具体实施方式
实施例1:化合物1-15的制备工艺及结构鉴定数据
化合物1的制备
称取黄连碱(102mg,0.29mmol)于反应瓶中,加入甲醇(4mL),放入冰水浴中,加入K2CO3(110mg,0.80mmol),将NaBH4(9mg,0.24mmol)溶解于5%NaOH(0.8mL)中,逐滴加入到反应瓶中,滴完后撤掉冰水浴,室温搅拌3h,原料反应完全,将反应液过滤,滤饼分别用30%乙醇(5mL)、80%乙醇(3mL)洗涤,得二氢黄连碱。
将二氢黄连碱用80%乙醇(3mL)溶解,逐滴加入HOAc(2mL),甲醛(0.7mL,7.03mmol),回流反应4h,原料反应完全,将反应液浓缩,加入2N HCl(2mL),室温反应1h,然后用氯仿/甲醇(v/v=10:1)萃取,有机相用无水MgSO4干燥,过滤,减压蒸除溶剂,粗品经硅胶柱层析[v/v=20:1(氯仿/甲醇)]纯化得黄色固体69mg,收率65.1%。
1H-NMR(DMSO-d6)δ(ppm):2.90(s,3H,ArCH3),3.10(t,J=5.4Hz,2H,NCH2CH 2),4.77(t,J=5.4Hz,2H,NCH 2CH2),6.17(s,2H,OCH2O),6.55(s,2H,OCH2O),7.13(s,1H,ArH),7.45(s,1H,ArH),7.97(d,J=9.0Hz,1H,ArH),8.05(d,J=9.0Hz,1H,ArH),9.95(s,1H,ArH).MS(m/z):334.2(M-Cl)+.
化合物2的制备
称取黄连碱(160mg,0.45mmol)于反应瓶中,加入甲醇(5mL),放入冰水浴中,加入K2CO3(175mg,1.27mmol),将NaBH4(17mg,0.45mmol)溶解于5%NaOH(1mL)中,逐滴加入到反应瓶中,滴完后撤掉冰水浴,室温搅拌3h,原料反应完全,将反应液过滤,滤饼分别用30%乙醇(6mL)、80%乙醇(3mL)洗涤,得二氢黄连碱。
将二氢黄连碱用80%乙醇(4mL)溶解,逐滴加入HOAc(2.5mL),乙醛(0.7mL,4.98mmol),回流反应4h,原料反应完全,将反应液浓缩,加入2N HCl(2mL),室温反应1h,然后用氯仿/甲醇(v/v=10:1)萃取,有机相用无水MgSO4干燥,过滤,减压蒸除溶剂,粗品经硅胶柱层析[v/v=20:1(氯仿/甲醇)]纯化得黄色固体70mg,收率40.7%。
1H-NMR(DMSO-d6)δ(ppm):1.44(t,J=6.9Hz,3H,CH2CH 3),3.07(t,J=5.1Hz,2H,NCH2CH 2),3.35(q,J=6.9Hz,2H,CH 2CH3),4.75(s,2H,NCH 2CH2),6.18(s,2H,OCH2O),6.55(s,2H,OCH2O),7.15(s,1H,ArH),7.29(s,1H,ArH),8.04(s,2H,ArH),9.97(s,1H,ArH).MS(m/z):348.2(M-Cl)+.
化合物3的制备
称取黄连碱(152mg,0.43mmol)于反应瓶中,加入甲醇(5mL),放入冰水浴中,加入K2CO3(162mg,1.17mmol),将NaBH4(16mg,0.42mmol)溶解于5%NaOH(1.5mL)中,逐滴加入到反应瓶中,滴完后撤掉冰水浴,室温搅拌3h,原料反应完全,将反应液过滤,滤饼分别用30%乙醇(6mL)、80%乙醇(3mL)洗涤,得二氢黄连碱。
将二氢黄连碱用80%乙醇(4mL)溶解,逐滴加入HOAc(2mL),丙醛(0.6mL,8.17mmol),回流反应4h,原料反应完全,将反应液浓缩,加入2N HCl(2mL),室温反应1h,然后用氯仿/甲醇(v/v=10:1)萃取,有机相用无水MgSO4干燥,过滤,减压蒸除溶剂,粗品经硅胶柱层析[v/v=20:1(氯仿/甲醇)]纯化得黄色固体68mg,收率40.0%。
1H-NMR(DMSO-d6)δ(ppm):0.97(t,J=7.2Hz,3H,CH2CH 3),1.78(m,2H,CH 2CH3),3.07(t,J=5.1Hz,2H,NCH2CH 2),3.26(m,2H,CH 2CH2CH3),4.75(t,J=5.1Hz,2H,NCH 2CH2),6.18(s,2H,OCH2O),6.55(s,2H,OCH2O),7.15(s,1H,ArH),7.24(s,1H,ArH),8.04(s,2H,ArH),9.96(s,1H,ArH).MS(m/z):362.2(M-Cl)+.
化合物4的制备
称取黄连碱(155mg,0.44mmol)于反应瓶中,加入甲醇(5mL),放入冰水浴中,加入K2CO3(155mg,1.12mmol),将NaBH4(14mg,0.37mmol)溶解于5%NaOH(1mL)中,逐滴加入到反应瓶中,滴完后撤掉冰水浴,室温搅拌3h,原料反应完全,将反应液过滤,滤饼分别用30%乙醇(6mL)、80%乙醇(3mL)洗涤,得二氢黄连碱。
将二氢黄连碱用80%乙醇(4mL)溶解,逐滴加入HOAc(2mL),丁醛(0.6mL,6.54mmol),回流反应4h,原料反应完全,将反应液浓缩,加入2N HCl(2mL),室温反应1h,然后用氯仿/甲醇(v/v=10:1)萃取,有机相用无水MgSO4干燥,过滤,减压蒸除溶剂,粗品经硅胶柱层析[v/v=20:1(氯仿/甲醇)]纯化得黄色固体56mg,收率31.1%。
1H-NMR(DMSO-d6)δ(ppm):0.90(t,J=7.2Hz,3H,CH2CH2CH2CH 3),1.40(q,J=7.2Hz,2H,CH2CH2CH 2CH3),1.76(br s,2H,CH2CH 2CH2CH3),3.08(br s,2H,NCH2CH 2),3.33(s,2H,CH 2CH2CH2CH3),4.75(br s,2H,NCH 2CH2),6.19(s,2H,OCH2O),6.56(s,2H,OCH2O),7.16(s,1H,ArH),7.29(s,1H,ArH),8.05(s,2H,ArH),9.96(s,1H,ArH).MS(m/z):376.2(M-Cl)+.
化合物5的制备
称取黄连碱(173mg,0.49mmol)于反应瓶中,加入甲醇(5mL),放入冰水浴中,加入K2CO3(180mg,1.30mmol),将NaBH4(16mg,0.42mmol)溶解于5%NaOH(1mL)中,逐滴加入到反应瓶中,滴完后撤掉冰水浴,室温搅拌3h,原料反应完全,将反应液过滤,滤饼分别用30%乙醇(6mL)、80%乙醇(3mL)洗涤,得二氢黄连碱。
将二氢黄连碱用80%乙醇(4mL)溶解,逐滴加入HOAc(2mL),异戊醛(0.6mL,5.36mmol),回流反应4h,原料反应完全,将反应液浓缩,加入2N HCl(2mL),室温反应1h,然后用氯仿/甲醇(v/v=10:1)萃取,有机相用无水MgSO4干燥,过滤,减压蒸除溶剂,粗品经硅胶柱层析[v/v=20:1(氯仿/甲醇)]纯化得黄色固体79mg,收率38.2%。
1H-NMR(DMSO-d6)δ(ppm):0.91(d,J=5.4Hz,6H,2CH3),1.68(s,3H,CH 2CH(CH3)2),3.06(t,J=5.1Hz,2H,NCH2CH 2),3.31(m,2H,ArCH2),4.15(s,2H,NCH 2CH2),6.17(s,2H,OCH2O),6.55(s,2H,OCH2O),7.15(s,1H,ArH),7.31(s,1H,ArH),7.98(d,J=9.3Hz,1H,ArH),8.04(d,J=9.0Hz,1H,ArH),9.96(s,1H,ArH).MS(m/z):390.2(M-Cl)+.
化合物6的制备
称取黄连碱(165mg,0.46mmol)于反应瓶中,加入甲醇(5mL),放入冰水浴中,加入K2CO3(175mg,1.27mmol),将NaBH4(16mg,0.42mmol)溶解于5%NaOH(1mL)中,逐滴加入到反应瓶中,滴完后撤掉冰水浴,室温搅拌3h,原料反应完全,将反应液过滤,滤饼分别用30%乙醇(6mL)、80%乙醇(3mL)洗涤,得二氢黄连碱。
将二氢黄连碱用80%乙醇(4mL)溶解,逐滴加入HOAc(2mL),戊醛(0.6mL,5.36mmol),回流反应4h,原料反应完全,将反应液浓缩,加入2N HCl(2mL),室温反应1h,然后用氯仿/甲醇(v/v=10:1)萃取,有机相用无水MgSO4干燥,过滤,减压蒸除溶剂,粗品经硅胶柱层析[v/v=20:1(氯仿/甲醇)]纯化得黄色固体74mg,收率37.4%。
1H-NMR(DMSO-d6)δ(ppm):0.84(t,J=7.2Hz,3H,CH2CH2(CH2)2CH 3),1.28-1.43(m,4H,CH2CH2(CH 2)2CH3),1.75(br s,2H,CH2CH 2(CH2)2CH3),3.07-3.08(m,2H,NCH2CH 2),3.31(br s,2H,CH 2CH2(CH2)2CH3),4.74(br s,2H,NCH 2CH2),6.18(s,2H,OCH2O),6.54(s,2H,OCH2O),7.15(s,1H,ArH),7.27(s,1H,ArH),8.03(s,2H,ArH),9.95(s,1H,ArH).MS(m/z):390.2(M-Cl)+.
化合物7的制备
称取黄连碱(183mg,0.51mmol)于反应瓶中,加入甲醇(5mL),放入冰水浴中,加入K2CO3(180mg,1.30mmol),将NaBH4(16mg,0.42mmol)溶解于5%NaOH(1mL)中,逐滴加入到反应瓶中,滴完后撤掉冰水浴,室温搅拌3h,原料反应完全,将反应液过滤,滤饼分别用30%乙醇(7mL)、80%乙醇(3mL)洗涤,得二氢黄连碱。
将二氢黄连碱用80%乙醇(5mL)溶解,逐滴加入HOAc(3mL),己醛(0.6mL,4.78mmol),回流反应4h,原料反应完全,将反应液浓缩,加入2N HCl(2mL),室温反应1h,然后用氯仿/甲醇(v/v=10:1)萃取,有机相用无水MgSO4干燥,过滤,减压蒸除溶剂,粗品经硅胶柱层析[v/v=20:1(氯仿/甲醇)]纯化得黄色固体48mg,收率21.2%。
1H-NMR(DMSO-d6)δ(ppm):0.83(t,J=6.9Hz,3H,CH2CH2(CH2)3CH 3),1.23-1.47(m,6H,CH2CH2(CH 2)3CH3),1.74(br s,2H,CH2CH 2(CH2)3CH3),3.06-3.08(m,2H,NCH2CH 2),3.30(br s,2H,CH 2CH2(CH2)3CH3),4.74(br s,2H,NCH 2CH2),6.18(s,2H,OCH2O),6.54(s,2H,OCH2O),7.15(s,1H,ArH),7.27(s,1H,ArH),8.03(s,2H,ArH),9.94(s,1H,ArH).MS(m/z):404.2(M-Cl)+.
化合物8的制备
称取黄连碱(183mg,0.51mmol)于反应瓶中,加入甲醇(5mL),放入冰水浴中,加入K2CO3(180mg,1.30mmol),将NaBH4(16mg,0.42mmol)溶解于5%NaOH(1mL)中,逐滴加入到反应瓶中,滴完后撤掉冰水浴,室温搅拌3h,原料反应完全,将反应液过滤,滤饼分别用30%乙醇(7mL)、80%乙醇(3mL)洗涤,得二氢黄连碱。
将二氢黄连碱用80%乙醇(5mL)溶解,逐滴加入HOAc(3mL),庚醛(0.7mL,5.05mmol),回流反应4h,原料反应完全,将反应液浓缩,加入2N HCl(2mL),室温反应1h,然后用氯仿/甲醇(v/v=10:1)萃取,有机相用无水MgSO4干燥,过滤,减压蒸除溶剂,粗品经硅胶柱层析[v/v=20:1(氯仿/甲醇)]纯化得黄色固体57mg,收率24.4%。
1H-NMR(DMSO-d6)δ(ppm):0.83(t,J=6.9Hz,3H,CH2CH2(CH2)4CH 3),1.10-1.46(m,8H,CH2CH2(CH 2)4CH3),1.74(br s,2H,CH2CH 2(CH2)4CH3),3.07-3.08(m,2H,NCH2CH 2),3.31(br s,2H,CH 2CH2(CH2)4CH3),4.74(br s,2H,NCH 2CH2),6.17(s,2H,OCH2O),6.54(s,2H,OCH2O),7.15(s,1H,ArH),7.28(s,1H,ArH),8.03(s,2H,ArH),9.94(s,1H,ArH).MS(m/z):418.2(M-Cl)+.
化合物9的制备
称取黄连碱(182mg,0.51mmol)于反应瓶中,加入甲醇(5mL),放入冰水浴中,加入K2CO3(178mg,1.29mmol),将NaBH4(16mg,0.42mmol)溶解于5%NaOH(1mL)中,逐滴加入到反应瓶中,滴完后撤掉冰水浴,室温搅拌3h,原料反应完全,将反应液过滤,滤饼分别用30%乙醇(7mL)、80%乙醇(3mL)洗涤,得二氢黄连碱。
将二氢黄连碱用80%乙醇(5mL)溶解,逐滴加入HOAc(3mL),辛醛(0.7mL,4.39mmol),回流反应4h,原料反应完全,将反应液浓缩,加入2N HCl(2mL),室温反应1h,然后用氯仿/甲醇(v/v=10:1)萃取,有机相用无水MgSO4干燥,过滤,减压蒸除溶剂,粗品经硅胶柱层析[v/v=20:1(氯仿/甲醇)]纯化得黄色固体43mg,收率18.0%。
1H-NMR(DMSO-d6)δ:0.83(t,J=6.9Hz,3H,CH2CH2(CH2)5CH 3),1.20-1.44(m,10H,CH2CH2(CH 2)5CH3),1.73(br s,2H,CH2CH 2(CH2)5CH3),3.06-3.07(m,2H,NCH2CH 2),3.30(br s,2H,CH 2CH2(CH2)5CH3),4.73(br s,2H,NCH 2CH2),6.17(s,2H,OCH2O),6.54(s,2H,OCH2O),7.14(s,1H,ArH),7.27(s,1H,ArH),8.02(s,2H,ArH),9.93(s,1H,ArH).MS(m/z):432.2(M-Cl)+.
化合物10的制备
称取黄连碱(182mg,0.51mmol)于反应瓶中,加入甲醇(5mL),放入冰水浴中,加入K2CO3(178mg,1.29mmol),将NaBH4(16mg,0.42mmol)溶解于5%NaOH(1mL)中,逐滴加入到反应瓶中,滴完后撤掉冰水浴,室温搅拌3h,原料反应完全,将反应液过滤,滤饼分别用30%乙醇(7mL)、80%乙醇(3mL)洗涤,得二氢黄连碱。
将二氢黄连碱用80%乙醇(5mL)溶解,逐滴加入HOAc(3mL),壬醛(0.8mL,4.44mmol),回流反应4h,原料反应完全,将反应液浓缩,加入2N HCl(2mL),室温反应1h,然后用氯仿/甲醇(v/v=10:1)萃取,有机相用无水MgSO4干燥,过滤,减压蒸除溶剂,粗品经硅胶柱层析[v/v=20:1(氯仿/甲醇)]纯化得黄色固体50mg,收率20.3%。
1H-NMR(DMSO-d6)δ:0.85-0.86(m,3H,CH2CH2(CH2)6CH 3),1.21-1.27(m,12H,CH2CH2(CH 2)6CH3),1.74(br s,2H,CH2CH 2(CH2)6CH3),3.07(br s,2H,NCH2CH 2),3.31(br s,2H,CH 2CH2(CH2)6CH3),4.74(br s,2H,NCH 2CH2),6.18(s,2H,OCH2O),6.55(s,2H,OCH2O),7.15(s,1H,ArH),7.28(s,1H,ArH),8.03(s,2H,ArH),9.95(s,1H,ArH).MS(m/z):446.3(M-Cl)+.
化合物11的制备
称取黄连碱(162mg,0.46mmol)于反应瓶中,加入甲醇(5mL),放入冰水浴中,加入K2CO3(175mg,1.27mmol),将NaBH4(15mg,0.40mmol)溶解于5%NaOH(1mL)中,逐滴加入到反应瓶中,滴完后撤掉冰水浴,室温搅拌3h,原料反应完全,将反应液过滤,滤饼分别用30%乙醇(6mL)、80%乙醇(3mL)洗涤,得二氢黄连碱。
将二氢黄连碱用80%乙醇(4mL)溶解,逐滴加入HOAc(2mL),癸醛(0.9mL,4.69mmol),回流反应4h,原料反应完全,将反应液浓缩,加入2N HCl(2mL),室温反应1h,然后用氯仿/甲醇(v/v=10:1)萃取,有机相用无水MgSO4干燥,过滤,减压蒸除溶剂,粗品经硅胶柱层析[v/v=20:1(氯仿/甲醇)]纯化得黄色固体43mg,收率19.1%。
1H-NMR(DMSO-d6)δ:0.84(t,J=6.9Hz,3H,CH2CH2(CH2)7CH 3),1.21(br s,14H,CH2CH2(CH 2)7CH3),1.73(br s,2H,CH2CH 2(CH2)7CH3),3.06(br s,2H,NCH2CH 2),3.32(s,2H,CH 2CH2(CH2)3CH3),4.73(br s,2H,NCH 2CH2),6.17(s,2H,OCH2O),6.54(s,2H,OCH2O),7.14(s,1H,ArH),7.28(s,1H,ArH),8.03(s,2H,ArH),9.94(s,1H,ArH).MS(m/z):460.3(M-Cl)+.
化合物12的制备
称取黄连碱(200mg,0.56mmol)于反应瓶中,加入甲醇(5mL),放入冰水浴中,加入K2CO3(180mg,1.30mmol),将NaBH4(17mg,0.45mmol)溶解于5%NaOH(1mL)中,逐滴加入到反应瓶中,滴完后撤掉冰水浴,室温搅拌3h,原料反应完全,将反应液过滤,滤饼分别用30%乙醇(8mL)、80%乙醇(3mL)洗涤,得二氢黄连碱。
将二氢黄连碱用80%乙醇(5mL)溶解,逐滴加入HOAc(4mL),十一醛(0.9mL,4.26mmol),回流反应4h,原料反应完全,将反应液浓缩,加入2N HCl(2mL),室温反应1h,然后用氯仿/甲醇(v/v=10:1)萃取,有机相用无水MgSO4干燥,过滤,减压蒸除溶剂,粗品经硅胶柱层析[v/v=20:1(氯仿/甲醇)]纯化得黄色固体47mg,收率16.4%。
1H-NMR(DMSO-d6)δ:0.84(t,J=6.9Hz,3H,CH2CH2(CH2)8CH 3),1.21(br s,16H,CH2CH2(CH 2)8CH3),1.73(br s,2H,CH2CH 2(CH2)8CH3),3.06-3.08(m,2H,NCH2CH 2),3.30(br s,2H,CH 2CH2(CH2)8CH3),4.73(brs,2H,NCH 2CH2),6.17(s,2H,OCH2O),6.54(s,2H,OCH2O),7.14(s,1H,ArH),7.28(s,1H,ArH),8.02(s,2H,ArH),9.93(s,1H,ArH).MS(m/z):474.3(M-Cl)+.
化合物13的制备
称取黄连碱(243mg,0.68mmol)于反应瓶中,加入甲醇(6mL),放入冰水浴中,加入K2CO3(220mg,1.59mmol),将NaBH4(20mg,0.53mmol)溶解于5%NaOH(1mL)中,逐滴加入到反应瓶中,滴完后撤掉冰水浴,室温搅拌3h,原料反应完全,将反应液过滤,滤饼分别用30%乙醇(8mL)、80%乙醇(3mL)洗涤,得二氢黄连碱。
将二氢黄连碱用80%乙醇(5mL)溶解,逐滴加入HOAc(4mL),十二醛(1mL,4.19mmol),回流反应4h,原料反应完全,将反应液浓缩,加入2N HCl(2mL),室温反应1h,然后用氯仿/甲醇(v/v=10:1)萃取,有机相用无水MgSO4干燥,过滤,减压蒸除溶剂,粗品经硅胶柱层析[v/v=20:1(氯仿/甲醇)]纯化得黄色固体55mg,收率15.4%。
1H-NMR(DMSO-d6)δ:0.84(t,J=6.9Hz,3H,CH2CH2(CH2)9CH 3),1.22(br s,18H,CH2CH2(CH 2)9CH3),1.73(br s,2H,CH2CH 2(CH2)9CH3),3.07-3.08(m,2H,NCH2CH 2),3.31(br s,2H,CH 2CH2(CH2)9CH3),4.74-4.79(m,2H,NCH 2CH2),6.17(s,2H,OCH2O),6.54(s,2H,OCH2O),7.14(s,1H,ArH),7.28(s,1H,ArH),8.02(s,2H,ArH),9.95(s,1H,ArH).MS(m/z):488.3(M-Cl)+.
化合物14的制备
称取黄连碱(210mg,0.59mmol)于反应瓶中,加入甲醇(5mL),放入冰水浴中,加入K2CO3(230mg,1.66mmol),将NaBH4(44mg,1.16mmol)溶解于5%NaOH(1mL)中,逐滴加入到反应瓶中,滴完后撤掉冰水浴,室温搅拌3h,原料反应完全,将反应液过滤,滤饼分别用30%乙醇(8mL)、80%乙醇(3mL)洗涤,得二氢黄连碱。
将二氢黄连碱用80%乙醇(5mL)溶解,逐滴加入HOAc(4mL),十三醛(0.9mL,3.81mmol),回流反应4h,原料反应完全,将反应液浓缩,加入2N HCl(2mL),室温反应1h,然后用氯仿/甲醇(v/v=10:1)萃取,有机相用无水MgSO4干燥,过滤,减压蒸除溶剂,粗品经硅胶柱层析[v/v=20:1(氯仿/甲醇)]纯化得黄色固体81mg,收率25.5%。
1H-NMR(CDCl3)δ:0.86(s,3H,CH2CH2(CH2)10CH 3),1.24-1.46(m,20H,CH2CH2(CH 2)10CH3),1.83(br s,2H,CH2CH 2(CH2)10CH3),3.08(br s,2H,CH 2CH2(CH2)10CH3),3.24(t,J=7.5Hz,2H,NCH2CH 2),5.33(br s,2H,NCH 2CH2),6.09(s,2H,OCH2O),6.42(s,2H,OCH2O),6.87(s,1H,ArH),7.08(s,1H,ArH),7.65-7.72(m,2H,ArH),11.18(s,1H,ArH).MS(m/z):502.3(M-Cl)+.
化合物15的制备
称取黄连碱(210mg,0.59mmol)于反应瓶中,加入甲醇(5mL),放入冰水浴中,加入K2CO3(230mg,1.66mmol),将NaBH4(44mg,1.16mmol)溶解于5%NaOH(1mL)中,逐滴加入到反应瓶中,滴完后撤掉冰水浴,室温搅拌3h,原料反应完全,将反应液过滤,滤饼分别用30%乙醇(8mL)、80%乙醇(3mL)洗涤,得二氢黄连碱。
将二氢黄连碱用80%乙醇(5mL)溶解,逐滴加入HOAc(4mL),碳烯醛(0.9mL,4.55mmol),回流反应4h,原料反应完全,将反应液浓缩,加入2N HCl(2mL),室温反应1h,然后用氯仿/甲醇(v/v=10:1)萃取,有机相用无水MgSO4干燥,过滤,减压蒸除溶剂,粗品经硅胶柱层析[v/v=20:1(氯仿/甲醇)]纯化得黄色固体64mg,收率21.3%。1H-NMR(CDCl3)δ:1.29-1.47(m,12H,CH2CH2(CH 2)6CH2CH=CH2),1.84(br s,2H,CH2CH 2(CH2)6CH2CH=CH2),2.00-2.04(m,2H,CH2CH2(CH2)6CH 2CH=CH2),3.08-3.09(m,2H,CH 2CH2(CH2)6CH2CH=CH2),3.25(t,J=7.5Hz,2H,NCH2CH 2),4.19-5.01(m,2H,CH=CH 2),5.34(br s,2H,NCH 2CH2),5.73-5.85(m,1H,CH=CH2),6.10(s,2H,OCH2O),6.43(s,2H,OCH2O),6.88(s,1H,ArH),7.09(s,1H,ArH),7.66-7.74(m,2H,ArH),11.18(s,1H,ArH).MS(m/z):472.3(M-Cl)+.
实验例2:本发明化合物的癌细胞生长抑制活性
1、本发明化合物的HCT-8人结肠癌细胞生长抑制活性
选用对数生长期的贴壁HCT-8人结肠癌细胞株,用胰酶消化后用10%小牛血清的RPMI 1640培养液,接种在96孔培养板中,每孔3000个细胞,每孔接种100ul,37℃,5%CO2培养24h。实验组加入不同浓度的样品,对照组则换含等体积溶剂的培养液,37℃,5%CO2培养3d。弃去上清液,每孔加入100ul新鲜配制的0.5mg/ml MTT的无血清培养液,37℃继续培养4h。小心弃上清,并加入150ul DMSO溶解MTTformazon沉淀,用微型超声振荡器混匀后,在酶标仪上测定波长540nm处的光密度值。按下式计算肿瘤细胞生长抑制率:
肿瘤细胞生长抑制率(%)=(OD对照-OD实验)/(OD对照-OD空白)X 100%
实验结果见表1
2、本发明化合物的A549人肺癌细胞生长抑制活性
选用对数生长期的贴壁A549人肺癌细胞株,用胰酶消化后用10%小牛血清的RPMI 1640培养液,接种在96孔培养板中,每孔3000个细胞,每孔接种100ul,37℃,5%CO2培养24h。实验组加入不同浓度的样品,对照组则换含等体积溶剂的培养液,37℃,5%CO2培养3d。弃去上清液,每孔加入100ul新鲜配制的0.5mg/ml MTT的无血清培养液,37℃继续培养4h。小心弃上清,并加入150ul DMSO溶解MTTformazon沉淀,用微型超声振荡器混匀后,在酶标仪上测定波长540nm处的光密度值。按下式计算肿瘤细胞生长抑制率:
肿瘤细胞生长抑制率(%)=(OD对照-OD实验)/(OD对照-OD空白)X 100%
实验结果见表1
3、本发明化合物的Bel7402人肝癌细胞生长抑制活性
选用对数生长期的贴壁Bel7402人肝癌细胞株,用胰酶消化后用10%小牛血清的RPMI 1640培养液,接种在96孔培养板中,每孔3000个细胞,每孔接种100ul,37℃,5%CO2培养24h。实验组加入不同浓度的样品,对照组则换含等体积溶剂的培养液,37℃,5%CO2培养3d。弃去上清液,每孔加入100ul新鲜配制的0.5mg/ml MTT的无血清培养液,37℃继续培养4h。小心弃上清,并加入150ul DMSO溶解MTTformazon沉淀,用微型超声振荡器混匀后,在酶标仪上测定波长540nm处的光密度值。按下式计算肿瘤细胞生长抑制率:
肿瘤细胞生长抑制率(%)=(OD对照-OD实验)/(OD对照-OD空白)X 100%
实验结果见表1
4、本发明化合物的C33A人宫颈癌细胞生长抑制活性
选用对数生长期的贴壁C33A人宫颈癌细胞株,用胰酶消化后用10%小牛血清的RPMI 1640培养液,接种在96孔培养板中,每孔5000个细胞,每孔接种100ul,37℃,5%CO2培养24h。实验组加入不同浓度的样品,对照组则换含等体积溶剂的培养液,37℃,5%CO2培养3d。弃去上清液,每孔加入100ul新鲜配制的0.5mg/ml MTT的无血清培养液,37℃继续培养4h。小心弃上清,并加入150ul DMSO溶解MTTformazon沉淀,用微型超声振荡器混匀后,在酶标仪上测定波长540nm处的光密度值。按下式计算肿瘤细胞生长抑制率:
肿瘤细胞生长抑制率(%)=(OD对照-OD实验)/(OD对照-OD空白)X 100%
实验结果见表1
a,b具有相同上标字母的化合物编号者为同批实验结果。