CN107711498B - 一种春砂仁种苗的快速繁殖方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种春砂仁种苗的快速繁殖方法，其包括以下步骤：步骤1)、以春砂仁的幼嫩根茎作为外植体，去除茎节上包被的叶鞘，对外植体进行消毒后接种于芽诱导培养基上培养，选取无菌外植体；步骤2)、将无菌外植体顶芽以下、4个节以上的幼嫩根茎横切成薄片，将薄片接种于芽分化培养基上，诱导不定芽分化，获得丛生芽；步骤3)、将获得丛生芽后的培养材料分割成单芽接入芽增殖培养基，待有展开的叶时转入生根壮苗培养基中培养，直至可练苗移栽。本繁殖方法育苗成本低、发芽率高、育苗时间短。
Description
技术领域
本发明属于植物无性繁殖技术领域，具体是涉及一种春砂仁种苗的快速繁殖方法。
背景技术
春砂仁为姜科豆蔻属春砂仁种,学名Amomum villosum Lour,多年生常绿草本植物。
传统种植春砂仁的育苗方式有两种：1.用种子繁殖；此方法要采收一定数量的春砂仁果实，春砂仁每公斤价格在800元以上，育苗成本高，且种子不易贮藏，发芽率低于80％，育苗时间大约2年。2.分株繁殖，一般每株每年可分株培育出15-20株苗，时间10-12个月不等，周期很长。
发明内容
有鉴于此，有必要针对上述传统种植春砂仁的育苗方式存在育苗成本高、发芽率低、育苗时间长的问题，提供一种春砂仁种苗的快速繁殖方法。
本发明春砂仁种苗的快速繁殖方法，包括以下步骤：
步骤1)、以春砂仁的幼嫩根茎作为外植体，去除茎节上包被的叶鞘，对外植体进行消毒后接种于芽诱导培养基上培养，选取无菌外植体；
步骤2)、将无菌外植体顶芽以下、4个节以上的幼嫩根茎横切成薄片，将薄片接种于芽分化培养基上，诱导不定芽分化，获得丛生芽；
步骤3)、将获得丛生芽后的培养材料分割成单芽接入芽增殖培养基，待有展开的叶时转入生根壮苗培养基中培养，直至可练苗移栽；
所述芽诱导培养基的配方为：MS基本培养基附加CPPU(氯吡苯脲)、6-BA(6-苄基腺嘌呤)、KT(激动素)中的一种，以及维生素C；
所述芽分化培养基的配方为：MS基本培养基附加CPPU、6-BA、KT中的一种；
所述芽增殖培养基的配方为：MS基本培养基附加CPPU、6-BA、KT中的一种，以及NAA(萘乙酸)、IBA(吲哚丁酸)、IAA(吲哚-3-乙酸)的一种或多种；
所述生根壮苗培养基的配方为：MS基本培养基附加CPPU、6-BA中的一种，以及NAA、IBA、IAA的一种或多种。
作为优选的实施方式，所述芽诱导培养基的配方中，MS基本培养基附加用量为0.1-0.2mg/L的CPPU，或附加用量为1.0-10.0mg/L的6-BA，或附加用量为0.5-5.0mg/L的KT，以及用量为0.5-1.0g/L的维生素C。
作为优选的实施方式，所述芽分化培养基的配方中，MS基本培养基附加用量为0.2-0.5mg/L的CPPU，或附加用量为1.0-10.0mg/L的6-BA，或附加用量为0.5-5.0mg/L的KT。
作为优选的实施方式，所述芽增殖培养基的配方中，MS基本培养基附加用量为0.5-1.0mg/L的CPPU，或附加用量为1.0-10.0mg/L的6-BA，或附加用量为0.5-5.0mg/L的KT，以及总用量为0.1-0.3mg/L的NAA、IBA、IAA中的一种或多种。
作为优选的实施方式，所述生根壮苗培养基的配方中，MS基本培养基附加用量为1.0-5.0mg/L的CPPU，或附加用量为1.0-10.0mg/L的6-BA，以及总用量为0.5-2.0mg/L的NAA、IBA、IAA中的一种或多种。
作为优选的实施方式，
所述芽诱导培养基的配方为：MS基本培养基附加CPPU，以及维生素C；
所述芽分化培养基的配方为：MS基本培养基附加CPPU；
所述芽增殖培养基的配方为：MS基本培养基附加CPPU，以及NAA、IBA的一种或两种；
所述生根壮苗培养基的配方为：MS基本培养基附加CPPU、6-BA中的一种，以及NAA、IBA的一种或两种。
相对现有技术，本发明春砂仁种苗的快速繁殖方法，其具备育苗成本低、发芽率高、育苗时间短等优点。
具体实施方式
为了便于本领域技术人员理解，下面将结合具体实施例对本发明进行进一步描述。
一种春砂仁种苗的快速繁殖方法，包括以下步骤：
步骤1)、以春砂仁的幼嫩根茎作为外植体，去除茎节上包被的叶鞘，对外植体进行消毒后接种于芽诱导培养基上培养，培养7天后，选取无菌外植体；
步骤2)、将无菌外植体顶芽以下、4个节以上的幼嫩根茎横切成小于1mm厚的薄片，将薄片以水平方向接种于芽分化培养基上，诱导不定芽分化，获得丛生芽；
步骤3)、将获得丛生芽后的培养材料分割成单芽接入芽增殖培养基，培养30-40天，待苗高15-25mm，有2-3片展开的叶时转入生根壮苗培养基中培养，约20天出根，继续培养30天可练苗移栽。
所述步骤1)、步骤3)中，培养的温度为26±1℃，16h光照/8h黑暗，光照强度为2000-2500lx；步骤2)为黑暗培养。
所述芽诱导培养基的配方为：MS基本培养基附加CPPU、6-BA、KT中的一种，以及维生素C。其中，当选择附加CPPU时，CPPU的用量为0.1-0.2mg/L；当选择附加6-BA时，6-BA的用量为1.0-10.0mg/L；当选择附加KT时，KT的用量为0.5-5.0mg/L；维生素C的用量为0.5-1.0g/L。
所述芽分化培养基的配方为：MS基本培养基附加CPPU、6-BA、KT中的一种；其中，当选择附加CPPU时，CPPU的用量为0.2-0.5mg/L；当选择附加6-BA时，6-BA的用量为1.0-10.0mg/L；当选择附加KT时，KT的用量为0.5-5.0mg/L。
所述芽增殖培养基的配方为：MS基本培养基附加CPPU、6-BA、KT中的一种，以及NAA、IBA、IAA的一种或多种；其中，当选择附加CPPU时，CPPU的用量为0.5-1.0mg/L；当选择附加6-BA时，6-BA的用量为1.0-10.0mg/L；当选择附加KT时，KT的用量为0.5-5.0mg/L；NAA、IBA、IAA中的一种或多种的总用量为0.1-0.3mg/L。
所述生根壮苗培养基的配方为：MS基本培养基附加CPPU、6-BA中的一种，以及NAA、IBA、IAA的一种或多种；其中，当选择附加CPPU时，CPPU的用量为1.0-5.0mg/L；当选择附加6-BA时，6-BA的用量为1.0-10.0mg/L；NAA、IBA、IAA中的一种或多种的总用量为0.5-2.0mg/L。
下表为采用本发明春砂仁种苗的快速繁殖方法进行繁殖的实验数据：
原始数据表
实验编号1至5中，所述芽诱导培养基的配方为：MS基本培养基附加0.1-0.2mg/L的CPPU，以及0.5-1.0g/L的维生素C；所述芽分化培养基的配方为：MS基本培养基附加0.2-0.5mg/L的CPPU；所述芽增殖培养基的配方为：MS基本培养基附加0.5-1.0mg/L的CPPU，以及0.1-0.3mg/L的NAA；所述生根壮苗培养基的配方为：MS基本培养基附加1.0-5.0mg/L的6-BA，以及0.5-2.0mg/L的IBA。
实验结果统计表
本发明春砂仁种苗的快速繁殖方法，对一个春砂仁的幼嫩根茎为外植体，可切出薄片30-40片，薄片在芽诱导培养基上的出芽率为83-93％，每薄片平均可出芽3.82个，即每外植体经一代增殖可获得95-142个芽，转移到生根壮苗培养基上，可获得93-139株苗(生根率为98％)，增殖系数大于93。
而目前相关文献记载的砂仁分株繁殖的增殖率为3-5.36。
“阳春砂仁微繁殖技术研究”(刘进平，《亚热带植物科学》2004年03期)中记载，以春砂仁带芽根茎的顶芽为外植体进行增殖培养，增殖培养基配方为：MS+5mg/L BA+5ml/L20％硫代硫酸钠，出苗率为62.5％，增殖率为5.36。
“长泰砂仁快速繁殖技术研究”(万学峰，《现代农业科技》，2015年18期)，以长泰砂仁的笋芽为外植体，笋芽分化增殖的培养基为MS加5.0mg/L的6-BA以及0.2mg/L的NAA，增殖系数为3.0。
以上所述实施例仅表达了本发明的部分实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对本发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。因此，本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。
Claims (5)
1.一种春砂仁种苗的快速繁殖方法，其特征在于，包括以下步骤：
步骤1)、以春砂仁的幼嫩根茎作为外植体，去除茎节上包被的叶鞘，对外植体进行消毒后接种于芽诱导培养基上培养，选取无菌外植体；
步骤2)、将无菌外植体顶芽以下、4个节以上的幼嫩根茎横切成薄片，将薄片接种于芽分化培养基上，诱导不定芽分化，获得丛生芽；
步骤3)、将获得丛生芽后的培养材料分割成单芽接入芽增殖培养基，待有展开的叶时转入生根壮苗培养基中培养，直至可练苗移栽；
所述芽诱导培养基的配方为：MS基本培养基附加0.1-0.2mg/L的CPPU，以及0.5-1.0g/L的维生素C；
所述芽分化培养基的配方为：MS基本培养基附加0.2-0.5mg/L的CPPU；
所述芽增殖培养基的配方为：MS基本培养基附加0.5-1.0mg/L的CPPU，以及0.1-0.3mg/L的NAA；
所述生根壮苗培养基的配方为：MS基本培养基附加1.0-5.0mg/L的6-BA，以及0.5-2.0mg/L的IBA。
2.根据权利要求1所述的春砂仁种苗的快速繁殖方法，其特征在于：步骤1)中，外植体接种于芽诱导培养基上培养的时间为7天。
3.根据权利要求1所述的春砂仁种苗的快速繁殖方法，其特征在于：步骤2)中，薄片为小于1mm厚的横切片，薄片的接种方向为水平方向。
4.根据权利要求1所述的春砂仁种苗的快速繁殖方法，其特征在于：步骤3)中，将获得丛生芽后的培养材料分割成单芽接入芽增殖培养基培养的时间为30-40天，待苗高15-25mm，有2-3片展开的叶时转入生根壮苗培养基中培养。
5.根据权利要求1至4任一项所述的春砂仁种苗的快速繁殖方法，其特征在于：步骤1)、步骤3)中，培养的温度为26±1℃，16h光照/8h黑暗，光照强度为2000-2500lx；步骤2)为黑暗培养。
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