CN103173286A - 一种利用超临界技术提取红豆杉挥发油的方法 - Google Patents

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王琼
喻琼林
蔡强
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Abstract

本发明涉及一种用超临界技术提取南方红豆杉枝叶中挥发油的方法，具体包括如下步骤：采摘南方红豆杉枝叶、洗净、常温干燥、切段、粉碎过筛，得到南方红豆杉粗粉，将粗粉放入萃取缸进行萃取，然后从分离釜Ⅰ和分离釜Ⅱ放料口放出挥发油即得。该方法可在常温下进行，无毒，无残留，节约时间，节约能耗，提取工艺简单，萃取效率高。克服了传统对南方红豆杉挥发油提取中使用的水蒸气蒸馏法存在的费时、费能和产品带有水分残留的缺点。

Description

一种利用超临界技术提取红豆杉挥发油的方法
技术领域
本发明涉及一种红豆杉的提取方法，更具体涉及一种利用超临界技术提取红豆杉挥发油的方法。
背景技术
植物挥发油，又称植物精油，是一类具有挥发性且可随水蒸气蒸馏出来的油状液体，多呈无色或黄色，具有特殊气味( 多为香气) 或辛辣味。在化学结构上主要分为萜类烷烃烯烃醇类酯类含羰基和羧基类物质。由植物花果实合成释放的挥发性物质，主要包括芳香化合物萜类化合物酯类物质以及一些含氮硫化合物；由营养组织如叶片等释放的挥发性物质，包括萜类脂肪酸衍生物，如醛类和醇类化合物等。植物挥发油大多具有独特香味，具有杀菌刺激放松等效应，能使人适度兴奋减缓疲劳及产生松弛感等；具有解热、镇痛、抗菌、消炎、缓解疲劳等作用。不仅在香料食品工业、日用化妆品等方面应用极为广泛，而且对人类医疗、保健也有十分重要的意义。
南方红豆杉属裸子植物红豆杉科红豆杉属植物，主要分布于长江流域、南岭山脉山区及河南、陕西(秦岭)、甘肃等省的山地或溪谷，江浙地区是其重要的自然分布区域之一。1999年被列为我国一级重点保护野生植物。南方红豆杉中除了含有抗癌成分紫杉醇外，还含有重要的植物挥发油。目前对南方红豆杉的研究报道，多针对其主要抗癌成分紫杉醇及其他紫杉烷类化合物的研究。对其挥发油的研究甚少，仅有水蒸气蒸馏提取其挥发油，据报道，用传统的水蒸气蒸馏法提取南方红豆杉枝叶的挥发油，提取率仅为0.3%左右，存在时间长、能耗高、产品中带有水分、有机溶剂残留等缺点；而采用超临界技术提取红豆杉中挥发油尚未见报道。
有鉴于此，特提出本发明。
发明内容
本发明用于解决上述南方红豆杉枝叶的挥发油的技术问题，克服上述现有技术的不足之处。目的在于提供一种保障南方红豆杉枝叶挥发油质量和产量的提取工艺，充分利用江苏无锡东港镇大面积人工栽培南方红豆杉资源，开拓南方红豆杉精油的应用领域。
为达到上述目的，本发明采用如下技术方案。
一种利用超临界技术提取红豆杉挥发油的方法，包括如下步骤：
1）采摘南方红豆杉枝叶，预处理后得南方红豆杉枝叶粗粉；
2）将南方红豆杉粗粉放入萃取缸中，设定萃取缸温度为30-45℃，萃取缸压力为15-25Mpa；分离釜Ⅰ温度为24-28℃，分离釜Ⅰ压力为7-9Mpa；分离釜Ⅱ温度为18-22℃，分离釜Ⅱ压力为3-5MPa；启动CO2循环系统；
3）萃取50-150min，从分离釜Ⅰ和分离釜Ⅱ放料口取出挥发油，即得南方红豆杉挥发油。
其中，步骤1）中所述的预处理为：将南方红豆杉枝叶洗净，常温干燥，切断，粉碎至20-60目。
其中，优选步骤2）中CO2纯度达99%以上，设定流速为0.5-15L/min，优选CO2流速为8-12L/min。 
其中，优选步骤2）中萃取缸温度优选为35℃，萃取缸压力为20-25MPa。
其中，优选步骤2）中分离釜Ⅰ温度为25℃，分离釜Ⅰ压力为8Mpa。
其中，优选步骤2）中分离釜Ⅱ温度为20℃，分离釜Ⅱ压力为4MPa；步骤3中萃取时间为60-90min。
本发明是采摘南方红豆杉枝叶、洗净、常温干燥、切段、粉碎过筛，得到南方红豆杉粗粉，将粗粉放入BSI 公司的BSI-400S-2000R超临界萃取设备的萃取缸中进行萃取，然后从分离釜Ⅰ和分离釜Ⅱ放料口放出挥发油即得。该方法可在常温下进行，CO2无毒，可循环使用，无残留溶剂，节约时间，节约能耗，提取工艺简单，萃取效率高，挥发油提取率在1.5%以上。
此外，本发明还保护上述提取方法所制备的南方红豆杉挥发油。
作为本发明的第三目的，本发明进一步保护上述方法获得的南方红豆杉挥发油在制备抗氧化抗菌日化用品中的应用。
以及，所述的方法获得的南方红豆杉挥发油在制备治疗糖尿病药物或保健用品或药品中的应用。
采用上述技术方案，本发明与现有传统技术相比，具有如下优点：
（1）本发明绿色环保：整个南方红豆杉枝叶中挥发油的提取工艺不用任何有机溶剂，产品不留任何化学溶剂残留，防止了对人体有害的化学残留以及加工过程对环境的污染，保证了100%的纯天然性；
（2）本发明挥发油提取过程安全：萃取过程中所用的CO2属惰性气体，不会发生化学反应，且不可燃、无味、无臭、无毒、安全性高；
（3）本发明提取方法高效节能：将传统挥发油提取工艺中的萃取和分离过程合二为一，萃取效率高、能耗少，极大提高生产效率、降低成本；
（4）本发明是在接近室温(35～40℃)及CO2气体氛围下进行的提取，有效地防止了南方红豆杉枝叶中热敏性物质的氧化、分解和逸散，并能把挥发油在远低于其沸点温度下萃取出来；
（5）本发明用到的CO2气体容易制取，价格低，且在生产中可以重复循环使用，可有效地降低成本；
（6）本发明通过对整个过程中温度与压力的控制，从而控制萃取能力，工艺简单容易掌握，萃取的速度快，易于实现产业化。
具体实施方式
实施例1
1）采摘南方红豆杉枝叶，洗净、常温干燥、切段、粉碎过20目筛，称取南方红豆杉枝叶粗粉200g。
2）通电源，开冷循环及加热，设定萃取缸温度为30℃，分离釜Ⅰ温度为25℃，分离釜Ⅱ温度为20℃。
3）将南方红豆杉粗粉放入萃取缸中，启动CO2循环系统，设定流速为10L/min。
4）调节萃取缸压力为15MPa，分离釜Ⅰ压力为8MPa，分离釜Ⅱ压力为4MPa。
5）待各参数达到设定值，开始计时，经过60min萃取，从分离釜Ⅰ和分离釜Ⅱ放料口取出挥发油，即得南方红豆杉挥发油，提取率为0.7%。
实施例2
1）采摘南方红豆杉枝叶，洗净、常温干燥、切段、粉碎过40目筛，称取南方红豆杉枝叶粗粉200g。
2）通电源，开冷循环及加热，设定萃取缸温度为30℃，分离釜Ⅰ温度为25℃，分离釜Ⅱ温度为20℃。
3）将南方红豆杉粗粉放入萃取缸中，启动CO2循环系统，设定流速为5L/min。
4）调节萃取缸压力为25MPa，分离釜Ⅰ压力为8MPa，分离釜Ⅱ压力为4MPa。
5）待各参数达到设定值，开始计时，经过60min萃取，从分离釜Ⅰ和分离釜Ⅱ放料口取出挥发油，即得南方红豆杉挥发油，提取率为1.1%。
实施例3
1）采摘南方红豆杉枝叶，洗净、常温干燥、切段、粉碎过40目筛，称取南方红豆杉枝叶粗粉200g。
2）通电源，开冷循环及加热，设定萃取缸温度为35℃，分离釜Ⅰ温度为25℃，分离釜Ⅱ温度为20℃。
3）将南方红豆杉粗粉放入萃取缸中，启动CO2循环系统，设定流速为10L/min。
4）调节萃取缸压力为22MPa，分离釜Ⅰ压力为8MPa，分离釜Ⅱ压力为4MPa。
5）待各参数达到设定值，开始计时，经过60min萃取，从分离釜Ⅰ和分离釜Ⅱ放料口取出挥发油，即得南方红豆杉挥发油，提取率为1.5%。
实施例4
1）采摘南方红豆杉枝叶，洗净、常温干燥、切段、粉碎过40目筛，称取南方红豆杉枝叶粗粉200g。
2）通电源，开冷循环及加热，设定萃取缸温度为30℃，分离釜Ⅰ温度为24℃，分离釜Ⅱ温度为18℃。
3）将南方红豆杉粗粉放入萃取缸中，启动CO2循环系统，设定流速为8L/min。
4）调节萃取缸压力为25MPa，分离釜Ⅰ压力为8MPa，分离釜Ⅱ压力为4MPa。
5）待各参数达到设定值，开始计时，经过90min萃取，从分离釜Ⅰ和分离釜Ⅱ放料口取出挥发油，即得南方红豆杉挥发油，提取率为1.2%。
实施例5
1）采摘南方红豆杉枝叶，洗净、常温干燥、切段、粉碎过40目筛，称取南方红豆杉枝叶粗粉200g。
2）通电源，开冷循环及加热，设定萃取缸温度为45℃，分离釜Ⅰ温度为28℃，分离釜Ⅱ温度为22℃。
3）将南方红豆杉粗粉放入萃取缸中，启动CO2循环系统，设定流速为0.5L/min。
4）调节萃取缸压力为22MPa，分离釜Ⅰ压力为7MPa，分离釜Ⅱ压力为3MPa。
5）待各参数达到设定值，开始计时，经过50min萃取，从分离釜Ⅰ和分离釜Ⅱ放料口取出挥发油，即得南方红豆杉挥发油，提取率为0.9%。
实施例6
1）采摘南方红豆杉枝叶，洗净、常温干燥、切段、粉碎过40目筛，称取南方红豆杉枝叶粗粉200g。
2）通电源，开冷循环及加热，设定萃取缸温度为45℃，分离釜Ⅰ温度为25℃，分离釜Ⅱ温度为20℃。
3）将南方红豆杉粗粉放入萃取缸中，启动CO2循环系统，设定流速为6L/min。
4）调节萃取缸压力为15MPa，分离釜Ⅰ压力为8MPa，分离釜Ⅱ压力为4MPa。
5）待各参数达到设定值，开始计时，经过60min萃取，从分离釜Ⅰ和分离釜Ⅱ放料口取出挥发油，即得南方红豆杉挥发油，提取率为0.8%。
实施例7
1）采摘南方红豆杉枝叶，洗净、常温干燥、切段、粉碎过40目筛，称取南方红豆杉枝叶粗粉200g。
2）通电源，开冷循环及加热，设定萃取缸温度为40℃，分离釜Ⅰ温度为25℃，分离釜Ⅱ温度为20℃。
3）将南方红豆杉粗粉放入萃取缸中，启动CO2循环系统，设定流速为8L/min。
4）调节萃取缸压力为20MPa，分离釜Ⅰ压力为8MPa，分离釜Ⅱ压力为4MPa。
5）待各参数达到设定值，开始计时，经过150min萃取，从分离釜Ⅰ和分离釜Ⅱ放料口取出挥发油，即得南方红豆杉挥发油，提取率为1.3%。
实施例8
1）采摘南方红豆杉枝叶，洗净、常温干燥、切段、粉碎过40目筛，称取南方红豆杉枝叶粗粉200g。
2）通电源，开冷循环及加热，设定萃取缸温度为35℃，分离釜Ⅰ温度为25℃，分离釜Ⅱ温度为20℃。
3）将南方红豆杉粗粉放入萃取缸中，启动CO2循环系统，设定流速为12L/min。
4）调节萃取缸压力为25MPa，分离釜Ⅰ压力为9MPa，分离釜Ⅱ压力为5MPa。
5）待各参数达到设定值，开始计时，经过90min萃取，从分离釜Ⅰ和分离釜Ⅱ放料口取出挥发油，即得南方红豆杉挥发油，提取率为1.0%。
实施例9
1）采摘南方红豆杉枝叶，洗净、常温干燥、切段、粉碎过40目筛，称取南方红豆杉枝叶粗粉200g。
2）通电源，开冷循环及加热，设定萃取缸温度为35℃，分离釜Ⅰ温度为25℃，分离釜Ⅱ温度为20℃。
3）将南方红豆杉粗粉放入萃取缸中，启动CO2循环系统，设定流速为10L/min。
4）调节萃取缸压力为20MPa，分离釜Ⅰ压力为8MPa，分离釜Ⅱ压力为4MPa。
5）待各参数达到设定值，开始计时，经过90min萃取，从分离釜Ⅰ和分离釜Ⅱ放料口取出挥发油，即得南方红豆杉挥发油，提取率为0.9%。
实施例10
1）采摘南方红豆杉枝叶，洗净、常温干燥、切段、粉碎过40目筛，称取南方红豆杉枝叶粗粉200g。
2）通电源，开冷循环及加热，设定萃取缸温度为35℃，分离釜Ⅰ温度为25℃，分离釜Ⅱ温度为20℃。
3）将南方红豆杉粗粉放入萃取缸中，启动CO2循环系统，设定流速为0.5-15L/min。
4）调节萃取缸压力为20MPa，分离釜Ⅰ压力为8MPa，分离釜Ⅱ压力为4MPa。
5）待各参数达到设定值，开始计时，经过150min萃取，从分离釜Ⅰ和分离釜Ⅱ放料口取出挥发油，即得南方红豆杉挥发油，提取率为1.0%。
实施例11
1）采摘南方红豆杉枝叶，洗净、常温干燥、切段、粉碎过40目筛，称取南方红豆杉枝叶粗粉100g。
2）通电源，开冷循环及加热，设定萃取缸温度为35℃，分离釜Ⅰ温度为25℃，分离釜Ⅱ温度为20℃。
3）将南方红豆杉粗粉放入萃取缸中，启动CO2循环系统，设定流速为11L/min。
4）调节萃取缸压力为20MPa，分离釜Ⅰ压力为8MPa，分离釜Ⅱ压力为4MPa。
5）待各参数达到设定值，开始计时，经过90min萃取，从分离釜Ⅰ和分离釜Ⅱ放料口取出挥发油，即得南方红豆杉挥发油，提取率为1.1%。
试验例1
细菌：大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌。
取冻干菌种管，在无菌下打开，以毛细吸管加入适量液体培养基，轻柔吹吸数次，使菌种融化分散。取含有5.0—10.0ml液体培养基试管，滴加少量菌种悬液，置37℃培养18h—24h。用接种环取第一代培养的悬浮液，划线接种于营养琼脂培养基上，置37℃培养18h—24h。挑取上述第二代培养物中典型菌落，接种于营养琼脂上，置37℃培养18h—24h，即为第三代培养物。真菌基本相同，但要置于26℃下培养，48h或更长时间。 
取菌种第3代-14代，加入适量稀释液，反复吹吸，洗下菌苔。随后将洗液移至另一试管，用电动混合器混合，或在手上镇敲80次，以使细菌悬浮均匀。真菌同理。
初步制成的菌液，稀释到合适浓度后备用。 
方法：贴片法。滤纸圆片，直径6.0mm，干热灭菌（烘箱165℃,2h），冷却备用。 
取经干热灭菌处理的培养皿（直径9cm），进行无菌操作。用经过灭菌的微量进样器吸取稀释好的菌液0.1ml加到倒好培养基的培养皿上，冷却凝固。将灭好菌的小圆纸片放到倒好培养基的培养皿上展平，然后用经过灭菌的微量进样器，依次向培养皿中加0.02毫升由实施例3、5、7、10获得的挥发油分别名为试验组1，2，3，4。倒置，做标记，放在37℃培养箱中培养，每24小时观察菌落生长情况。每种样品每个菌种作三个重复。
挥发油对供试菌的抑菌圈直径(mm)
供试菌种 实验组1 实验组2 实验组3 实验组4
大肠杆菌 31.5 30.9 31.9 30.2
金黄色葡萄球菌 26.7 26.4 25.6 24.3
沙门氏菌 39.1 39.6 39.8 40.1
   上述试验结果表明，本发明所得到的挥发油具有显著的抑菌作用，即本发明所述南方红豆杉挥发油可以有效用于制备抗氧化抗菌日化用品，具有广泛的应用前景。

Claims (10)

1.一种利用超临界技术提取南方红豆杉枝叶中挥发油的方法，所述的方法包括如下步骤：
1）采摘南方红豆杉枝叶，预处理后得南方红豆杉枝叶粗粉；
2）将南方红豆杉粗粉放入萃取缸中，启动CO2循环系统；设定萃取缸温度为30-45℃，萃取缸压力为15-25Mpa；分离釜Ⅰ温度为24-28℃，分离釜Ⅰ压力为7-9Mpa；分离釜Ⅱ温度为18-22℃，分离釜Ⅱ压力为3-5MPa；
3）萃取50-150min，从分离釜Ⅰ和分离釜Ⅱ放料口取出挥发油，即得南方红豆杉挥发油。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于步骤1）中所述的预处理为：将南方红豆杉枝叶洗净，常温干燥，切断，粉碎至20-60目。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于步骤2）中CO2纯度达99%以上，设定流速为0.5-15L/min。
4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于步骤2）中CO2流速为8-12L/min。
5.根据权利要求1-3任一项所述的方法，其特征在于步骤2）中萃取缸温度为35℃，萃取缸压力为20-25MPa。
6.根据权利要求1-5任一项所述的方法，其特征在于步骤2）中分离釜Ⅰ温度为25℃，分离釜Ⅰ压力为8Mpa。
7.根据权利要求1-6任一项所述的方法，其特征在于步骤2）中分离釜Ⅱ温度为20℃，分离釜Ⅱ压力为4MPa；萃取时间为60-90min。
8.权利要求1-7任一项方法所制备的南方红豆杉挥发油。
9.权利要求8所述南方红豆杉挥发油在制备抗氧化抗菌日化用品中的应用。
10.权利要求8所述南方红豆杉挥发油在制备治疗糖尿病药物或保健用品或药品中的应用。
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