CN103184183A - 一种干酪乳杆菌干粉的制备方法 - Google Patents

一种干酪乳杆菌干粉的制备方法 Download PDF

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张卫兵
艾对元
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Abstract

本发明公开了一种干酪乳杆菌干粉的制备方法。本发明干酪乳杆菌干粉的制备过程包括以下步骤：菌种活化、增殖培养、菌体收集、预冻和真空低温冷冻干燥。本发明方法制备的干酪乳杆菌干粉适于在乳品工业中应用。

Description

一种干酪乳杆菌干粉的制备方法
技术领域
本发明属于生物工程技术领域，涉及一种干酪乳杆菌干粉的制备方法。
背景技术
生产发酵乳制品最重要的要素是发酵过程中使用的乳酸菌菌种，只有好的乳酸菌菌种才能生产出优质的发酵乳制品。青藏高原牧区具有非常特殊的地理生态环境，海拔高、昼夜温差大。当地牧民采用千百年来沿袭古老而传统的方法制作牦牛酸奶，将新鲜的牦牛乳加热煮沸，冷却后接种上次制作预留的酸奶(接种量一般是3％～5％)，在室内放置(10～25℃)至凝乳，属于典型的低温发酵。在长期的自然进化过程中，牦牛乳酸奶中传代性好、抗逆性强、凝乳状态好、风味独特、低温发酵的的优良乳酸菌得到富集。
前期我们采用Elliker培养基分离得到的一株干酪乳杆菌(Lactobacillus casei，保藏号CGMCC NO.4775)2。该菌株已在牦牛乳硬质干酪中进行了成功应用，在本申请人2011.10.24提交的CN102367428A专利申请中已经提交微生物保藏。目前国内酸奶和干酪乳酸菌发酵剂大多采用国外菌株。本发明所涉及一种干酪乳杆菌干粉的制备方法，具有方法简单、易操作、活菌数高等优点，生产的干酪乳杆菌干粉适合应用于以其为发酵剂的发酵乳制品加工。
发明内容
本发明的目的是提供一种干酪乳杆菌干粉的制备方法。本发明涉及一种干酪乳杆菌干粉的制备方法。本发明的目的是按如下技术方案实现的，其特征是它包括以下步骤：
(1)菌种活化：将冷冻保藏的干酪乳杆菌接种到灭菌乳中，37℃培养12h后再按3％(V/V)比例转接到灭菌乳中，37℃下培养至凝乳；
(2)增殖培养：将活化好的菌种按3～5％（V/V)的比例接入MRS培养基，在37℃培养10h，得到培养液；
(3)菌体收集：将培养液在4℃、6000r/mim离心10～15min得到菌泥；
(4)预冻：将得到的菌泥与保护剂以1∶3比例混合，在-30℃预冷12小时；
(5)真空低温冷冻干燥：将预冻后的菌泥加入冻干机，保持-40℃以下，冷冻干燥20～25小时，得到干酪乳杆菌干粉；
2、如权利要求1所述的制备方法，其特征在于：所述步骤(5)中采用的保护剂组成重量比为：甘氨酸∶脱脂乳∶蔗糖∶谷氨酸钠＝1∶2∶1∶1。
本发明的有益效果
(1)本发明方法采用的菌种分离自天然发酵的牦牛乳酸奶，具有自主知识产权。
(2)本发明的干酪乳杆菌干粉制备方法，具有方法简单、易操作等优点。
(3)本发明生产的干酪乳杆菌干粉适用于以干酪乳杆菌为发酵剂的发酵乳制品的加工。
具体实施方式
下面的实施例可以进一步说明本发明，但不以任何方式限制本发明。
实施例1
将冷冻保藏的干酪乳杆菌接种到灭菌乳中，37℃培养12h后再按3％(V/V)比例转接到灭菌乳中，37℃下培养至凝乳。将活化好的菌种按3％（V/V)的比例接入MRS培养基，在37℃培养10h，得到培养液。将培养液在4℃、6000r/mim离心10min得到菌泥。将得到的菌泥与保护剂以1∶3比例混合，在-30℃预冷12小时。将预冻后的菌泥加入冻干机，保持-40℃以下，冷冻干燥20小时，得到干酪乳杆菌干粉。
实施例2
将冷冻保藏的干酪乳杆菌接种到灭菌乳中，37℃培养12h后再按3％(V/V)比例转接到灭菌乳中，37℃下培养至凝乳。将活化好的菌种按4％(V/V)的比例接入MRS培养基，在37℃培养10h，得到培养液。将培养液在4℃、6000r/mim离心12min得到菌泥。将得到的菌泥与保护剂以1∶3比例混合，在-30℃预冷12小时。将预冻后的菌泥加入冻干机，保持-40℃以下，冷冻干燥23小时，得到干酪乳杆菌干粉。
实施例3
将冷冻保藏的干酪乳杆菌接种到灭菌乳中，37℃培养12h后再按3％（V/V）比例转接到灭菌乳中，37℃下培养至凝乳。将活化好的菌种按5％(V/V)的比例接入MRS培养基，在37℃培养10h，得到培养液。将培养液在4℃、6000r/mim离心15min得到菌泥。将得到的菌泥与保护剂以1∶3比例混合，在-30℃预冷12小时。将预冻后的菌泥加入冻干机，保持-40℃以下，冷冻干燥25小时，得到干酪乳杆菌干粉。

Claims (2)

1.一种干酪乳杆菌干粉的制备方法，其特征是它包括以下步骤： 
(1)菌种活化：将冷冻保藏的干酪乳杆菌接种到灭菌乳中，37℃培养12h后再按3％(V/V)比例转接到灭菌乳中，37℃下培养至凝乳； 
(2)增殖培养：将活化好的菌种按3～5％(V/V)的比例接入MRS培养基，在37℃培养10h，得到培养液； 
(3)菌体收集：将培养液在4℃、6000r/mim离心10～15min得到菌泥； 
(4)预冻：将得到的菌泥与保护剂以1∶3比例混合，在-30℃预冷12小时； 
(5)真空低温冷冻干燥：将预冻后的菌泥加入冻干机，保持-40℃以下，冷冻干燥20～25小时，得到干酪乳杆菌干粉。 
2.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于：所述步骤(5)中采用的保护剂组成重量比为：甘氨酸∶脱脂乳∶蔗糖∶谷氨酸钠＝1∶2∶1∶1。 
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