CN103039367A - 一种适合于杜鹃花组织培养的基本培养基配方 - Google Patents

一种适合于杜鹃花组织培养的基本培养基配方 Download PDF

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本发明涉及一种植物繁殖领域，即一种适合于杜鹃花组织培养的基本培养基配方。其培养基成分和含量包括：（1）大量元素：375mg·L-1NH4NO3，180mg·L-1KNO3，320mg·L-1CaCl2·2H2O，245mg·L-1MgSO4·7H2O，436mg·L-1KH2PO4；（2）铁盐：18.4mg·L-1FeSO4·7H2O，24.9mg·L-1Na2·EDTA·2H2O；（3）微量元素：12.4mg·L-1MnSO4·4H2O，7.2mg·L-1ZnSO4·7H2O，5.7mg·L-1H3BO3，0.05mg·L-1Na2MO4·2H2O；（4）有机成分：0.3mg·L-1盐酸硫胺素(VB1)，75mg·L-1肌醇；（5）其它：琼脂粉7.8g·L-1，添加蔗糖15.0g·L-1，pH5.6，及附加细胞分裂素种类、生长素种类成份。具有所含组分用量少且价格低廉，适合杜鹃花的快速生长的特点。

Description

一种适合于杜鹃花组织培养的基本培养基配方
 
技术领域　
本发明涉及一种植物繁殖领域，即一种适合于杜鹃花组织培养的基本培养基配方。 
背景技术
在现有技术中，杜鹃是世界著名观赏植物，也是我国十大传统名花之一。我国野生杜鹃花资源十分丰富，特别是野生高山杜鹃野生资源较多。但国内外对野生杜鹃花的引种、人工繁育、栽培和育种等研究开展缓慢，大多处于研究的初级阶段。 
    目前，杜鹃花组织培养研究较多，但基本培养基各不相同，大多属于在现有培养基基础上进行的改良，没有一种具有可靠、规范、高效、稳定、广谱等特性的标准培养基。
发明内容
本发明的目的是针对上述不足而提供一种所含组分用量少且价格低廉，适合杜鹃花的快速生长的适合于杜鹃花组织培养的基本培养基配方。
本发明的技术解决方案是：一种适合于杜鹃花组织培养的基本培养基配方，其培养基成分和含量包括：
（1）大量元素：375 mg·L-1NH4NO3，180 mg·L-1KNO3，320 mg·L-1CaCl2·2H2O，245 mg·L-1MgSO4·7H2O，436 mg·L-1KH2PO4；
（2）铁盐：18.4 mg·L-1FeSO4·7H2O，24.9 mg·L-1Na2·EDTA·2H2O；
（3）微量元素：12.4 mg·L-1MnSO4·4H2O，7.2 mg·L-1ZnSO4·7H2O，5.7 mg·L-1H3BO3，0.05 mg·L-1Na2MO4·2H2O；
（4）有机成分：0.3 mg·L-1盐酸硫胺素(VB1)，75 mg·L-1肌醇；
（5）其它：琼脂粉7.8 g·L-1，添加蔗糖15.0 g·L-1，pH5.6。
还包括：玉米素(ZT)（1.00～3.50 mg·L-1）；反式玉米素(Trans-zeatin)（1.00～3.50 mg·L-1）；2-异戊烯腺嘌呤(2-iP) （1.00～3.00 mg·L-1）、苯基噻二唑基脲(TDZ)（1.00～3.00 mg·L-1）、吲哚乙酸(IAA)（0.40～1.60 mg·L-1）、吲哚丁酸(IBA)（0.40～1.50 mg·L-1）、萘乙酸(NAA)（0.15～0.90 mg·L-1）和2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)（0.10～0.50 mg·L-1）；适合愈伤组织诱导。
还包括：玉米素(ZT)（1.50～4.50 mg·L-1）、反式玉米素(Trans-zeatin)（1.50～4.50 mg·L-1）、2-异戊烯腺嘌呤(2-iP) （1.30～3.50 mg·L-1）、苯基噻二唑基脲(TDZ)（1.00～2.50 mg·L-1）、吲哚乙酸(IAA)（0.10～0.60 mg·L-1）、吲哚丁酸(IBA)（0.08～0.50 mg·L-1）和萘乙酸(NAA)（0.05～0.30 mg·L-1）；适合愈伤组织再分化。
还包括：玉米素(ZT)（2.10～4.00 mg·L-1）、反式玉米素(Trans-zeatin)（2.10～4.00 mg·L-1）、2-异戊烯腺嘌呤(2-iP) （1.80～3.00 mg·L-1）、吲哚乙酸(IAA)（0.05～0.10 mg·L-1）、吲哚丁酸(IBA)（0.03～0.06 mg·L-1）和萘乙酸(NAA)（0.01～0.05 mg·L-1）；适合嫩茎尖或嫩茎基部直接再生。
还包括：玉米素(ZT)（2.50～3.80 mg·L-1）、反式玉米素(Trans-zeatin)（2.50～3.80 mg·L-1）、2-异戊烯腺嘌呤(2-iP) （2.20～3.30 mg·L-1）、吲哚乙酸(IAA)（0.04～0.08 mg·L-1）、吲哚丁酸(IBA)（0.03～0.06 mg·L-1）和萘乙酸(NAA)（0.01～0.03 mg·L-1）、赤霉素GA3（1.00～3.00 mg·L-1）；适合腋芽丛生。
还包括：玉米素(ZT)（0.07～0.12 mg·L-1）、反式玉米素(Trans-zeatin)（0.07～0.12 mg·L-1）、2-异戊烯腺嘌呤(2-iP) （0.02～0.06 mg·L-1）、吲哚乙酸(IAA)（0.05～0.15 mg·L-1）、吲哚丁酸(IBA)（0.05～0.13 mg·L-1）和萘乙酸(NAA)（0.01～0.03 mg·L-1）、赤霉素GA3（0.70～1.60 mg·L-1）；适合腋芽生长。
还包括：玉米素(ZT)（0.01～0.05 mg·L-1）、反式玉米素(Trans-zeatin)（0.01～0.05 mg·L-1）、吲哚乙酸(IAA)（0.01～0.20 mg·L-1）、吲哚丁酸(IBA)（0.01～0.20 mg·L-1）、萘乙酸(NAA) （0.01～0.15 mg·L-1）、激动素KT（0.02～0.10 mg·L-1）；适合芽苗生根。
还包括：苯基噻二唑基脲(TDZ)（1.50～4.00 mg·L-1）、2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)（0.50～2.80 mg·L-1）；适合杜鹃花组织培养诱导突变体育种。
本发明的优点是：在近20年的试验研究中，总结前人研究的基础上，结合自身在杜鹃花研究过程中发现的问题及不足，经过大量实验探索获得了一种适合于杜鹃花组织培养的基本培养基配方，通过在全国各地区大多数杜鹃花品种的验证实验，确定了此配方在杜鹃花组织培养中的准确性、广谱性和标准性。可作为杜鹃花的愈伤组织诱导、愈伤组织再分化、嫩茎尖或嫩茎基部直接再生、腋芽丛生、腋芽生长、芽苗生根和组织培养诱导突变体培育新品种等培养的基本培养基。该基本培养基特点是所含组分用量少且价格低廉，适合杜鹃花的快速生长和发育。而且形态特征均正常。
下面将结合实施例对本发明的实施方式作进一步详细描述。 
具体实施方式
1 培养基成分和含量：
1.1大量元素：375 mg·L-1NH4NO3，180 mg·L-1KNO3，320 mg·L-1CaCl2·2H2O，245 mg·L-1MgSO4·7H2O，436 mg·L-1KH2PO4；
1.2铁盐：18.4 mg·L-1FeSO4·7H2O，24.9 mg·L-1Na2·EDTA·2H2O；
1.3微量元素：12.4 mg·L-1MnSO4·4H2O，7.2 mg·L-1ZnSO4·7H2O，5.7 mg·L-1H3BO3，0.05 mg·L-1Na2MO4·2H2O；
1.4有机成分：0.3 mg·L-1盐酸硫胺素(VB1)，75 mg·L-1肌醇；
1.5其它：琼脂粉7.8 g·L-1，添加蔗糖15.0 g·L-1，调节5.6。
2 应用的植物生长调节物质
2.1 愈伤组织诱导
附加细胞分裂素种类：玉米素(ZT)（1.00～3.50 mg·L-1）；反式玉米素(Trans-zeatin)（1.00～3.50 mg·L-1）；2-异戊烯腺嘌呤(2-iP) （1.00～3.00 mg·L-1）、苯基噻二唑基脲(TDZ)（1.00～3.00 mg·L-1）。
附加生长素种类：吲哚乙酸(IAA)（0.40～1.60 mg·L-1）、吲哚丁酸(IBA)（0.40～1.50 mg·L-1）、萘乙酸(NAA)（0.15～0.90 mg·L-1）和2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)（0.10～0.50 mg·L-1）。
例如利用牛皮杜鹃、短果杜鹃、照白杜鹃、小叶杜鹃、大字杜鹃、兴安杜鹃、迎红杜鹃、毛毡杜鹃和苞叶杜鹃等嫩茎段工厂化育苗，用量可根据品种不同选择适当浓度。
2.2 愈伤组织再分化
附加细胞分裂素种类：玉米素(ZT)（1.50～4.50 mg·L-1）、反式玉米素(Trans-zeatin)（1.50～4.50 mg·L-1）、2-异戊烯腺嘌呤(2-iP) （1.30～3.50 mg·L-1）、苯基噻二唑基脲(TDZ)（1.00～2.50 mg·L-1）。
附加生长素种类：吲哚乙酸(IAA)（0.10～0.60 mg·L-1）、吲哚丁酸(IBA)（0.08～0.50 mg·L-1）和萘乙酸(NAA)（0.05～0.30 mg·L-1）。
例如利用牛皮杜鹃、短果杜鹃、照白杜鹃、小叶杜鹃、大字杜鹃、兴安杜鹃、迎红杜鹃、毛毡杜鹃和苞叶杜鹃等嫩茎段工厂化育苗，用量可根据品种不同选择适当浓度。
2.3 嫩茎尖或嫩茎基部直接再生
附加细胞分裂素种类：玉米素(ZT)（2.10～4.00 mg·L-1）、反式玉米素(Trans-zeatin)（2.10～4.00 mg·L-1）、2-异戊烯腺嘌呤(2-iP)（1.80～3.00 mg·L-1）。
附加生长素种类：吲哚乙酸(IAA)（0.05～0.10 mg·L-1）、吲哚丁酸(IBA)（0.03～0.06 mg·L-1）和萘乙酸(NAA)（0.01～0.05 mg·L-1）。
例如利用牛皮杜鹃、短果杜鹃、照白杜鹃、小叶杜鹃、大字杜鹃、兴安杜鹃、迎红杜鹃、毛毡杜鹃和苞叶杜鹃等嫩茎段工厂化育苗，用量可根据品种不同选择适当浓度。
2.4 腋芽丛生
附加细胞分裂素种类：玉米素(ZT)（2.50～3.80 mg·L-1）、反式玉米素(Trans-zeatin)（2.50～3.80 mg·L-1）、2-异戊烯腺嘌呤(2-iP) （2.20～3.30 mg·L-1）。
附加生长素种类：吲哚乙酸(IAA)（0.04～0.08 mg·L-1）、吲哚丁酸(IBA)（0.03～0.06 mg·L-1）和萘乙酸(NAA)（0.01～0.03 mg·L-1）。
其它植物生长调节物质：赤霉素GA3（1.00～3.00 mg·L-1）
例如利用牛皮杜鹃、短果杜鹃、照白杜鹃、小叶杜鹃、大字杜鹃、兴安杜鹃、迎红杜鹃、毛毡杜鹃和苞叶杜鹃等嫩茎段工厂化育苗，用量可根据品种不同选择适当浓度。
2.5 腋芽生长
附加细胞分裂素种类：玉米素(ZT)（0.07～0.12 mg·L-1）、反式玉米素(Trans-zeatin)（0.07～0.12 mg·L-1）、2-异戊烯腺嘌呤(2-iP) （0.02～0.06 mg·L-1）。
附加生长素种类：吲哚乙酸(IAA)（0.05～0.15 mg·L-1）、吲哚丁酸(IBA)（0.05～0.13 mg·L-1）和萘乙酸(NAA)（0.01～0.03 mg·L-1）。
其它植物生长调节物质：赤霉素GA3（0.70～1.60 mg·L-1）
例如利用牛皮杜鹃、短果杜鹃、照白杜鹃、小叶杜鹃、大字杜鹃、兴安杜鹃、迎红杜鹃、毛毡杜鹃和苞叶杜鹃等嫩茎段工厂化育苗，用量可根据品种不同选择适当浓度。
2.6 芽苗生根
附加细胞分裂素种类：玉米素(ZT)（0.01～0.05 mg·L-1）、反式玉米素(Trans-zeatin)（0.01～0.05 mg·L-1）。
附加生长素种类：吲哚乙酸(IAA)（0.01～0.20 mg·L-1）、吲哚丁酸(IBA)（0.01～0.20 mg·L-1）、萘乙酸(NAA) （0.01～0.15 mg·L-1）。
其它植物生长调节物质：激动素KT（0.02～0.10 mg·L-1）
例如利用牛皮杜鹃、短果杜鹃、照白杜鹃、小叶杜鹃、大字杜鹃、兴安杜鹃、迎红杜鹃、毛毡杜鹃和苞叶杜鹃等嫩茎段工厂化育苗，用量可根据品种不同选择适当浓度。
2.7 杜鹃花组织培养诱导突变体育种
附加细胞分裂素种类：苯基噻二唑基脲(TDZ)（1.50～4.00 mg·L-1）。
附加生长素种类：2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)（0.50～2.80 mg·L-1）。
例如利用牛皮杜鹃、短果杜鹃、照白杜鹃、小叶杜鹃、大字杜鹃、兴安杜鹃、迎红杜鹃、毛毡杜鹃和苞叶杜鹃等花瓣培育杜鹃花新品种，用量可根据品种不同选择适当浓度。

Claims (8)

1. 一种适合于杜鹃花组织培养的基本培养基配方，其特征在于培养基成分和含量包括：
（1）大量元素：375 mg·L-1NH4NO3，180 mg·L-1KNO3，320 mg·L-1CaCl2·2H2O，245 mg·L-1MgSO4·7H2O，436 mg·L-1KH2PO4；
（2）铁盐：18.4 mg·L-1FeSO4·7H2O，24.9 mg·L-1Na2·EDTA·2H2O；
（3）微量元素：12.4 mg·L-1MnSO4·4H2O，7.2 mg·L-1ZnSO4·7H2O，5.7 mg·L-1H3BO3，0.05 mg·L-1Na2MO4·2H2O；
（4）有机成分：0.3 mg·L-1盐酸硫胺素(VB1)，75 mg·L-1肌醇；
（5）其它：琼脂粉7.8 g·L-1，添加蔗糖15.0 g·L-1，调节5.6。
2.按照权利要求1所述的适合于杜鹃花组织培养的基本培养基配方，其特征在于包括：玉米素 1.00～3.50 mg·L-1；反式玉米素1.00～3.50 mg·L-1；2-异戊烯腺嘌呤1.00～3.00 mg·L-1、苯基噻二唑基脲1.00～3.00 mg·L-1、吲哚乙酸0.40～1.60 mg·L-1、吲哚丁酸0.40～1.50 mg·L-1、萘乙酸0.15～0.90 mg·L-1和2,4-二氯苯氧乙酸0.10～0.50 mg·L-1；适合愈伤组织诱导。
3.按照权利要求1所述的适合于杜鹃花组织培养的基本培养基配方，其特征在于包括：玉米素1.50～4.50 mg·L-1、反式玉米素1.50～4.50 mg·L-1、2-异戊烯腺嘌呤1.30～3.50 mg·L-1、苯基噻二唑基脲1.00～2.50 mg·L-1、吲哚乙酸0.10～0.60 mg·L-1、吲哚丁酸0.08～0.50 mg·L-1和萘乙酸0.05～0.30 mg·L-1；适合愈伤组织再分化。
4.按照权利要求1所述的适合于杜鹃花组织培养的基本培养基配方，其特征在于包括：玉米素2.10～4.00 mg·L-1、反式玉米素2.10～4.00 mg·L-1、2-异戊烯腺嘌呤1.80～3.00 mg·L-1、吲哚乙酸0.05～0.10 mg·L-1、吲哚丁酸0.03～0.06 mg·L-1和萘乙酸0.01～0.05 mg·L-1；适合嫩茎尖或嫩茎基部直接再生。
5.按照权利要求1所述的适合于杜鹃花组织培养的基本培养基配方，其特征在于包括：玉米素2.50～3.80 mg·L-1、反式玉米素2.50～3.80 mg·L-1、2-异戊烯腺嘌呤2.20～3.30 mg·L-1、吲哚乙酸0.04～0.08 mg·L-1、吲哚丁酸0.03～0.06 mg·L-1和萘乙酸0.01～0.03 mg·L-1、赤霉素1.00～3.00 mg·L-1；适合腋芽丛生。
6.按照权利要求1所述的适合于杜鹃花组织培养的基本培养基配方，其特征在于包括：玉米素0.07～0.12 mg·L-1、反式玉米素0.07～0.12 mg·L-1、2-异戊烯腺嘌呤0.02～0.06 mg·L-1、吲哚乙酸0.05～0.15 mg·L-1、吲哚丁酸0.05～0.13 mg·L-1和萘乙酸0.01～0.03 mg·L-1、赤霉素0.70～1.60 mg·L-1；适合腋芽生长。
7.按照权利要求1所述的适合于杜鹃花组织培养的基本培养基配方，其特征在于包括：玉米素0.01～0.05 mg·L-1、反式玉米素0.01～0.05 mg·L-1、吲哚乙酸0.01～0.20 mg·L-1、吲哚丁酸0.01～0.20 mg·L-1、萘乙酸0.01～0.15 mg·L-1、激动素KT0.02～0.10 mg·L-1；适合芽苗生根。
8.按照权利要求1所述的适合于杜鹃花组织培养的基本培养基配方，其特征在于包括：苯基噻二唑基脲1.50～4.00 mg·L-1、2,4-二氯苯氧乙酸0.50～2.80 mg·L-1；适合杜鹃花组织培养诱导突变体育种。
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