CN103102389A - 作为丙型肝炎病毒ns3丝氨酸蛋白酶抑制剂的硫化合物 - Google Patents

作为丙型肝炎病毒ns3丝氨酸蛋白酶抑制剂的硫化合物 Download PDF

Info

Publication number
CN103102389A
CN103102389A CN2012103533032A CN201210353303A CN103102389A CN 103102389 A CN103102389 A CN 103102389A CN 2012103533032 A CN2012103533032 A CN 2012103533032A CN 201210353303 A CN201210353303 A CN 201210353303A CN 103102389 A CN103102389 A CN 103102389A
Authority
CN
China
Prior art keywords
solution
make
add
mixture
stirred
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN2012103533032A
Other languages
English (en)
Inventor
F.本内特
R.G.洛维
黄育华
S.亨德拉塔
A.K.萨克塞纳
S.L.博根
刘义雄
F.G.恩乔罗格
S.芬卡特拉曼
陈新海
M.桑尼格拉希
A.阿拉萨彭
V.M.吉里贾法拉布汉
F.维拉兹奎茨
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Merck Sharp and Dohme LLC
Original Assignee
Schering Corp
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Schering Corp filed Critical Schering Corp
Publication of CN103102389A publication Critical patent/CN103102389A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D209/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings, condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D209/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings, condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom condensed with one carbocyclic ring
    • C07D209/52—Heterocyclic compounds containing five-membered rings, condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom condensed with one carbocyclic ring condensed with a ring other than six-membered
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D207/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D207/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D207/04—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D207/10—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D207/16—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D209/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings, condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D209/56—Ring systems containing three or more rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/02—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings
    • C07D405/12—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D409/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D409/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings
    • C07D409/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D411/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having oxygen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D411/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having oxygen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings
    • C07D411/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having oxygen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D491/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00
    • C07D491/02—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D491/04—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/02—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing at least one abnormal peptide link
    • C07K5/0202—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing at least one abnormal peptide link containing the structure -NH-X-X-C(=0)-, X being an optionally substituted carbon atom or a heteroatom, e.g. beta-amino acids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Crystallography & Structural Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Nitrogen And Oxygen As The Only Ring Hetero Atoms (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)

Abstract

本发明涉及一种作为丙型肝炎病毒NS3丝氨酸蛋白酶抑制剂的硫化合物。本发明公开新的化合物，其具有HCV蛋白酶抑制剂活性，以及制备这类化合物的方法。在另一个实施方案中，本发明公开包含这类化合物的药用组合物，以及使用它们来治疗与HCV蛋白酶有关的病症的方法。

Description

作为丙型肝炎病毒NS3丝氨酸蛋白酶抑制剂的硫化合物
本申请是申请号为“200580012859.3”，发明名称为“作为丙型肝炎病毒NS3丝氨酸蛋白酶抑制剂的硫化合物”的发明专利申请的分案申请。
发明领域
本发明涉及新的丙型肝炎病毒(″HCV″)蛋白酶抑制剂、含有一或多个这类抑制剂的医药组合物、制备这类抑制剂的方法，以及使用这类抑制剂治疗丙型肝炎和相关病症的方法。本发明还公开作为HCVNS3/NS4a丝氨酸蛋白酶抑制剂的新的化合物。本申请要求2004年2月27日提交的美国临时申请系列号60/548,670的优先权。
发明背景
丙型肝炎病毒(HCV)是(+)-有意义单股RNA病毒，其已经成为非-甲，非-乙型肝炎(NANBH)的主要病因，特别是在与血液-有关的NANBH(BB-NANBH)(参见，国际专利申请公布号WO 89/04669和欧洲专利申请公布号EP 381 216)中。NANBH与其它类型的病毒引起的肝脏疾病，如甲型肝炎病毒(HAV)、乙型肝炎病毒(HBV)、δ型肝炎病毒(HDV)、巨细胞病毒(CMV)和Epstein-barr病毒(EBV)，以及其它形式的肝脏疾病，如酒精中毒和原发胆汁性肝硬化显然有别。
最近，已经鉴定、克隆并表达多肽加工和病毒复制所需的HCV蛋白酶。(参见，例如美国专利第5,712,145号)。这种大约3000个氨基酸的多蛋白，从氨基终端到羧基终端，含有壳包核酸蛋白(C)、包膜蛋白(E1和E2)，以及数个非-结构蛋白(NS1、2、3、4a、5a和5b)。NS3是大约68 kda的蛋白，由HCV基因组的大约1 893个核苷酸编码，并具有两个不同的结构域：(a)丝氨酸蛋白酶结构域，由大约200个N-终端的氨基酸所组成；以及(b)在蛋白的C-终端的RNA-依赖性ATP酶结构域。由于在蛋白序列、整体三维结构和催化机制上的类似性，因而认为NS3蛋白酶是胰凝乳蛋白酶家族的成员。其它胰凝乳蛋白酶样的酶是弹性蛋白酶、因子X a、凝血酶、胰蛋白酶、血纤维蛋白溶酶、尿激酶、tPA和PSA。HCV NS3丝氨酸蛋白酶负责在NS3/NS4a、NS4a/NS4b、NS4b/NS5a和NS5a/NS5b接合处的多肽(多蛋白)的蛋白水解作用，并因此负责在病毒复制期间产生四个病毒蛋白。这制备出HCV NS3丝氨酸蛋白酶，一种有吸引力的抗病毒化学疗法的标靶。本发明化合物可抑制这类蛋白酶。它们也可调节丙型肝炎病毒(HCV)多肽的加工。
已经确定NS4a蛋白，一种大约6kda的多肽，是NS3的丝氨酸蛋白酶活性的辅因子。由NS3/NS4a丝氨酸蛋白酶自动切割NS3/NS4a接合发生在分子内(即顺式)，而以分子间的方式加工其它切割位置(即反式)。
HCV蛋白酶的天然切割位置的分析，显示在P1处出现半胱氨酸并在P1′处出现丝氨酸，且在NS4a/NS4b、NS4b/NS5a和NS5a/NS5b接合处中严格地保留这些残基。NS3/NS4a接合处在P1处含有苏氨酸，并在P1′处含有丝氨酸。假定在NS3/NS4a处的Cys→Thr取代，说明在该接合处需要顺而非反式加工。参见，例如，Pizzi等(1994)Proc.Natl.Acad.Sci(USA)91：888-892，Failla等(1996)Folding&Design 1：35-42。NS3/NS4a切割位置也比其它位置更容忍突变生成。参见，例如，Kollykhalov等(1994)J.Virol.68：7525-7533。也发现在切割位置的上游区中的酸性残基需要有效的切割。参见，例如，Komoda等(1994)J.Virol.68：7351-7357。
已经报告了HCV蛋白酶的抑制剂，包括抗氧化剂(参见，国际专利申请公布号WO 98/14181号)、某些肽和肽类似物(参见，国际专利申请公布号WO 98/17679号，Landro等(1997)Biochem.36：9340-9348，Ingallinella等(1998)Biochem.37：8906-8914，Llinas-Brunet等(1998)Bioorg.Med.Chem.Lett.8：1713-1718)、以70-氨基酸多肽水蛭蛋白酶抑制剂(eglin)c为基础的抑制剂(Martin等(1998)Biochem.37：11459-11468，抑制剂亲和力选自人类胰脏分泌胰蛋白酶抑制剂(hPSTI-C3)和微型抗体(minibody)节目(repertoires)(MBip)(Dimasi等(1997)J.Virol.71：7461-7469)、cVHE2(一种″骆驼化的(camelized)″可变结构域抗体片段)(Martin等(1997)Protein Eng.10：607-614)，以及α1-抗胰凝乳蛋白酶(ACT)(Elzouki等(1997)J.Hepat.27：42-28)。最近已经公开一种核酶，其被设计成选择性地破坏丙型肝炎病毒RNA(参见，BioWorld Today 9(217)：4(1998年11月10日，1998))。
也参考1998年4月30日发表的PCT公布号WO 98/17679(VertexPharmaceuticals incorporated)；1998年5月28日发表的WO 98/22496(F.Hoffmann-La Roche AG)；以及1999年2月18日发表的WO 99/07734(Boehringer Ingelheim Canada Ltd.)。
HCV已经涉及肝脏的肝硬化，并引起肝细胞癌。目前，罹患HCV感染的患者的预后很差。HCV感染比其它形式的肝炎更难治疗，因为缺乏与HCV感染有关的免疫力或减轻。目前的数据指出在诊断出肝硬化后的四年内，存活率低于50％。诊断出患有局限性可切除的肝细胞癌的患者，具有10-30％的五年存活率，而患有局限性不可切除的肝细胞癌的那些患者仅具有低于1％的五年存活率。
参考WO 00/59929(美国专利第6,608,027号，受让人：BoehringerIngelheim(Canada)Ltd.；2000年10月12日发表)，其公开具有下式的肽衍生物：
Figure BDA00002167589500031
参考A.Marchetti等，Synlett，S1，1000-1002(1999)描述的HCV NS3蛋白酶的抑制剂的双环类似物的合成。其中公开的化合物具有下式：
Figure BDA00002167589500041
也参考W.Han等，Bioorganic&Medicinal Chem.Lett，(2000)10，711-713，其描述某些含有烯丙基和乙基官能度的α-酮酰胺、α-酮酯和α-二酮的制备。
也参考WO 00/09558(受让人：Boehringer Ingelheim Limited；2000年2月24日发表)，其公开下式的肽衍生物：
Figure BDA00002167589500042
其中在本文中定义各种部分(element)。该系列的示例性化合物为：
Figure BDA00002167589500051
也参考WO 00/09543(受让人：Boehringer Ingelheim Limited；2000年2月24日发表)，其公开下式的肽衍生物：
其中在本文中定义各种部分。该系列的示例性化合物为：
Figure BDA00002167589500061
也参考美国专利6,608,027(Boehringer Ingelheim Canada)，其公开下列类型的NS3蛋白酶抑制剂：
Figure BDA00002167589500062
其中在本文中定义各种部分。
丙型肝炎的现行治疗包括干扰素-α(INFα)和利巴韦林与干扰素的联合治疗。参见，例如，Beremguer等(1998)Proc.Assoc.Am.Physicians 110(2)：98-112。这些治疗苦恼于低的持续反应率和频繁的副作用。参见，例如Hoofnagle等(1997)N.Engl.J.Med.336：347。目前，没有可供HCV感染使用的疫苗。
进一步参考2001年10月11日发表的WO 01/74768(受让人：VertexPharmaceuticals Inc)，其公开某些具有下列通式的化合物(R在本文中定义)，作为丙型肝炎病毒的NS3-丝氨酸蛋白酶抑制剂：
Figure BDA00002167589500071
在上述WO 01/74768中公开的特殊化合物具有下式：
Figure BDA00002167589500072
PCT公布号WO 01/77113；WO 01/081325；WO 02/08198；WO02/08256；WO 02/08187；WO 02/08244；WO 02/48172；WO 02/08251；以及2002年1月18日提交的正在待审的美国专利申请系列号10/052,386公开了作为丙型肝炎病毒的NS3-丝氨酸蛋白酶抑制剂的各种类型的肽和/或其它化合物。这些申请的公开内容全部以引用的方式和结合到本文中。
需要HCV感染的新的治疗和疗法。需要可用来治疗或预防或改善丙型肝炎的一或多种症状的化合物。
需要治疗或预防或改善丙型肝炎的一或多种症状的方法。
需要使用在本文中提供的化合物，调节丝氨酸蛋白酶，特别是HCV NS3/NS4a丝氨酸蛋白酶的活性的方法。
需要使用在本文中提供的化合物，调节HCV多肽的加工的方法。
发明概述
在本发明的许多实施方案中，提供了新型的HCV蛋白酶抑制剂、含有一或多个所述化合物的药用组合物、制备包含一或多个此类化合物的药用组合物的方法，以及使用一或多个这类化合物或一或多个这类制剂治疗或预防HCV或改善一或多种丙型肝炎的症状的方法。也提供调节HCV多肽与HCV蛋白酶的相互作用的方法。在本文公开的化合物的中，抑制HCV NS3/NS4a丝氨酸蛋白酶活性的化合物是优选的。本发明公开化合物以及所述化合物的药学上可接受的盐、溶剂合物或酯，所述化合物具有在结构式1中所示的通用结构：
Figure BDA00002167589500081
式1
其中：
R1为H、OR8、NR9R10或CHR9R10，其中R8、R9和R10可以是相同或不同的，各自独立选自H、烷基-、烯基-、炔基-、芳基-、杂烷基-、杂芳基-、环烷基-、杂环基-、芳烷基-和杂芳烷基；
A与M可以是相同或不同的，各自独立选自R、OR、NHR、NRR′、SR、SO2R及卤代基；或A与M互相连接，以使上文式I中所示的部分：
Figure BDA00002167589500082
形成3、4、6、7或8-元环烷基、4至8-元杂环基、6至10-元芳基或5至10-元杂芳基；
E为C(H)或C(R)；
L为C(H)、C(R)、CH2C(R)或C(R)CH2；
R、R′、R2和R3可以是相同或不同的，各自独立选自H、烷基-、烯基-、炔基-、环烷基-、杂烷基-、杂环基-、芳基-、杂芳基-、(环烷基)烷基-、(杂环基)烷基-、芳基-烷基-及杂芳基-烷基-；或者，NRR′中的R与R′互相连接，以使NRR′形成4至8-元杂环基；
且Y选自下列部分：
Figure BDA00002167589500091
其中G为NH或O；且R15、R16、R17和R18可以是相同或不同的，各自独立选自H、烷基、杂烷基、烯基、杂烯基、炔基、杂炔基、环烷基、杂环基、芳基、芳烷基、杂芳基及杂芳烷基，或者，(i)R15和R16互相连接，以形成4至8-元环状结构，与(ii)同样地，R17与R18独立地互相连接，以形成3至8-元环烷基或杂环基；
其中所述烷基、芳基、杂芳基、环烷基或杂环基各自可为未取代的，或任选独立被一或多个部分取代，所述部分选自：羟基、烷氧基、芳氧基、硫代、烷硫基、芳基硫基、氨基、酰氨基、烷氨基、芳氨基、烷基磺酰基、芳基磺酰基、亚磺酰氨基(sulfonamido)、烷基亚磺酰氨基、芳基亚磺酰氨基、烷基、芳基、杂芳基、酮基、羧基、烷氧羰基、羧酰氨基(carboxamido)、烷氧羰基氨基、烷氧羰基氧基、烷基脲基、芳基脲基、卤代基、氰基及硝基。
上文所指的陈述，″A与M互相连接，以使上文式I中所示的部分：
形成3、4、6、7或8-元环烷基、4至8-元杂环基、6至10-元芳基或5至10-元杂芳基″，可如下述以非限制性方式说明。因此，例如在A与M连接以使上文式I中所示的部分：
形成6元环烷基(环己基)的情况下，式I可描绘如下：
Figure BDA00002167589500103
本领域普通技术人员应该理解，当上文部分中所示的A与M：
Figure BDA00002167589500104
(M-L-E-A结合在一起)连接而形成3、4、7或8-元环烷基、4至8-元杂环基、6至10-元芳基或5至10-元杂芳基时，可达到关于式I的类似描述。
陈述″或者，(i)R15和R16互相连接，以形成4至8-元环状结构，与(ii)同样地，R17与R18独立地连接而形成3至8-元环烷基或杂环基″意指下列可能性：(i)R15与R16连接而形成环状结构，而R17与R18则不然；(ii)R17与R18连接而形成环状结构，而R15与R16则不然；及(iii)R15与R16连接而形成环状结构，且R17与R18亦连接而形成环状结构。这些可能性可彼此独立地存在。
在上文提及的R、R′、R2和R3的定义中，优选的烷基由1至10个碳原子构成，优选的烯基或炔基由2至10个碳原子构成，优选的环烷基由3至8个碳原子构成，而优选的杂烷基、杂芳基或杂环烷基具有1至6个氧、氮、硫或磷原子。
由式1代表的化合物，本身或与在本文中公开的一或多种其它的适当药物联合，可用于治疗疾病，例如HCV、HIV、AIDS(获得性免疫缺陷综合征)及相关病症，并可用来调解丙型肝炎病毒(HCV)蛋白酶的活性，预防HCV，或改善丙型肝炎的一或多种症状。可利用本发明的化合物，以及包含这类化合物的药用组合物或制剂，来进行这类调节、治疗、预防或改善。不受理论的限制，相信HCV蛋白酶可能是NS3或NS4a蛋白酶。本发明的化合物可抑制这类蛋白酶。它们也可调节丙型肝炎病毒(HCV)多肽的加工。
详细描述
在一个实施方案中，本发明公开由结构式1代表的化合物，或其药学上可接受的盐、溶剂合物或酯，其中各部分如上所定义。
在另一个实施方案中，R1为NR9R10，且R9为H，R10为H或R14，其中R14为H、烷基、芳基、杂烷基、杂芳基、环烷基、烷基-芳基、烷基-杂芳基、芳基-烷基、烯基、炔基或杂芳基-烷基。
在另一个实施方案中，R14选自下列基团：
Figure BDA00002167589500121
在另一个实施方案中，R2选自下列部分：
Figure BDA00002167589500132
Figure BDA00002167589500141
在进一步的实施方案中，R3选自下列的基团：
Figure BDA00002167589500142
其中R31为OH或O-烷基；且
R32为H、C(O)CH3、C(O)OtBu或C(O)N(H)tBu。
在另外的实施方案中，R3选自下列部分：
Figure BDA00002167589500161
在进一步的实施方案中，Y选自下列的部分：
Figure BDA00002167589500171
其中R15、R16、R17和R18可以是相同或不同的，各自独立选自H、烷基、杂烷基、烯基、杂烯基、炔基、杂炔基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基，或者R15与R16互相连接，以形成4至8-元环烷基或杂环结构，和/或R17与R18互相连接，以形成3至8-元环烷基或杂环基，其中所述芳基、杂芳基、环烷基或杂环基各自可为未取代的，或任选独立被一或多个选自以下的部分取代：羟基、烷氧基、芳氧基、硫代、烷硫基、芳基硫基、氨基、酰氨基、烷氨基、芳氨基、烷基磺酰基、芳基磺酰基、亚磺酰氨基、烷基亚磺酰氨基、芳基亚磺酰氨基、羧基、烷氧羰基、羧酰氨基、烷氧羰基氨基、烷氧羰基氧基、烷基脲基、芳基脲基、卤代基、氰基及硝基。
在另一项实施方案中，Y选自：
Figure BDA00002167589500181
其中Y31选自：
Figure BDA00002167589500191
Figure BDA00002167589500201
Y32选自：
且Y12选自H、CO2H、CO2Me、OMe、F、Cl、Br、NH2、N(H)S(O2)CH3、N(H)C(O)CH3、NO2、S(O2)NH2、CF3、Me、OH、OCF3及C(O)NH2。
在另一项实施方案中，所述部分：
选自下列结构：
Figure BDA00002167589500221
Figure BDA00002167589500231
Figure BDA00002167589500241
在另一项实施方案中，所述部分：
Figure BDA00002167589500242
选自下列结构：
Figure BDA00002167589500243
Figure BDA00002167589500251
在另一项实施方案中，所述部分：
Figure BDA00002167589500252
选自下列结构：
Figure BDA00002167589500261
在另一个其它实施方案中，R1为NHR14，其中R14选自：
Figure BDA00002167589500271
R2选自下列部分：
Figure BDA00002167589500272
Figure BDA00002167589500281
R3选自下列部分：
Figure BDA00002167589500291
Y选自：
Figure BDA00002167589500301
其中Y31选自：
Figure BDA00002167589500311
Y32选自：
Figure BDA00002167589500312
且Y12选自H、CO2H、CO2Me、OMe、F、Cl、Br、NH2、N(H)S(O2)CH3、N(H)C(O)CH3、NO2、S(O2)NH2、CF3、Me、OH、OCF3和C(O)NH2；且所述部分：
Figure BDA00002167589500321
为：
Figure BDA00002167589500322
本发明的又一项实施方案公开下文表1中的化合物，以及稍后在表1、表3、表3A、表4、表4A及表5中所示的化合物：
表1
Figure BDA00002167589500331
Figure BDA00002167589500341
Figure BDA00002167589500351
Figure BDA00002167589500361
Figure BDA00002167589500371
Figure BDA00002167589500381
Figure BDA00002167589500411
Figure BDA00002167589500421
Figure BDA00002167589500431
Figure BDA00002167589500441
Figure BDA00002167589500451
Figure BDA00002167589500461
Figure BDA00002167589500471
Figure BDA00002167589500481
Figure BDA00002167589500511
Figure BDA00002167589500531
Figure BDA00002167589500541
Figure BDA00002167589500551
Figure BDA00002167589500571
在另一项实施方案中，本发明公开表2中的下列化合物：
表2
Figure BDA00002167589500581
Figure BDA00002167589500591
Figure BDA00002167589500601
如同上文使用的，并在本公开全文中，除非另外指明，应理解下列的术语具有下列的意义：
″患者″包括人和动物。
″哺乳动物″意指人及其它哺乳动物。
″烷基″意指可以是直链或支链脂肪族烃基，且在链中包含大约1到大约20个碳原子。优选的烷基基团在链中含有大约1到大约12个碳原子。更优选的烷基基团在链中含有大约1到大约6个碳原子。支链意指一或多个低级烷基基团，如甲基、乙基或丙基，与直链的烷基链连接。″低级烷基″意指在链中具有大约1至大约6个碳原子的基团，其可以是直链或支链。术语″取代的烷基″意指该烷基基团可被一或多个取代基取代，其可以是相同或不同的，每个取代基各自独立选自卤代、烷基、芳基、环烷基、氰基、羟基、烷氧基、烷硫基、氨基、-NH(烷基)、-NH(环烷基)、-N(烷基)2、-N(烷基)2、羧基和-C(O)O-烷基。合适的烷基基团的非限制性实例包括甲基、乙基、正-丙基、异丙基和叔-丁基。
″烯基″意指含有至少一个碳-碳双键的脂肪族烃基，且其可以是直链或支链，且在链中包含大约2到大约15个碳原子。优选的烯基基团在链中具有大约2到大约12个碳原子；而更优选在链中具有大约2到大约6个碳原子。支链意指一或多个低级烷基基团，如甲基、乙基或丙基，与直链的烯基链连接。″低级烯基″意指在链中具有大约2至大约6个碳原子的基团，其可以是直链或支链。术语″取代的烯基″意指该烯基基团可被一或多个取代基取代，所述取代基可以是相同或不同的，各自独立选自卤代、烷基、芳基、环烷基、氰基、烷氧基和-S(烷基)。合适的烯基基团的非限制性实例包括乙烯基、丙烯基、正-丁烯基、3-甲基丁-2-烯基、正-戊烯基、辛烯基和癸烯基。
″炔基″意指含有至少一个碳-碳三键的脂肪族烃基，且其可以是直链或支链，且在链中包含大约2到大约15个碳原子。优选的炔基基团在链中具有大约2到大约12个碳原子；而更优选在链中具有大约2到大约4个碳原子。支链意指一或多个低级烷基基团，如甲基、乙基或丙基，与直链的炔基链连接。″低级炔基″意指在链中具有大约2至大约6个碳原子的基团，其可以是直链或支链。合适的炔基基团的非限制性实例包括乙炔基、丙炔基、2-丁炔基和3-甲基丁炔基。术语″取代的炔基″意指该炔基基团可被一或多个取代基取代，其可以是相同或不同的，每个取代基各自独立选自烷基、芳基和环烷基。
″芳基″意指芳香族单环或多环的环系统，其包含大约6到大约14个碳原子，优选大约6到大约10个碳原子。所述芳基可任选由″环系统取代基″取代，所述取代基可以是相同或不同的，并如同在本文中的定义。合适的芳基基团的非限制性实例包括苯基和萘基。
″杂芳基″意指包括大约5到大约14个环原子，优选大约5到大约10个环原子的芳香族单环或多环的环系统，其中一或多个环原子是碳以外的元素，例如氮、氧或硫，它们可单独或组合存在。优选的杂芳基含有大约5到大约6个环原子。所述″杂芳基″可任选由″环系统取代基″取代，所述取代基可以是相同或不同的，并如同在本文中的定义。在杂芳基词根名字前的前缀氮杂、氧杂或硫杂，意指分别出现至少一个氮、氧或硫原子作为环原子。可任选将杂芳基的氮原子氧化成相应的N-氧化物。合适的杂芳基的非限制性实例包括吡啶基、吡嗪基、呋喃基、噻吩基、嘧啶基、吡啶酮(包括N-取代的吡啶酮)、异唑基、异噻唑基、
Figure BDA00002167589500622
唑基、噻唑基、吡唑基、呋呫基、吡咯基、吡唑基、三唑基、1，2，4-噻二唑基、吡嗪基、哒嗪基、喹喔啉基、2，3-二氮杂萘基(phthalazinyl)、羟吲哚基、咪唑并[1，2-a]吡啶基、咪唑并[2，1-b]噻唑基、苯并呋呫基、吲哚基、氮杂吲哚基、苯并咪唑基、苯并噻吩基、喹啉基、咪唑基、噻吩并吡啶基、喹唑啉基、噻吩并嘧啶基、吡咯并吡啶基、咪唑并吡啶基、异喹啉基、苯并氮杂吲哚基、1，2，4-三嗪基、苯并噻唑基等。术语″杂芳基″也意指部分饱和的杂芳基部分，例如四氢异喹啉基、四氢喹啉基等。
″芳烷基″或″芳基烷基″意指芳基-烷基-基团，其中该芳基和烷基如同前文所述。优选的芳烷基包括低级烷基基团。合适的芳烷基基团的非限制性实例包括苄基、2-苯乙基和萘甲基。通过烷基与母体部分连接。
″烷芳基″意指烷基-芳基-基团，其中该烷基和芳基如同前文所述。优选的烷芳基包括低级烷基基团。合适的烷芳基基团的非限制性实例为甲苯基。通过芳基与母体部分连接。
″环烷基″意指非-芳香族单-或多环的环系统，其包括大约3至大约10个碳原子，优选大约5至大约10个碳原子。优选的环烷基环含有大约5至大约7个环原子。环烷基可任选由一或多个″环系统取代基″取代，所述取代基可以是相同或不同的，并如同在上文中的定义。合适的单环环烷基的非限制性实例包括环丙基、环戊基、环己基、环庚基等。合适的多环环烷基的非限制性实例包括1-萘烷基、降冰片基(norbornyl)、金刚烷基等，以及部分饱和的物质，例如茚满基、四氢萘基等。
″卤素″或″卤代″意指氟、氯、溴或碘。优选氟、氯和溴。
″环系统取代基″意指与芳香族或非-芳香族环系统连接的取代基，其例如代替在该环系统上可用的氢。环系统取代基可以是相同或不同的，各自独立选自烷基、烯基、炔基、芳基、杂芳基、芳烷基、烷芳基、杂芳烷基、杂芳烯基、杂芳炔基、烷基杂芳基、羟基、羟烷基、烷氧基、芳氧基、芳烷氧基、酰基、芳酰基、卤代、硝基、氰基、羧基、烷氧羰基、芳氧羰基、芳烷氧基羰基、烷基磺酰基、芳基磺酰基、杂芳基磺酰基、烷硫基、芳硫基、杂芳硫基、芳烷硫基、杂芳烷硫基、环烷基、杂环基、-C(＝N-CN)-NH2、-C(＝NH)-NH2、-C(＝NH)-NH(烷基)、Y1Y2N-、Y1Y2N-烷基-、Y1Y2NC(O)-、Y1Y2NSO2-和-SO2NY1Y2，其中Y1和Y2可以是相同或不同的，并各自独立选自氢、烷基、芳基、环烷基和芳烷基。″环系统取代基″也可意指单一部分，其同时代替在环系统上的两个相邻碳原子上的两个可用的氢(每个碳上一个H)。这类部分的实例是亚甲二氧基、亚乙二氧基、-C(CH3)2-等，其形成例如： 的部分。
″杂环基″意指非芳香族的饱和单环或多环的环系统，其包含大约3至大约10个环原子，优选大约5到大约10个环原子，其中在该环系统中的一或多个原子是碳以外的元素，例如氮、氧或硫，它们可单独或组合存在。在环系统中不存在相邻的氧和/或硫原子。优选的杂环基包含大约5至大约6个环原子。在杂环词根名字前的前缀氮杂、氧杂或硫杂，意指分别出现至少一个氮、氧或硫原子作为环原子。任何在杂环基环中的-NH均可以以被保护的基团，例如作为-N(Boc)、-N(CBz)、-N(Tos)基团等存在；也将这类保护视为本发明的一部分。所述杂环基可任选由一或多个″环系统取代基″取代，所述取代基可以是相同或不同的，并如同在本文中的定义。可任选将杂环基的氮或硫原子氧化成相对应的N-氧化物、S-氧化物或S，S-二氧化物。合适的单环杂环基环的非限制性实例包括哌啶基、吡咯烷基、哌嗪基、吗啉基、硫代吗啉基、噻唑烷基、1，4-二氧六环基、四氢呋喃基、四氢噻吩基、内酰胺、内酯等。
应注意到在本发明的环系统所含有的杂原子中，在与N、O或S相邻的碳原子上没有羟基基团，而且在与其它杂原子相邻的碳原子上没有N或S基团。因此，例如在环中：
Figure BDA00002167589500641
没有-OH直接连接在标号为2和5的碳上。
也应注意到互变异构形式，例如下列的部分：
Figure BDA00002167589500642
在本发明的某些实施方案中认为它们是等同的。
″炔烷基″意指炔基-烷基-基团，其中该炔基和烷基如同前文所述。优选的炔烷基含有低级炔基和低级烷基基团。通过烷基与母体部分连接。合适的炔烷基基团的非限制性实例包括炔丙基甲基。
″杂芳烷基″意指杂芳基-烷基-基团，其中该杂芳基和烷基如同前文所述。优选的杂芳烷基含有低级烷基基团。合适的芳烷基基团的非限制性实例包括吡啶基甲基和喹啉-3-基甲基。通过烷基与母体部分连接。
″羟烷基″意指HO-烷基-基团，其中烷基如同前述所定义。优选的羟烷基含有低级烷基。合适的羟烷基基团的非限制性实例包括羟甲基和2-羟乙基。
″酰基″意指H-C(O)-、烷基-C(O)-或环烷基-C(O)-基团，其中各种基团如同前文所述。通过羰基与母体部分连接。优选的酰基含有低级烷基。合适的酰基基团的非限制性实例包括甲酰基、乙酰基和丙酰基。
″芳酰基″意指芳基-C(O)-基团，其中该芳基基团如同前文所述。通过羰基与母体部分连接。合适的基团的非限制性实例包括苯甲酰基和1-萘酰基。
″烷氧基″意指烷基-O-基团，其中该烷基基团如同前文所述。合适的烷氧基基团的非限制性实例包括甲氧基、乙氧基、正-丙氧基、异丙氧基和正-丁氧基。通过醚氧与母体部分连接。
″芳氧基″意指芳基-O-基团，其中该芳基基团如同前文所述。合适的芳氧基基团的非限制性实例包括苯氧基和萘氧基。通过醚氧与母体部分连接。
″芳烷氧基″意指芳烷基-O-基团，其中该芳烷基如同前文所述。合适的芳烷氧基基团的非限制性实例包括苄氧基和1-或2-萘甲氧基。通过醚氧与母体部分连接。
″烷硫基″意指烷基-S-基团，其中该烷基基团如同前文所述。合适的烷硫基基团的非限制性实例包括甲硫基和乙硫基。通过硫与母体部分连接。
″芳硫基″意指芳基-S-基团，其中该芳基基团如同前文所述。合适的芳硫基基团的非限制性实例包括苯硫基和萘硫基。通过硫与母体部分连接。
″芳烷硫基″意指芳烷基-S-基团，其中该芳烷基基团如同前文所述。合适的芳烷硫基基团的非限制性实例是苄硫基。通过硫与母体部分连接。
″烷氧羰基″意指烷基-O-CO-基团。合适的烷氧羰基基团的非限制性实例包括甲氧羰基和乙氧羰基。通过羰基与母体部分连接。
″芳氧羰基″意指芳基-O-C(O)-基团。合适的芳氧羰基基团的非限制性实例包括苯氧羰基和萘氧羰基。通过羰基与母体部分连接。
″芳烷氧羰基″意指芳烷基-O-C(O)-基团。合适的芳烷氧羰基基团的非限制性实例为苄氧羰基。通过羰基与母体部分连接。
″烷基磺酰基″意指烷基-S(O2)-基团。优选的基团是其中烷基基团为低级烷基的那些基团。通过磺酰基与母体部分连接。
″芳基磺酰基″意指芳基-S(O2)-基团。通过磺酰基与母体部分连接。
术语″取代的″意指由选自指定的基团代替在指明的原子上的一或多个氢，条件为在现有情况下不超过该指明的原子的正常价数，且该取代产生稳定的化合物。只要这类组合结果产生稳定的化合物，取代基和/或变量的组合就是允许的。″稳定的化合物″或″稳定的结构″意指一化合物足够稳定，能承受从反应混合物中分离至有用程度的纯度，并配制成有效的治疗剂。
当指示取代基、化合物、组合试剂等的数目时，术语″一或多个″或″至少一个″，依据前后文，意指出现或添加至少一个，并最高达到在化学或物理上可容许的最大数目的取代基、化合物、组合试剂等。这类技术和知识在本领域技术人员熟知的范围内。
术语″任选取代的″意指可视需要用指定的基团、原子团或部分取代。
对化合物而言，术语″分离的″或″以分离的形式″，意指所述化合物在从合成过程或天然来源或其组合中分离后的物理状态。对化合物而言，术语″纯化的″或″以纯化的形式″，意指在从本文中描述或技术少熟练人员熟知的纯化过程获得该化合物后的物理状态，其具有足够的纯度，可通过本文中描述的或技术少熟练人员熟知的标准分析技术鉴定。
也应注意到，假设在本文的正文、流程、实施例和表格中，任何具有不饱和价数的碳或杂原子具有满足价数的氢原子。
当称化合物中的官能基是″保护的″时，这意指该基团是经过修改的形式，从而使该化合物经历反应时，在保护位置排除不想要的副反应。将借通过本领域普通技术人员，以及通过参考教科书，例如T.W.Greene等，Protective Groups in organic Synthesis(1991)，Wiley，NewYork，识别合适的保护基团。
当任何变数(例如芳基、杂环、R2等)在任何成分或在式1中出现一次以上时，其在每次出现时的定义独立于其在其它地方每次出现处的定义。
当在本文中使用时，术语″组合物″意欲包含含有指定量的特定成分的产物，以及任何直接或间接由指定量的特定成分的组合获得的产物。
在本文中也设计本发明的化合物的前药和溶剂合物。当在本文中使用时，术语″前药″代表为药物前体的化合物，当将其给予患者时，通过代谢或化学过程经历化学转变，产生式1的化合物，或其盐和/或溶剂合物。在T.Higuchi和V.Stella，Pro-drugs as Novel DeliverySystems(1987)14 of the A.C.S.Symposium Series中，以及在Bioreversible Carriers in Drug Design，(1987)Edward B.Roche编辑，American Pharmaceutical Association and Pergamon Press中提供了前药的讨论，两者均通过引用结合到本文中。
″溶剂合物″意指本发明化合物与一或多种溶剂分子的物理缔合。该物理缔合涉及各种程度的离子和共价键结合，包括氢键。在某些例子中，溶剂合物将能够分离，例如当将一或多个溶剂分子并入结晶固体的晶格中时。″溶剂合物″包括溶液-相和可分离溶剂合物两者。合适的溶剂合物的非限制性实例包括乙醇化物、甲醇化物等。″水合物″为其中该溶剂分子为H2O的溶剂合物。
″有效量″或″治疗有效量″意在叙述的本发明化合物或组合物的量在抑制CDK(s)上是有效的，并因此产生所需的治疗、改善、抑制或预防效果。
可形成盐的式1化合物也在本发明的范围内。除非另外指明，在本文中提及式1化合物时，应该理解也包括其盐。当在本文中使用时，术语″盐″表示与无机和/或有机酸形成的酸加成盐，以及与无机和/或有机碱形成的碱加成盐。此外，当式1化合物含有碱性部分，例如但不限于吡啶或咪唑，和酸性部分，例如但不限于羧酸两者时，可形成两性离子(″内盐″)，并也包括在本文中使用的术语″盐″中。药学上可接受的(即无毒性、生理学上可接受的)盐是优选的，虽然也可使用其它的盐。可借着例如使式1化合物与一定量(如等当量)的酸或碱，在其中使盐沉淀的介质或在含水介质中反应，接着冷冻干燥，形成式1化合物的盐。
示例性的酸加成盐类包括乙酸盐、抗坏血酸盐、苯甲酸盐、苯磺酸盐、硫酸氢盐、硼酸盐、丁酸盐、柠檬酸盐、樟脑酸盐、樟脑磺酸盐、富马酸盐、盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、乳酸盐、顺丁烯二酸盐、甲烷磺酸盐、萘磺酸盐、硝酸盐、草酸盐、磷酸盐、丙酸盐、水杨酸盐、琥珀酸盐、酒石酸盐、硫氰酸盐、甲苯磺酸盐(也称为甲苯基磺酸盐)等。此外，由例如P.Stahl等，Camille G.(编辑)药用盐手册，特性、选择和用途(Handbook of Pharmaceutical Salts.Properties，Selection and Use)，(2002)Zurich：Wiley-VCH；S.Berge等，Journal ofPharmaceutical Sciences(1977)66(1)1-19；P.Gould，International J.ofPharmaceutics(1986)33201-217；Anderson等，The Practice ofMedicinal Chem istry(1996)，Academic Press，New York；以及在TheOrange Book(Food&Drug Administration，Washington，D.C.在其网址上)中，讨论了一般认为适合用来从碱性药学化合物来形成在药学上有用的盐类的酸。这些公开的内容通过引用结合到本文中。
示例性的碱加成盐包括铵盐、碱金属盐，如钠、锂和钾盐、碱土金属盐，如钙和镁盐，与有机碱(例如有机胺)所成的盐，如二环己胺、叔-丁胺，以及与氨基酸如精氨酸、离氨酸等所成的盐。可利用试剂将碱性含氮基团季铵化，如低级烷基卤化物(例如甲基、乙基和丁基的氯化物、溴化物和碘化物)、硫酸二烷基酯(例如硫酸二甲酯、二乙酯和二丁酯)、长链卤化物(例如癸基、十二烷基和硬脂酰基的氯化物、溴化物和碘化物)、芳烷基卤化物(例如苄基和苯乙基的溴化物)及其它。
为了本发明，所有预定为药学上可接受的盐的这类酸加成盐和碱加成盐均在本发明的范围内，并认为所有的酸加成盐和碱加成盐均等于相应的化合物的游离形式。
本发明化合物的药学上可接受的酯包括下列各组：(1)通过羟基基团的酯化作用而获得的羧酸酯，其中酯类的羧酸部分的非-羰基部分选自直链或支链的烷基(例如乙酰基、正-丙基、叔-丁基或正-丁基)、烷氧烷基(例如甲氧甲基)、芳烷基(例如苄基)、芳氧烷基(例如苯氧基甲基)、芳基(例如任选由例如卤素、C1-4烷基或C1-4烷氧基或氨基取代的苯基)；(2)磺酸酯，如烷基-或芳烷基磺酰基(例如甲烷磺酰基)；(3)氨基酸酯(例如L-缬氨酰基或L-异亮氨酰基)；(4)膦酸酯和(5)单-、二-或三-磷酸酯。可通过例如C1-20醇或其反应性衍生物，或通过2，3-二(C6-24)酰基甘油，将磷酸酯进一步酯化。
式1的化合物，及其盐、溶剂合物、酯和前药，可以其互变异构形式存在(例如酰胺或亚氨基醚)。在本文中，所有的这类互变异构形式被视为本发明的一部分。
打算使本发明的化合物(包括所述化合物的盐、溶剂合物、酯和前药，以及前药的盐和溶剂合物)的所有的立体异构体(例如几何异构体、光学异构体等)，如可能是因为在各种取代基上的不对称碳而出现的那些异构体，包括对映体形式(甚至可能在缺少不对称碳时出现)、旋转异构体形式、阻转异构体和非对映异构体形式均在本发明的范围内，位置异构体(例如4-吡啶基和3-吡啶基)也是如此。本发明化合物的各立体异构体可以是，例如基本上不含其它异构体，或可以混合成为例如外消旋物，或带有所有其它的，或其它选择的立体异构体。本发明的手性中心可具有S或R构型，如同由IUPAC 1974推荐书定义的。术语″盐″、″溶剂合物″、″前药″等的使用，旨在等同地应用在本发明化合物的对映体、立体异构体、旋转异构体、互变异构体、位置异构体、外消旋物或前药的盐、溶剂合物和前药上。
打算将式1化合物，以及式1化合物的盐、溶剂合物、酯和前药的多形形式纳入本发明内。
应了解式1化合物在本文中讨论的治疗应用上的用途，可适用于每个化合物本身或一或多个式1化合物的混合或组合，如同在例如紧接着的下一段中说明的。相同的理解也适用于药用组合物，其包含一种或多种这样的化合物，以及涉及这样的化合物的治疗方法。
根据本发明的化合物可具有药理学特性；具体而言，式1化合物可以是HCV蛋白酶的抑制剂，每个化合物本身或一或多个式1化合物，可与一或多个选自式1中的化合物混合。所述化合物可用来治疗疾病，例如HCV、HIV、AIDS(获得性免疫缺陷综合征)及相关病症，并可用来调节丙型肝炎病毒(HCV)蛋白酶的活性、预防HCV或改善丙型肝炎的一或多种症状。
可使用式1化合物来制备用来治疗与HCV蛋白酶有关的病症的药物，例如，该方法包括使式1化合物与药学上可接受的载体紧密接触。
在其它的实施方案中，本发明提供药用组合物，其包含作为活性成分的本发明的一种或多种化合物。药用组合物通常还地包括至少一种药学上可接受的载体稀释剂、赋形剂或载体(在本文中统称为载体原料)。因为其HCV抑制活性，这类药用组合物具有治疗丙型肝炎和相关病症的用途。
在另一个实施方案中，本发明公开制备包含作为活性成分的本发明化合物的药用组合物的方法。在本发明的药用组合物和方法中，活性成分通常将与合适的载体原料混合给予，针对想要的给药形式而适当地选择载体原料，即口服片剂、胶囊(填装固体、填装半固体或填装液体)、构成用的粉末、口服凝胶、酏剂、可分散的颗粒、糖浆、悬浮液等，并符合常规药学实践。例如，对于口服给药用的片剂或胶囊形式，可将活性药物组分与任何口服无毒性的药学上可接受的惰性载体混合，如乳糖、淀粉、蔗糖、纤维素、硬脂酸镁、磷酸二钙、硫酸钙、滑石、甘露糖醇、乙醇(液体形式)等。此外，在想要或需要时，也可将合适的粘合剂、润滑剂、崩解剂和着色剂掺入混合物中。散剂和片剂可包含从大约5到大约95％的本发明组合物。
合适的粘合剂包括淀粉、明胶、天然糖类、玉米增甜剂、天然和合成的树胶，如阿拉伯树胶、藻酸钠、羧甲基纤维素、聚乙二醇和蜡。在润滑剂中，可提及的用于这些剂型中的有硼酸、苯甲酸钠、乙酸钠、氯化钠等。崩解剂包括淀粉、甲基纤维素、瓜耳树胶等。
合适时也可包括增甜剂和着色剂及防腐剂。在上文中提及的一些术语，即崩解剂、稀释剂、润滑剂、粘合剂等，在下文中有更详细地讨论。
此外，本发明的组合物可以持续释放的形式配制，以便提供任一种或多种组分或活性成分的速率控制释放，以发挥最大的治疗效果，即HCV抑制活性等。持续释放的适当剂型包括多层片剂，其含有具有不同崩解速率的各层，或充满活性组分的控制释放的聚合基质，并制成片剂形式或含有这类充满或包胶(encapsulated)多孔聚合基质的胶囊。
液体形式的制剂包括溶液、悬浮液和乳剂。举例来说，可提及水或水-丙二醇溶液，用于胃肠外注射，或为了口服溶液、悬浮液和乳剂，可加入增甜剂和镇静剂(pacifiers)。液体形式的制剂也可包括鼻内给药的溶液。
适合吸入的气溶胶制剂可包括溶液和粉末形式的固体，可将其与药学上可接受的载体，如惰性压缩气体，例如氮气组合。
至于制备栓剂，首先熔化低熔点的蜡，如脂肪酸甘油酯，如可可脂的混合物，并通过搅拌或类似地混合使活性成分均匀地分散在其中。然后将熔化的均质混合物倒入适当尺寸的模具中，使其冷却并藉此固化。
也包括固体形式的制剂，计划在临用前将其转变成液体形式的制剂，以供口服或胃肠外给药。这类液体形式包括溶液、悬浮液和乳剂。
本发明的化合物也可经皮传递。经皮传递的组合物可采用霜剂、洗剂、气溶胶和/或乳剂的形式，并可将其包括在本领域中用于该目的的传统基质或贮库类型的经皮贴片中。
本发明的化合物也可口服，静脉内、鼻内或皮下给药。
本发明的化合物也可包括为单位剂型的制剂。在这类形式中，将制剂细分成含有适当量的活性组分的适当尺寸的单位剂量，例如达到所需目的的有效量。
在单位剂量的制剂中的本发明活性组合物的量，通常根据特殊的应用，可从大约1.0毫克变化或调整到大约1,000毫克，优选从大约1.0到大约950毫克，更优选从大约1.0到大约500毫克，而典型的是从大约1到大约250毫克。可根据患者的年龄、性别、体重和待治疗疾病的严重性，改变所使用的实际剂量。这类技术为本领域普通技术人员所熟知。
通常，可每天给予人含有活性成分的口服剂型1或2次。将根据临床医师的判断调整给药的用量和频率。一般对于口服给药推荐的日剂量方案可在每天大约1.0毫克到大约1,000毫克范围内，以单一或分开的剂量给予。
在下文中描述一些有用的名词：
胶囊-意指由甲基纤维素、聚乙烯醇或变性明胶或淀粉制备的特殊容器或包封外壳，用以容纳或含有包括活性成分的组合物。硬壳胶囊通常是由较高凝胶强度的骨和猪皮明胶的混合物制成。胶囊本身可含有少量的染料、不透明剂、塑化剂和防腐剂。
片剂-意指压缩或模压的固体剂型，其含有活性成分与合适的稀释剂。可通过压缩混合物或通过湿法制粒、干法制粒而获得的颗粒，或通过压紧来制备片剂。
口服凝胶-意指活性成分分散或溶解于亲水性固体基质内。
构成用的粉末-意指含有活性成分和适当稀释剂的粉末混合物，可将其悬浮于水或果汁中。
稀释剂-意指通常构成大部分组合物或剂型的物质。合适的稀释剂包括糖，如乳糖、蔗糖、甘露糖醇和山梨糖醇；衍生自小麦、玉米、稻米和马铃薯的淀粉；以及纤维素，如微晶纤维素。稀释剂在组合物中的量的范围可从总组合物的大约10到大约90％重量，优选从大约25到大约75％，更优选从大约30到大约60％重量，甚至更优选从大约12到大约60％。
崩解剂-意指加在组合物中帮助它瓦解(崩解)并释放药物的原料。合适的崩解剂包括淀粉；″可溶于冷水″的经修饰的淀粉，如羧甲基淀粉钠；天然和合成的树胶，如槐树豆胶、刺梧桐树胶、瓜耳树胶、黄蓍胶和琼脂；纤维素衍生物，如甲基纤维素和羧甲基纤维素钠；微晶纤维素和交联微晶纤维素，如交联羧甲基纤维素钠；藻酸盐，如藻酸和藻酸钠；粘土，如膨润土；以及泡腾混合物。崩解剂在组合物中的量d范围可从组合物的大约2到大约15％重量，优选从大约4到大约10％重量。
粘合剂-意指将粉末结合或″粘合″在一起，并通过形成颗粒使它们粘结的物质，因此在配制时用来作为″粘附剂″。已经在稀释剂或填充剂中获得粘合剂加上粘结强度。合适的粘合剂包括糖，如蔗糖；衍生自小麦、玉米、稻米和马铃薯的淀粉；天然的树胶，如阿拉伯树胶、明胶和黄蓍胶；海藻的衍生物，如藻酸、藻酸钠和藻酸钙铵；纤维素材料，如甲基纤维素和羧甲基纤维素钠，以及羟丙基甲基纤维素；聚乙烯吡咯烷酮；以及无机物，如硅酸铝镁。粘合剂在组合物中的量的范围可从组合物的大约2到大约20％重量，更优选从大约3到大约10％重量，甚至更优选从大约3到大约6％重量。
润滑剂-意指加在剂型中，使片剂、颗粒等在已经压缩后，能够通过降低摩擦力或磨损而从模具或冲模中释放的物质。合适的润滑剂包括金属硬脂酸盐，如硬脂酸镁、硬脂酸钙或硬脂酸钾；硬脂酸；高熔点的蜡；以及水溶性润滑剂，如氯化钠、苯甲酸钠、乙酸钠、油酸钠、聚乙二醇和d′l-亮氨酸。通常在压缩前很晚的步骤中才加入润滑剂，因为它必须出现在颗粒的表面，并在它们和压片机的部件之间。润滑剂在组合物中的量的范围可从组合物的大约0.2到大约5％重量，优选从大约0.5到大约2％，更优选从大约0.3到大约1.5％重量。
助流剂(Glident)-防止结块并改善颗粒的流动特征的材料，使得流动平顺并均匀。合适的助流剂包括二氧化硅或滑石。助流剂在组合物中的量的范围可从总组合物的大约0.1％到大约5％重量，优选从大约0.5到大约2％重量。
着色剂-提供给组合物或剂型颜色的赋形剂。这类赋形剂可包括食品级染料，并将食品级的染料吸附在合适的吸附剂上，如粘土或氧化铝。着色剂的量可从组合物的大约0.1变化到大约5％重量，优选从大约0.1到大约1％。
生物利用度-意指与标准物或对照组相比较，活性药物成分或治疗部分从给予的剂型被吸收至全身循环内的速率和程度。
制备片剂的传统方法是已知的。这类方法包括干式方法，如直接压缩和压缩通过压紧产生的颗粒，或湿式方法，或其它特殊程序。制备其它给药形式，例如胶囊、栓剂等的传统方法也是已熟知的。
本发明的另一实施方案公开上文公开的本发明化合物或药用组合物在治疗疾病，例如丙型肝炎等中的用途。该方法包括对患有这样的疾病，且需要这类治疗的患者，给予治疗有效量的本发明化合物或药用组合物。
在又一个实施方案中，可使用本发明的化合物，以单一疗法模式或以联合疗法(例如双重联合、三重联合等)模式，例如与抗病毒和/或免疫调节剂联合使用来治疗人类的HCV。这类抗病毒和/或免疫调节剂的实例，包括利巴韦林(得自Schering-Plough Corporation，Madison，New Jersey)和LevovirinTM(得自ICN Pharmaceuticals，Costa Mesa，California)、VP 50406TM(得自Viropharma，Incorporated，Exton，Pennsylvania)、ISIS 14803TM(得自ISIS Pharmaceuticals，Carlsbad，California)、HeptazymeTM(得自Ribozyme Pharmaceuticals，Boulder，Colorado)、VX 497TM(得自Vertex Pharmaceuticals，Cambridge，Massachusetts)、胸腺素(Thymosin)TM(得自SciClone Pharmaceuticals，San Mateo，California)、MaxamineTM(得自Maxim Pharmaceuticals，SanDiego，California)、麦考酚酸吗乙酯(得自Hoffman-LaRoche，Nutley，New Jersey)、干扰素(例如干扰素α、PEG-干扰素α共轭物)等。″PEG-干扰素α共轭物″是与PEG分子共价连接的干扰素α分子。代表性的PEG-干扰素α共轭物包括干扰素α-2a (RoferonTM，得自HoffmanLa-Roche，Nutley，New Jersey)，为聚乙二醇化的干扰素α-2a的形式(例如以商标名PegasysTM出售)、干扰素α-2b(IntronTM，得自Schering-Plough Corporation)，以聚乙二醇化的干扰素α-2b的形式(例如以商标名PEG-IntronTM出售)、干扰素α-2c(BeroforαTM，得自BoehringerIngelheim，Ingelheim，Germany)，或通过测定天然存在的干扰素α的共有序列定义的共有干扰素(InfergenTM，得自Amgen，Thousand Oaks，California)。
如同较早陈述的，本发明也包括本发明的化合物的互变异构体、旋转异构体、对映体和其它立体异构体。因此，本领域普通技术人员意识到一些本发明的化合物可以以合适的异构形式存在。打算将这类变化包括在本发明的范围内。
本发明它的再一个实施方案公开制备在本文中公开的化合物的方法。可通过本领域已知的几种技术制备该化合物。在下列的反应方案中概述了示例性程序。不应将示例解释为对本发明的范围的限制，其在附录的权利要求书中定义。其它的机械路径和类似结构对本领域技术人员而言，将是显而易见的。
应该理解，虽然下列的示例性方案描述了数个代表性本发明化合物的制备，但任何天然和非天然氨基酸两者的适当取代作用将导致形成以这样的取代为基础的所需化合物。打算将这类变化纳入本发明的范围内。
在以下方法程序的描述中使用下列缩写：
THF：四氢呋喃
DMF：N，N-二甲基甲酰胺
EtOAc：乙酸乙酯
AcOH：醋酸
HOOBt：3-羟基-1，2，3-苯并三嗪-4(3H)-酮
EDCl：1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳化二亚胺盐酸盐
NMM：N-甲基吗啉
ADDP：1，1′-(偶氮二羰基)二哌啶
DEAD：偶氮二羧酸二乙酯
MeOH：甲醇
EtOH：乙醇
Et2O：乙醚
DMSO：二甲亚砜
HOBt：N-羟基苯并三唑
PyBrOP：溴-三-吡咯烷
Figure BDA00002167589500761
六氟磷酸盐
DCM：二氯甲烷
DCC：1，3-二环己基碳化二亚胺
TEMPO：2，2，6，6-四甲基-1-哌啶基氧基
Phg：苯基甘氨酸
Chg：环己基甘氨酸
Bn：苄基
Bzl：苄基
Et：乙基
Ph：苯基
DMF-DMA：N.N-二甲基甲酰胺-缩二甲醇(dimethylacetal)
iBoc：异丁氧羰基
iPr：异丙基
tBu或But：叔-丁基
Boc：叔-丁氧羰基
Cbz：苄氧羰基
Cp：环戊二烯基
Ts：对-甲苯磺酰基
Me：甲基
HATU：O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-1，1，3，3-四甲基脲
Figure BDA00002167589500771
六氟磷酸盐
DMAP：4-N，N-二甲氨基吡啶
BOP：苯并三唑-1-基-氧基-三(二甲氨基)六氟磷酸盐
PCC：吡啶
Figure BDA00002167589500772
氯铬酸盐
KHMS：六甲基二硅叠氮化钾或双(三甲基甲硅烷基氨化)钾
NaHMS：六甲基二硅叠氮化钠或双(三甲基甲硅烷基氨化)钠
LiHMDS：六甲基二硅叠氮化锂或双(三甲基甲硅烷基氨化)锂
10％Pd/C：10％披钯碳(按重量计)
TG：硫甘油
制备目标化合物的通用方案
本发明化合物采用下文所述的通用方案(方法A-E)合成。
方法A
N-Boc官能团1.01于酸性条件下的去保护提供其盐酸盐1.02，接着，使其在肽偶合方法下，与N-Boc-叔-亮氨酸偶合，得到1.03。在N-Boc去保护后，接着以适当异氰酸酯处理，获得脲1.05。所述甲酯的水解作用提供酸1.06。所述酸1.06与适当的P1-P′伯酰胺部分的肽偶合，提供羟基酰胺1.07。氧化作用(Moffatt氧化作用或相关方法-参阅T.T.Tidwell，Synthesis，1990，857)或Dess-Martin Periodinane-J.Org.Chem.，(1983)48，4155)得到目标化合物1.08。
Figure BDA00002167589500781
方法B
酸1.06与适当的P1-P′仲酰胺部分的肽偶合，提供羟基酰胺1.09。氧化作用(Moffatt或Dess-Martin’s)，得到目标化合物1.10。
Figure BDA00002167589500782
方法C
在另一种变化中，N-Boc-P2-P3-酸1.17与适当的P1-P′酰胺部分的肽偶合，提供羟基酰胺1.11。氧化作用(Moffatt或Dess-MartinPeriodinane)，得到酮酰胺1.12。N-Boc官能团的去保护获得其盐酸盐1.13。以适当异氰酸酯(或异氰酸酯等同物)处理，，得到目标化合物1.14。
Figure BDA00002167589500791
方法D
在又一种变化中，通过与氯甲酸4-硝基苯酯反应，使该盐酸盐1.13转化成氨基甲酸4-硝基苯酯1.15。以所选择胺(或胺盐酸盐)进行后续处理，提供目标化合物1.14。
Figure BDA00002167589500801
方法E
在再一种变化中，如上述使二肽盐酸盐1.03转化成氨基甲酸4-硝基苯酯。以所选择的胺(或胺盐酸盐)处理，提供脲衍生物1.05。水解作用及如方法A/B中所述进一步进行，提供目标化合物1.14。
Figure BDA00002167589500802
P1-P′部分的制备
中间物10.11与10.12的制备
步骤1.
Figure BDA00002167589500803
于N2下，使酮亚胺10.01(50g，187.1mmol)在无水THF(400ml)中的搅拌溶液冷却至-78℃，并以K-tBuO(220ml，1.15当量)在THF中的1M溶液处理。使反应混合物温热至0℃，并搅拌1小时，并用溴代甲基环丁烷(28ml，249mmol)处理。将反应混合物于室温下搅拌48小时，并在真空中浓缩。使残留物溶于Et2O(300ml)中，并以HCl水溶液(2M，300ml)处理。将所形成的溶液于室温下搅拌5小时，并以Et2O(1升)萃取。以NaOH(50％水溶液)使水层呈碱性至pH～12-14，并以CH2Cl2(3x300ml)萃取。使合并的有机层脱水干燥(MgSO4)，过滤，并浓缩，得到纯胺(10.02，18g)，为无色油。
步骤2
Figure BDA00002167589500811
于0℃下，用二碳酸二-叔-丁酯(23g，105.4mmol)处理胺10.02(18g，105.2mmol)在CH2Cl2(350ml)中的溶液，并在室温下搅拌12小时。于反应完成后(TLC)，使反应混合物在真空中浓缩，并使残留物溶于THF/H2O(200ml，1∶1)中，并用LiOH·H2O(6.5g，158.5mmol)处理，并在室温下搅拌3小时。使反应混合物浓缩，并以Et2O萃取碱性水层。以浓HCl使水层酸化至pH～1-2，并用CH2Cl2萃取。使合并的有机层干燥(MgSO4)，过滤，及在真空中浓缩，得到10.03，为无色粘稠油，将其用于下一步骤，无需任何进一步纯化。
步骤3
用BOP试剂(41.1g，93mmol)、N-甲基吗啉(27ml)、N，O-二甲基羟基胺盐酸盐(9.07g，93mmol)处理酸10.03(15.0g，62mmol)在CH2Cl2(250ml)中的溶液，并于室温下搅拌过夜。将反应混合物以1NHCl水溶液(250ml)稀释，并分离各层，且以CH2Cl2(3x300ml)萃取水层。使合并的有机层干燥(MgSO4)，过滤，并在真空中浓缩，经层析纯化(SiO2，EtOAc/己烷2∶3)，得到酰胺10.04(15.0g)，为无色固体。
步骤4
Figure BDA00002167589500821
于0℃下，用LiAlH4溶液(1M，93ml，93mmol)逐滴处理酰胺10.04(15g，52.1mmol)在无水THF(200ml)中的溶液。将反应混合物于室温下搅拌1小时，并在0℃下，用KHSO4溶液(10％水溶液)小心地使反应猝灭，及搅拌0.5小时。将反应混合物以HCl水溶液(1M，150ml)稀释，并用CH2Cl2(3x200ml)萃取。将合并的有机层以HCl水溶液(1M)、饱和NaHCO3、盐水洗涤，并干燥(MgSO4)。过滤混合物，并在真空中浓缩，得到10.05，为粘稠无色油(14g)。
步骤5：
Figure BDA00002167589500822
将醛10.05(14g，61.6mmol)在CH2Cl2(50ml)中的溶液用Et3N(10.73ml，74.4mmol)与丙酮氰醇(10.86g，127.57mmol)处理，并于室温下搅拌24小时。使反应混合物于真空中浓缩，并用HCl水溶液(1M，200ml)稀释，及萃取在CH2Cl2(3x200ml)中。将合并的有机层以H2O、盐水洗涤，干燥(MgSO4)，过滤，在真空中浓缩，经层析纯化(SiO2，EtOAc/己烷1∶4)，得到10.06(10.3g)，为无色液体。
步骤6.
于0℃下，用氰醇10.06处理通过使HCl气体起泡通入CH3OH(700ml)中所制备的用HCl饱和的甲醇*，并加热至回流24小时。使反应物在真空中浓缩，得到10.07，将其使用于下一步骤而无需纯化。
*或者，也可使用通过将AcCl加入至无水甲醇中制备的6M HCl。
步骤7.
Figure BDA00002167589500832
于-78℃下，将胺盐酸盐10.07在CH2Cl2中的溶液(200ml)用Et3N(45.0ml，315mmol)与Boc2O(45.7g，209mmol)处理。然后，将反应混合物于室温下搅拌过夜，并用HCl(2M，200ml)稀释，及萃取于CH2Cl2中。使合并的有机层干燥(MgSO4)，过滤，在真空中浓缩，经层析纯化(EtOAc/己烷1∶4)，得到羟基酯10.08。
步骤8
将甲酯10.08(3g，10.5mmol)在THF/H2O(1∶1)中的溶液用LiOHH2O(645mg，15.75mmol)处理，并于室温下搅拌2小时。以HCl水溶液(1M，15ml)使反应混合物酸化，并在真空中浓缩。使残留物于真空中干燥，以定量产率得到10.09。
步骤9.
Figure BDA00002167589500841
将酸10.09(得自上文)在CH2Cl2(50ml)与DMF(25ml)中的溶液用NH4Cl(2.94g，55.5mmol)、EDCI(3.15g，16.5mmol)、HOOBt(2.69g，16.5mmol)及NMM(4.4g，44mmol)处理。将反应混合物于室温下搅拌3天。于真空下除去溶剂，并将残留物以HCl水溶液(250ml)稀释，并用CH2Cl2萃取。将合并的有机层以饱和NaHCO3水溶液洗涤，干燥(MgSO4)，过滤，在真空中浓缩，获得10.10，将其原样用于下面的步骤。(或者，10.10也可于0℃下，通过使10.06(4.5g，17.7mmol)与H2O2水溶液(10ml)、LiOH·H2O(820mg，20.8mmol)在50mlCH3OH中反应0.5小时而直接获得)。
步骤10
Figure BDA00002167589500842
使前一步骤中所获得的10.10溶液溶于二氧六环中的4N HCl内，并在室温下搅拌2小时。使反应混合物在真空中浓缩，获得中间物10.11，为固体，无需进一步纯化而使用。
步骤11.
采用基本上在上文步骤9、10中所述的程序，用适当试剂从化合物10.09，获得所需的中间体10.12。
中间体11.01的制备
步骤1
Figure BDA00002167589500851
向4-戊炔-1-醇11.02溶液(4.15g；Aldrich)中添加Dess-MartinPeriodinane(30.25g；Aldrich)，并将所形成的混合物搅拌45分钟，然后添加(叔-丁氧羰基亚甲基)三苯基正膦(26.75g；Aldrich)。将所形成的深色反应物搅拌过夜，用EtOAc稀释，以亚硫酸钠水溶液、饱和NaHCO3水溶液、水、盐水洗涤，并干燥。于减压下除去挥发性物质，并使残留物经硅胶柱层析纯化，使用己烷中的1％EtOAc作为洗脱液，得到所需的化合物11.03(3.92g)。也获得一些不纯流分，但此时搁置一旁。
步骤2
Figure BDA00002167589500852
使用正-丙醇(20ml；Aldrich))中的烯烃11.03(1.9g)、正-丙醇(40ml)中的氨基甲酸苄酯(4.95g；Aldrich)、水(79ml)中的NaOH(1.29g)、次氯酸叔-丁酯(3.7ml)、正-丙醇(37.5ml)中的(DHQ)2PHAL(0.423g；Aldrich)及锇酸钾：脱水物(0.1544g；Aldrich)，以及Angew.Chem.Int.Ed.Engl(1998)，35，(23/24)，第2813-7页中所述程序，获得粗产物，使其经硅胶柱层析纯化，使用EtOAc∶己烷(1∶5)，得到所需的氨基醇11.04(1.37g，37％)，为白色固体。
步骤3
Figure BDA00002167589500861
向酯11.04(0.700g)中添加二氧六环中的4M HCl(20ml；Aldrich)，并使所得到的混合物于室温下静置过夜。于减压下除去挥发性物质，获得酸11.05(0.621g)，为白色固体。
步骤4
于室温下，将BOP试剂(3.65g；Sigma)，接着是三乙胺(3.45ml)添加至羧酸11.05(2.00g)的二氯甲烷(20ml)溶液与烯丙基胺(0.6l6ml)中，并将所形成的混合物搅拌过夜。使反应混合物于EtOAc与10％HCl水溶液之间分配。分离有机相，以饱和碳酸氢钠水溶液、水洗涤，干燥(硫酸镁)。使粗制反应产物经硅胶柱层析纯化，使用(EtOAc∶己烷；70∶30)作为洗脱液，提供所需的酰胺11.01(1.73g)，为粘稠黄色油。
中间体12.03与1
步骤1
Figure BDA00002167589500863
使用基本上关于中间体10.11步骤3-8所述的程序，使化合物12.01转化成所需的物质12.02。
步骤2
Figure BDA00002167589500871
使用基本上关于中间体10.11步骤9、10所述的程序，使化合物12.02转化成所需的中间体12.03。
步骤3
使用基本上关于中间体10.12步骤11所述的程序，使化合物12.02转化成所需的中间体12.03。
中间体13.01的制备
步骤1
Figure BDA00002167589500873
于0℃-5℃下，用2小时向1-硝基丁烷13.02(16.5g，0.16mol)与乙醛酸在H2O(28.1g，0.305mol)和MeOH(122ml)中的搅拌溶液中逐滴添加三乙胺(93ml，0.667mol)。使溶液温热至室温，搅拌过夜，并浓缩至干燥，得到油状物。然后，使油溶于H2O中，并以10％HCl酸化至pH＝1，接着以EtOAc萃取。将合并的有机溶液用盐水洗涤，以Na2SO4干燥，过滤，并浓缩至干燥，获得产物13.03(28.1g，99％产率)。
步骤2
Figure BDA00002167589500881
向化合物13.03(240g，1.35mol)在醋酸(1.25L)中的搅拌溶液中添加10％Pd/C(37g)。使所形成的溶液于59psi下氢化3小时，接着在60psi下过夜。然后，使醋酸蒸发，并与甲苯共沸3次，接着以MeOH及乙醚研磨。然后过滤溶液，并与甲苯共沸两次，得到13.04，为灰白色固体(131g，0.891mol，66％)。
步骤3
Figure BDA00002167589500882
于0℃下，向氨基酸13.04(2.0g，13.6mmol)在二氧六环(10ml)与H2O(5ml)中的搅拌溶液中添加1N NaOH溶液(4.3ml，14.0mmol)。将所形成的溶液搅拌10分钟，接着添加二碳酸二-叔-丁酯(0.110g，14.0mmol)，并于0℃下搅拌15分钟。然后，使溶液温热至室温，搅拌45分钟，并在冰箱中保持过夜，并浓缩至干燥，获得粗制物质。向此粗制物质在EtOAc(100ml)与冰中的溶液中加入KHSO4(3.36g)与H2O(32ml)，并搅拌4-6分钟。接着分离有机层，并以EtOAc将水层萃取两次，且将合并的有机层以水、盐水洗涤，以Na2SO4干燥，过滤，并浓缩至干燥，得到产物13.05，为透明胶状物(3.0g，89％产率)。
步骤4
使用基本上关于中间体10.12，步骤11所述的程序，使化合物13.05转化成所需的中间体13.01。
中间体14.01的制备
步骤1
Figure BDA00002167589500891
使用基本上关于中间体13.01，步骤1-3所述的程序，使化合物14.02转化成所需的物质14.03。
步骤2
Figure BDA00002167589500892
使用基本上关于中间体10.12，步骤11所述的程序，使化合物14.03转化成所需的中间体14.01。
中间体15.01的制备
步骤1
Figure BDA00002167589500893
于0℃下，向亚硝酸银(9g，58.5mmol)在乙醚(25ml)中的悬浮液中慢慢地经过添液漏斗(约15分钟)加入4-碘-1，1，1-三氟丁烷15.02(10g，42.0mmol)在乙醚(25ml)中的溶液。将所形成的混合物于0℃下激烈搅拌，并温热至室温。50小时后，经过硅藻土垫滤出固体物质。使所形成的乙醚溶液于真空中浓缩，获得15.03，为无色油，其无需进一步纯化而使用。
步骤2
Figure BDA00002167589500901
使用基本上关于中间体13.01，步骤1-3所述的程序，使化合物15.03转化成所需的物质15.04。
步骤3
Figure BDA00002167589500902
使用基本上关于中间体10.12，步骤11所述的程序，使化合物15.04转化成所需的中间体15.01。
中间体16.01的制备
Figure BDA00002167589500903
如上文所述处理酸16.02(Winkler，D.；Burger，K.，Synthesis，1996，1419)(中间体10.12的制备)，获得期望的中间体16.01。
P2/P3-P2部分的制备
中间体20.01的制备
Figure BDA00002167589500904
氨基酯20.01按照R.Zhang和J.S.Madalengoitia(J.Org.Chem.1999，64，330)的方法制成，但通过Boc-保护的氨基酸与甲醇制HCl的反应而裂解Boc基团。
(注：在所报告合成的一种变化中，将锍叶立德用其相应的叶立德置换)。
中间体20.04的制备
步骤1
Figure BDA00002167589500912
于0℃下，用BOP试剂处理市售的氨基酸Boc-Chg-OH20.02(Senn化学品，6.64g，24.1mmol)与胺盐酸盐20.01(4.5g，22mmol)在CH2Cl2(100ml)中的溶液，并在室温下搅拌15小时。使反应混合物于真空中浓缩，然后将其以1M HCl水溶液稀释，并萃取于EtOAc(3x200ml)中。将合并的有机层以饱和NaHCO3(200ml)洗涤，干燥(MgSO4)，过滤，并在真空中浓缩，及层析(SiO2，EtOAc/己烷3∶7)，获得20.03(6.0g)，为无色固体。
步骤2
Figure BDA00002167589500913
将甲酯20.03(4.0g，9.79mmol)在THF/H2O(1∶1)中的溶液用LiOH·H2O(401mg，9.79mmol)处理，并于室温下搅拌3小时。以HCl水溶液使反应混合物酸化，并于真空中浓缩，获得所需的中间体游离酸20.04。
中间体20.07的制备
步骤1
Figure BDA00002167589500921
使Boc-叔-Leu 20.05(Fluka，5.0g，21.6mmol)在无水CH2Cl2/DMF(50ml，1∶1)中的溶液冷却至0℃，并以胺盐20.01(5.3g，25.7mmol)、NMM(6.5g，64.8mmo1)及BOP试剂(11.6g，25.7mmol)处理。将反应物于室温下搅拌24小时，用HCl水溶液(1M)稀释，并用CH2Cl2萃取。将合并的有机层用HCl(水溶液，1M)、饱和NaHCO3、盐水洗涤，干燥(MgSO4)，过滤，并在真空中浓缩，经层析纯化(SiO2，丙酮/己烷1∶5)，得到20.06，为无色固体。
步骤2
Figure BDA00002167589500922
使甲酯20.06溶液(4.0g，10.46mmol)溶于二氧六环中的4M HCl内，并在室温下搅拌3小时。使反应混合物于真空中浓缩，获得胺盐酸盐20.07，使用之而无需纯化。
中间体20.10的制备
步骤1
Figure BDA00002167589500931
向1.17(10.4g，28mmol)在DCM(300ml)中的-20℃溶液中加入HATU(1.05当量，29.4mmol，11.2g)、胺盐、中间体12.03(1.0当量，28mmol，5.48g)。于-20℃下10分钟后，添加DIPEA(3.6当量，100mmol，17.4ml)。将反应物于此温度下搅拌16小时。16小时后，将反应物用EtOAc稀释，并以NaHCO3、柠檬酸(10％w/w)及盐水连续洗涤。有机层经MgSO4干燥，过滤，及在真空中浓缩，得到14克所需的中间体20.08。
步骤2
Figure BDA00002167589500932
以对实例198所述的方式(步骤8)，使羟基酰胺20.08氧化成所需的酮酰胺20.09。LC-MS＝507(M+H)+。
步骤3
Figure BDA00002167589500933
按关于20.06转变成20.07中所述，进行t-Boc官能团20.09的去保护，获得所需的物质20.10。
中间体21.01的制备：
步骤1：
Figure BDA00002167589500941
于室温下，向N-Boc-3，4-脱氢脯氨酸21.02(5.0g，23.5mmol)、二碳酸二-叔-丁酯(7.5g，34.4mmol)及4-N，N-二甲氨基吡啶(0.40g，3.33mmol)在乙腈(100ml)中的搅拌溶液中添加三乙胺(5.0ml，35.6mmol)。于真空中浓缩之前，将所形成的溶液在此温度下搅拌18小时。使深褐色残留物经快速柱层析纯化，用10-25％EtOAc/己烷洗脱，得到产物21.03，为淡黄色油(5.29g，84％)。
步骤2：
Figure BDA00002167589500942
在室温下，向脱氢脯氨酸衍生物21.03(10.1g，37.4mmol)、苄基三乙基氯化铵(1.60g，7.02mmol)在氯仿(120ml)中的搅拌溶液中添加50％氢氧化钠水溶液(120g)。于此温度下激烈搅拌24小时后，将暗色混合物以CH2Cl2(200ml)与乙醚(600ml)稀释。分离各层后，将水溶液以CH2Cl2/Et2O(1∶2，3x600ml)萃取。使有机溶液干燥(MgSO4)，并浓缩。使残留物经快速柱层析纯化，使用5-20％EtOAc/己烷，得到9.34克(71％)21.04，为灰白色固体。
步骤3：
Figure BDA00002167589500951
于室温下，将21.04(9.34g，26.5mmol)在CH2Cl2(25ml)与CF3CO2H(50ml)中的溶液搅拌4.5小时，然后使其在真空中浓缩，获得褐色残留物21.05，将其使用于步骤4，无需进一步纯化。
步骤4
Figure BDA00002167589500952
将浓盐酸(4.5ml)添加至得自步骤3的残留物21.05在甲醇(70ml)中的溶液内，并使所形成的混合物在油浴中温热至65℃。18小时后，使混合物于真空中浓缩，得到褐色油21.01，无需进一步纯化而使用。
中间体22.01的制备
步骤1
将双(三甲基甲硅烷基)氨化钾(158ml，在甲苯中的0.5M溶液；79mmol)添加至溴化环丙基三苯基
Figure BDA00002167589500954
(33.12g；86.4mmol)在无水四氢呋喃(130ml)中的搅拌悬浮液中，于氮气氛及室温下，将所形成的橙色混合物搅拌1小时，然后添加THF(8ml)中的醛22.02(9.68g；42.2mmol)。接着，使反应物于氮气氛下回流2小时。冷却后，添加甲醇、乙醚和Rochelles盐。分离有机相，用盐水洗涤，干燥，及在减压下浓缩。使粗制反应产物经硅胶柱层析纯化，使用EtOAc-己烷(1∶99)至EtOAc-己烷(5∶95)，提供烯烃22.03(8.47g)，为黄色油。
步骤2
Figure BDA00002167589500961
通过将14.2ml乙酰氯逐滴添加至冷甲醇中，并于室温下，将所形成的溶液稀释至200ml来制备1M HCl在MeOH/MeOAc中的溶液。
使氨基甲酸酯22.03(9.49g；37.5mmol)溶于甲醇(12ml)中，并添加至MeOH/MeOAc中的1M HCl(150ml)内，同时在冰浴中冷却。使所形成的混合物在此温度下保持1小时，然后移除冰浴，并于室温下持续搅拌过夜。于减压下除去挥发性物质，得到黄色油，其无需纯化而用于下一步骤。
使黄色油溶于THF(30ml)与MeOH(20ml)的混合物中，并以三乙胺(15ml；108mmol)处理，直到溶液pH＝9-10为止。放置在冰浴中后，以N-Boc-Gly-Osu(11.22g；41mmol)处理混合物。撤去冰浴，并将反应物于室温下搅拌1小时。于减压下除去挥发性物质，并使残留物经硅胶柱层析纯化，使用二氯甲烷中的甲醇(1-3％)，提供所需的酰胺22.04(9.09g)。
步骤3
Figure BDA00002167589500962
使醇22.04(9.09g；33.6mmol)溶于丙酮(118.5ml)中，并以2，2-二甲氧基丙烷(37.4ml；304mmol)与BF3：Et2O(0.32ml；2.6mmol)处理，且将所形成的混合物在室温下搅拌5.5小时。将反应溶液用数滴三乙胺处理，并于减压下除去挥发性物质。使残留物经硅胶柱层析纯化，使用己烷中的5-25％EtOAc，提供N，O-缩醛22.05(8.85g)。
步骤4
Figure BDA00002167589500971
使氨基甲酸酯22.05(8.81g；28.4mmol)溶于乙腈(45ml)中，并在氮气氛下使溶液冷却至-40℃。添加吡啶(6.9ml；85.3mmol)，接着加入nitrosium tetrafluoroborate(NOBF4)(6.63g；56.8mmol)，并使所形成的反应混合物保持低于0℃，直到TLC显示无起始原料残留为止(约2.25小时)。添加吡咯烷(20ml；240mmol)，并撤除冷却浴，并在室温下持续搅拌1小时，然后于减压下除去挥发性物质。使残留物快速地通过硅胶垫，得到黄色油。
使黄色油溶于无水苯(220ml)中，并添加乙酸钯(0.317g；1.41mmol)，接着将所形成的混合物在氮气氛下加热至回流1.5小时。冷却后，在减压下除去挥发性物质，并使深色残留物经硅胶柱层析纯化，使用EtOAc-己烷(1∶4)，提供i)反式-吡咯烷酮22.06(1.94g)，接着是ii)顺式-吡咯烷酮22.07(1.97g)。
步骤5
Figure BDA00002167589500972
将新鲜制备的MeOAc/MeOH中的1M HCl(10ml；如上述)添加至N，O-缩醛22.06中，并于室温下搅拌1小时。于减压下除去溶剂，并使残留物经硅胶柱层析纯化，使用二氯甲烷中的0-4％MeOH作为洗脱液，提供所需的醇22.08(1.42g)，黄色油。
步骤6
Figure BDA00002167589500981
向内酰胺22.08(1.29g；8.44mmol)在无水四氢呋喃(55ml)中的溶液内，添加氢化锂铝(2.40g；63.2mmol)，并使所形成的混合物回流8小时。冷却后，添加水，接着加入15％NaOH水溶液，并经过硅藻土过滤所形成的混合物，且以THF和MeOH充分洗涤固体。于减压下除去溶剂，并使残留物再溶解于二氯甲烷中，干燥，并在减压下浓缩，提供吡咯烷，可无需纯化而使用。
于-60℃及氮气氛下，将Hunigs碱(4.5ml；25.8mmol)添加至N-Boc-L-叔-Leu-OH(1.76g；7.6mmol)、粗制吡咯烷及HATU(2.89g；7.6mmol)在无水二氯甲烷(50ml)中的混合物中。使所形成的反应物慢慢回复至室温过夜。添加EtOAc，并将黄色溶液以稀HCl水溶液、碳酸氢钠饱和水溶液、水、盐水洗涤。使有机层干燥，并于减压下浓缩。使残留物经硅胶柱层析纯化，使用EtOAc∶己烷(1∶3)，得到所需的酰胺22.09(2.00g)。
步骤7
Figure BDA00002167589500991
使醇22.09(2.00g；5.67mmol)溶于丙酮(116ml)中，并在冰浴中冷却10分钟。然后，将此溶液添加至已冷却的Jones试剂(14.2ml；约2mmol/ml)中，并将所形成的混合物于5℃下搅拌0.5小时，且移除冰浴。在添加至EtOAc(100ml)中的硫酸钠(28.54g)、硅藻土(15g)之前，将反应物于室温下再搅拌2小时。1分钟后添加异丙醇(15ml)，然后再搅拌10分钟，并过滤。使滤液在减压下浓缩，提供褐色油，使其溶于EtOAc中。将此溶液以水、3％柠檬酸水溶液、盐水洗涤，干燥，及浓缩，提供所需的羧酸22.01(1.64g)，为白色固体。
中间体23.01的制备
步骤1：
向酯23.02(6.0g)与分子筛(5.2g)在无水二氯甲烷(35ml)中的混合物中添加吡咯烷(5.7ml，66.36mmol)。将所形成的褐色浆液于室温及N2下搅拌24小时，过滤，并以无水CH3CN洗涤。浓缩合并的滤液，得到所需的产物23.03。
步骤2：
Figure BDA00002167589501001
向得自前一步骤的产物23.03在CH3CN(35ml)中的溶液中添加无水K2CO3、甲代烯丙基氯(2.77g，30.5mmol)、NaI(1.07g，6.7mmol)。将所形成的浆液于环境温度及N2下搅拌24小时。添加50ml冰冷却的水，接着加入2N KHSO4溶液，直到pH值为1。添加EtOAc(100ml)，并将混合物搅拌0.75小时。收集合并的有机层，并用盐水洗涤，经MgSO4干燥，及蒸发，得到所需的产物23.04。
步骤3：
Figure BDA00002167589501002
使得自前一步骤的产物23.04(2.7g，8.16mmol)溶于二氧六环(20ml)中，并用新鲜制备的1N LiOH(9ml)处理。将反应混合物于环境温度及N2下搅拌20小时。使反应混合物溶于EtOAc中，并以H2O洗涤。使合并的水相冷却至0℃，并使用1N HCl酸化至pH 1.65。以EtOAc(2x100ml)萃取混浊混合物。将合并的有机层用盐水洗涤，经MgSO4干燥，及浓缩，得到所需的酸；23.05(3.40g)。
步骤4：
Figure BDA00002167589501011
向NaBH(OAc)3(3.93g，18.5mmol)在CH2Cl2(55ml)中的悬浮液中添加得自前一步骤的产物23.05在无水CH2Cl2(20ml)与乙酸(2ml)中的溶液。将浆液于环境温度下搅拌20小时。将冰冷却的水(100ml)添加至浆液中，并搅拌1/2小时。分离有机层，过滤，干燥，并蒸发，得到所需的产物23.06。
步骤5：
将得自前一步骤的产物23.06(1.9g)在MeOH(40ml)中的溶液，以过量CH2N2/Et2O溶液处理，并搅拌过夜。使反应混合物浓缩至干，得到粗残留物。使残留物于硅胶上层析，以EtOAc/己烷梯度液洗脱，得到1.07g所需的纯产物23.07。
步骤6：
Figure BDA00002167589501021
将得自前一步骤的产物23.07(1.36g)在无水CH2Cl2(40ml)中的溶液，以BF3.Me2O(0.7ml)处理。将反应混合物于环境温度下搅拌20小时，并以饱和NaHCO3(30ml)使反应猝灭，搅拌1/2小时。分离有机层，并将合并的有机层用盐水洗涤，经MgSO4干燥，浓缩，得到粗制残留物。使残留物于硅胶上层析，以EtOAc/己烷梯度液洗脱，得到0.88g所需化合物23.08。
步骤7：
Figure BDA00002167589501022
在室温下，向得自前一步骤的产物23.08(0.92g)在MeOH(30ml)中的溶液中添加10％Pd/C(0.16g)，并于环境温度及1大气压力下氢化。将反应混合物搅拌4小时，并浓缩至干，得到所需化合物23.01。
P3部分的制备
中间体50.01的制备
步骤1
Figure BDA00002167589501031
向50.02(15g)在MeOH(150ml)中的溶液中添加浓HCl(3-4ml)，并使混合物回流16小时。使反应混合物冷却至室温，并浓缩。使残留物溶于乙醚(250ml)中，并以冷饱和碳酸氢钠溶液及盐水洗涤。使有机层干燥(Na2SO4)，并浓缩，得到甲酯50.03(12.98g)，其无需进一步纯化而往前进行。
步骤2
Figure BDA00002167589501032
使得自上文的甲酯50.03溶于二氯甲烷(100ml)中，并在氮气氛下冷却至-78℃。用2小时逐滴添加DIBAL(二氯甲烷中的1.0M溶液，200ml)。使反应混合物温热至室温经16小时。使反应混合物冷却至0℃，并逐滴添加MeOH(5-8ml)。慢慢添加10％酒石酸钠钾溶液(200ml)，并搅拌。以二氯甲烷(100ml)稀释，并分离有机层(伴随着一些白色沉淀物)。将有机层以1N HCl(250ml)、盐水(200ml)洗涤，干燥(Na2SO4)，及浓缩，提供醇50.04(11.00g)，为透明油。
步骤3
Figure BDA00002167589501041
使得自上文的醇50.04溶于二氯甲烷(400ml)中，并在氮气氛下冷却至0℃。分次添加PCC(22.2g)，并使反应混合物慢慢温热至室温经16小时。将反应混合物以乙醚(500ml)稀释，并经过硅藻土垫过滤。浓缩滤液，并使残留物溶于乙醚(500ml)中。使其通过硅胶垫，并浓缩滤液，提供醛50.05，其无需进一步纯化而往前进行。
步骤4
Figure BDA00002167589501042
基本上使用Chakraborty等的方法(Tetrahedron，1995，51(33)，9179-90)，使得自上文的醛50.05转化成所需的物质50.01。
具体实施例的制备
实施例108：
Figure BDA00002167589501043
步骤1和2：
Figure BDA00002167589501044
步骤1：
于-78℃及氮气氛下，将KHMS(200ml，甲苯中的0.5M溶液)逐滴添加至环己烷羧酸甲酯(11.1g；78mmol)在无水THF(200ml)中的搅拌溶液中。于添加完成时，使反应在此温度下再保持0.5小时，然后添加苄基氯甲基醚(18.6ml；134mmol)。使反应物温热至室温过夜，并添加水(100ml)。水溶液处理后提供残留物，使其经硅胶柱层析纯化，使用EtOAc∶己烷(1∶10)作为洗脱液，得到所需的不纯中间体醚(14.98g)，为无色油。
步骤2：
使10％Pd/C(0.5g)与前述粗制醚(4.1g)在MeOH(80ml)中的黑色悬浮液，于室温下暴露于氮气氛(气囊)过夜。经过硅藻土垫过滤反应物，并将固体以甲醇充分洗涤。使合并的滤液于减压下浓缩，并使粗产物经硅胶柱层析纯化，使用EtOAc∶己烷(1∶5)，得到伯醇(108A；0.62g)，无色油。
步骤3：
Figure BDA00002167589501051
于0℃及氮气氛下，将甲磺酰氯(0.31ml)和三乙胺(0.75ml)先后加入伯醇(108A；0.62g)的搅拌溶液中。将所形成的混合物于此温度下搅拌0.5小时。将反应混合物萃取于EtOAc中，并以1M HCl水溶液、饱和NaHCO3水溶液、水洗涤，干燥(MgSO4)，并浓缩。以黄色油获得残留物(甲烷磺酸酯108B；0.74g)，其无需纯化而用于后续步骤。
步骤4：
Figure BDA00002167589501061
将甲烷硫醇钠(0.236g；2当量)添加至甲烷磺酸酯(108B；0.42g)的DMF(2ml)溶液中，并将混合物加热至100℃，历经1小时。水溶液处理，并使粗制反应产物经硅胶柱层析纯化，使用EtOAc∶己烷(1∶20)洗脱，获得硫化物(108C；0.089g)。
步骤5和6：
Figure BDA00002167589501062
步骤5：
使氢氧化钾(0.25g)溶于水(1ml)与乙醇(5ml)的混合物中，并添加至甲酯(108C；0.089g)中，将所形成的混合物于氮气氛下加热至回流过周末(约72小时)。冷却后，使反应物在EtOAc与稀HCl水溶液之间分配。将有机相分离，用盐水洗涤，干燥，并浓缩，产生粗制中间体羧酸，无需纯化而使用。
步骤6：
将三乙胺(61μL)和DPPA(95μL)先后加入到得自前一步骤的羧酸的甲苯溶液中，并将反应物加热至100℃过夜。冷却后，使反应混合物在EtOAc和饱和碳酸氢钠水溶液之间分配。将有机相分离，干燥，并浓缩，得到异氰酸酯(108D；50mg)，无需纯化而使用。
步骤7和8：
Figure BDA00002167589501071
步骤7：
将二氯甲烷(1ml)中的异氰酸酯(108D；50mg)添加至其盐酸盐(108E；以对20.06的转变成20.07所述的方式，由20.08制得；100mg)与三乙胺(111μL)在二氯甲烷(2ml)中的混合物中，并将所形成的混合物于室温下搅拌4小时。使反应混合物于EtOAc与10％HCl水溶液之间分配。分离有机相，以饱和碳酸氢钠水溶液、水洗涤，干燥(硫酸镁)，并浓缩，得到残留物，将其使用于步骤8而无需纯化。
步骤8：
使前述步骤中的残留物溶于甲苯(3ml)与二甲亚砜(3ml)的混合物中，并添加EDCI(647mg)，接着是二氯乙酸(140μL)，且将所形成的反应混合物于室温下搅拌4小时。使反应混合物于EtOAc和5％亚硫酸钠水溶液之间分配。分离有机相，以10％HCl水溶液、饱和碳酸氢钠水溶液、水洗涤，干燥(硫酸镁)，并浓缩，得到残留物，使其经硅胶柱层析纯化，使用丙酮∶己烷(40∶60)作为洗脱液，提供所需的酮基-酰胺(108；11.5mg)。MS：MH+，592.1.
实施例185：
Figure BDA00002167589501072
步骤1：
使Oxone(5.68g)溶于水(5ml)中，并添加至甲醇(5ml)中的羧酸185A(1.25g)中，同时在冰浴中冷却。使反应混合物温热至室温过夜。于减压下除去挥发性物质，并使残留物在二氯甲烷与水之间分配。分离水相，并以二氯甲烷萃取(X2)。使合并的有机相干燥，并浓缩，得到砜(185B；1.10g)，为白色固体，无需纯化而用于后续程序。
步骤2和3：
Figure BDA00002167589501082
步骤2：
使氨基甲酸苄酯(11.01；0.16g)溶于TFA(7ml)中，并添加二甲硫(1.78ml)，且使所形成的混合物在室温下静置3小时，然后于减压下除去挥发性物质。获得残留物，将其使用于下文步骤3中。
步骤3：
将三乙胺(111μL)添加至得自步骤2的残留物羧酸(1.17；0.180g)与BOP试剂(0.236g)在二氯甲烷(5ml)中的混合物中，并将反应混合物于室温下搅拌过夜。使反应物于乙酸乙酯与10％HCl水溶液之间分配。分离有机相，以饱和碳酸氢钠水溶液，水洗涤，干燥(硫酸镁)，并于减压下除去挥发性物质。使残留物经硅胶柱层析纯化，使用EtOAc∶己烷(70∶30)作为洗脱液，得到所需的羟基-酰胺(185D；0.165g)，为白色固体。
步骤4：
Figure BDA00002167589501091
将Periodinane(0.236g)添加至醇(185D；0.152g)在二氯甲烷(5ml)中的搅拌溶液中，并将所形成的白色悬浮液搅拌2小时，然后添加至EtOAc与5％亚硫酸钠水溶液的混合物中。分离有机相，以饱和碳酸氢钠水溶液、水洗涤，干燥，并于减压下除去挥发性物质。使残留物经硅胶柱层析纯化，使用EtOAc∶己烷(40∶60)作为洗脱液，得到所需的酮基-酰胺(185E；0.147g)，为白色固体。MS：MH+，545.5。
步骤5：
Figure BDA00002167589501092
将HCl在二氧六环中的溶液(4M；5ml；Aldrich)添加至氨基甲酸酯(185E；0.14g)中，并使其在室温下静置3小时。于减压下除去挥发性物质，提供其盐酸盐(185F；0.126g：含有少量二氧六环)。
步骤6和7：
Figure BDA00002167589501093
步骤6：
将DPPA(19μL)添加至羧酸(185B；20mg)和三乙胺(13μL)在甲苯(1ml)中的混合物中，并将所形成的反应混合物加热至回流1小时。冷却后，使反应物在EtOAc与饱和碳酸氢钠水溶液之间分配。分离有机相，干燥，并于减压下除去挥发性物质。获得粗制中间体异氰酸酯，将其使用于下文步骤7而无需纯化。
步骤7：
使得自步骤6的产物溶于二氯甲烷(1ml)中，并添加至其盐酸盐(185F；20mg)与三乙胺(60μL)在二氯甲烷(1ml)中的混合物中，且将所形成的混合物在室温下搅拌1小时。使反应物于EtOAc与10％HCl水溶液之间分配。分离有机相，以饱和碳酸氢钠水溶液、水洗涤，干燥，并于减压下除去挥发性物质。使所形成的残留物经硅胶板层析纯化，使用EtOAc∶己烷(1∶1)作为洗脱液，提供酮基-酰胺(185；16.3mg)，为白色固体。MS：MH+，662.5。
式132与210化合物直接由式122化合物的制备
Figure BDA00002167589501101
使用硫化物122(以类似如108的方式，使用甲酯210A而非108C制成；20mg)、Oxone(27mg；1.5当量)、水(1ml)、甲醇(1ml)及先前提出的程序(185A至185B)，获得粗制反应产物，使其经硅胶板层析纯化，使用EtOAc作为洗脱液。获得砜(210；MH+＝704.4；5.6mg)，为白色固体，接着是亚砜类的混合物(132；MH+＝688.5；6.3mg)，也为白色固体。
化合物113的制备
Figure BDA00002167589501102
步骤1和2：
Figure BDA00002167589501111
步骤1：
使用环己烷羧酸甲酯(5.55g)、KHM S(100ml，甲苯中的0.5M溶液)、无水THF(100ml)及苄基2-溴基乙醚(10.09g)，以及前述程序(实施例108，步骤1)，于硅胶柱层析(EtOAc∶己烷∶15∶85)后，获得所需的中间体苄基醚(6.83g)。
步骤2：
使用前述苄基醚(5.00g)、10％Pd/C(1.00g)、甲醇(20ml)及前述程序(实施例108；步骤2)，经硅胶柱层析(EtOAc∶己烷；1∶10)之后，获得内酯(113B；0.87g)，接着获得醇(113A；2.01g)。
步骤3：
Figure BDA00002167589501112
步骤3：
将硫代酚钠(Sodium thiophenoxide)(0.68g)添加至内酯(113B；0.84g)在乙醇(15ml)中的溶液中，并将所形成的混合物于氮气氛下加热至回流过夜。冷却后，水溶液处理，并使粗制反应产物经硅胶柱层析纯化(EtOAc-己烷；30∶70)，获得羧酸(113C；0.32g)，为黄色固体。
使用前文关于108C转化成108中所述的化学，以类似方式使113C转化成113。MS，MH+，668.3。
化合物116的制备：
Figure BDA00002167589501121
步骤1：
使用醇(113A；1.00g)、甲磺酰氯(1.12g)、三乙胺(0.82g)、二氯甲烷(10ml)及前述程序(108A至108B)，获得所需的中间体甲烷磺酸酯，并使用于下一步骤而无需纯化。
步骤2：
于室温下，使用前述甲烷磺酸酯、甲烷硫醇钠(0.75g)、乙醇(10ml)及前述程序(108B至108C)，经硅胶柱层析(EtOAc-己烷；1∶10)后，获得所需的硫化物(116A；0.78g)。使用前述程序(108C至108D)和(108D至108)，使中间体116A转变成116。MS；MH+，606.1。
化合物198的制备
Figure BDA00002167589501122
步骤1和2″
Figure BDA00002167589501131
步骤1和2：
步骤1：
使3-苄氧基苯胺(5.00g；Aldrich)溶于浓HCl混合物(10ml)中，并添加冰(10.00g)。添加水(10ml)中的亚硝酸钠(1.85g)，同时在冰浴中冷却。于添加完成时，添加O-乙基黄酸钾，并在此温度下搅拌，直到停止氮气释出停止，然后于40-45℃下加热1.5小时。冷却后，水溶液处理，并经硅胶柱纯化层析(己烷中的2-5％EtOAc)，得到中间体黄酸盐(3.60g)。
步骤2：
将氢化锂铝(6.4ml，THF中的1M溶液)逐滴添加至前述黄酸盐(1.49g)在THF(10ml)中的搅拌溶液中，并于室温下搅拌0.5小时。以过量丙酮使反应猝灭，并于EtOAc与1M HCl水溶液之间分配。分离有机相，干燥，并浓缩。使粗制反应产物经硅胶柱层析纯化(己烷中的1-2％EtOAc)，获得苯硫酚(198A；0.84g)，白色固体。
步骤3：
将硫醇(198B；0.72g)添加至NaH(0.08g，矿油中的60％分散液)在无水DMF中的悬浮液中，同时于氮气氛下，在冰浴中冷却。将所形成的混合物搅拌1小时，并添加甲磺酸酯(108B；0.417g)，且使反应物温热至室温过夜。水溶液处理，并使粗制反应产物经硅胶柱层析纯化(己烷中的3％EtOAc)，获得硫化物(198C；0.313g)。
步骤4-6：
Figure BDA00002167589501141
使用前一步骤中所产生的硫化物(198C)，使用(108C至108D)与(185A至185D)中提出的程序，制备异氰酸酯(198D)。将异氰酸酯(198D)无需纯化而用于后续程序。
步骤7：
Figure BDA00002167589501142
将最少量二氯甲烷(约1ml)中的异氰酸酯(198D；0.139g)，添加至盐酸盐(108E；0.080g)与三乙胺(0.126ml)的混合物中，并将所形成的混合物于室温下搅拌4小时。使反应混合物于EtOAc与10％HCl水溶液之间分配。分离有机相，以饱和碳酸氢钠水溶液、水洗涤，干燥，并浓缩。将粗制反应产物(198E)以粗制物使用于下一步骤中。氧化作用
步骤8：
Figure BDA00002167589501143
使得自前一步骤的粗产物(198E)溶于DMSO(3ml)与甲苯(3ml)中，并添加EDCI(0.346g)，接着加入二氯乙酸(0.074ml)，且将所形成的混合物于室温下搅拌4小时。使反应物于EtOAc与5％亚硫酸钠水溶液之间分配。分离有机相，以饱和碳酸氢钠水溶液，水洗涤，干燥，并浓缩。使粗制反应产物经硅胶柱层析纯化，使用丙酮∶己烷(30∶70)作为洗脱液，得到酮基-酰胺(198；MH+＝792.2；55mg)。
从苄基醚198制备酚199：
Figure BDA00002167589501151
将10％Pd-C(25mg)和甲酸(0.125ml)先后加入到苄基醚(198；50mg)在乙醇(4ml)中的溶液中，并使所形成的黑色悬浮液回流1小时。冷却后，经过硅藻土垫过滤反应物，并以甲醇洗涤固体。使合并的滤液于减压下浓缩，得到所需的酚(199；MH+＝702.2；23mg)。与
式210化合物的替代制备：
Figure BDA00002167589501152
步骤1：
Figure BDA00002167589501153
将二甲基甲酰胺(20ml；无水；Aldrich)添加至氢化钠(0.56g；Aldrich)中，并将叔-丁基硫醇添加至此悬浮液中，同时于氮气氛下，在冰浴中冷却。一旦添加完成后，即添加甲烷磺酸酯(108B；按上述由2.00g醇制备；108A)，并将所形成的混合物于室温下搅拌过夜。使反应物于EtOAc与水之间分配，并分离有机相，干燥(MgSO4)。经硅胶柱层析，使用EtOAc-己烷(2∶98)，提供甲酯-硫化物(210A；1.75g)。
将EtOAc添加至水相中，并添加10％HCl水溶液，直到水层pH＝l为止。将有机层分离，以水洗涤，干燥，及在减压下浓缩，获得硫化物-羧酸(210B；0.747g)，为白色固体。
步骤2：
Figure BDA00002167589501161
于甲醇(75ml)中的硫化物(210B；2.287g)中添加Oxone(18.00g；Aldrich)溶液，并将所形成的白色悬浮液于室温下搅拌过夜。于减压下除去挥发性物质，并使白色固体在EtOAc与水之间分配。分离有机相，干燥，并浓缩，提供砜(210C；2.52g；含有一些溶剂)。
步骤3：
Figure BDA00002167589501162
将三乙胺(0.173ml)和DPPA(0.268ml)先后加入到羧酸(210E；0.325g)在甲苯(3ml)中的溶液中，并将所形成的混合物加热至110℃(油浴)1小时。冷却后，使反应混合物在EtOAc与饱和碳酸氢钠水溶液之间分配。分离有机相，干燥，并浓缩。使残留物溶于二氯甲烷(1ml)中，并添加至盐酸盐(185F；0.300g)与三乙胺(0.044ml)在二氯甲烷(3ml)中的混合物中，且将所形成的反应混合物于室温下搅拌过夜。使反应物于EtOAc与10％HCl水溶液之间分配。分离有机相，以饱和碳酸氢钠水溶液，水洗涤，干燥，并浓缩，得到粗产物，其无需纯化而用于下一步骤。
步骤4：
Figure BDA00002167589501171
使得自前一步骤的残留物(210D)溶于二氯甲烷(5ml)中，并添加Dess-Martin Periodinane(0.527g)，且将反应混合物在室温下搅拌3小时。使反应物于EtOAc与5％亚硫酸钠水溶液之间分配。分离有机相，以饱和碳酸氢钠水溶液、水洗涤，干燥，并于减压下除去挥发性物质。使残留物经硅胶柱层析纯化，使用EtOAc-己烷(70∶30)作为洗脱液，得到所需的酮基-酰胺(210；0.310g)。
式284化合物的制备：
Figure BDA00002167589501172
步骤1和2：
Figure BDA00002167589501173
步骤1：
使用甲苯(10ml)中的羧酸(210C；2.52g)、DPPA(2.07ml)、三乙胺(1.34ml)，以及上文提出的程序，形成粗制异氰酸酯。
步骤2：
使中间体异氰酸酯溶于二氯甲烷(2ml)中，并添加至盐酸盐284A(采用关于20.06向20.07的转化中所述，由20.04制备；1.66g)与三乙胺(3.4ml)的混合物中，且将混合物在室温下搅拌过夜。水溶液处理，并使残留物于硅胶上纯化，使用EtOAc-己烷(3∶97)，获得所需的脲(284B)。
步骤3：
Figure BDA00002167589501181
使甲酯(284B)溶于二氧六环(90ml)与水(30ml)的混合物中，并添加氢氧化锂：单水合物(0.402g；2当量)，且将反应物在室温下搅拌3小时。使反应混合物于EtOAc与10％HCl水溶液之间分配。分离有机相，干燥，并浓缩，得到羧酸(284C；2.65g)。试剂
步骤4：
Figure BDA00002167589501182
将BOP试剂(2.54g)和三乙胺(2.4ml)先后加入到羧酸(284C；2.65g)及盐酸盐(12.03；0.933g)在二氯甲烷(20ml)中的溶液中，并于室温下搅拌过夜。使反应物于EtOAc与10％HCl水溶液之间分配。分离有机相，以饱和碳酸氢钠水溶液、水洗涤，干燥，并浓缩。使残留物经硅胶柱层析纯化，使用二氯甲烷中的2-10％MeOH作为洗脱液，得到所需的酰胺(284D；2.92g)。
步骤5：
Figure BDA00002167589501191
向羧酰胺(284D；2.92g)在甲醇(30ml)中的溶液中加入DMF-DMA(1.12ml)，并将所形成的混合物于室温下搅拌3小时，然后回流1.5小时，直到T.L.C.显示无起始物质留置。冷却后，使反应物在乙醚与1NHCl水溶液之间分配。分离有机相，干燥，并浓缩。使残留物经硅胶柱层析，获得甲酯(284E)，将其按下文步骤6所示处理。
步骤6：
Figure BDA00002167589501192
使甲酯(284E)溶于二氧六环(30ml)与水(10ml)的混合物中，并添加氢氧化锂：单水合物(0.354g)，且将所形成的混合物搅拌3小时。使反应物于EtOAc与10％HCl水溶液之间分配。分离有机相，干燥，并浓缩，提供羧酸(284F；2.80g)。
步骤7和8：
Figure BDA00002167589501193
步骤7：
将烯丙基胺(0.045ml)、BOP试剂(0.266g)及三乙胺(0.25ml)添加至羟基-酸(284F；0.348g)在二氯甲烷(5ml)中的溶液混合物中，并将所形成的混合物于室温下搅拌过夜。使反应物于EtOAc与10％HCl水溶液之间分配。分离有机相，以饱和碳酸氢钠水溶液、水洗涤，干燥，并浓缩，提供残留物，将其使用于下文步骤8而无需纯化。
步骤8：
使残留物溶于二氯甲烷(5ml)中，并添加Dess-Martin Periodinane(0.424g)，且将反应混合物在室温下搅拌3小时。使反应物于EtOAc与5％亚硫酸钠水溶液之间分配。分离有机相，以饱和碳酸氢钠水溶液、水洗涤，干燥，并浓缩。粗制反应产物经硅胶柱层析纯化，得到所需的酮基-酰胺(284；0.296g)。MH+，732.2.
实施例331的制备.式331化合物的式331D和331E中间体的制备：
Figure BDA00002167589501201
步骤1.式331B与331C化合物的制备：
Figure BDA00002167589501202
使N-苄基-4-甲基丁亚胺(butanimine)(按以下所述制备：Synthesis，1985，679)与四氢噻吩1，1-二氧化物以实施例336中所述的方式反应，但在-78℃下，得到化合物331A，使其以实施例336中所述的方式氢解，但在1大气压力下进行。使粗产物于硅胶上层析，以EtOAc至1∶1丙酮-EtOAc的梯度液洗脱，获得第一种外消旋非对映异构物：H1-NMR(CDCl3)δ3.2(m，1H)，3.1-2.9(m，3H)，2.3-2.1(m，2H)，2.1-1.9(m，1H)，1.9-1.7(m，2H)，1.02(d，3H)，0.85(d，3H)。
进一步洗脱提供另一种外消旋非对映异构物：H1-NMR(CDCl3)δ3.2(m，1H)，3.2-2.9(m，4H)，2.3-2.1(m，3H)，2.1-2.0(m，1H)，1.78(六重峰，1H)，0.96(m，6H).
步骤2.式331D和331E化合物的制备
Figure BDA00002167589501211
以实施例336中所述的方式，使化合物331B与331C分别与光气反应，得到两种非对映异构的异氰酸酯：
一种得自较高Rf胺：H1-NMR(CDCl3)δ3.79(dd，J1＝9.9Hz，J2＝3.0Hz，1H)，3.25(m，1H)，3.1-3.0(m，2H)，2.25(m，2H)，2.2-2.0(m，1H)，2.0-1.7(m，2H)，1.09(d，J＝6.9Hz，3H)，0.93(d，J＝6.9Hz，3H)。
另一种得自较低Rf胺：H1NMR(CDCl3)δ3.92(dd，J1＝6.6Hz，J2＝4.8Hz，1H)，3.3-2.9(m，3H)，2.4(m，1H)，2.3(m，1H)，2.2-2.0(m，3H)，1.03(t，Δv＝6.3，6H)。
实施例336的制备.式336化合物的制备
Figure BDA00002167589501212
图式336-1
Figure BDA00002167589501221
步骤1.式336A化合物的制备
Figure BDA00002167589501222
将20ml 2N LDA在己烷-THF中的溶液添加至60ml THF中，并使溶液冷却至-30℃。然后，于-30℃与-10℃之间，慢慢添加4.80g四氢噻吩1，1-二氧化物(Aldrich化学公司)，并于-10℃下再搅拌10分钟。于-10℃下，立即添加7.5g N-苄基环己基亚胺(按以下所述制成：Synthesis，1998，1609)。于环境温度下0.5小时后，以饱和NaHCO3水溶液使混合物猝灭，并用CH2Cl2萃取。使萃液以无水Mg2SO4干燥，过滤，并蒸发滤液。使残留物于硅胶上层析，以EtOAc-己烷(3∶7)洗脱，得到1.3克化合物336A：H1-NMR(CDCl3)：δ7.5-7.2(m，5H)，3.76(ABq，Δv＝230Hz，J＝12，2H)，3.41(m，1H)，3.13(m，1H)，2.94(m，1H)，2.4-1.3(m，14H)。
步骤2.式336B化合物的制备
Figure BDA00002167589501223
使1.3克化合物336A、30mlEtOH、1.2ml 4N HCl/二氧六环溶液及0.35g 10％Pd-C的溶液在3个大气压下氢化1.5小时。过滤混合物，并蒸发滤液。将残留物以2N NaOH处理，并用CH2Cl2萃取，使萃液干燥并蒸发，留下0.51g化合物336B，其于静置时固化：H1-NMR(CDCl3)δ3.2-2.9(m，3H)，2.4-1.8(m，6H)，1.7-1.2(m，8H)。
步骤3.式336C化合物的制备
Figure BDA00002167589501231
于0℃下，向0.75g光气在30ml甲苯中的溶液中慢慢添加0.5g化合物336B与0.80ml二异丙基乙胺在10mlCH2Cl2中的溶液。将混合物于室温下搅拌5小时，浓缩至15ml，过滤，然后以新鲜甲苯稀释至18ml，产生0.12M化合物336C溶液，将其用于后续反应。
步骤4.式336化合物的制备
Figure BDA00002167589501232
以制备实施例108中所述的方式，使化合物336C与化合物20.10反应，产生化合物336，为非对映异构物的混合物。H1-NMR(DMSO-d6)δ8.40(m)，8.33(m)，8.00(d)，7.75(s)，6.25(m)，6.10(s)，6.01(s)，4.18(m)，3.92(m)，3.83(m)，3.78(m)，3.13(m)，2.90(m)2.47(m)，2.1-0.8(m；MeA：1.01；MeB：0.82；But：0.91)，0.40(m)，0.19(m)。
实施例336C.化合物336C的替代合成
图式336-2
Figure BDA00002167589501241
步骤1.式336E化合物的制备
Figure BDA00002167589501242
以前述实施例中所述的方式，使2-氯代四氢噻吩(如下所述制成：Chem.Pharm.Bull.，1986，34(9)，3644)与α-锂环己烷羧酸(lithiocyclohexanecarboxylic acid)反应，得到硫化物酯化合物336D，39％产率。以前述实施例中所述的方式，以
Figure BDA00002167589501243
使化合物336D氧化，得到砜酯化合物336E：H1NMR(CDCl3)δ3.73(s，3H)3.3-3.0(m，2H)，3.0-2.9(m，1H)，2.6-2.4(m，1H)，2.4-1.3(m，13H)。
步骤2.式336C化合物的制备
于100℃下，以前述实施例中所述的方式，用水-二氧六环中的LiOH水解化合物336E，得到砜羧酸化合物336F：H1NMR (CDCl3)δ3.4-3.2(m，1H)，3.2-3.1(m，1H)，3.1-2.9(m，1H)，2.3-2.1(m，3H)，2.1-1.8(m，3H)，1.8-1.3(m，7H)。以前述实施例中所述的方式，使化合物336F与二苯基磷酰基叠氮化物反应，得到化合物336C，为无色固体：H1NMR(CDCl3)δ3.2(m，1H)，3.1-2.9(m，2H)，2.45(d，1H)，2.4-1.9(m，4H)，1.85-1.5(m，7H)，1.5-1.2(m，2H)。
化合物349的合成：
Figure BDA00002167589501251
在-78℃(浴液温度)下，向乙酯(349A；10g；0.052mol)在乙醚(50ml)中的溶液中添加KHMDS(0.5M，在甲苯中；156.087ml；1.5当量)。将所形成的溶液搅拌30分钟，然后添加苄基氯甲基醚(11.89ml；密度1.13；1.65当量)。将反应混合物于-78℃至室温下搅拌24小时。通过加入饱和NH4Cl水溶液使反应停止。接着，将其以乙酸乙酯稀释，并将合并的有机相用盐水洗涤，以Na2SO4干燥，及在真空中蒸发至干燥，提供淡褐色油(24.2g)。使其在硅胶上层析(300g)。使管柱以正-己烷中的1％-4％乙酸乙酯洗脱，在一些流分中提供纯349B(6.54g)。
Figure BDA00002167589501252
将苄基醚(239B；2.8316g；0.0091mol)在CHCl3(49.5ml)中的溶液以甲烷磺酸(22.65ml)处理，并将反应混合物于室温下搅拌～70分钟。将冰添加至反应混合物中，并将其以乙酸乙酯稀释。将有机相以饱和NaHCO3洗涤，以Na2SO4干燥，及在真空中蒸发至干燥，提供淡黄色油(2.86g)。使其在SiO2(65g)上层析。用正-己烷中的15％-25％乙酸乙酯洗柱，在一些流分中提供纯349C(1.5913g)。
Figure BDA00002167589501261
使醇(349C；1.14g；0.0051mol)在二氯甲烷(6.4ml)中的搅拌溶液在冰浴中冷却，并以Et3N(0.7857ml；密度0.726；1.1当量)与甲磺酰氯(0.4168ml；密度1.48；1.05当量)处理。～2小时后，将反应混合物以二氯甲烷稀释，并用6N HCl和饱和NaHCO3先后洗涤。使有机相以Na2SO4干燥，并在真空中蒸发至干燥，提供甲磺酸酯349D(1.5447g)，为淡黄色油。
Figure BDA00002167589501262
用叔-丁基硫醇(1.16ml；密度0.8；2当量)处理NaH(0.4114g；在矿油中的60％分散液；2当量)在无水DMF中的经搅拌悬浮液，并以冰浴冷却。将反应混合物搅拌30分钟，然后添加无水DMF(8+2ml)中的甲磺酸盐(349D；1.5447g；1当量)。移除冰浴，并将反应混合物于室温下搅拌过夜。以6N HCl使反应混合物酸化，并以乙酸乙酯萃取。使乙酸乙酯萃液以Na2SO4干燥，并于真空中蒸发至干燥，提供粗制349D(2.87g)，使其在SiO2(60g)上层析。用3％乙酸乙酯洗柱，在一些流分中提供纯349E(1.38g)，为无色油。
用KOH颗粒(2.63g；10当量)处理乙酯(349E；1.38g；0.00468mol)在乙醇(16ml)和水(4.13ml)中的溶液。使所形成的溶液回流7小时，然后使其冷却至室温过夜。于真空中蒸发乙醇，并使残留物在CH2Cl2/水之间分配，以6N HCl酸化至pH 1。分离有机相，并将水相以CH2Cl2萃取三次。使合并的有机相以Na2SO4干燥，并在真空中蒸发至干燥，提供349F(1.19g)，为灰白色固体，熔点93-95℃。
Figure BDA00002167589501272
在0℃下(浴液温度)下，将已溶于水(31ml)中的Oxone(8.24g；3当量)添加至硫化物(349F；1.19g；1当量)在甲醇(31ml)中的搅拌溶液中。将反应物于0℃至室温下搅拌过周末。于真空中蒸发溶剂，并使残留物在CH2Cl2/水之间分配。分离有机层，并将水层以CH2Cl2萃取两次。使合并的有机相以Na2SO4干燥，并于真空中蒸发至干燥，提供349G(1.29g)，为结晶性固体，熔点212℃。
Figure BDA00002167589501273
向酯(1.03；4.56g；0.0119mol)在二氧六环(18.23ml)中的已冷却(冰浴)溶液中加入1.0N LiOH(18.23ml)，并搅拌。将反应混合物搅拌2小时。TLC显示一些起始物质仍然残留，因此添加2+1ml 1.0N LiOH，并搅拌过夜。经TLC监测反应完成。添加6N HCl，以使反应混合物酸化至pH 1，并添加乙酸乙酯(150ml)。振荡后，分离乙酸乙酯相，并用乙酸乙酯萃取水相。将合并的乙酸乙酯相用盐水洗涤一次，干燥(Na2SO4)，并在真空中蒸发至干燥，提供1.17，为无定形固体(4.7805g；包含溶剂)。
Figure BDA00002167589501281
向酸1.17(0.7079g；0.00192mol)与胺盐(12.04；0.5231g；1.16当量)在CH2Cl2(10ml)中的-20℃溶液中加入HATU(0.77g；1.05当量)，接着加入二异丙基乙胺(0.8913g；1.2ml；3.59当量)。将反应混合物于-20℃下搅拌～16小时。然后，将其以EtOAc(～150ml)稀释，并以饱和NaHCO3、10％柠檬酸连续洗涤，且以Na2SO4干燥。于真空中蒸发溶剂，提供无定形固体，使其在SiO2(42g)上层析。以正-己烷中的50％-60％EtOAc洗柱，在一些流分中提供纯349H(0.7835g)。
Figure BDA00002167589501282
将羟基酰胺349H(0.7835g；0.00142mol)在无水二氯甲烷(32ml)中的溶液，以Dess-Martin试剂(1.5134g；2.5当量)处理，并搅拌及冷却(冰浴)。移除冰浴，并将反应混合物于室温下搅拌2.5小时。添加饱和Na2S2O3(32ml)，以分解过量氧化剂，并持续搅拌，直到混浊溶液转变成透明两相系统为止。然后，将反应混合物以CH2Cl2(～100ml)稀释，分离有机相，并以饱和NaHCO3、水洗涤一次，接着干燥。于真空中蒸干，提供349I(0.7466g)，为无定形固体。
将氨基甲酸叔-丁酯349I(0.7466g)用4M HCl/二氧六环(20ml)处理，并在加盖塞子的烧瓶中留置45分钟。于真空中蒸发大部份二氧六环，并使残留物用正-己烷蒸发两次；将其余残留物以乙醚研磨，留下349K(0.6341g)，为自由流动性固体。
Figure BDA00002167589501292
向酸349G(0.1g；0.0003351mol)的甲苯溶液(7.5ml)中添加Et3N(0.0467ml；46.7μl；1当量)，接着加入二苯基磷酰基叠氮化物(0.072；72μl；1当量)。使反应混合物回流1小时。冷却后，将其用乙酸乙酯(～50ml)处理，将有机相以饱和NaHCO3洗涤，及在真空中浓缩，提供349J(0.1g)。
Figure BDA00002167589501293
向胺盐酸盐349K(0.1g；0.000207mol)在二氯甲烷(5ml)中的搅拌悬浮液中添加二异丙基乙胺(0.135g；5当量)。1分钟后，添加异氰酸酯349J(0.1g；0.0003385mol)。将反应混合物于室温下搅拌2小时，然后将其用EtOAc稀释，并用1N HCl、饱和NaHCO3洗涤，以Na2SO4干燥，及最后在真空中蒸发至干燥，提供无定形固体。使其经硅胶板制备型TLC，使用正-己烷中的40％丙酮作为洗脱液。将uv正吸收带用二氯甲烷中的60％丙酮萃取，提供349(0.122g)，为无定形固体。
化合物350的合成：
Figure BDA00002167589501301
向胺盐酸盐20.10(0.0966g；0.000223mol)在二氯甲烷(5ml)中的搅拌悬浮液中，添加二异丙基乙胺(0.144g；5当量)。1分钟后，添加异氰酸酯349H(0.1g；0.0003385mol)。将反应混合物于室温下搅拌2小时。然后将其以EtOAc(～100ml)稀释，接着用1N HCl、饱和NaHCO3洗涤，以Na2SO4干燥，及最后在真空中蒸发至干燥，提供无定形白色固体(0.1731g)。使其在硅胶上经预备型TLC，使用正-己烷中的40％丙酮作为洗脱液。将uv正吸收带用二氯甲烷中的60％丙酮萃取，提供350(0.0671g)，为无定形固体。
实施例145式145化合物的制备：
Figure BDA00002167589501311
步骤1
Figure BDA00002167589501312
将1-丙醇以金属钠(361mg，15.7mmol)处理，并于室温下搅拌1小时。于钠完全溶解后，添加苄基硫醇(2.74ml，23.2mmol)，并将反应混合物在室温下搅拌0.5小时。添加(S)-4-异丙基-
Figure BDA00002167589501313
唑烷酮(Aldrich，1g，7.74mmol)，并将反应混合物于回流下加热16小时。使反应混合物于真空中浓缩，并将粗制混合物以冷水稀释，且以乙醚(3x150ml)萃取。使合并的有机层干燥，过滤，在真空中浓缩，得到胺145b。用4M HCl使其转化成其盐酸盐，并在高真空中干燥，得到145b.HCl(1.9g)。
步骤2
Figure BDA00002167589501314
于0℃下，用光气(15％，在甲苯中，10ml)处理，145b.HCl(1g，4.07mmol)在CH2Cl2(50ml)和饱和NaHCO3(70ml)中的溶液，并在0℃下搅拌3小时。将反应混合物倒入分液漏斗中，并分离有机层。将有机层用冷NaHCO3、盐水洗涤，并干燥(MgSO4)。使其浓缩，并原样用于下一步骤。
使胺盐酸盐(1.04；865mg，2.7mmol)溶于CH2Cl2/DMF 1∶1中，并冷却至0℃。将混合物用(C2H5)3N(682mg，6.75mmol)和按上述制备的异氰酸酯(950mg，4.07mmol)处理，并于室温下搅拌过夜。蒸发溶剂，并使残留物溶于EtOAc中。将有机层以HCl水溶液、NaHCO3水溶液、盐水洗涤。使反应混合物干燥，过滤，及在真空中浓缩。残留物经层析纯化(SiO2，EtOAc/己烷1∶3)，得到145c(880mg)。
步骤3
Figure BDA00002167589501321
将145c(500mg，0.9mmol)在1，2二氯乙烷(10ml)中的溶液用MCPBA(70％，500mg)处理，并于0℃下，以乙醚及Na2S2O3水溶液稀释。分离有机层，并以饱和NaHCO3水溶液及盐水充分洗涤。使反应混合物干燥(MgSO4)，过滤，在真空中浓缩，经层析纯化(SiO2，EtOAc/己烷2∶3)，得到145d(530mg)。MS(ESI)550[(M+1)+，100]，381(95)，353(20)。
步骤4
Figure BDA00002167589501331
145d的转化成145与284B转化成284D，及108D转化成108中所述的程序相同。MS(ESI)690[(M+1)+，100)，381(30)。
式347中间体的制备：
Figure BDA00002167589501332
步骤1：
Figure BDA00002167589501333
将苯甲醛缩二甲醇(10.0ml，67.2mmol)添加至CBZ-D-丙氨酸(15.0g，67.2mmol)在Et2O(180ml)中的冷却溶液中，接着加入BF3.Et2O(50.6ml，403.2mmol)，历经15分钟。将反应混合物于-20℃下搅拌4天，并通过加入冰冷饱和NaHCO3(350.0ml)使反应猝灭。将有机层以Et2O(500ml)稀释，分离，以NaHCO3(5％水溶液)、盐水洗涤，经MgSO4干燥，过滤，并浓缩。使用Et2O/己烷使粗制物再结晶，得到347A(13.6g，65％)。
步骤2
Figure BDA00002167589501341
将THF(48.0ml)添加至经火焰干燥的烧瓶中，并冷却至-35℃。将KHDMS(PhMe中的0.5M溶液，42.0ml，21mmol)加入其中，接着逐滴添加347A(6.22g，20.0mol)和3-溴代-2-丙烯(2.02ml，20mmol)的混合物，保持内部温度在-30与-35℃之间。将反应混合物于-35℃下搅拌2小时，然后使其温热2.5小时，通过加入冰冷的饱和NaHCO3(400.0ml)使反应猝灭。将有机层以Et2O(600ml)稀释，分离，用盐水洗涤，经MgSO4干燥，过滤，并浓缩。使粗制物于SiO2上使用CH2Cl2纯化，得到347B(14.2g，90％)。
步骤3
Figure BDA00002167589501342
向347B(10.7g，29.4mmol)在MeOH(200ml)中的溶液中加入LiOH(4N，15ml)，并在室温下搅拌30分钟，以H2O(500ml)稀释，用EtOAc(4x400ml)萃取，用盐水洗涤，经MgSO4干燥，过滤，并浓缩。使粗制物于SiO2上使用CH2Cl2纯化，得到347C(8.65g，88％)。
步骤4
Figure BDA00002167589501351
向347C(8.56g，29.4mmol)在EtOH(100ml)中的冰冷溶液中加入LiBH4(960mg，44.1mmol)，并在室温下搅拌12小时，于5℃下，将另一份LiBH4(960mg)加入其中，及在室温下搅拌4小时，以H2O(100ml)与MeOH(100ml)稀释，蒸发至干燥，溶于H2O(100ml)中，用EtOAc(500ml)萃取，用盐水洗涤，经MgSO4干燥，过滤，并浓缩。使粗制物于SiO2上纯化，使用CH2Cl2中的EtOAc(1-8％)，得到347D(4.7g，60％)。
步骤5
Figure BDA00002167589501352
将t-BuOK(1M，在THF中，3.85ml)添加至347D(4.06g，15.4mmol)在THF(20ml)中的冷却(-5℃)溶液中，并于该温度下搅拌2小时。使反应混合物浓缩，再溶解于EtOAc(250ml)和NaOH(2N，50ml)中。将有机层以EtOAc(600ml)稀释，分离，用盐水洗涤，经MgSO4干燥，过滤，并浓缩。使粗制物于SiO2上纯化，使用EtOAc中的10％CH2Cl2，得到347E(1.4g)。
步骤6
使347E(1.37g，8.82mmol)溶于EtOH(25ml)中，并将Pd-C(10重量％，275.0mg)加入其中。将反应混合物于氢大气下搅拌12小时，过滤，浓缩，及在SiO2上纯化，使用EtOAc中的10％CH2Cl2，得到347F(1.04g，75％)。
步骤7
Figure BDA00002167589501362
使347F(2.58g，16.4mmol)溶于PrOH(40ml)中，并将NaSBu-t(10.2g，82mmol)加入其中。使反应混合物回流136小时，冷却，蒸发，及再溶解于EtOAc中，以H2O洗涤，有机层经MgSO4干燥，过滤，并浓缩。使粗制物于SiO2上纯化，使用CH2Cl2中的30％丙酮，得到347G(0.6g，19％)和347F(1.1g)。
步骤8
Figure BDA00002167589501363
将饱和NaHCO3添加至347G(0.6g，3.0mmol)在CH2Cl2(30ml)中的冰冷溶液内。将反应混合物激烈搅拌10分钟，并将COCl2(PhMe中的1.85M溶液，4.51ml)加入其中，及在室温下持续搅拌1小时。有机层经MgSO4干燥，过滤，并浓缩至一半体积，得到347H，为CH2Cl2中的溶液。
步骤9
Figure BDA00002167589501371
向347H(685mg，3.0mmol)在DMF(10.0ml)中的冷却溶液(0℃)中添加20.07(1.05g，3.34mmol)，接着加入DIPEA(1.45ml，8.35mmol)。将反应混合物于室温下搅拌1.2小时，以乙酸乙酯稀释，以3％柠檬酸、盐水洗涤，经MgSO4干燥，过滤，浓缩，及在SiO2上纯化，使用丙酮/CH2Cl2(1∶9)，得到347I(1.57g)。
步骤10
Figure BDA00002167589501372
向347I(1.5g，3.34mmol)在CH2Cl2(100.0ml)中的冷却溶液(0℃)中添加m-CPBA(2.51g，10.02mmol)。使反应混合物温热至室温，历经12小时，用CH2Cl2(300.0ml)稀释，用盐水洗涤，经MgSO4干燥，过滤，浓缩，及在SiO2上纯化，使用丙酮/CH2Cl2(1∶9)，得到347J(1.57g)。
步骤11
Figure BDA00002167589501381
347J的转化成347类似于284B转化成284D与108D转化成108中所述的程序。MS(LCMS)计算值681.94，实测值(MH+)683.2。
表3列出一些本发明化合物，及其通过在稍后所述的检测测定的HCV丝氨酸蛋白酶抑制活性范围。活性以Ki*范围(毫微摩尔浓度)表示，其为：A＝＜75nM；B＝75-250nM；及c＝＞250nM。
表3
硫化物化合物
Figure BDA00002167589501401
Figure BDA00002167589501411
Figure BDA00002167589501421
Figure BDA00002167589501431
Figure BDA00002167589501441
Figure BDA00002167589501451
Figure BDA00002167589501461
Figure BDA00002167589501471
亚砜化合物
Figure BDA00002167589501491
Figure BDA00002167589501501
Figure BDA00002167589501511
砜化合物
Figure BDA00002167589501521
Figure BDA00002167589501531
Figure BDA00002167589501541
Figure BDA00002167589501561
Figure BDA00002167589501571
Figure BDA00002167589501581
Figure BDA00002167589501591
Figure BDA00002167589501601
Figure BDA00002167589501611
Figure BDA00002167589501631
Figure BDA00002167589501641
Figure BDA00002167589501651
Figure BDA00002167589501661
Figure BDA00002167589501671
Figure BDA00002167589501701
Figure BDA00002167589501711
Figure BDA00002167589501721
Figure BDA00002167589501731
Figure BDA00002167589501741
Figure BDA00002167589501751
Figure BDA00002167589501761
Figure BDA00002167589501771
Figure BDA00002167589501781
Figure BDA00002167589501791
Figure BDA00002167589501801
Figure BDA00002167589501811
Figure BDA00002167589501821
Figure BDA00002167589501861
Figure BDA00002167589501871
Figure BDA00002167589501901
Figure BDA00002167589501921
Figure BDA00002167589501931
Figure BDA00002167589501941
Figure BDA00002167589501961
Figure BDA00002167589501971
Figure BDA00002167589501981
Figure BDA00002167589501991
Figure BDA00002167589502011
Figure BDA00002167589502031
Figure BDA00002167589502041
Figure BDA00002167589502071
Figure BDA00002167589502081
Figure BDA00002167589502091
Figure BDA00002167589502101
Figure BDA00002167589502111
Figure BDA00002167589502131
Figure BDA00002167589502161
Figure BDA00002167589502171
Figure BDA00002167589502191
Figure BDA00002167589502201
Figure BDA00002167589502211
Figure BDA00002167589502231
Figure BDA00002167589502241
Figure BDA00002167589502271
Figure BDA00002167589502281
Figure BDA00002167589502311
Figure BDA00002167589502321
表3A列出根据本发明制备的其它化合物。下述实验程序描述按照实验制备表3A中所示的化合物。
实施例792
Figure BDA00002167589502322
步骤1
Figure BDA00002167589502331
向五亚甲基硫化物(10.09g)在无水苯(120ml)中的溶液中分次添加(经40分钟)N-氯代琥珀酰亚胺(13.02g)，同时保持内部温度低于9℃。将所形成的反应混合物在低于15℃下搅拌45分钟。过滤沉淀物，并使上清液于减压下浓缩。将残留物以冷己烷稀释，过滤，及在减压下浓缩上清液，提供氯化物，为黄色油(11.88g)。
在-78℃及氮气氛下，向无水THF(15ml)中的二异丙基胺(12.5ml)中添加n-BuLi(53ml，己烷中的1.6M溶液)，并使所形成的混合物在此温度下保持15分钟，然后添加甲基环己烷羧酸(12.47ml)，且使反应物于-78℃下再保持40分钟。将无水THF中的氯化物(50ml)添加至反应混合物中，并将烧瓶从冷却浴中移出，使其慢慢温热至室温。以含有浓HCl水溶液(2.7ml)的5％KH2PO4水溶液(100ml)使反应猝灭。将有机物质萃取于Et2O/EtOAc中，干燥(MgSO4)，及在减压下浓缩，得到残留物，使其经硅胶柱层析纯化，使用己烷中的0-2％EtOAc作为洗脱液。获得双环化合物(792A；8.12g)，为黄色油。
步骤2
Figure BDA00002167589502332
使硫化物(792A；0.780g)在50％MeOH水溶液(8ml)中的溶液冷却至0℃，并添加至Oxone(5.97g)在50％MeOH水溶液(8ml)中的冷却(0℃)的悬浮液中，且使反应物温热至室温过夜，然后于二氯甲烷与水之间分配。将水层进一步用二氯甲烷萃取，并使合并的有机相干燥(MgSO4)，及在减压下浓缩。使残留物经硅胶柱层析纯化，使用己烷中的(25-35％)EtOAc，得到砜(792B；0.1598g)。使用硫化物(792A；8.12g)、Oxone(62.06g)、甲醇(30ml)、水(30ml)重复此反应，获得砜(792B；4.73g)。
使外消旋混合物(792B；0.4925g)进一步经手性HPLC纯化，使用制备型ChiralpakAS柱，使用己烷中的40％i-PrOH(45ml/分钟；于218nm下监测)，获得(792B-对映体A；0.247g；保留时间37分钟)，接着获得(792B-对映体B；0.249g；保留时间63分钟)。
步骤3和4：
Figure BDA00002167589502341
步骤3
向羧酸(792C；0.172g)及其盐酸盐(792D)在二氯甲烷(5ml)中的溶液中加入BOP试剂(0.246g)，接着加入三乙胺(0.232ml)，并将所形成的反应混合物在室温下搅拌过夜。使反应混合物于EtOAc与10％HCl水溶液之间分配。分离有机相，以饱和NaHCO3水溶液、水洗涤，干燥(MgSO4)，及在减压下除去挥发性物质，得到残留物，将其使用于步骤4而无需纯化。
步骤4
向得自步骤3的残留物中添加二氧六环中的4M HCl(10ml)，并使溶液在室温下静置2小时。于减压下除去挥发性物质，得到其盐酸盐(792E)，无需纯化而使用。
步骤5和6
Figure BDA00002167589502351
步骤5
向溶于无水DMF(1ml)中的甲酯(792B-对映体A；0.100g)溶液中加入乙烷硫醇钠(0.122g)，并使反应混合物在室温下搅拌约72小时。使反应物于EtOAc与10％HCl水溶液之间分配。分离有机相，以水洗涤(X4)，干燥(MgSO4)，及在减压下除去挥发性物质。
步骤6
使得自步骤5的残留物溶于无水甲苯(2ml)中，并添加DPPA(0.083ml)与Et3N(0.054ml)，且将反应物在氮气氛下加热至120℃1小时。冷却后，使反应物在EtOAc与饱和NaHCO3水溶液之间分配。分离有机相，干燥(MgSO4)，及在减压下除去挥发性物质，提供异氰酸酯(792F-对映体A)，无需纯化而使用。
步骤7和8
Figure BDA00002167589502352
步骤7
向二氯甲烷(3ml)中的所述盐酸盐(792E；0.050g)中加入三乙胺(0.100ml)，接着加入甲苯(1ml)中的异氰酸酯(792F；约0.040g)，并将反应混合物在室温下搅拌过夜。使反应混合物于EtOAc与10％HCl水溶液之间分配。分离有机相，以饱和碳酸氢钠水溶液，水洗涤，干燥(MgSO4)。于减压下除去挥发性物质，产生残留物，将其使用于步骤8而无需纯化。
步骤8
使得自步骤7的残留物溶于二氯甲烷(3ml)中，并添加Dess-Martinperidinane(0.100g)，且将反应物在室温下搅拌1小时。使反应物于EtOAc与10％硫代硫酸钠水溶液之间分配。分离有机相，以饱和碳酸氢钠水溶液洗涤，干燥(MgSO4)，及在减压下除去挥发性物质。使残留物经硅胶柱层析纯化，使用EtOAc-己烷(1∶1)作为洗脱液，获得酮基-酰胺(792；0.0436g)，为白色固体。
实施例795
Figure BDA00002167589502361
使用对制备792所述的程序，按步骤5与6中所述，使792B-对映体B转变成其相应的异氰酸酯。进一步利用792E与步骤7及8，以及衍生自792B-对映体B的异氰酸酯，制成795。
实施例621：
Figure BDA00002167589502362
步骤1
Figure BDA00002167589502371
向甲醇(20ml)中的紫苏酸甲酯(Methyl Perillate)(3g)中加入PtO2(0.3g)，并将所形成的悬浮液于氢大气(气囊)下放置过夜。经过硅藻土垫过滤此悬浮液，并以甲醇充分洗涤固体。使滤液于减压下浓缩，得到环己烷(621A；2.93g)，非对映异构体的混合物，为无色油。
步骤2与3
Figure BDA00002167589502372
步骤2
使羧酸酯(621A；3.75g)溶于无水乙醚(50ml)中，并在氮气氛下冷却至-78℃。逐滴添加KHM S(69ml，甲苯中的0.5M溶液)，并将所形成的混合物再搅拌15分钟，然后添加BOMCl(1.7当量)，并将反应烧瓶移离冷却容器，且使其慢慢温热至室温。添加水(约10ml)，并使混合物于EtOAc与10％HCl水溶液之间分配。分离有机相，以饱和碳酸氢钠水溶液，水洗涤，干燥(MgSO4)，及在减压下除去挥发性物质。使残留物经硅胶柱层析纯化，使用EtOAc∶己烷(1∶20)作为洗脱液，提供中间体苄基醚(3.01g)，为无色油。
步骤3
向得自步骤2的苄基醚(2g)中添加甲醇(10ml)，接着加入10％Pd-C(1g)，并将黑色悬浮液在氢大气(气囊)下放置过夜。经过硅藻土垫过滤反应物，并以甲醇充分洗涤固体。使滤液浓缩，提供所需的醇(621B；1.362g)，为无色油。
步骤4和5
Figure BDA00002167589502381
步骤4
使醇(621B；0.32g)溶于二氯甲烷(5ml)中，并添加甲磺酰氯(0.166ml)，接着加入三乙胺(0.37ml)，且将所形成的反应物搅拌0.5小时，然后于EtOAc与10％HCl水溶液之间分配。分离有机相，以饱和碳酸氢钠水溶液、水洗涤，干燥(MgSO4)，及在减压下除去挥发性物质，得到残留物，将其使用于步骤5而无需纯化。
步骤5
使得自步骤4的残留物溶于DMF(10ml)中，并添加叔-丁基硫醇钠，且将所形成的反应混合物在室温及氮气氛下搅拌过夜。将混合物于EtOAc与10％HCl水溶液之间分配。分离有机相，以水洗涤(X4)，干燥(MgSO4)，及在减压下除去挥发性物质。使残留物经硅胶柱层析纯化，使用EtOAc-己烷(3∶7)作为洗脱液，获得羧酸(621C；0.214g)。
步骤6
使用硫化物(621C；0.090g)、Oxone(0.61g)、甲醇(2ml)、水(2ml)，及实施例792(步骤2)中提出的程序，获得砜(621D；0.091g)，为白色固体。如上文(实施例792；步骤6至8)所述，使砜-羧酸转化成化合物621。
实施例749：
Figure BDA00002167589502391
步骤1
Figure BDA00002167589502392
程序：在50℃下，向CCl4中的异丁醛(59g，0.69mol)中逐滴添加二氯化二硫(27.6ml，0.345mol，0.5当量)。短暂停滞(10分钟)后，开始释出HCl气体。于HCl释出停止后，将混合物于55℃下搅拌2.5小时，其TLC显示反应几乎完成。然后冷却至室温。使粗制物浓缩至干燥。使用油状残留物二硫化物(749A)而无需纯化。
步骤2
在0℃下，向THF中的二硫化物(749A；7.5g，36mmol)中极其缓慢地添加LiAlH4(2.76g，72.7mmol，2当量)。将混合物于室温下搅拌3小时，然后逐滴添加饱和Na2SO4，直到出现白灰色固体为止。于室温下搅拌10分钟。将其以CH2Cl2稀释，经MgSO4干燥。过滤，并浓缩至干燥。经HPFC，用己烷中的2～20％EtOAc纯化，得到醇(749B；6.81g)。产率89％。
步骤3
Figure BDA00002167589502401
向醇(749B；10g，94.2mmol)中添加3，4-二氢-2H-吡喃(8.8ml，94.2mmol，1当量)与ZrO2(2.0g，20％w/w)。将混合物于80℃下搅拌2小时。将反应物以CH2Cl2稀释，并过滤。使滤液浓缩至干燥，并经HPFC，用己烷中的2～10％EtOAc纯化，获得14.3g产物(749C)。产率80％。
步骤4
Figure BDA00002167589502402
在-20℃下，向CH2Cl2中的醇(108A；3.0g，17.4mmol，1当量)中添加吡啶(2.4ml，29.6mmol，1.7当量)和三氟甲磺酸酐(3.8ml，22.6mmol，1.3当量)。将反应物于-20～10℃下搅拌2小时，其MS与TLC显示反应完成。将其用EtOAc稀释，以饱和NH4Cl及盐水洗涤。以MgSO4干燥。浓缩至干燥，得到磺酸酯(749D；5.21g)。产率98％。
步骤5
在0℃下，向THF中添加NaH(1.02g，25.6mmol，1.5当量)，然后加入(749C；4.88g，25.6mmol，1.5当量)。将混合物于0℃下搅拌10分钟，然后在0℃下添加749D(5.21g，17.1mmol)。将反应物于室温下搅拌1小时，其TLC显示无起始原料。将其以EtOAc和水稀释。用EtOAc萃取水层。将合并的有机层以H2O及盐水洗涤。有机层经MgSO4干燥。使其浓缩至干燥。使其经HPFC，用己烷中的2～8％EtOAc纯化，获得(749E；5.89g)产物。产率100％。
步骤6
Figure BDA00002167589502411
在0℃下，向CH2Cl2中的硫化物(749E；0.17g，0.49mmol)中添加NaHCO3(0.205g，2.45mmol，5当量)、MCPBA(0.304g，1.23mmol，2.5当量)。将反应物于室温下搅拌2小时，其TLC与MS显示反应完成。以CH2Cl2稀释。以饱和NaHCO3及盐水洗涤。以MgSO4干燥。使其经HPFC，用己烷中的5～20％EtOAc纯化，得到0.14g砜(749F)。产率76％。
可使甲酯(749F)转化成其相应的羧酸，接着转化为异氰酸酯(实施例108；步骤5与6)，并转化成749(实施例792；步骤7和8)。
实施例811：
步骤1
Figure BDA00002167589502421
向MeOH中的749F(70mg，0.18mmol)中加入pTsOH。将反应物于室温下搅拌过夜。MS显示反应几乎完成。使其浓缩至干燥。用EtOAc稀释。以饱和NaHCO3、盐水洗涤。经HPFC，用己烷中的10～40％EtOAc纯化，获得52mg醇(811A)，产率99％。
Figure BDA00002167589502422
在0℃下，向DMF中的NaH(88mg，2.21mmol，1.3当量)中添加醇(811A；0.5g，1.7mmol)和MeI(0.16ml，2.56mmol，1.5当量)。将反应物于室温下搅拌2小时，其TLC显示反应未完成。再次添加1当量MeI。将反应物于室温下搅拌过夜。将其用EtOAc稀释。以水、盐水洗涤。以MgSO4干燥。使其经HPFC，用己烷中的2～10～40％EtOAc纯化，得到醚(811B；0.283g)，产率54％。
可使甲酯(811B)转化成其相应的羧酸，接着为异氰酸酯(实施例108；步骤5与6)，并转化成749(实施例792；步骤7和8)。
实施例853：
Figure BDA00002167589502423
步骤1
Figure BDA00002167589502431
在-20℃下，向CH2Cl2中的醇(811A；56mg，0.19mmol，1当量)中添加吡啶(0.026ml，0.32mmol，1.7当量)与三氟甲磺酸酐(0.042ml，0.25mmol，1.3当量)。将反应物于-20～10℃下搅拌2小时，其MS与TLC显示反应完成。将其用EtOAc稀释，以饱和NH4Cl及盐水洗涤。以MgSO4干燥。使其浓缩至干燥，获得75.9mg粗产物(853A)。
步骤2
Figure BDA00002167589502432
在-15℃下，向醚中的853A(75.9mg，0.18mmol，1当量)中逐滴添加氟化四-正-丁基铵(0.23ml，0.23mmol，1.3当量)。将反应物于室温下搅拌过夜。将其以乙醚稀释，以饱和NH4Cl及盐水洗涤。以MgSO4干燥。使其以己烷中的2～10％EtOAc纯化，得到32mg氟化物(853B)。产率60％。
可使甲酯(853B)转化成其相应的羧酸，接着是异氰酸酯(实施例108；步骤5与6)，并转化成749(实施例792；步骤7和8)。
实施例455：
Figure BDA00002167589502441
步骤1和2
Figure BDA00002167589502442
步骤1和2(″一釜法″)
将Dess-Martin peridinane(21.35g)添加至醇(455A；10.00g)在二氯甲烷(100ml)中的溶液中，并搅拌45分钟，然后添加正磷(17.42g)，及搅拌过夜。使反应混合物于5％硫代硫酸钠水溶液与EtOAc之间分配，并分离有机相，以饱和碳酸氢钠水溶液，水洗涤，干燥(MgSO4)，及在减压下浓缩。将己烷添加至残留物中，并将所形成的悬浮液激烈搅拌2小时，及过滤。使滤液于减压下浓缩并经硅胶柱层析纯化，使用EtOAc-己烷(1∶99)作为洗脱液，得到所需的烯烃(455B；7.33g)，为黄色油。
步骤3
将乙酸(26ml)添加至甲硅烷基醚在THF(6ml)与水(14ml)中的溶液中，并将所形成的混合物于室温下搅拌过夜。使反应物于EtOAc与饱和碳酸氢钠水溶液之间分配。分离有机相，以水洗涤，干燥(MgSO4)，及在减压下除去挥发性物质。使残留物经硅胶柱层析纯化，使用EtOAc-己烷(1∶5)作为洗脱液，获得醇(455C；4.46g)，为无色油。
步骤4
Figure BDA00002167589502451
在-78℃及氮气氛下，将DAST(1.32ml)添加至醇(455C；2.00g)在二氯甲烷(50ml)中的搅拌溶液中。添加完成后，移除冷却浴，并将反应物在室温下搅拌2小时，然后于EtOAc与水之间分配。分离有机相，干燥(MgSO4)，及在减压下除去挥发性物质，接着经柱层析纯化。获得氟化物(455D；0.758g)。
步骤5
Figure BDA00002167589502452
使用n-PrOH(18ml)中的氨基甲酸苄酯(2.06g)、烯烃(455D；0.881g)、NaOH(0.537g)、新鲜制备的tBuOCl(1.54ml)、n-PrOH(16ml)中的(DHQ)2PHAL(0.176g)、锇酸钾(0.065g)，及Angewandte Int.Ed.(Engl)，1996，35，2813中所提出的程序，形成粗产物，使其经硅胶柱层析纯化，使用EtOAc-己烷(1∶5)作为洗脱液，得到所需的羟基酰胺(455E；0.892g)。
步骤6
将二氧六环中的4M HCl(25ml)(实施例Aldrich)添加至t-Bu酯(455E；0.69g)中，并将所形成的溶液于室温下静置2小时。于减压下除去挥发性物质，得到羧酸(455F；0.613g)，将其用于后续反应中而无需纯化。
步骤7
Figure BDA00002167589502461
将BOP试剂(0.254g)和三乙胺(0.240ml)先后加入到羧酸(455F；0.15g)与烯丙基胺(0.043ml)在二氯甲烷(5ml)中的混合物中，并将所形成的反应混合物于室温下搅拌过夜。使反应物于EtOAc与10％HCl水溶液之间分配。分离有机相，以饱和碳酸氢钠水溶液、水洗涤，干燥(MgSO4)，及在减压下除去挥发性物质。使残留物于硅胶上经硅胶柱层析纯化，使用EtOAc∶己烷(7∶3)作为洗脱液，获得酰胺(455g；0.151g)，为白色固体。
步骤8、9和10
Figure BDA00002167589502462
步骤8
向氨基甲酸苄酯(455G；0.037g)中添加TFA(2ml)，接着加入二甲硫(0.5ml)，并使所形成的溶液在室温下静置3小时，然后除去挥发性物质。将粗制反应产物使用于下文步骤9而无需纯化。
步骤9
向得自步骤8的残留物中加入二氯甲烷(3ml)、羧酸(455H；0.050g)、BOP试剂(0.047g)及最后加入三乙胺(0.044ml)，并将所形成的混合物在室温下搅拌过夜。使反应物于EtOAc与10％HCl水溶液之间分配。分离有机相，以饱和碳酸氢钠水溶液洗涤，干燥(MgSO4)，及在减压下除去挥发性物质，得到残留物，将其使用于下文步骤10而无需纯化。
步骤10
向得自步骤9的残留物中加入二氯甲烷(3ml)，接着加入Dess-Martin peridinane(0.075g)，并将此悬浮液在室温下搅拌2小时，然后于EtOAc与5％硫代硫酸钠水溶液之间分配。分离有机相，以饱和碳酸氢钠水溶液、水洗涤，干燥(MgSO4)，及在减压下除去挥发性物质。使粗制反应产物经硅胶柱层析纯化，得到所需的酮基-酰胺(455；0.0467g)，为白色固体。
实施例458：
Figure BDA00002167589502471
步骤1
Figure BDA00002167589502472
向醇(455C；1.66g)在二氯甲烷(20ml)中的溶液中加入Dess-Martinperidinane(4.22g)，并将所形成的混合物在室温下搅拌1小时，然后于EtOAc与5％硫代硫酸钠水溶液之间分配。分离有机相，以饱和碳酸氢钠水溶液、水洗涤，干燥(MgSO4)，及在减压下除去挥发性物质，得到醛(458A；0.775g)，经纯化使用。
步骤2
Figure BDA00002167589502481
将DAST(1.11ml)逐滴添加至醛(458A；0.755g)在二氯甲烷(50ml)中的搅拌溶液中，同时于氮气氛下，在冰浴中冷却。于添加完成后，将所形成的混合物在室温下搅拌2小时，然后于EtOAc与水之间分配。分离有机相，干燥(MgSO4)，及在减压下除去挥发性物质。使残留物经硅胶柱层析纯化，得到所需的二氟化物(458B；0.758g)。
使用458B与实施例455(步骤5至10)中所概述的程序，制成目标化合物458。
实施例423：
Figure BDA00002167589502482
步骤1
Figure BDA00002167589502483
向Garner醛(423A；10.7g)在二氯甲烷(110ml)中的溶液中加入(乙氧羰基亚乙基)三苯基正磷(28.75g)，将所形成的溶液在室温下搅拌过夜。于减压下除去挥发性物质，并使残留物纯化经硅胶柱层析，使用己烷中的4-10％EtOAc，得到所需的烯烃(423B；12.7g)，为无色油。
步骤2
Figure BDA00002167589502491
在-78℃及氮气氛下，向乙酯(423B；12.72g)在二氯甲烷(20ml)中的溶液中添加DIBAL-H(90ml，二氯甲烷中的1M溶液)。于添加完成时，使反应物于此温度下再保持30分钟，在室温下1小时，然后添加MeOH(3ml)与饱和酒石酸钾钠水溶液(3ml)及EtOAc。分离有机相，以1M HCl水溶液、盐水洗涤，干燥(MgSO4)。于减压下除去挥发性物质，并使残留物经硅胶柱层析纯化，使用己烷中的6-35％EtOAc，获得醇(9.06g)，为无色油。
步骤3
Figure BDA00002167589502492
向醇(423C；8.66g)在无水DMF(30ml)中的溶液中加入NaH(1.38g)，同时在冰浴中冷却，并使所形成的混合物保持在室温下45分钟，然后添加溴化苄(5ml)。在先后添加乙醚和10％HCl水溶液之前，使反应物温热至室温过夜。分离有机相，以饱和碳酸氢钠水溶液、盐水洗涤，干燥(Na2SO4)。于减压下除去挥发性物质，得到残留物，使其经硅胶柱层析纯化，使用己烷中的8％EtOAc，产生苄基醚(8.10g)，为黄色油。
使用类似上文对22.03转化为22.01所述的程序，使423D转变成423E。
Figure BDA00002167589502501
实施例397：
Figure BDA00002167589502502
步骤A
使苄氧基环己胺397a(10.6g，Lancaster)和N-甲基吗啉(8.5ml，d0.920)在200ml无水二氯甲烷中的溶液冷却至-78℃。于15分钟内，使用加液漏斗，添加100ml无水二氯甲烷中的Boc-酐。于添加完成后，移除冷却浴，并将混合物再搅拌30分钟。使反应混合物于300ml乙醚与100ml 1N HCl水溶液之间分配。使有机层经硫酸镁干燥，过滤，及在减压下浓缩，得到产物397b(15.7g；99％)，为白色固体，无需进一步纯化而使用。
步骤B
Figure BDA00002167589502511
将20％二氢氧化钯/碳(30mol％；10.8g)添加至苄基醚397b(15.7g)在300ml甲醇中的溶液内。使不均匀混合物于40psi下接受氢化作用，直到经TLC(乙酸乙酯/己烷；2∶8)不再检测出起始原料为止。经过硅藻土过滤混合物，并使滤液于减压下浓缩。产物397c未进行进一步纯化(11.1g；99％)。
步骤C
于0℃下，将吡啶(25.0ml)添加至环己醇397c在300ml无水二氯甲烷中的溶液内。于15分钟中加入100ml无水二氯甲烷中的甲磺酰氯(8.0ml)。反应混合物转变成均匀黄色溶液。将反应混合物于0℃下搅拌15分钟，然后移除冷却浴。将反应物于室温下搅拌约3小时。使混合物于乙醚(500ml)与1N HCl水溶液(100ml)之间分配。将有机层以饱和碳酸氢钠水溶液(100ml)、盐水(100ml)洗涤，经硫酸镁干燥，过滤，及在减压下浓缩。残留物经硅胶层析(梯度液∶乙酸乙酯/(己烷-二氯甲烷1∶1)；0∶10至2∶8)，得到产物397d(9.7g；64％)，为白色固体。
步骤D
Figure BDA00002167589502521
向250ml烧瓶中加入甲磺酸酯397d(3.0g)和叔-丁基硫醇钠盐(3.44g)。以氮吹洗洗烧瓶，并添加100ml无水DMF。使所形成的溶液脱气(真空/氮吹洗)，并加热至70℃。反应的流量经TLC监控(乙酸乙酯/己烷；2∶8)。所有起始原料在约3小时内消耗。使反应混合物溶于300ml乙酸乙酯中，并以水(3x50ml)及盐水(1x50ml)洗涤。使有机层经硫酸镁干燥，过滤，并浓缩。产物397e未进行进一步纯化(2.78g；95％)。
步骤E
Figure BDA00002167589502522
将硫化物397e(10.22mmol)在无水二氯甲烷(60ml)中的溶液，以m-CPBA(5.28g；60％)处理。将均匀混合物于45℃下加热约3小时。TLC分析(乙酸乙酯/己烷；1∶9)显示所有起始原料已经消耗。使混合物在减压下浓缩，并使残留物溶于20ml乙醚中，且在0℃下以硫代硫酸钠水溶液处理。将混合物以乙醚(350ml)稀释，并以饱和碳酸氢钠水溶液(5x30ml)洗涤。使有机层经硫酸镁干燥，过滤，并浓缩。残留物经硅胶层析(梯度液∶丙酮/己烷；3∶97至2∶8)，得到产物397f(2.45g；75％)，为白色固体。
步骤F
Figure BDA00002167589502531
使N-Boc保护的胺397f(2.43g)溶于20ml二氧六环中的4M HCl内。于室温下搅拌混合物，直到当经TLC分析(乙酸乙酯/己烷；2∶8)测定时，所有起始原料已经消耗为止。3小时后，于减压下除去所有挥发性物质，得到产物397g(1.90g；98％)，为白色固体。
步骤G
将氨基甲酸对-硝基苯酯397h(640mg)在10ml乙腈中的溶液用胺盐酸盐397g(350mg)处理。将N-甲基吗啉(0.37ml，d 0.920)添加至不均匀混合物中，并于室温下搅拌反应混合物。7小时后，当经TLC分析(丙酮/己烷；2∶8)测定时反应完成。使反应混合物于减压下浓缩。使残留物溶于150ml二氯甲烷中，并以1N HCl水溶液(1x30ml)及饱和碳酸氢钠水溶液(2x30ml)洗涤。使有机层经硫酸镁干燥，过滤，及在减压下浓缩。使产物于硅胶上纯化(梯度液∶丙酮/己烷；1∶9至4∶6)，得到产物397i(625mg；87％)，为白色固体。
步骤H
Figure BDA00002167589502533
将甲酯397i(610mg)在15ml THF/MeOH/水(1∶1∶1)混合物中的溶液用氢氧化锂单水合物(121mg)处理。将反应物于室温下搅拌，并经TLC监控(丙酮/己烷；3∶7)。3小时后，于减压下除去所有挥发性物质。使残留物于30ml 1N HCl水溶液与100ml二氯甲烷之间分配。将水层以二氯甲烷(2x30ml)回提(back extract)。使合并的有机层经硫酸镁干燥，过滤，及在减压下浓缩，得到产物397j(570mg；96％)，为白色固体。
步骤I
Figure BDA00002167589502541
于0℃下搅拌酸397j(120mg)在2ml无水二氯甲烷和2ml无水DMF中的溶液，并以HATU(124mg)处理。添加胺盐酸盐397k(63mg)，接着添加N-甲基吗啉(0.10ml，d0.920)。使反应混合物逐渐温热至室温，并搅拌过夜。于真空下移除所有挥发性物质，并使残留物溶于100ml乙酸乙酯中。将有机层以1N HCl水溶液(15ml)、饱和碳酸氢钠水溶液(15ml)及盐水(15ml)洗涤。使有机层经硫酸镁干燥，过滤，及在减压下浓缩，得到所需的产物397l(150mg；96％)，无需进一步纯化而使用。
步骤J
Figure BDA00002167589502542
将397l(150mg)在6ml甲苯/DMSO 1∶1混合物中的溶液用EDCI(430mg)和二氯乙酸(0.09ml，d1.563)处理。将反应混合物于室温下搅拌约2小时。将反应混合物以二氯甲烷(100ml)稀释，并以饱和碳酸氢钠水溶液(15ml)、1N HCl水溶液(15ml)及盐水(15ml)洗涤。使有机层经硫酸镁干燥过滤，并于减压下浓缩。残留物经硅胶层析(梯度液∶丙酮/己烷；2∶8至5∶5)，得到产物397(94mg；64％)，为白色固体。对C33H56N5O7S[M+H]+HRMS的计算值：666.3900，实测值666.3883。
实施例398：
步骤A
Figure BDA00002167589502552
于0℃下搅拌酸397j(100mg)在2ml无水二氯甲烷和2ml无水DMF中的溶液，并以HATU(103mg)处理。添加胺盐酸盐398a(60mg)，接着添加N-甲基吗啉(0.09ml，d0.920)。使反应混合物逐渐温热至室温，并搅拌过夜。于真空下移除所有挥发性物质，并使残留物溶于100ml乙酸乙酯中。将有机层以1N HCl水溶液(15ml)、饱和碳酸氢钠水溶液(15ml)及盐水(15ml)洗涤。使有机层经硫酸镁干燥，过滤，及在减压下浓缩，得到所需的产物398b(115mg；86％)。
步骤B
将羟基酰胺398b(115mg)在10ml无水二氯甲烷中的溶液，以Dess-Martin peridinane(210mg)处理。将反应混合物于室温下搅拌1小时。将混合物以1M亚硫酸钠溶液(10ml)和饱和碳酸氢钠水溶液(10ml)处理，并搅拌15分钟。以二氯甲烷(3x30ml)萃取混合物。使合并的有机层经硫酸镁干燥，过滤，并浓缩。残留物经硅胶层析(梯度液∶丙酮/己烷；2∶8至5∶5)，得到产物398(60mg；53％)，为白色固体。对C35H58N5O7S[M+H]+HRMS的计算值：692.4057，实测值692.4081。
实施例399：
Figure BDA00002167589502562
步骤A
于0℃下搅拌酸397j(100mg)在2ml无水二氯甲烷与2ml无水DMF中的溶液，并以HATU(106mg)处理。逐滴添加胺盐399a(0.252mmol)与N-甲基吗啉(0.09ml，d 0.920)在1ml二氯甲烷中的溶液。使反应混合物逐渐温热至室温，并搅拌过夜。于真空下移除所有挥发性物质，并使残留物溶于l00ml乙酸乙酯中。将有机层以1N HCl水溶液(15ml)、饱和碳酸氢钠水溶液(15ml)及盐水(15ml)洗涤。使有机层经硫酸镁干燥，过滤，及在减压下浓缩，得到所需的产物399b(85mg；63％)。
步骤B
Figure BDA00002167589502571
将羟基酰胺399b(85mg)在10ml无水二氯甲烷中的溶液，以Dess-Martin peridinane(157mg)处理。将反应混合物于室温下搅拌1小时。将混合物以1M硫代硫酸钠溶液(10ml)和饱和碳酸氢钠水溶液(10ml)处理，并搅拌15分钟。以二氯甲烷(3x30ml)萃取混合物。使合并的有机层经硫酸镁干燥，过滤，并浓缩。残留物经硅胶层析(梯度液∶丙酮/己烷；2∶8至4∶6)，得到产物399(50mg；60％)，为白色固体。对C33H55N6O7S[M+H]+HRMS的计算值：679.3853，实测值679.3834。
实施例473：
Figure BDA00002167589502572
步骤A
将顺式-2，6-二甲基-1-亚甲基环己烷(3.0g，ChemSamp公司)添加至固态碳酸氢钠(6当量，12.19g)在150ml二氯甲烷中的搅拌悬浮液中。使混合物冷却至0℃，并以少量分批加入70％m-CPBA(3当量，17.4g)在150ml二氯甲烷中的浆液。添加完成后，移除冷却浴，并将混合物搅拌约2小时。于0℃下，通过小心添加饱和硫代硫酸钠水溶液，使过量m-CPBA猝灭。将混合物以饱和碳酸氢钠溶液(100ml)洗涤。使有机层在旋转蒸发器中浓缩(使用冰水浴)。使残留物溶于乙醚(80ml)与己烷(120ml)中，并以饱和碳酸氢钠水溶液洗涤数次。使有机层经硫酸镁干燥，过滤，及在减压下浓缩(冰水浴)。残留物经硅胶层析(梯度液∶乙醚/己烷；0∶10至8∶92)，得到产物473b(3.0g；90％)，为无色油。
步骤B
Figure BDA00002167589502581
将环氧化物473b(3g)与氯化铵(5当量，5.72g)在80ml甲醇中的不均匀混合物用叠氮化钠(5当量，7.17g)处理，并于65℃下加热3小时。TLC分析显示留下一些起始原料，并添加更多氯化铵(1.5当量，1.71g)和叠氮化钠(1.5当量，2.15g)。将混合物加热(65℃)过夜。将反应混合物以30ml水稀释，并以乙醚(3x100ml)萃取。使合并的有机萃液经硫酸镁干燥，过滤，及在减压下浓缩。残留物经硅胶层析(梯度液∶乙醚/己烷；0∶10至2∶8)，得到其相应的非对映异构产物473b(2.73g；71％)，为无色油。
步骤C
Figure BDA00002167589502582
将叠氮基醇473b(1.73g)在50ml乙腈中的溶液用三苯膦(1.1当量，2.69g)处理，并回流1小时。使反应混合物于减压下浓缩，并使残留物在硅胶上层析(梯度液∶乙醚/己烷；5∶5至9∶1)，得到所需的氮丙啶产物473c(2.0g；98％)。
步骤D
Figure BDA00002167589502591
使氮丙啶473c(大约1.5g)在无水二氯甲烷(50ml)中的溶液冷却至0℃，并以50ml无水二氯甲烷中的二碳酸二-叔-丁酯(1.3当量，3.0g)处理。逐滴添加N-甲基吗啉(2.5当量，2.9ml，d0.920)，并将混合物搅拌过夜(温度：0至25℃)。将混合物以乙醚(300ml)稀释，并以1M HCl水溶液(100ml)、饱和碳酸氢钠水溶液(80ml)及盐水(80ml)洗涤。使有机层经硫酸镁干燥，过滤，及在减压下浓缩。残留物经硅胶层析(梯度液∶乙醚/己烷；0∶10至1∶9)，得到产物473d和473e，为透明油(970mg)。
步骤E
Figure BDA00002167589502592
向20ml小瓶中加入N-Boc-氮丙啶473e(469mg)在20ml无水DMF和叔-丁基硫醇钠(2当量，438mg)中的溶液。使反应物于130℃下，在微波炉中进行30分钟。将反应混合物以100ml乙醚稀释，并以水(3x30ml)及盐水(20ml)洗涤。使有机层经硫酸镁干燥，过滤，及在减压下浓缩。残留物经硅胶层析(梯度液∶己烷至乙醚/己烷4∶96)，得到产物473e(140mg)，为白色固体与未反应的起始原料(120mg)。
步骤F
Figure BDA00002167589502601
使N-Boc保护的胺473f(140mg)溶于10ml二氧六环中的4M HCl溶液内。将所形成的溶液于室温下搅拌30分钟，直到当经TLC分析(乙醚/己烷；5∶95)测定时，所有起始原料已经消耗为止。于减压下除去所有挥发性物质，并将残留物在高真空下放置3小时，得到产物473g(112mg；98％)，为白色固体。
步骤G
Figure BDA00002167589502602
将氨基甲酸对-硝基苯酯473h(l.05当量，212mg)在3ml乙腈中的溶液用2ml乙腈中的胺盐酸盐473g(110mg)处理。添加N-甲基吗啉(2.5当量，0.11ml，d0.920)，并将所形成的黄色溶液于室温下搅拌8小时。使反应混合物在减压下浓缩，并使残留物溶于100ml二氯甲烷中，且以1N HCl水溶液(1x20ml)及饱和碳酸氢钠水溶液(2x20ml)洗涤。使有机层经硫酸镁干燥，过滤，及在减压下浓缩。使产物于硅胶上纯化(梯度液∶己烷至丙酮/己烷，2∶8)，得到产物473i(150mg；63％)。
步骤H
Figure BDA00002167589502611
将硫化物473i(150mg)在无水二氯甲烷(15ml)中的溶液用60％m-CPBA(3当量，134mg)处理。将均匀混合物于45℃下加热约1.5小时。通过加入硫代硫酸钠溶液(20ml)使过量m-CPBA猝灭，并持续搅拌10分钟。添加饱和碳酸氢钠溶液(20ml)，并使产物溶入乙酸乙酯(100ml)中。浓缩有机层，并使残留物溶于乙酸乙酯(80ml)中。将有机层以饱和碳酸氢钠水溶液(3x10ml)及盐水(10ml)洗涤。使有机层经硫酸镁干燥，过滤，并浓缩。残留物经硅胶层析(梯度液∶乙酸乙酯/己烷；1∶3至5∶5)，得到产物473j(120mg；76％)，为无色油。
步骤I
使甲酯473j(110mg)在10ml THF/水/MeOH的1∶1∶1混合物中的溶液冷却至0℃，并以氢氧化锂单水合物(2.5当量，19mg)处理。30分钟后移除冷却浴，并将混合物于室温下再搅拌2小时，直到当经TLC分析(乙酸乙酯/己烷；3∶7)测定时，所有起始原料已经消耗为止。以20ml 1MHCl水溶液(混合物的pH值＝1)处理反应混合物，并于减压下除去有机溶剂。将含水残留物以二氯甲烷(3x50ml)萃取。使合并的有机萃液经硫酸镁干燥，过滤，及在减压下浓缩，得到产物473k(105mg；98％)，为透明油。
步骤J
Figure BDA00002167589502621
于0℃下搅拌酸473k(50mg)在2ml无水二氯甲烷与1ml无水DMF中的溶液，并以HATU(1.4当量，44mg)处理。添加胺盐(1.3当量，25mg)，接着加入N-甲基吗啉(4当量，0.036ml，d 0.920)。将反应混合物搅拌过夜(温度0至25℃)。在真空下移除所有挥发性物质，并使残留物溶于50ml乙酸乙酯中。将有机层以水(20ml)、1M HCl水溶液(10ml)、饱和碳酸氢钠水溶液(10ml)及盐水(10ml)洗涤。使有机层经硫酸镁干燥，过滤，及在减压下浓缩。使用产物473m(64mg)而无需进一步纯化。
步骤K
Figure BDA00002167589502622
将羟基酰胺473m(0.083mmol)在10ml无水二氯甲烷中的溶液用Dess-Martin peridinane(2.0当量，70mg)处理。将反应混合物于室温下搅拌30分钟。将混合物以1M硫代硫酸钠溶液(10ml)处理，并搅拌5分钟。也添加饱和碳酸氢钠水溶液(20ml)，并再持续搅拌10分钟。将混合物以二氯甲烷(3x30ml)萃取。使合并的有机层经硫酸镁干燥，过滤，并浓缩。残留物经硅胶层析(梯度液∶丙酮/己烷；1∶9至4∶6)，得到产物473(40mg；62％，经两个步骤)，为白色固体。对C41H68N5O7S[M+H]+：HRMS的计算值：774.4839，实测值774.4834.
实施例474：
步骤A
于0℃下搅拌酸473k(50mg)在2ml无水二氯甲烷与1ml无水DMF中的溶液，并以HATU(1.4当量，44mg)处理。添加胺盐474a(1.3当量，25mg)，接着加入N-甲基吗啉(4当量，0.036ml，d0.920)。将反应混合物搅拌过夜(温度0至25℃)。在真空下移除所有挥发性物质，并使残留物溶于50ml乙酸乙酯中。将有机层以水(20ml)、1M HCl水溶液(10ml)、饱和碳酸氢钠水溶液(10ml)及盐水(10ml)洗涤。使有机层经硫酸镁干燥，过滤，及在减压下浓缩。使用产物474b(65mg)，无需进一步纯化。
步骤B
将羟基酰胺474b(0.083mmol)在10ml无水二氯甲烷中的溶液用Dess-Martin peridinane(2.0当量，70mg)处理。将反应混合物于室温下搅拌30分钟。将混合物以1M硫代硫酸钠溶液(10ml)处理，并搅拌5分钟。也添加饱和碳酸氢钠水溶液(20ml)，并再持续搅拌10分钟。将混合物以二氯甲烷(3x30ml)萃取。使合并的有机层经硫酸镁干燥，过滤，并浓缩。残留物经硅胶层析(梯度液∶丙酮/己烷；1∶9至4∶6)，得到产物474(40mg；62％，经两个步骤)，为白色固体。对C41H70N5O7S[M+H]+：HR S的计算值：776.4995，实测值776.5005.
实施例696：
Figure BDA00002167589502641
步骤A
使酸696a(3.0g)在140ml无水DMF中的溶液冷却至0℃，并以碳酸铯(1.1当量，5.04g)处理，接着添加溴化苄(1.2当量，2.00ml，d1.438)。将反应混合物搅拌24小时(温度：0至25℃)。将混合物以乙酸乙酯(350ml)稀释，并以水(3x50ml)洗涤。使有机层经硫酸镁干燥，过滤，及在减压下浓缩。残留物经硅胶层析(梯度液∶己烷至乙酸乙酯/己烷25∶75)，得到产物696b(3.82g；90％)，为透明油。
步骤B
Figure BDA00002167589502643
于氩气气氛下，用四氧化锇(0.1当量，318mg)处理N-甲基吗啉-N-氧化物(1.3当量，1.9g)在叔-丁醇(20ml)、THF(7ml)及水(3.5ml)中的溶液。将所形成的淡黄色溶液搅拌5分钟，接着逐滴添加30ml THF中的苄基酯696b(3.8g)。将反应混合物于室温下搅拌20小时。经过短路径硅胶过滤混合物，并以乙酸乙酯(500ml)洗涤固体。将有机层以盐水(80ml)洗涤，经硫酸镁干燥，过滤，及在减压下浓缩。残留物经硅胶层析(梯度液∶丙酮/己烷；2∶8至55∶45)，得到产物696c(3.5g；83％)，为糊剂。
步骤C
使N-Boc胺696c(3.5g)溶于60ml二氧六环中的4M HCl内。将所形成的溶液于室温下搅拌约2小时。于减压下除去所有挥发性物质，获得产物696d(2.8g；98％)，无需进一步纯化而使用。
步骤D
将N-Boc-叔-丁基甘氨酸(2.15g)在100ml无水二氯甲烷和20ml无水DMF中的溶液于0℃下搅拌，并以HATU(1.4当量，4.96g)处理。添加30ml DMF中的胺盐696d(1.1当量，2.8g)，接着添加N-甲基吗啉(4当量，4.08ml，d 0.920)。将反应混合物于0℃下搅拌过夜。在真空下移除所有挥发性物质，并使残留物溶于300ml乙酸乙酯中。将有机层以水(1x100ml)、1M HCl水溶液(100ml)、饱和碳酸氢钠水溶液(100ml)及盐水(100ml)洗涤。使有机层经硫酸镁干燥，过滤，及在减压下浓缩。残留物经硅胶层析(乙酸乙酯/己烷；6∶4)，得到产物696e(3.29g；79％)，为无色油。
步骤E
Figure BDA00002167589502661
使N-Boc胺696e(1.24g)溶于30ml二氧六环中的4M HCl内。将所形成的溶液于室温下搅拌约2小时。于减压下除去所有挥发性物质，得到产物696f(1.06g；98％)，为白色固体。
步骤F
Figure BDA00002167589502662
将N-甲基吗啉(1.3当量，0.39ml，d0.920)添加至胺-二醇696f(1.06g)在50ml二氯甲烷中的不均匀混合物中。5分钟后，添加异氰酸酯溶液(1.05当量，9.63ml，甲苯中的0.3M溶液)。也添加DMF(5ml)，并于室温下搅拌浆液。混合物逐渐转化(于4小时内)成透明均匀溶液。将混合物以乙酸乙酯(300ml)稀释，并以1M HCl水溶液洗涤。以100ml乙酸乙酯回提水层。使合并的有机层经硫酸镁干燥，过滤，及在减压下浓缩。残留物经硅胶层析(梯度液∶丙酮/己烷；3∶7至6∶4)，获得产物696g(1.6g；98％)，为无色油。
步骤G
Figure BDA00002167589502671
将二醇696g(1.5g)溶液以2，2-二甲氧基丙烷(2当量，0.6ml，d0.847)和催化量的吡锭对-甲苯磺酸(0.1当量，62mg)处理。将混合物于50℃下搅拌过夜。将混合物以200ml乙酸乙酯稀释，并以50ml饱和碳酸氢钠溶液洗涤。以乙酸乙酯(100ml)萃取水层。使合并的有机层经硫酸镁干燥，过滤，并浓缩。残留物经硅胶层析(梯度液∶丙酮/己烷；5∶95至35∶65)，得到产物696h(1.33g；83％)，为白色固体。
步骤H
Figure BDA00002167589502672
使苄基酯696h(1.33g)溶于70ml乙酸乙酯中，并以20％二氢氧化钯/碳(0.1mol％；144mg)处理。使不均匀混合物于50psi下氢化3小时。将混合物以200ml二氯甲烷稀释，并经过短路径硅藻土过滤。于减压下浓缩滤液，得到产物696i(1.14g；98％)，为白色固体。
步骤I
于0℃下搅拌酸696i(100mg)在3ml无水二氯甲烷和3ml无水DMF中的溶液，并以HATU(1.4当量，93mg)处理。添加胺盐696j(1.2当量，47mg)，接着加入N-甲基吗啉(4当量，0.08ml，d 0.920)。将反应混合物搅拌过夜(温度0至25℃)。在真空下移除所有挥发性物质，并使残留物溶于50ml乙酸乙酯中。将有机层以水(10ml)、1M HCl水溶液(10ml)、饱和碳酸氢钠水溶液(10ml)及盐水(10ml)洗涤。使有机层经硫酸镁干燥，过滤，及在减压下浓缩。使用产物696k，无需进一步纯化。
步骤J
Figure BDA00002167589502681
将羟基酰胺696k(0.178mmol)在10ml无水二氯甲烷中的溶液用Dess-Martin peridinane(2.0当量，150mg)处理。将反应混合物于室温下搅拌30分钟。将混合物以1M硫代硫酸钠溶液(10ml)处理，并搅拌5分钟。也添加饱和碳酸氢钠水溶液(10ml)，并再持续搅拌10分钟。以二氯甲烷(3x30ml)萃取混合物。使合并的有机层经硫酸镁干燥，过滤，并浓缩。残留物经硅胶层析(梯度液∶丙酮/己烷；15∶85至1∶1)，得到产物696(120mg；93％)，为白色固体。对C35H60N5O9S[M+H]+：HRMS的计算值：726.4112，实测值726.4128.
实施例697：
步骤A
Figure BDA00002167589502691
于0℃下搅拌酸696i(100mg)在3ml无水二氯甲烷和3ml无水DMF中的溶液，并以HATU(1.4当量，93mg)处理。添加胺盐697a(1.2当量，50mg)，接着加入N-甲基吗啉(4当量，0.08ml，d0.920)。将反应混合物搅拌过夜(温度0至25℃)。在真空下移除所有挥发性物质，并使残留物溶于50ml乙酸乙酯中。将有机层以水(10ml)、1M HCl水溶液(10ml)、饱和碳酸氢钠水溶液(10ml)及盐水(10ml)洗涤。使有机层经硫酸镁干燥，过滤，及在减压下浓缩。使用产物697b而无需进一步纯化。
步骤B
Figure BDA00002167589502692
将羟基酰胺697b(0.178mmol)在10ml无水二氯甲烷中的溶液用Dess-Martin peridinane(2.0当量，150mg)处理。将反应混合物于室温下搅拌30分钟。将混合物以1M硫代硫酸钠溶液(10ml)处理，并搅拌5分钟。也添加饱和碳酸氢钠水溶液(10ml)，并再持续搅拌10分钟。将混合物以二氯甲烷(3x30ml)萃取。使合并的有机层经硫酸镁干燥，过滤，并浓缩。残留物经硅胶层析(梯度液∶丙酮/己烷；15∶85至1∶1)，得到产物697(120mg；91％)，为白色固体。对C36H60N5O9S[M+H]+：HRMS的计算值：738.4112，实测值738.4092.
实施例837：
步骤A
Figure BDA00002167589502702
于0℃下，将硫杂环丁烷(thietane)(10g，9.727ml，d1.028，Aldrich)在200ml二氯甲烷中的溶液用间-氯基过氧苯甲酸(2.3当量，76g，70％m-CPBA)在二氯甲烷(400ml)中的浆液处理。移除冷却浴，并将混合物搅拌3小时。经过滤移除固体，并于减压下浓缩滤液。使残留物溶于乙酸乙酯(400ml)中，并以饱和碳酸氢钠溶液充分洗涤溶液。使有机层经硫酸镁干燥，过滤，并浓缩。使残留物经柱层析纯化，得到产物837b，为白色固体。
步骤B
Figure BDA00002167589502703
于氮气氛下，将四乙醇钛(2当量，24.2ml，d1.088)添加至环己酮(1.2当量，7.18ml，d0.947)在150ml无水THF中的溶液中。5分钟后，逐滴添加50ml THF中的叔-丁烷亚磺酰胺(sulfinamide)(7.0g，Aldrich)。将混合物加热至60℃过夜。将反应混合物倒入等体积饱和碳酸氢钠水溶液中，并迅速搅拌，及立即经过滤纸whatman#1过滤。以乙酸乙酯(100ml)洗涤滤饼。分离滤液中的液层，并以乙酸乙酯(100ml)萃取水层。将合并的有机层以饱和碳酸氢钠水溶液(100ml)洗涤，经硫酸镁干燥过滤，并浓缩。残留物经硅胶层析(乙酸乙酯/己烷；3∶7)，得到产物837d(7.5g；55％)，为无色油。使产物保持在惰性大气及-20℃下。
步骤C
Figure BDA00002167589502711
于干燥大气下，将正-丁基锂(1.1当量，7.6ml，环己烷中的1.6M溶液)逐滴添加至砜837b(1.15当量，1.35g)在100ml无水THF中的冷却(-78℃)的溶液中。将混合物于该温度下搅拌1小时，然后通过套管，转移至亚磺酰基亚胺837d(2.23g)在100ml无水THF中的已预先冷却(-78℃)的溶液内。将所形成的混合物于-78℃下搅拌，并经TLC监控(丙酮/己烷；3∶7)。所有亚磺酰基亚胺837d起始原料于2小时内消耗。通过加入饱和氯化铵水溶液(5ml)使反应猝灭。使混合物达到室温，并于乙酸乙酯(200ml)与饱和碳酸氢钠水溶液(80ml)之间分配。将水层以乙酸乙酯(2x60ml)回提。将合并的有机层用盐水洗涤，经硫酸镁干燥，过滤，及在减压下浓缩。残留物经硅胶层析(梯度液∶二氯甲烷至丙酮/二氯甲烷；3∶7)，得到其相应的非对映异构产物837e与837f，为1.4∶1的混合物(1.64g；50％合并产率)。
步骤D
Figure BDA00002167589502712
使亚磺酰胺(sulfinamide)837e(910mg)溶于50ml甲醇中，并以20ml二氧六环中的4M HCl溶液处理。将混合物搅拌约1小时，直到当经TLC(丙酮/己烷；1∶9)测定时，所有起始原料已经消耗为止。使混合物浓缩至干燥。添加二氯甲烷(10ml)，以制备均匀溶液，然后添加乙醚(80ml)，并形成白色沉淀物。经过滤回收胺盐酸盐产物837g(700mg；98％)，为白色固体。
步骤E
Figure BDA00002167589502721
将胺盐酸盐837g(2.960mmol)在40ml二氯甲烷中的溶液用20ml饱和碳酸氢钠溶液处理，并于0℃下激烈搅拌10分钟。停止搅拌，并分离各层。经过针头，将光气(10ml，甲苯中的20％溶液)一次性添加至有机层(下层)中。在添加10分钟后，立即将混合物于0℃下激烈搅拌，及进一步在室温下搅拌3小时。将混合物以100ml二氯甲烷稀释，并分离各层。将有机层以50ml冷饱和碳酸氢钠水溶液洗涤，并经硫酸镁干燥。过滤有机层，并以50ml甲苯稀释。浓缩所形成的溶液，并保持为甲苯中的0.118M溶液。
步骤F
将胺盐酸盐837i(1.5mmol)在30ml二氯甲烷中的溶液用5ml饱和碳酸氢钠水溶液处理。将混合物搅拌10分钟，接着添加异氰酸酯837h(1.03当量，13.1ml，甲苯中的0.118M溶液)。将反应混合物搅拌过夜。将反应混合物以二氯甲烷(200ml)稀释，并以饱和碳酸氢钠水溶液(40ml)洗涤。使有机层经硫酸镁干燥，过滤，及在减压下浓缩。残留物经硅胶层析(梯度液∶丙酮/己烷；1∶9至1∶1)，提供产物837j(740mg；84％)，为白色固体。
步骤G
使苄基酯837j(740mg)溶于20ml甲醇中，并以20％二氢氧化钯/碳(0.1mol％；90mg)处理。使不均匀混合物于50psi下氢化2小时。TLC(丙酮/己烷；35∶65)显示所有起始原料已经消耗。将混合物以100ml二氯甲烷稀释，并经过短路径硅藻土过滤。于减压下浓缩滤液，得到产物837k(620mg；98％)，为白色固体。
步骤H
Figure BDA00002167589502732
于0℃下搅拌酸837k(69mg)在2ml无水二氯甲烷和2ml无水DMF中的溶液，并以HATU(1.4当量，74mg)处理。添加胺盐837l(1.2当量，39mg)，接着加入N-甲基吗啉(4当量，0.06ml，d 0.920)。将反应混合物搅拌过夜(温度0至25℃)。在真空下移除所有挥发性物质，并使残留物溶于50ml乙酸乙酯中。将有机层以水(10ml)、1M HCl水溶液(10ml)、饱和碳酸氢钠水溶液(10ml)及盐水(10ml)洗涤。使有机层经硫酸镁干燥，过滤，及在减压下浓缩。使用产物837m，无需进一步纯化。
步骤I
将羟基酰胺837m(0.138mmol)在10ml无水二氯甲烷中的溶液用Dess-Martin peridinane(2.0当量，117mg)处理。将反应混合物于室温下搅拌30分钟。将混合物以1M硫代硫酸钠溶液(10ml)处理，并搅拌5分钟。也添加饱和碳酸氢钠水溶液(10ml)，并再持续搅拌10分钟。以二氯甲烷(3x30ml)萃取混合物。使合并的有机层经硫酸镁干燥，过滤，并浓缩。残留物经硅胶层析(梯度液∶丙酮/己烷；2∶8至1∶1)，得到产物837(66mg；70％)，为白色固体。对C34H56N5O7S[M+H]+：HRMS的计算值：678.3900，实测值678.3883.
实施例838：
Figure BDA00002167589502742
步骤A
Figure BDA00002167589502743
于0℃下搅拌酸837k(69mg)在2ml无水二氯甲烷和2ml无水DMF中的溶液，并以HATU(1.4当量，74mg)处理。添加胺盐838a(1.2当量，39mg)，接着加入N-甲基吗啉(4当量，0.06ml，d0.920)。将反应混合物搅拌过夜(温度0至25℃)。在真空下移除所有挥发性物质，并使残留物溶于50ml乙酸乙酯中。将有机层以水(10ml)、1M HCl水溶液(10ml)、饱和碳酸氢钠水溶液(10ml)及盐水(10ml)洗涤。使有机层经硫酸镁干燥，过滤，及在减压下浓缩。使用产物838b而无需进一步纯化。
步骤B
Figure BDA00002167589502751
将羟基酰胺838b(0.138mmol)在10ml无水二氯甲烷中的溶液以Dess-Martin peridinane(2.0当量，l17mg)处理。将反应混合物于室温下搅拌30分钟。将混合物以1M硫代硫酸钠水溶液(10ml)处理，并搅拌5分钟。也添加饱和碳酸氢钠水溶液(10ml)，并再持续搅拌10分钟。以二氯甲烷(3x30ml)萃取混合物。使合并的有机层经硫酸镁干燥，过滤，并浓缩。残留物经硅胶层析(梯度液∶丙酮/己烷；1∶9至4∶6)，得到产物838(71mg；76％)，为白色固体。对C34H56N5O7S[M+H]+：HRMS的计算值：678.3900，实测值678.3883.
实施例869：
Figure BDA00002167589502752
步骤A
Figure BDA00002167589502761
于0℃下搅拌酸837k(69mg)在2ml无水二氯甲烷和2ml无水DMF中的溶液，并以HATU(1.4当量，74mg)处理。添加胺盐869a(1.2当量，37mg)，接着加入N-甲基吗啉(4当量，0.06ml，d0.920)。将反应混合物搅拌过夜(温度0至25℃)。在真空下移除所有挥发性物质，并使残留物溶于50ml乙酸乙酯中。将有机层以水(10ml)、1M HCl水溶液(10ml)、饱和碳酸氢钠水溶液(10ml)及盐水(10ml)洗涤。使有机层经硫酸镁干燥，过滤，及在减压下浓缩。使用产物869b，无需进一步纯化。
步骤B
Figure BDA00002167589502762
将羟基酰胺869b(0.138mmol)在10ml无水二氯甲烷中的溶液用Dess-Martin peridinane(2.0当量，117mg)处理。将反应混合物于室温下搅拌30分钟。将混合物以1M硫代硫酸钠水溶液(10ml)处理，并搅拌5分钟。也添加饱和碳酸氢钠水溶液(10ml)，并再持续搅拌10分钟。以二氯甲烷(3x30ml)萃取混合物。使合并的有机层经硫酸镁干燥，过滤，并浓缩。残留物经硅胶层析(梯度液∶丙酮/己烷；18∶85至45∶55)，得到产物869(69mg；75％)，为白色固体。
制备实施例868：
Figure BDA00002167589502771
步骤A
Figure BDA00002167589502772
将酸837k(69mg)在2ml无水二氯甲烷和2ml无水DMF中的溶液于0℃下搅拌，并以HATU(1.4当量，74mg)处理。添加胺盐868a(1.2当量，39mg)，接着加入N-甲基吗啉(4当量，0.06ml，d0.920)。将反应混合物搅拌过夜(温度0至25℃)。在真空下移除所有挥发性物质，并使残留物溶于50ml乙酸乙酯中。将有机层以水(10ml)、1M HCl水溶液(10ml)、饱和碳酸氢钠水溶液(10ml)及盐水(10ml)洗涤。使有机层经硫酸镁干燥，过滤，及在减压下浓缩。使用产物868b而无需进一步纯化。
步骤B
Figure BDA00002167589502773
将羟基酰胺868b(0.138mmol)在10ml无水二氯甲烷中的溶液以Dess-Martin peridinane(2.0当量，117mg)处理。将反应混合物于室温下搅拌30分钟。将混合物以1M硫代硫酸钠水溶液(10ml)处理，并搅拌5分钟。也添加饱和碳酸氢钠水溶液(10ml)，并再持续搅拌10分钟。以二氯甲烷(3x30ml)萃取混合物。使合并的有机层经硫酸镁干燥，过滤，并浓缩。残留物经硅胶层析(梯度液∶丙酮/己烷；1∶9至4∶6)，得到产物868(73mg；78％)，为白色固体。
实施例833：
Figure BDA00002167589502781
步骤1
Figure BDA00002167589502782
在-78℃及N2下，向二乙砜酸(ethylsulfone acid)833a(2.06g，8.79mmol)在无水THF中的溶液中添加LiHMDS溶液(19.3ml，1.0M，在THF中)。将混合物于-78℃下搅拌30分钟，然后使其伴随着冷丙酮浴温热至0℃。接着使其再冷却至-78℃，并于其中添加2-溴代乙基醚(1.8ml，13.2mmol)。于-78℃下搅拌30分钟后，使混合物温热至室温，并搅拌2小时。使其再一次再冷却至-78℃，并于其中添加LiHMDS溶液(10.6ml，10.6mmol)。于-78℃下搅拌30分钟后，使混合物温热至室温，并搅拌3小时，然后以1N HCl水溶液使反应猝灭，直到pH值约1-2为止。将溶液以CH2Cl2(2x450ml)萃取。使合并的有机溶液干燥(MgSO4)，过滤，并浓缩。使粗产物溶于1N NaOH溶液(300ml)中，并以EtOAc(100ml)萃取。分离各层后，以1N NaOH(2x150ml)洗涤有机溶液。使用6NHCl溶液，使合并的水溶液酸化至pH～1。将其以EtOAc(3x300ml)萃取。将有机溶液合并，干燥(MgSO4)，过滤，并浓缩，得到2.3g产物(833b；7.56mmol，89％)。
步骤2
Figure BDA00002167589502791
在室温及N2下，向甲苯中的酸833b(2.30g，7.56mmol)中添加三乙胺(1.15ml，8.32mmol)与二苯基磷酰基叠氮化物(1.79ml，8.32mmol)。将所形成的混合物于室温下搅拌30分钟，并加热至回流5.5小时。使其冷却至室温后，添加更多甲苯，以制备异氰酸酯833c的0.19M溶液，无需进一步纯化而使用。
使用前述程序，使833c转变成833。
表3A
Figure BDA00002167589502792
Figure BDA00002167589502801
Figure BDA00002167589502811
Figure BDA00002167589502821
Figure BDA00002167589502831
Figure BDA00002167589502841
Figure BDA00002167589502851
Figure BDA00002167589502861
Figure BDA00002167589502871
Figure BDA00002167589502881
Figure BDA00002167589502891
Figure BDA00002167589502901
Figure BDA00002167589502921
Figure BDA00002167589502931
Figure BDA00002167589502941
Figure BDA00002167589502961
Figure BDA00002167589502971
Figure BDA00002167589502981
Figure BDA00002167589502991
Figure BDA00002167589503001
Figure BDA00002167589503011
Figure BDA00002167589503021
Figure BDA00002167589503031
Figure BDA00002167589503041
Figure BDA00002167589503051
Figure BDA00002167589503061
Figure BDA00002167589503071
Figure BDA00002167589503081
Figure BDA00002167589503101
Figure BDA00002167589503111
Figure BDA00002167589503121
Figure BDA00002167589503131
Figure BDA00002167589503141
Figure BDA00002167589503151
Figure BDA00002167589503161
Figure BDA00002167589503171
Figure BDA00002167589503191
Figure BDA00002167589503201
Figure BDA00002167589503231
Figure BDA00002167589503241
Figure BDA00002167589503251
Figure BDA00002167589503261
Figure BDA00002167589503281
Figure BDA00002167589503291
Figure BDA00002167589503301
Figure BDA00002167589503311
Figure BDA00002167589503321
Figure BDA00002167589503331
Figure BDA00002167589503341
Figure BDA00002167589503351
Figure BDA00002167589503371
Figure BDA00002167589503381
Figure BDA00002167589503391
Figure BDA00002167589503401
Figure BDA00002167589503411
Figure BDA00002167589503421
Figure BDA00002167589503431
Figure BDA00002167589503441
Figure BDA00002167589503451
Figure BDA00002167589503481
Figure BDA00002167589503491
Figure BDA00002167589503501
Figure BDA00002167589503511
Figure BDA00002167589503531
Figure BDA00002167589503541
Figure BDA00002167589503551
Figure BDA00002167589503561
Figure BDA00002167589503571
Figure BDA00002167589503581
Figure BDA00002167589503591
Figure BDA00002167589503601
Figure BDA00002167589503611
Figure BDA00002167589503621
Figure BDA00002167589503631
Figure BDA00002167589503641
Figure BDA00002167589503661
Figure BDA00002167589503671
Figure BDA00002167589503701
Figure BDA00002167589503711
Figure BDA00002167589503721
Figure BDA00002167589503731
Figure BDA00002167589503741
Figure BDA00002167589503751
Figure BDA00002167589503761
Figure BDA00002167589503771
Figure BDA00002167589503781
Figure BDA00002167589503791
Figure BDA00002167589503801
Figure BDA00002167589503821
Figure BDA00002167589503831
Figure BDA00002167589503841
Figure BDA00002167589503851
Figure BDA00002167589503861
Figure BDA00002167589503871
Figure BDA00002167589503881
Figure BDA00002167589503891
Figure BDA00002167589503901
Figure BDA00002167589503911
Figure BDA00002167589503931
Figure BDA00002167589503941
Figure BDA00002167589503951
Figure BDA00002167589503961
Figure BDA00002167589503971
Figure BDA00002167589503981
Figure BDA00002167589503991
Figure BDA00002167589504001
Figure BDA00002167589504011
Figure BDA00002167589504021
Figure BDA00002167589504031
Figure BDA00002167589504041
Figure BDA00002167589504051
Figure BDA00002167589504061
Figure BDA00002167589504071
Figure BDA00002167589504081
Figure BDA00002167589504091
Figure BDA00002167589504101
Figure BDA00002167589504111
Figure BDA00002167589504121
Figure BDA00002167589504131
Figure BDA00002167589504141
Figure BDA00002167589504151
Figure BDA00002167589504161
Figure BDA00002167589504171
Figure BDA00002167589504181
Figure BDA00002167589504191
Figure BDA00002167589504201
Figure BDA00002167589504211
Figure BDA00002167589504221
Figure BDA00002167589504231
Figure BDA00002167589504241
Figure BDA00002167589504251
Figure BDA00002167589504261
Figure BDA00002167589504281
Figure BDA00002167589504291
Figure BDA00002167589504311
Figure BDA00002167589504321
Figure BDA00002167589504341
Figure BDA00002167589504361
Figure BDA00002167589504371
Figure BDA00002167589504381
Figure BDA00002167589504391
Figure BDA00002167589504401
Figure BDA00002167589504411
Figure BDA00002167589504431
Figure BDA00002167589504441
Figure BDA00002167589504451
Figure BDA00002167589504461
Figure BDA00002167589504471
Figure BDA00002167589504481
Figure BDA00002167589504491
Figure BDA00002167589504511
Figure BDA00002167589504521
Figure BDA00002167589504531
Figure BDA00002167589504541
Figure BDA00002167589504551
Figure BDA00002167589504561
Figure BDA00002167589504571
Figure BDA00002167589504581
Figure BDA00002167589504591
Figure BDA00002167589504601
Figure BDA00002167589504611
Figure BDA00002167589504621
Figure BDA00002167589504631
Figure BDA00002167589504651
Figure BDA00002167589504671
Figure BDA00002167589504681
Figure BDA00002167589504691
Figure BDA00002167589504701
Figure BDA00002167589504711
Figure BDA00002167589504721
Figure BDA00002167589504731
Figure BDA00002167589504741
Figure BDA00002167589504751
Figure BDA00002167589504761
Figure BDA00002167589504771
Figure BDA00002167589504781
Figure BDA00002167589504791
Figure BDA00002167589504801
Figure BDA00002167589504811
Figure BDA00002167589504821
Figure BDA00002167589504841
Figure BDA00002167589504851
Figure BDA00002167589504861
Figure BDA00002167589504871
Figure BDA00002167589504881
Figure BDA00002167589504891
Figure BDA00002167589504901
Figure BDA00002167589504911
Figure BDA00002167589504921
Figure BDA00002167589504941
Figure BDA00002167589504951
Figure BDA00002167589504961
Figure BDA00002167589504971
Figure BDA00002167589504981
Figure BDA00002167589504991
Figure BDA00002167589505001
Figure BDA00002167589505011
Figure BDA00002167589505021
Figure BDA00002167589505031
Figure BDA00002167589505051
Figure BDA00002167589505061
Figure BDA00002167589505071
Figure BDA00002167589505091
Figure BDA00002167589505101
Figure BDA00002167589505111
Figure BDA00002167589505121
Figure BDA00002167589505131
Figure BDA00002167589505141
Figure BDA00002167589505151
Figure BDA00002167589505161
Figure BDA00002167589505181
Figure BDA00002167589505201
Figure BDA00002167589505211
Figure BDA00002167589505221
Figure BDA00002167589505231
Figure BDA00002167589505241
Figure BDA00002167589505251
Figure BDA00002167589505261
Figure BDA00002167589505291
Figure BDA00002167589505301
Figure BDA00002167589505311
Figure BDA00002167589505321
Figure BDA00002167589505331
Figure BDA00002167589505341
Figure BDA00002167589505351
Figure BDA00002167589505361
Figure BDA00002167589505371
Figure BDA00002167589505381
Figure BDA00002167589505391
Figure BDA00002167589505401
Figure BDA00002167589505411
Figure BDA00002167589505431
Figure BDA00002167589505441
Figure BDA00002167589505451
Figure BDA00002167589505461
Figure BDA00002167589505481
Figure BDA00002167589505491
Figure BDA00002167589505501
Figure BDA00002167589505511
Figure BDA00002167589505521
Figure BDA00002167589505531
Figure BDA00002167589505541
Figure BDA00002167589505551
Figure BDA00002167589505561
Figure BDA00002167589505571
Figure BDA00002167589505581
Figure BDA00002167589505591
Figure BDA00002167589505601
Figure BDA00002167589505611
Figure BDA00002167589505631
Figure BDA00002167589505641
Figure BDA00002167589505651
Figure BDA00002167589505661
Figure BDA00002167589505671
Figure BDA00002167589505681
Figure BDA00002167589505691
Figure BDA00002167589505701
Figure BDA00002167589505711
Figure BDA00002167589505721
Figure BDA00002167589505731
Figure BDA00002167589505761
Figure BDA00002167589505771
Figure BDA00002167589505781
Figure BDA00002167589505791
Figure BDA00002167589505811
Figure BDA00002167589505821
Figure BDA00002167589505831
也公开表4和表4A中的下列化合物。表4和表4A中的化合物的制备描述于下文：
实施例1005：
Figure BDA00002167589505832
步骤1
Figure BDA00002167589505833
在0℃下，向5g 1005-A(可市购得自Aldrich)在100ml EtOAc中的溶液中添加40ml饱和NaHCO3溶液，接着一次性添加6.5mlCbz-Cl。将所形成的混合物搅拌2小时，并分离各层。以50ml EtOAc回提水层。将合并的有机层用盐水洗涤一次，经MgSO4干燥，并浓缩成无色液体，其系于静置时固化。获得10.7g 1005-B，为白色固体。MS：274[M+Na]+。
步骤2
Figure BDA00002167589505841
在0℃下，向10.7g 1005-B在120ml DCM中的溶液中添加7.04ml三乙胺与4.05ml甲磺酰氯。于0℃下将混合物搅拌10分钟，并在室温下搅拌1.5小时。将混合物以1M KHSO4溶液、水、盐水洗涤，经MgSO4干燥。浓缩溶剂，获得粗产物，使其在硅胶柱上纯化，以DCM洗脱。获得13g 1005-C，为无色浓稠油。MS：352[M+Na]+。
步骤3
Figure BDA00002167589505842
向8.3g Cs2CO3在100ml无水DMF中的悬浮液中加入3.3ml硫代乙酸。于深褐色浆液中加入12.97g 1005-C在30ml无水DMF中的溶液。将所形成的混合物于室温下搅拌过夜，以300ml冰水稀释，并以2x250ml EtOAc萃取。将合并的有机层以水、盐水洗涤，经MgSO4干燥。蒸发溶剂，获得～10g粗产物，使其在硅胶柱上，以己烷中的10％EtOAc纯化。获得4.8g 1005-D，为白色固体。
MS：310[M+H]+，332[M+Na]+。
步骤4
Figure BDA00002167589505843
向4.4g 1005-D在15ml AcOH中的溶液中加入15ml 30％H2O2和30ml AcOH的溶液。将所形成的溶液于室温下搅拌20小时。添加75mg10％Pd/C，并将混合物搅拌1小时，经过硅藻土垫过滤，并以MeOH冲洗。使合并的滤液浓缩，并与3x100ml甲苯共蒸发，得到固体。添加90ml无水DCM，以溶解固体，并于此溶液中加入15ml甲苯中的20％光气(Fluka)，接着是1.8ml无水DMF。有气体释出，将混合物于室温下搅拌2小时，并浓缩，得到固体残留物。于硅胶上纯化，以DCM洗脱，获得3.94g 1005-E，为固体。MS：356，358[M+Na]+。
Figure BDA00002167589505851
步骤5
将900mg1005-E、1.0ml叔-丁基胺及0.4ml NMM在40ml DCM中的混合物于室温下搅拌0.5小时，以1M KHSO4溶液、盐水洗涤，经MgSO4干燥。蒸发溶剂，获得445mg粗产物，使其在硅胶上，以DCM与DCM中的5％EtOAc纯化。获得617mg1005-F。MS：379[M+Na]+。
步骤6
将600mg1005-F、2.64g碳酸铯和0.5ml甲基碘在10ml无水DMF中的混合物于室温下搅拌过夜，以50ml冰冷水稀释，并以2x50mlEtOAc萃取。将合并的有机溶液以水洗涤两次，用盐水洗涤一次，经MgSO4干燥。于真空下除去溶剂，获得620mg 1005-G，为白色固体。MS：385[M+H]+.
步骤7
将1005-G(600mg)与Pd(OH)2(70mg)在MeOH中的溶液，于氢气氛下放置过夜。过滤固体，并以MeOH充分洗涤。于减压下除去挥发性物质，得到胺(1005-J；380mg)。
MS：251[M+H]+。
步骤8
向所述盐酸盐(Bachem；2.24g)在二氯甲烷(50ml)中的溶液中加入NMM(2.6ml)，接着加入氯甲酸对-硝基苯酯(2.42g)，并将所形成的混合物在室温下搅拌过夜。将反应混合物以冷1N HCl水溶液、饱和碳酸氢钠水溶液洗涤，干燥，及在减压下除去挥发性物质。使粗制反应产物经硅胶层析，使用EtOAc∶己烷(1∶10)作为洗脱液，得到氨基甲酸酯(1005-K；2.97g)。
步骤9
Figure BDA00002167589505861
使用步骤8中所提出的程序，氨基甲酸酯1005-L由胺-盐酸盐1.04制备。
步骤10
Figure BDA00002167589505862
将NMM(0.12ml)添加至胺(1005-J；0.20g)与氨基甲酸酯(1005-L；0.375g)在乙腈(15ml)中的混合物中，并将所形成的混合物于室温及氮气氛下搅拌过夜。于减压下除去挥发性物质，并使残留物在EtOAc与水之间分配。分离有机相，干燥，并浓缩。使粗制反应产物经硅胶柱层析纯化，使用EtOAc∶己烷(2∶3)作为洗脱液，提供所需的脲(1005-M；0.43g)。MS：559.28[M+H]+。
步骤11
Figure BDA00002167589505871
将水(2ml)中的氢氧化锂(0.020g)添加至甲酯(1005-M；0.41g)在二氧六环(15ml)中的溶液中，并将所形成的混合物于室温下搅拌过夜。添加HCl水溶液(0.01N)，并将有机物质萃取于EtOAc中。分离有机相，干燥，并浓缩，得到羧酸(1005-N；0.395g)。MS：545.32[M+H]+。
步骤12
Figure BDA00002167589505872
于-20℃及氮气氛下，将Hunig氏碱(0.050ml)添加至羧酸(1005-N；0.030g)及其盐酸盐(13.01；0.015g)在二氯甲烷(5ml)中的混合物中。使反应物在此温度下保持20小时。水溶液处理获得粗制反应产物(1005-O)，将其使用于下文步骤12。
步骤13
Figure BDA00002167589505873
向二氯甲烷(3ml)中的粗制物(1005-O；上文步骤11)中加入Dess-Martin Periodinane(0.050g)，并将所形成的混合物在室温下搅拌24小时。水溶液处理，及硅胶板层析，使用二氯甲烷∶甲醇(20∶1)作为洗脱液，获得所需的α-酮基-酰胺(0.0282g)，为白色固体。Ki*范围为：A＝＜75nM；B＝75-250nM；C＝＞250nM。
表4
Figure BDA00002167589505881
Figure BDA00002167589505901
表4A列出代表本发明的另外的其它化合物：
表4A
Figure BDA00002167589505911
Figure BDA00002167589505941
Figure BDA00002167589505951
Figure BDA00002167589505961
Figure BDA00002167589505971
Figure BDA00002167589505981
本发明涉及新的HCV蛋白酶抑制剂。可在其抑制HCV NS3/NS4a丝氨酸蛋白酶的能力上，证明该用途。通过下列的体外测定，说明这类证明的一般程序。
HCV蛋白酶抑制活性的测定：
分光光度计测定：可通过依据R.Zhang等，Analytical Biochemistry，270(1999)268-275描述的程序(其公开内容以引用的方式结合到本文中)，对本发明的化合物进行HCV丝氨酸蛋白酶的分光光度测定。该测定以适合连续监视HCV NS3蛋白酶活性的色原酯(chromogenic ester)酶解物的蛋白水解作用为基础。该酶解物衍生自NS5A-NS5B接合序列的P侧(Ac-DTEDVVX(Nva)，其中X＝A或P)，其C-终端羧基基团被用四个不同发色团的醇(3-或4-硝基酚、7-羟基-4-甲基-香豆素或4-苯基偶氮苯酚)之一酯化。下文解释了这些新的分光光度测定的酯酶解物的合成、鉴定和应用，以便进行HCV NS3蛋白酶抑制剂的高通过量筛选和详细的动力学评估。
材料和方法：
材料：从Sigma Chemical Company(St.Louis，Missouri)获得与测定有关的缓冲液的化学试剂。肽合成的试剂则得自Aldrich Chemicals、Novabiochem(San Diego，California)、Applied Biosystems(Foster City，California)和Perseptive Biosystems(Framingham，Massachusetts)。以手工或在自动ABI 431A型合成器(得自Applied Biosystems)上合成肽。UV/VIS分光计LAMBDA  12型得自Perkin  Elmer(NorwalK，Connecticut)，而96-孔UV培养板则获自Corning(Corning，New York)。预热块可得自USA Scientific(Ocala，Florida)，且96-孔培养板旋转器(vortexer)则得自Labline Instruments(Melrose Park，Illinois)。具有单色仪的Spectramax Plus微量滴定板读取器获自MolecularDevices(Sunnyvale，California)。
酶制备：通过使用先前发表的程序(D.L.Sali等，Biochemistry，37(1998)3392-3401)，制备重组的异种二聚体的HCV NS3/NS4a蛋白酶(strain 1a)。通过Biorad染色法，使用先前通过氨基酸分析定量的重组HCV蛋白酶标准物，确定蛋白浓度。在开始测定的前，使用BioradBio-Spin P-6预先包装的管柱，以测定缓冲液(25mM MOPS pH 6.5、300mM NaCl、10％甘油、0.05％月桂基麦芽糖苷、5μM EDTA和5μM DTT)交换酶储备缓冲液(50mM磷酸钠pH 8.0、300mM NaCl、10％甘油、0.05％月桂基麦芽糖苷和10mM DTT)。
酶解物合成和纯化：按照R.Zhang等(出处同上)的报告，进行酶解物的合成，并通过使用标准方案(K.Barlos等，Int.J.Pept.Protein Res.，37(1991)，513-520)，使Fmoc-Nva-OH锚定在2-氯三苯甲基氯树脂上来启动。接着使用Fmoc化学，以手工或在自动ABI 431型肽合成器上组装肽。通过在二氯甲烷(DCM)中的10％乙酸(HOAc)和10％三氟乙醇(TFE)处理30分钟，或通过在二氯甲烷(DCM)中的2％三氟乙酸(TFA)处理10分钟，从树脂上裂解N-乙酰化且完全保护的肽片段。以共沸方式蒸发合并的滤液和DCM洗涤液(或以Na2CO3水溶液重复萃取)，除去在裂解时使用的酸。将DCM相经Na2SO4干燥，并蒸发。
使用标准酸-醇偶联程序(K.Holmber等，Acta Chem.Scand.，B33(1979)410-412)，组装酯酶解物。将肽片段溶解于无水吡啶(30-60mg/mL)中，在其中加入10摩尔当量的发色团和催化量(0.1当量)的对-甲苯磺酸(pTSA)。加入二环己基碳化二亚胺(DCC，3当量)，以启动偶联反应。通过HPLC监测产物形成，并可发现在室温下12-72小时后完成反应。在真空下蒸发吡啶溶剂，并通过与甲苯共沸蒸发进一步除去。用在DCM中的95％TFA处理2小时，将肽酯脱保护，并以无水的二乙醚萃取3次，除去过量的发色团。在C3或C8管柱上，使用30％至60％乙腈梯度(使用6倍的柱体积)，通过逆相HPLC纯化脱保护的酶解物。在HPLC纯化后的整体产率可能是大约20-30％。可通过电喷雾电离质谱分析，证实分子质量。以干粉形式将酶解物在干燥条件下储存。
酶解物和产物的光谱：在pH 6.5测定缓冲液中，获得酶解物和相应的发色团产物的光谱。在最佳非高峰波长处(对3-Np和HMC为340nm，对PAP为370nm，而对4-Np为400nm)，在1-cm比色杯中，使用多倍稀释测定消光系数。将最佳非高峰波长定义为在酶解物与产物之间，产生吸光度的最大分数差异(产物OD-酶解物OD/酶解物OD)的波长。
蛋白酶测定：在30℃下，在96-孔微量滴定板中，使用200μl反应混合物进行HCV蛋白酶测定。测定缓冲液条件(25mM MOPS pH 6.5，300mM NaCl，10％甘油，0.05％月桂基麦芽糖苷，5μM EDTA和5uMDTT)是最适合NS3/NS4a异二聚体(heterodimer)的(D.L. Sali等，出处同上)。通常，将缓冲液、酶解物和抑制剂的150μl混合物放在孔中(DMSO的终浓度≤4％体积/体积)，并容许在30℃下预先温育大约3分钟。然后使用50μl在测定缓冲液中的预热的蛋白酶(12nM，30℃)启动反应(终体积200μl)。在整个测定长度(60分钟)内，使用装有单色仪的Spectromax Plus微量滴定板读取器，在合适的波长下(对3-Np和HMC为340nm，对PAP为370nm，而对4-Np为400nm)，监测培养板的吸光度变化(可利用使用截止滤纸的培养板读取器获得可接受的结果)。在合适的波长下，对作为无-酶水解作用的对照组的无酶空白组，监视在Nva和发色团之间的酯键的氮白水解裂解作用。在30-倍酶解物浓度范围(～6-200μM)内，进行酶解物动力学参数的评估。使用线性回归确定初速，并通过使用非线性回归分析，使数据拟合Michaelis-Menten方程式，获得动力学常数(Mac Curve Fit 1.1，K.Raner)。在假定酶完全是有活性的情况下计算转换数(Turnover number)(kcat)。
评估抑制剂和失活剂：在固定浓度的酶和酶解物下，根据为了竞争性抑制动力学而重新整理的Michaelis-Menten方程式：vo/vi＝1+[I]o/(Ki(1+[S]o/Km))，通过vo/vi对抑制剂浓度([I]o)作图，以实验方式确定竞争抑制剂Ac-D-(D-Gla)-L-I-(Cha)-C-OH(27)、Ac-DTEDVVA(Nva)-OH和Ac-DTEDVVP(Nva)-OH的抑制常数(Ki)，其中vo为未被抑制的初速，vi为在抑制剂存在下，在任何给定的抑制剂浓度([I]o)下的初速，及[S]o是所使用的酶解物浓度。使用线性回归拟合所得数据，并使用所得的斜率1/(Ki(1+[S]o/Km)来计算Ki值。下文表5列出一些本发明化合物所得的Ki*值(以毫微摩尔浓度表示)。数种其它化合物在前文页数的表中指出。
表5
Figure BDA00002167589506011
Figure BDA00002167589506031
Figure BDA00002167589506041
虽然已经结合上文所述的具体实施方案一起说明本发明，但其许多改变、修饰和其它变化对本领域普通技术人员而言将是显而易见的。打算使所有的这类改变、修饰和变化落入本发明的精神及范围内。

Claims (1)

1.一种显示HCV蛋白酶抑制活性的化合物，或所述化合物的对映体、立体异构体、旋转异构体、互变异构体及外消旋物，或所述化合物的药学上可接受盐或溶剂合物或酯，所述化合物具有以下结构：
Figure FDA00002167589400011
CN2012103533032A 2004-02-27 2005-02-24 作为丙型肝炎病毒ns3丝氨酸蛋白酶抑制剂的硫化合物 Pending CN103102389A (zh)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US54867004P 2004-02-27 2004-02-27
US60/548670 2004-02-27

Related Parent Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CNA2005800128593A Division CN101076516A (zh) 2004-02-27 2005-02-24 作为丙型肝炎病毒ns3丝氨酸蛋白酶抑制剂的硫化合物

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN103102389A true CN103102389A (zh) 2013-05-15

Family

ID=34961556

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN2012103533032A Pending CN103102389A (zh) 2004-02-27 2005-02-24 作为丙型肝炎病毒ns3丝氨酸蛋白酶抑制剂的硫化合物
CNA2005800128593A Pending CN101076516A (zh) 2004-02-27 2005-02-24 作为丙型肝炎病毒ns3丝氨酸蛋白酶抑制剂的硫化合物

Family Applications After (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CNA2005800128593A Pending CN101076516A (zh) 2004-02-27 2005-02-24 作为丙型肝炎病毒ns3丝氨酸蛋白酶抑制剂的硫化合物

Country Status (31)

Country Link
US (1) US8067379B2 (zh)
EP (1) EP1730110B9 (zh)
JP (1) JP4714732B2 (zh)
KR (2) KR101316137B1 (zh)
CN (2) CN103102389A (zh)
AR (1) AR048241A1 (zh)
AT (1) ATE470660T1 (zh)
AU (1) AU2005222060A1 (zh)
BR (1) BRPI0508085A (zh)
CA (1) CA2557495C (zh)
CY (1) CY1111212T1 (zh)
DE (1) DE602005021760D1 (zh)
DK (1) DK1730110T3 (zh)
EC (1) ECSP066791A (zh)
ES (1) ES2346233T3 (zh)
HK (1) HK1095819A1 (zh)
HR (1) HRP20100416T1 (zh)
IL (1) IL177544A (zh)
MY (1) MY145081A (zh)
NO (1) NO20064358L (zh)
NZ (1) NZ549223A (zh)
PE (1) PE20051150A1 (zh)
PL (1) PL1730110T3 (zh)
PT (1) PT1730110E (zh)
RS (1) RS51394B (zh)
RU (1) RU2428428C9 (zh)
SG (1) SG186041A1 (zh)
SI (1) SI1730110T1 (zh)
TW (2) TWI314927B (zh)
WO (1) WO2005087731A1 (zh)
ZA (1) ZA200607096B (zh)

Families Citing this family (64)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
IL129407A0 (en) 1996-10-18 2000-02-17 Vertex Pharma Inhibitors of serine proteases particularly hepatitis C virus NS3 protease pharmaceutical compositions containing the same and the use thereof
MY145081A (en) * 2004-02-27 2011-12-15 Schering Corp Sulfur compounds as inhibitors of hepatitis c virus ns3 serine protease
US7816326B2 (en) 2004-02-27 2010-10-19 Schering Corporation Sulfur compounds as inhibitors of hepatitis C virus NS3 serine protease
GB0426661D0 (en) * 2004-12-06 2005-01-05 Isis Innovation Pyrrolidine compounds
US20060275366A1 (en) * 2005-06-02 2006-12-07 Schering Corporation Controlled-release formulation
AU2006252553B2 (en) * 2005-06-02 2012-03-29 Merck Sharp & Dohme Corp. Combination of HCV protease inhibitors with a surfactant
US20060276406A1 (en) * 2005-06-02 2006-12-07 Schering Corporation Methods of treating hepatitis C virus
WO2006130554A2 (en) * 2005-06-02 2006-12-07 Schering Corporation Methods of treating hepatitis c virus
US20070021351A1 (en) * 2005-06-02 2007-01-25 Schering Corporation Liver/plasma concentration ratio for dosing hepatitis C virus protease inhibitor
WO2006130686A2 (en) 2005-06-02 2006-12-07 Schering Corporation Hcv protease inhibitors in combination with food
US20060276404A1 (en) * 2005-06-02 2006-12-07 Anima Ghosal Medicaments and methods combining a HCV protease inhibitor and an AKR competitor
US20070237818A1 (en) * 2005-06-02 2007-10-11 Malcolm Bruce A Controlled-release formulation of HCV protease inhibitor and methods using the same
WO2006130607A2 (en) * 2005-06-02 2006-12-07 Schering Corporation Controlled-release formulation useful for treating disorders associated with hepatitis c virus
US20060281689A1 (en) * 2005-06-02 2006-12-14 Schering Corporation Method for modulating activity of HCV protease through use of a novel HCV protease inhibitor to reduce duration of treatment period
AR055395A1 (es) 2005-08-26 2007-08-22 Vertex Pharma Compuestos inhibidores de la actividad de la serina proteasa ns3-ns4a del virus de la hepatitis c
US7816348B2 (en) 2006-02-03 2010-10-19 Boehringer Ingelheim International Gmbh Viral polymerase inhibitors
JP2009528353A (ja) * 2006-03-03 2009-08-06 シェーリング コーポレイション Ｈｃｖのプロテアーゼ阻害剤およびｉｒｅｓ阻害剤の医薬的組み合わせ
MX2008011869A (es) 2006-03-16 2008-12-03 Vertex Pharma Procedimientos e intermediarios para preparar compuestos estericos.
WO2007111866A2 (en) * 2006-03-23 2007-10-04 Schering Corporation Combinations of hcv protease inhibitor(s) and cyp3a4 inhibitor(s), and methods of treatment related thereto
CA2643680A1 (en) 2006-04-11 2007-11-22 Novartis Ag Hcv/hiv inhibitors and their uses
DE102006059317A1 (de) 2006-07-04 2008-01-10 Evonik Degussa Gmbh Verfahren zur Herstellung von β-Amino-α-hydroxy-carbonsäureamiden
RU2009109355A (ru) 2006-08-17 2010-09-27 БЕРИНГЕР ИНГЕЛЬХАЙМ ИНТЕРНАЦИОНАЛЬ ГмбХ (DE) Ингибиторы вырусной полимеразы
MX2009006056A (es) * 2006-12-07 2009-06-16 Schering Corp Formulacion de matriz sensible al ph.
JP5153648B2 (ja) * 2006-12-22 2013-02-27 住友精化株式会社 ３−ベンジルオキシベンゼンチオールの製造方法
KR20090106539A (ko) 2006-12-22 2009-10-09 쉐링 코포레이션 Ｈｃｖ 및 관련 바이러스 감염을 치료 또는 예방하기 위한 4,5-환 환상 인돌 유도체
AU2007339382B2 (en) 2006-12-22 2013-05-02 Merck Sharp & Dohme Llc 4,5-ring annulated indole derivatives for treating or preventing of HCV and related viral infections
EP2081922B1 (en) 2006-12-22 2012-02-01 Schering Corporation 5,6-Ring annulated indole derivatives and use thereof
US8242140B2 (en) 2007-08-03 2012-08-14 Boehringer Ingelheim International Gmbh Viral polymerase inhibitors
AU2008295476B2 (en) 2007-08-29 2013-08-01 Merck Sharp & Dohme Corp. 2, 3-Substituted Indole Derivatives for treating viral infections
MX2010002317A (es) 2007-08-29 2010-03-22 Schering Corp Derivados de indol sustituidos y metodos para su utilizacion.
EP2195317B1 (en) 2007-08-29 2012-01-18 Schering Corporation 2,3-substituted azaindole derivatives for treating viral infections
WO2009038663A1 (en) 2007-09-14 2009-03-26 Schering Corporation Method of treating hepatitis c patients
KR101218882B1 (ko) * 2007-10-10 2013-01-07 노파르티스 아게 스피로피롤리딘, 및 ｈｃｖ 및 ｈｉｖ 감염에 대한 그의 용도
WO2009064852A1 (en) 2007-11-16 2009-05-22 Schering Corporation 3-aminosulfonyl substituted indole derivatives and methods of use thereof
CN102099351A (zh) 2007-11-16 2011-06-15 先灵公司 3-杂环取代的吲哚衍生物及其使用方法
JP5623289B2 (ja) 2007-12-19 2014-11-12 ベーリンガーインゲルハイム インターナショナル ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツング ウイルスポリメラーゼインヒビター
US7964560B2 (en) * 2008-05-29 2011-06-21 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
JP5580814B2 (ja) 2008-06-13 2014-08-27 メルク・シャープ・アンド・ドーム・コーポレーション ３環式インドール誘導体およびその使用方法
WO2010017432A1 (en) * 2008-08-07 2010-02-11 Schering Corporation Pharmaceutical formulations of an hcv protease inhibitor in a solid molecular dispersion
US8188137B2 (en) 2008-08-15 2012-05-29 Avila Therapeutics, Inc. HCV protease inhibitors and uses thereof
WO2010068714A2 (en) 2008-12-12 2010-06-17 Schering Corporation Deuterated compounds as hepatitis c virus (hcv) inhibitors
AU2010203656A1 (en) 2009-01-07 2011-07-21 Scynexis, Inc. Cyclosporine derivative for use in the treatment of HCV and HIV infection
US8512690B2 (en) 2009-04-10 2013-08-20 Novartis Ag Derivatised proline containing peptide compounds as protease inhibitors
AU2010253791A1 (en) 2009-05-29 2011-11-24 Merck Sharp & Dohme Corp. Antiviral compounds composed of three linked Aryl moieties to treat diseases such as Hepatitis C
AU2010276490B2 (en) * 2009-07-29 2013-11-14 Merck Sharp & Dohme Corp. Enantio- and stereo-specific syntheses of beta-amino-alpha- hydroxy amides
AU2010324871A1 (en) 2009-11-25 2012-06-14 Merck Sharp & Dohme Corp. Fused tricyclic compounds and derivatives thereof useful for the treatment of viral diseases
AU2010341537A1 (en) 2009-12-22 2012-08-09 Merck Sharp & Dohme Corp. Fused Tricyclic Compounds and methods of use thereof for the treatment of viral diseases
SG183526A1 (en) 2010-03-09 2012-09-27 Merck Sharp & Dohme Fused tricyclic silyl compounds and methods of use thereof for the treatment of viral diseases
JP2013541499A (ja) 2010-07-26 2013-11-14 メルク・シャープ・エンド・ドーム・コーポレイション 置換されたビフェニレン化合物およびウイルス性疾患の治療のためのその使用方法
WO2012042539A2 (en) 2010-09-28 2012-04-05 Panacea Biotec Ltd Novel bicyclic compounds
AU2011314168A1 (en) 2010-09-29 2013-04-04 Merck Sharp & Dohme Corp. Fused tetracycle derivatives and methods of use thereof for the treatment of viral diseases
WO2012073249A1 (en) 2010-12-01 2012-06-07 Arch Pharmalabs Limited A novel process for the preparation of 3-(benzyloxy)- benzenethiol, a key intermediate for the preparation of pharmaceutical drugs.
US9156872B2 (en) 2011-04-13 2015-10-13 Merck Sharp & Dohme Corp. 2′-azido substituted nucleoside derivatives and methods of use thereof for the treatment of viral diseases
BR112013026345A2 (pt) 2011-04-13 2019-04-24 Merck Sharp & Dohe Corp. composto, composição farmacêutica, uso de um composto, e, método para tratar um paciente infectado com hcv
WO2013033901A1 (en) 2011-09-08 2013-03-14 Merck Sharp & Dohme Corp. Heterocyclic-substituted benzofuran derivatives and methods of use thereof for the treatment of viral diseases
WO2013033899A1 (en) 2011-09-08 2013-03-14 Merck Sharp & Dohme Corp. Substituted benzofuran compounds and methods of use thereof for the treatment of viral diseases
WO2013033900A1 (en) 2011-09-08 2013-03-14 Merck Sharp & Dohme Corp. Tetracyclic heterocycle compounds and methods of use thereof for the treatment of viral diseases
EP2755981A4 (en) 2011-09-14 2015-03-25 Merck Sharp & Dohme HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING SILYL AND METHODS OF USING THE SAME FOR TREATING VIRAL DISEASES
WO2015065817A1 (en) 2013-10-30 2015-05-07 Merck Sharp & Dohme Corp. Pseudopolymorphs of an hcv ns5a inhibitor and uses thereof
CA3000709A1 (en) * 2015-10-01 2017-04-06 Memorial Sloan-Kettering Cancer Center Inhibitors of menaquinone biosynthesis
WO2017059446A1 (en) * 2015-10-01 2017-04-06 Memorial Sloan-Kettering Cancer Center Anthranilyl-adenosinemonosulfamate analogs and uses thereof
CN109563033B (zh) * 2016-06-21 2023-04-04 奥瑞恩眼科有限责任公司 脂族脯氨酰胺衍生物
US20230218644A1 (en) 2020-04-16 2023-07-13 Som Innovation Biotech, S.A. Compounds for use in the treatment of viral infections by respiratory syndrome-related coronavirus
US11351149B2 (en) 2020-09-03 2022-06-07 Pfizer Inc. Nitrile-containing antiviral compounds

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2003062265A2 (en) * 2002-01-18 2003-07-31 Schering Corporation Novel peptides as ns3-serine protease inhibitors of hepatitis c virus

Family Cites Families (20)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CA2079105C (en) * 1990-04-04 2000-06-13 Michael Houghton Hepatitis c virus protease
US5922757A (en) 1996-09-30 1999-07-13 The Regents Of The University Of California Treatment and prevention of hepatic disorders
IL129407A0 (en) 1996-10-18 2000-02-17 Vertex Pharma Inhibitors of serine proteases particularly hepatitis C virus NS3 protease pharmaceutical compositions containing the same and the use thereof
GB9623908D0 (en) 1996-11-18 1997-01-08 Hoffmann La Roche Amino acid derivatives
NZ503263A (en) 1997-08-11 2002-10-25 Boehringer Ingelheim Ca Ltd Hepatitis C NS3 protease inhibitor peptides and peptide analogues
US6323180B1 (en) * 1998-08-10 2001-11-27 Boehringer Ingelheim (Canada) Ltd Hepatitis C inhibitor tri-peptides
AR022061A1 (es) 1998-08-10 2002-09-04 Boehringer Ingelheim Ca Ltd Peptidos inhibidores de la hepatitis c, una composicion farmaceutica que los contiene, el uso de los mismos para preparar una composicion farmaceutica, el uso de un producto intermedio para la preparacion de estos peptidos y un procedimiento para la preparacion de un peptido analogo de los mismos.
US6608027B1 (en) * 1999-04-06 2003-08-19 Boehringer Ingelheim (Canada) Ltd Macrocyclic peptides active against the hepatitis C virus
DE60111509T2 (de) 2000-04-03 2006-05-11 Vertex Pharmaceuticals Inc., Cambridge Inhibitoren von Serin-Proteasen, insbesondere der Hepatitis-C-Virus NS23-Protease
PL359359A1 (en) 2000-04-05 2004-08-23 Schering Corporation Macrocyclic ns3-serine protease inhibitors of hepatitis c virus comprising n-cyclic p2 moieties
CZ20023473A3 (cs) 2000-04-19 2003-01-15 Schering Corporation Makrocyklická sloučenina a farmaceutický prostředek
AR029851A1 (es) 2000-07-21 2003-07-16 Dendreon Corp Nuevos peptidos como inhibidores de ns3-serina proteasa del virus de hepatitis c
EP1301527A2 (en) 2000-07-21 2003-04-16 Corvas International, Inc. Peptides as ns3-serine protease inhibitors of hepatitis c virus
RU2355700C9 (ru) * 2000-07-21 2010-03-20 Шеринг Корпорейшн Новые пептиды как ингибиторы ns3-серинпротеазы вируса гепатита с
BR0112666A (pt) 2000-07-21 2003-06-10 Schering Corp Peptìdeos como inibidores de ns3-serina protease de vìrus da hepatite c
SV2003000617A (es) 2000-08-31 2003-01-13 Lilly Co Eli Inhibidores de la proteasa peptidomimetica ref. x-14912m
ES2324594T3 (es) * 2000-12-12 2009-08-11 Schering Corporation Diaril peptidicos utilizados como inhibidores de la serina proteasa ns3 del virus de la hepatitis c.
US7816326B2 (en) * 2004-02-27 2010-10-19 Schering Corporation Sulfur compounds as inhibitors of hepatitis C virus NS3 serine protease
MY145081A (en) 2004-02-27 2011-12-15 Schering Corp Sulfur compounds as inhibitors of hepatitis c virus ns3 serine protease
AU2006252553B2 (en) 2005-06-02 2012-03-29 Merck Sharp & Dohme Corp. Combination of HCV protease inhibitors with a surfactant

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2003062265A2 (en) * 2002-01-18 2003-07-31 Schering Corporation Novel peptides as ns3-serine protease inhibitors of hepatitis c virus

Also Published As

Publication number Publication date
SG186041A1 (en) 2012-12-28
WO2005087731A8 (en) 2006-06-22
CA2557495A1 (en) 2005-09-22
RU2006134003A (ru) 2008-04-10
DE602005021760D1 (de) 2010-07-22
HK1095819A1 (en) 2007-07-27
PE20051150A1 (es) 2006-01-16
CN101076516A (zh) 2007-11-21
US20070042968A1 (en) 2007-02-22
ECSP066791A (es) 2006-11-16
AU2009225346A1 (en) 2009-11-05
BRPI0508085A (pt) 2007-07-17
TWI314927B (en) 2009-09-21
RS51394B (en) 2011-02-28
HRP20100416T1 (hr) 2010-09-30
KR20130018418A (ko) 2013-02-21
AU2005222060A1 (en) 2005-09-22
IL177544A (en) 2015-02-26
EP1730110B1 (en) 2010-06-09
CY1111212T1 (el) 2015-06-11
TWI393704B (zh) 2013-04-21
RU2428428C2 (ru) 2011-09-10
EP1730110B9 (en) 2011-11-02
ES2346233T3 (es) 2010-10-13
CA2557495C (en) 2014-04-15
TW200530183A (en) 2005-09-16
KR20060134083A (ko) 2006-12-27
NZ549223A (en) 2010-10-29
EP1730110A1 (en) 2006-12-13
IL177544A0 (en) 2006-12-10
RU2428428C9 (ru) 2012-03-10
TW200938526A (en) 2009-09-16
AR048241A1 (es) 2006-04-12
JP4714732B2 (ja) 2011-06-29
JP2007525514A (ja) 2007-09-06
ZA200607096B (en) 2008-09-25
PT1730110E (pt) 2010-09-14
SI1730110T1 (sl) 2010-10-29
ATE470660T1 (de) 2010-06-15
MY145081A (en) 2011-12-15
PL1730110T3 (pl) 2010-11-30
WO2005087731A1 (en) 2005-09-22
NO20064358L (no) 2006-11-24
KR101316137B1 (ko) 2013-10-10
DK1730110T3 (da) 2010-09-27
US8067379B2 (en) 2011-11-29

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN103102389A (zh) 作为丙型肝炎病毒ns3丝氨酸蛋白酶抑制剂的硫化合物
CN100509784C (zh) 丙型肝炎病毒ns3/ns4a丝氨酸蛋白酶的抑制剂
TWI302835B (en) 3,4-(cyclopentyl)-fused proline compounds as inhibitors of hepatitis c virus ns3 serine protease
EP1939213B1 (en) Novel compounds as inhibitors of hepatitis C virus NS3 serine protease
US7718691B2 (en) Compounds as inhibitors of hepatitis C virus NS3 serine protease
JP4745327B2 (ja) Ｃ型肝炎ウイルスｎｓ３プロテアーゼのインヒビター
EP1730142B1 (en) Novel ketoamides with cyclic p4's as inhibitors of ns3 serine protease of hepatitis c virus
US7550559B2 (en) Acylsulfonamide compounds as inhibitors of hepatitis C virus NS3 serine protease
CN1984922A (zh) 用作丙型肝炎病毒ns3丝氨酸蛋白酶抑制剂的取代脯氨酸
MXPA06009814A (en) Inhibitors of hepatitis c virus ns3 protease

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C12 Rejection of a patent application after its publication
RJ01 Rejection of invention patent application after publication

Application publication date: 20130515