CN103073617B

CN103073617B - N(2)-l-丙氨酰-l-谷氨酰胺的化合物

Info

Publication number: CN103073617B
Application number: CN201210579815.0A
Authority: CN
Inventors: 王震; 杨朝福; 郑方晔; 李成利; 邓洪丽
Original assignee: XI'AN WANLONG PHARMACEUTICAL CO Ltd
Current assignee: XI'AN WANLONG PHARMACEUTICAL CO Ltd
Priority date: 2012-12-27
Filing date: 2012-12-27
Publication date: 2014-03-05
Anticipated expiration: 2032-12-27
Also published as: CN103073617A

Abstract

本发明提供N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺（分子式为：C₈H₁₅N₃O₄）的III型结晶，其溶解性和稳定性更好。同时，本发明还提供了所述新晶体的制备方法，包含它的药物组合物及制剂，特别是注射液。

Description

N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺的化合物

发明领域

本发明涉及N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺（分子式为：C₈H₁₅N₃O₄）的化合物。

背景技术

N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺（分子式为：C₈H₁₅N₃O₄）是一种较理想的静脉补充谷氨酰胺的物质，在体内能迅速转化为谷氨酰胺而被利用。N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺可在体内分解为谷氨酰胺和丙氨酸的特性使经由肠外营养输液补充谷氨酰胺成为可能。双肽分解释放出的氨基酸作为营养物质各自储存在身体的相应部位并随机体的需要进行代谢。

在严重的应激状态下，机体组织细胞对其利用量增加，并超过生成量。因此，若不补充足够的谷氨酰胺，将产生谷氨酰胺的相对缺乏。用N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺强化后的肠外营养不仅能明显促进患者蛋白质的合成，恢复正氮平衡，而且能较快地提高机体的免疫指标，防治免疫功能障碍。同时，N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺还可减少单纯肠外营养对肝功能的损害，减少血葡萄糖的波动、促进葡萄糖的利用，提高机体对营养支持的耐受性，对减少并发症、改善预后均有积极意义。

现有技术中，一些文献公开了N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺（分子式为：C₈H₁₅N₃O₄）本身的合成；在结晶方面，ZL 200510009619.X中公开了N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺无菌粉末制剂，及其制备方法，经过加水、加热搅拌、溶解、加活性炭等步骤，最后得到白色结晶粉末。ZL 200610076056.0中公开了N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺的制备方法，经过4个步骤的制备后，最后精制得到白色结晶。

本发明人在生产实践中，经过悉心研究，发现了不同于现有技术的N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺的新结晶，它具有良好的医药性能，适合用于临床。

发明内容

本发明人发现了N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺（分子式为：C₈H₁₅N₃O₄）的新型结晶，为临床应用提供了更好的选择。

首先，相对于上述两种结晶，本发明提供N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺的III型结晶，使用Cu Kα₁X-射线(波长＝1.5406埃)获得的它的粉末X-射线衍射图，具有以4.08，4.77，5.73，6.80，7.17，7.91，8.27，9.62，9.99，11.66，12.70，13.70，14.30，15.42，15.90，16.80，17.51，18.06，18.42，20.48，20.95，23.27，23.72，24.78，25.18，25.82，26.10，26.64，26.96，27.90，28.85，29.70，31.08，34.18的2θ角度数(±0.1度)表示的峰。更具体地，具有如图1所示的粉末X-射线衍射图。

本发明的另一方面，提供了制备N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺（分子式为：C₈H₁₅N₃O₄）的III型结晶的方法，它包括：i)在30℃-约50℃的温度下，将N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺粉末溶于适当溶剂中；ii)在约30℃-约50℃的温度下搅拌该溶液10到15小时；iii)降温至5-10℃，收集析出的III型结晶。其中所述溶剂选自二噁烷或二甲基甲酰胺。

如果需要，还可以加入III型结晶的晶种来诱导结晶。

此外，本发明提供包含所述III型结晶的药物组合物。更具体地，该药物组合物进一步包含药学可接受的载体或赋形剂。

所施用的化合物的量的范围为约0.001到100mg/kg动物体重，一次或分次给予。可以单独施用或者与一种或多种其它药物联合施用。通常，它以与一种或多种药学可接受的赋形剂结合的制剂形式施用。在本发明中，赋形剂是指除了本发明化合物之外的任何成分。赋形剂的选择将主要取决于以下因素，例如具体的给药方式、赋形剂对溶解度和稳定性的影响以及剂型的特性等。

本发明的组合物可口服或注射给药。给药时，可以采用包含所述活性化合物胶囊或片剂形式的口服制剂。通过将活性成分与适当的稀释剂例如淀粉、乳糖、滑石粉、硬脂酸镁和植物胶等混合而制备这些剂型。

优选地，本发明的组合物可胃肠外给动物施用，例如，通过胃内、肌内或皮下注射，在这种情况下，将活性成分溶于或分散于液体载体中。对于胃肠外给药来说，可以将活性物质与可接受的载体例如水、植物油等适当地混合。也使用其它胃肠外载体，例如使用丙二醇、甘油等有机制剂。可以将活性化合物溶于或悬浮于胃肠外制剂中，这些制剂通常包含0.005到5％重量的活性化合物。

在一个优选的实施方案中，本发明提供N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺（分子式为：C₈H₁₅N₃O₄）的III型结晶的注射液。

本发明的N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺（分子式为：C₈H₁₅N₃O₄）的III型结晶具有更好的性能，特别是在溶解性和稳定性方面表现优良。特别适合作为注射液来用于临床。而其制备方法简单易控，适合工业化生产。

附图说明

图1是本发明的N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺III型结晶的粉末X-射线衍射图。

实施例

下列实施例更详细地描述了本发明，但是本发明并不仅限于此。

实施例1

在35℃下，将4.0gN(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺粉末缓慢加入到50ml二噁烷中，搅拌使之溶解，然后在该温度下搅拌该溶液14小时，降温开始析出结晶，降至5℃，结晶大量析出，过滤，用丙醇洗涤，干燥，收集得到3.2g的III型结晶。

该固体的粉末X-射线衍射图如图1所示。使用Scintag X2 Advanced Diffraction System(由ScintagDMS/NT 1.30a和Microsoft Windows NT 4.0软件操作)进行粉末X-射线衍射。该系统使用Cu X-射线源(45kV和40mA)来提供1.5406

的Cu Kα₁射线，以及固态Peltier冷却检测器。使用2和4mm的管发散缝隙和抗散射缝隙以及0.5和0.2mm宽的检测器抗散射缝隙和接受缝隙来控制射束孔径。使用计数时间为每步1秒，0.03°/步的分步扫描来收集2到50°(2θ)的数据。

本领域技术人员可以理解，各个峰的相对强度会由于许多因素而改变，例如结晶在X-射线束中的定向效应、物质的纯度等等。峰位也可移位，但是相对峰位将基本保持如图1中所示的峰位。

实施例2

在40℃下，将5.0g N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺粉末缓慢加入到50ml二甲基甲酰胺中，搅拌使之溶解，然后在该温度下搅拌该溶液12小时，降温开始析出结晶，降至8℃，结晶大量析出，过滤，用丙醇洗涤，干燥，收集得到4.2g的III型结晶。

该结晶的粉末X-射线衍射图与图1相似。

实施例3

在50℃下，将10.0g N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺粉末缓慢加入到100ml二甲基甲酰胺中，搅拌使之溶解，然后在该温度下搅拌该溶液15小时，降温开始析出结晶，降至5℃，结晶大量析出，过滤，用丙醇洗涤，干燥，收集得到8.3g的III型结晶。

该结晶的粉末X-射线衍射图与图1相似。

实施例4

在40℃下，将10.0g N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺粉末缓慢加入到110ml二噁烷中，搅拌使之溶解，然后在该温度下搅拌该溶液12小时，降温开始析出结晶，降至8℃，结晶大量析出，过滤，用丙醇洗涤，干燥，收集得到7.6g的III型结晶。

该结晶的粉末X-射线衍射图与图1相似。

实施例5 注射液

规格：100ml：N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺20g（相当于L-丙氨酸8.20g，L-谷氨酰胺13.46g）。

制备方法：按处方比例称取N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺，置于适当的无菌容器内，加入处方比例80%的注射用水，搅拌使溶解，投入所加注射用水体积0.1%（g/ml）的针用活性炭，搅拌，微沸（100℃）15min，趁热用钛滤棒过滤脱炭；

补液至所需量，用0.1mol/L的NaOH溶液调节pH值为5.4－6.0(上限为1000ml)，微孔滤膜滤过。进行中间体测定；

中间体测定合格后，灌装，轧盖。121℃热压灭菌8min；

全检，包装，入库。

实施例6 溶出试验

试验物质使用III型结晶(实施例1)、ZL 200510009619.X的I型结晶、ZL 200610076056.0的II型结晶和无定形体。将试验物质2g置于瓶中，将注射用水10mL加至该瓶中，将该瓶侧面固定，再通过MRK培养箱-振摇器(4cm的振摇宽度，50次/分钟的振摇速度)振摇。通过肉眼判断完全溶出，并且测定完全溶出所需的时间。试验分别进行3次，取平均值为溶出时间。结果列于下。

可见，本发明的III型结晶溶解速率更快，因此效果更好。

实施例7 稳定性试验

取供试品适量（即实施例6的样品），置温度为60℃条件下放置10天，于第10天取样测定，比较外观后，测试各项指标并将结果与0天比较。结果列于下表1。

表1

由上表1可知，这三种结晶在高温下的含量变化都要小于无定形体，表明它们的稳定性更好，其中本发明的III型结晶表现更为出色。

上面已经参照各种具体和优选的实施方案详细地描述了本发明，然而，可以理解的是，在此基础上进行的变化和改变都不脱离本发明的范围。

Claims

1.分子式为C₈H₁₅N₃O₄的N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺化合物，其特征在于，其为III型结晶化合物，由波长为1.5406埃的Cu Kα₁X-射线获得的它的粉末X-射线衍射图，具有以4.08±0.1°，4.77±0.1°，5.73±0.1°，6.80±0.1°，7.17±0.1°，7.91±0.1°，8.27±0.1°，9.62±0.1°，9.99±0.1°，11.66±0.1°，12.70±0.1°，13.70±0.1°，14.30±0.1°，15.42±0.1°，15.90±0.1°，16.80±0.1°，17.51±0.1°，18.06±0.1°，18.42±0.1°，20.48±0.1°，20.95±0.1°，23.27±0.1°，23.72±0.1°，24.78±0.1°，25.18±0.1°，25.82±0.1°，26.10±0.1°，26.64±0.1°，26.96±0.1°，27.90±0.1°，28.85±0.1°，29.70±0.1°，31.08±0.1°，34.18±0.1°的2θ角度数表示的峰。

2.权利要求1的化合物，其具有如图1所示的粉末X-射线衍射图。

3.制备权利要求1-2任一的N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺的III型结晶化合物的方法，包括：i)在30℃-50℃的温度下，将N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺粉末溶于适当溶剂中；ii)在30℃-50℃的温度下搅拌该溶液10到15小时；iii)降温至5-10℃，收集析出的III型结晶，其中所述溶剂选自二噁烷或二甲基甲酰胺。

4.权利要求3的方法，还加入III型结晶的晶种来诱导结晶。