CN103004749A - 血细胞分析仪用稀释液 - Google Patents
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Abstract
本发明公开一种血细胞分析仪用稀释液,其包括:氯化钠、硫酸钠、磷酸盐缓冲剂、乙二胺四乙酸二钠、1-羟基吡啶-2-硫、甲醛;溶液的pH值为6.5-7.4,优选7.2;前述各组分的含量优选为:氯化钠5g/L,硫酸钠10g/L,乙二胺四乙酸二钠0.3g/L,1-羟基吡啶-2-硫0.2ml/L。本发明的有益之处在于:采用一般物理混合即可,制备十分方便;用1-羟基吡啶-2-硫替代了常用的抗菌防腐剂叠氮钠,无毒、使用安全,避免了对试剂生产人员和环境的损害;甲醛不仅具有防腐作用,还可保持血细胞形态和结构完整、增加血细胞抗机械损伤的性能;采用本发明稀释液与原厂稀释液具有相当的测试效果,但是成本得到了更好的控制。
Description
技术领域
本发明涉及一种稀释液,具体涉及一种血细胞分析仪用稀释液。
背景技术
血细胞稀释液通常是一类具有酸碱缓冲作用、适当的离子强度和电导率的等渗溶液。适当的离子强度、与血浆相同的渗透压,能在一定时间内完整的保持血细胞原来的体积;合适的电导率能保证获得与细胞体积相应的脉冲大小。
目前,血细胞分析仪用稀释液一般为仪器原厂提供的配套试剂或由国内生产企业采用进口试剂进行分装而来,所以试剂价格较贵且不便于运输,影响日常使用。良好的试剂对保证仪器的正常运行和日常维护及获得准确的测试结果至关重要,部分国产试剂虽然价格相对便宜,但一般稳定性较差,在结果的准确度及对机器的损害上无法估计。以上原因制约了医院检验科血常规检测血球计数分析项目的开展。所以,从现有的情况来看,急需研制出一种可以替代进口同类型试剂、价格更加合理的血细胞稀释液。
发明内容
为解决现有技术的不足,本发明的目的在于提供一种性质稳定、在保证测试效果的同时可降低试剂使用成本的血细胞分析仪用稀释液。
为了实现上述目标,本发明采用如下的技术方案:
一种血细胞分析仪用稀释液,其特征在于,包括以下组分:氯化钠、硫酸钠、磷酸盐缓冲剂、乙二胺四乙酸二钠、1-羟基吡啶-2-硫,前述各组分用纯水溶解,溶解后溶液的pH值为6.5-7.4。
前述的血细胞分析仪用稀释液,其特征在于,前述各组分的含量为:氯化钠4.6-5.2g/L,硫酸钠9.5-10.5g/L,乙二胺四乙酸二钠0.25-0.35g/L,1-羟基吡啶-2-硫0.18-0.24ml/L。
优选的,前述各组分的含量为:氯化钠5.0g/L,硫酸钠10.0g/L,乙二胺四乙酸二钠0.3g/L,1-羟基吡啶-2-硫0.2ml/L。
前述的血细胞分析仪用稀释液,其特征在于,前述溶解后的溶液的pH值为7.2。
前述的血细胞分析仪用稀释液,其特征在于,前述组分还包括:甲醛。
前述的血细胞分析仪用稀释液,其特征在于,前述甲醛的含量为0.5-0.7ml/L。
优选的,前述甲醛的含量为0.6ml/L。
本发明的有益之处在于:组分的种类相对较少,采用一般物理混合即可,制备十分方便;在本发明的配方中,用1-羟基吡啶-2-硫替代了常用的抗菌防腐剂叠氮钠,无毒、使用安全,避免了对试剂生产人员和环境的损害;另外,本发明的配方中还加入了一定量的甲醛,其不仅具有防腐作用,还具有半固定血细胞的作用,可保持血细胞形态和结构完整、增加血细胞抗机械损伤的性能;采用本发明的稀释液可以达到与原厂稀释液相当的测试效果,但是成本得到了更好的控制。
具体实施方式
稀释液使血细胞保持在血液中的原有形状,稀释液中维护细胞大小形状的主要因素有:摩尔渗透压浓度、PH值、导电性、缓冲作用力、离子多少、离子类型、变形力大小、温度等。改变这些参数中的任意一个,通常都能影响到其他参数达到平衡,而此时,血细胞的体积通常也会受到影响。以下结合具体实施例对本发明作具体的介绍。
首先,按照表1所示的配方制备血细胞稀释液。
表1血细胞稀释液配比
配制方法为:准确称取NaCl、Na2SO4、Na2HPO4/NaH2PO4、EDTA-2Na,用0.8L纯水充分溶解,然后加入1-羟基吡啶-2-硫,再加入甲醛,搅拌混匀后定容至1L;静置15分钟,将配制好的溶液用0.1μm滤芯过滤器过滤,即得到本发明的血细胞稀释液,待用。
在本发明的配方中,NaCl用来调节渗透压、离子浓度、PH值、K+/Na+比例;Na2SO4用于调节渗透压、离子浓度、防止细胞粘连;Na2HPO4/NaH2PO4用来调整稀释液的pH值,保证不同pH值的样品加入到其中时,仍能保持体系pH值的稳定;EDTA-2Na与水相中的钙离子形成稳定的螯合物,可阻止血液样本凝固;1-羟基吡啶-2-硫替代了常用的抗菌防腐剂叠氮钠,无毒、使用安全,避免了对试剂生产人员和环境的损害。
作为一种优选的方案,在配方中还加入了一定量的甲醛,其不仅具有防腐作用,还具有半固定血细胞的作用,可保持血细胞形态和结构完整、增加血细胞抗机械损伤的性能。
接下来,将本发明的稀释液与目前较为广泛使用的MEK原厂稀释液的主要理化参数进行比较。所采用的仪器如下:
全自动冰点渗透压计(上海医大仪器厂);
DDS-307W电导率仪(上海理达仪器厂);
PHS-3C型数显酸度计(雷磁分析仪器厂);
101系列数显鼓风干燥箱(上海叶拓仪器仪表有限公司)。
比较的参数以及结果见表2。
表2两种稀释液的主要理化参数比较
渗透压mOsm/kg | 电导率mS | pH值 | 干重g/L | |
MEK原厂稀释液 | 320 | 14.82 | 7.21 | 16.85 |
实施例1 | 323 | 14.87 | 7.21 | 16.90 |
实施例2 | 322 | 14.88 | 7.23 | 16.88 |
实施例3 | 323 | 14.89 | 7.18 | 16.89 |
实施例4 | 300 | 13.12 | 7.05 | 16.02 |
实施例5 | 325 | 14.88 | 7.06 | 16.99 |
实施例6 | 315 | 14.75 | 7.31 | 16.59 |
实施例7 | 336 | 15.11 | 7.31 | 17.61 |
实施例8 | 320 | 14.87 | 7.25 | 16.84 |
实施例9 | 321 | 14.88 | 7.10 | 16.93 |
实施例10 | 316 | 14.88 | 7.17 | 16.88 |
实施例11 | 324 | 14.89 | 7.24 | 16.89 |
实施例12 | 321 | 14.87 | 7.35 | 16.87 |
实施例13 | 322 | 14.89 | 7.10 | 16.88 |
由表2可以看出:本发明的稀释液与MEK原厂稀释液的渗透压、电导率、pH值数值相近,误差均不超过10%,说明二者浓度相当,配方效果接近。
由于血细胞分析仪只有在开机确认空白背景计数符合设计要求时,才能准确及时地对血液进行全面的分析,所以,接下来对本发明的稀释液与MEK原厂稀释液的空白背景计数进行比对分析。
分析方法为:
第一步:按MEK 7222K血细胞分析仪操作说明书进行操作,首先采用全套原厂试剂,以下称为进口稀释液,执行灌注程序,灌注完毕做空白背景计数5次并计算平均值,然后把新鲜血液上下颠倒摇匀后进行测试,重复10次,计算平均值(x)和偏差值(CV%);
第二步:将上述进口稀释液排空,接上本发明的稀释液,其余试剂依旧使用原厂试剂,组成新的稀释液,以下称为待比对稀释液,然后执行灌注程序,灌注完毕做空白背景计数5次并计算平均值,然后把新鲜血液上下颠倒摇匀后进行测试,重复10次,计算平均值(x)和偏差值(CV%)。
比对结果见表3。
表3两种稀释液的空白背景的比较
WBC(×109/L) | RBC(×1012/L) | HGB(g/L) | PLT(×109/L) | MCV(fL) | |
进口稀释液 | 0 | 0 | 0 | 1 | 0 |
实施例1 | 0.01 | 0 | 0 | 2 | 0 |
实施例2 | 0 | 0 | 0 | 1 | 0 |
实施例3 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 |
实施例4 | 0 | 0 | 0 | 1 | 0 |
实施例5 | 0 | 0 | 0 | 1 | 0 |
实施例6 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 |
实施例7 | 0.01 | 0 | 0 | 1 | 0 |
实施例8 | 0.01 | 0 | 0 | 1 | 0 |
实施例9 | 0 | 0 | 0 | 1 | 0 |
实施例10 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 |
实施例11 | 0.01 | 0 | 0 | 0 | 0 |
实施例12 | 0 | 0 | 0 | 1 | 0 |
实施例13 | 0 | 0 | 0 | 1 | 0 |
由表3可以看出:待比对稀释液和进口稀释液各项指标的空白背景计数均达到了仪器正常工作的要求。
最后,分别用上述进口稀释液、待比对稀释液对新鲜的血液标本进行测试,测试采用的仪器为MEK 7222K血细胞分析仪,测试方法按照MEK 7222K血细胞分析仪操作说明书进行操作即可,测试的结果见表4。
表4两种稀释液对照试验新鲜血液标本数据结果
由表4可以看出:进口稀释液、待比对稀释液分别对新鲜的血液标本进行测试,其白细胞、红细胞、血红蛋白、血小板和平均红细胞体积数据均较接近,CV值均小于10%。
将待比对稀释液在国内相关医院进行试验,并与进口原装MEK血细胞分析仪试剂进行对比,结果显示:本发明的血细胞分析仪稀释液在标本测试结果的准确性和稳定性方面均与进口试剂相近,其可以替代进口的同类型试剂。
需要说明的是,上述实施例不以任何形式限制本发明,凡采用等同替换或等效变换的方式所获得的技术方案,均落在本发明的保护范围内。
Claims (7)
1.血细胞分析仪用稀释液,其特征在于,包括以下组分:氯化钠、硫酸钠、磷酸盐缓冲剂、乙二胺四乙酸二钠、1-羟基吡啶-2-硫,上述各组分用纯水溶解,溶解后溶液的pH值为6.5-7.4。
2.根据权利要求1所述的血细胞分析仪用稀释液,其特征在于,上述各组分的含量为:氯化钠4.6-5.2g/L,硫酸钠9.5-10.5g/L,乙二胺四乙酸二钠0.25-0.35g/L,1-羟基吡啶-2-硫0.18-0.24ml/L。
3.根据权利要求2所述的血细胞分析仪用稀释液,其特征在于,上述各组分的含量为:氯化钠5.0g/L,硫酸钠10.0g/L,乙二胺四乙酸二钠0.3g/L,1-羟基吡啶-2-硫0.2ml/L。
4.根据权利要求1所述的血细胞分析仪用稀释液,其特征在于,上述溶解后的溶液的pH值为7.2。
5.根据权利要求1至4任意一项所述的血细胞分析仪用稀释液,其特征在于,上述组分还包括:甲醛。
6.根据权利要求5所述的血细胞分析仪用稀释液,其特征在于,上述甲醛的含量为0.5-0.7ml/L。
7.根据权利要求6所述的血细胞分析仪用稀释液,其特征在于,上述甲醛的含量为0.6ml/L。
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