CN103006832A - 一种升血小板中药组合物及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种升血小板中药组合物及其制备方法,该中药组合物是由青黛、连翘、仙鹤草、牡丹皮、甘草共五味中药制备而成;该药具有清热解毒,凉血止血,散瘀消斑的功效;主要用于原发性血小板减少性紫癜;症见:全身瘀点或瘀斑,发热烦渴,小便短赤,大便秘结,或见鼻衄,齿衄,舌红苔黄,脉滑数或弦数。其临床药效学试验效果显著,生物利用度高,且无任何毒副作用。
Description
技术领域
本发明涉及一种升血小板中药组合物及其制备方法,属于制药技术领域。
技术背景
原发性血小板减少性紫癜属临床中比较常见和多发的一种疾病,临床治疗比较困难,严重的影响了人们的身体健康;目前临床上使用的中成药也较多,但大多疗效不理想。2005年1月12日中国专利公报公开了申请的发明名称为:“治疗原发性血小板减少性紫癜的药物及其制备方法”,公开号为CN1562271A的专利申请,组成发明所述中成药的各味药物原料的重量配比为:青黛20-300份、牡丹皮300-1200份、连翘200-800份、仙鹤草200-800份、甘草50-600份。但是在实际应用过程中我们发现这种中成药的效果还不够理想。在近几年的时间里,我们在此专利所公开处方的基础上,对处方用量进行了大量的试验摸索,找到了最佳的组方配比,临床药效学实验效果显著提高,我们制成了胶囊剂、片剂及颗粒剂。
发明内容
本发明的目的在于:提供一种疗效更为显著的一种升血小板中药组合物及其制备方法。该中药组合物用于原发性血小板减少性紫癜的治疗效果更好。
本发明中药组合物,其配方组成如下:
青黛167g 连翘500g 甘草500g
牡丹皮833g 仙鹤草250g。
1、本发明中药组合物胶囊剂的制备方法如下:
以上五味药材,取青黛研成细粉;仙鹤草、牡丹皮以5倍量80%乙醇提取二次,每次2小时,合并二次乙醇提取液,滤过,回收乙醇并减压浓缩成60℃时相对密度为1.25~1.30的浸膏;连翘浸泡4小时,水蒸气蒸馏法提取挥发油6小时,挥发油另器贮存,水煎液留用,药渣与甘草水煎提取2次,每次煎煮1.5小时,二次水煎液与上述水煎液合并,滤过,浓缩成60℃时相对密度为1.25~1.30的浸膏,与上述醇提浸膏合并,加入青黛细粉,混匀,60℃烘干,粉碎成细粉,加入适量糊精,加入乙醇制成颗粒,烘干,整粒,喷入上述挥发油,混匀,装入胶囊,制成1000粒,即得。
2、本发明中药组合物片剂的制备方法如下:
以上五味药材,取青黛研成细粉;仙鹤草、牡丹皮以5倍量80%乙醇提取二次,每次2小时,合并二次乙醇提取液,滤过,回收乙醇并减压浓缩成60℃时相对密度为1.25~1.30的浸膏;连翘浸泡4小时,水蒸气蒸馏法提取挥发油6小时,挥发油另器贮存,水煎液留用,药渣与甘草水煎提取2次,每次煎煮1.5小时,二次水煎液与上述水煎液合并,滤过,浓缩成60℃时相对密度为1.25~1.30的浸膏,与上述醇提浸膏合并,加入青黛细粉,混匀,60℃烘干,粉碎成细粉,加入适量淀粉,加入乙醇制成颗粒,烘干,整粒,喷入上述挥发油,混匀,压片,制成1000片,即得。
3、本发明中药组合物颗粒剂的制备方法如下:
以上五味药材,取青黛研成细粉;仙鹤草、牡丹皮以5倍量80%乙醇提取二次,每次2小时,合并二次乙醇提取液,滤过,回收乙醇并减压浓缩成60℃时相对密度为1.25~1.30的浸膏;连翘浸泡4小时,水蒸气蒸馏法提取挥发油6小时,挥发油另器贮存,水煎液留用,药渣与甘草水煎提取2次,每次煎煮1.5小时,二次水煎液与上述水煎液合并,滤过,浓缩成60℃时相对密度为1.25~1.30的浸膏,与上述醇提浸膏合并,加入青黛细粉,混匀,60℃烘干,粉碎成细粉,加入适量糊精,加入乙醇制成颗粒,烘干,整粒,喷入上述挥发油,混匀,制成1000g颗粒,即得。
主要药效学试验证明:本发明原料重量配比“青黛167g、牡丹皮833g、连翘500g、仙鹤草250g、甘草500g”同原发明重量配比1:青黛20份、牡丹皮300份、连翘200份、仙鹤草200份、甘草50份及原发明重量配比2:青黛300份、牡丹皮1200份、连翘800份、仙鹤草800份、甘草600份及原发明重量配比3:青黛167份、牡丹皮833份、连翘500份、仙鹤草500份、甘草250份相比,药效学试验结果有显著提高。
主要药效学试验
一、实验药物的制备:
1、原料:
a、本发明组:由青黛167g、牡丹皮833g、连翘500g、仙鹤草250g、甘草500g制备。(按本发明青黛167g、牡丹皮833g、连翘500g、仙鹤草250g、甘草500g配比)
b、原发明1组:由青黛58.44g、牡丹皮876.6g、连翘584.4g、仙鹤草584.4g、甘草146.1g制备。(按原发明重量配比1:青黛20份、牡丹皮300份、连翘200份、仙鹤草200份、甘草50份配比)
c、原发明2组:由青黛182.5g、牡丹皮729.9g、连翘486.6g、仙鹤草486.6g、甘草365.0g制备。(按原发明重量配比2:青黛300份、牡丹皮1200份、连翘800份、仙鹤草800份、甘草600份配比)
d、原发明3组:由青黛167g、牡丹皮833g、连翘500g、仙鹤草500g、甘草250g制备。(按原发明重量配比3:青黛167份、牡丹皮833份、连翘500份、仙鹤草500份、甘草250份配比)
2、a、b、c、d的制法为:
以上五味药材,取青黛研成细粉;仙鹤草、牡丹皮以5倍量80%乙醇提取二次,每次2小时,合并二次乙醇提取液,滤过,回收乙醇并减压浓缩成60℃时相对密度为1.25~1.30的浸膏;连翘浸泡4小时,水蒸气蒸馏法提取挥发油6小时,挥发油另器贮存,水煎液留用,药渣与甘草水煎提取2次,每次煎煮1.5小时,二次水煎液与上述水煎液合并,滤过,浓缩成60℃时相对密度为1.25~1.30的浸膏,与上述醇提浸膏合并,加入青黛细粉,混匀,60℃烘干,粉碎成细粉,加入适量糊精,加入乙醇制成颗粒,烘干,整粒,喷入上述挥发油,混匀,装入胶囊,制成1000粒,即得。
二、:试验过程及试验结果
主要药效学实验
实验目的:通过对本发明a组和b、c、d组的抗炎、毛细血管通透性、血小板凝聚、外周血血小板数、凝血、抗疲劳及机体免疫力等作用的药理实验研究,将本发明a组与d组以及新处方b、c组进行对比,观察其药理作用的强弱。
试验方法:本发明a组和b、c、d组对角叉菜胶致小鼠足肿胀的影响;对小鼠毛细血管通透性的影响;对小鼠血小板的影响;对小鼠凝血时间的影响;对小鼠外周血血小板的影响;对小鼠血清溶血素生成的影响;对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响;对小鼠抗疲劳的作用。
一、对角叉菜胶致小鼠足肿胀的影响
实验材料
1、动物:昆明种小鼠,雌雄各半,体重18~22g。
2、药物:本发明a组和b、c、d组均为2.25g生药/粒;药物在实验前用蒸馏水配置,灌胃给药。
实验方法
昆明种小鼠50只,雌雄各半,体重18~22g,随机分成5组,每组10只。对照组灌胃同体积的生理盐水;本发明a组和b、c、d组分别灌胃给药为5.0g生药/kg。连续给药7d,每日1次,末次给药前2h将每只小鼠左后脚足跖用1%角叉菜胶0.03mL。药后1h颈椎脱位处死动物,自踝关节0.5mm处剪下后足分别称重,以两足重量之差为肿胀度。实验结果:见表1
与对照组相比**P<0.01;与本发明a组比ΔP<0.05。
结果表明:本发明a组和b、c、d组可明显抑制角叉菜胶致小鼠足的肿胀,与对照组相比有极显著性的差异(P<0.01);本发明a组与b、c、d组相比较有显著性差异(P<0.05)。可见,本发明a组比b、c、d组的抗炎作用强。
二、对小鼠毛细血管通透性的影响
实验材料
1、动物:昆明种小鼠,雌雄兼有,体重18~22g。
2、药物:本发明a组和b、c、d组均为2.25g生药/粒;药物在实验前用蒸馏水配置,灌胃给药。
实验方法
昆明小鼠50只,雌雄各半,体重18~22g,随机分成5组,每组10只。对照组灌胃同体积的生理盐水;本发明a组和b、c、d组分别灌胃给药5.0g生药/kg。连续给药7d,每日1次,末次给药1h后,给小鼠尾静脉注射0.5%伊文思兰5ml/kg,5min后腹腔注射0.5%醋酸10ml/kg。30min后脱椎处死,剖腹用蒸馏水冲洗腹腔,冲洗液稀释至10ml,加0.1mol/L NaOH0.1ml,放置30min。用721型分分光光度计(590nm)比色。实验结果:见表2
与对照组相比**P<0.01;与本发明a组比ΔP<0.05。
结果表明:本发明a组和b、c、d组均显著抑制腹腔毛细血管通透性增加,对抗非特异性炎症,从而有效地抑制血细胞渗出,有利于止血过程,与对照组相比有极显著性的差异(P<0.01);本发明a组与b、c、d组相比较有显著性差异(P<0.05)。可见,本发明a组比b、c、d组的抑制毛细血管通透性的作用强。
三、对小鼠血小板的影响
实验材料
1、动物:昆明种小鼠,雌雄兼有,体重18~22g。
2、药物:本发明a组和b、c、d组均为2.25g生药/粒;药物在实验前用蒸馏水配置,灌胃给药。
实验方法
昆明种小鼠50只,雌雄各半,体重18~22g,随机分成5组,每组10只。对照组灌胃同体积的生理盐水;本发明a组和b、c、d组分别灌胃给药5.0g生药/kg。连续给药7d,末次给药1h后,按剪尾法用毛细管取血10μl,用半自动血球记数仪进行血小板记数。实验结果:见表3
与对照组相比**P<0.01;与本发明a组比ΔP<0.05。
结果表明:本发明a组和b、c、d组均明显增强血小板凝聚功能,与对照组相比有极显著性的差异(P<0.01);本发明a组与b、c、d组相比较有显著性差异(P<0.05)。可见,本发明a组比b、c、d组的增强血小板凝聚功能作用强,止血效果好。
四、对小鼠凝血时间的影响
实验材料
1、动物:昆明种小鼠,雌雄兼有,体重18~22g。
2、药物:本发明a组和b、c、d组均为2.25g生药/粒;药物在实验前用蒸馏水配置,灌胃给药。
实验方法
昆明种小鼠50只,雌雄各半,体重18~22g,随机分成5组,每组10只。对照组灌胃同体积的生理盐水;本发明a组和b、c、d组分别灌胃给药5.0g生药/kg。连续给药7d,每天1次,于末次给药1h后,摘眼球取血,滴于载玻片上,以针头挑到血丝为凝血终点时间,测定出凝血时间。实验结果:见表4
与对照组相比**P<0.01;与本发明a组比ΔP<0.05。
结果表明:本发明a组和b、c、d组均可缩短凝血时间而起到止血作用,与对照组相比有极显著性的差异(P<0.01);本发明a组与b、c、d组相比较有显著性差异(P<0.05)。可见,本发明a组比b、c、d组的止血作用强。
五、对小鼠外周血小板的影响
实验材料
1、动物:昆明种小鼠,雌雄兼有,体重18~22g。
2、药物:本发明a组和b、c、d组均为2.25g生药/粒;药物在实验前用蒸馏水配置,灌胃给药。
实验方法
实验前预先制备豚鼠抗小鼠血小板血清。将昆明种小鼠60只,雌雄各半,体重18~22g,随机分成6组,每组10只。除空白对照组外,其余5组按照100ml/20g小鼠腹腔注射已制备好的抗血清,分别于1、2、4、5、7、9d注入小鼠腹腔内以造模。从第1d注射起开始灌胃给药,空白对照组和模型组灌胃同体积的生理盐水;本发明a组和b、c、d、e组分别灌胃给药5.0g生药/kg。至造模第11d采血,进行外周血象检测。实验结果:见表5
与模型组相比**P<0.01;与本发明a组比ΔP<0.05。
结果表明:本发明a组和b、c、d组可明显提高小鼠外周血血小板数,与模型组相比有极显著性的差异(P<0.01);本发明a组与b、c、d组相比较有显著性差异(P<0.05)。可见,本发明a组比b、c、d组升高外周血血小板数的作用强。
六、对小鼠血清溶血素生成的影响
实验材料
1、动物:昆明种小鼠,雌雄兼有,体重18~22g。
2、药物:本发明a组和b、c、d组均为2.25g生药/粒;药物在实验前用蒸馏水配置,灌胃给药。
实验方法
昆明种小鼠50只,雌雄各半,体重18~22g,随机分成5组,每组10只。对照组灌胃同体积的生理盐水;本发明a组和b、c、d组分别灌胃给药5.0g生药/kg。每日1次,连续给药7d,在给药第二天,各组小鼠腹腔注射羊红细胞悬液(20亿个/ml)0.2ml。末次给药次日,小鼠眼眶取血进行溶血素测定。实验结果:见表6
表6对小鼠血清溶血素生成的影响
与对照组相比**P<0.01;与本发明a组比ΔP<0.05。
结果表明:本发明a组和b、c、d组可增强小鼠血清溶血素的生成,与对照组相比有极显著性的差异(P<0.01);本发明a组与b、c、d组相比较有显著性差异(P<0.05)。可见,本发明a组比b、c、d组的提高机体免疫功能作用强。
七、对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响
实验材料
1、动物:昆明种小鼠,雌雄兼有,体重18~22g。
2、药物:本发明a组和b、c、d组均为2.25g生药/粒;药物在实验前用蒸馏水配置,灌胃给药。
实验方法
昆明种小鼠50只,雌雄各半,体重18~22g,随机分成5组,每组10只。对照组灌胃同体积的生理盐水;本发明a组和b、c、d组分别灌胃给药5.0g生药/kg。连续给药7d,每天1次,末次给药1h后,每鼠腹腔注射5%鸡红细胞混悬液0.4ml,4h后处死小鼠,测腹腔巨噬细胞的吞噬指数。实验结果:见表7
与对照组相比**P<0.01;与本发明a组比ΔP<0.05。
结果表明:本发明a组和b、c、d组能显著提高小鼠巨噬细胞吞噬功能,与对照组相比有极显著性的差异(P<0.01);本发明a组与b、c、d组相比较有显著性差异(P<0.05)。本发明a组比b、c、d组的提高机体免疫功能作用强。
八、对小鼠抗疲劳的作用
实验材料
1、动物:昆明种小鼠,雌雄兼有,体重18~22g。
2、药物:本发明a组和b、c、d组均为2.25g生药/粒;药物在实验前用蒸馏水配置,灌胃给药。
实验方法
昆明种小鼠50只,雌雄各半,体重18~22g,随机分成5组,每组10只。对照组灌胃同体积的生理盐水;本发明a组和b、c、d组分别灌胃给药5.0g生药/kg。连续给药7d,每日1次,末次给药1h后,按体重的10%给小鼠尾部加负荷(铅丝),将小鼠放人55cm×35cm×15cm的游泳池中水温25℃,室温27℃,观察小鼠尾部加负荷游泳时间,小鼠鼻部沉入水中10s不再浮出水面为溺水指标。实验结果:见表8
与对照组相比**P<0.01;与本发明a组比ΔP<0.05。
结果表明:本发明a组和b、c、d组可明显延长小鼠的负重游泳时间,与对照组相比有极显著性的差异(P<0.01);本发明a组与b、c、d组相比较有显著性差异(P<0.05)。本发明a组比b、c、d组抗疲劳作用强。
实验结果:本发明a组和b、c、d组可明显抑制角叉菜胶致小鼠足的肿胀;显著抑制腹腔毛细血管通透性增加;明显增强血小板凝聚功能;可缩短凝血时间而起到止血作用;可明显提高小鼠外周血血小板数;可增强小鼠血清溶血素的生成;能显著提高小鼠巨噬细胞吞噬功能;可明显延长小鼠的负重游泳时间。
结论:本发明a组比b、c、d组的抗炎、抑制毛细血管通透性、增强血小板凝聚、提高外周血血小板数、缩短凝血时间、抗疲劳及提高机体免疫力等药理作用强。因此,临床上本发明a组比b、c、d组的清热解毒,凉血止血,散瘀消斑的疗效好。
急性毒性实验结果表明:将本发明胶囊最大浓度、最大容积灌胃给药,在24h内连续给药3次,每次间隔4h,累积药物总量达72g生药/kg,相当于临床拟用量的186.7倍。给药后7d内,小鼠活动、进食、排泄均正常,生长良好,毛色光亮,其平均体重均随试验时间的延长而增加。第8d处死后解剖每只小鼠肉眼观察心、肝、脾、肺、肾、脑、胸腺、肾上腺、胃、肠等均未发现颜色及形态异常。表明本发明胶囊无急性毒性反应。
长期毒性实验结果表明:本发明胶囊组分为低、中、高剂量分别为9、18、36g生药/kg/d,相当于临床剂量的23.3、46.7、93.3倍,灌胃给药12周后,本发明胶囊对动物的一般状况、血液学指标、血液生化指标均无明显的影响,系统解剖、脏器系数及组织病理学检查也未发现异常病理改变。停药2周也未见明显改变。本发明胶囊在长期毒性试验中,未发现明显毒性反应和延迟毒性反应。可见,本发明胶囊无毒性反应,长期用药安全可靠。
具体实施方式
1、本发明胶囊剂的制备:
处方:
青黛167g 连翘500g 甘草500g
牡丹皮833g 仙鹤草250g
制备方法:
以上五味药材,取青黛研成细粉;仙鹤草、牡丹皮以5倍量80%乙醇提取二次,每次2小时,合并二次乙醇提取液,滤过,回收乙醇并减压浓缩成60℃时相对密度为1.25~1.30的浸膏;连翘浸泡4小时,水蒸气蒸馏法提取挥发油6小时,挥发油另器贮存,水煎液留用,药渣与甘草水煎提取2次,每次煎煮1.5小时,二次水煎液与上述水煎液合并,滤过,浓缩成60℃时相对密度为1.25~1.30的浸膏,与上述醇提浸膏合并,加入青黛细粉,混匀,60℃烘干,粉碎成细粉,加入适量糊精,加入乙醇制成颗粒,烘干,整粒,喷入上述挥发油,混匀,装入胶囊,制成1000粒,即得。
2、本发明片剂的制备:
处方:
青黛167g 连翘500g 甘草500g
牡丹皮833g 仙鹤草250g
制备方法:
以上五味药材,取青黛研成细粉;仙鹤草、牡丹皮以5倍量80%乙醇提取二次,每次2小时,合并二次乙醇提取液,滤过,回收乙醇并减压浓缩成60℃时相对密度为1.25~1.30的浸膏;连翘浸泡4小时,水蒸气蒸馏法提取挥发油6小时,挥发油另器贮存,水煎液留用,药渣与甘草水煎提取2次,每次煎煮1.5小时,二次水煎液与上述水煎液合并,滤过,浓缩成60℃时相对密度为1.25~1.30的浸膏,与上述醇提浸膏合并,加入青黛细粉,混匀,60℃烘干,粉碎成细粉,加入适量淀粉,加入乙醇制成颗粒,烘干,整粒,喷入上述挥发油,混匀,压片,制成1000片,即得。
3、本发明颗粒剂的制备:
处方:
青黛167g 连翘500g 甘草500g
牡丹皮833g 仙鹤草250g
制备方法:
以上五味药材,取青黛研成细粉;仙鹤草、牡丹皮以5倍量80%乙醇提取二次,每次2小时,合并二次乙醇提取液,滤过,回收乙醇并减压浓缩成60℃时相对密度为1.25~1.30的浸膏;连翘浸泡4小时,水蒸气蒸馏法提取挥发油6小时,挥发油另器贮存,水煎液留用,药渣与甘草水煎提取2次,每次煎煮1.5小时,二次水煎液与上述水煎液合并,滤过,浓缩成60℃时相对密度为1.25~1.30的浸膏,与上述醇提浸膏合并,加入青黛细粉,混匀,60℃烘干,粉碎成细粉,加入适量糊精,加入乙醇制成颗粒,烘干,整粒,喷入上述挥发油,混匀,制成1000g颗粒,即得。
Claims (6)
1.一种升血小板中药组合物,其特征在于所述中药组合物的配方组成为:
青黛167g 连翘500g 甘草500g
牡丹皮833g 仙鹤草250g。
2.根据权利要求1所述中药组合物,其特征在于所述中药组合物的剂型为:胶囊剂、片剂或颗粒剂。
3.根据权利要求1所述中药组合物,其特征在于所述中药组合物最佳剂型为:胶囊剂。
4.根据权利要求1或2或3所述中药组合物的制备方法,其特征在于:
以上五味药材,取青黛研成细粉;仙鹤草、牡丹皮以5倍量80%乙醇提取二次,每次2小时,合并二次乙醇提取液,滤过,回收乙醇并减压浓缩成60℃时相对密度为1.25~1.30的浸膏;连翘浸泡4小时,水蒸气蒸馏法提取挥发油6小时,挥发油另器贮存,水煎液留用,药渣与甘草水煎提取2次,每次煎煮1.5小时,二次水煎液与上述水煎液合并,滤过,浓缩成60℃时相对密度为1.25~1.30的浸膏,与上述醇提浸膏合并,加入青黛细粉,混匀,60℃烘干,粉碎成细粉,加入适量糊精,加入乙醇制成颗粒,烘干,整粒,喷入上述挥发油,混匀,装入胶囊,制成1000粒,即得。
5.根据权利要求1或2所述中药组合物的制备方法,其特征在于:
以上五味药材,取青黛研成细粉;仙鹤草、牡丹皮以5倍量80%乙醇提取二次,每次2小时,合并二次乙醇提取液,滤过,回收乙醇并减压浓缩成60℃时相对密度为1.25~1.30的浸膏;连翘浸泡4小时,水蒸气蒸馏法提取挥发油6小时,挥发油另器贮存,水煎液留用,药渣与甘草水煎提取2次,每次煎煮1.5小时,二次水煎液与上述水煎液合并,滤过,浓缩成60℃时相对密度为1.25~1.30的浸膏,与上述醇提浸膏合并,加入青黛细粉,混匀,60℃烘干,粉碎成细粉,加入适量淀粉,加入乙醇制成颗粒,烘干,整粒,喷入上述挥发油,混匀,压片,制成1000片,即得。
6.根据权利要求1或2所述中药组合物的制备方法,其特征在于:
以上五味药材,取青黛研成细粉;仙鹤草、牡丹皮以5倍量80%乙醇提取二次,每次2小时,合并二次乙醇提取液,滤过,回收乙醇并减压浓缩成60℃时相对密度为1.25~1.30的浸膏;连翘浸泡4小时,水蒸气蒸馏法提取挥发油6小时,挥发油另器贮存,水煎液留用,药渣与甘草水煎提取2次,每次煎煮1.5小时,二次水煎液与上述水煎液合并,滤过,浓缩成60℃时相对密度为1.25~1.30的浸膏,与上述醇提浸膏合并,加入青黛细粉,混匀,60℃烘干,粉碎成细粉,加入适量糊精,加入乙醇制成颗粒,烘干,整粒,喷入上述挥发油,混匀,制成1000g颗粒,即得。
Priority Applications (1)
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