CN103183716B

CN103183716B - 一种牛磺熊去氧胆酸的制备方法

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Publication number: CN103183716B
Application number: CN201110459028.8A
Authority: CN
Inventors: 秦笃伟
Original assignee: SUZHOU TIANLV BIO-PHARMACEUTICAL CO LTD; SHANDONG TIANLV PHARMACEUTICAL CO Ltd
Current assignee: SUZHOU TIANLV BIO-PHARMACEUTICAL CO LTD; SHANDONG TIANLV PHARMACEUTICAL CO Ltd
Priority date: 2011-12-31
Filing date: 2011-12-31
Publication date: 2015-06-24
Anticipated expiration: 2031-12-31
Also published as: CN103183716A

Abstract

本发明公开了一种牛磺熊去氧胆酸的制备方法。该方法包括以下操作步骤：1)熊去氧胆酸溶于有机溶剂中，降温至0～10℃，加入胺类化合物，进行搅拌；2)在步骤1)中进行搅拌结束后加入缩合剂和4-二甲氨基吡啶，在室温下搅拌反应，得到反应液A；3)将步骤2)中得到的反应液A加入到牛磺酸钠盐水溶液中，室温搅拌下滴加三乙胺进行反应。4)反应结束后，加入二氯甲烷萃取分液，将水层再用二氯甲烷洗涤。洗涤后调节pH值，搅拌后浓缩得产品。本发明的特点在于：以一种新的工艺方法来制备牛磺熊去氧胆酸，具有反应速度快、产品质量高、原料便宜的特点。

Description

一种牛磺熊去氧胆酸的制备方法

技术领域

本发明涉及一种制备牛磺熊去氧胆酸的方法。

背景技术

牛磺熊去氧胆酸(tauroursodeoxycholicacid)是熊胆汁的有效成分，化学名为2-[[(3α，5β，7β)-3，7-二羟基-24-氧代胆甾烷-24-基]氨基]乙烷磺酸二水合物，由意大利贝思迪大药厂研制，1991年首次在意大利上市，2007年以商品名滔罗特(taurolite)获准在中国销售。临床主要用于治疗胆囊胆固醇结石、原发硬化性胆管炎、原发胆汁性肝硬化和慢性丙型病毒性肝炎等。由于天然资源和动物保护的限制，药用牛黄熊去氧胆酸主要由化学半合成法得到：

1.用熊去氧胆酸与氯甲酸乙酯或特戊酰氯反应形成混合酸酐，在碱性条件下与牛磺酸反应，再经离子交换柱纯化制得牛磺熊去氧胆酸。

2.用熊去氧胆酸与牛磺酸在碱性条件下分别在N-乙氧羰基-2-乙氧基-1，2-二氢喹啉(EEDQ)(N-ethoxy-carbonyl-ethoxy-1，2-dihydroquino line)或氰基磷酸二乙酯(DEPC)作用下直接缩合得牛磺熊去氧胆酸。

3.熊去氧胆酸和氯甲酸乙酯形成混合酸酐后，与对羟基苯丙酮缩合，得熊去氧胆酸的活性酚酯，再与牛磺酸反应制得牛磺熊去氧胆酸。

上述方法存在成本较高，工艺复杂，产品杂质较多，收率不高等问题。

关于制备牛黄熊去氧胆酸的文献有卓超等人在《合成化学》2002年第10期第5卷第444-446页发表的名为“牛磺熊去氧胆酸的合成研究”的文章，该文章中公开了以熊去氧胆酸为原料，先与氯甲酸乙酯形成混酐，再与牛磺酸反应合成牛磺熊去氧胆酸。通过优化反应条件，简化后处理等工艺改进，提高了收率。但还是存在收率不是很高、原料氯甲酸乙酯毒性大、后处理复杂等问题。

王海龙等在《中国医药工业杂志》2009年，40(2)第88-89页发表的名为“牛磺熊去氧胆酸的合成”的文章中公开了一种制备牛磺熊去氧胆酸的方法，该方法是用熊去氧胆酸和2，2’-二硫二苯并噻唑在三乙胺和三苯磷作用下缩合，得熊去氧胆酸-2-苯并噻唑硫酯，将得到的熊去氧胆酸-2-苯并噻唑硫酯和牛磺酸反应得到熊去氧胆酸粗品，再经丙酮-水(12∶1)重结晶即得到纯品，总收率达75.6％。不足之处在于用到含硫含磷的原材料，造成环境污染。

发明内容

为了解决上述不足，本发明提供一种制备牛磺熊去氧胆酸的方法，所述牛磺熊去氧胆酸由下述化学式I所示。

化学式I

本发明提供的制备牛磺熊去氧胆酸的方法包括下述步骤：

1)熊去氧胆酸溶于有机溶剂中，降温至0～10℃，加入胺类化合物，进行搅拌。

2)在步骤1)中进行搅拌结束后加入缩合剂和4-二甲氨基吡啶，在室温下搅拌反应，得到反应液A。

3)将步骤2)中得到的反应液A加入到牛磺酸钠盐水溶液中，室温搅拌下滴加三乙胺进行反应。

4)反应结束后，加入二氯甲烷萃取分液，将水层再用二氯甲烷洗涤，洗涤后调节pH值，搅拌后浓缩得产品。

所述步骤4)中以TLC显示原料点消失来判断反应结束。

所述步骤1)中的有机溶剂选自N，N-二甲基甲酰胺、四氢呋喃、二甲亚砜，优选为N，N-二甲基甲酰胺。

所述步骤2)中的胺类化合物选自N-羟基丁二酰亚胺、N-羟基邻苯二甲酰亚胺，优选为N-羟基丁二酰亚胺。

所述步骤2)中的缩合剂选自二环己基碳二亚胺、二异丙基碳二亚胺、1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)碳二亚胺，优选为二环己基碳二亚胺。

所述步骤1)为熊去氧胆酸溶于有机溶剂中，降温至8℃，加入N-羟基丁二酰亚胺，于135～150rpm下搅拌10～40分钟。

所述步骤2)为在步骤1)中进行搅拌结束后加入二环己基碳二亚胺和4-二甲氨基吡啶，在8-12℃，135-150rpm下搅拌20min-2.5小时，得到反应液A。

所述步骤3)是将步骤2)中得到的反应液A加入到牛磺酸钠盐水溶液中，在20～25℃，135～150rpm转速下搅拌滴加三乙胺反应2～2.5小时。

所述步骤3)中，当反应液A中熊去氧胆酸含量小于0.1％时进行步骤4)。

所述步骤4)中采用稀盐酸调节pH值至1.0～2.0。

所述步骤4)中搅拌是在20～25℃，135～150rpm转速下搅拌0.5～2小时，优选1小时。

所述步骤4)中浓缩得到产品后进行抽滤，水洗。然后在70～80℃下进行鼓风干燥。

本发明涉及的反应式如下：

每一步的反应方程式如下：

第一步制备熊去氧胆酸的活性酯，化学方程式如下：

C₂₄H₄₀O₄+C₄H₅NO₃＝C₂₈H₄₃NO₆+H₂O

第二步制备牛磺熊去氧胆酸，化学方程式如下：

C₂₈H₄₃NO₆+C₂H₇O₃S＝C₂₆H₄₅O₆S+C₄H₅NO₃

本发明的特点在于：以一种新的工艺方法来制备牛磺熊去氧胆酸，制备方法新颖，反应所用的材料便宜，便于回收，反应用时较短，收率比原有方法有所提高，对环境影响较小，同时还提高了产率。

附图说明

图1为牛磺熊去氧胆酸对照品红外吸收图谱；

图2为实施例1制得的成品红外吸收图谱；

图3为实施例2制得的成品红外吸收图谱；

图4为实施例3制得的成品红外吸收图谱；

图5为实施例4制得的成品红外吸收图谱

图6为牛磺熊去氧胆酸对照品核磁共振氢谱；

图7为实施例1制得的成品核磁共振氢谱；

图8为实施例2制得的成品核磁共振氢谱；

图9为实施例3制得的成品核磁共振氢谱；

图10为实施例4制得的成品核磁共振氢谱。

具体实施方式

以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。

实施例1牛磺熊去氧胆酸的制备

熊去氧胆酸39.2g(0.1mol)加入到100ml的N，N-二甲基甲酰胺中，搅拌溶解(转速为150rpm搅拌10分钟)。降温至10℃，加入N-羟基丁二酰亚胺12.66g(0.11mol)，搅拌溶解(转速为135rpm搅拌20分钟)，加入二环己基碳二亚胺24.76g(0.12mol)和4-二甲氨基吡啶0.12g(0.001mol)，全部料加完后，在12℃下搅拌反应2.5小时，转速为135rpm，HPLC检测熊去氧胆酸含量小于0.1％，停止反应。另取牛磺酸12g(0.12mol)溶于500ml氢氧化钠水溶液(含氢氧化钠4.8g，0.12mol)中，得牛磺酸钠盐水溶液。将上面的二甲基甲酰胺溶液加入到牛磺酸钠盐水溶液中，滴加三乙胺34ml(0.24mol)，滴加完毕在20℃下反应2小时，转速为135rpm。加入二氯甲烷200ml萃取分液，水层再用二氯甲烷200ml分2次洗涤。洗涤后水层加稀盐酸调PH＝1.0，在20℃，135rpm下，搅拌0.5小时，浓缩，析出产品，抽滤，水洗，75℃鼓风干燥。干燥后称重40.0g，含量99％，收率为81％。样品经红外、核磁共振氢谱检查，结果(见附图2、7)，与牛磺熊去氧胆酸的对照品的红外图(见附图1)、核磁共振氢谱图(见附图6)一致。

实施例2牛磺熊去氧胆酸的制备

熊去氧胆酸39.2g(0.1mol)加入到100ml四氢呋喃中，搅拌溶解(转速为150rpm搅拌10分钟)。降温至0℃，加入N-羟基邻苯二甲酰亚胺12.66g(0.11mol)，搅拌溶解(转速为150rpm搅拌20分钟)，加入二异丙基碳二亚胺15.14g(0.12mol)和4-二甲氨基吡啶0.12g(0.001mol)，全部料加完后，在8℃下反应20min，HPLC检测熊去氧胆酸含量小于0.1％，停止反应。另取牛磺酸12g(0.12mol)溶于500ml氢氧化钠水溶液(含氢氧化钠4.8g，0.12mol)中，得牛磺酸钠盐水溶液。将上面的四氢呋喃溶液加入到牛磺酸钠盐水溶液中，滴加三乙胺34ml(0.24mol)，滴加完毕在25℃下反应2.5小时，转速为150rpm。加入二氯甲烷200ml萃取分液，水层再用二氯甲烷200ml分2次洗涤。洗涤后水层加稀盐酸调PH＝1.0，在25℃，150rpm下，搅拌1.5小时，浓缩，析出产品。抽滤，水洗。75℃鼓风干燥。干燥后称重36.0g，含量97％，收率为80％。样品经红外、核磁共振氢谱检查，结果(见附图3、8)，与牛磺熊去氧胆酸的对照品的红外图(见附图1)、核磁共振氢谱图(见附图6)一致。

实施例3牛磺熊去氧胆酸的制备

熊去氧胆酸39.2g(0.1mol)加入到100ml二甲亚砜中，搅拌溶解(转速为150rpm搅拌10分钟)。降温至10℃，加入N-羟基丁二酰亚胺12.66g(0.11mol)，搅拌溶解(转速为150rpm搅拌10)，加入1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)碳二亚胺18.62g(0.12mol)和4-二甲氨基吡啶012g(0.001mol)，全部料加完后，在8℃下搅拌反应20min，转速为150rpm，HPLC检测熊去氧胆酸含量小于0.1％，停止反应。另取牛磺酸12g(0.12mol)溶于500ml氢氧化钠水溶液(含氢氧化钠4.8g，0.12mol)中，得牛磺酸钠盐水溶液。将上面的二氯甲烷溶液加入到牛磺酸钠盐水溶液中，滴加三乙胺34ml(0.24mol)，滴加完毕在22℃下反应2.4小时。加入二氯甲烷300ml萃取分液，水层再用二氯甲烷200ml分2次洗涤。洗涤后水层加稀盐酸调PH＝2.0，在22℃，140rpm下，搅拌1小时，浓缩，析出产品。抽滤，水洗。75℃鼓风干燥。干燥后称重37.5g，含量94％，收率为75％。样品经红外、核磁共振氢谱检查，结果(见附图4、9)，与牛磺熊去氧胆酸的对照品的红外图(见附图1)、核磁共振氢谱图(见附图6)一致。

实施例4牛磺熊去氧胆酸的制备

1)熊去氧胆酸39.2g(0.1mol)加入到100ml的N，N-二甲基甲酰胺中，搅拌溶解(转速为150rpm搅拌10分钟)。降温至8℃，加入N-羟基丁二酰亚胺12.66g(0.11mol)，搅拌溶解(转速为140rpm搅拌30分钟)，加入二环己基碳二亚胺24.76g(0.12mol)和4-二甲氨基吡啶0.12g(0.001mol)，全部料加完后，在10℃下搅拌反应2.2小时，转速为140rpm，HPLC检测熊去氧胆酸含量小于0.1％，停止反应。另取牛磺酸12g(0.12mol)溶于500ml氢氧化钠水溶液(含氢氧化钠4.8g，0.12mol)中，得牛磺酸钠盐水溶液。将上面的二甲基甲酰胺溶液加入到牛磺酸钠盐水溶液中，滴加三乙胺34ml(0.24mol)，滴加完毕在22℃下反应2.2小时，转速为145rpm。加入二氯甲烷200ml萃取分液，水层再用二氯甲烷200ml分2次洗涤。洗涤后水层加稀盐酸调PH＝1.0，在22℃，140rpm下，搅拌1小时，浓缩，析出产品，抽滤，水洗，75℃鼓风干燥。干燥后称重40.0g，含量99％，收率为85％。结果(见附图5、10)，与牛磺熊去氧胆酸的对照品的红外图(见附图1)、核磁共振氢谱图(见附图6)一致。

虽然，上文中已经用一般性说明、具体实施方式及试验，对本发明作了详尽的描述，但在本发明基础上，可以对之作出一些修改或改进，这对本领域技术人员而言是显而易见的。因此，在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进，均属于本发明要求保护的范围。

Claims

1.一种化学式I所示的牛磺熊去氧胆酸的制备方法，其特征在于，该方法包括下述步骤：

1)熊去氧胆酸溶于有机溶剂中，降温至0～10℃，加入胺类化合物，进行搅拌；

2)在步骤1)中进行搅拌结束后加入二环己基碳二亚胺和4-二甲氨基吡啶，在8-12℃，135-150rpm下搅拌20min-2.5小时，得反应液A；

3)将步骤2)中得到的反应液A加入到牛磺酸钠盐水溶液中，在20～25℃，135～150rpm转速下搅拌滴加三乙胺反应2～2.5小时；

4)反应结束后，加入二氯甲烷萃取分液，将水层再用二氯甲烷洗涤，洗涤后调节pH值，搅拌后浓缩得产品；

所述步骤1)中的胺类化合物选自N-羟基丁二酰亚胺、N-羟基邻苯二甲酰亚胺。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤1)为熊去氧胆酸溶于有机溶剂中，降温至8℃，加入N-羟基丁二酰亚胺，于135～150rpm下搅拌10～40分钟。

3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤4)中使用稀盐酸调节pH值至1.0～2.0。

4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，在所述步骤4)结束后还包括干燥的步骤。

5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，所述干燥为鼓风干燥。

6.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤1)中的有机溶剂选自N,N-二甲基甲酰胺、四氢呋喃、二甲亚砜。