯基氨基)-1-氧代丙烷-2-基氨基甲酸叔丁酯：LC-MS(ESI)m/z 484.1[M+H]+。
(S)-1-(1-(3，5-二氟苄基)-7-(甲基磺酰基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙胺
Figure BDA00002500618801571
采用实施例47中的(S)-2-(1-氨基乙基)-1-环丙基-1H-苯并[d]咪唑-7-甲酸甲酯的一般合成程序，使用(S)-1-(2-(3，5-二氟苄基氨基)-3-(甲基磺酰基)苯基氨基)-1-氧代丙烷-2-基氨基甲酸叔丁酯制备(S)-1-(1-(3，5-二氟苄基)-7-(甲基磺酰基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙胺：LC-MS(ESI)m/z 366.1[M+H]+。
4-氨基-6-(((1S)-1-(1-(3，5-二氟苄基)-7-(甲基磺酰基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈
Figure BDA00002500618801572
采用实施例47中的(S)-2-(1-(6-氨基-5-氰基嘧啶-4-基氨基)乙基)-1-环丙基-1H-苯并[d]咪唑-7-甲酸甲酯的一般合成程序，使用(S)-1-(1-(3，5-二氟苄基)-7-(甲基磺酰基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙胺制备4-氨基-6-(((1S)-1-(1-(3，5-二氟苄基)-7-(甲基磺酰基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈：1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.16(1H，d，J＝8.0Hz)，8.16(1H，s)，8.05(1H，dd，J＝8.0，4.0Hz)，7.51(1H，t，J＝8.0Hz)，6.79-6.71(1H，m)，6.50-6.45(2H，m)，6.37(1H，d，J＝16.0Hz)，6.26(1H，br)，6.11(1H，d，J＝16.0Hz)，5.75(2H，br)，5.72-5.62(1H，m)，3.52(3H，s)，1.70(3H，d，J＝8.0Hz)；LC-MS(ESI)m/z484.0[M+H]+。
实施例62：5-氟-N-(4-氟-2-硝基苯基)吡啶-3-胺
Figure BDA00002500618801581
根据一般程序D中的步骤D1使用5-氟吡啶-3-胺(2.114g，18.86mmol)制备，从而获得5-氟-N-(4-氟-2-硝基苯基)吡啶-3-胺，为橙色固体。LC-MS(ESI)m/z 252.1[M+H]+。
4-氟-N1-(5-氟吡啶-3-基)苯-1，2-二胺
Figure BDA00002500618801582
根据一般程序D中的步骤D2使用5-氟-N-(4-氟-2-硝基苯基)吡啶-3-胺(1.42g，5.64mmol)制备，从而获得4-氟-N1-(5-氟吡啶-3-基)苯-1，2-二胺，为红色油状物。LC-MS(ESI)m/z 222.1[M+H]+。
1-(5-氟-2-(5-氟吡啶-3-基氨基)苯基氨基)-1-氧代丙烷-2-基氨基甲酸叔丁酯
Figure BDA00002500618801583
根据一般程序D中的步骤D3使用4-氟-N1-(5-氟吡啶-3-基)苯-1，2-二胺(0.890g，4.02mmol)制备，从而获得1-(5-氟-2-(5-氟吡啶-3-基氨基)苯基氨基)-1-氧代丙烷-2-基氨基甲酸叔丁酯，为白色固体。LC-MS(ESI)m/z 393.2[M+H]+。
N-(1-(5-氟-1-(5-氟吡啶-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基)乙酰胺
Figure BDA00002500618801591
根据一般程序D中的步骤D4使用1-(5-氟-2-(5-氟吡啶-3-基氨基)苯基氨基)-1-氧代丙烷-2-基氨基甲酸叔丁酯(0.500g，1.274mmol)制备，从而获得N-(1-(5-氟-1-(5-氟吡啶-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基)乙酰胺，为棕褐色固体。LC-MS(ESI)m/z 317.1[M+H]+。
1-(5-氟-1-(5-氟吡啶-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙胺
根据一般程序D中的步骤D5a使用N-(1-(5-氟-1-(5-氟吡啶-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基)乙酰胺(0.110g，0.348mmol)制备，从而获得1-(5-氟-1-(5-氟吡啶-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙胺，为棕褐色泡沫状物。LC-MS(ESI)m/z 275.1[M+H]+。
4-氨基-6-(1-(5-氟-1-(5-氟吡啶-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基氨基)嘧啶-5-甲腈
Figure BDA00002500618801593
根据一般程序D中的步骤D6使用1-(5-氟-1-(5-氟吡啶-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙胺(0.095g，0.346mmol)制备，从而获得4-氨基-6-(1-(5-氟-1-(5-氟吡啶-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基氨基)嘧啶-5-甲腈，为白色固体。1HNMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.59(d，J＝6.85Hz，3H)5.59(quin，J＝6.99Hz，1H)7.02-7.39(m，4H)7.60(dd，J＝9.59，2.35Hz，1H)7.77(d，J＝7.63Hz，1H)7.84(s，1H)8.10(d，J＝9.19Hz，1H)8.63(s，1H)8.68(d，J＝2.74Hz，1H).LC-MS(ESI)m/z 393.0[M+H]+。
4-氨基-6-(((1R)-1-(5-氟-1-(5-氟-3-吡啶基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，和4-氨基-6-(((1S)-1-(5-氟-1-(5-氟-3-吡啶基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈
Figure BDA00002500618801601
使用制备SFC在AD-H柱上分离外消旋混合物(96mg)从而获得两种级分。在OD-H柱上的第一峰：4-氨基-6-(((1R)-1-(5-氟-1-(5-氟-3-吡啶基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，为浅黄色固体。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.60(d，J＝6.85Hz，3H)5.59(quin，J＝6.99Hz，1H)7.01-7.34(m，4H)7.60(dd，J＝9.59，2.35Hz，1H)7.77(d，J＝7.63Hz，1H)7.84(s，1H)8.10(d，J＝9.00Hz，1H)8.64(s，1H)8.69(d，J＝2.54Hz，1H).LC-MS(ESI)m/z 393.0[M+H]+。在OD-H柱上的第二峰：4-氨基-6-(((1S)-1-(5-氟-1-(5-氟-3-吡啶基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，为浅黄色固体。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.59(d，J＝6.65Hz，3H)5.59(quin，J＝6.90Hz，1H)7.01-7.35(m，4H)7.60(dd，J＝9.59，2.54Hz，1H)7.77(d，J＝7.82Hz，1H)7.84(s，1H)8.10(d，J＝9.19Hz，1H)8.63(s，1H)8.68(d，J＝2.54Hz，1H).LC-MS(ESI)m/z 393.0[M+H]+。
实施例63
(S)-1-(6-氟-3-(5-氟吡啶-3-基)咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基)乙基氨基甲酸苄基酯
Figure BDA00002500618801611
将5-氟吡啶-3-基硼酸(0.096g，0.68mmol)、(S)-1-(6-氟-3-碘咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基)乙基氨基甲酸苄基酯(0.200g，0.455mmol)、碳酸钠(0.145g，1.366mmol)以及与DCM 1∶1络合的1，1′-双(二苯基膦基)二茂铁-二氯化钯(II)(0.019g，0.023mmol)在二噁烷(2.53mL)和水(0.50mL)中的溶液在微波辐照下在110℃下搅拌2小时。MPLC纯化(使用10-60％的在己烷中的EtOAc梯度洗脱)产生粗(S)-1-(6-氟-3-(5-氟吡啶-3-基)咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基)乙基氨基甲酸苄基酯，为灰白色泡沫状物。LC-MS(ESI)m/z 409.1[M+H]+。
(S)-1-(6-氟-3-(5-氟吡啶-3-基)咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基)乙胺
Figure BDA00002500618801612
根据一般程序C中的步骤C4使用(S)-1-(6-氟-3-(5-氟吡啶-3-基)咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基)乙基氨基甲酸苄基酯(0.142g，0.348mmol)制备，从而获得(S)-1-(6-氟-3-(5-氟吡啶-3-基)咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基)乙胺，为棕褐色固体。LC-MS(ESI)m/z 275.1[M+H]+。
4-氨基-6-(((1S)-1-(6-氟-3-(5-氟-3-吡啶基)咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈
Figure BDA00002500618801613
根据一般程序C中的步骤C5使用(S)-1-(6-氟-3-(5-氟吡啶-3-基)咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基)乙胺(0.095g，0.346mmol)制备，从而获得(S)-4-氨基-6-(1-(6-氟-3-(5-氟吡啶-3-基)咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基)乙基氨基)嘧啶-5-甲腈，为灰白色固体。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.54(d，J＝6.85Hz，3H)5.47(quin，J＝6.90Hz，1H)7.09(d，J＝7.24Hz，1H)7.22(br.s.，2H)7.39-7.48(m，1H)7.74(dd，J＝9.78，5.28Hz，1H)7.89(s，1H)8.00(dt，J＝9.73，1.98Hz，1H)8.43(dd，J＝4.50，2.15Hz，1H)8.56(s，1H)8.66(d，J＝2.74Hz，1H).LC-MS(ESI)m/z393.0[M+H]+。
实施例64
(S)-1-(6-氟-3-苯基咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基)乙基氨基甲酸苄基酯
Figure BDA00002500618801621
向微波小瓶中加入在二噁烷(3.44mL)和水(0.34mL)中的苯基硼酸(0.104g，0.852mmol)、(S)-1-(6-氟-3-碘咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基)乙基氨基甲酸苄基酯(0.250g，0.568mmol)、碳酸钠(0.181g，1.74mmol)以及与DCM 1∶1络合的1，1′-双(二苯基膦基)二茂铁-二氯化钯(II)(0.023g，0.028mmol)。将该悬浮液在微波辐照下在110℃下搅拌2小时。MPLC纯化(使用0-6％的在DCM中的MeOH梯度洗脱)产生(S)-1-(6-氟-3-苯基咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基)乙基氨基甲酸苄基酯，为棕色油状物。LC-MS(ESI)m/z 390.1[M+H]+。
(S)-1-(6-氟-3-苯基咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基)乙胺
Figure BDA00002500618801622
根据一般程序C中的步骤C4使用(S)-1-(6-氟-3-苯基咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基)乙基氨基甲酸苄基酯(0.142g，0.365mmol)制备，从而获得(S)-1-(6-氟-3-苯基咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基)乙胺，为黄色固体。LC-MS(ESI)m/z 256.1[M+H]+。
(S)-4-氨基-6-(1-(6-氟-3-苯基咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基)乙基氨基)-嘧啶-5-甲腈
根据一般程序C中的步骤C5使用(S)-1-(6-氟-3-苯基咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基)乙胺(0.093g，0.364mmol)制备，从而获得(S)-4-氨基-6-(1-(6-氟-3-苯基咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基)乙基氨基)嘧啶-5-甲腈，为米色固体。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.50(d，J＝6.65Hz，3H)5.47(quin，J＝6.85Hz，1H)6.91(d，J＝7.43Hz，1H)7.27(br.s.，2H)7.41(ddd，J＝10.03，8.07，2.45Hz，1H)7.51(dq，J＝8.85，4.22Hz，1H)7.58(d，J＝4.30Hz，4H)7.75(dd，J＝9.78，5.28Hz，1H)7.97(s，1H)8.25(dd，J＝4.50，2.35Hz，1H).LC-MS(ESI)m/z 374.1[M+H]+。
实施例65：2-((1R)-1-((6-氨基-5-氰基-4-嘧啶基)氨基)乙基)-1-(5-氟-3-吡啶基)-N-甲基-1H-苯并咪唑-7-甲酰胺，和2-((1S)-1-((6-氨基-5-氰基-4-嘧啶基)氨基)乙基)-1-(5-氟-3-吡啶基)-N-甲基-1H-苯并咪唑-7-甲酰胺的制备
2-(5-氟吡啶-3-基氨基)-N-甲基-3-硝基苯甲酰胺
将碳酸铯(1.55g，4.75mmol)、4，5-双二苯基膦-9，9-二甲基氧杂蒽(550mg，0.950mmol)、2-溴-N-甲基-3-硝基苯甲酰胺(820mg，3.17mmol)(在实施例20中制备的)、三(二亚苄基丙酮)二钯(0)(580mg，0.63mmol)、5-氟吡啶-3-胺(532mg，4.75mmol)在甲苯(15mL)中的混合物在N2下在100℃下加热18小时。将该混合物冷却至室温并用EtOAc稀释。过滤该混合物并在真空中浓缩滤液。残余物通过硅胶快速色谱法使用EtOAc  作为洗脱剂来进行纯化，获得2-(5-氟吡啶-3-基氨基)-N-甲基-3-硝基苯甲酰胺：1H NMR(400MHz，CDCl3)δ9.29(1H，s)，8.23(1H，s)，8.21(1H，d，J＝8.0Hz)，8.16(1H，s)，7.89(1H，d，J＝8.0Hz)，7.26(1H，t，J＝8.0Hz)，7.04(1H，d，J＝8.0Hz)，6.41(1H，br)，2.78(3H，d，J＝4.0Hz)；LC-MS(ESI)m/z 291.1[M+H]+。
3-氨基-2-(5-氟吡啶-3-基氨基)-N-甲基苯甲酰胺
采用实施例47中的3-氨基-2-(环丙基氨基)苯甲酸甲酯的一般合成程序，使用2-(5-氟吡啶-3-基氨基)-N-甲基-3-硝基苯甲酰胺制备3-氨基-2-(5-氟吡啶-3-基氨基)-N-甲基苯甲酰胺：LC-MS(ESI)m/z 261.1[M+H]+。
(S)-1-(2-(5-氟吡啶-3-基氨基)-3-(甲基氨基甲酰基)苯基氨基)-1-氧代丙烷-2-基氨基甲酸叔丁酯
Figure BDA00002500618801642
采用实施例47中的(S)-3-(2-(叔丁氧基羰基氨基)-丙酰胺基)-2-(环丙基氨基)苯甲酸甲酯的一般合成程序，使用3-氨基-2-(5-氟吡啶-3-基氨基)-N-甲基苯甲酰胺制备(S)-1-(2-(5-氟吡啶-3-基氨基)-3-(甲基氨基甲酰基)苯基氨基)-1-氧代丙烷-2-基氨基甲酸叔丁酯：1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.60(1H，br)，8.43(1H，br)，8.34(1H，d，J＝8.0Hz)，8.13(1H，br)，8.00(1H，s)，7.42-7.32(2H，m)，6.73(1H，d，J＝8.0Hz)，6.47(1H，br)，4.84(1H，br)，4.24(1H，br)，2.94(3H，d，J＝4.0Hz)，1.41(9H，s)，1.28(3H，d，J＝4.0Hz)；LC-MS(ESI)m/z 432.1[M+H]+。
(S)-2-(1-氨基乙基)-1-(5-氟吡啶-3-基)-N-甲基-1H-苯并[d]咪唑-7-甲酰胺，和(R)-2-(1-氨基乙基)-1-(5-氟吡啶-3-基)-N-甲基-1H-苯并[d]咪唑-7-甲酰胺
Figure BDA00002500618801651
将搅拌着的(S)-1-(2-(5-氟吡啶-3-基氨基)-3-(甲基-氨基甲酰基)苯基氨基)-1-氧代丙烷-2-基氨基甲酸叔丁酯(260mg，0.60mmol)和HOAc(3mL)的悬浮液在密封Q-管中在140℃下加热2小时。将该混合物冷却至室温并在真空中浓缩。向残余混合物中加入37％HCl (10mL)。将该混合物回流3小时，冷却至室温并在真空中浓缩。将残余物溶解在水(5mL)中并用1N NaOH碱化至pH 9.5。在真空中浓缩该混合物并用MeOH-CDM(1∶1)研磨。在真空中浓缩在溶液中的粗产物。残余物通过硅胶快速色谱法进行纯化，使用6％至15％的在含有0.2％NH4OH的DCM-EtOAc(1∶1)中的MeOH作为洗脱剂梯度洗脱，从而获得(S)-2-(1-氨基乙基)-1-(5-氟吡啶-3-基)-N-甲基-1H-苯并[d]咪唑-7-甲酰胺和(R)-2-(1-氨基乙基)-1-(5-氟吡啶-3-基)-N-甲基-1H-苯并[d]咪唑-7-甲酰胺的外消旋混合物：1H NMR(400MHz，MeOH-d4)8.72(1H，d，J＝4.0Hz)，8.59(0.5H，s)，8.49(0.5H，s)，7.97-7.92(0.5H，m)，7.88-7.82(1.5H，m)，7.41(0.5H，d，J＝8.0Hz)，7.39(0.5H，d，J＝8.0Hz)，7.34(1H，d，J＝8.0Hz)，4.05-3.98(1H，m)，2.50(3H，s)，1.48(3H，dd，J＝4.0，4.0Hz)；LC-MS(ESI)m/z 314.2[M+H]+。
2-((1R)-1-((6-氨基-5-氰基-4-嘧啶基)氨基)乙基)-1-(5-氟-3-吡啶基)-N-甲基-1H-苯并咪唑-7-甲酰胺，和2-((1S)-1-((6-氨基-5-氰基-4-嘧啶基)氨基)乙基)-1-(5-氟-3-吡啶基)-N-甲基-1H-苯并咪唑-7-甲酰胺
Figure BDA00002500618801661
采用实施例47中的(S)-2-(1-(6-氨基-5-氰基-嘧啶-4-基氨基)乙基)-1-环丙基-1H-苯并[d]咪唑-7-甲酸甲酯的一般合成程序，使用(S)-2-(1-氨基乙基)-1-(5-氟吡啶-3-基)-N-甲基-1H-苯并[d]咪唑-7-甲酰胺和(R)-2-(1-氨基乙基)-1-(5-氟吡啶-3-基)-N-甲基-1H-苯并[d]咪唑-7-甲酰胺的外消旋混合物制备2-((1R)-1-((6-氨基-5-氰基-4-嘧啶基)氨基)乙基)-1-(5-氟-3-吡啶基)-N-甲基-1H-苯并咪唑-7-甲酰胺和2-((1S)-1-((6-氨基-5-氰基-4-嘧啶基)氨基)乙基)-1-(5-氟-3-吡啶基)-N-甲基-1H-苯并咪唑-7-甲酰胺的外消旋混合物：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.60(0.5H，br)，8.54(1H，br)，8.33(0.5H，br)，8.20-8.14(1H，m)，8.04(0.5H，d，J＝8.0Hz)，7.84-7.73(3H，m)，7.64(0.5H，d，J＝8.0Hz)，7.30(1H，t，J＝8.0Hz)，7.25-7.15(3H，m)，5.55-5.40(1H，m)，2.24(3H，d，J＝4.0Hz)，1.58(3H，d，J＝4.0Hz)；LC-MS(ESI)m/z 432.1[M+H]+。
使用SFC通过手性分离来分离该外消旋混合物从而获得两种级分：在AD-H柱上的第一洗脱对映体：2-((1R)-1-((6-氨基-5-氰基-4-嘧啶基)氨基)乙基)-1-(5-氟-3-吡啶基)-N-甲基-1H-苯并咪唑-7-甲酰胺：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.60(0.5H，br)，8.54(1H，br)，8.33(0.5H，br)，8.20-8.14(1H，m)，8.04(0.5H，d，J＝8.0Hz)，7.84-7.73(3H，m)，7.64(0.5H，d，J＝8.0Hz)，7.30(1H，t，J＝8.0Hz)，7.25-7.15(3H，m)，5.55-5.40(1H，m)，2.24(3H，d，J＝4.0Hz)，1.58(3H，d，J＝4.0Hz)；LC-MS(ESI)m/z 432.1[M+H]+。在AD-H柱上的第二洗脱对映体：2-((1S)-1-((6-氨基-5-氰基-4-嘧啶基)氨基)乙基)-1-(5-氟-3-吡啶基)-N-甲基-1H-苯并咪唑-7-甲酰胺：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.60(0.5H，br)，8.54(1H，br)，8.33(0.5H，br)，8.20-8.14(1H，m)，8.04(0.5H，d，J＝8.0Hz)，7.84-7.73(3H，m)，7.64(0.5H，d，J＝8.0Hz)，7.30(1H，t，J＝8.0Hz)，7.25-7.15(3H，m)，5.55-5.40(1H，m)，2.24(3H，d，J＝4.0Hz)，1.58(3H，d，J＝4.0Hz)；LC-MS(ESI)m/z 432.1[M+H]+。
实施例66：4-氨基-6-(((1S)-1-(1-(环丙基甲基)-7-(甲基磺酰基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈的制备
(S)-1-(2-(环丙基甲基氨基)-3-(甲基磺酰基)苯基氨基)-1-氧代丙烷-2-基氨基甲酸叔丁酯
Figure BDA00002500618801671
向
(S)-1-(2-氨基-3-(甲基磺酰基)苯基氨基)-1-氧代丙烷-2-基氨基甲酸叔丁酯(在实施例51中制备的)(440mg，1.23mmol)、冰AcOH(0.43mL，7.4mmol)和环丙烷甲醛(0.18mL，2.5mmol)在1，2-二氯乙烷(5mL)中的混合物中加入三乙酰氧基硼氢化钠(780mg，3.7mmol)，并在N2下在室温下搅拌18小时。用EtOAc稀释反应混合物，用水、碳酸氢钠饱和水溶液、盐水洗涤，用硫酸镁干燥，并在真空中浓缩。残余物通过快速色谱法在硅胶柱上进行纯化，使用10％至20％的在DCM中的EtOAC∶DCM(1∶1)作为洗脱剂梯度洗脱，从而获得(S)-1-(2-(环丙基甲基氨基)-3-(甲基磺酰基)苯基氨基)-1-氧代丙烷-2-基氨基甲酸叔丁酯：LC-MS(ESI)m/z 412.1[M+H]+。
(S)-1-(1-(环丙基甲基)-7-(甲基磺酰基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙胺
Figure BDA00002500618801672
采用实施例47中的(S)-2-(1-氨基乙基)-1-环丙基-1H-苯并[d]咪唑-7-甲酸甲酯的一般合成程序，使用(S)-1-(2-(环丙基甲基氨基)-3-(甲基磺酰基)苯基氨基)-1-氧代丙烷-2-基氨基甲酸叔丁酯制备(S)-1-(1-(环丙基甲基)-7-(甲基磺酰基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙胺：LC-MS(ESI)m/z 294.1[M+H]+。
4-氨基-6-(((1S)-1-(1-(环丙基甲基)-7-(甲基磺酰基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈
Figure BDA00002500618801681
采用实施例47中的(S)-2-(1-(6-氨基-5-氰基-嘧啶-4-基氨基)乙基)-1-环丙基-1H-苯并[d]咪唑-7-甲酸甲酯的一般合成程序，使用(S)-1-(1-(环丙基甲基)-7-(甲基磺酰基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙胺制备4-氨基-6-(((1S)-1-(1-(环丙基甲基)-7-(甲基磺酰基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.06(1H，s)，8.03(1H，d，J＝8.0Hz)，7.89(1H，d，J＝8.0Hz)，7.76(1H，t，J＝8.0Hz)，7.43(1H，t，J＝8.0Hz)，7.34(2H，br)，5.84-5.76(1H，m)，4.82(1H，dd，J＝12.0，4.0Hz)，4.55(1H，dd，J＝12.0，4.0Hz)，3.44(3H，s)，1.66(3H，d，J＝4.0Hz)，1.34-1.26(1H，m)，0.55-0.35(4H，m)；LC-MS(ESI)m/z 412.0[M+H]+。
实施例67：4-氨基-6-(((1S)-1-(3-(2-吡啶基)咪唑并[1，2-a]嘧啶-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈的制备
(1-咪唑并[1，2-a]嘧啶-2-基-乙基)-氨基甲酸苄基酯
Figure BDA00002500618801682
将嘧啶-2-基胺(3gm，31.5mmol)和(3-溴-1-甲基-2-氧代-丙基)-氨基甲酸苄基酯(9.4gm，31.54mmol)在EtOH(20mL)中的混合物加热至回流过夜。在完成后，将反应混合物冷却至室温并在真空中除去EtOH。将残余物溶解在EtOAc中并用碳酸氢钠饱和溶液洗涤。用硫酸钠干燥有机层，过滤并在真空中浓缩。粗产物通过柱色谱法使用硅胶(100-200目)和0-5％的在DCM中的MeOH来进行纯化，从而获得(1-咪唑并[1，2-a]嘧啶-2-基-乙基)-氨基甲酸苄基酯：LC-MS(ESI)m/z 297.1[M+H]+。
[1-(3-碘-咪唑并[1，2-a]嘧啶-2-基)-乙基]-氨基甲酸苄基酯.
Figure BDA00002500618801691
向(1-咪唑并[1，2-a]嘧啶-2-基-乙基)-氨基甲酸苄基酯(5.3g，17.90mmol)在乙腈(30mL)中的溶液中加入n-碘代琥珀酰亚胺(4.0g，17.90mmol)，并在室温下搅拌过夜。在反应完成后，用水稀释该混合物并用EtOAc萃取。用碳酸氢钠饱和溶液洗涤有机层，用硫酸钠干燥，过滤并在真空中浓缩。粗产物通过柱色谱法使用硅胶(100-200目)和0-4％的在DCM中的MeOH来进行纯化，从而获得[1-(3-碘-咪唑并[1，2-a]嘧啶-2-基)-乙基]-氨基甲酸苄基酯：LC-MS(ESI)m/z 422.8[M+H]+。
[1-(3-吡啶-2-基-咪唑并[1，2-a]嘧啶-2-基)-乙基]-氨基甲酸苄基酯
Figure BDA00002500618801692
在室温下向[1-(3-碘-咪唑并[1，2-a]嘧啶-2-基)-乙基]-氨基甲酸苄基酯(5.0g，14.21mmol)和2-三丁基锡烷基-吡啶(15.6g，42.63mmol)在1，4-二噁烷(30mL)中的溶液中加入Pd(PPh3)4(1.6g，1.4mmol)。将反应混合物在110℃下搅拌过夜。在反应完成后，在真空中浓缩该混合物。粗产物通过柱色谱法使用硅胶(100-200目)和0-40％的在己烷中的丙酮来进行纯化，从而获得[1-(3-碘-咪唑并[1，2-a]嘧啶-2-基)-乙基]-氨基甲酸苄基酯：LC-MS(ESI)m/z 374.1[M+H]+。
1-(3-吡啶-2-基-咪唑并[1，2-a]嘧啶-2-基)-乙胺
将[1-(3-碘-咪唑并[1，2-a]嘧啶-2-基)-乙基]-氨基甲酸苄基酯(900mg，2.4mmol)和二甲基硫醚(0.9mL)在TFA(4.5mL)中的混合物在室温下搅拌过夜。在真空中浓缩该混合物，将其溶解在EtOAc中，用碳酸氢钠饱和溶液洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并在真空中浓缩从而获得1-(3-吡啶-2-基-咪唑并[1，2-a]嘧啶-2-基)-乙胺：LC-MS(ESI)m/z240.0[M+H]+。
4-氨基-6-[1-(3-吡啶-2-基-咪唑并[1，2-a]嘧啶-2-基)-乙基氨基]-嘧啶-5-甲腈
Figure BDA00002500618801702
在室温下向1-(3-吡啶-2-基-咪唑并[1，2-a]嘧啶-2-基)-乙胺(800mg，3.34mmol)和4-氨基-6-氯-嘧啶-5-甲腈(520mg 3.34mmol)在正丁醇(5mL)中的混合物中加入DIEA(1.7mL，10.04mmol)。将反应混合物在100℃下搅拌过夜。在真空中浓缩该混合物。残余物通过柱色谱法使用硅胶(100-200目)和0-30％的在己烷中的丙酮来进行纯化，从而获得4-氨基-6-[1-(3-吡啶-2-基-咪唑并[1，2-a]嘧啶-2-基)-乙基氨基]-嘧啶-5-甲腈：1H NMR ：(DMSO-d6，400MHz)δ1.547(d，J 6.4Hz，3H)，5.807-5.841(br s，1H)，7.150-7.176(m，1H)，7.289(br s，2H)，7.429-7.466(m，2H)，7.847-7.867(m，1H)，7.998(s，2H)，8.653(s，1H)，8.789(s，1H)，9.419(d，J 6.4Hz，1H)；LC-MS(ESI)m/z 358.2[M+H]+。
实施例68
(S)-2-(1-(苄氧基羰基氨基)乙基)-3-(5-氟吡啶-3-基)咪唑并[1，2-a]吡啶-5-甲酸甲酯
Figure BDA00002500618801711
根据一般程序C中的步骤C3b使用(S)-2-(1-(苄氧基羰基氨基)乙基)-3-碘咪唑并[1，2-a]吡啶-5-甲酸甲酯(0.350g，0.730mmol)和5-氟吡啶-3-基硼酸(0.154g，1.10mmol)制备，从而获得(S)-2-(1-(苄氧基羰基氨基)乙基)-3-(5-氟吡啶-3-基)咪唑并[1，2-a]吡啶-5-甲酸甲酯，为棕褐色固体.LC-MS(ESI)m/z 449.1[M+H]+。
(S)-2-(1-氨基乙基)-3-(5-氟吡啶-3-基)咪唑并[1，2-a]吡啶-5-甲酸甲酯
Figure BDA00002500618801712
根据一般程序C中的步骤C4使用(S)-2-(1-(苄氧基羰基氨基)乙基)-3-(5-氟吡啶-3-基)咪唑并[1，2-a]吡啶-5-甲酸甲酯(0.215g，0.479mmol)制备，从而获得(S)-2-(1-氨基乙基)-3-(5-氟吡啶-3-基)咪唑并[1，2-a]吡啶-5-甲酸甲酯。LC-MS(ESI)m/z 315.0[M+H]+。
2-((1S)-1-((6-氨基-5-氰基-4-嘧啶基)氨基)乙基)-3-(5-氟-3-吡啶基)咪唑并[1，2-a]吡啶-5-甲酸甲酯
Figure BDA00002500618801713
将(S)-2-(1-氨基乙基)-3-(5-氟吡啶-3-基)咪唑并[1，2-a]吡啶-5-甲酸甲酯(0.151g，0.480mmol)、4-氨基-6-氯嘧啶-5-甲腈(0.089g，0.576mmol)和DIEA(0.252mL，1.441mmol)在正丁醇(2.40mL)中的溶液在110℃下搅拌2小时。将该混合物上样到硅胶上并通过MPLC纯化(使用0-7％的在DCM中的MeOH梯度洗脱)从而产生2-((1S)-1-((6-氨基-5-氰基-4-嘧啶基)氨基)乙基)-3-(5-氟-3-吡啶基)咪唑并[1，2-a]吡啶-5-甲酸甲酯，为浅黄色固体。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm1.55(d，J＝6.65Hz，3H)3.33(s，3H)5.41(quin，J＝6.65Hz，1H)7.16(d，J＝7.24Hz，1H)7.23(br.s.，2H)7.38-7.50(m，2H)7.75-7.90(m，2H)7.95(dd，J＝8.61，1.57Hz，1H)8.42(br.s.，1H)8.62(d，J＝2.74Hz，1H).LC-MS(ESI)m/z 433.1[M+H]+。
实施例69：4-氨基-6-(((1S)-1-(1-环丙基-7-(甲基磺酰基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，和4-氨基-6-(((1R)-1-(1-环丙基-7-(甲基磺酰基)-1H-苯并咪唑-2-基)-乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈的制备
2-溴-N-环丙基-6-硝基苯胺
Figure BDA00002500618801721
将1-溴-2-氟-3-硝基苯(4.1g，18.6mmol)和环丙胺(1.29mL，18.6mmol)在THF(10mL)中的混合物在N2下在60℃下搅拌18小时。用EtOAc稀释反应混合物，用水洗涤，在CeliteTM垫上过滤，用盐水洗涤并用硫酸镁干燥。在真空中浓缩该溶液。残余物通过快速色谱法在硅胶柱上进行纯化，使用30％至50％的在己烷中的DCM作为洗脱剂梯度洗脱，从而获得2-溴-N-环丙基-6-硝基苯胺：LC-MS(ESI)m/z259.0[M+H]+。
N-环丙基-2-(甲基磺酰基)-6-硝基苯胺
Figure BDA00002500618801731
采用实施例51中的3-(甲基磺酰基)-2-硝基苯胺的一般合成程序，使用2-溴-N-环丙基-6-硝基苯胺制备N-环丙基-2-(甲基磺酰基)-6-硝基苯胺：LC-MS(ESI)m/z 257.0[M+H]+。
N1-环丙基-6-(甲基磺酰基)苯-1，2-二胺
Figure BDA00002500618801732
采用实施例47中的3-氨基-2-(环丙基氨基)苯甲酸甲酯的一般合成程序，使用N-环丙基-2-(甲基磺酰基)-6-硝基苯胺制备N1-环丙基-6-(甲基磺酰基)苯-1，2-二胺：LC-MS(ESI)m/z 227.1[M+H]+。
(S)-1-(2-(环丙基氨基)-3-(甲基磺酰基)苯基氨基)-1-氧代丙烷-2-基氨基甲酸叔丁酯
Figure BDA00002500618801733
采用实施例47中的(S)-3-(2-(叔丁氧基羰基-氨基)丙酰胺基)-2-(环丙基氨基)苯甲酸甲酯的一般合成程序，使用N1-环丙基-6-(甲基磺酰基)苯-1，2-二胺制备(S)-1-(2-(环丙基氨基)-3-(甲基磺酰基)苯基氨基)-1-氧代丙烷-2-基氨基甲酸叔丁酯：LC-MS(ESI)m/z 398.0[M+H]+。
(S)-1-(1-环丙基-7-(甲基磺酰基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙胺和(R)-1-(1-环丙基-7-(甲基磺酰基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙胺
Figure BDA00002500618801734
采用实施例65中的(S)-2-(1-氨基乙基)-1-(5-氟吡啶-3-基)-N-甲基-1H-苯并[d]咪唑-7-甲酰胺和(R)-2-(1-氨基乙基)-1-(5-氟吡啶-3-基)-N-甲基-1H-苯并[d]咪唑-7-甲酰胺的合成的一般合成程序，使用(S)-1-(2-(环丙基氨基)-3-(甲基磺酰基)苯基氨基)-1-氧代丙烷-2-基氨基甲酸叔丁酯制备(S)-1-(1-环丙基-7-(甲基磺酰基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙胺和(R)-1-(1-环丙基-7-(甲基磺酰基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙胺的外消旋混合物：LC-MS(ESI)m/z 280.0[M+H]+。
4-氨基-6-(((1S)-1-(1-环丙基-7-(甲基磺酰基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，和4-氨基-6-(((1R)-1-(1-环丙基-7-(甲基磺酰基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈
采用实施例47中的(S)-2-(1-(6-氨基-5-氰基-嘧啶-4-基氨基)乙基)-1-环丙基-1H-苯并[d]咪唑-7-甲酸甲酯的一般合成程序，使用(S)-1-(1-环丙基-7-(甲基磺酰基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙胺和(R)-1-(1-环丙基-7-(甲基磺酰基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙胺的外消旋混合物制备4-氨基-6-(((1S)-1-(1-环丙基-7-(甲基磺酰基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈和4-氨基-6-(((1R)-1-(1-环丙基-7-(甲基磺酰基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈的外消旋混合物：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.05(1H，s)，7.94(1H，d，J＝8.0Hz)，7.90(1H，d，J＝8.0Hz)，7.76(1H，d，J＝8.0Hz)，7.39(1H，t，J＝8.0Hz)，7.32(2H，br)，5.97-5.90(1H，m)，3.70-3.62(1H，m)，3.52(3H，s)，1.62(3H，d，J＝4.0Hz)，1.28-0.97(4H，m)；LC-MS(ESI)m/z 398.0[M+H]+。使用SFC通过手性分离来分离该外消旋混合物从而获得两种级分：
在AD-H柱上的第一洗脱异构体：4-氨基-6-(((1R)-1-(1-环丙基-7-(甲基磺酰基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.05(1H，s)，7.94(1H，d，J＝8.0Hz)，7.90(1H，d，J＝8.0Hz)，7.76(1H，d，J＝8.0Hz)，7.39(1H，t，J＝8.0Hz)，7.32(2H，br)，5.97-5.90(1H，m)，3.70-3.62(1H，m)，3.52(3H，s)，1.62(3H，d，J＝4.0Hz)，1.28-0.97(4H，m)；LC-MS(ESI)m/z 398.0[M+H]+。
在AD-H  柱上的第二洗脱异构体：4-氨基-6-(((1S)-1-(1-环丙基-7-(甲基磺酰基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.05(1H，s)，7.94(1H，d，J＝8.0Hz)，7.90(1H，d，J＝8.0Hz)，7.76(1H，d，J＝8.0Hz)，7.39(1H，t，J＝8.0Hz)，7.32(2H，br)，5.97-5.90(1H，m)，3.70-3.62(1H，m)，3.52(3H，s)，1.62(3H，d，J＝4.0Hz)，1.28-0.97(4H，m)；LC-MS(ESI)m/z 398.0[M+H]+。
实施例70
(S)-2-(1-((3-氨基-2-氰基苯基)氨基)乙基)-3-(5-氟吡啶-3-基)咪唑并[1，2-a]吡啶-5-甲酸
Figure BDA00002500618801751
将2-((1S)-1-((6-氨基-5-氰基-4-嘧啶基)氨基)乙基)-3-(5-氟-3-吡啶基)咪唑并[1，2-a]吡啶-5-甲酸甲酯(0.060g，0.139mmol)和碘化锂(0.056g，0.416mmol)在吡啶(0.73mL)中的溶液在100℃下搅拌6小时。在减压下除去挥发物从而产生(S)-2-(1-((3-氨基-2-氰基苯基)氨基)乙基)-3-(5-氟吡啶-3-基)咪唑并[1，2-a]吡啶-5-甲酸，为深色残余物。LC-MS(ESI)m/z 419.1[M+H]+。
2-((1S)-1-((6-氨基-5-氰基-4-嘧啶基)氨基)乙基)-3-(5-氟-3-吡啶基)-N-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶-5-甲酰胺
向(S)-2-(1-((3-氨基-2-氰基苯基)氨基)乙基)-3-(5-氟-吡啶-3-基)咪唑并[1，2-a]吡啶-5-甲酸(0.058g，0.139mmol)在DMF(0.93mL)中的溶液中加入苯并三唑-1-基-氧三吡咯烷基磷鎓六氟磷酸盐(PyBOP)(181mg，0.348mmol)，接着加入DIEA(0.049mL，0.278mmol)和甲胺(2.0M的在THF中的溶液，0.174mL，0.348mmol)。将该溶液在室温下搅拌1小时，然后上样到硅胶上并通过MPLC纯化(使用0-8％的在DCM中的MeOH梯度洗脱)从而产生浅黄色固体。通过MPLC再纯化(使用在DCM中的0-90％(1∶10∶90NH4OH∶MeOH∶DCM溶液)梯度洗脱)从而产生2-((1S)-1-((6-氨基-5-氰基-4-嘧啶基)氨基)乙基)-3-(5-氟-3-吡啶基)-N-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶-5-甲酰胺，为白色固体。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.55(br.s.，3H)2.28(d，J＝4.70Hz，3H)5.35(quin，J＝6.94Hz，1H)7.00(dd，J＝6.75，0.88Hz，1H)7.08(d，J＝7.43Hz，1H)7.22(br.s.，2H)7.39(dd，J＝9.00，6.85Hz，1H)7.67(br.s.，1H)7.78(dd，J＝9.10，0.88Hz，1H)7.87(s，1H)8.31(br.s.，1H)8.57(d，J＝2.74Hz，1H)8.73(q，J＝4.30Hz，1H).LC-MS(ESI)m/z 432.0[M+H]+。
实施例71：3-(5-氟-2-硝基苯基氨基)苯甲腈
根据一般程序D中的步骤D1使用3-氨基苯甲腈(1.00g，8.46mmol)制备，从而获得3-(5-氟-2-硝基苯基氨基)苯甲腈，为橙色固体。LC-MS(ESI)m/z 256.1[M-H]-。
3-(2-氨基-5-氟苯基氨基)苯甲腈
Figure BDA00002500618801771
根据一般程序D中的步骤D2使用3-(5-氟-2-硝基苯基氨基)苯甲腈(0.538g，2.09mmol)制备，从而获得3-(2-氨基-5-氟苯基氨基)苯甲腈，为黄色固体。LC-MS(ESI)m/z 228.1[M+H]+。
1-(2-(3-氰基苯基氨基)-4-氟苯基氨基)-1-氧代丙烷-2-基氨基甲酸叔丁酯
Figure BDA00002500618801772
根据一般程序D中的步骤D3使用3-(2-氨基-5-氟苯基氨基)苯甲腈(0.451g，1.985mmol)制备，从而获得1-(2-(3-氰基苯基氨基)-4-氟苯基氨基)-1-氧代丙烷-2-基氨基甲酸叔丁酯，为黄色固体。LC-MS(ESI)-m/z 421.1[M+Na]+。
N-(1-(1-(3-氰基苯基)-6-氟-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基)乙酰胺
Figure BDA00002500618801773
根据一般程序D中的步骤D4使用1-(2-(3-氰基苯基氨基)-4-氟苯基氨基)-1-氧代丙烷-2-基氨基甲酸叔丁酯(0.783g，1.97mmol)制备，从而获得N-(1-(1-(3-氰基苯基)-6-氟-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基)乙酰胺，为白色固体。LC-MS(ESI)m/z 323.1[M+H]+。
3-(2-(1-氨基乙基)-6-氟-1H-苯并[d]咪唑-1-基)苯甲腈
Figure BDA00002500618801781
根据一般程序D中的步骤D5a使用N-(1-(1-(3-氰基苯基)-6-氟-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基)乙酰胺(0.247g，0.766mmol)制备，从而获得3-(2-(1-氨基乙基)-6-氟-1H-苯并[d]咪唑-1-基)苯甲腈，为无色油状物。LC-MS(ESI)m/z 281.1[M+H]+。
4-氨基-6-(1-(1-(3-氰基苯基)-6-氟-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基氨基)嘧啶-5-甲腈
Figure BDA00002500618801782
根据一般程序D中的步骤D6使用3-(2-(1-氨基乙基)-6-氟-1H-苯并[d]咪唑-1-基)苯甲腈(0.215g，0.767mmol)制备，从而获得4-氨基-6-(1-(1-(3-氰基苯基)-6-氟-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基氨基)嘧啶-5-甲腈，为灰白色固体。1HNMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.57(d，J＝6.85Hz，3H)5.61(quin，J＝6.85Hz，1H)7.00(dd，J＝8.90，2.45Hz，1H)7.09-7.17(m，1H)7.18(br.s.，2H)7.63-7.79(m，3H)7.81-7.94(m，3H)8.07(br.s.，1H).LC-MS(ESI)m/z 399.0[M+H]+。
4-氨基-6-(((1R)-1-(1-(3-氰基苯基)-6-氟-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，和4-氨基-6-(((1S)-1-(1-(3-氰基苯基)-6-氟-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈
Figure BDA00002500618801791
使用制备SFC在AD-H柱上分离外消旋混合物(0.182mg)从而获得两种级分。在OD-H柱上的第一峰：4-氨基-6-(((1S)-1-(1-(3-氰基苯基)-6-氟-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈(62mg)LC-MS(ESI)m/z 399.0[M+H]+。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.58(d，J＝6.65Hz，3H)5.55-5.68(m，1H)7.01(dd，J＝9.00，2.35Hz，1H)7.09-7.25(m，3H)7.67-7.74(m，2H)7.76(dd，J＝8.80，4.70Hz，1H)7.82-7.88(m，2H)7.90(dt，J＝7.68，1.25Hz，1H)8.08(br.s.，1H)。在OD-H柱上的第二峰：4-氨基-6-(((1R)-1-(1-(3-氰基苯基)-6-氟-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈(60mg)，LC-MS(ESI)m/z 399.0[M+H]+。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.58(d，J＝6.65Hz，3H)5.61(quin，J＝6.90Hz，1H)7.01(dd，J＝9.00，2.35Hz，1H)7.08-7.25(m，3H)7.67-7.74(m，2H)7.76(dd，J＝8.90，4.79Hz，1H)7.83-7.88(m，2H)7.90(dt，J＝7.63，1.27Hz，1H)8.08(br.s.，1H)。
实施例72：4-氨基-6-(((1S)-1-(3-(2-吡啶基)咪唑并[1，2-a]吡嗪-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈的制备
(1-咪唑并[1，2-a]吡嗪-2-基-乙基)-氨基甲酸苄基酯
Figure BDA00002500618801792
将吡嗪-2-基胺(3g，31.5mmol)和(3-溴-1-甲基-2-氧代-丙基)-氨基甲酸苄基酯(12g，41.05mmol)在EtOH(20mL)中的混合物加热至回流过夜。在完成后，将反应混合物冷却至室温。在真空中除去EtOH。将残余物溶解在EtOAc中并用碳酸氢钠饱和溶液洗涤。用硫酸钠干燥有机层，过滤并在真空中浓缩。粗产物通过柱色谱法使用硅胶(100-200目)和0-5％的在DCM中的MeOH来进行纯化，从而获得(1-咪唑并[1，2-a]吡嗪-2-基-乙基)-氨基甲酸苄基酯：LC-MS(ESI)m/z 297.2[M+H]+。
[1-(3-碘-咪唑并[1，2-a]吡嗪-2-基)-乙基]-氨基甲酸苄基酯
Figure BDA00002500618801801
在室温下向(1-咪唑并[1，2-a]吡嗪-2-基-乙基)-氨基甲酸苄基酯(1.7g，5.74mmol)在乙腈(10mL)中的溶液中加入n-碘代琥珀酰亚胺(1.3g，5.74mmol)并搅拌过夜。在反应完成后，用水稀释该混合物并用EtOAc萃取。用碳酸氢钠饱和溶液洗涤有机层，用硫酸钠干燥，过滤并在真空中浓缩。粗产物通过柱色谱法使用硅胶(100-200目)和0-4％的在DCM中的MeOH来进行纯化，从而获得[1-(3-碘-咪唑并[1，2-a]吡嗪-2-基)-乙基]-氨基甲酸苄基酯：LC-MS(ESI)m/z 422.9[M+H]+。
[1-(3-吡啶-2-基-咪唑并[1，2-a]吡嗪-2-基)-乙基]-氨基甲酸苄基酯
Figure BDA00002500618801802
在室温下向[1-(3-碘-咪唑并[1，2-a]吡嗪-2-基)-乙基]-氨基甲酸苄基酯(1.6g，3.79mmol)和2-三丁基锡烷基吡啶(4.1g，11.37mmol)在1，4-二噁烷(20mL)中的溶液中加入Pd(PPh3)4(50mg，0.4mmol)。将反应混合物在110℃下搅拌过夜。在反应完成后，在真空中浓缩该混合物。粗产物通过柱色谱法使用硅胶(100-200目)和0-40％的在己烷中的丙酮来进行纯化，从而获得[1-(3-吡啶-2-基-咪唑并[1，2-a]吡嗪-2-基)-乙基]-氨基甲酸苄基酯：LC-MS(ESI)m/z 374.1[M+H]+。
1-(3-吡啶-2-基-咪唑并[1，2-a]吡嗪-2-基)-乙胺
Figure BDA00002500618801811
将[1-(3-吡啶-2-基-咪唑并[1，2-a]吡嗪-2-基)-乙基]-氨基甲酸苄基酯(450mg，1.2mmol)和二甲基硫醚(1.0mL)在TFA(4.0mL)中的混合物在室温下搅拌过夜。在真空中浓缩该混合物并将残余物溶解在EtOAc中。用碳酸氢钠饱和溶液洗涤有机层，用硫酸钠干燥，过滤并在真空中浓缩从而获得1-(3-吡啶-2-基-咪唑并[1，2-a]吡嗪-2-基)-乙胺：LC-MS(ESI)m/z 240.0[M+H]+。
4-氨基-6-[1-(3-吡啶-2-基-咪唑并[1，2-a]吡嗪-2-基)-乙基氨基]-嘧啶-5-甲腈
Figure BDA00002500618801812
在室温下向1-(3-吡啶-2-基-咪唑并[1，2-a]吡嗪-2-基)-乙胺(250mg，1.04mmol)和4-氨基-6-氯-嘧啶-5-甲腈(160mg 1.04mmol)在正丁醇(3mL)中的混合物中加入DIEA(1.7mL，10.04mmol)。将反应混合物在110℃下搅拌过夜。在真空中浓缩该混合物。残余物通过柱色谱法使用硅胶(100-200目)和0-40％的在己烷中的丙酮来进行纯化，获得4-氨基-6-[1-(3-吡啶-2-基-咪唑并[1，2-a]吡嗪-2-基)-乙基氨基]-嘧啶-5-甲腈：1H NMR ：(400MHz，DMSO-d6)δ1.537(d，J＝6.8Hz，3H)，5.837-5.906(m，1H)，7.269(br s，2H)，7.471-7.502(m，1H)，7.572-7.594(m，1H)，7.887-7.907(m，1H)，7.983-8.043(m，3H)，8.814-8.826(m，1H)，8.928-8.944(m，1H)，9.180(d，J＝1.2Hz，1H)；LC-MS(ESI)m/z 358.2[M+H]+。
实施例73：2-((1S)-1-((6-氨基-5-氰基-4-嘧啶基)氨基)乙基)-3-苯基咪唑并[1，2-a]吡啶-5-甲酸甲酯的制备
(S)-2-(1-(((苄氧基)羰基)氨基)乙基)咪唑并[1，2-a]吡啶-5-甲酸甲酯
将6-氨基-吡啶-2-甲酸甲酯(1g，6.57mmol)和(S)-(4-溴-3-氧代丁烷-2-基)氨基甲酸苄基酯(2.3g，7.88mmol)在EtOH(25mL)中的混合物加热至回流过夜。在完成后，将反应混合物冷却至25℃。在真空中除去EtOH。将残余物溶解在EtOAc中并用饱和碳酸氢钠洗涤。用硫酸钠干燥有机层，过滤并在真空中浓缩。粗产物通过柱色谱法使用硅胶(100-200目)和0-55％的在己烷中的丙酮来进行纯化，从而获得(S)-2-(1-(((苄氧基)羰基)氨基)乙基)咪唑并[1，2-a]吡啶-5-甲酸甲酯：1H NMR ：(400MHz，DMSO-d6)δ1.4745(d，J＝6.8Hz，3H)，3.962(s，3H)，4.878-4.951(m，1H)，5.053(s，2H)，6.282(br s，1H)，7.312-7.380(m，5H)，7.782-7.803(m，1H)，7，851-7.899(2H，m)，8.264(m，1H)；LC-MS(ESI)m/z 354.1[M+H]+。
(S)-2-(1-(((苄氧基)羰基)氨基)乙基)-3-碘咪唑并[1，2-a]吡啶-5-甲酸甲酯
Figure BDA00002500618801822
在25℃下向(S)-2-(1-(((苄氧基)羰基)氨基)乙基)咪唑并[1，2-a]吡啶-5-甲酸甲酯(5.5g，7.93mmol)在乙腈(50mL)中的溶液中加入N-碘代琥珀酰亚胺(2.3g，10.3mmol)。将反应混合物在25℃下搅拌过夜。在反应完成后，用水稀释该混合物并用EtOAc萃取。用碳酸氢钠饱和溶液洗涤有机层，用硫酸钠干燥，过滤并在真空中浓缩。粗产物通过柱色谱法使用硅胶(100-200目)和0-50％的在己烷中的EtOAc来进行纯化，从而获得(S)-2-(1-(((苄氧基)羰基)氨基)乙基)-3-碘咪唑并[1，2-a]吡啶-5-甲酸甲酯：1H NMR(CDCl3，400MHz)δ1.547(d，J＝6.8Hz，3H)，4.048(s，3H)，5.067-5.200(m，3H)，5.805(d，J＝7.2Hz，1H)，7.229-7.260(m，2H)，7.292-7.350(m，5H)，7，675-7.708(m，1H)；LC-MS(ESI)m/z 479.9[M+H]+。
(S)-2-(1-(((苄氧基)羰基)氨基)乙基)-3-苯基咪唑并[1，2-a]吡啶-5-甲酸甲酯
在25℃下向(S)-2-(1-(((苄氧基)羰基)氨基)乙基)-3-碘咪唑并[1，2-a]吡啶-5-甲酸甲酯(900mg，1.87mmol)和苯基硼酸(275mg，2.25mmol)在乙腈-水(12mL)中的溶液中加入碳酸钠(400mg，3.35mmol)。用氮气给该反应混合物脱气30分钟。在25℃下向该混合物中加入Pd(PPh3)4(217mg，0.18mmol)。将反应混合物在95℃下搅拌过夜。在反应完成后，将水加入到该反应混合物中并用EtOAc萃取。有机层用硫酸钠干燥并在真空中浓缩。残余物通过柱色谱法使用硅胶(100-200目)和0-70％的在己烷中的EtOAc来进行纯化，从而获得(S)-2-(1-(((苄氧基)羰基)氨基)乙基)-3-苯基咪唑并[1，2-a]吡啶-5-甲酸甲酯：LC-MS(ESI)m/z 430.0[M+H]+。
(S)-2-(1-氨基乙基)-3-苯基咪唑并[1，2-a]吡啶-5-甲酸甲酯
Figure BDA00002500618801832
将(S)-2-(1-(((苄氧基)羰基)氨基)乙基)-3-苯基咪唑并[1，2-a]吡啶-5-甲酸甲酯(600mg，1.3mmol)和二甲基硫醚(0.4mL)在TFA(1.2mL)中的混合物在25℃下搅拌过夜。在真空中浓缩该混合物并将残余物溶解在EtOAc中。用饱和碳酸氢钠洗涤有机层，用硫酸钠干燥，过滤并在真空中浓缩从而获得(S)-2-(1-氨基乙基)-3-苯基咪唑并[1，2-a]吡啶-5-甲酸甲酯(400mg)：LC-MS(ESI)m/z 296.2[M+H]+。粗产物可直接使用而无需进一步纯化。
(S)-2-[1-((6-氨基-5-氰基-嘧啶-4-基)氨基)乙基]-3-苯基咪唑并[1，2-a]吡啶-5-甲酸甲酯
Figure BDA00002500618801841
在25℃下向在正丁醇(5mL)中的粗(S)-2-(1-氨基乙基)-3-苯基咪唑并[1，2-a]吡啶-5-甲酸甲酯(500mg，1.69mmol)和4-氨基-6-氯-嘧啶-5-甲腈(268mg，1.69mmol)中加入DIEA(0.5mL，2.54mmol)。将反应混合物在110℃下搅拌5-6小时。用EtOAc萃取该混合物。用硫酸钠干燥有机层，过滤并在真空中浓缩。残余物通过柱色谱法使用硅胶(100-200目)和0-40％的在己烷中的丙酮来进行纯化，从而获得(S)-2-[1-((6-氨基-5-氰基-嘧啶-4-基)氨基)乙基]-3-苯基咪唑并[1，2-a]吡啶-5-甲酸甲酯：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ1.471(d，J＝6.8Hz，3H)，3.111(s，3H)，5.352-5.420(m，1H)，6.935-6.954(m，1H)，7.259-7.518(m，9H)，7.882-7.941(m，2H)；LC-MS(ESI)m/z 414.1[M+H]+。
实施例74：4-氨基-6-(((1S)-1-(3-(2-吡啶基)咪唑并[1，2-b]哒嗪-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈的制备
(1-咪唑并[1，2-b]哒嗪-2-基-乙基)-氨基甲酸苄基酯的制备
Figure BDA00002500618801842
将哒嗪-3-基胺(2g，21.05mmol)和(3-溴-1-甲基-2-氧代-丙基)-氨基甲酸苄基酯(7.5g，25.26mmol)在EtOH(25mL)中的混合物加热至回流过夜。在完成后，将反应混合物冷却至室温。在真空中除去EtOH。将残余物溶解在EtOAc中。用硫酸钠干燥有机层，过滤并在真空中浓缩。粗产物通过柱色谱法使用硅胶(100-200目)和0-5％的在DCM中的MeOH来进行纯化，从而获得(1-咪唑并[1，2-b]哒嗪-2-基-乙基)-氨基甲酸苄基酯：LC-MS(ESI)m/z 297.3[M+H]+。
[1-(3-碘-咪唑并[1，2-b]哒嗪-2-基)-乙基]-氨基甲酸苄基酯
Figure BDA00002500618801851
在室温下向(1-咪唑并[1，2-b]哒嗪-2-基-乙基)-氨基甲酸苄基酯(2.5g，8.44mmol)在乙腈(30mL)中的溶液中加入N-碘代琥珀酰亚胺(2.3g，10.13mmol)并搅拌过夜。在反应完成后，用水稀释该混合物并用EtOAc萃取。用饱和碳酸氢钠洗涤有机层，用硫酸钠干燥，过滤并在真空中浓缩。粗产物通过柱色谱法使用硅胶(100-200目)和0-5％的在DCM中的MeOH来进行纯化，从而获得[1-(3-碘-咪唑并[1，2-b]哒嗪-2-基)-乙基]-氨基甲酸苄基酯：LC-MS(ESI)m/z 422.9[M+H]+。
[1-(3-吡啶-2-基-咪唑并[1，2-b]哒嗪-2-基)-乙基]-氨基甲酸苄基酯
Figure BDA00002500618801852
在室温下向[1-(3-碘-咪唑并[1，2-b]哒嗪-2-基)-乙基]-氨基甲酸苄基酯(3.0g，7.1mmol)和2-三丁基锡烷基-吡啶(7.8g，21.32mmol)在1，4-二噁烷(20mL)中的溶液中加入Pd(PPh3)4(820mg，0.71mmol)。将反应混合物在110℃下搅拌过夜。在反应完成后，在真空中浓缩该混合物。粗产物通过柱色谱法使用硅胶(100-200目)和0-40％的在己烷中的丙酮来进行纯化，从而获得[1-(3-吡啶-2-基-咪唑并[1，2-b]哒嗪-2-基)-乙基]-氨基甲酸苄基酯：LC-MS(ESI)m/z 374.1[M+H]+。
1-(3-吡啶-2-基-咪唑并[1，2-b]哒嗪-2-基)-乙胺
Figure BDA00002500618801861
将[1-(3-吡啶-2-基-咪唑并[1，2-b]哒嗪-2-基)-乙基]-氨基甲酸苄基酯(600mg，1.6mmol)和二甲基硫醚(1.2mL)在TFA(7.5mL))中的混合物在室温下搅拌过夜。在真空中浓缩该混合物。将残余物溶解在EtOAc中。用碳酸氢钠饱和溶液洗涤有机层，用硫酸钠干燥，过滤并在真空中浓缩从而获得1-(3-吡啶-2-基-咪唑并[1，2-b]哒嗪-2-基)-乙胺(450mg)：LC-MS(ESI)m/z 240.0[M+H]+。
4-氨基-6-[1-(3-吡啶-2-基-咪唑并[1，2-b]哒嗪-2-基)乙基氨基]-嘧啶-5-甲腈
Figure BDA00002500618801862
在室温下向1-(3-吡啶-2-基-咪唑并[1，2-b]哒嗪-2-基)-乙胺(450mg，2.09mmol)和4-氨基-6-氯-嘧啶-5-甲腈(325mg，2.09mmol)在正丁醇(8mL)中的混合物中加入DIEA(0.6mL，3.01mmol)。将反应混合物在110℃下搅拌过夜。在真空中浓缩该混合物。残余物通过柱色谱法使用硅胶(100-200目)和0-60％的在己烷中的丙酮来进行纯化，从而获得4-氨基-6-[1-(3-吡啶-2-基-咪唑并[1，2-b]哒嗪-2-基)-乙基氨基]-嘧啶-5-甲腈：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ1.272(d，J＝6.4Hz，3H)，6.047-6.118(m，1H)，7.375(br s，2H)，7.446-7.477(m，2H)，8.022-8.060(m，2H)，8.230-8.280(m，1H)，8.400-8.490(m，2H)，8.727(s，1H)，8.878(s，1H).LC-MS(ESI)m/z 358.2[M+H]+。
实施例75：3-(5-氟-2-硝基苯基氨基)-N-甲基苯甲酰胺
Figure BDA00002500618801871
根据一般程序D中的步骤D1使用3-氨基苯甲酰基甲酰胺(2.360g，15.71mmol)制备，从而获得3-(5-氟-2-硝基苯基氨基)-N-甲基苯甲酰胺，为橙色固体。LC-MS(ESI)m/z 290.0[M+H]+。
3-(2-氨基-5-氟苯基氨基)-N-甲基苯甲酰胺
Figure BDA00002500618801872
根据一般程序D中的步骤D2使用3-(5-氟-2-硝基苯基氨基)-N-甲基苯甲酰胺(0.600g，2.07mmol)制备，从而获得3-(2-氨基-5-氟苯基氨基)-N-甲基苯甲酰胺，为橙色固体。LC-MS(ESI)m/z 260.1[M+H]+。
(S)-1-(4-氟-2-(3-(甲基氨基甲酰基)苯基氨基)苯基氨基)-1-氧代丙烷-2-基氨基甲酸叔丁酯
Figure BDA00002500618801873
根据一般程序D中的步骤D3使用3-(2-氨基-5-氟苯基氨基)-N-甲基苯甲酰胺(0.538g，2.08mmol)制备，从而获得(S)-1-(4-氟-2-(3-(甲基氨基甲酰基)苯基氨基)苯基氨基)-1-氧代丙烷-2-基氨基甲酸叔丁酯，为黄色泡沫状物，假定为定量产率。LC-MS(ESI)m/z 453.0[M+Na]+。
3-(2-(1-乙酰胺基乙基)-6-氟-1H-苯并[d]咪唑-1-基)-N-甲基苯甲酰胺
Figure BDA00002500618801881
根据一般程序D中的步骤D4使用(S)-1-(4-氟-2-(3-(甲基氨基甲酰基)苯基氨基)苯基氨基)-1-氧代丙烷-2-基氨基甲酸叔丁酯(0.893g，2.074mmol)制备，从而产生3-(2-(1-乙酰胺基乙基)-6-氟-1H-苯并[d]咪唑-1-基)-N-甲基苯甲酰胺。LC-MS(ESI)m/z 355.1[M+H]+。
3-(2-(1-氨基乙基)-6-氟-1H-苯并[d]咪唑-1-基)-N-甲基苯甲酰胺
Figure BDA00002500618801882
根据一般程序D中的步骤D5a使用3-(2-(1-乙酰胺基乙基)-6-氟-1H-苯并[d]咪唑-1-基)-N-甲基苯甲酰胺(0.630g，1.78mmol)制备，从而获得3-(2-(1-氨基乙基)-6-氟-1H-苯并[d]咪唑-1-基)-N-甲基苯甲酰胺，为橙色固体。MS(ESI)m/z 313.1[M+H]+。
3-(2-(1-(6-氨基-5-氰基嘧啶-4-基氨基)乙基)-6-氟-1H-苯并[d]咪唑-1-基)-N-甲基苯甲酰胺
Figure BDA00002500618801883
根据一般程序D中的步骤D6使用3-(2-(1-氨基乙基)-6-氟-1H-苯并[d]咪唑-1-基)-N-甲基苯甲酰胺(430mg，1.38mmol)制备，从而获得3-(2-(1-(6-氨基-5-氰基嘧啶-4-基氨基)乙基)-6-氟-1H-苯并[d]咪唑-1-基)-N-甲基苯甲酰胺，为白色固体。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.52(d，J＝6.85Hz，3H)2.81(d，J＝4.30Hz，3H)5.32-5.59(m，1H)6.92(d，J＝8.80Hz，1H)7.08-7.17(m，1H)7.19(br.s.，2H)7.56-7.78(m，4H)7.83(s，1H)7.91-8.10(m，2H)8.49(d，J＝4.50Hz，1H).LC-MS(ESI)m/z 431.0[M+H]+
3-(2-((1R)-1-((6-氨基-5-氰基-4-嘧啶基)氨基)乙基)-6-氟-1H-苯并咪唑-1-基)-N-甲基苯甲酰胺，和3-(2-((1S)-1-((6-氨基-5-氰基-4-嘧啶基)氨基)乙基)-6-氟-1H-苯并咪唑-1-基)-N-甲基苯甲酰胺
Figure BDA00002500618801891
使用制备SFC在AD-H柱上分离外消旋混合物(0.383mg)从而获得两种级分。在OD-H柱上的第一峰：3-(2-((1S)-1-((6-氨基-5-氰基-4-嘧啶基)氨基)乙基)-6-氟-1H-苯并咪唑-1-基)-N-甲基苯甲酰胺。1HNMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.52(d，J＝6.85Hz，3H)2.81(d，J＝4.50Hz，3H)5.39-5.52(m，1H)6.92(dd，J＝8.90，2.45Hz，1H)7.14(ddd，J＝9.78，8.80，2.54Hz，1H)7.19(br.s.，2H)7.59-7.72(m，3H)7.75(dd，J＝8.80，4.89Hz，1H)7.83(s，1H)7.92-8.06(m，2H)8.49(q，J＝4.37Hz，1H)LC-MS(ESI)m/z 431.1在OD-H柱上的第二峰：3-(2-((1R)-1-((6-氨基-5-氰基-4-嘧啶基)氨基)乙基)-6-氟-1H-苯并咪唑-1-基)-N-甲基苯甲酰胺。1HNMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.52(d，J＝6.85Hz，3H)2.81(d，J＝4.50Hz，3H)5.37-5.55(m，1H)6.92(dd，J＝8.90，2.45Hz，1H)7.14(ddd，J＝9.78，8.80，2.54Hz，1H)7.19(br.s.，2H)7.60-7.72(m，3H)7.75(dd，J＝8.80，4.69Hz，1H)7.83(s，1H)7.92-8.05(m，2H)8.49(q，J＝4.30Hz，1H).LC-MS(ESI)m/z 431.1[M+H]+。
实施例76
(S)-2-(1-((6-氨基-5-氰基嘧啶-4-基)氨基)乙基)-3-苯基咪唑并[1，2-a]吡啶-5-甲酸
Figure BDA00002500618801901
将(S)-2-(1-(6-氨基-5-氰基嘧啶-4-基氨基)乙基)-1-苯基-1H-苯并[d]咪唑-7-甲酸甲酯(0.244g，0.590mmol)和碘化锂(0.237g，1.771mmol)在吡啶(3.11mL)中的溶液在100℃下搅拌过夜。在减压下浓缩该溶液从而产生(S)-2-(1-((6-氨基-5-氰基嘧啶-4-基)氨基)乙基)-3-苯基咪唑并[1，2-a]吡啶-5-甲酸，为灰白色固体。LC-MS(ESI)m/z 400.1[M+H]+。
2-((1S)-1-((6-氨基-5-氰基-4-嘧啶基)氨基)乙基)-N-甲基-3-苯基咪唑并[1，2-a]吡啶-5-甲酰胺
Figure BDA00002500618801902
向DIEA(0.207mL，1.18mmol)、PyBOP(0.768g，1.475mmol)，和(S)-2-(1-((6-氨基-5-氰基嘧啶-4-基)氨基)乙基)-3-苯基咪唑并[1，2-a]-吡啶-5-甲酸(0.236g，0.590mmol)在DMF(3.93mL)中的溶液中加入甲胺(在THF中的2.0M，0.738mL，1.48mmol)。将该溶液在室温下搅拌1小时，然后上样到硅胶上并通过MPLC纯化(使用0-10％的在DCM中的MeOH梯度洗脱)从而产生固体，该固体通过反相分析HPLC再纯化(使用10-60％的在含有0.1％TFA的水中的MeCN梯度洗脱)从而产生(S)-2-(1-((6-氨基-5-氰基嘧啶-4-基)氨基)乙基)-N-甲基-3-苯基咪唑并[1，2-a]吡啶-5-甲酰胺，为浅黄色固体。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.44(d，J＝6.65Hz，3H)2.16(d，J＝4.70Hz，3H)5.29(quin，J＝6.90Hz，1H)6.83(d，J＝7.63Hz，1H)6.93(dd，J＝6.85，1.17Hz，1H)7.18-7.46(m，8H)7.74(dd，J＝9.00，1.17Hz，1H)7.94(s，1H)8.51(q，J＝4.56Hz，1H).LC-MS(ESI)m/z 413.1[M+H]+。
实施例77：5-氟-N-(3-氟-2-硝基苯基)吡啶-3-胺
Figure BDA00002500618801911
根据一般程序D中的步骤D1使用3-氨基-5-氟吡啶(2.114g，18.86mmol)制备，从而获得5-氟-N-(3-氟-2-硝基苯基)吡啶-3-胺，为橙色固体。LC-MS(ESI)m/z 252.1[M+H]+。
3-氟-N1-(5-氟吡啶-3-基)苯-1，2-二胺
Figure BDA00002500618801912
根据一般程序D中的步骤D2使用5-氟-N-(3-氟-2-硝基苯基)吡啶-3-胺(3.40g，13.54mmol)制备，从而获得3-氟-N1-(5-氟吡啶-3-基)苯-1，2-二胺(2.92g，13.20mmol，98％产率)，为黄色固体。LC-MS(ESI)-m/z 222.1[M+H]+。
(S)-1-(2-氟-6-(5-氟吡啶-3-基氨基)苯基氨基)-1-氧代丙烷-2-基氨基甲酸叔丁酯
Figure BDA00002500618801913
根据一般程序D中的步骤D3使用3-氟-N1-(5-氟吡啶-3-基)苯-1，2-二胺(2.92g，13.20mmol)制备，从而获得(S)-1-(2-氟-6-(5-氟吡啶-3-基氨基)苯基氨基)-1-氧代丙烷-2-基氨基甲酸叔丁酯，为米色固体。LC-MS(ESI)m/z 393.0[M+H]+。
N-(1-(4-氟-1-(5-氟吡啶-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基)乙酰胺
Figure BDA00002500618801921
根据一般程序D中的步骤D4使用(S)-1-(2-氟-6-(5-氟吡啶-3-基氨基)苯基氨基)-1-氧代丙烷-2-基氨基甲酸叔丁酯(3.07g，7.82mmol)制备，从而获得N-(1-(4-氟-1-(5-氟吡啶-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基)乙酰胺，为棕色固体。LC-MS(ESI)m/z 317.1[M+H]+。
1-(4-氟-1-(5-氟吡啶-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙胺
Figure BDA00002500618801922
根据一般程序D中的步骤D5a使用N-(1-(4-氟-1-(5-氟吡啶-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基)乙酰胺(2.30g，7.27mmol)制备，从而获得1-(4-氟-1-(5-氟吡啶-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙胺，为黑色油状物。LC-MS(ESI)m/z 275.1[M+H]+。
4-氨基-6-(1-(4-氟-1-(5-氟吡啶-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基氨基)嘧啶-5-甲腈
Figure BDA00002500618801923
根据一般程序D中的步骤D6使用1-(4-氟-1-(5-氟吡啶-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙胺(0.380g，1.39mmol)制备，从而获得4-氨基-6-(1-(4-氟-1-(5-氟吡啶-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基氨基)嘧啶-5-甲腈，为灰白色固体。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.62(d，J＝6.85Hz，3H)5.60(quin，J＝6.99Hz，1H)7.02(dd，J＝8.12，0.68Hz，1H)7.08-7.17(m，1H)7.17-7.34(m，3H)7.75-7.91(m，2H)8.12(d，J＝8.61Hz，1H)8.65(s，1H)8.70(d，J＝2.54Hz，1H).LC-MS(ESI)m/z393.0[M+H]+。
4-氨基-6-(((1R)-1-(4-氟-1-(5-氟-3-吡啶基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，和4-氨基-6-(((1S)-1-(4-氟-1-(5-氟-3-吡啶基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈
Figure BDA00002500618801931
使用制备SFC在AD-H柱上分离外消旋混合物(0.220mg)从而获得两种级分。在OD-H柱上的第一峰：4-氨基-6-(((1R)-1-(4-氟-1-(5-氟-3-吡啶基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈。LC-MS(ESI)m/z 393.0[M+H]+。1HNMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.61(d，J＝6.85Hz，3H)5.59(quin，J＝6.94Hz，1H)7.02(d，J＝8.02Hz，1H)7.13(dd，J＝10.76，7.82Hz，1H)7.17-7.29(m，3H)7.75-7.87(m，2H)8.12(d，J＝8.22Hz，1H)8.64(s，1H)8.70(d，J＝2.74Hz，1H)。在OD-H柱上的第二峰：4-氨基-6-(((1S)-1-(4-氟-1-(5-氟-3-吡啶基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈(73mg，66.4％)。LC-MS(ESI)m/z393.0[M+H+。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.61(d，J＝6.85Hz，3H)5.59(quin，J＝6.90Hz，1H)7.02(d，J＝8.02Hz，1H)7.13(dd，J＝10.96，8.02Hz，1H)7.17-7.33(m，3H)7.72-7.90(m，2H)8.12(d，J＝7.43Hz，1H)8.64(s，1H)8.70(d，J＝2.54Hz，1H)
实施例78：4-氨基-6-(((1S)-1-(6-氟-1-(5-氟-3-吡啶基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲酰胺
Figure BDA00002500618801941
向(S)-4-氨基-6-(1-(6-氟-1-(5-氟吡啶-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基氨基)嘧啶-5-甲腈(0.040g，0.10mmol)在DMSO(1.02mL)中的溶液中加入碳酸钾(0.017g，0.122mmol)，接着加入过氧化氢(在水中的31％，0.635mL，6.42mmol)。在搅拌2小时后，将该溶液倒入水中并用EtOAc萃取。浓缩有机萃取物并通过MPLC纯化(用在DCM中的0-100％(1∶10∶90NH4OH∶MeOH∶DCM)洗脱)从而产生4-氨基-6-(((1S)-1-(6-氟-1-(5-氟-3-吡啶基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲酰胺，为白色固体。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.51(d，J＝6.85Hz，3H)5.34(quin，J＝6.94Hz，1H)6.57(s，2H)7.04-7.22(m，2H)7.43(br.s.，2H)7.67-7.80(m，2H)7.92(d，J＝7.63Hz，1H)8.21(dt，J＝9.29，2.10Hz，1H)8.71(s，1H)8.81(d，J＝2.74Hz，1H).LC-MS(ESI)m/z 411.0[M+H]+。
实施例79：2-((1S)-1-((5-氨基-1，3，4-噻二唑-2-基)氨基)乙基)-1-环丙基-N-甲基-1H-苯并咪唑-7-甲酰胺的制备
Figure BDA00002500618801942
将(S)-2-(1-氨基乙基)-1-环丙基-N-甲基-1H-苯并[d]咪唑-7-甲酰胺(在实施例20中制备的)(63.5mg，0.25mmol)、碳酸铯(80mg，0.25mmol)和2-氨基-5-溴-[1，3，4]噻二唑(44.3mg，0.25mmol)在EtOH(5mL)中的混合物在N2下在室温下搅拌18小时。在真空中浓缩该反应混合物。用EtOAc稀释残余物，用水、盐水洗涤，用硫酸镁干燥，并在真空中浓缩。残余物通过硅胶快速色谱法纯化，使用0％至10％的在含有0.2％NH4OH的DCM中的MeOH作为洗脱剂梯度洗脱，从而获得2-((1S)-1-((5-氨基-1，3，4-噻二唑-2-基)氨基)乙基)-1-环丙基-N-甲基-1H-苯并咪唑-7-甲酰胺：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.46-8.39(1H，m)；7.62(1H，d，J＝8.0Hz)，7.44(1H，d，J＝8.0Hz)，7.24-7.16(2H，m)；6.22(2H，s)，5.46-5.37(1H，m)，3.40-3.30(1H，m)，2.82(3H，d，J＝4.0Hz)，1.55(3H，d，J＝4.0Hz)，1.22-1.15(1H，m)，1.12-1.04(1H，m)，1.01-0.92(1H，m)，0.83-0.74(1H，m)；LC-MS(ESI)m/z 358.0[M+H]+。
实施例80：4-氨基-6-(((1R)-1-(7-溴-1-(5-氟-3-吡啶基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，和4-氨基-6-(((1S)-1-(7-溴-1-(5-氟-3-吡啶基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈的制备
N-(2-溴-6-硝基苯基)-5-氟吡啶-3-胺
Figure BDA00002500618801951
向1-溴-2-氟-3-硝基苯(5.69g，25.9mmol)和3-氨基-5-氟吡啶(2.6373g，23.53mmol)在DMF(39.2mL)中的溶液中加入叔丁醇钾(5.28g，47.1mmol)，并将该溶液在氮气下在室温下搅拌过夜。再过5小时后，将该混合物倒入水(150mL)中并用EtOAc(2x100mL)萃取。用MgSO4干燥有机萃取物。过滤该溶液并在真空中浓缩从而获得粗料，为橙色固体。该橙色固体通过色谱法经由Redi-SepTM预装填硅胶柱(120g)纯化，使用0％至50％的在己烷中的EtOAc梯度洗脱，从而获得N-(2-溴-6-硝基苯基)-5-氟吡啶-3-胺，为橙色浆料：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.73(1H，s)，8.09(1H，dd，J＝8.1，1.5Hz)，8.03(1H，dd，J＝8.2，1.4Hz)，7.97(1H，d，J＝2.5Hz)，7.88(1H，t，J＝1.9Hz)，7.44(1H，t，J＝8.1Hz)，6.77(1H，dt，J＝11.2，2.3Hz)；LC-MS(ESI)m/z 312.0[M+H(79Br)]+和313.9[M+H(81Br)]+。
6-溴-N1-(5-氟吡啶-3-基)苯-1，2-二胺
Figure BDA00002500618801961
在搅拌条件下在回流下加热N-(2-溴-6-硝基苯基)-5-氟吡啶-3-胺(5.686g，18.22mmol)和氯化锡(II)二水合物(20.56g，91mmol)在EtOAc(121mL)中的混合物。在2.5小时后，将该混合物冷却至室温。将冷却的混合物倒入10M NaOH水溶液(150mL)中。用EtOAC(100mL x 2)萃取该混合物，用水(100mLx 2)、盐水(100mL x 1)洗涤，用Mg2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。使粗料吸收到硅胶塞上并通过色谱法经由Redi-SepTM预装填硅胶柱(120g)纯化，使用0％至30％的在己烷中的EtOAc梯度洗脱，从而获得6-溴-N1-(5-氟吡啶-3-基)苯-1，2-二胺，为棕色浆料状固体：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 7.84(1H，s)，7.76-7.82(2H，m)，6.91-6.98(1H，m)，6.81-6.87(1H，m)，6.77(1H，dd，J＝8.0，1.4Hz)，6.39(1H，dt，J＝11.7，2.3Hz)，5.28(2H，s)；LC-MS(ESI)m/z 282.0[M+H(79Br)]+和283.9[M+H(81Br)]+。
(S)-1-(3-溴-2-(5-氟吡啶-3-基氨基)苯基氨基)-1-氧代丙烷-2-基氨基甲酸叔丁酯
Figure BDA00002500618801962
向Boc-L-Ala-OH(6.36g，33.6mmol)和N-甲基吗啉(3.88mL，35.3mmol)在DCM(84mL)中的-10℃溶液(NaCl-冰浴)中加入氯甲酸异丁酯(4.40mL，33.6mmol)。将所得混浊无色混合物在-10℃下搅拌30分钟。然后向该混合物中加入6-溴-N1-(5-氟吡啶-3-基)苯-1，2-二胺(4.7437g，16.81mmol)在DCM(84mL)中的溶液。在搅拌下让所得混合物升温至室温。在20小时后，将饱和NH4Cl(100mL)加入到该混合物中。分离出混浊有机层。用DCM(1x 100mL)萃取含水混合物并在真空中浓缩有机萃取物从而获得粗产物。使该粗料吸收到硅胶塞上并通过色谱法经由Redi-Sep预装填硅胶柱(120g)纯化，使用0％至100％的在DCM中的DCM∶MeOH∶NH4OH  (89∶9∶1)梯度洗脱，从而获得(S)-1-(3-溴-2-(5-氟吡啶-3-基氨基)苯基氨基)-1-氧代丙烷-2-基氨基甲酸叔丁酯，为橙色固体：LC-MS(ESI)m/z 453.0[M+H(79Br)]+和455.0[M+H(81Br)]+。
N-(1-(7-溴-1-(5-氟吡啶-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基)乙酰胺
Figure BDA00002500618801971
在100℃下在搅拌下加热(S)-1-(3-溴-2-(5-氟吡啶-3-基氨基)苯基-氨基)-1-氧代丙烷-2-基氨基甲酸叔丁酯(2.4253g，5.35mmol)在AcOH(17.83mL)中的溶液。在5天后，将该混合物从热源上移开并倒入DCM(100mL)和碳酸氢钠饱和溶液(100mL)的双相中。用10N NaOH(10mL)碱化该混合物。用水(100mL x 3)和盐水(100mL x1)洗涤有机层，用MgSO4干燥，过滤，并在真空中浓缩从而获得N-(1-(7-溴-1-(5-氟吡啶-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基)乙酰胺，为暗棕色固体：LC-MS(ESI)m/z 376.9[M+H(79Br)]+和379[M+H(81Br)]+。
1-(7-溴-1-(5-氟吡啶-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙胺
Figure BDA00002500618801981
在100℃下加热N-(1-(7-溴-1-(5-氟吡啶-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基)乙酰胺(1.5652g，4.15mmol)和2N HCl(31.1mL，62.2mmol)的溶液。在6小时后，将该混合物冷却至室温并在DCM(50mL)与水(50mL)之间进行分配。用DCM(50mL x 4)洗涤酸性含水混合物从而除去有机杂质，然后用10N NaOH(6mL)碱化至～pH 12并用DCM(50mL x 3)萃取。合并的有机层用水(100mL x 1)、盐水(100mL x 1)洗涤，用MgSO4干燥，过滤并在真空中浓缩从而获得暗红色浆料。使该粗料吸收到硅胶塞上并通过色谱法经由Redi-SepTM预装填硅胶柱(80g)纯化，使用0％至50％的在DCM中的DCM∶MeOH∶NH4OH(89∶9∶1)梯度洗脱，从而获得1-(7-溴-1-(5-氟吡啶-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙胺，为棕色浆料状固体：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.86(1H，t，J＝2.8Hz)，8.73(1H，dt，J＝13.5，1.4Hz)，8.23-8.33(1H，m)，7.75(1H，dd，J＝8.0，1.0Hz)，7.41(1H，d，J＝7.4Hz)，7.21(1H，t，J＝7.9Hz)，3.76(1H，q，J＝6.7Hz)，1.93(2H，br.s.)，1.36(3H，d，J＝6.7Hz)；LC-MS(ESI)m/z 334.9[M+H(79Br)]+和337[M+H(81Br)]+。
4-氨基-6-(1-(7-溴-1-(5-氟-3-吡啶基)-1H-苯并咪唑-2-基)-乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈
Figure BDA00002500618801982
在120℃下搅拌4-氨基-6-氯嘧啶-5-甲腈(0.368g，2.381mmol)、1-(7-溴-1-(5-氟吡啶-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙胺(0.798g，2.38mmol)，和DIEA(1.24mL，7.14mmol)在1-丁醇(23.8mL)中的混合物。在23小时后，将该混合物从热源上移开并放置在室温下。在冷却后，在真空中浓缩该混合物从而获得暗紫色固体。向该暗紫色固体中加入水(50mL)，接着进行超声处理。通过过滤收集所得沉淀，用水洗涤，并进行空气干燥从而获得产物。使该固体吸收到硅胶塞上并通过色谱法经由Redi-SepTM预装填硅胶柱(80g)纯化，使用0％至50％的在DCM中的DCM∶MeOH∶NH4OH(89∶9∶1)梯度洗脱，从而获得紫色固体。将该紫色固体悬浮在EtOAc-己烷(1∶5，10mL)中，过滤，并用EtOAc-己烷(1∶5，40mL)洗涤，从而获得4-氨基-6-(1-(7-溴-1-(5-氟吡啶-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基氨基)嘧啶-5-甲腈，为紫色固体：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.47-8.79(2H，m)，7.88-8.34(1H，m)，7.67-7.85(3H，m)，7.44(1H，dd，J＝7.8，0.8Hz)，7.22(3H，t，J＝7.9Hz)，5.29-5.47(1H，m)，1.57(3H，d，J＝6.8Hz)；LC-MS(ESI)m/z 453.0[M+H(79Br)]+和454.9[M+H(81Br)]+。
4-氨基-6-(((1R)-1-(7-溴-1-(5-氟-3-吡啶基)-1H-苯并咪唑-2-基)-乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，和4-氨基-6-(((1S)-1-(7-溴-1-(5-氟-3-吡啶基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈
Figure BDA00002500618801991
使用制备SFC在AD-H柱上分离外消旋混合物(0.1g)从而获得两种级分：在SFC AD-H柱上的第一峰：4-氨基-6-(((1R)-1-(7-溴-1-(5-氟-3-吡啶基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，为粉红色固体：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.50-8.78(2H，m)，7.87-8.34(1H，m)，7.71-7.84(3H，m)，7.44(1H，dd，J＝7.8，0.8Hz)，7.22(3H，t，J＝7.9Hz)，5.30-5.47(1H，m)，1.57(3H，d，J＝6.7Hz)；LC-MS(ESI)m/z 453.0[M+H(79Br)]+和455.0[M+H(81Br)]+。在SFC AD-H柱上的第二峰：4-氨基-6-(((1S)-1-(7-溴-1-(5-氟-3-吡啶基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，为粉红色固体：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.51-8.77(2H，m)，7.88-8.33(1H，m)，7.71-7.84(3H，m)，7.44(1H，dd，J＝7.8，0.8Hz)，7.22(3H，t，J＝7.9Hz)，5.30-5.46(1H，m)，1.57(3H，d，J＝6.7Hz)；LC-MS(ESI)m/z 453.0[M+H(79Br)]+和455.0[M+H(81Br)]+在1.650分钟。
实施例81：2-((1S)-1-((6-氨基-5-氰基-4-嘧啶基)氨基)乙基)-3-(3-吡啶基)咪唑并[1，2-a]吡啶-5-甲酸甲酯的制备
(S)-2-(1-(((苄氧基)羰基)氨基)乙基)-3-(吡啶-3-基)咪唑并[1，2-a]吡啶-5-甲酸甲酯
Figure BDA00002500618802001
在25℃下向(S)-2-(1-(((苄氧基)羰基)氨基)乙基)-3-碘咪唑并[1，2-a]吡啶-5-甲酸甲酯(在实施例73中制备的，4.00g，8.35mmol)和吡啶-3-基硼酸(1.00g，10.2mmol)在甲苯(48mL)、EtOH(32mL)和水(16mL)中的溶液中加入碳酸钠(4.38g，41.8mmol)。用氮气给反应混合物脱气30分钟并在25℃下将二(三苯基膦)二氯化钯(II)(22mg，0.18mmol)加入到该反应混合物中。将该反应混合物在120℃下搅拌过夜。在反应完成后，将水加入到该反应混合物中并用EtOAc萃取。用硫酸钠干燥有机层并在真空中浓缩。残余物通过柱色谱法使用中性氧化铝和0-70％的在己烷中的EtOAc来进行纯化，从而获得(S)-2-(1-(((苄氧基)羰基)氨基)乙基)-3-(吡啶-3-基)咪唑并[1，2-a]吡啶-5-甲酸甲酯：LC-MS(ESI)m/z 431.0[M+H]+。
(S)-2-(1-氨基乙基)-3-(吡啶-3-基)咪唑并[1，2-a]吡啶-5-甲酸甲酯
Figure BDA00002500618802011
将(S)-2-(1-(((苄氧基)羰基)氨基)乙基)-3-(吡啶-3-基)咪唑并[1，2-a]吡啶-5-甲酸甲酯(450mg，1.04mmol)和二甲基硫醚(0.4mL)在TFA(1.2mL)中的混合物在室温下搅拌过夜。在真空中浓缩该混合物。将残余物溶解在EtOAc中。用碳酸氢钠饱和溶液洗涤有机层，用硫酸钠干燥，过滤并在真空中浓缩从而获得(S)-2-(1-氨基乙基)-3-(吡啶-3-基)咪唑并[1，2-a]吡啶-5-甲酸甲酯：LC-MS(ESI)m/z 297.2[M+H]+。该粗产物可直接使用而无需进一步纯化。
(S)-2-(1-((6-氨基-5-氰基嘧啶-4-基)氨基)乙基)-3-(吡啶-3-基)咪唑并[1，2-a]吡啶-5-甲酸甲酯
Figure BDA00002500618802012
在室温下向(S)-2-(1-氨基乙基)-3-(吡啶-3-基)咪唑并[1，2-a]吡啶-5-甲酸甲酯(300mg，1.013mmol)和4-氨基-6-氯-嘧啶-5-甲腈(156mg，1.013mmol)在正丁醇(3mL)中的混合物中加入DIEA(0.3mL，1.519mmol)。将反应混合物搅拌6小时并在110℃下加热。用EtOAc稀释并萃取该混合物。用硫酸钠干燥有机层，过滤，并在真空中浓缩。残余物通过柱色谱法使用硅胶(100-200目)和0-40％的在己烷中的丙酮来进行纯化，从而获得(S)-2-(1-((6-氨基-5-氰基嘧啶-4-基)氨基)乙基)-3-(吡啶-3-基)咪唑并[1，2-a]吡啶-5-甲酸甲酯：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ1.514(d，J＝5.6Hz，3H)，3.226(s，3H)，5.313-5.382(m，1H)，7.064-7.082(m，1H)，7.220(br s，2H)，7.346-7.363(m，1H)，7.397-7.437(m，1H)，7.486-7.518(m，1H)，7.765(br s，1H)，7.875-7.926(m，2H)，8.552-8.605(m，2H)；LC-MS(ESI)m/z 414.1[M+H]+。
实施例82：4-氨基-6-(((1S)-1-(1-(环丙基甲基)-7-(三氟甲基)-1H-苯并咪唑-2-基)丙基)氨基)-5-嘧啶甲腈的制备
3-(三氟甲基)苯-1，2-二胺
Figure BDA00002500618802021
采用实施例47中的3-氨基-2-(环丙基氨基)苯甲酸甲酯的一般合成程序，使用2-硝基-3-氨基三氟甲苯制备3-(三氟甲基)苯-1，2-二胺：LC-MS(ESI)m/z 177.1[M+H]+。
(S)-1-(2-氨基-3-(三氟甲基)苯基氨基)-1-氧代丁烷-2-基氨基甲酸叔丁酯
Figure BDA00002500618802022
采用实施例47中的(S)-3-(2-(叔丁氧基羰基氨基)-丙酰胺基)-2-(环丙基氨基)苯甲酸甲酯的一般合成程序，使用3-(三氟甲基)苯-1，2-二胺和Boc-abu-OH制备(S)-1-(2-氨基-3-(三氟甲基)苯基氨基)-1-氧代丁烷-2-基氨基甲酸叔丁酯：LC-MS(ESI)m/z 362.0[M+H]+。
(S)-1-(2-(环丙基甲基氨基)-3-(三氟甲基)苯基氨基)-1-氧代丁烷-2-基氨基甲酸叔丁酯
Figure BDA00002500618802023
采用实施例66中的(S)-1-(2-(环丙基甲基-氨基)-3-(甲基磺酰基)苯基氨基)-1-氧代丙烷-2-基氨基甲酸叔丁酯的一般合成程序，使用(S)-1-(2-氨基-3-(三氟甲基)苯基氨基)-1-氧代丁烷-2-基氨基甲酸叔丁酯制备(S)-1-(2-(环丙基甲基氨基)-3-(三氟甲基)苯基氨基)-1-氧代丁烷-2-基氨基甲酸叔丁酯：LC-MS(ESI)m/z 416.0[M+H]+。
(S)-1-(1-(环丙基甲基)-7-(三氟甲基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)丙烷-1-胺
Figure BDA00002500618802031
采用实施例47中的(S)-2-(1-氨基乙基)-1-环丙基-1H-苯并[d]咪唑-7-甲酸甲酯的一般合成程序，使用(S)-1-(2-(环丙基甲基氨基)-3-(三氟甲基)苯基氨基)-1-氧代丁烷-2-基氨基甲酸叔丁酯制备(S)-1-(1-(环丙基甲基)-7-(三氟甲基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)丙烷-1-胺：LC-MS(ESI)m/z 298.0[M+H]+。
4-氨基-6-(((1S)-1-(1-(环丙基甲基)-7-(三氟甲基)-1H-苯并咪唑-2-基)丙基)氨基)-5-嘧啶甲腈
Figure BDA00002500618802032
采用实施例47中的(S)-2-(1-(6-氨基-5-氰基-嘧啶-4-基氨基)乙基)-1-环丙基-1H-苯并[d]咪唑-7-甲酸甲酯的一般合成程序，使用(S)-1-(1-(环丙基甲基)-7-(三氟甲基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)丙烷-1-胺制备4-氨基-6-(((1S)-1-(1-(环丙基甲基)-7-(三氟甲基)-1H-苯并咪唑-2-基)丙基)氨基)-5-嘧啶甲腈：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.06(1H，s)，8.01(1H，d，J＝8.0Hz)，7.70-7.64(2H，m)，7.40(1H，t，J＝8.0Hz)，7.34(2H，br)，5.70-5.60(1H，m)，4.39(1H，dd，J＝16.0，4.0Hz)，4.38(1H，dd，J＝16.0，4.0Hz)，2.15-2.06(2H，m)，1.20-2.10(1H，m)，1.66(3H，t，J＝8.0Hz)，0.58-0.48(3H，m)，0.43-0.35(1H，m)；LC-MS(ESI)m/z 416.0[M+H]+。
实施例83：2-((1S)-1-((6-氨基-5-氰基-4-嘧啶基)氨基)-丙基)-1-环丙基-N-甲基-1H-苯并咪唑-7-甲酰胺的制备
(S)-1-(2-(环丙基氨基)-3-(甲基氨基甲酰基)苯基氨基)-1-氧代丁烷-2-基氨基甲酸叔丁酯
Figure BDA00002500618802041
采用实施例47中的(S)-3-(2-(叔丁氧基羰基氨基)-丙酰胺基)-2-(环丙基氨基)苯甲酸甲酯的一般合成程序，使用3-氨基-2-(环丙基氨基)-N-甲基苯甲酰胺(在实施例20中制备的)制备(S)-1-(2-(环丙基氨基)-3-(甲基氨基甲酰基)苯基氨基)-1-氧代丁烷-2-基氨基甲酸叔丁酯：LC-MS(ESI)m/z 391.1[M+H]+。
(S)-2-(1-氨基丙基)-1-环丙基-N-甲基-1H-苯并[d]咪唑-7-甲酰胺
Figure BDA00002500618802042
采用实施例47中的(S)-2-(1-氨基乙基)-1-环丙基-1H-苯并[d]咪唑-7-甲酸甲酯的一般合成程序，使用(S)-1-(2-(环丙基氨基)-3-(甲基氨基甲酰基)苯基氨基)-1-氧代丁烷-2-基氨基甲酸叔丁酯制备(S)-2-(1-氨基丙基)-1-环丙基-N-甲基-1H-苯并[d]咪唑-7-甲酰胺：LC-MS(ESI)m/z 273.1[M+H]+。
2-((1S)-1-((6-氨基-5-氰基-4-嘧啶基)氨基)丙基)-1-环丙基-N-甲基-1H-苯并咪唑-7-甲酰胺
Figure BDA00002500618802051
采用实施例47中的(S)-2-(1-(6-氨基-5-氰基-嘧啶-4-基氨基)乙基)-1-环丙基-1H-苯并[d]咪唑-7-甲酸甲酯的一般合成程序，2-((1S)-1-((6-氨基-5-氰基-4-嘧啶基)氨基)丙基)-1-环丙基-N-甲基-1H-苯并咪唑-7-甲酰胺：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.46-8.40(1H，m)；8.03(1H，s)，7.66(1H，d，J＝8.0Hz)，7.44(1H，d，J＝8.0Hz)，7.32(2H，br)，7.26-7.16(2H，m)；5.80-5.72(1H，m)，2.82(3H，d，J＝4.0Hz)，2.13-2.02(2H，m)，1.20-1.08(2H，m)，1.00-0.92(4H，m)，0.82-0.74(1H，m)；LC-MS(ESI)m/z 391.1[M+H]+。
实施例84
4-氨基-6-(((1S)-1-(5-((4-甲基-1-哌嗪基)羰基)-3-苯基咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈
Figure BDA00002500618802052
将N-甲基哌嗪(0.040mL，0.356mmol)、(S)-2-(1-(6-氨基-5-氰基嘧啶-4-基氨基)乙基)-3-苯基咪唑并[1，2-a]吡啶-5-甲酸(0.071g，0.178mmol)、PyBOP(0.185g，0.356mmol)和DIEA(0.062mL，0.356mmol)在DMF(1.78mL)中的溶液在室温下搅拌1小时。将该溶液上样到硅胶上并通过MPLC纯化(使用0-10％的在DCM中的MeOH梯度洗脱)从而产生灰白色固体，该灰白色固体通过MPLC再纯化(使用0-80％的在DCM中的(1∶10∶90NH4OH∶MeOH∶DCM)溶液梯度洗脱)从而产生4-氨基-6-(((1S)-1-(5-((4-甲基-1-哌嗪基)羰基)-3-苯基咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，为白色固体。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.43(dd，J＝14.18，6.75Hz，3H)1.88-2.01(m，1H)2.03-2.10(m，1H)2.12-2.44(m，6H)3.00-3.14(m，1H)3.22(m，J＝9.19Hz，1H)3.40(d，J＝4.30Hz，1H)5.13-5.34(m，1H)6.75-6.98(m，2H)7.16-7.53(m，8H)7.75(m，J＝9.00，5.09Hz，1H)7.94(d，J＝6.85Hz，1H).LC-MS(ESI)m/z 482.1[M+H]+。
实施例85：4-氨基-6-(((1S)-1-(1-(4-氟苄基)-7-(三氟甲基)-1H-苯并咪唑-2-基)丙基)氨基)-5-嘧啶甲腈的制备
(S)-1-(2-(4-氟苄基氨基)-3-(三氟甲基)苯基氨基)-1-氧代丁烷-2-基氨基甲酸叔丁酯
Figure BDA00002500618802061
采用实施例59中的4-氨基-6-(((1S)-1-(1-(4-氟苄基)-4-(甲基磺酰基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈的一般合成程序，使用(S)-1-(2-氨基-3-(三氟甲基)苯基氨基)-1-氧代丁烷-2-基氨基甲酸叔丁酯(在实施例82中制备的)制备(S)-1-(2-(4-氟苄基氨基)-3-(三氟甲基)苯基氨基)-1-氧代丁烷-2-基氨基甲酸叔丁酯：LC-MS(ESI)m/z 470.2[M+H]+。
(S)-1-(1-(4-氟苄基)-7-(三氟甲基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)丙烷-1-胺
Figure BDA00002500618802062
采用实施例47中的(S)-2-(1-氨基乙基)-1-环丙基-1H-苯并[d]咪唑-7-甲酸甲酯的一般合成程序，使用(S)-1-(2-(4-氟苄基氨基)-3-(三氟甲基)苯基氨基)-1-氧代丁烷-2-基氨基甲酸叔丁酯制备(S)-1-(1-(4-氟苄基)-7-(三氟甲基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)丙烷-1-胺：LC-MS(ESI)m/z 352.0[M+H]+。
4-氨基-6-(((1S)-1-(1-(4-氟苄基)-7-(三氟甲基)-1H-苯并咪唑-2-基)丙基)氨基)-5-嘧啶甲腈
Figure BDA00002500618802071
采用实施例47中的(S)-2-(1-(6-氨基-5-氰基-嘧啶-4-基氨基)乙基)-1-环丙基-1H-苯并[d]咪唑-7-甲酸甲酯的一般合成程序，使用(S)-1-(1-(4-氟苄基)-7-(三氟甲基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)丙烷-1-胺制备4-氨基-6-(((1S)-1-(1-(4-氟苄基)-7-(三氟甲基)-1H-苯并咪唑-2-基)丙基)氨基)-5-嘧啶甲腈：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.09(1H，d，J＝8.0Hz)，7.97(1H，s)，7.69-7.63(2H，m)，7.44(1H，t，J＝8.0Hz)，7.18(2H，br)，7.04(1H，d，J＝8.0Hz)，7.01(1H，d，J＝8.0Hz)，6.83-6.76(2H，m)，5.85(2H，br)，5.53-5.45(1H，m)，2.10-2.02(1H，m)，1.20-1.14(1H，m)，0.78(3H，t，J＝8.0Hz)；LC-MS(ESI)m/z470.0[M+H]+。
实施例86：
2-((1S)-1-((6-氨基-55-氰基-4-嘧啶基)氨基)乙基)-N-环丙基-3-苯基咪唑并[1，2-a]吡啶-5-甲酰胺
Figure BDA00002500618802081
将DIEA(0.062mL，0.356mmol)、环丙胺(0.025mL，0.36mmol)、(S)-2-(1-(6-氨基-5-氰基嘧啶-4-基氨基)乙基)-1-苯基-1H-苯并[d]咪唑-7-甲酸(0.071g，0.18mmol)，和PyBOP(0.185g，0.356mmol)在DMF(1.18mL)中的溶液在室温下搅拌1小时。直接将该溶液上样到硅胶上并通过MPLC纯化(用0-8％的在DCM中的MeOH洗脱)从而产生灰白色固体，该灰白色固体通过MPLC再纯化(用0-100％的在DCM中的(1∶10∶90NH4OH∶MeOH∶DCM)溶液洗脱)从而产生2-((1S)-1-((6-氨基-5-氰基-4-嘧啶基)氨基)乙基)-N-环丙基-3-苯基咪唑并[1，2-a]吡啶-5-甲酰胺，为白色固体。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 0.16-0.25(m，2H)0.37-0.49(m，2H)1.44(d，J＝6.65Hz，3H)2.05(tq，J＝7.25，3.64Hz，1H)5.29(quin，J＝6.80Hz，1H)6.84(d，J＝7.24Hz，1H)6.94(d，J＝6.85Hz，1H)7.12-7.51(m，8H)7.75(d，J＝9.00Hz，1H)7.95(s，1H)8.67(d，J＝3.52Hz，1H).LC-MS(ESI)m/z 439.1[M+H]+。
实施例87：2-((1S)-1-((6-氨基-5-氰基-4-嘧啶基)氨基)乙基)-1-(5-氟-3-吡啶基)-1H-苯并咪唑-7-甲腈，和2-((1R)-1-((6-氨基-5-氰基-4-嘧啶基)氨基)乙基)-1-(5-氟-3-吡啶基)-1H-苯并咪唑-7-甲腈的制备
Figure BDA00002500618802091
向装有冷凝器的三颈圆底烧瓶中的搅拌着的4-氨基-6-(1-(7-溴-1-(5-氟吡啶-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基氨基)嘧啶-5-甲腈(在实施例80中制备的，0.157g，0.346mmol)在DMF(1.73mL)中的溶液中加入XphosTM预催化剂(0.031g，0.042mmol)和磷酸氢钾(0.066g，0.38mmol)，并将该混合物在120℃下加热2分钟。用超过10分钟的时间向该混合物中逐滴加入在DMF(1.73mL)中的三丁基锡烷甲腈(0.109g，0.346mmol)，并在120℃下在搅拌下加热该混合物。在24小时后，将该混合物冷却至室温并在EtOAc(50mL)与1.0M含水LiCl(50mL)之间进行分配。用EtOAc(1x 50mL)萃取分离的水层并且用1.0M含水LiCl(50mL)洗涤合并的有机萃取物，用MgSO4干燥并在真空中浓缩。使粗料吸收到硅胶塞上并通过色谱法经由Redi-SepTM预装填硅胶柱(40g)纯化，使用0％至100％的在DCM中的DCM∶MeOH∶NH4OH(89∶9∶1)梯度洗脱，从而获得固体。将该固体悬浮在EtOAc-己烷(1∶5，10mL)中，过滤，用EtOAc-己烷(1∶5，50mL)洗涤从而获得2-(1-(6-氨基-5-氰基嘧啶-4-基氨基)乙基)-1-(5-氟吡啶-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-7-甲腈，为棕褐色固体：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm8.58-8.84(2H，m)，7.97-8.39(2H，m)，7.69-7.87(3H，m)，7.45(1H，t，J＝7.8Hz)，7.22(2H，br.s.)，5.43-5.57(1H，m)，1.60(3H，t，J＝6.5Hz)；LC-MS(ESI)m/z 400.0[M+H]+。
Figure BDA00002500618802101
使用制备SFC在AD-H柱上分离外消旋混合物(0.05g)从而获得两种级分：在SFC  AD-H  柱上的第一峰：2-((1S)-1-((6-氨基-5-氰基-4-嘧啶基)氨基)乙基)-1-(5-氟-3-吡啶基)-1H-苯并咪唑-7-甲腈，为灰白色固体：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm8.58-8.84(2H，m)，7.98-8.38(2H，m)，7.70-7.86(3H，m)，7.45(1H，t，J＝7.9Hz)，7.23(2H，br.s.)，5.42-5.57(1H，m)，1.60(3H，t，J＝6.5Hz)；LC-MS(ESI)m/z 400.0[M+H]+。在SFC AD-H柱上的第二峰：2-((1R)-1-((6-氨基-5-氰基-4-嘧啶基)氨基)乙基)-1-(5-氟-3-吡啶基)-1H-苯并咪唑-7-甲腈，为灰白色固体：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.60-8.84(2H，m)，7.98-8.39(2H，m)，7.71-7.86(3H，m)，7.45(1H，t，J＝7.9Hz)，7.22(2H，br.s.)，5.42-5.57(1H，m)，1.60(3H，t，J＝6.5Hz)；LC-MS(ESI)m/z 400.0[M+H]+。
实施例88：N-((1S)-1-(1-(环丙基甲基)-7-(三氟甲基)-1H-苯并咪唑-2-基)丙基)-9H-嘌呤-6-胺的制备
Figure BDA00002500618802102
采用实施例47中的(S)-2-(1-(6-氨基-5-氰基-嘧啶-4-基氨基)乙基)-1-环丙基-1H-苯并[d]咪唑-7-甲酸甲酯的一般合成程序，使用(S)-1-(1-(环丙基甲基)-7-(三氟甲基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)丙烷-1-胺(在实施例82中制备的)制备N-((1S)-1-(1-(环丙基甲基)-7-(三氟甲基)-1H-苯并咪唑-2-基)丙基)-9H-嘌呤-6-胺：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ12.94(1H，br)，8.25(1H，s)，8.18(1H，s)，8.00(1H，d，J＝8.0Hz)，7.94(2H，br)，7.67(1H，d，J＝8.0Hz)，7.39(1H，t，J＝8.0Hz)，5.79(1H，br)，4.45(1H，br)，2.23-2.12(2H，m)，1.25-1.15(1H，m)，1.02(3H，t，J＝8.0Hz)，0.68-0.58(1H，m)，0.58-0.48(2H，m)，0.480.38(1H，m)；LC-MS(ESI)m/z 416.0[M+H]+。
实施例89：4-氨基-6-(((1S)-1-(1-(环丙基甲基)-7-(甲基磺酰基)-1H-苯并咪唑-2-基)丙基)氨基)-5-嘧啶甲腈的制备
(S)-1-(2-氨基-3-(甲基磺酰基)苯基氨基)-1-氧代丁烷-2-基氨基甲酸叔丁酯
Figure BDA00002500618802111
采用实施例47中的(S)-3-(2-(叔丁氧基羰基-氨基)丙酰胺基)-2-(环丙基氨基)苯甲酸甲酯的一般合成程序，使用3-(甲基磺酰基)苯-1，2-二胺(在实施例51中制备的)和Boc-abu-OH制备(S)-1-(2-氨基-3-(甲基磺酰基)苯基氨基)-1-氧代丁烷-2-基氨基甲酸叔丁酯：LC-MS(ESI)m/z 372.1[M+H]+。
(S)-1-(2-(环丙基甲基氨基)-3-(甲基磺酰基)苯基氨基)-1-氧代丁烷-2-基氨基甲酸叔丁酯
Figure BDA00002500618802112
采用实施例66中的(S)-1-(2-(环丙基甲基-氨基)-3-(甲基磺酰基)苯基氨基)-1-氧代丙烷-2-基氨基甲酸叔丁酯的一般合成程序，使用(S)-1-(2-氨基-3-(甲基磺酰基)苯基氨基)-1-氧代丁烷-2-基氨基甲酸叔丁酯制备(S)-1-(2-(环丙基甲基氨基)-3-(甲基磺酰基)苯基氨基)-1-氧代丁烷-2-基氨基甲酸叔丁酯：LC-MS(ESI)m/z426.1[M+H]+。
(S)-1-(1-(环丙基甲基)-7-(甲基磺酰基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)丙烷-1-胺
Figure BDA00002500618802121
采用实施例47中的(S)-2-(1-氨基乙基)-1-环丙基-1H-苯并[d]咪唑-7-甲酸甲酯的一般合成程序，使用(S)-1-(2-(环丙基甲基氨基)-3-(甲基磺酰基)苯基氨基)-1-氧代丁烷-2-基氨基甲酸叔丁酯制备(S)-1-(1-(环丙基甲基)-7-(甲基磺酰基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)丙烷-1-胺：LC-MS(ESI)m/z 308.0[M+H]+。
4-氨基-6-(((1S)-1-(1-(环丙基甲基)-7-(甲基磺酰基)-1H-苯并咪唑-2-基)丙基)氨基)-5-嘧啶甲腈
Figure BDA00002500618802122
采用实施例47中的(S)-2-(1-(6-氨基-5-氰基-嘧啶-4-基氨基)乙基)-1-环丙基-1H-苯并[d]咪唑-7-甲酸甲酯的一般合成程序，使用(S)-1-(1-(环丙基甲基)-7-(甲基磺酰基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)丙烷-1-胺制备4-氨基-6-(((1S)-1-(1-(环丙基甲基)-7-(甲基磺酰基)-1H-苯并咪唑-2-基)丙基)氨基)-5-嘧啶甲腈：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.08(1H，s)，8.04(1H，d，J＝8.0Hz)，7.90(1H，d，J＝8.0Hz)，7.62(1H，d，J＝8.0Hz)，7.44(1H，t，J＝8.0Hz)，7.34(2H，br)，5.75-5.66(1H，m)，4.82(1H，dd，J＝16.0，4.0Hz)，4.59(1H，dd，J＝16.0，4.0Hz)，3.44(3H，s)，2.17-2.06(2H，m)，1.34-1.27(1H，m)，0.97(3H，t，J＝8.0Hz)，0.59-0.35(4H，m)；LC-MS(ESI)m/z 426.1[M+H]+。
实施例90：4-氨基-6-(((1S)-1-(1-(4-氟苄基)-7-(甲基磺酰基)-1H-苯并咪唑-2-基)丙基)氨基)-5-嘧啶甲腈的制备
(S)-1-(2-(4-氟苄基氨基)-3-(甲基磺酰基)苯基氨基)-1-氧代丁烷-2-基氨基甲酸叔丁酯
Figure BDA00002500618802131
采用实施例59中的4-氨基-6-(((1S)-1-(1-(4-氟苄基)-4-(甲基磺酰基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈的一般合成程序，使用(S)-1-(2-氨基-3-(甲基磺酰基)苯基氨基)-1-氧代丁烷-2-基氨基甲酸叔丁酯(在实施例89中制备的)制备(S)-1-(2-(4-氟苄基氨基)-3-(甲基磺酰基)苯基氨基)-1-氧代丁烷-2-基氨基甲酸叔丁酯：LC-MS(ESI)m/z 480.1[M+H]+。
(S)-1-(1-(4-氟苄基)-7-(甲基磺酰基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)丙烷-1-胺
Figure BDA00002500618802132
采用实施例47中的(S)-2-(1-氨基乙基)-1-环丙基-1H-苯并[d]咪唑-7-甲酸甲酯的一般合成程序，使用(S)-1-(2-(4-氟苄基氨基)-3-(甲基磺酰基)苯基氨基)-1-氧代丁烷-2-基氨基甲酸叔丁酯制备(S)-1-(1-(4-氟苄基)-7-(甲基磺酰基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)丙烷-1-胺：LC-MS(ESI)m/z 362.0[M+H]+。
4-氨基-6-(((1S)-1-(1-(4-氟苄基)-7-(甲基磺酰基)-1H-苯并咪唑-2-基)丙基)氨基)-5-嘧啶甲腈
采用实施例47中的(S)-2-(1-(6-氨基-5-氰基-嘧啶-4-基氨基)乙基)-1-环丙基-1H-苯并[d]咪唑-7-甲酸甲酯的一般合成程序，使用(S)-1-(1-(4-氟苄基)-7-(甲基磺酰基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)丙烷-1-胺制备4-氨基-6-(((1S)-1-(1-(4-氟苄基)-7-(甲基磺酰基)-1H-苯并咪唑-2-基)丙基)氨基)-5-嘧啶甲腈：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.14(1H，d，J＝8.0Hz)，7.99(1H，s)，7.90(1H，d，J＝8.0Hz)，7.65(1H，d，J＝8.0Hz)，7.50(1H，t，J＝8.0Hz)，7.21(2H，br)，7.08(1H，d，J＝8.0Hz)，7.06(1H，d，J＝8.0Hz)，6.88-6.81(2H，m)，6.06(2H，br)，5.51-5.46(1H，m)，3.00(3H，s)，2.06-1.95(2H，m)，0.76(3H，t，J＝8.0Hz)；LC-MS(ESI)m/z 480.1[M+H]+。
实施例91：5-溴-N-(5-氟-2-硝基苯基)吡啶-3-胺
Figure BDA00002500618802142
根据一般程序D中的步骤D1使用3-氨基-5-溴吡啶(5.00g，28.9mmol)制备从而获得5-溴-N-(5-氟-2-硝基苯基)吡啶-3-胺，为棕色固体。LC-MS(ESI)m/z 314.0[M+H]+。
5-(2-氨基-5-氟苯基氨基)烟酸甲酯
Figure BDA00002500618802143
根据一般程序D中的步骤D2使用5-溴-N-(5-氟-2-硝基苯基)吡啶-3-胺(6.4g，20.5mmol)制备从而获得N1-(5-溴吡啶-3-基)-5-氟苯-1，2-二胺，为粗的黑色固体。LC-MS(ESI)m/z 282.0[M+H]+。
(S)-1-(2-(5-溴吡啶-3-基氨基)-4-氟苯基氨基)-1-氧代丙烷-2-基氨基甲酸叔丁酯
Figure BDA00002500618802151
根据一般程序D中的步骤D3使用5-(2-氨基-5-氟苯基氨基)烟酸甲酯(5.50g，21.1mmol)制备，从而获得(S)-1-(2-(5-溴吡啶-3-基氨基)-4-氟苯基氨基)-1-氧代丙烷-2-基氨基甲酸叔丁酯。LC-MS(ESI)m/z 455.0[M+H]+。
N-(1-(1-(5-溴吡啶-3-基)-6-氟-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基)乙酰胺
Figure BDA00002500618802152
根据一般程序D中的步骤D4使用(S)-1-(2-(5-溴吡啶-3-基氨基)-4-氟苯基氨基)-1-氧代丙烷-2-基氨基甲酸叔丁酯(5.32g，11.74mmol)制备，从而获得N-(1-(1-(5-溴吡啶-3-基)-6-氟-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基)乙酰胺，为棕色油状物。LC-MS(ESI)m/z 377.0[M+H]+。
1-(1-(5-溴吡啶-3-基)-6-氟-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙胺
根据-般程序D中的步骤D5a使用N-(1-(1-(5-溴吡啶-3-基)-6-氟-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基)乙酰胺(0.980g，2.60mmol)制备，从而获得1-(1-(5-溴吡啶-3-基)-6-氟-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙胺，为棕色油状物。LC-MS(ESI)m/z 337.0[M+H]+。
4-氨基-6-(1-(1-(5-溴吡啶-3-基)-6-氟-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基氨基)嘧啶-5-甲腈
Figure BDA00002500618802161
根据一般程序D中的步骤D6使用1-(1-(5-溴吡啶-3-基)-6-氟-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙胺(0.769g，2.29mmol)制备，从而获得4-氨基-6-(1-(1-(5-溴吡啶-3-基)-6-氟-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基氨基)嘧啶-5-甲腈，为浅棕褐色固体。1HNMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.59(d，J＝6.85Hz，3H)5.63(quin，J＝6.70Hz，1H)7.09(dd，J＝8.90，2.45Hz，1H)7.11-7.18(m，1H)7.19(br.s.，2H)7.71-7.80(m，2H)7.84(s，1H)8.33(br.s.，1H)8.70(d，J＝1.17Hz，1H)8.72(d，J＝1.96Hz，1H).LC-MS(ESI)m/z 452.9[M+H]+。
实施例92：4-氨基-6-(((1S)-1-(5，6-二氟-1-(5-氟-3-吡啶基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈的制备
(S)-1-(2-氨基-4，5-二氟苯基氨基)-1-氧代丙烷-2-基氨基甲酸叔丁酯
Figure BDA00002500618802162
在室温下向1，2-二氨基-4，5-二氟苯(2.00g，13.9mmol)和Boc-L-Ala-OH(2.63g，13.9mmol)以及1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳化二亚胺盐酸盐(5.85g，30.5mmol)在DCM(139mL)中的混合物中加入三乙胺(6.00mL，43.0mmol)并搅拌3小时。然后在真空中浓缩该混合物，并使其吸收到硅胶柱塞上并通过色谱法经由Redi-SepTM预装填硅胶柱(80g)纯化，使用0％至100％的在己烷中的EtOAc梯度洗脱，从而获得(S)-1-(2-氨基-4，5-二氟苯基氨基)-1-氧代丙烷-2-基氨基甲酸叔丁酯，为橙色固体：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 9.16(1H，s)，7.21(1H，dd，J＝11.9，8.8Hz)，7.11(1H，d，J＝6.7Hz)，6.65(1H，dd，J＝12.9，8.0Hz)，5.04(2H，br.s.)，4.04-4.14(1H，m)，1.39(9H，s)，1.25(3H，d，J＝7.0Hz)；LC-MS(ESI)m/z 338.0[M+Na]+和m/z 314.0[M-H]-。
(S)-1-(5，6-二氟-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基氨基甲酸叔丁酯
Figure BDA00002500618802171
在75℃下加热(S)-1-(2-氨基-4，5-二氟苯基氨基)-1-氧代丙烷-2-基氨基甲酸叔丁酯(3.454g，10.96mmol)在AcOH(21.91mL)中的混合物。在50分钟后，在真空中浓缩该混合物。将残余物溶解在DCM(100mL)中，并用碳酸氢钠饱和溶液(50mL x 2)、水(100mL x 1)和盐水(100mL x 1)洗涤。该产品从DCM中沉淀析出。为了溶解沉淀物，加入EtOAc(100mL)。用MgSO4干燥合并的有机层，过滤，并在真空中浓缩。使残余物吸收到硅胶塞上并通过色谱法经由Redi-Sep预装填硅胶柱(80g)纯化，使用0％至100％的在己烷中的EtOAc梯度洗脱，从而获得(S)-1-(5，6-二氟-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基氨基甲酸叔丁酯(2.5025g，8.42mmol，77％产率)，为橙色固体。将该橙色固体悬浮在DCM-己烷(1∶1)中并过滤从而获得(S)-1-(5，6-二氟-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基-氨基甲酸叔丁酯(2.0003g，6.73mmol，61.4％产率)，为粉红色固体：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 12.34(1H，br.s.)，7.47-7.57(2H，m)，7.38(1H，d，J＝7.2Hz)，4.83(1H，quin，J＝6.6Hz)，1.45(3H，d，J＝7.0Hz)，1.40(9H，s)；LC-MS(ESI)m/z 298.1[M+H]+。
(S)-1-(5，6-二氟-1-(5-氟吡啶-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基氨基甲酸叔丁酯
在烧瓶中加入(S)-1-(5，6-二氟-1H-苯并[d]咪唑-2-基)-乙基氨基甲酸叔丁酯(0.506g，1.70mmol)、5-氟吡啶-3-硼酸(0.480g，3.40mmol)、DCM(22.7mL)和吡啶(0.28mL，3.4mmol)，以及乙酸铜(II)(0.464g，2.55mmol)。将该混合物在室温下搅拌57天。然后将该混合物在氯化铵饱和水溶液(50mL)与DCM(50mL)之间进行分配。用氯化铵饱和水溶液(1x 50mL)洗涤有机层。用硫酸钠干燥有机层，过滤并在真空中浓缩。使粗料吸收到硅胶塞上并通过色谱法经由Redi-SepTM预装填硅胶柱(40g)纯化，使用0％至20％的在己烷中的EtOAc梯度洗脱，从而获得(S)-1-(5，6-二氟-1-(5-氟吡啶-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基氨基甲酸叔丁酯和(S)-1-(5，6-二氟-1-(5-氟吡啶-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基氨基甲酸叔丁酯的混合物，为固体：LC-MS(ESI)m/z 393.1[M+H]+。
(S)-1-(5，6-二氟-1-(5-氟吡啶-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙胺
Figure BDA00002500618802182
在室温下搅拌(S)-1-(5，6-二氟-1-(5-氟吡啶-3-基)-1H-苯并[d]-咪唑-2-基)乙基氨基甲酸叔丁酯(0.460g，1.17mmol)在4M的在1，4-二噁烷中的盐酸溶液(5.86mL，23.45mmol)中的混合物。在4h后，将该混合物在DCM(50mL)与水(50mL)之间进行分配。用DCM(1x 50mL)洗涤水层从而除去有机杂质。用碳酸氢钠饱和水溶液(50mL)处理并用DCM(1x 50mL)萃取水层。用硫酸钠干燥有机层，过滤并在真空中浓缩。使粗料吸收到硅胶塞上并通过色谱法经由Redi-SepTM预装填硅胶柱(40g)纯化，使用0％至50％的在DCM中的DCM∶MeOH∶NH4OH  (89∶9∶1)梯度洗脱，从而获得(S)-1-(5，6-二氟-1-(5-氟吡啶-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙胺，为无色浆料：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.84(1H，d，J＝2.7Hz)，8.75(1H，s)，8.24(1H，dt，J＝9.4，2.3Hz)，7.79(1H，dd，J＝11.0，7.4Hz)，7.40(1H，dd，J＝10.4，7.2Hz)，3.96(1H，q，J＝6.6Hz)，2.00(2H，d，J＝4.5Hz)，1.37(3H，d，J＝6.7Hz)；LC-MS(ESI)m/z 293.0[M+H]+。
4-氨基-6-(((1S)-1-(5，6-二氟-1-(5-氟-3-吡啶基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈
在120℃下搅拌4-氨基-6-氯嘧啶-5-甲腈(0.014g，0.091mmol)、(S)-1-(5，6-二氟-1-(5-氟吡啶-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙胺(0.0266g，0.091mmol)，和DIEA(0.048mL，0.273mmol)在正丁醇(0.910mL)中的混合物。在20小时后，将该混合物从热源上移开并在真空中浓缩。向残余物中加入水(50mL)并用DCM(2x 50mL)萃取含水混合物。用硫酸钠干燥有机萃取物，过滤并在真空中浓缩从而获得粗料。使该粗料吸收到硅胶塞上并通过色谱法经由Redi-SepTM预装填硅胶柱(40g)纯化，使用0％至50％的在DCM中的DCM∶MeOH∶NH4OH(89∶9∶1)梯度洗脱，从而获得4-氨基-6-(((1S)-1-(5，6-二氟-1-(5-氟-3-吡啶基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，为棕色固体：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.67(1H，d，J＝2.5Hz)，8.61(1H，s)，8.06(1H，d，J＝8.2Hz)，7.86(1H，dd，J＝11.0，7.4Hz)，7.82(1H，s)，7.75(1H，d，J＝7.8Hz)，7.39(1H，dd，J＝10.4，7.2Hz)，7.19(2H，br.s.)，5.57(1H，quin，J＝7.0Hz)，1.58(3H，d，J＝6.8Hz)；LC-MS(ESI)]m/z 411.0[M+H]+。
实施例93
4-氨基-6-(1-(1-(5-溴吡啶-3-基)-6-氟-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基氨基)嘧啶-5-甲腈
Figure BDA00002500618802201
向微波小瓶中加入在二噁烷(1.91mL)中的4-氨基-6-(1-(1-(5-溴吡啶-3-基)-6-氟-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基氨基)嘧啶-5-甲腈(0.130g，0.287mmol)、乙酸钯(II)(3.22mg，0.014mmol)、2-三正丁基锡烷基吡啶(0.158mL，0.430mmol)，以及2-(二环己基膦基)-2′，4′，6′，-三异丙基-1，1′-联苯(0.014g，0.029mmol)。用氮气吹扫该溶液10分钟，然后在微波辐照下在120℃下搅拌2小时。直接将该溶液上样到硅胶上并经由MPLC纯化(用0-8％的在DCM中的MeOH洗脱)从而产生灰白色固体。通过MPLC的再纯化(用0-6％的在DCM中的MeOH洗脱)产生4-氨基-6-(1-(1-(5-溴吡啶-3-基)-6-氟-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基氨基)嘧啶-5-甲腈(0.130g，0.287mmol)(外消旋)，为白色固体。LC-MS(ESI)m/z 452.2[M+H]+。
4-氨基-6-(((1R)-1-(1-(2，3′-联吡啶-5′-基)-6-氟-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，和4-氨基-6-(((1S)-1-(1-(2，3′-联吡啶-5′-基)-6-氟-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈
使用制备SFC在AD-H柱上分离外消旋的4-(1-(1-(2，3′-联吡啶-5′-基)-6-氟-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基氨基)-6-氨基嘧啶-5-甲腈(0.104mg)从而获得两种级分。在OD-H柱上的第一峰：4-氨基-6-(((1R)-1-(1-(2，3′-联吡啶-5′-基)-6-氟-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，为米色固体。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm1.60(d，J＝6.85Hz，3H)5.51-5.71(m，1H)6.94-7.26(m，4H)7.46(ddd，J＝7.43，4.89，0.98Hz，1H)7.66(br.s.，1H)7.74-7.86(m，2H)7.96(td，J＝7.73，1.76Hz，1H)8.06(d，J＝8.02Hz，1H)8.62(s，1H)8.72(d，J＝4.11Hz，1H)8.78(d，J＝1.37Hz，1H)9.33(d，J＝1.76Hz，1H).LC-MS(ESI)m/z 452.0[M+H]+。在OD-H柱上的第二峰：4-氨基-6-((((S)-4-(1-(1-(2，3′-联吡啶-5′-基)-6-氟-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基氨基)-6-氨基嘧啶-5-甲腈，为米色固体。1HNMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.60(d，J＝6.85Hz，3H)5.63(br.s.，1H)6.98-7.20(m，4H)7.46(ddd，J＝7.43，4.89，0.98Hz，1H)7.66(br.s.，1H)7.74-7.84(m，2H)7.96(td，J＝7.73，1.76Hz，1H)8.06(d，J＝8.02Hz，1H)8.62(s，1H)8.72(dt，J＝4.79，0.83Hz，1H)8.78(d，J＝1.37Hz，1H)9.33(d，J＝1.96Hz，1H).LC-MS(ESI)m/z 452.1[M+H]+。
实施例94
N-(1-(6-氟-1-(5-(甲基磺酰胺基)吡啶-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基)乙酰胺
Figure BDA00002500618802211
向微波小瓶中加入在二噁烷(7.95mL)中的碳酸铯(1.30g，3.98mmol)、Pd2(dba)3(0.146g，0.159mmol)、4，5-双二苯基膦-9，9-二甲基氧杂蒽(0.230g，0.398mmol)、N-(1-(1-(5-溴吡啶-3-基)-6-氟-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基)乙酰胺(0.600g，1.59mmol)，和甲烷磺酰胺(0.166g，1.75mmol)。用氮气给该悬浮液吹扫5分钟，然后在微波辐照下在120℃下搅拌3小时。直接将该溶液上样到硅胶上，然后通过MPLC纯化(使用0-10％的在DCM中的MeOH梯度洗脱)从而产生N-(1-(6-氟-1-(5-(甲基磺酰胺基)吡啶-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基)乙酰胺，为灰白色固体。LC-MS(ESI)m/z 392.1[M+H]+。
N-(5-(2-(1-氨基乙基)-6-氟-1H-苯并[d]咪唑-1-基)吡啶-3-基)甲烷磺酰胺
Figure BDA00002500618802221
根据一般程序D中的步骤D5a使用N-(1-(6-氟-1-(5-(甲基磺酰胺基)吡啶-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基)乙酰胺(0.389g，0.994mmol)制备，从而获得N-(5-(2-(1-氨基乙基)-6-氟-1H-苯并[d]咪唑-1-基)吡啶-3-基)甲烷磺酰胺，为棕褐色油状物。LC-MS(ESI)m/z 350.1[M+H]+。
N-(5-(2-(1-(6-氨基-5-氰基嘧啶-4-基氨基)乙基)-6-氟-1H-苯并[d]咪唑-1-基)吡啶-3-基)甲烷磺酰胺
Figure BDA00002500618802222
根据一般程序D中的步骤D6使用N-(5-(2-(1-氨基乙基)-6-氟-1H-苯并[d]咪唑-1-基)吡啶-3-基)甲烷磺酰胺(0.175g，0.501mmol)制备，从而获得N-(5-(2-(1-(6-氨基-5-氰基嘧啶-4-基氨基)乙基)-6-氟-1H-苯并[d]咪唑-1-基)吡啶-3-基)甲烷磺酰胺，为灰白色固体。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.57(d，J＝6.85Hz，3H)3.15(s，3H)5.50(quin，J＝6.94Hz，1H)7.04(dd，J＝8.90，2.45Hz，1H)7.10-7.18(m，1H)7.20(br.s.，2H)7.69-7.82(m，3H)7.86(s，1H)8.48(d，J＝2.15Hz，2H)10.39(br.s.，1H).LC-MS(ESI)m/z 468.0[M+H]+。
N-(5-(2-((1R)-1-((6-氨基-5-氰基-4-嘧啶基)氨基)乙基)-6-氟-1H-苯并咪唑-1-基)-3-吡啶基)甲烷磺酰胺，和N-(5-(2-((1S)-1-((6-氨基-5-氰基-4-嘧啶基)氨基)乙基)-6-氟-1H-苯并咪唑-1-基)-3-吡啶基)甲烷磺酰胺
Figure BDA00002500618802231
使用制备SFC在AD-H柱上分离外消旋混合物(54mg)从而获得两种级分。在OD-H柱上的第一峰：(R)-N-(5-(2-(1-((6-氨基-5-氰基嘧啶-4-基)氨基)乙基)-6-氟-1H-苯并[d]咪唑-1-基)吡啶-3-基)甲烷磺酰胺，为棕褐色固体。1HNMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.56(d，J＝6.65Hz，3H)3.14(s，3H)5.50(quin，J＝6.90Hz，1H)7.04(dd，J＝8.90，2.25Hz，1H)7.14(td，J＝9.29，2.35Hz，1H)7.20(br.s.，2H)7.69-7.81(m，3H)7.85(s，1H)8.47(d，J＝1.37Hz，2H)10.39(br.s.，1H).LC-MS(ESI)m/z 468.2[M+H]+。在OD-H柱上的第二峰：(S)-N-(5-(2-(1-((6-氨基-5-氰基嘧啶-4-基)氨基)乙基)-6-氟-1H-苯并[d]咪唑-1-基)吡啶-3-基)甲烷磺酰胺，为棕褐色固体。1HNMR(400MHz，DMSO-d6)δppm1.56(d，J＝6.85Hz，3H)3.14(s，3H)5.50(quin，J＝6.94Hz，1H)6.99-7.07(m，1H)7.08-7.17(m，1H)7.20(br.s.，2H)7.67-7.81(m，3H)7.85(s，1H)8.46(s，2H)10.39(br.s.，1H).LC-MS(ESI)m/z 468.2[M+H]+。
实施例95
4-氨基-6-(((1S)-1-(6-氟-1-(3-吡啶基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲酰胺
Figure BDA00002500618802232
在氮气气氛下向冰冷却的碳酸钾(0.027g，0.19mmol)和(S)-4-氨基-6-(1-(6-氟-1-(吡啶-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基氨基)嘧啶-5-甲腈(0.060g，0.16mmol)在DMSO(1.60mL)中的溶液中逐滴加入过氧化氢(在水中的31.3％，0.078mL，0.80mmol)。将该溶液在0℃下搅拌1小时，然后在水与EtOAc之间进行分配。在减压下浓缩有机萃取物，然后通过MPLC纯化(使用0-10％的在DCM中的MeOH梯度洗脱)从而产生4-氨基-6-(((1S)-1-(6-氟-1-(3-吡啶基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲酰胺，为灰白色泡沫状物。1HNMR(400MHz，DMSO-d6)d ppm 1.48(d，J＝6.85Hz，3H)5.26(quin，J＝6.94Hz，1H)6.57(s，2H)6.98(dd，J＝8.90，2.45Hz，1H)7.14(ddd，J＝9.78，8.80，2.54Hz，1H)7.46(s，2H)7.65-7.70(m，1H)7.74(dd，J＝8.80，4.89Hz，1H)7.77(s，1H)7.94(d，J＝7.63Hz，1H)8.05-8.12(m，1H)8.78(dd，J＝4.79，1.47Hz，1H)8.82(d，J＝2.15Hz，1H).LC-MS(ESI)m/z 393.2[M+H]+。
实施例96
N-(3，5-二氟-2-硝基苯基)吡啶-3-胺
Figure BDA00002500618802241
根据一般程序D中的步骤D1使用1，3，5-三氟-2-硝基苯(5.28mL，45.2mmol)和吡啶-3-胺(4.25g，45.2mmol)制备，从而获得N-(3，5-二氟-2-硝基苯基)吡啶-3-胺，为黄色固体。LC-MS(ESI)m/z 252.1[M+H]+。
3，5-二氟-N1-(吡啶-3-基)苯-1，2-二胺
Figure BDA00002500618802242
根据一般程序D中的步骤D2使用N-(3，5-氟-2-硝基苯基)吡啶-3-胺(6.7g，26.7mmol)制备，从而获得3，5-二氟-N1-(吡啶-3-基)苯-1，2-二胺，为棕色固体。LC-MS(ESI)m/z 222.2[M+H]+。
1-(2，4-二氟-6-(吡啶-3-基氨基)苯基氨基)-1-氧代丙烷-2-基氨基甲酸叔丁酯
根据一般程序D中的步骤D3使用3，5-二氟-N1-(吡啶-3-基)苯-1，2-二胺(5.1g，23.06mmol)制备，从而获得1-(2，4-氟-6-(吡啶-3-基氨基)苯基氨基)-1-氧代丙烷-2-基氨基甲酸叔丁酯，为粉红色固体。LC-MS(ESI)m/z 393.2[M+H]+。
N-(1-(4，6-二氟-1-(吡啶-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基)乙酰胺
Figure BDA00002500618802252
根据一般程序D中的步骤D4使用1-(2，4-氟-6-(吡啶-3-基氨基)苯基氨基)-1-氧代丙烷-2-基氨基甲酸叔丁酯(5.44g，13.86mmol)制备，从而获得N-(1-(4，6-氟-1-(吡啶-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基)乙酰胺，为棕褐色固体。LC-MS(ESI)m/z 317.1[M+H]+。
1-(4，6-二氟-1-(吡啶-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙胺
Figure BDA00002500618802253
根据一般程序D中的步骤D5a使用N-(1-(4，6-氟-1-(吡啶-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基)乙酰胺(1.29g，4.08mmol)制备，从而获得1-(4，6-二氟-1-(吡啶-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙胺，为暗紫色固体。LC-MS(ESI)m/z 275.1[M+H]+。
4-氨基-6-(1-(4，6-二氟-1-(吡啶-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基氨基)嘧啶-5-甲腈
Figure BDA00002500618802261
根据一般程序D中的步骤D6使用1-(4，6-二氟-1-(吡啶-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙胺(0.820g，2.99mmol)制备，从而获得4-氨基-6-(1-(4，6-二氟-1-(吡啶-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基氨基)嘧啶-5-甲腈(0.850g，72.5％产率)，为浅粉色固体。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.57(d，J＝6.85Hz，3H)5.47(quin，J＝6.94Hz，1H)6.86(dd，J＝8.41，2.15Hz，1H)7.11-7.29(m，3H)7.54-7.60(m，1H)7.78-7.85(m，2H)8.02(d，J＝8.02Hz，1H)8.66(dd，J＝4.79，1.47Hz，1H)8.75(d，J＝2.15Hz，1H).LC-MS(ESI)m/z 393.2[M+H]+。
4-氨基-6-(((1R)-1-(4，6-二氟-1-(3-吡啶基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，和4-氨基-6-(((1S)-1-(4，6-二氟-1-(3-吡啶基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈
Figure BDA00002500618802262
使用制备SFC在AD-H柱上分离外消旋混合物(300mg)从而获得两种级分。在OD-H柱上的第一峰：4-氨基-6-(((1R)-1-(4，6-二氟-1-(3-吡啶基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，为白色固体。1HNMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.58(d，J＝6.85Hz，3H)5.47(quin，J＝6.94Hz，1H)6.87(dd，J＝8.51，2.05Hz，1H)7.10-7.28(m，3H)7.57(dd，J＝8.12，4.79Hz，1H)7.77-7.85(m，2H)8.02(d，J＝8.02Hz，1H)8.67(dd，J＝4.79，1.47Hz，1H)8.75(d，J＝2.15Hz，1H).LC-MS(ESI)m/z 391.1[M-H]-。在OD-H柱上的第二峰：4-氨基-6-(((1S)-1-(4，6-二氟-1-(3-吡啶基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，为白色固体。LC-MS(ESI)m/z 391.1[M-H]-.1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 1.58(d，J＝6.85Hz，3H)5.47(quin，J＝6.94Hz，1H)6.87(dd，J＝8.51，2.05Hz，1H)7.08-7.29(m，3H)7.57(dd，J＝8.02，4.89Hz，1H)7.76-7.87(m，2H)8.02(d，J＝7.83Hz，1H)8.67(dd，J＝4.69，1.37Hz，1H)8.75(d，J＝1.96Hz，1H)
实施例97：4-氨基-6-(((1S)-1-(6-氟-3-(3-吡啶基)咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈的制备
(S)-(1-(6-氟咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基氨基甲酸苄基酯
Figure BDA00002500618802271
将2-氨基-5-氟吡啶(0.50g，4.45mmol)和(S)-(4-溴-3-氧代丁烷-2-基)氨基甲酸苄基酯(1.3g，4.4mmol)在EtOH(25mL)中的溶液加热至回流过夜。在完成后，将反应混合物冷却至25℃并在真空中除去EtOH。将残余物溶解在EtOAc中并用饱和碳酸氢钠洗涤。用硫酸钠干燥有机层，过滤并浓缩。粗料通过柱色谱法使用硅胶(100-200目)和0-7％的在DCM中的MeOH来进行纯化，从而获得(S)-(1-(6-氟咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基氨基甲酸苄基酯：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ1.502(d，J＝6.8Hz，3H)，4.946-4.980(m，1H)，5.014-5.107(m，2H)，7.344-7.373(m，5H)，7.751-7.842(m，2H)，8.012-8.070(m，2H)，9.025(s，1H)；LC-MS(ESI)]m/z 313.9[M+H]+。
(S)-(1-(6-氟-3-碘咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基)乙基)氨基甲酸苄基酯
在25℃下向(S)-(1-(6-氟咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基氨基甲酸苄基酯(1.2g，3.8mmol)在乙腈(19mL)中的溶液中加入N-碘代琥珀酰亚胺(0.861g，3.82mmol)。将反应混合物在25℃下搅拌过夜。在反应完成后，用水稀释该混合物并用EtOAc萃取。用饱和碳酸氢钠洗涤有机层，用硫酸钠干燥，过滤并浓缩。粗产物通过柱色谱法使用硅胶(100-200目)和0-40％的在己烷中的EtOAc来进行纯化，从而获得(S)-(1-(6-氟-3-碘咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基)乙基)氨基甲酸苄基酯：LC-MS(ESI)]m/z 439.8[M+H]+。
(S)-(1-(6-氟-3-(吡啶-3-基)咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基)乙基)氨基甲酸苄基酯
Figure BDA00002500618802282
在25℃下向(S)-(1-(6-氟-3-碘咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基)乙基)氨基甲酸苄基酯(100mg，0.22mmol)和吡啶3-基-硼酸(30.7mg，0.25mmol)在1，4-二噁烷(2mL)中的溶液中加入氟化铯(66.8mg，0.440mmol)。用氮气给反应混合物脱气30分钟并然后在25℃下加入四(三苯基膦)钯(0)(13mg，0.011mmol)。将该反应混合物在100℃下搅拌过夜。在反应完成后，加入水并用EtOAc萃取。用硫酸钠干燥有机层并在真空中浓缩。残余物通过柱色谱法使用硅胶(100-200目)和0-4％的在DCM中的MeOH来进行纯化，从而获得(S)-(1-(6-氟-3-(吡啶-3-基)咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基)乙基)氨基甲酸苄基酯：LC-MS(ESI)]m/z391.0[M+H]+。
(S)-2-(1-氨基乙基)-3-苯基咪唑并[1，2-a]吡啶-5-甲酸甲酯
将(S)-(1-(6-氟-3-(吡啶-3-基)咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基)乙基)氨基甲酸苄基酯(300mg，0.760mmol)和DMS(0.3mL)在TFA(1mL)中的混合物在25℃下搅拌过夜。在真空中浓缩该混合物。将残余物溶解在EtOAc中并用碳酸氢钠饱和溶液洗涤。用碳酸氢钠饱和溶液洗涤有机层，用硫酸钠干燥，过滤并在真空中浓缩从而获得(S)-2-(1-氨基乙基)-3-苯基咪唑并[1，2-a]吡啶-5-甲酸甲酯。该粗产物可直接使用而无需进一步纯化。
4-氨基-6-(((1S)-1-(6-氟-3-(3-吡啶基)咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈
Figure BDA00002500618802292
在25℃下向在正丁醇(4.4mL)中的粗(S)-2-(1-氨基乙基)-3-苯基咪唑并[1，2-a]吡啶-5-甲酸甲酯(190mg，0.74mmol)和4-氨基-6-氯-嘧啶-5-甲腈(114mg，0.74mmol)中加入DIEA(0.36mL，2.2mmol)。将反应混合物在110℃下搅拌过夜。向反应混合物中加入水并用EtOAc萃取。用硫酸钠干燥有机层，过滤并在真空中浓缩。残余物通过柱色谱法使用硅胶(100-200目)和0-3％的在DCM中的MeOH来进行纯化，从而获得4-氨基-6-(((1S)-1-(6-氟-3-(3-吡啶基)咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈(25mg)：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ1.522(d，J＝6.8Hz，3H)，5.398-5.466(m，1H)，7.036(d，1H，J＝7.6Hz)，7.229(br s，2H)，7.395-7.446(m，1H)，7.550-7.581(m，1H)，7.728-7.765(m，1H)，8.008(d，1H，J＝8Hz)，8.317-8.333(m，1H)，8.663-8.675(m，1H).，8.717(d，1H，J＝1.2Hz)；LC-MS(ESI)]m/z 375.16[M+H]+。
生物测定
PI3K的重组表达
将N-末端用polyHis标记物标记的PI3k α、β和δ的全长p110亚基与p85一起用杆状(Baculo)病毒表达载体在sf9昆虫细胞中进行共表达。通过依次进行Ni-NTA、Q-HP、Superdex-100色谱来纯化P110/p85异二聚体。将纯化的α、β和δ同工酶在-20℃下贮存在20mMTris(pH 8)、0.2M NaCl、50％甘油、5mM DTT、2mM胆酸钠中。将N-末端用polyHis标记物标记的截短的PI3Kγ，残基114-1102用杆状病毒在Hi5昆虫细胞中进行表达。通过依次进行Ni-NTA、Superdex-200、Q-HP色谱来纯化γ同工酶。将γ同工酶在-80℃下在NaH2PO4(pH 8)、0.2M NaCl、1％乙二醇、2mM β-巯基乙醇中冷冻贮存。
α β δ γ
50mM Tris pH 8 pH 7.5 pH 7.5 pH 8
MgCl2 15mM 10mM 10mM 15mM
胆酸钠 2mM 1mM 0.5mM 2mM
DTT 2mM 1mM 1mM 2mM
ATP 1uM 0.5uM 0.5uM 1uM
PIP2 无 2.5uM 2.5uM 无
时间 1小时 2小时 2小时 1小时
[酶] 15nM 40nM 15nM 50nM
体外酶测定
在白色聚丙烯平板(Costar 3355)中，使用25μL具有上述最终浓度的组分进行测定。磷脂酰肌醇磷酸基受体PtdIns(4，5)P2P4508得自Echelon Biosciences。在这些条件下，a和γ同工酶的ATPase活性没有被PtdIns(4，5)P2显著剌激，并因此从这些同工酶的测定中省去。将测试化合物溶解在在二甲亚砜中，并且用三倍系列稀释进行稀释。将在DMSO(1μL)中的化合物加到每个测试孔中，并且测定相对于具有酶和不具有酶的不含化合物的反应的抑制。在室温下测定培育之后，停止反应，并且根据制造商说明书通过加入等体积的市售ATP生物发光试剂盒(Perkin Elmer EasyLite)来测定残余ATP，并且使用AnalystGT发光计进行检测。
用抗-IgM剌激人B细胞增殖
分离人B细胞：
从Leukopac或者从人新鲜血液中分离PBMC。通过使用Miltenyi方案和B细胞分离试剂盒II来分离人B细胞。-使用AutoMac.柱纯化人B细胞。
人B细胞的活化
使用96孔平底板，在每个孔中接种50000个在B细胞增殖培养基(DMEM+5％FCS，10mM Hepes，50μM 2-巯基乙醇)中的纯化的B细胞；150μL培养基含有250ng/mL CD40L-LZ重组蛋白(Amgen)和2μg/mL抗-人IgM抗体(Jackson ImmunoReseachLab.#109-006-129)，与50μL含有PI3K抑制剂的B细胞培养基混合，并且在37℃温育器中培育72小时。72小时后，用0.5-1uCi/孔3H胸苷将B细胞脉冲标记过夜～18小时，并且使用TOM收获器收获细胞。
用IL-4剌激人B细胞增殖
分离人B 细胞：
从Leukopac或者从人新鲜血液中分离人PBMC。使用Miltenyi方案-B细胞分离试剂盒分离人B细胞。使用AutoMacs柱纯化人B细胞。
人B细胞的活化
使用96孔平底板，在每个孔中接种50000个在B细胞增殖培养基(DMEM+5％FCS，50μM 2-巯基乙醇，10mM Hepes)中的纯化的B细胞。培养基(150μL)含有250ng/mL CD40L-LZ重组蛋白(Amgen)和10ng/mL IL-4(R&D system#204-IL-025)，与50150μL含有化合物的B细胞培养基混合，并且在37℃温育器中培育72小时。72小时后，用0.5-1uCi/孔3H胸苷将B细胞脉冲标记过夜～18小时，并且使用TOM收获器收获细胞。
特异性T抗原(破伤风类毒素)诱导的人PBMC增殖测定
由冷冻原液制备人PBMC，或者使用Ficoll梯度从新鲜人血液中纯化出人PBMC。使用96孔圆底平板，并在每个孔中接种2x105个在培养基(RPMI1640+10％FCS，50uM 2-巯基乙醇，10mM Hepes)中的PBMC。对于IC50测定，在以半对数增加的10μM至0.001μM内以一式三份测试PI3K抑制剂。将破伤风类毒素，T细胞特异性抗原(University of Massachusetts Lab)以1μg/mL加入，并且在37℃的温育器中陪育6天。6天后，收集上清液用于IL2ELISA测定，然后用3H胸苷将细胞脉冲～18小时以测量增殖。
用于检测Ia类和III类PI3K的抑制的GEP测定
由致有丝分裂因子(IGF-1、PDGF、胰岛素、凝血酶、NGF等)活化的Ia类PI3K调节AKT1(PKBa)。作为对于致有丝分裂剌激的反应，AKT1从胞质溶胶易位到质膜上
叉头(Forkhead)(FKHRLl)是AKT1的底物。当它被AKT磷酸化(存活/生长)时它在细胞质中。AKT的抑制(停滞/细胞凋亡)-叉头易位到细胞核中。
FYVE结构域结合至PI(3)P。大部分由III类PI3K的组成性作用产生。
AKT膜边缘波动测定(CHO-IR-AKT1-EGFP细胞/通用电气医疗集团(GE Healthcare))
用测定缓冲液洗涤细胞。用在测定缓冲液中的化合物处理1小时。加入10ng/mL胰岛素。在室温下10分钟后，进行固定并且成像。
叉头易位测定(MDA MB468 叉头-各种GFP细胞)
用在生长培养基中的化合物处理细胞1小时。进行固定并且成像。
III类PI(3)P测定(U2OS EGFP-2XFYVE细胞/通用电气医疗集团(GE Healthcare))
用测定缓冲液洗涤细胞。用在测定缓冲液中的化合物处理1小时。进行固定并且成像。
所有3个测定的对照都是10uM渥曼青霉素(Wortmannin)：
AKT在细胞质中
叉头在细胞核中
PI(3)P从内体中耗尽
生物标记物测定：CD69或B7.2(CD86)表达的B-细胞受体剌激
用10μg/mL抗-IgD(Southern Biotech，#9030-01)剌激肝素化人全血。然后将90μL剌激的血液在96-孔平板的每个孔中等份试样化，并且用10μL在IMDM+10％FBS(Gibco)中稀释的不同浓度的阻断化合物(10-0.0003μM)处理。在37℃将样本一起培育4小时(对于CD69表达)至6小时(对于B7.2表达)。将处理的血液(50μL)转移到96-孔深孔平板(Nunc)中，以用每种10μL的CD45-PerCP(BD Biosciences，#347464)、CD19-FITC(BD Biosciences，#340719)和CD69-PE(BDBiosciences，#341652)对抗体进行染色。将第二份50μL处理的血液转移到第二个96-孔深孔平板中，以用每种10μL的CD19-FITC(BDBiosciences，#340719)和CD86-PeCy5(BD Biosciences，#555666)对抗体进行染色。所有染色都是在黑暗中于室温下进行15-30分钟。然后将血液裂解，并且在室温下使用450μL FACS裂解溶液(BDBiosciences，#349202)固定15分钟。然后将样本在PBS+2％FBS中洗涤两次，之后进行FACS分析。将样本封闭在(gated)CD45/CD19双阳性细胞上用于CD69染色，或者封闭在CD19阳性细胞上用于CD86染色。
γ计数器筛选(Counterscreen)：剌激人单核细胞用于磷酸-AKT表达
将人单核细胞细胞系THP-1保持在RPMI+10％FBS(Gibco)中。在剌激前一天，使用台盼蓝排除在血细胞计数器上对细胞计数，并且将细胞以1x 106个细胞/mL培养基的浓度悬浮。然后将100μL细胞+培养基(1x 105个细胞)在4个96-孔深孔培养皿(Nunc)中等份试样化以测试8种不同化合物。将细胞静置过夜，然后用不同浓度(10-0.0003μM)的阻断化合物进行处理。在37℃下将在培养基中稀释的化合物(12μL)加到细胞中并保持10分钟。将人MCP-1(12μL，R&DDiagnostics，#279-MC)稀释在培养基中，并且以50ng/mL的终浓度加到每个孔中。在室温下持续剌激2分钟。向每个孔中加入预热的FACSPhosflow细胞溶解/固定(Lyse/Fix)缓冲液(1mL，37℃)(BDBiosciences，#558049)。然后将平板再在37℃下培育10-15分钟。将平板以1500rpm旋转(spun)10分钟，抽吸出上清液，并且在剧烈摇动下向每个孔中加入1mL冰冷的90％MEOH。然后将平板在-70℃下培育过夜或者或在冰上培育30分钟，然后进行抗体染色。将平板旋转，并且在PBS+2％FBS(Gibco)中洗涤两次。抽吸出洗涤液，并且将细胞悬浮在剩余缓冲液中。在室温下于摇动下向每种样品中以1∶100加入家兔pAKT(50μL，Cell Signaling，#4058L)并且保持1小时。洗涤细胞并且以1500rpm旋转10分钟。抽吸出上清液，并且将细胞悬浮在剩余缓冲液中。在室温下于摇动下以1∶500加入第二抗体山羊抗-家兔Alexa 647(50μL，Invitrogen，#A21245)并且保持30分钟。然后将细胞在缓冲液中洗涤一次，并且悬浮在150μL缓冲液中用于FACS分析。需要通过吸移使细胞充分分散，之后在流式血细胞计数器上运行。将细胞在LSR II (Becton Dickinson)上运行，并且在前置和侧向散射器上封闭以测定pAKT在单核细胞群体中的表达水平。
γ计数器筛选：剌激单核细胞以在小鼠骨髓中进行磷酸化AKT表达
从5只雌性BALB/c小鼠(Charles River Labs.)中切下小鼠股骨，并且收集到RPMI+10％FBS培养基(Gibco)中。通过切下股骨末端并且通过使用25规格针头用1mL培养基冲洗来取出小鼠骨髓。然后使用21规格针头将骨髓分散在培养基中。将培养基体积增加到20mL，并且使用台盼蓝排除在血细胞计数器上对细胞计数。然后将细胞悬浮液增加至7.5x 106个细胞/1mL培养基，并且将100μL(7.5x 105个细胞)在4个96-孔深孔培养皿(Nunc)中等份试样化以测试8种不同化合物。将细胞在37℃下静置2小时，然后用不同浓度(10-0.0003μM)的阻断化合物进行处理。在37℃下将在培养基中稀释的化合物(12μL)加到骨髓细胞中并保持10分钟。将小鼠MCP-1(12μL，R&DDiagnostics，#479-JE)稀释在培养基中，并且以50ng/mL的终浓度加到每个孔中。在室温下持续剌激2分钟。向每个孔中加入1mL 37℃预热的FACS Phosflow细胞溶解/固定(Lyse/Fix)缓冲液(BDBiosciences，#558049)。然后将平板在37℃下再培育10-15分钟。将平板以1500rpm旋转10分钟。抽吸出上清液，并且在剧烈摇动下向每个孔中加入1mL冰冷的90％MEOH。然后将平板在-70℃培育过夜或者或冰上培育30分钟，之后进行抗体染色。将平板旋转，并且在PBS+2％FBS(Gibco)中洗涤两次。抽吸出洗涤液，并且将细胞悬浮在剩余缓冲液中。然后在室温下向每个孔中加入FC阻断剂(2μL，BDPharmingen，#553140)并保持10分钟。阻断后，在室温下于摇动下向每种样本中加入50μL在缓冲液中稀释的第一抗体；以1∶50加入CD11b-Alexa488(BD Biosciences，#557672)，以1∶50加入CD64-PE(BD Biosciences，#558455)以及以1∶100加入家兔pAKT(CellSignaling，#4058L)，保持1小时。向细胞中加入洗涤缓冲液并且以1500rpm旋转10分钟。抽吸出上清液，并且将细胞悬浮在剩余缓冲液中。在室温下于摇动下以1∶500加入第二抗体山羊抗-家兔Alexa647(50μL，Invitrogen，#A21245)，保持30分钟。然后将细胞在缓冲液中洗涤一次，并且悬浮在100μL缓冲液中用于FACS分析。将细胞在LSR II(Becton Dickinson)上运行，并且封闭在CD11b/CD64双阳性细胞上以测定pAKT在单核细胞群体中的表达水平。
pAKT体内测定
通过管饲法(口服管饲针Popper&Sons，New Hyde Park，NY)给小鼠(转基因细胞系3751，雌性，10-12周，Amgen Inc，Thousand Oaks，CA)口服施用载体和化合物(0.2mL)，15分钟后，静脉内注射(0.2mL)抗-IgM FITC(50ug/小鼠)(Jackson Immuno Research，West Grove，PA)。45分钟后，将小鼠在CO2室内处死。经由心脏穿剌取出血液(0.3mL)-(1cc 25g注射器，Sherwood，St.Louis，MO)，并且转移到15mL锥形瓶(Nalge/Nunc International，Denmark)中。立即用6.0mL BD Phosflow细胞溶解/固定(Lyse/Fix)缓冲液(BD Bioscience，San Jose，CA)固定血液，反转3次，并且置于37℃水浴中。取出一半脾，并且转移到含有0.5mL PB S(Invitrogen Corp，Grand Island，NY)的eppendorf管中。使用组织研磨器(Pellet Pestle，Kimble/Kontes，Vineland，NJ)将脾磨碎，并且立即用6.0mL BD Phosflow细胞溶解/固定(Lyse/Fix)缓冲液固定，反转3次，并且置于37℃水浴中。一旦已经收集了组织，就将小鼠通过颈椎脱臼法处死，并且处置尸体。15分钟后，将15mL锥形瓶从37℃水浴中取出，并放置在冰上直至进一步处理组织。将磨碎的脾经由70μm细胞过滤器(BD Bioscience，Bedford，MA)过滤到另一只15mL锥形瓶中，并且用9mL PBS洗涤。将脾细胞和血液以2,000rpm旋转10分钟(冷)，并且抽吸出缓冲液。将细胞重悬在2.0mL冷(-20℃)90％甲醇(Mallinckrodt Chemicals，Phillipsburg，NJ)中。缓慢地加入MeOH，同时将锥形瓶快速涡旋。然后将组织在-20℃下贮存直至可以将细胞染色用于FACS分析。
多剂量TNP免疫
在免疫之前第0天，通过后眼眶采血法从7-8周龄的BALB/C雌性小鼠(Charles River Labs.)中采集血液。让血液凝固30分钟并在血清微量采集管(microtainer)(Becton Dickinson)中以10,000rpm旋转10分钟。收集血清，在Matrix管(Matrix Tech.Corp.)中等份试样化，并且在-70℃下贮存直至进行ELISA。根据分子的寿命在免疫之前以及在随后的时间经口给予小鼠化合物。然后使用50μgTNP-LPS(BiosearchTech.，#T-5065)、50μg TNP-Ficoll(Biosearch Tech.，#F-1300)，或100μgTNP-KLH(Biosearch Tech.，#T-5060)+1％的在PB S中的明矾(Brenntag，#3501)免疫小鼠。在免疫之前1小时，通过每10分钟将混合物轻微反转3-5次来制备TNP-KLH+明矾溶液。在第5天，最后一次治疗后，将小鼠用CO2处死，并且进行心脏穿剌。让血液凝固30分钟并在血清微量采集管中以10,000rpm旋转10分钟。收集血清，在Matrix管中等份试样化，并且在-70℃下贮存直至进行进一步分析。然后通过ELISA测量血清中的TNP-特异性IgG1、IgG2a、IgG3、IgM的量。使用TNP-BSA(Biosearch Tech.，#T-5050)来捕获TNP-特异性抗体。使用TNP-BSA(10μg/mL)涂布384-孔ELISA平板(Corning Costar)过夜。然后洗涤平板，并且使用10％BSA ELISA阻断溶液(KPL)阻断1小时。阻断后，洗涤ELISA平板，并对血清样本/标准物进行连续稀释并且让其结合至平板1小时。洗涤平板，并且将Ig-HRP缀合的第二抗体(山羊抗-小鼠IgG1，Southern Biotech#1070-05，山羊抗-小鼠IgG2a，Southern Biotech#1080-05，山羊抗-小鼠IgM，SouthernBiotech#1020-05，山羊抗-小鼠IgG3，Southern Biotech#1100-05)以1∶5000稀释，并且在平板上培育1小时。使用TMB过氧化物酶溶液(SureBlue Reserve TMB from KPL)显现抗体。洗涤平板，并且根据所分析的Ig让样本在TMB溶液中显像大约5-20分钟。用2M硫酸停止该反应，并且在450nm的OD下读取平板。
PI3k δKi(μM)值如下：
Figure BDA00002500618802381
Figure BDA00002500618802391
Figure BDA00002500618802401
Figure BDA00002500618802411
Figure BDA00002500618802421
Figure BDA00002500618802431
Figure BDA00002500618802441
Figure BDA00002500618802451
Figure BDA00002500618802461
Figure BDA00002500618802481
Figure BDA00002500618802491
为了治疗PI3Kδ-介导的疾病(如类风湿关节炎、关节强硬性脊椎炎、骨关节炎、牛皮癣性关节炎、牛皮癣、炎症性疾病，和自身免疫性疾病)，可以将本发明化合物以含有常规药学上可接受的载体、佐剂和媒介物的单位剂量制剂形式经口施用、肠胃外施用、通过吸入喷雾施用、直肠施用，或局部施用。如本文使用的术语肠胃外包括皮下、静脉内、肌内、胸骨内、输注技术或腹腔内。
本文中疾病和病症的治疗旨在还包括给受试者(即动物，优选哺乳动物，最优选人)预防性地施用本发明化合物、其药学上的盐，或任一种药物组合物，所述受试者据信需要预防治疗，例如类风湿性关节炎、关节强硬性脊椎炎、骨关节炎、牛皮癣关节炎、牛皮癣、炎症性疾病和自身免疫性疾病等。
使用本发明化合物和/或本发明组合物治疗PI3Kδ-介导的疾病、癌症和/或高血糖的给药方案取决于多种因素，包括疾病类型，患者的年龄、体重、性别、健康状况，病状严重程度，施用途径，以及所采用的具体化合物。因此，给药方案可以有很大的变化，但是可以照常规使用标准方法确定。约0.01mg/kg体重/天至30mg/kg体重/天，优选约0.1mg/kg至10mg/kg，更优选约0.25mg/kg至1mg/kg的剂量水平对于本文公开的所有使用方法都是有用的。
本发明药物活性化合物可以根据常规制药方法来加工，以制备用于施用给包括人和其他哺乳动物在内的患者的药剂。
对于口服施用，药物组合物可以为例如胶囊、片剂、混悬液或液体剂形式。药物组合物优选被制备成含有给定量活性成分的剂量单位形式。例如，这些剂量单位可以含有约1mg至2000mg，优选约1mg至500mg，更优选约5mg至150mg的活性成分。对于人或其他哺乳动物，合适的日剂量可以根据患者的病状及其他因素而有很大的变化，但是也可以使用常规方法来确定。
活性成分还可以作为含有合适载体的组合物而通过注射施用，所述载体包括盐水、葡萄糖或水。每日胃肠外给药方案将为约0.1mg/kg总体重至约30mg/kg总体重，优选为约0.1mg/kg总体重至约10mg/kg总体重，更优选为约0.25mg/kg总体重至1mg/kg总体重。
注射用制剂(如无菌注射用水性或油性混悬液)可根据已知技术使用合适的分散剂或润湿剂和混悬剂配制。无菌注射用制剂也可以为在无毒胃肠外可接受的稀释剂或溶剂中的无菌注射用溶液或混悬液，例如在1，3-丁二醇中的溶液。在可接受的媒介物和溶剂当中，可以使用水、林格氏溶液和等渗氯化钠溶液。另外，无菌的不挥发油通常用作溶剂或混悬介质。为达到这个目的，可采用任何温和的不挥发油，包括合成的甘油单酯或甘油双酯。另外，脂肪酸(例如油酸)可用于制备注射剂。
通过直肠施用药物的栓剂可通过将该药物与合适的无剌激性赋形剂(如可可油和聚乙二醇)混合来制备，所述赋形剂在常温下为固体，但是在直肠温度下为液体，并因此在直肠中融化并释放药物。
本发明化合物的活性成分的合适的局部剂量为0.1mg至150mg，每天施用1-4次，优选1或2次。对于局部施用，活性成分可以占制剂重量的0.001％至10％w/w，例如，1重量％至2重量％，但是其可以占制剂的高达10％w/w，但是优选不超过5％w/w，更优选为0.1％-1％。
适于局部施用的制剂包括适于穿透皮肤的液体制剂或半液体制剂(例如搽剂、洗剂、软膏剂、乳膏剂或糊剂)以及适于施用于眼睛、耳朵或鼻子的滴剂。
为了施用，通常将本发明化合物与适于指定施用途径的一种或多种佐剂组合。本发明化合物可以与以下成分混合：乳糖、蔗糖、淀粉粉末、链烷酸的纤维素酯、硬脂酸、滑石粉、硬脂酸镁、氧化镁、磷酸和硫酸的钠盐和钙盐、阿拉伯胶、明胶、藻酸钠、聚乙烯吡咯烷酮和/或聚乙烯醇，并且可被制成片剂或制成胶囊用于常规施用。或者，可以将本发明化合物溶解在盐水、水、聚乙二醇、丙二醇、乙醇、玉米油、花生油、棉籽油、芝麻油、黄蓍胶和/或各种缓冲液中。其他佐剂和施用方式是药物领域熟知的。载体或稀释剂可以包括时间延迟材料，如单独的单硬脂酸甘油酯或二硬脂酸甘油酯，或者其与蜡或本领域熟知的其他材料一起使用。
药物组合物可以被制备成固体形式(包括颗粒剂、散剂或栓剂)或液体形式(例如溶液剂、混悬剂或乳剂)。可以对药物组合物实施常规药物操作例如灭菌和/或药物组合物可以含有常规佐剂如防腐剂、稳定剂、润湿剂、乳化剂、缓冲剂等。
用于口服施用的固体剂型可以包括胶囊剂、片剂、丸剂、散剂和颗粒剂。在此类固体剂型中，可以将活性化合物与至少一种惰性稀释剂(如蔗糖、乳糖或淀粉)混合。在正常实践中，此类剂型还可以包含除了惰性稀释剂以外的另外物质，例如润湿剂如硬脂酸镁。在胶囊剂、片剂和丸剂的情况下，该剂型还可以包含缓冲剂。片剂和丸剂另外可以用肠溶包衣来制备。
用于口服施用的液体剂型可以包括药学上可接受的乳剂、溶液剂、混悬剂、糖浆剂和酏剂，其含有本领域常用的惰性稀释剂如水。此类组合物还可以包含佐剂如润湿剂、甜味剂、调味剂和芳香剂。
本发明化合物可以具有一个或多个不对称碳原子，并且因而能够以光学异构体形式以及其外消旋或非外消旋混合物形式存在。光学异构体可以通过根据常规工艺，例如通过用光学活性酸或碱处理形成非对映体盐来拆分外消旋混合物而获得。合适的酸的实例为酒石酸、二乙酰基酒石酸、二苯甲酰基酒石酸、二甲苯甲酰基酒石酸和樟脑磺酸，然后通过结晶分离出非对映体混合物，之后从这些盐释放出光学活性碱。分离光学异构体的另一种工艺涉及使用手性色谱柱，其为最大化对映体的分离的最佳选择。又一种可采用的方法涉及通过使本发明化合物与呈活化形式的光学纯酸或光学纯异氰酸酯反应来合成共价非对映体分子。所合成的非对映体可以通过常规方式(如色谱法、蒸馏、结晶或升华)来分离，然后水解以提供对映体纯的化合物。本发明的光学活性化合物还可以通过使用活性原料来获得。这些异构体可以为游离酸、游离碱、酯或盐的形式。
同样，本发明化合物可以作为异构体存在，该异构体是具有相同分子式，但是彼此之间的原子排列不同的化合物。特别地，本发明化合物的亚烷基取代基是通常且优先排列的并且插到分子内，如这些基团中的每个的定义中所指出的那样，从左向右读。然而，在某些情况下，本领域技术人员应当理解，可以制备其中这些取代基在分子中相对于其他原子的方向是相反的化合物。也就是说，待插入的取代基与所指出的取代基相同，但是以相反方向插到分子内。本领域技术人员应当理解，本发明化合物的这些异构体形式都包括在本发明范围内。
本发明化合物可以以衍生自无机酸或有机酸的盐形式使用。该盐包括但不限于以下：乙酸盐、己二酸盐、藻酸盐、柠檬酸盐、天冬氨酸盐、苯甲酸盐、苯磺酸盐、硫酸氢盐、丁酸盐、樟脑酸盐、樟脑磺酸盐、二葡糖酸盐、环戊烷丙酸盐、十二烷基硫酸盐、乙烷磺酸盐、葡糖庚酸盐、甘油磷酸盐、半硫酸盐、庚酸盐、己酸盐、富马酸盐、盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、2-羟基乙烷磺酸盐、乳酸盐、马来酸盐、甲烷磺酸盐、烟酸盐、2-萘磺酸盐、草酸盐、棕榈酸盐、果胶酸盐(pectinate)、过硫酸盐、2-苯基丙酸盐、苦味酸盐、新戊酸盐、丙酸盐、琥珀酸盐、酒石酸盐、硫氰酸盐、甲苯磺酸盐、甲磺酸盐和十一烷酸盐。此外，碱性含氮基团可以用诸如以下的试剂季铵化：低级烷基卤化物例如甲基、乙基、丙基和丁基的氯化物、溴化物和碘化物；硫酸二烷酯例如硫酸二甲酯、硫酸二乙酯、硫酸二丁酯和硫酸二戊酯，长链卤化物如癸基、月桂基、十四烷基和十八烷基的氯化物、溴化物和碘化物，芳烷基卤化物如苄基溴化物和苯乙基溴化物等。由此获得水溶性或油溶性或可分散的产物。
可用于形成药学上可接受的酸加成盐的酸的实例包括此类无机酸，如盐酸、硫酸和磷酸，以及有机酸例如草酸、马来酸、琥珀酸和柠檬酸。其他实例包括与碱金属或碱土金属(如钠、钾、钙或镁)或与有机碱形成的盐。
本发明范围内还包括含有羧酸或羟基的基团的药学上可接受的酯，包括本发明化合物的代谢不稳定酯或前药形式。代谢不稳定酯是可以使例如该化合物的相应未酯化形式的血液量增加以及延长该化合物的相应未酯化形式的效力的酯。前药形式是不以分子的活性形式施用，但是在一些体内活动或生物转化(例如代谢，例如酶促或水解裂解)之后，变得有治疗活性的形式。有关酯的前药的一般讨论请参见Svensson and Tunek Drug Metabolism Reviews 165(1988)及Bundgaard Design of Prodrugs，Elsevier(1985)。掩蔽的羧酸根阴离子的实例包括多种酯类，如烷基(例如甲基、乙基)、环烷基(例如环己基)、芳烷基(例如苄基、对甲氧基苄基)和烷基羰基氧基烷基(例如新戊酰氧基甲基)。胺已经被掩蔽成芳基羰基氧基甲基取代的衍生物，所述芳基羰基氧基甲基取代的衍生物在体内被酯酶裂解，释放出游离药物和甲醛(Bungaard J.Med.Chem.2503(1989))。此外，含有酸性NH基团(如咪唑、酰亚胺、吲哚等)的药物已经用N-酰基氧基甲基掩蔽(Bundgaard Design of Prodrugs，Elsevier(1985))。羟基已经被掩蔽成酯类和醚类。EP 039,051(Sloan and Little，4/11/81)公开了曼尼希碱异羟肟酸前药、它们的制备及用途。本发明化合物的酯类可以包括例如甲基、乙基、丙基和丁基酯，以及在酸性部分与含有羟基的部分之间形成的其他合适的酯。代谢不稳定酯可以包括例如甲氧基甲基，乙氧基甲基，异丙氧基甲基，α-甲氧基乙基，诸如α-((C1-C4)烷氧基)乙基的基团如甲氧基乙基、乙氧基乙基、丙氧基乙基、异丙氧基乙基等；2-氧代-1，3-二氧杂环戊烯-4-基甲基，如5-甲基-2-氧代-1，3-二氧杂环戊烯-4-基甲基等；C1-C3烷基硫基甲基，例如甲基硫基甲基、乙基硫基甲基、异丙基硫基甲基等；酰氧基甲基，例如新戊酰氧基甲基、α-乙酰氧基甲基等；乙氧基羰基-1-甲基；或α-酰基氧基-α-取代的甲基，例如α-乙酰氧基乙基。
进一步地，本发明化合物可以结晶固体形式存在，所述结晶固体可以从常用溶剂(如乙醇、N，N-二甲基-甲酰胺、水等)中结晶出来。因此，本发明化合物的结晶形式可以母体化合物或其药学上可接受的盐的多晶型物、溶剂化物和/或水合物形式存在。所有此类形式同样都应被解读为落在本发明范围内。
虽然本发明化合物可以作为单独的活性药剂施用，但是它们还可以与一种或多种本发明化合物或其他药剂组合使用。当组合施用时，治疗剂可以被配制成在相同时间或不同时间给予的单独的组合物，或者治疗剂可以作为单一组合物给予。
上面仅仅是举例说明了本发明，而并非旨在将本发明限制于所公开的化合物。可以在由所附权利要求书限定的本发明范围和实质内对本发明作出许多改变和变化，这对本领域熟练技术人员是明显的。
通过前面的描述，本领域技术人员可以容易地确定本发明的必要特征，并且在不背离本发明的精神和范围的情况下，可以针对各种应用和条件对本发明作出各种改变和更改。

Claims (7)

1. 一种具有如下结构的化合物：
Figure DEST_PATH_IMAGE002
、
Figure DEST_PATH_IMAGE004
、或 
Figure DEST_PATH_IMAGE006
，
或其任何药学上可接受的盐，其中：
X1为C(R10)或N； 
X2为C(R12)或N； 
X3为C或N；
X4为C或N；
X5为C或N；
X6为C或N；其中X3、X4、X5和X6中的至少两个是C；
Y为N(R8)、O或S；
Z为S、O或NR11；
n为0、1、2或3；
R1为直接键接、C1-4烷基连接、OC1-2烷基连接、C1-2烷基O连接或O-连接的饱和、部分饱和或不饱和的3-、4-、5-、6-或7-元单环或者8-、9-、10-或11-元双环，所述环含有0、1、2、3或4个选自N、O和S的原子，但是含有不超过一个的O或S原子，并且所述环被0、1、2或3个独立地选自以下的取代基取代：卤代、C1-6烷基、C1-4卤代烷基、氰基、硝基、-C(=O)Ra、-C(=O)ORa、-C(=O)NRaRa、-C(=NRa)NRaRa、-ORa、-OC(=O)Ra、-OC(=O)NRaRa、-OC(=O)N(Ra)S(=O)2Ra、-OC2-6烷基NRaRa、-OC2-6烷基ORa、-SRa、-S(=O)Ra、-S(=O)2Ra、-S(=O)2NRaRa、-S(=O)2N(Ra)C(=O)Ra、-S(=O)2N(Ra)C(=O)ORa、-S(=O)2N(Ra)C(=O)NRaRa、-NRaRa、-N(Ra)C(=O)Ra、-N(Ra)C(=O)ORa、-N(Ra)C(=O)NRaRa、-N(Ra)C(=NRa)NRaRa、-N(Ra)S(=O)2Ra、-N(Ra)S(=O)2NRaRa、-NRaC2-6烷基NRaRa和-NRaC2-6烷基ORa；其中所述环的可用碳原子另外被0、1或2个氧代或硫代基团取代；并且其中所述环另外被0或1个饱和5-或6-元单环取代，所述饱和5-或6-元单环含有1、2、3或4个选自N、O和S的原子，但是含有不超过一个的O或S原子，并且所述饱和5-或6-元单环被0、1、2或3个独立地选自卤代、C1-6烷基、C1-4卤代烷基和氰基的取代基取代；或者R1为被1或2个选自以下的取代基取代的C1-4烷基：氰基、硝基、-C(=O)Ra、-C(=O)ORa、-C(=O)NRaRa、-C(=NRa)NRaRa、-ORa、-OC(=O)Ra、-OC(=O)NRaRa、-OC(=O)N(Ra)S(=O)2Ra、-OC2-6烷基NRaRa、-OC2-6烷基ORa、-SRa、-S(=O)Ra、-S(=O)2Ra、-S(=O)2NRaRa、-S(=O)2N(Ra)C(=O)Ra、-S(=O)2N(Ra)C(=O)ORa、-S(=O)2N(Ra)C(=O)NRaRa、-NRaRa、-N(Ra)C(=O)Ra、-N(Ra)C(=O)ORa、-N(Ra)C(=O)NRaRa、-N(Ra)C(=NRa)NRaRa、-N(Ra)S(=O)2Ra、-N(Ra)S(=O)2NRaRa、-NRaC2-6烷基NRaRa和-NRaC2-6烷基ORa；
R2选自H、卤代、C1-6烷基、C1-4卤代烷基、氰基、硝基、ORa、NRaRa、-C(=O)Ra、-C(=O)ORa、-C(=O)NRaRa、-C(=NRa)NRaRa、-S(=O)Ra、-S(=O)2Ra、-S(=O)2NRaRa、-S(=O)2N(Ra)C(=O)Ra、-S(=O)2N(Ra)C(=O)ORa、-S(=O)2N(Ra)C(=O)NRaRa；
R3选自H、卤代、硝基、氰基、C1-4烷基、OC1-4烷基、OC1-4卤代烷基、NHC1-4烷基、N(C1-4烷基)C1-4烷基、C1-4卤代烷基、-C(=O)ORa、-C(=O)NRaRa、-C(=NRa)NRaRa、-ORa、-OC(=O)Ra、-OC(=O)NRaRa、-OC(=O)N(Ra)S(=O)2Ra、-OC2-6烷基NRaRa、-OC2-6烷基ORa、-SRa、-S(=O)Ra、-S(=O)2Ra、-S(=O)2NRaRa、-S(=O)2N(Ra)C(=O)Ra、-S(=O)2N(Ra)C(=O)ORa、-S(=O)2N(Ra)C(=O)NRaRa、-NRaRa、-N(Ra)C(=O)Ra、-N(Ra)C(=O)ORa、-N(Ra)C(=O)NRaRa、-N(Ra)C(=NRa)NRaRa、-N(Ra)S(=O)2Ra、-N(Ra)S(=O)2NRaRa、-NRaC2-6烷基NRaRa和-NRaC2-6烷基ORa；或者R3为不饱和5-、6-或7-元单环，所述环含有0、1、2、3或4个选自N、O和S的原子，但是含有不超过一个的O或S，并且所述环被0、1、2或3个选自以下的取代基取代：卤代、C1-4烷基、C1-3卤代烷基、-OC1-4烷基、-NH2、-NHC1-4烷基、-N(C1-4烷基)C1-4烷基；
R4在各情况下均独立地为卤代、硝基、氰基、C1-4烷基、OC1-4烷基、OC1-4卤代烷基、NHC1-4烷基、N(C1-4烷基)C1-4烷基或C1-4卤代烷基；
R5在各情况下均独立地为H、卤代、C1-6烷基、C1-4卤代烷基，或被1、2或3个选自以下的取代基取代的C1-6烷基：卤代、氰基、OH、OC1-4烷基、C1-4烷基、C1-3卤代烷基、OC1-4烷基、NH2、NHC1-4烷基、N(C1-4烷基)C1-4烷基；或者两个R5基团一起形成被0、1、2或3个选自以下的取代基取代的C3-6螺烷基：卤代、氰基、OH、OC1-4烷基、C1-4烷基、C1-3卤代烷基、OC1-4烷基、NH2、NHC1-4烷基、N(C1-4烷基)C1-4烷基；
R6为H、卤代、NHR9或OH；
R7选自H、卤代、C1-4卤代烷基、氰基、硝基、-C(=O)Ra、-C(=O)ORa、-C(=O)NRaRa、-C(=NRa)NRaRa、-ORa、-OC(=O)Ra、-OC(=O)NRaRa、-OC(=O)N(Ra)S(=O)2Ra、-OC2-6烷基NRaRa、-OC2-6烷基ORa、-SRa、-S(=O)Ra、-S(=O)2Ra、-S(=O)2NRaRa、-S(=O)2N(Ra)C(=O)Ra、-S(=O)2N(Ra)C(=O)ORa、-S(=O)2N(Ra)C(=O)NRaRa、-NRaRa、-N(Ra)C(=O)Ra、-N(Ra)C(=O)ORa、-N(Ra)C(=O)NRaRa、-N(Ra)C(=NRa)NRaRa、-N(Ra)S(=O)2Ra、-N(Ra)S(=O)2NRaRa、-NRaC2-6烷基NRaRa、-NRaC2-6烷基ORa和C1-6烷基，其中所述C1-6烷基被0、1、2或3个选自以下的取代基取代：卤代、C1-4卤代烷基、氰基、硝基、-C(=O)Ra、-C(=O)ORa、-C(=O)NRaRa、-C(=NRa)NRaRa、-ORa、-OC(=O)Ra、-OC(=O)NRaRa、-OC(=O)N(Ra)S(=O)2Ra、-OC2-6烷基NRaRa、-OC2-6烷基ORa、-SRa、-S(=O)Ra、-S(=O)2Ra、-S(=O)2NRaRa、-S(=O)2N(Ra)C(=O)Ra、-S(=O)2N(Ra)C(=O)ORa、-S(=O)2N(Ra)C(=O)NRaRa、-NRaRa、-N(Ra)C(=O)Ra、-N(Ra)C(=O)ORa、-N(Ra)C(=O)NRaRa、-N(Ra)C(=NRa)NRaRa、-N(Ra)S(=O)2Ra、-N(Ra)S(=O)2NRaRa、-NRaC2-6烷基NRaRa和-NRaC2-6烷基ORa，并且所述C1-6烷基另外被0或1个饱和、部分饱和或不饱和的5-、6-或7-元单环取代，所述环含有0、1、2、3或4个选自N、O和S的原子，但是含有不超过一个的O或S，其中所述环的可用碳原子被0、1或2个氧代或硫代基团取代，其中所述环被0、1、2或3个独立地选自以下的取代基取代：卤代、硝基、氰基、C1-4烷基、OC1-4烷基、OC1-4卤代烷基、NHC1-4烷基、N(C1-4烷基)C1-4烷基和C1-4卤代烷基；或者R7和R8一起形成-C=N-桥，其中所述碳原子被H、卤代、氰基或含有0、1、2、3或4个选自N、O和S的原子、但是含有不超过一个O或S的饱和、部分饱和或不饱和的5-、6-或7-元单环取代，其中所述环的可用碳原子被0、1或2个氧代或硫代基团取代，其中所述环被0、1、2、3或4个选自以下的取代基取代：卤代、C1-6烷基、C1-4卤代烷基、氰基、硝基、-C(=O)Ra、-C(=O)ORa、-C(=O)NRaRa、-C(=NRa)NRaRa、-ORa、-OC(=O)Ra、-OC(=O)NRaRa、-OC(=O)N(Ra)S(=O)2Ra、-OC2-6烷基NRaRa、-OC2-6烷基ORa、-SRa、-S(=O)Ra、-S(=O)2Ra、-S(=O)2NRaRa、-S(=O)2N(Ra)C(=O)Ra、-S(=O)2N(Ra)C(=O)ORa、-S(=O)2N(Ra)C(=O)NRaRa、-NRaRa、-N(Ra)C(=O)Ra、-N(Ra)C(=O)ORa、-N(Ra)C(=O)NRaRa、-N(Ra)C(=NRa)NRaRa、-N(Ra)S(=O)2Ra、-N(Ra)S(=O)2NRaRa、-NRaC2-6烷基NRaRa和-NRaC2-6烷基ORa；或者R7和R9一起形成-N=C-桥，其中所述碳原子被H、卤代、C1-6烷基、C1-4卤代烷基、氰基、硝基、ORa、NRaRa、-C(=O)Ra、-C(=O)ORa、-C(=O)NRaRa、-C(=NRa)NRaRa、-S(=O)Ra、-S(=O)2Ra、-S(=O)2NRaRa取代；
R8为H或C1-6烷基；
R9为H、C1-6烷基或C1-4卤代烷基；
R10为H、卤代、C1-3烷基、C1-3卤代烷基或氰基；
R11为H或C1-4烷基；
R12为H或C1-4烷基；
Ra在各情况下均独立地为H或Rb；以及
Rb在各情况下均独立地为苯基、苄基或C1-6烷基，所述苯基、苄基和C1-6烷基被0、1、2或3个选自以下的取代基取代：卤代、C1-4烷基、C1-3卤代烷基、-OC1-4烷基、-NH2、-NHC1-4烷基、-N(C1-4烷基)C1-4烷基。
2. 根据权利要求1所述的化合物，其中所述化合物具有如下通式结构：
Figure DEST_PATH_IMAGE008
。
3. 根据权利要求1所述的化合物，其中所述化合物具有如下通式结构：
Figure DEST_PATH_IMAGE010
。
4. 根据权利要求1所述的化合物，其中所述化合物选自：
1-环丙基-N-甲基-2-((1S)-1-(9H-嘌呤-6-基氨基)乙基)-1H-苯并咪唑-7-甲酰胺，
2-((1R)-1-((6-氨基-5-氰基-4-嘧啶基)氨基)乙基)-1-(5-氟-3-吡啶基)-N-甲基-1H-苯并咪唑-7-甲酰胺，2-((1S)-1-((6-氨基-5-氰基-4-嘧啶基)氨基)乙基)-1-(5-氟-3-吡啶基)-N-甲基-1H-苯并咪唑-7-甲酰胺，
2-((1R)-1-((6-氨基-5-氰基-4-嘧啶基)氨基)乙基)-1-(5-氟-3-吡啶基)-N-甲基-1H-苯并咪唑-7-甲酰胺，
2-((1R)-1-((6-氨基-5-氰基-4-嘧啶基)氨基)乙基)-1-(5-氟-3-吡啶基)-1H-苯并咪唑-7-甲腈，2-((1S)-1-((6-氨基-5-氰基-4-嘧啶基)氨基)乙基)-1-(5-氟-3-吡啶基)-1H-苯并咪唑-7-甲腈，
2-((1R)-1-((6-氨基-5-氰基-4-嘧啶基)氨基)乙基)-1-(5-氟-3-吡啶基)-1H-苯并咪唑-7-甲腈，
2-((1S)-1-((6-氨基-5-(4-(甲基磺酰基)苯基)-4-嘧啶基)氨基)乙基)-1-环丙基-N-甲基-1H-苯并咪唑-7-甲酰胺，
2-((1S)-1-((6-氨基-5-(甲基磺酰基)-4-嘧啶基)氨基)乙基)-1-环丙基-N-甲基-1H-苯并咪唑-7-甲酰胺，
2-((1S)-1-((6-氨基-5-(三氟甲基)-4-嘧啶基)氨基)乙基)-1-环丙基-N-甲基-1H-苯并咪唑-7-甲酰胺，
2-((1S)-1-((6-氨基-5-氰基-4-嘧啶基)氨基)乙基)-1-(5-氟-3-吡啶基)-N-甲基-1H-苯并咪唑-7-甲酰胺，
2-((1S)-1-((6-氨基-5-氰基-4-嘧啶基)氨基)乙基)-1-(5-氟-3-吡啶基)-1H-苯并咪唑-7-甲腈，
2-((1S)-1-((6-氨基-5-氰基-4-嘧啶基)氨基)乙基)-1-环丙基-N-甲基-1H-苯并咪唑-7-甲酰胺，
2-((1S)-1-((6-氨基-5-氰基-4-嘧啶基)氨基)乙基)-3-(5-氟-3-吡啶基)-N-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-5-甲酰胺，
2-((1S)-1-((6-氨基-5-氰基-4-嘧啶基)氨基)乙基)-N,1-二环丙基-1H-苯并咪唑-7-甲酰胺，
2-((1S)-1-((6-氨基-5-氰基-4-嘧啶基)氨基)乙基)-N-环戊基-1-环丙基-1H-苯并咪唑-7-甲酰胺，
2-((1S)-1-((6-氨基-5-氰基-4-嘧啶基)氨基)乙基)-N-环丙基-3-苯基咪唑并[1,2-a]吡啶-5-甲酰胺，
2-((1S)-1-((6-氨基-5-氰基-4-嘧啶基)氨基)乙基)-N-甲基-3-苯基咪唑并[1,2-a]吡啶-5-甲酰胺，
2-((1S)-1-((6-氨基-5-氰基-4-嘧啶基)氨基)乙基)-N-叔丁基-1-环丙基-1H-苯并咪唑-7-甲酰胺，
2-((1S)-1-((6-氨基-5-氰基-4-嘧啶基)氨基)丙基)-1-环丙基-N-甲基-1H-苯并咪唑-7-甲酰胺，
3-(2-((1R)-1-((6-氨基-5-氰基-4-嘧啶基)氨基)乙基)-6-氟-1H-苯并咪唑-1-基)-N-甲基苯甲酰胺，3-(2-((1S)-1-((6-氨基-5-氰基-4-嘧啶基)氨基)乙基)-6-氟-1H-苯并咪唑-1-基)-N-甲基苯甲酰胺，
3-(2-((1R)-1-((6-氨基-5-氰基-4-嘧啶基)氨基)乙基)-6-氟-1H-苯并咪唑-1-基)-N-甲基苯甲酰胺，
3-(2-((1S)-1-((6-氨基-5-氰基-4-嘧啶基)氨基)乙基)-6-氟-1H-苯并咪唑-1-基)-N-甲基苯甲酰胺，
4-氨基-6-(((1R)-1-(1-(2,3'-联吡啶-5'-基)-6-氟-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，
4-氨基-6-(((1R)-1-(1-(2-吡啶基)-1H-咪唑并[4,5-b]吡啶-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，4-氨基-6-(((1S)-1-(1-(2-吡啶基)-1H-咪唑并[4,5-b]吡啶-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，
4-氨基-6-(((1R)-1-(1-(2-吡啶基)-1H-咪唑并[4,5-b]吡啶-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，
4-氨基-6-(((1R)-1-(1-(3,5-二氟苯基)-1H-咪唑并[4,5-b]吡啶-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，4-氨基-6-(((1S)-1-(1-(3,5-二氟苯基)-1H-咪唑并[4,5-b]吡啶-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，
4-氨基-6-(((1R)-1-(1-(3,5-二氟苯基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，4-氨基-6-(((1S)-1-(1-(3,5-二氟苯基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，
4-氨基-6-(((1R)-1-(1-(3,5-二氟苯基)-4,6-二氟-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，
4-氨基-6-(((1R)-1-(1-(3,5-二氟苯基)-4-氟-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，
4-氨基-6-(((1R)-1-(1-(3,5-二氟苯基)-6-氟-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，
4-氨基-6-(((1R)-1-(1-(3,5-二氟苯基)-6-氟-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，
4-氨基-6-(((1R)-1-(1-(3,5-二氟苯基)-7-氟-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，
4-氨基-6-(((1R)-1-(1-(3,5-二氟苯基)-7-氟-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，
4-氨基-6-(((1R)-1-(1-(3-氰基苯基)-6-氟-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，4-氨基-6-(((1S)-1-(1-(3-氰基苯基)-6-氟-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，
4-氨基-6-(((1R)-1-(1-(3-氰基苯基)-6-氟-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，
4-氨基-6-(((1R)-1-(1-(5-溴-3-吡啶基)-6-氟-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，4-氨基-6-(((1S)-1-(1-(5-溴-3-吡啶基)-6-氟-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，
4-氨基-6-(((1R)-1-(1-环丙基-7-(甲基磺酰基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，4-氨基-6-(((1S)-1-(1-环丙基-7-(甲基磺酰基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，
4-氨基-6-(((1R)-1-(1-环丙基-7-(甲基磺酰基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，
4-氨基-6-(((1R)-1-(3-(3,5-二氟苯基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，
4-氨基-6-(((1R)-1-(4,6-二氟-1-(3-吡啶基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，4-氨基-6-(((1S)-1-(4,6-二氟-1-(3-吡啶基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，
4-氨基-6-(((1R)-1-(4,6-二氟-1-(3-吡啶基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，
4-氨基-6-(((1R)-1-(4-氟-1-(5-氟-3-吡啶基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，4-氨基-6-(((1S)-1-(4-氟-1-(5-氟-3-吡啶基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，
4-氨基-6-(((1R)-1-(5-氟-1-(2-吡啶基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，
4-氨基-6-(((1R)-1-(5-氟-1-(3-(甲硫基)苯基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，
4-氨基-6-(((1R)-1-(5-氟-1-(3-(甲硫基)苯基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，
4-氨基-6-(((1R)-1-(5-氟-1-(3-(甲基磺酰基)苯基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，
4-氨基-6-(((1R)-1-(5-氟-1-(5-氟-3-吡啶基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，4-氨基-6-(((1S)-1-(5-氟-1-(5-氟-3-吡啶基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，
4-氨基-6-(((1R)-1-(5-氟-1-(5-氟-3-吡啶基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，
4-氨基-6-(((1R)-1-(6-氯-1-(3,5-二氟苯基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，
4-氨基-6-(((1R)-1-(6-氯-1-(3,5-二氟苯基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，
4-氨基-6-(((1R)-1-(6-氟-1-(2-(甲基磺酰基)苯基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，
4-氨基-6-(((1R)-1-(6-氟-1-(2-(甲基磺酰基)苯基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，
4-氨基-6-(((1R)-1-(6-氟-1-(2-(甲基磺酰基)苯基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，
4-氨基-6-(((1R)-1-(6-氟-1-(3-(2-吡啶基)苯基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，
4-氨基-6-(((1R)-1-(6-氟-1-(3-(甲基磺酰基)苯基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，
4-氨基-6-(((1R)-1-(6-氟-1-(3-(甲基磺酰基)苯基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，
4-氨基-6-(((1R)-1-(6-氟-1-(3-氟苯基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，
4-氨基-6-(((1R)-1-(6-氟-1-(3-吡啶基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，4-氨基-6-(((1S)-1-(6-氟-1-(3-吡啶基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，
4-氨基-6-(((1R)-1-(6-氟-1-(3-吡啶基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，
4-氨基-6-(((1R)-1-(6-氟-1-(4-氟苯基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，
4-氨基-6-(((1R)-1-(6-氟-1-(4-氟苯基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，
4-氨基-6-(((1R)-1-(6-氟-1-(5-氟-3-吡啶基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，
4-氨基-6-(((1R)-1-(6-氟-1-(5-氟-3-吡啶基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，
4-氨基-6-(((1R)-1-(6-氟-1-(6-氟-2-吡啶基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，4-氨基-6-(((1S)-1-(6-氟-1-(6-氟-2-吡啶基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，
4-氨基-6-(((1R)-1-(6-氟-1-(6-氟-2-吡啶基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，
4-氨基-6-(((1R)-1-(7-溴-1-(5-氟-3-吡啶基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，4-氨基-6-(((1S)-1-(7-溴-1-(5-氟-3-吡啶基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，
4-氨基-6-(((1S)-1-(1-(2,3'-联吡啶-5'-基)-6-氟-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，
4-氨基-6-(((1S)-1-(1-(2-吡啶基)-1H-咪唑并[4,5-b]吡啶-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，
4-氨基-6-(((1S)-1-(1-(3,5-二氟苄基)-7-(甲基磺酰基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，
4-氨基-6-(((1S)-1-(1-(3,5-二氟苯基)-4,6-二氟-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，
4-氨基-6-(((1S)-1-(1-(3,5-二氟苯基)-4-氟-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，
4-氨基-6-(((1S)-1-(1-(3,5-二氟苯基)-4-氟-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，
4-氨基-6-(((1S)-1-(1-(3,5-二氟苯基)-6-氟-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，
4-氨基-6-(((1S)-1-(1-(3,5-二氟苯基)-7-氟-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，
4-氨基-6-(((1S)-1-(1-(3-氰基苯基)-6-氟-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，
4-氨基-6-(((1S)-1-(1-(4-氟苄基)-4-(甲基磺酰基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，
4-氨基-6-(((1S)-1-(1-(4-氟苄基)-7-(甲基磺酰基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，
4-氨基-6-(((1S)-1-(1-(4-氟苄基)-7-(甲基磺酰基)-1H-苯并咪唑-2-基)丙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，
4-氨基-6-(((1S)-1-(1-(4-氟苄基)-7-(三氟甲基)-1H-苯并咪唑-2-基)丙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，
4-氨基-6-(((1S)-1-(1-(环丙基甲基)-5-氟-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，
4-氨基-6-(((1S)-1-(1-(环丙基甲基)-5-氟-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，
4-氨基-6-(((1S)-1-(1-(环丙基甲基)-6-氟-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，
4-氨基-6-(((1S)-1-(1-(环丙基甲基)-7-(甲基磺酰基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，
4-氨基-6-(((1S)-1-(1-(环丙基甲基)-7-(甲基磺酰基)-1H-苯并咪唑-2-基)丙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，
4-氨基-6-(((1S)-1-(1-(环丙基甲基)-7-(三氟甲基)-1H-苯并咪唑-2-基)丙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，
4-氨基-6-(((1S)-1-(1-环戊基-4-(甲基磺酰基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，
4-氨基-6-(((1S)-1-(1-环丙基-5-氟-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，
4-氨基-6-(((1S)-1-(1-环丙基-5-氟-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，
4-氨基-6-(((1S)-1-(1-环丙基-6-氟-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，
4-氨基-6-(((1S)-1-(1-环丙基-7-(甲基磺酰基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，
4-氨基-6-(((1S)-1-(1-环丙基-7-氟-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，
4-氨基-6-(((1S)-1-(3-(2-吡啶基)咪唑并[1,2-a]吡嗪-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，
4-氨基-6-(((1S)-1-(3-(2-吡啶基)咪唑并[1,2-a]嘧啶-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，
4-氨基-6-(((1S)-1-(3-(2-吡啶基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，
4-氨基-6-(((1S)-1-(3-(3,5-二氟苯基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，
4-氨基-6-(((1S)-1-(3-(3,5-二氟苯基)-6-氟咪唑并[1,2-a]吡啶-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，
4-氨基-6-(((1S)-1-(3-(3-氯-5-氟苯基)-6-氟咪唑并[1,2-a]吡啶-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，
4-氨基-6-(((1S)-1-(3-(4-氯苯基)-6-氟咪唑并[1,2-a]吡啶-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，
4-氨基-6-(((1S)-1-(3-(4-氯苯基)咪唑并[1,2-a]吡啶-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，
4-氨基-6-(((1S)-1-(4,6-二氟-1-(3-吡啶基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，
4-氨基-6-(((1S)-1-(4-氟-1-(5-氟-3-吡啶基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，
4-氨基-6-(((1S)-1-(5-((4-甲基-1-哌嗪基)羰基)-3-苯基咪唑并[1,2-a]吡啶-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，
4-氨基-6-(((1S)-1-(5,6-二氟-1-(5-氟-3-吡啶基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，
4-氨基-6-(((1S)-1-(5-氟-1-(3-(甲硫基)苯基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，
4-氨基-6-(((1S)-1-(5-氟-1-(3-(甲基磺酰基)苯基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，
4-氨基-6-(((1S)-1-(5-氟-1-(3-(甲基磺酰基)苯基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，
4-氨基-6-(((1S)-1-(5-氟-1-(5-氟-3-吡啶基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，
4-氨基-6-(((1S)-1-(5-氟-1-苯基-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，
4-氨基-6-(((1S)-1-(6-氯-1-(3,5-二氟苯基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，
4-氨基-6-(((1S)-1-(6-氟-1-(2-(甲基磺酰基)苯基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，
4-氨基-6-(((1S)-1-(6-氟-1-(2-(甲基磺酰基)苯基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，
4-氨基-6-(((1S)-1-(6-氟-1-(3-(2-吡啶基)苯基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，
4-氨基-6-(((1S)-1-(6-氟-1-(3-(2-吡啶基)苯基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，
4-氨基-6-(((1S)-1-(6-氟-1-(3-(甲基磺酰基)苯基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，
4-氨基-6-(((1S)-1-(6-氟-1-(3-氟苯基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，
4-氨基-6-(((1S)-1-(6-氟-1-(3-氟苯基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，
4-氨基-6-(((1S)-1-(6-氟-1-(3-吡啶基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，
4-氨基-6-(((1S)-1-(6-氟-1-(3-吡啶基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲酰胺，
4-氨基-6-(((1S)-1-(6-氟-1-(4-氟苯基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，
4-氨基-6-(((1S)-1-(6-氟-1-(5-氟-3-吡啶基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，
4-氨基-6-(((1S)-1-(6-氟-1-(5-氟-3-吡啶基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲酰胺，
4-氨基-6-(((1S)-1-(6-氟-1-(6-氟-2-吡啶基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，
4-氨基-6-(((1S)-1-(6-氟-1-苯基-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，
4-氨基-6-(((1S)-1-(6-氟-3-(2-(甲基磺酰基)苯基)咪唑并[1,2-a]吡啶-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，
4-氨基-6-(((1S)-1-(6-氟-3-(2-(甲基磺酰基)苯基)咪唑并[1,2-a]吡啶-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，
4-氨基-6-(((1S)-1-(6-氟-3-(2-(甲基磺酰基)苯基)咪唑并[1,2-a]吡啶-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，
4-氨基-6-(((1S)-1-(6-氟-3-(2-吡啶基)咪唑并[1,2-a]吡啶-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，
4-氨基-6-(((1S)-1-(6-氟-3-(3-(甲基磺酰基)苯基)咪唑并[1,2-a]吡啶-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，
4-氨基-6-(((1S)-1-(6-氟-3-(3-吡啶基)咪唑并[1,2-a]吡啶-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，
4-氨基-6-(((1S)-1-(6-氟-3-(4-氟苯基)咪唑并[1,2-a]吡啶-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，
4-氨基-6-(((1S)-1-(6-氟-3-(5-氟-3-吡啶基)咪唑并[1,2-a]吡啶-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，
4-氨基-6-(((1S)-1-(6-氟-3-苯基咪唑并[1,2-a]吡啶-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，
4-氨基-6-(((1S)-1-(7-(甲基磺酰基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，
4-氨基-6-(((1S)-1-(7-溴-1-(5-氟-3-吡啶基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，
4-氨基-6-(((1S)-1-(7-氟-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，
4-氨基-6-(((8-氯-3-苯基咪唑并[1,2-a]吡啶-2-基)甲基)氨基)-5-嘧啶甲腈，
4-氨基-6-((1-(3-(3,5-二氟苯基)-1-苯并噻吩-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，
4-氨基-6-((1-(3-苯基-1-苯并噻吩-2-基)乙基)氨基)-5-嘧啶甲腈，
2-((1S)-1-((6-氨基-5-氰基-4-嘧啶基)氨基)乙基)-3-(5-氟-3-吡啶基)咪唑并[1,2-a]吡啶-5-甲酸甲酯，
2-((1S)-1-((6-氨基-5-氰基-4-嘧啶基)氨基)乙基)-3-(3-吡啶基)咪唑并[1,2-a]吡啶-5-甲酸甲酯，
2-((1S)-1-((6-氨基-5-氰基-4-嘧啶基)氨基)乙基)-3-苯基咪唑并[1,2-a]吡啶-5-甲酸甲酯，
N-((1R)-1-(6-氯-1-(3,5-二氟苯基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)-9H-嘌呤-6-胺，
N-((1R)-1-(6-氯-1-(3,5-二氟苯基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)-9H-嘌呤-6-胺，
N-((1R)-1-(6-氟-1-(3-氟苯基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)-9H-嘌呤-6-胺，
N-((1R)-1-(6-氟-1-(3-氟苯基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)-9H-嘌呤-6-胺，
N-((1R)-1-(6-氟-1-(5-氟-3-吡啶基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)-9H-嘌呤-6-胺，
N-((1R)-1-(6-氟-1-(5-氟-3-吡啶基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)-9H-嘌呤-6-胺，
N-((1S)-1-(1-(环丙基甲基)-7-(三氟甲基)-1H-苯并咪唑-2-基)丙基)-9H-嘌呤-6-胺，
N-((1S)-1-(6-氯-1-(3,5-二氟苯基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)-9H-嘌呤-6-胺，
N-((1S)-1-(6-氟-1-(3-氟苯基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)-9H-嘌呤-6-胺，
N-((1S)-1-(6-氟-1-(5-氟-3-吡啶基)-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)-9H-嘌呤-6-胺，
N-((1S)-1-(7-氟-1H-苯并咪唑-2-基)乙基)-9H-嘌呤-6-胺，
N-(5-(2-((1R)-1-((6-氨基-5-氰基-4-嘧啶基)氨基)乙基)-6-氟-1H-苯并咪唑-1-基)-3-吡啶基)甲烷磺酰胺，N-(5-(2-((1S)-1-((6-氨基-5-氰基-4-嘧啶基)氨基)乙基)-6-氟-1H-苯并咪唑-1-基)-3-吡啶基)甲烷磺酰胺，
N-(5-(2-((1R)-1-((6-氨基-5-氰基-4-嘧啶基)氨基)乙基)-6-氟-1H-苯并咪唑-1-基)-3-吡啶基)甲烷磺酰胺，和
N-(5-(2-((1S)-1-((6-氨基-5-氰基-4-嘧啶基)氨基)乙基)-6-氟-1H-苯并咪唑-1-基)-3-吡啶基)甲烷磺酰胺，及其任何药学上可接受的盐。
5. 根据权利要求1至4中的任一项所述的化合物，其用于治疗以下疾病：类风湿关节炎、关节强硬性脊椎炎、骨关节炎、牛皮癣关节炎、牛皮癣、炎症性疾病和自身免疫性疾病、炎性肠病、炎性眼病、炎症性或不稳定性膀胱病症、含炎症性成分的皮肤病、慢性炎症性病状、自身免疫性疾病、系统性红斑狼疮(SLE)、重症肌无力、类风湿关节炎、急性播散性脑脊髓炎、特发性血小板减少性紫癜、多发性硬化、舍格伦综合征和自身免疫性溶血性贫血、过敏性病状和过敏症，所述治疗包括施用根据权利要求1所述的化合物的步骤。
6. 根据权利要求1至4中的任一项所述的化合物，其用于治疗p110δ活性介导、依赖于p110δ活性或者与p110δ活性相关的癌症，所述治疗包括施用根据权利要求1所述的化合物的步骤。
7. 一种药物组合物，其包含根据权利要求1所述的化合物和药学上可接受的稀释剂或载体。
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