CN103182074A - 一种含有溶菌酶的眼用制剂 - Google Patents
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Abstract
本发明属于酶学和药物制剂学领域,涉及一种含有溶菌酶的眼用制剂。具体地,所述眼药制剂中溶菌酶的含量为0.001%-25%(w/w)、0.01%-20%(w/w)、0.1%-15%(w/w)、0.3%-10%(w/w)或0.5%-5%(w/w)。本发明的眼用制剂以及其中的溶菌酶稳定性良好,并且具有良好的抑菌和/或防腐的性能,也有利于长期储存。
Description
技术领域
本发明属于酶学和药物制剂学领域,涉及一种含有溶菌酶的眼用制剂。
背景技术
近年来,大量的眼科药物制剂的临床数据和研究资料表明,在眼部疾病的治疗过程中产生的副作用或不良反应有很多时候都是由于抑菌剂造成的。例如,眼部手术后使用药物进行术后治疗时,由于抑菌剂的影响而造成的角膜上皮细胞脱落等现象时有发生。并且,随着电脑、空调等的普及,干眼症患者人群也在不断增加,这类患者的治疗往往需要长期辅以人工泪液,而化学抑菌剂的长期使用会造成不同程度的角膜损伤。
因此,眼用制剂中的抑菌剂带来的副作用已成为社会普遍关注的问题,也是目前全球眼科药物开发研究的热点。现有技术中采用多种方法来避免抑菌剂对眼部带来的伤害,如制成不含抑菌剂的眼科单剂量产品:如日本参天公司的可乐必妥滴眼液;也可以使用除菌的眼用制剂容器如:日本点眼剂研究所开发的乌诺前列酮异丙酯滴眼液。但这些包装方面的改善并不能保证完全无菌,且成本高,对于长期使用的人群来说,无疑会增加患者的经济负担。
也有人尝试过在喹诺酮类滴眼液中不加抑菌剂,直接依靠药物的抗菌作用维持制剂的无菌状态。但由于喹诺酮类药物的抗菌谱及抑菌效力有限,其抑菌效果也不尽理想,不具备普遍应用性。
溶菌酶(Lysozyme)是分子量为14.4kDa的酶类,1922年Alexander Fleming在寻找抗生素的过程中发现了溶菌酶。作为人体自身的抗感染天然屏障之一,它能够通过催化肽聚糖中N-乙酰胞壁酸和N-乙酰氨基葡萄糖残基间和壳糊精中N-乙酰葡糖胺残基间的1,4-β链的水解,而破坏细菌的细胞壁,达到杀死细菌的目的,因此可以作为抑菌剂,已经在食物领域中得到应用。溶菌酶作为酶类具高效性,其抗菌活性为同类化学物质的几十倍甚至上千倍;且作为人体固有活性物质,对人体无任何副作用,可应用于各类人群。除此之外,溶菌酶成本低廉、获取途经多、来源广阔,在蛋清、乳汁中都含有大量的溶菌酶,特别是近年来随着克隆技术的广泛应用,使得微生物提取溶菌酶也成为溶菌酶大量生产的一大途径。
然而,溶菌酶在水中的稳定性较差,不能长时间保存。并且眼用制剂大多是水溶性制剂,因此溶菌酶应用于眼用制剂受到一定限制。
发明内容
本发明人经过深入的研究和创造性的劳动,获得了一种溶菌酶制剂。本发明人惊奇地发现,该溶菌酶制剂能够用于眼用制剂,并且溶菌酶在本发明的体系(包括合适的pH和稳定剂盐类浓度)中能够保持良好的稳定性。由此提供了下述发明:
本发明者综合以上问题,寻找到一种对眼部安全、无刺激且高效的抑菌剂——溶菌酶,该抑菌剂可适用于各类人群,且成本低廉。溶菌酶作为一种眼用制剂的抑菌剂用量范围为0.001%-25%(w/w),优选范围为0.01%-20%(w/w),更优选为0.1%-15%(w/w);进一步优选为0.3%-10%(w/w),特别优选为0.5%-5%(w/w)。且在与其他抑菌剂联合使用,可以使两种抑菌剂的浓度同时降低,用量减小,降低其他抑菌剂对眼表的损害。
过去虽有人考虑到以其作为眼用制剂的抑菌剂,但由于其在水溶液中的稳定性不佳,使得溶菌酶在此方面的应用未能得到发展。为保证溶菌酶的稳定性,发明人通过大量的实验,处理溶菌酶原料,使获得的精制溶菌酶可在水溶液中保持3-5年稳定,攻克了这个难题。处理工艺如下:
1)将溶菌酶溶于注射用水,得到溶菌酶溶液;
2)向步骤1)中的溶菌酶溶液中加入稳定剂盐类;
3)调节pH至4.6-9.0。
在本发明的一个实施方案中,还包括步骤4)静置,使溶菌酶与稳定剂盐类充分接触后过滤;
在本发明的一个实施方案中,还包括5)加入吸附性物质对溶液中的杂质进行吸附,获得澄清透明的溶液,吸附后过滤除去吸附性物质后备用。
在本发明的一个实施方案中,还包括6)得到的溶液可采用冷冻干燥、喷雾干燥等方式,使其以固体形式保存以备制剂用;亦可调节至等电点后,收集固体,采用真空干燥等方式,收集固体;亦可以液体形式加入其他药物、渗透压调节剂、保湿增稠剂等原辅料直接投料制成眼用制剂,例如滴眼液、眼膏剂、眼用凝胶剂、眼用固体制剂等剂型。
下面是对上述工艺的详细解释:
发明中所涉及到的眼用制剂的剂型可以为滴眼液、眼膏剂、眼用凝胶剂、眼用固体制剂等眼科常用的液体、半固体、固体剂型。
发明中所涉及到的pH值调节剂,以调节注射用水的pH值,此时用到物质可以为稀盐酸、醋酸、氢氧化钠等为人们所常用的酸碱调节剂,亦可以是一些具有酸碱度调节功能的盐类物质,如枸橼酸、硼酸,磷酸二氢钠、磷酸氢二钠等物质。
本领域技术人员能够理解,pH值是眼用制剂中非常重要的技术控制指标,关系到本发明所述眼用制剂的稳定性、有效性及眼刺激性。此外,pH值对于蛋白质亦是一个重要的控制指标,众所周知,蛋白质具有一个特性指标——等电点。蛋白质的水溶液pH值离等电点越近,其在水溶液中的稳定性越差,相反越远则越稳定。且蛋白质容易在强酸强碱中发生不可逆的变性反应,也就是我们通常所说的蛋白质变质。溶菌酶作为一种蛋白类的酶,同样具有蛋白质的共同性质。
本发明为含有溶菌酶的眼用制剂,在制备过程中需同时兼顾溶菌酶与眼用制剂的特点,因此pH值的控制在本品中可以说是关键中的关键。
在以往溶菌酶纯化的过程中,pH值均在4.6以下,其主要原因是在保证溶菌酶稳定的前提下,提高溶菌酶的收率。但发明人发现,在此pH值条件下,得到的溶菌酶制剂对人眼刺激过强,但将pH值增大后,其稳定性又降低。本发明人通过大量的实验发现溶液pH值、盐浓度及处理溶菌酶浓度在溶菌酶原料处理过程中至关重要,通过精密控制这三项参数值可实现在与人体接近的pH值下,获得更为稳定的溶菌酶溶液,且可将溶菌酶在处理过程中得到更高的收率。通过一系列实验,发明者将含溶菌酶的眼用制剂处理过程中的pH值控制在4.6-10.0间可保证溶菌酶的稳定性,优选为4.7-9.0;更优选为4.8-8.5;特别优选为5.0-8.0;进一步优选为5.0-7.0;更进一步优选为5.5-6.5,例如5.5、5.6、5.7、5.8、5.9、6.0、6.1、6.2、6.3、6.4、或6.5。
本发明中所涉及的稳定剂,多为盐类,包括但不限于碳酸钠、碳酸氢钠、枸橼酸钠、硼酸、硼砂、磷酸二氢钾、氯化钾、氯化钙等中的一种或多种盐类,优选为选自硼酸、硼砂、枸橼酸钠、以及磷酸氢二钾中的任一种或者多种。不拘于理论的限制,硼酸、硼砂、枸橼酸钠、以及磷酸氢二钾同时兼具pH调节的作用。不拘于理论的限制,溶菌酶可能会与一些盐作用产生沉淀,或者是溶菌酶的空间构象发生改变,从而导致溶菌酶活性和/或稳定性的改变。不拘于理论的限制,上述稳定剂盐类兼具两种功效:其一为调节溶液渗透压,保证眼用制剂与泪液的渗透压相同而减少眼刺激。另一作用为,盐类的存在可以驱使溶菌酶的构型中同性电荷的分子以斥力在溶液中保持稳定,而异性电荷的分子则会相互聚集而沉淀,从溶液中分离。盐类的存在可有效的除去溶液中的不稳定因素,从而保证溶菌酶稳定性。本发明通过大量试验获得稳定剂的以上作用机理,打破以往普遍使用的氯化钠等盐类的单纯局限,得到了更适合溶菌酶的稳定剂盐类,并且增加了稳定剂盐类的种类,使制剂的制备组方上更为多样化。
发明人在对比处理与未处理过溶菌酶原料的活性时,惊奇地发现,稳定剂盐类的加入可以保持或增强溶菌酶原料的活性。有些盐类甚至可以直接用于调节溶液的pH值,可作为之后所制备制剂中缓冲盐。
在上述发明中已提及,本品是通过控制pH值、稳定剂盐浓度、溶菌酶浓度三个指标来对溶菌酶浓溶液进行处理,而得到稳定的溶菌酶眼用制剂的。因此在本发明中,盐类的用量亦是很重要的控制指标之一。盐的量通常在0.001%-30%(w/w)之间;优选为0.01%-25%(w/w),更优选为0.1%-20%(w/w);特别优选为1%-20%(w/w),进一步优选为3%-15%(w/w),例如3%、4%、5%、6%、7%、8%、9%、10%、11%、12%、13%、14%、或15%(w/w)。
上述发明中所涉及的静置是为保证在特定的pH值下,盐类物质与溶菌酶充分接触而设计的,充分的接触有利于更好的沉淀异性电荷,排除不稳定性因素,使获得的溶菌酶更加稳定。静置通常在0℃-40℃环境下(例如室温或者常温)进行,静置的时间在为不小于2小时,例如2-48小时。
本发明人在研究中发现,盐析虽可以保证溶菌酶在一定时间的稳定性,但是在长时间的储存过程中,含溶菌酶的滴眼液仍会出现少量的析出物。经发明人进行大量实验研究,发现在上述盐析过程的基础上加上吸附沉降的过程,可以使得溶菌酶更加稳定的存在于溶液体系中。
上述发明中所涉及的吸附性物质,目的在于保证液体中的溶菌酶以最稳定的构型或者空间构象存在。不拘于理论的限制作为蛋白质,溶菌酶在水中会以各种构型存在,而各种构型之间会互相转变。曾经有人对其各种构型进行研究,发现溶菌酶在水溶液中大部分都是表面带负电的,而其带正电为少量,正是由于这种正电构型的分子对带有异性电荷(负电)的分子具有一定的吸引力,从而造成蛋白质聚集。因此,本发明者采用一些带有负电的吸附剂,对溶液中的不稳定因素进行吸附,以使其溶液稳定性增加。本发明中采用的吸附剂包括活性炭、硅藻土、膨润土等。使用量为0.001%-10%(w/w)之间;优选为0.01-8%;更优选为0.1%-6%。吸附的温度为0℃-80℃;优选为5℃-75℃、10℃-70℃、20℃-65℃、或30℃-60℃。吸附时间一般为5min-48h;优选为10mi n-36h、15min-24h、20min-12h、25min-6h、或30min-2h。
处理工艺中涉及到两次过滤,此过滤可以为单层滤纸、滤膜的简单过滤,亦可以为深层过滤,如砂滤棒、石英砂板、钛棒、用于深层过滤的纸板以及适应工业化生产的滤芯过滤等过滤方式。
处理后的溶菌酶,可直接以液体形式进行投料;亦可借助冷冻干燥等干燥技术,或者借助氢氧化钠等碱性水溶液等物质将其pH值调节至溶菌酶等电点附近,使其大量析出后,过滤干燥,以固体状态使用。以上两种状态均可直接作为抑菌剂使用。
如采用冷冻干燥工艺处理得到溶液,其冻干条件:现将处理后的到的溶液放入低温冰箱中进行预冻,预冻的温度在-80℃~-70℃间,通常预冻8-12小时后,取出迅速放入已降温的冷阱中,冷阱的初始温度在-50℃~-30℃间,抽真空1h后,缓慢升温至-25℃~-20℃后,继续抽真空10h,待水分基本完全升华后转入次级冻干,次级冻干过程中,将温度升至10℃后,保温5h左右,直至次级冻干结束。
如采用喷雾干燥条件:加料速度通常在1.0-3.0ml/min,进口气流温度通常为105℃-120℃,出口气流温度在60℃-80℃,喷头压力在1.0-1.2kg/cm2。
亦可采用氢氧化钠水溶液等碱性溶液调节其pH至等电点,收集固体后,采用25℃-40℃,真空干燥24h左右,至其完全干燥后,收集得到的固体粉末。
本发明还涉及如下的(1)-(10)项中的任一项:
1.一种眼用制剂,其含有溶菌酶,并且所述溶菌酶的含量为0.001%-25%(w/w)、0.01%-20%(w/w)、0.1%-15%(w/w)、0.3%-10%(w/w)或0.5%-5%(w/w)。
2.根据第1项所述的眼用制剂,其中,所述溶菌酶是以溶菌酶制剂的形式添加的,并且所述溶菌酶制剂通过如下步骤制备:
1)将溶菌酶溶于注射用水,得到溶菌酶溶液;
2)向步骤1)中的溶菌酶溶液中加入稳定剂盐类;
3)调节pH至4.6-9.0。
3.根据第2项所述的眼用制剂,其中,所述溶菌酶溶液中溶菌酶的浓度为0.001%-50%(w/w)、0.01%-20%(w/w)、0.1%-15%(w/w)、0.3%-10%(w/w)或0.5%-5%(w/w)。
4.根据第2项所述的眼用制剂,其中,所述稳定剂盐类选自碳酸钠、碳酸氢钠、枸橼酸钠、硼酸、硼砂、磷酸二氢钾、氯化钾、以及氯化钙中的一种或多种;优选自硼酸、硼砂、枸橼酸钠、以及磷酸氢二钾中的一种或多种。
5.根据第2项所述的眼用制剂,其中,所述pH为4.7-9.0、4.8-8.5、5.0-8.0、5.0-7.0、或5.5-6.5。
6.根据第2项所述的眼用制剂,其还包括下述步骤:
4)静置,使溶菌酶与稳定剂盐类充分接触后过滤,得到滤液;优选地,所述静置在0℃-40℃环境下进行,静置时间为2-48小时之间。
7.根据第2项所述的眼用制剂,其还包括下述步骤:
5)加入带负电的吸附剂对滤液中的杂质进行吸附,获得澄清透明的溶液,然后过滤除去吸附性物质;优选地,所述吸附剂选自活性炭、硅藻土、和膨润土中的一种或多种。
8.根据第2项所述的眼用制剂,其中,所述吸附剂的使用量为0.001%-10%(w/w),吸附时间为5min-48h。
9.根据第2至8项中任一项所述的眼用制剂,其还包括下述步骤:
将溶菌酶制剂溶液制成溶菌酶制剂固体粉末;具体地,使用冷冻干燥或者喷雾干燥制得溶菌酶制剂固体粉末。
10.根据第1至9项中任一项所述的眼用制剂,其为滴眼液、眼膏剂、眼用凝胶剂、或眼用固体制剂。
发明的有益效果
溶菌酶为人体本身所固有,在泪液中作为一种抵御外界细菌等有害物质侵袭的天然抗菌物质,因此,对人体无任何危害,可以保证在长期使用的情况下对眼表无损伤,是一种理想抑菌剂。且作为天然抑菌剂,剂量的增大不会对人体产生任何副作用,因此为了加强抑菌效力可适当增大剂量,使获得的眼用制剂在达到良好稳定性的同时保证绝对的安全性。且与化学抑菌剂组成复合抑菌剂,可使化学抑菌剂用量降低至对人体损害较小的用量,而不降低整体防腐效力。
发明人解决了溶菌酶在溶液中稳定性问题,从而扩展了溶菌酶作为抑菌剂的使用范围。在国内乃至全球范围内首次将溶菌酶作为眼科抑菌剂应用于眼科药物制剂中。
本发明的眼用制剂以及其中的溶菌酶稳定性良好,并且具有良好的抑菌和/或防腐的性能,也有利于长期储存。
具体实施方式
下面将结合实施例对本发明的实施方案进行详细描述,但是本领域技术人员将会理解,下列实施例仅用于说明本发明,而不应视为限定本发明的范围。实施例中未注明具体条件者,按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者,均为可以通过市购获得的常规产品。
实施例1:溶菌酶制剂的制备
(1)取0.5g溶菌酶原料加入注射用水100g中,搅拌溶解,待全部溶解后备用;
(2)向其中加入磷酸二氢钠16g,使用1mol/L氢氧化钠调节注射用水的pH值至5.0±0.2;
(3)20℃静置48h,混合纤维素膜过滤;
(4)加入活性炭0.02g,70℃吸附20min,布氏漏斗过滤除去活性炭,将得到的溶液。
(5)将处理后的到的溶液放入低温冰箱中,-70℃预冻,通常预冻8h后,取出迅速放入已降温的冷井中,冷井的初始温度在-40℃间,抽真空1h后,缓慢升温至-20℃后,继续抽真空10h,待水分基本完全升华后转入次级冻干,将温度升至10℃后,保温5h左右,冷冻干燥后得到溶菌酶制剂。
实施例2:溶菌酶制剂的制备
(1)取硼酸6.2g,硼砂0.029g加入注射用水100g中,搅拌溶解,待全部溶解后备用;
(2)向其中加入2.5g溶菌酶原料,使其pH值至6.3±0.3;
(3)4℃冷藏静置2h,垂融漏斗过滤;
(4)加入膨润土2g,80℃吸附5min,砂滤棒过滤除去膨润土,得到处理后的溶菌酶制剂备用。
实施例3:溶菌酶制剂的制备
(1)取硫酸钠4.0g加入注射用水100g中,搅拌溶解,待全部溶解后备用;
(2)向其中加入5.0g溶菌酶原料,氢氧化钠调节pH值至8.0±0.2;
(3)室温(25℃)静置6h,砂滤棒过滤;
(4)加入活性炭10.0g,室温(25℃)吸附24h,砂滤棒过滤除去活性炭后,10%氢氧化钠浓溶液调节pH值至10.8±0.3,等电点沉降溶菌酶固体,过滤收集固体,在30℃下,真空干燥24h即得溶菌酶制剂。
实施例4:溶菌酶制剂的制备
(1)取20.0g溶菌酶原料加入注射用水50g中,搅拌溶解,待全部溶解后备用;
(2)向其中加入柠檬酸钠0.2g,使其pH值至5.5±0.2;
(3)10℃静置12h,深层过滤纸板过滤;
(4)加入硅藻土2.0g,10℃吸附48h,砂滤棒过滤除去硅藻土后,得到溶菌酶制剂备用。
实施例5:溶菌酶制剂的制备
(1)取10.0g溶菌酶原料加入注射用水100g中,搅拌溶解,待全部溶解后备用;
(2)向其中加入氯化钠5.0g,三乙醇胺调节pH值至7.5±0.3;
(3)8℃静置24h,滤芯过滤;
(4)加入活性炭5.0g,25℃吸附12h,砂滤棒过滤除去活性炭后,进行喷雾干燥。
(5)喷雾干燥的加料速度为1.0ml/min,进口气流温度通常为120℃,出口气流温度在60℃,喷头压力在1.2kg/cm2,干燥后得溶菌酶制剂。
注:上述实施例1-5中所使用的溶菌酶原料为溶菌酶的纯品或基本上为纯品(可视为纯品),其中溶菌酶的含量约为1万U/mg。
实施例6-1:以溶菌酶制剂做为抑菌剂的聚乙烯醇滴眼液
1)处方:
2)工艺:
(1)取70℃-80℃的注射用水适量,加入聚乙烯醇,搅匀,使其充分溶胀后,备用。
(2)取适量注射用水,依次加入硼酸、硼砂、甘油,搅拌使其溶解后备用。
(3)取实施例2制备的溶菌酶制剂加入(2)中,待全部溶解后备用。
(4)将已溶胀好的聚乙烯醇加入上述溶液中,补水至全量,搅匀即得。
实施例6-2:以羟苯乙酯作为抑菌剂的聚乙烯醇滴眼液
1)处方:
2)工艺:
(1)取70℃-80℃的注射用水适量,加入聚乙烯醇,搅匀,使其充分溶胀后,备用。
(2)取适量注射用水,依次加入硼酸、硼砂、甘油,搅拌使其溶解后备用。
(3)取羟苯乙酯加入(2)中,待全部溶解后备用。
(4)将已溶胀好的聚乙烯醇加入上述溶液中,补水至全量,搅匀即得。
实施例7-1:以溶菌酶制剂为抑菌剂的复方门冬维甘滴眼液
1)处方:
2)工艺:
(1)取80g左右注射用水,依次加入盐酸萘甲唑林、甲硫酸新斯的明、马来酸氯苯那敏、门冬氨酸钾、甘草酸二钾溶解后,加入氯化钠溶解。
(2)向上述溶液中加入实施例2制备的溶菌酶制剂,溶解后,补充注射用水至100ml,即得。
实施例7-2:以来处理溶菌酶为抑菌剂的复方门冬维甘滴眼液
1)处方:
2)工艺:
(1)取80g左右注射用水,依次加入盐酸萘甲唑林、甲硫酸新斯的明、马来酸氯苯那敏、门冬氨酸钾、甘草酸二钾溶解后,加入氯化钠溶解。
(2)向上述溶液中加入未处理溶菌酶粉末溶解后,补充注射用水至100ml,即得。
除应用于溶液型滴眼液外,眼用混悬剂、乳剂中亦可采用溶菌酶作为防腐抑菌剂,以抑制溶液内部微生物生长。具体由以下实施例3、实施例4加以说明。
实施例8-1:以溶菌酶制剂作为抑菌剂的复方硫酸新霉素混悬型
滴眼液
1)处方:
2)工艺:
(1)取适当70℃-80℃注射用水,向其中加入羟丙甲纤维素后,搅拌均匀,使其溶胀完全;
(2)另取适当注射用水向其中加入磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、甘油、实施例3制备的溶菌酶制剂,待全部溶解后加入硫酸新霉素、硫酸多黏菌素溶解后备用;
(3)将(1)加入(2)中搅拌混匀,备用;
(4)将醋酸泼尼松龙用少量上述溶液润湿后研磨,使其分散均匀后,加入上述溶液中,搅拌混匀;
(5)补充注射用水至100.0ml,搅匀即得。
实施例8-2:以苯氧乙醇作为抑菌剂的复方硫酸新霉素混悬型滴
眼液
1)处方:
2)工艺:
(1)取适当70℃-80℃注射用水,向其中加入羟丙甲纤维素后,搅拌均匀,使其溶胀完全;
(2)另取适当注射用水向其中加入磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、甘油,苯氧乙醇,待全部溶解后加入硫酸新霉素、硫酸多黏菌素溶解后备用;
(3)将(1)加入(2)中搅拌混匀,备用;
(4)将醋酸泼尼松龙用少量上述溶液润湿后研磨,使其分散均匀后,加入上述溶液中,搅拌混匀;
(5)补充注射用水至100.0ml,搅匀即得。
实施例9-1:以溶菌酶制剂为抑菌剂的维生素A眼用微乳
1)处方:
2)工艺:
(1)取适当50℃-60℃注射用水,向其中加入羟乙基纤维素后,搅拌均匀,使其溶胀完全;
(2)取适量注射用水,向其中加入依地酸二钠、实施例5制备的溶菌酶制剂、甘油、吐温80溶解后,备用;
(3)取处方量的中链甘油酸酯,向其中加入BHA溶解后,向其中加入维生素A混匀后,备用;
(4)将(3)在搅拌下缓慢倒入(2)中,混合均匀后,补充注射用水至100ml,即得。
实施例9-2:以苯扎氯铵为抑菌剂的维生素A眼用微乳
1)处方:
2)工艺:
(1)取适当50℃-60℃注射用水,向其中加入羟乙基纤维素后,搅拌均匀,使其溶胀完全;
(2)取适量注射用水,向其中加入依地酸二钠、苯扎氯铵、甘油、吐温80溶解后,备用;
(3)取处方量的中链甘油酸酯,向其中加入BHA溶解后,向其中加入维生素A混匀后,备用;
(4)将(3)在搅拌下缓慢倒入(2)中,混合均匀后,补充注射用水至100ml,即得。
溶菌酶除眼用液体制剂外,其亦可作为眼用半固体制剂如眼膏剂、眼用凝胶剂等剂型中的抑菌剂使用,以实验例3、5来进行详细描述。
实施例10-1:以溶菌酶制剂为抑菌剂的更昔洛韦眼用凝胶
1)处方:
2)工艺:
(1)取适当70℃-80℃注射用水,向其中加入羟丙甲纤维素、卡波姆后,搅拌均匀,使其溶胀完全;
(2)取适量注射用水,向其中依次加入甘油、更昔洛韦溶解后,另取少量稀盐酸溶解实施例3制备的溶菌酶制剂,加入其中搅匀备用。
(3)将(2)加入(1)中搅拌均匀后,向其中加入适量的三乙胺,使其pH值至6.0-7.0范围内。加注射用水至100ml后,搅匀即得。
实施例10-2:以硫柳汞为抑菌剂的更昔洛韦眼用凝胶
1)处方:
2)工艺:
(1)取适当70℃-80℃注射用水,向其中加入羟丙甲纤维素、卡波姆后,搅拌均匀,使其溶胀完全;
(2)取适量注射用水,向其中依次加入甘油、硫柳汞、更昔洛韦溶解后备用。
(3)将(2)加入(1)中搅拌均匀后,向其中加入适量的三乙胺,使其pH值至6.0-7.0范围内。加注射用水水至100ml后,搅匀即得。
实施例11-1:以溶菌酶制剂为抑菌剂的盐酸利多卡因眼用即型凝
胶
1)处方:
2)工艺:
(1)取适量注射用水溶解海藻酸钠后,备用。
(2)另取适当注射用水,依次加入并溶解氯化钠、实施例5制备的溶菌酶制剂、盐酸利多卡因后,将(1)加入其中搅拌均匀。
(3)补充注射用水至100ml,即得。
实施例11-2:以三氯叔丁醇为抑菌剂的盐酸利多卡因眼用即型凝
胶
1)处方:
2)工艺:
(1)取适量注射用水溶解海藻酸钠后,备用。
(2)另取适当注射用水,依次加入并溶解氯化钠、三氯叔丁醇、盐酸利多卡因后,将(1)加入其中搅拌均匀。
(3)补充注射用水至100ml,即得。
除此以外,溶菌酶还可以与其他抑菌剂共同使用作为复合抑菌剂,减小其他抑菌剂的用量的同时,不降低防腐效力,从而在保证制剂无菌的条件下,又可减小对眼部的伤害。具体通过实验例7加以详细说明。
实施例12-1:溶菌酶制剂与苯扎氯铵组成复合抑菌剂制成的牛磺
酸滴眼液
1)处方:
2)工艺:
(1)取适量注射用水溶解苯扎氯铵后,全部溶解后备用。
(2)另取适当注射用水,依次加入实施例1得到的溶菌酶制剂、牛磺酸溶解后,将(1)加入其中搅拌均匀。
(3)补充注射用水至100ml,即得。
实施例12-2:以苯扎氯铵单独作为抑菌剂制成的牛磺酸滴眼液
1)处方:
2)工艺:
(1)取适量注射用水溶解苯扎氯铵后,带全部溶解后备用。
(2)另取适当注射用水,依次加入硼砂、牛磺酸溶解后,将(1)加入其中搅拌均匀。
(3)补充注射用水至100ml,即得。
以上可见,在眼用液体制剂、半固体制剂中,均可以溶菌酶作为抑菌剂,除此以外,溶菌酶还可以在其他眼用制剂中作为抑菌剂使用,例如眼用固体制剂等,在此不加以一一说明。
实施例13:溶菌酶制剂与羟苯乙酯组成复合抑菌剂制成的色甘酸
钠滴眼液
1)处方:
2)工艺:
(1)取适量注射用水溶解羟苯乙酯后,全部溶解后备用。
(2)另取适当注射用水,依次加入磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、色甘酸钠、实施例1制备的溶菌酶制剂溶解后,将(1)加入其中搅拌均匀。
(3)补充注射用水至100ml,即得。
实施例14:溶菌酶制剂作为抑菌剂制成的聚维酮滴眼液
1)处方:
2)工艺:
(1)取适量注射用水溶解聚维酮后,全部溶解后浸泡24h。
(2)另取适当注射用水,依次加入氯化钠、实施例3制备的溶菌酶制剂溶解后,将(1)加入其中搅拌均匀。
(3)补充注射用水至100ml,即得。
实施例15:眼用制剂和溶菌酶的稳定性实验(1)
1.实验样品:在上述实施例7-1、7-2制成的样品。
2.实验方法:将7-1与7-2制成的样品,灌装于塑料滴眼剂瓶中。
长期稳定性考察在0、3、6、9、12、18、24、36个月取样;加速考察在0、1、2、3、6个月取样。检测眼用制剂的性状、可见异物、pH值、渗透压以及溶菌酶含量。
3.实验条件:
长期稳定性考察将样品置于温度为25℃±2℃、相对湿度60%±10%的条件下避光考察。
加速考察将样品置于40℃±2℃、相对湿度20%±2%的条件下避光考察。
4.溶菌酶含量测定方法:
溶菌酶含量可以反应溶菌酶活性,单位为U/ml。通常采用效价测定法对其含量进行测定,方法如下:
供试品溶液配制取本品1ml,置100ml量瓶中,加磷酸盐缓冲液(取磷酸二氢钠10.4g,磷酸氢二钠7.86g,依地酸二钠0.37g,加水溶解使成为1000ml,调节pH值至6.2)稀释至刻度,混合均匀。
底物悬浮液的制备称取溶酶小球菌10mg,加磷酸盐缓冲液5滴,在研钵内研磨3分钟,再加磷酸盐缓冲液适量,使总体积约100ml,悬浮液于25±0.1℃时,在450nm的波长处测得的吸收度为0.7±0.05(临用前配制)
测定方法精密量取25±0.1℃的底物悬浮液3ml,置1cm比色池中,在450nm的波长处测定吸收度,作为零秒的读数A0,然后精密量取25±0.1℃的供试品溶液0.15ml,加至上述比色池中,迅速混匀,用秒表计时,至60秒时再测定吸收度A;同时精密量取磷酸盐缓冲液0.15ml,同法操作,作为空白试验,测得零秒的读数A0′及60秒的读数A′。
计算公式:
5.实验结果:实施例7-1与7-2的眼用制剂与溶菌酶稳定性考察对比。
表1:眼用制剂和溶菌酶的稳定性考察对比表
从上述实验数据可明显看出,处理前后的溶菌酶对于制剂的性状、pH值、渗透压方面基本无差异,从可见异物、含量方面可以看出,处理后的溶菌酶稳定性明显优于未处理溶菌酶的稳定性。
实施例16:眼用制剂和抑菌剂的稳定性实验(2)
1.实验样品:在上述实施例9-1、9-2以及制成的样品。
2.实验方法:将9-1与9-2制成的样品,灌装于塑料滴眼剂瓶中。长期稳定性考察在0、3、6、9、12、18、24、36个月取样;加速考察在0、1、2、3、6个月取样。检测眼用制剂的性状、可见异物、pH值、渗透压以及抑菌剂含量。
3.实验条件:
长期稳定性考察将样品置于温度为25℃±2℃、相对湿度60%±10%的条件下避光考察。
加速考察将样品置于40℃±2℃、相对湿度20%±2%的条件下避光考察。
4.抑菌剂含量测定方法:
溶菌酶含量可以反应溶菌酶活性,单位为U/ml。通常采用效价测定法对其含量进行测定,方法如下:
供试品溶液配制取本品1ml,置100ml量瓶中,加磷酸盐缓冲液(取磷酸二氢钠10.4g,磷酸氢二钠7.86g,依地酸二钠0.37g,加水溶解使成为1000ml,调节pH值至6.2)稀释至刻度,混合均匀。
底物悬浮液的制备称取溶酶小球菌10mg,加磷酸盐缓冲液5滴,在研钵内研磨3分钟,再加磷酸盐缓冲液适量,使总体积约100ml,悬浮液于25±0.1℃时,在450nm的波长处测得的吸收度为0.7±0.05(临用前配制)
测定方法精密量取25±0.1℃的底物悬浮液3ml,置1cm比色池中,在450nm的波长处测定吸收度,作为零秒的读数A0,然后精密量取25±0.1℃的供试品溶液0.15ml,加至上述比色池中,迅速混匀,用秒表计时,至60秒时再测定吸收度A;同时精密量取磷酸盐缓冲液0.15ml,同法操作,作为空白试验,测得零秒的读数A0′及60秒的读数A′。
计算公式:
苯扎氯铵含量测定方法
照高效液相色谱法(中国药典2010版附录VD)测定
色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以0.005mo l/L醋酸铵溶液(每1000ml中含三乙胺10ml,用冰醋酸调节pH值至5.0±0.5)-乙腈(35∶65)为流动相;检测波长214nm。
测定法取本品20μl注入液相色谱仪,记录色谱图;另精密称取苯扎氯铵对照品适量,加水溶解并定量稀释制成每1ml中约含0.1mg的溶液。同法测定,供试品如苯扎氯铵,按外标法以峰面积计算,苯扎氯铵测得结果以标示量表示。
5.实验结果:实施例9-1与9-2的眼用制剂与溶菌酶稳定性考察对比。
表2:眼用制剂和抑菌剂的稳定性考察对比表
从上述实验数据可明显看出,实施例9-1与9-2中的制剂在加速考察6个月与长期稳定性考察36个月后,制剂在性状、可见异物、pH值、渗透压、抑菌剂含量方面均无明显变化。以苯扎氯铵或溶菌酶作为抑菌剂均不会影响制剂质量。
实施例17:眼用制剂和抑菌剂的稳定性实验(3)
1.实验样品:在上述实施例10-1、10-2制成的样品。
2.实验方法:将10-1与10-2制成的样品,灌装于塑料滴眼剂瓶中。长期稳定性考察在0、3、6、9、12、18、24、36个月取样;加速考察在0、1、2、3、6个月取样。检测眼用制剂的性状、可见异物、pH值、渗透压以及抑菌剂含量。
3.实验条件:
长期稳定性考察将样品置于温度为25℃±2℃、相对湿度60%±10%的条件下避光考察。
加速考察将样品置于30℃±2℃、相对湿度65%±5%的条件下避光考察。
4.抑菌剂含量测定方法:
溶菌酶含量可以反应溶菌酶活性,单位为U/ml。通常采用效价测定法对其含量进行测定,方法如下:
供试品溶液配制取本品1ml,置100ml量瓶中,加磷酸盐缓冲液(取磷酸二氢钠10.4g,磷酸氢二钠7.86g,依地酸二钠0.37g,加水溶解使成为1000ml,调节pH值至6.2)稀释至刻度,混合均匀。
底物悬浮液的制备称取溶酶小球菌10mg,加磷酸盐缓冲液5滴,在研钵内研磨3分钟,再加磷酸盐缓冲液适量,使总体积约100ml,悬浮液于25±0.1℃时,在450nm的波长处测得的吸收度为0.7±0.05(临用前配制)
测定方法精密量取25±0.1℃的底物悬浮液3ml,置1cm比色池中,在450nm的波长处测定吸收度,作为零秒的读数A0,然后精密量取25±0.1℃的供试品溶液0.15ml,加至上述比色池中,迅速混匀,用秒表计时,至60秒时再测定吸收度A;同时精密量取磷酸盐缓冲液0.15ml,同法操作,作为空白试验,测得零秒的读数A0′及60秒的读数A′。
计算公式:
硫柳汞含量测定方法
照高效液相色谱法(中国药典2010版附录VD)测定
色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以0.02mol/L醋酸铵溶液-甲醇(70∶30)为流动相;检测波长240nm。
测定法取本品20μl注入液相色谱仪,记录色谱图;另精密称取硫柳汞对照品适量,加水溶解并定量稀释制成每1ml中约含40μg的溶液。同法测定,供试品如硫柳汞,按外标法以峰面积计算,硫柳汞测得结果以标示量表示。
5.实验结果:实施例10-1与10-2的眼用制剂与溶菌酶稳定性考察对比。
表3:眼用制剂和抑菌剂的稳定性考察对比表
从上述实验数据可明显看出,实施例10-1与10-2中的制剂在加速考察6个月与长期稳定性考察36个月后,制剂在性状、可见异物、pH值、渗透压均无明显变化。在抑菌剂含量方面,溶菌酶含量在考察过程中基本无变化,而硫柳汞在考察过程中呈现下降趋势。
实施例18:抑菌效力实验
为验证溶菌酶作为眼用抑菌剂的抑菌效力,发明者参照中国药典2010版XIX N抑菌剂效力检验法指导原则对上述实施例的抑菌效力进行测定。
1.实验药物:上面的各实施例中制备的眼用制剂。
2.实验方法:
2.1受试菌种:
铜绿假单胞菌(pseudomonas aeruginosa)〔CMCC(B)10 104〕
大肠埃希菌(Escherichia coli)〔CMCC(B)44 102〕
金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)〔CMCC(B)26 003〕
白色念球菌(Candida albicans)〔CMCC(F)98 001〕
黑曲霉(Aspergillus niger)〔CMCC(F)98 003〕
2.2试验方法:
取供试品5份,分别转移至5个适宜的无菌容器中,每种容器接种一种试验菌,接种菌量为105-106cfu,接种菌液的体积不得超过供试品体积的0.5%-1%,充分混合,施工食品中的试验菌均匀分布。然后讲解中的供试品在实验期间置20℃-25℃,避光贮存。
2.3存活菌数测定
在供试品刚接种(0时)及第7天、14天及28天分别提取供试品,以平皿法或薄膜过滤法测定每份供试品中所含菌数。根据均属测定结果,计算1ml(g)供试品各试验菌所加菌数及各间隔时间的菌数,并换算成1g值。
2.4实验结果判断标准
参照中国药典2010版,眼用制剂属于1类供试品。
对其中抑菌剂的防腐效力规定细菌7天菌数下降不少于1.01g,14天菌数下降不少于3.01g,14天到28天菌数不增加;真菌与初始值比,7、14、28天菌数均不增加。按此规定,溶菌酶可以满足眼用制剂对抑菌剂的要求。
3.实验结果。分别如下面的表2-8所示。
3.1以实施例6-1与实施例6-2制成样品,对溶菌酶与羟苯乙酯的防腐能力进行比较,结果如下表4:
表4:溶菌酶与羟苯乙酯的防腐效力中菌落数及结果对比表
从上表中可以看出,溶菌酶与羟苯乙酯的防腐效力无明显差异。
3.2以实施例7-1与实施例7-2制成样品,对溶菌酶处理前后的防腐能力进行比较,结果如下表5:
表5:溶菌酶处理与未处理防腐效力中菌落数及结果对比表
从上表中可以看出未处理溶菌酶与已处理溶菌酶对大肠埃希菌与金黄色葡萄球菌的抑菌效力基本无差异,但对铜绿假单疱菌与真菌,未处理的溶菌酶抑菌效力略低于处理后的溶菌酶。
另外,由上表结果可以看出,溶菌酶浓度在0.3%时(最小有效浓度),其抑菌效力即可满足国家标准。
3.3以实施例8-1与实施例8-2对比了在混悬型滴眼液中溶菌酶与苯氧乙醇的防腐能力,结果如下表6:
表6:溶菌酶与苯氧乙醇的防腐效力对比结果表
从上表中可以看出溶菌酶与苯氧乙醇的抑菌效力无明显差异。
3.4以实施例9-1与实施例9-2对比了在营养型滴眼液中溶菌酶与苯扎氯铵的防腐能力,结果如下表7:
表7:溶菌酶与苯扎氯铵的防腐效力对比结果表
从上表中可以看出苯扎氯铵在其眼科药物常用量内的防腐效力明显要低于溶菌酶的效力。且由于溶菌酶为人体内源性物质,在较大的使用量下对人体亦无影响。使得营养型滴眼液可以在排除对人体眼表伤害的同时,保证其滴眼液内部的无菌环境。
3.5以实施例10-1与实施例10-2对比了在中溶菌酶与硫柳汞在眼膏剂中的防腐能力,结果如下表8:
表8:溶菌酶与硫柳汞的防腐效力对比结果表
从上表中可以看出溶菌酶与硫柳汞抑菌效力无明显差异。
3.6以实施例11-1与实施例11-2对比了在中溶菌酶与三氯叔丁醇在眼用即型凝胶中的的防腐能力,结果如下表9:
表9:溶菌酶与三氯叔丁醇的防腐效力对比结果表
从上表中可以看出溶菌酶与三氯叔丁醇的抑菌效力并无显著差异。
3.7以实施例12-1与实施例12-2对比了单独使用高浓度的苯扎氯铵与溶菌酶与低浓度苯扎氯铵复合使用时防腐能力进行对比,结果如下表10:
表10:12-1与12-2抑菌效力对比结果表
由上表可见,溶菌酶与苯扎氯铵复合使用的情况下,可在苯扎氯铵用量降低的情况下,减小苯扎氯铵的副作用的同时,抑菌效力不发生显著变化。
综上实验结果可见,与苯扎氯铵等常用抑菌剂相比较,溶菌酶与其它抑菌剂的抑菌效力无显著差异。且可与其它抑菌剂合用,减小其用量,从而减小其它抑菌剂的毒副作用。
尽管本发明的具体实施方式已经得到详细的描述,本领域技术人员将会理解。根据已经公开的所有教导,可以对那些细节进行各种修改和替换,这些改变均在本发明的保护范围之内。本发明的全部范围由所附权利要求及其任何等同物给出。
Claims (10)
1.一种眼用制剂,其含有溶菌酶,并且所述溶菌酶的含量为0.001%-25%(w/w)、0.01%-20%(w/w)、0.1%-15%(w/w)、0.3%-10%(w/w)或0.5%-5%(w/w)。
2.根据权利要求1所述的眼用制剂,其中,所述溶菌酶是以溶菌酶制剂的形式添加的,并且所述溶菌酶制剂通过如下步骤制备:
1)将溶菌酶溶于注射用水,得到溶菌酶溶液;
2)向步骤1)中的溶菌酶溶液中加入稳定剂盐类;
3)调节pH至4.6-9.0。
3.根据权利要求2所述的眼用制剂,其中,所述溶菌酶溶液中溶菌酶的浓度为0.001%-50%(w/w)、0.01%-20%(w/w)、0.1%-15%(w/w)、0.3%-10%(w/w)或0.5%-5%(w/w)。
4.根据权利要求2所述的眼用制剂,其中,所述稳定剂盐类选自碳酸钠、碳酸氢钠、枸橼酸钠、硼酸、硼砂、磷酸二氢钾、氯化钾、以及氯化钙中的一种或多种;优选自硼酸、硼砂、枸橼酸钠、以及磷酸氢二钾中的一种或多种。
5.根据权利要求2所述的眼用制剂,其中,所述pH为4.7-9.0、4.8-8.5、5.0-8.0、5.0-7.0、或5.5-6.5。
6.根据权利要求2所述的眼用制剂,其还包括下述步骤:
4)静置,使溶菌酶与稳定剂盐类充分接触后过滤,得到滤液;优选地,所述静置在0℃-40℃环境下进行,静置时间为2-48小时之间。
7.根据权利要求6所述的眼用制剂,其还包括下述步骤:
5)加入带负电的吸附剂对滤液中的杂质进行吸附,获得澄清透明的溶液,然后过滤除去吸附性物质;优选地,所述吸附剂选自活性炭、硅藻土、和膨润土中的一种或多种。
8.根据权利要求7所述的眼用制剂,其中,所述吸附剂的使用量为0.001%-10%(w/w),吸附时间为5min-48h。
9.根据权利要求2至8中任一项所述的眼用制剂,其还包括下述步骤:
将溶菌酶制剂溶液制成溶菌酶制剂固体粉末;具体地,使用冷冻干燥或者喷雾干燥制得溶菌酶制剂固体粉末。
10.根据权利要求1至9中任一项所述的眼用制剂,其为滴眼液、眼膏剂、眼用凝胶剂、或眼用固体制剂。
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---|---|
CN (1) | CN103182074B (zh) |
Cited By (10)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN105999239A (zh) * | 2016-05-11 | 2016-10-12 | 山东司邦得制药有限公司 | 一种盐酸溶菌酶滴眼液及其制备方法和应用 |
CN106434474A (zh) * | 2016-10-26 | 2017-02-22 | 山东大学齐鲁医院 | 一种用于细菌培养的防腐稳定剂及其制备方法 |
CN110404057A (zh) * | 2019-07-09 | 2019-11-05 | 武汉华肽生物科技有限公司 | 一种基于基因重组蛋白Tat-hMsrA的药物组合物及其应用 |
CN111249219A (zh) * | 2018-11-30 | 2020-06-09 | 中南大学湘雅三医院 | 治疗耳道真菌的滴耳液及其制备方法 |
CN111662954A (zh) * | 2020-06-03 | 2020-09-15 | 南京健友生化制药股份有限公司 | 一种薄膜过滤法检测注射用达托霉素中间产品中微生物计数的方法 |
US10927360B1 (en) | 2019-08-07 | 2021-02-23 | Clara Foods Co. | Compositions comprising digestive enzymes |
US11160299B2 (en) | 2019-07-11 | 2021-11-02 | Clara Foods Co. | Protein compositions and consumable products thereof |
US11279748B2 (en) | 2014-11-11 | 2022-03-22 | Clara Foods Co. | Recombinant animal-free food compositions and methods of making them |
EP3834839A4 (en) * | 2018-06-14 | 2022-03-30 | Shaanxi Huikang Bio-Tech Co., Ltd | NOVEL ARTIFICIAL TEARS WITH RECOMBINANT HUMAN LYSOZYME |
WO2023020520A1 (zh) * | 2021-08-20 | 2023-02-23 | 苏州三个臭皮匠生物科技有限公司 | 去蛋白效果检测用蛋白沉积方法、培养液及清洗检测仪 |
Citations (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2003055258A (ja) * | 2001-08-16 | 2003-02-26 | Rohto Pharmaceut Co Ltd | 安定化された組成物 |
CN1593651A (zh) * | 2004-06-21 | 2005-03-16 | 张华� | 人溶菌酶在制备治疗眼病的药物中的新用途 |
JP2008156268A (ja) * | 2006-12-22 | 2008-07-10 | Lion Corp | 眼科用組成物 |
US20080213188A1 (en) * | 2007-03-02 | 2008-09-04 | Saint Simeon Lda | Novel ophthalmic compositions containing human recombinant lysozyme and use thereof for treating eye conditions and as contact lens solutions |
JP2010043068A (ja) * | 2008-07-14 | 2010-02-25 | Lion Corp | 眼科用組成物及びなみだ目改善剤 |
JP4508628B2 (ja) * | 2003-12-18 | 2010-07-21 | ライオン株式会社 | 眼科用組成物 |
-
2011
- 2011-12-30 CN CN201110451263.0A patent/CN103182074B/zh active Active
Patent Citations (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2003055258A (ja) * | 2001-08-16 | 2003-02-26 | Rohto Pharmaceut Co Ltd | 安定化された組成物 |
JP4508628B2 (ja) * | 2003-12-18 | 2010-07-21 | ライオン株式会社 | 眼科用組成物 |
CN1593651A (zh) * | 2004-06-21 | 2005-03-16 | 张华� | 人溶菌酶在制备治疗眼病的药物中的新用途 |
JP2008156268A (ja) * | 2006-12-22 | 2008-07-10 | Lion Corp | 眼科用組成物 |
US20080213188A1 (en) * | 2007-03-02 | 2008-09-04 | Saint Simeon Lda | Novel ophthalmic compositions containing human recombinant lysozyme and use thereof for treating eye conditions and as contact lens solutions |
JP2010043068A (ja) * | 2008-07-14 | 2010-02-25 | Lion Corp | 眼科用組成物及びなみだ目改善剤 |
Cited By (15)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US11279748B2 (en) | 2014-11-11 | 2022-03-22 | Clara Foods Co. | Recombinant animal-free food compositions and methods of making them |
CN105999239A (zh) * | 2016-05-11 | 2016-10-12 | 山东司邦得制药有限公司 | 一种盐酸溶菌酶滴眼液及其制备方法和应用 |
CN106434474A (zh) * | 2016-10-26 | 2017-02-22 | 山东大学齐鲁医院 | 一种用于细菌培养的防腐稳定剂及其制备方法 |
EP3834839A4 (en) * | 2018-06-14 | 2022-03-30 | Shaanxi Huikang Bio-Tech Co., Ltd | NOVEL ARTIFICIAL TEARS WITH RECOMBINANT HUMAN LYSOZYME |
CN111249219A (zh) * | 2018-11-30 | 2020-06-09 | 中南大学湘雅三医院 | 治疗耳道真菌的滴耳液及其制备方法 |
CN111249219B (zh) * | 2018-11-30 | 2023-08-11 | 中南大学湘雅三医院 | 治疗耳道真菌的滴耳液及其制备方法 |
CN110404057A (zh) * | 2019-07-09 | 2019-11-05 | 武汉华肽生物科技有限公司 | 一种基于基因重组蛋白Tat-hMsrA的药物组合物及其应用 |
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