CN103003269A

CN103003269A - 取代的杂环基苄基吡唑及其用途

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Publication number: CN103003269A
Application number: CN2011800336375A
Authority: CN
Inventors: M.赫特; H.贝克; S.格雷沙特-沙德; P.埃林豪斯; K.昂特舍姆; J.舒马歇尔
Original assignee: Bayer Pharma AG
Current assignee: Bayer Pharma AG; Bayer Intellectual Property GmbH
Priority date: 2010-05-08
Filing date: 2011-05-03
Publication date: 2013-03-27
Anticipated expiration: 2031-05-03
Also published as: BR112012028651A2; AU2011252223A1; KR20130108997A; DOP2012000284A; CR20120570A; EA201291167A1; IL222851A0; UY33369A; TW201200510A; CU20120157A7; AR081368A1; ECSP12012288A; ES2462522T3; CN103003269B; CO6640218A2; TN2012000531A1; EP2569312B1; MA34939B1; PE20130228A1; SG185459A1

Abstract

本申请涉及新颖的取代的1-[3-(杂环基)苄基]-1H-吡唑衍生物、它们的制备方法、它们用于治疗和/或预防疾病的用途、以及它们用于生产治疗和/或预防疾病的药物的用途，更具体地，所述药物用于治疗和/或预防过度增生性和血管生成性疾病和由于对缺氧状态的代谢适应导致的那些疾病。这样的治疗可以以单一疗法形式实现，或者结合其它药物或其它治疗措施实现。

Description

取代的杂环基苄基吡唑及其用途

癌症是多种不同组织的失控细胞生长的后果。在许多情况下，新细胞渗入现有组织(侵袭性生长)，或它们转移进遥远的器官中。癌症发生在多种不同的器官中，且经常以组织特异性的方式进展。因此，术语“癌症”作为上位概念，描述了不同器官、组织和细胞类型的一大群确定的疾病。

在2002年，全世界有440万人被诊断出乳房、肠、卵巢、肺或前列腺的肿瘤。在同一年，大约250万例死亡是由这些疾病引起(Globocan 2002年报道)。仅在美国预计在2005年由于癌症超过125万新病例和超过500 000例死亡。这些新病例中的大多数涉及肠(约100 000)、肺(约170 000)、乳房(约210 000)和前列腺(约230 000)的癌症。预计在接下来的10年中进一步增加大约15%的癌症(美国癌症学会，Cancer Facts and Figures，2005)。

通过外科手术措施和放疗措施，可以除去一些在早期的肿瘤。转移的肿瘤通常能通过化疗剂仅姑息地治疗。这里的目的是，实现生活品质改善和寿命延长的最适组合。

化学疗法经常由细胞毒性药物的组合组成。这些物质中的大多数以结合微管蛋白作为它们的作用机理，或它们是与核酸的形成和加工相互作用的化合物。最近，这些还包括干扰后生DNA修饰或细胞周期进展的酶抑制剂(例如组蛋白脱乙酰基酶抑制剂、极光激酶抑制剂)。由于这些疗法是有毒的，最近越来越多地聚焦于靶向疗法，其中阻断细胞中的特定过程，且没有高毒性的负荷。这些具体地包括激酶的抑制剂，所述抑制剂会抑制受体和信号传递分子的磷酸化。为此的一个实例是伊马替尼（Imatinib），其非常成功地用于治疗慢性髓细胞样白血病(CML)和胃肠间质肿瘤(GIST)。其它实例是：阻断EGFR激酶和HER2的物质，诸如厄洛替尼（Erlotinib），和VEGFR激酶抑制剂，诸如用于肾细胞癌、肝癌和晚期GIST的索拉非尼（Sorafenib）和舒尼替尼(Sunitinib)。

利用针对VEGF的抗体，已经可能延长结肠直肠癌患者的预期寿命。贝伐单抗(Bevacizumab)抑制血管生长，这是肿瘤快速繁殖的一个障碍，因为肿瘤需要与血管系统相连进行连续功能供给和清理。

血管生成的一种刺激因素是缺氧，这常见于实体肿瘤，因为血液供给由于失控的生长而不足。在缺氧的情况下，细胞会将它们的物质代谢从氧化磷酸化转换至糖酵解，从而稳定细胞中的ATP水平。该过程是由转录因子控制，所述转录因子随细胞中的氧含量而增量调节。该称作“缺氧诱导的因子”的转录因子(HIF)，通常在翻译后通过快速降解而除去，并防止被运输进细胞核中。这通过酶脯氨酰脱氢酶和FIH (“抑制HIF的因子”)对在氧可降解的结构域(ODD)中的2个脯氨酸单元和在C端附近的1个天冬酰胺单元的羟基化来实现。在修饰脯氨酸单元以后，HIF可以在Hippel-Lindau蛋白(泛素-E3-连接酶复合物的一部分)介导下被蛋白酶体降解(Maxwell, Wiesener等人, 1999)。在氧缺乏的情况下，所述降解不会发生，所述蛋白被增量调节并导致转录，或导致众多(超过100种)其它蛋白的转录阻断(Semenza和Wang, 1992; Wang和Semenza, 1995)。

转录因子HIF由受调节的α-亚基和组成性存在的β-亚基(ARNT, 芳基烃受体核转位分子)形成。α-亚基存在3种不同的物种：1α、2α和3α，其中后者被假定为最可能的抑制物(Makino, Cao等人, 2001)。HIF亚基是bHLH (基础的螺旋-环-螺旋)蛋白，它们经由它们的HLH-和PAS- (Per-Arnt-Sim)结构域而二聚化，这启动它们的反式激活活性(Jiang, Rue等人, 1996)。

在最重要的肿瘤实体中，HIF 1α-蛋白的过表达与增加的血管密度和增强的VEGF表达相关(Hirota和Semenza, 2006)。与此同时，葡萄糖代谢向糖酵解移动，克雷布斯循环减少，以支持细胞单元的生成。这也暗示脂类代谢的变化。这样的变化似乎保证肿瘤的存活。另一方面，如果HIF的活性现在被抑制，肿瘤的发展也会相应地被抑制。这已经在不同的实验模型中观察到(Chen, Zhao等人, 2003; Stoeltzing, McCarty等人, 2004; Li, Lin等人, 2005; Mizukami, Jo等人, 2005; Li, Shi等人, 2006)。因此，HIF控制的代谢的特异性抑制剂应适合作为肿瘤治疗剂。

WO 2004/089303-A2中描述了二芳基取代的吡唑类化合物作为用于治疗精神疾病的mGluR5调节剂。WO 2010/072352-A1和WO 2010/085584-A1中公开了3-苯基-5-(1H-吡唑-4-基)-1,2,4-噁二唑衍生物作为用于治疗自身免疫疾病和血管疾病的鞘氨醇-1-磷酸酯激动剂。

WO 2005/030121-A2和WO 2007/065010-A2中描述了特定吡唑衍生物用于抑制HIF和HIF调节的基因在肿瘤细胞中的表达的可用性。WO 2008/141731-A2中公开了杂芳基取代的N-苄基吡唑类化合物作为用于治疗癌症的HIF调节途径的抑制剂。但是，已经发现，许多这样的化合物不具有足够的抑制活性，或者，基于它们在动物模型中的药代动力学性质，预期在人体中会具有长半衰期(>48 h)，使得在重复的每天1次给药以后，可能积累大量物质。

因此，本发明的目的是，发现和提供新颖的化合物，所述化合物一方面充当转录因子HIF的反式激活作用的有效抑制剂，且另一方面具有这样的药代动力学分布：其允许重复地每天1次给药，且不会同时发生临床上有关的积累。这样的性质还会总体上导致这些HIF抑制剂的临床可用性的拓宽，并更具体地，促进它们与其它活性成分（例如常规肿瘤化疗剂）的可组合性。

该目的由在下文中描述的根据本发明的化合物来实现。在结构方面，该新颖的N-苄基吡唑衍的组的特征在于，在苄基头部基团的3位中的羟基-或氰基-取代的杂环基残基，其令人惊讶地导致所述化合物的改善的性能特征。

本发明具体地涉及通式(I)的化合物和它们的盐、溶剂化物和所述盐的溶剂化物，

其中

m是数1或2，

n是数1、2或3，

R¹是羟基或氰基，

且

R²是三氟甲氧基, 三氟甲基硫烷基, 三氟甲磺酰基, 五氟硫烷基或下式的基团

其中

*表示与苯基环的键合位，

R^3A和R^3B各自独立地是氟或甲基

或者

彼此相连，且与它们键合的碳原子一起，形成环丙烷-1,1-二基环、环丁烷-1,1-二基环、环戊烷-1,1-二基环、环己烷-1,1-二基环、氧杂环丁烷-3,3-二基环或四氢-2H-吡喃-4,4-二基环，

且

R⁴是氢、氟、甲基、三氟甲基或甲氧基。

在本发明范围内，优选的是，式(I)化合物和它们的盐、溶剂化物和所述盐的溶剂化物，其中

m和n各自独立地是数1或2，

R¹是羟基或氰基，

且

R²是三氟甲基、三氟甲氧基、三氟甲基硫烷基或下式的基团

其中

*表示与苯基环的键合位，

R^3A和R^3B都是甲基，或者彼此相连，且与它们键合的碳原子一起，形成环丙烷-1,1-二基环、环丁烷-1,1-二基环、氧杂环丁烷-3,3-二基环或四氢-2H-吡喃-4,4-二基环，

且

R⁴是氢、氟、甲基或三氟甲基。

在本发明范围内，特别优选的是，式(I)化合物和它们的盐、溶剂化物和所述盐的溶剂化物，其中

m和n都是数1或数2，

R¹是羟基或氰基，

且

R²是三氟甲氧基或下式的基团

其中

*表示与苯基环的键合位。

本发明的一个具体实施方案涉及式(I)化合物和它们的盐、溶剂化物和所述盐的溶剂化物，其中

R¹是羟基，

且

m、n和R²各自如上面所定义。

该后一实施方案对应着式(I-A)的化合物它们的盐、溶剂化物和所述盐的溶剂化物

其中m、n和R²各自如上面所定义。

在另一个方面，本发明也包括式(I-A)化合物的特定前药。一般而言，术语“前药”在本文中表示式(I-A)化合物的共价衍生物，其本身可以是生物学上有活性的或无活性的，但是在其在体内的停留时间期间，通过例如代谢或水解途径，转化成式(I-A)的化合物。

因此，本发明另外提供了式(I-PD)的化合物和它们的盐、溶剂化物和所述盐的溶剂化物，

其中m、n和R²各自如上面所定义

且

R^PD是下式的前药基团

其中

#表示与氧原子的键合位，

R⁵是氢或(C₁-C₄)-烷基，

且

R^6A和R^6B各自独立地是氢或甲基。

在本发明范围内，优选的是，式(I-PD)的化合物和它们的盐、溶剂化物和所述盐的溶剂化物，其中

R^PD是下式的前药基团

其中

#表示与氧原子的键合位。

所述式(I-PD)化合物是式(I-A)化合物的前药，其在水性介质或其它生理上相容的介质中具有良好的溶解性；此外，它们提供了与适当的酸的成盐可能性，这可以导致溶解性的进一步提高。因此，式(I-PD)化合物和它们的盐特别适合静脉内给药形式或者也适合具有改良的释放特征的固体制剂。由此也为这些化合物开辟了另外的治疗应用领域。

根据本发明的化合物因而是：式(I)、(I-A)和(I-PD)的化合物和它们的盐、溶剂化物和所述盐的溶剂化物，被式(I)、(I-A)和(I-PD)包括的下文所述式的化合物和它们的盐、溶剂化物和所述盐的溶剂化物，以及被式(I)、(I-A)和(I-PD)包括的在下文中作为工作实施例提及的化合物和它们的盐、溶剂化物和所述盐的溶剂化物，只要所述被式(I)、(I-A)和(I-PD)包括的且在下文中提及的化合物还不是盐、溶剂化物和所述盐的溶剂化物。

取决于它们的结构，根据本发明的化合物可以以不同的立体异构形式存在，即以构型异构体的形式存在，或也可能作为构象异构体（对映异构体和/或非对映异构体，包括在阻转异构体的情况下的那些）存在。本发明因此包括对映异构体和非对映异构体和它们的各自的混合物。以已知的方式，可以从对映异构体和/或非对映异构体的这样的混合物中分离出立体异构同质组分；为此优选使用色谱法，尤其是在非手性或手性相上的HPLC色谱法。

如果根据本发明的化合物能够以互变异构形式存在，则本发明包括所有的互变异构形式。

本发明也包括根据本发明的化合物的所有合适的同位素变体。根据本发明的化合物的同位素变体在这里理解为是指这样的化合物：其中在根据本发明的化合物内至少一个原子已经被替换为相同原子序数的另一原子，但是所述另一原子的原子质量不同于在自然界中通常存在或优势存在的原子质量。可以并入根据本发明的化合物中的同位素的实例是：氢、碳、氮、氧、磷、硫、氟、氯、溴和碘的同位素，诸如²H（氘）、³H（氚）、¹³C、¹⁴C、¹⁵N、¹⁷O、¹⁸O、³²P、³³P、³³S、³⁴S、³⁵S、³⁶S、¹⁸F、³⁶Cl、⁸²Br、¹²³I、¹²⁴I、¹²⁹I和¹³¹I。根据本发明化合物的某些同位素变体，如特别是其中已经并入一种或多种放射性同位素的那些，可能是有用的，例如，用于检查在体内的作用机理或活性成分在体内的分布；由于比较而言容易的可制备性和可检测性，用³H-或¹⁴C-同位素标记的特殊化合物适用于该目的。另外，由于化合物的更大代谢稳定性，同位素（例如氘）的嵌入可以导致一定的治疗益处，例如导致体内半衰期的延长或导致必需的活性剂量的降低；因此，根据本发明的化合物的这种改性也可以任选构成本发明的优选实施方式。根据本领域技术人员已知的通用方法，例如根据在下面描述的方法和在工作实施例中描述的方法，通过在其中使用各自的反应试剂和/或起始化合物的相应的同位素改性，可以制备根据本发明的化合物的同位素变体。

在本发明范围内，优选的盐是根据本发明的化合物的生理上可接受的盐。也包括这样的盐：尽管其本身不适合药用，但是其可以例如用于分离、纯化或贮存根据本发明的化合物。

根据本发明的化合物的生理上可接受的盐具体地包括无机酸、羧酸和磺酸的酸加成盐，例如盐酸、氢溴酸、硫酸、磷酸、甲磺酸、乙磺酸、甲苯磺酸、苯磺酸、萘二磺酸、醋酸、三氟醋酸、丙酸、乳酸、葡萄酸、苹果酸、柠檬酸、富马酸、马来酸和苯甲酸的盐。

在本发明范围内，溶剂化物指根据本发明的化合物的这样的形式：其以固体或液体状态通过与溶剂分子的配位作用形成络合物。水合物是溶剂化物的一种具体形式，其中所述配位作用是与水发生。作为溶剂化物在本发明范围内优选水合物。

在本发明范围内，除非另外指出，取代基具有下述定义：

在本发明范围内，(C₁-C₄)-烷基是具有1-4个碳原子的直链的或支化的烷基残基。示例性地和优选地可提及：甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基。

在本发明范围内，所有多次出现的残基彼此独立地定义。当在根据本发明的化合物中的残基被取代时，所述残基可以被单取代或多取代，除非另有说明。优选用1个或2个相同或不同的取代基进行的取代。特别优选用1个取代基进行的取代。

独立于各自给出的残基的组合，在残基的各自组合或优选组合中单独给出的残基的定义也任意被其它组合的残基定义替代。

2个或更多个上述优选范围的组合是最特别优选的。

本发明另外提供了用于制备式(I)化合物的方法，其特征在于，在合适的钯催化剂和碱存在下，使式(II)化合物与式(III)化合物偶联

其中R²如上面所定义

且

X是溴或碘，

其中m、n和R¹各自如上面所定义，

并任选地将如此得到的式(I)化合物分离成它们的对映异构体和/或非对映异构体，和/或使用适当的(i)溶剂和/或(ii)酸转化成它们的溶剂化物、盐和/或所述盐的溶剂化物。

反应(II) + (III)→(I)的适当的惰性溶剂是，例如，芳族烃诸如苯、甲苯或二甲苯，醚诸如乙醚、二异丙醚、甲基叔丁基醚、1,2-二甲氧基乙烷、双-(2-甲氧基乙基)醚，四氢呋喃或1,4-二噁烷，或偶极非质子溶剂诸如乙腈、N,N-二甲基甲酰胺(DMF)、N,N-二甲基乙酰胺(DMA)、二甲基亚砜(DMSO)、N,N'-二甲基亚丙基脲(DMPU)、N-甲基吡咯烷酮(NMP)或吡啶。同样可能使用这些溶剂的混合物。优选地，使用1,2-二甲氧基乙烷、四氢呋喃、N,N-二甲基甲酰胺或甲苯。

借助于过渡金属催化剂，进行偶联反应(II) + (III)→(I)。为此特别适用的是，钯(0)-催化剂，例如双(二亚苄基丙酮)钯(0)、三(二亚苄基丙酮)二钯(0)或四(三苯基膦基)钯(0)，其任选地与另外的膦配体相组合，诸如2-二环己基膦基-2'-(N,N-二甲氨基)联苯、2-二环己基膦基-2',4',6'-三异丙基联苯(X-Phos)或4,5-双(二苯基膦基)-9,9-二甲基呫吨(Xantphos) [参见，例如，J. Hassan等人, Chem. Rev. 102, 1359-1469 (2002)]。优选地，使用与2-二环己基膦基-2',4',6'-三异丙基联苯(X-Phos)相组合的三(二亚苄基丙酮)二钯(0)。

通常在加入碱的情况下进行偶联。为此特别适用的是，碱金属的碳酸盐、碳酸氢盐、磷酸盐、磷酸氢盐或叔丁醇盐，诸如碳酸钠、碳酸钾、碳酸铯、碳酸氢钠、碳酸氢钾、磷酸三钾、磷酸氢二钠、磷酸氢二钾、叔丁醇钠或叔丁醇钾。优选地，使用碳酸铯或叔丁醇钠。

通常在标准压力下在+50℃至+200℃、优选地在+100℃至+150℃的温度范围进行该反应(II) + (III)→(I)。但是，也可以在减压或增压(例如0.5-5巴)下进行。可能有益的是，在微波辐照的同时进行转化。

在R¹残基是羟基的情况下，可能有利的是，在上述的偶联反应(II) + (III)→(I)中，暂时保护该羟基。为此目的，优选地，使用化合物(III)的甲硅烷基衍生物，例如相应的三甲基甲硅烷基醚、三异丙基甲硅烷基醚、叔丁基二甲基甲硅烷基醚或叔丁基(二苯基)甲硅烷基醚，它们可以根据已知的方法从化合物(III)容易地得到。在偶联结束以后，然后再根据常规方法，例如通过用四正丁基氟化铵处理，使这些保护基重新裂解。

式(II)化合物本身可以如下制备：首先，使式(IV)的N'-羟基脒

其中R²如上面所定义

与式(V)的吡唑羧酸缩合

得到式(VI)的1,2,4-噁二唑衍生物

其中R²如上面所定义，

然后在碱存在下，使化合物(VI)与式(VII)的化合物反应

其中X如上面所定义

且

Y是离去基团，例如氯、溴、碘、甲磺酸盐、三氟甲磺酸盐或甲苯磺酸盐。

缩合反应(IV) + (V)→(VI)优选借助于碳二亚胺诸如N'-(3-二甲氨基丙基)-N-乙基碳二亚胺(EDC)，与作为活性酯组分的1-羟基-1H-苯并三唑(HOBt)相结合，或借助于光气衍生物诸如1,1'-羰二咪唑(CDI)，在高沸点偶极非质子溶剂例如N,N-二甲基甲酰胺或二甲基亚砜中进行。

该反应中的初始偶联步骤通常在0℃至+50℃的温度范围进行；然后，通过随后在+100℃至+150℃的温度加热所述反应混合物，环化成1,2,4-噁二唑。该反应可以在常压、增压或减压（例如0.5-5巴）下进行；通常在常压工作。

方法步骤(VI) + (VII)→(II)的惰性溶剂是，例如，卤代烃诸如二氯甲烷、三氯甲烷、四氯甲烷、三氯乙烯或氯苯，醚诸如乙醚、二异丙醚、甲基叔丁基醚、四氢呋喃、1,4-二噁烷、1,2-二甲氧基乙烷或双-(2-甲氧基乙基)醚，烃诸如苯、甲苯、二甲苯、戊烷、己烷、环己烷或石油馏分，或偶极非质子溶剂诸如丙酮、甲基乙基酮、乙酸乙酯、乙腈、N,N-二甲基甲酰胺(DMF)、N,N-二甲基乙酰胺(DMA)、二甲基亚砜(DMSO)、N,N'-二甲基丙烯基脲(DMPU)、N-甲基吡咯烷酮(NMP)或吡啶。同样可以使用所述溶剂的混合物。优选使用四氢呋喃或1,4-二噁烷。

适用于反应(VI) + (VII)→(II)的碱是常规的无机或有机碱。这些优选地包括：碱金属氢氧化物例如氢氧化锂、氢氧化钠或氢氧化钾，碱金属醇盐诸如甲醇钠或甲醇钾、乙醇钠或乙醇钾、或叔丁醇钠或叔丁醇钾，碱金属氢化物诸如氢化钠或氢化钾，或氨化物诸如氨基钠、双(三甲基甲硅烷基)氨基锂或双(三甲基甲硅烷基)氨基钾或二异丙基氨基锂。优选使用叔丁醇钾。可以有利地加入烷基化催化剂，例如溴化锂、碘化钠、四正丁基溴化铵或苄基三乙基氯化铵。

所述反应通常在-20℃至+100℃、优选在0℃至+60℃的温度范围进行。所述反应可以在常压、增压或减压（例如0.5-5巴）下进行；通常在常压工作。

本发明另外提供了用于制备式(I-PD)化合物的方法，其特征在于，根据常规方法，用式(VIII)的化合物或该化合物的活化形式酯化式(I-A)的化合物，

其中R^PD如上面所定义，

其中m、n和R²各自如上面所定义，

并任选地将如此得到的式(I-PD)化合物分离成它们的对映异构体和/或非对映异构体，和/或使用适当的(i)溶剂和/或(ii)酸转化成它们的溶剂化物、盐和/或所述盐的溶剂化物。

适用于引入前药基团R^PD的化合物(VIII)的活化形式是，例如，相应的氯化物或酸酐，包括混合的酸酐，或者某些酯-或酰胺衍生物。存在于残基R^PD中的游离氨基以临时受保护的形式适当地存在于这里，然后在酯化反应结束时根据常规方法再次释放。作为这样的保护优选使用叔丁氧基羰基，其可以通过用强酸如氯化氢或三氟醋酸处理来裂解[参见，例如，M. Bodanszky和A. Bodanszky, The Practice of Peptide Synthesis, Springer-Verlag, Berlin, 1984; M. Bodanszky, Principles of Peptide Synthesis, Springer-Verlag, Berlin, 1993; T.W. Greene和P.G.M. Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, Wiley, New York, 1999]。

式(I-A)的化合物本身可通过上述的偶联反应(II) + (III)→(I)得到。

式(III)、(IV)、(V)、(VII)和(VIII)的化合物是商购可得的，或作为描述于文献中的那些，或它们可以以类似于在文献中公开的方法以本领域技术人员显而易见的方式来制备。在实验部分中在制备原料化合物和中间体的部分中，也有用于制备原料的许多详细方法和文献信息。

通过下面的反应路线图可以示例性地说明根据本发明的化合物的制备：

路线图 1

路线图 2

路线图 3

根据本发明的化合物具有有价值的药理学性质，且可以用于预防和/或治疗人类和动物的疾病。

根据本发明的化合物是HIF调节途径的高效抑制剂。另外，根据本发明的化合物在它们的分布容积和/或它们的清除率和由此衍生出的半衰期方面具有有利的药代动力学性质，这使得它们适合重复的每天1次给药。

基于它们的作用特性，根据本发明的化合物特别适用于治疗人类和哺乳动物的一般过度增生性疾病。所述化合物可以抑制、阻断、减少或减慢细胞增殖和细胞分裂，且另一方面会增加细胞凋亡。

可以使用根据本发明的化合物治疗的过度增生性疾病尤其包括：银屑病、疤痕疙瘩、疤痕形成和其它皮肤增生性疾病，良性疾病，诸如良性前列腺增生(BPH)，以及尤其是肿瘤疾病类。在本发明范围内，这些被认为具体地是指下述疾病，但是不限于此：乳癌和乳房肿瘤(导管形式和小叶形式以及原位形式)、呼吸道肿瘤(小细胞性癌和非小细胞性癌、支气管癌)、脑肿瘤(例如脑干肿瘤和下丘脑肿瘤、星形细胞瘤、髓母细胞瘤、室管膜瘤和神经外胚层肿瘤和松果体肿瘤)、消化器官(食管、胃、胆囊、小肠、大肠、直肠)的肿瘤、肝肿瘤(包括肝细胞癌、胆管细胞癌和混合型肝细胞癌和胆管细胞癌)、头颈部(喉、下咽、鼻咽、口咽、唇和口腔)的肿瘤、皮肤肿瘤(鳞状上皮癌、卡波西肉瘤、恶性黑色素瘤、梅克尔细胞皮肤癌和非黑色素瘤性皮肤癌)、软组织肿瘤(包括软组织肉瘤、骨肉瘤、恶性纤维组织细胞瘤、淋巴肉瘤和横纹肌肉瘤)、眼肿瘤(包括眼内黑色素瘤和视网膜母细胞瘤)、内分泌腺肿瘤和外分泌腺肿瘤(例如甲状腺和甲状旁腺、胰腺和唾液腺)、泌尿道肿瘤(膀胱、阴茎、肾、肾盂和输尿管的肿瘤)和生殖器官肿瘤(子宫内膜癌、宫颈癌、卵巢癌、阴道癌、女性外阴-和子宫癌以及男性的前列腺和睾丸癌)。这些也包括实体形式和作为循环血细胞的增生性血液疾病，诸如淋巴瘤、白血病和骨髓增生性疾病例如急性髓样白血病、急性淋巴细胞性白血病、慢性淋巴细胞性白血病、慢性髓样白血病和毛细胞性白血病，以及AIDS相关的淋巴瘤、霍奇金淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤、皮肤T细胞淋巴瘤、伯基特淋巴瘤和中枢神经系统中的淋巴瘤。

这些人类的确定地描述的疾病也可以以可比较的病因出现在其它哺乳动物中，且在那里可以用本发明的化合物进行治疗。

在本发明范围内，术语“治疗”或“治疗”以常规含义使用，且是指照料、看护和护理患者，其目的是，抵抗、减少、减弱或减轻疾病或健康异常，并改善受该疾病损害的生活质量，例如，在癌症的情况下。

根据本发明的化合物可以充当HIF调节途径的调节剂，并因而也适用于治疗与HIF转录因子的有害表达有关的疾病。这尤其涉及转录因子HIF-1α和HIF-2α。术语“HIF的有害表达”在这里是指HIF蛋白的异常生理学存在。这可以由蛋白的过度合成(mRNA或翻译造成的)造成，由减少的降解造成，或由转录因子功能的不充分负调节造成。

HIF-1α和HIF-2α调节超过100个基因。这涉及在血管生成中起作用并因此与肿瘤直接相关的蛋白，以及影响葡萄糖-、氨基酸-和脂类代谢和细胞迁移、转移和DNA修复或通过抑制细胞凋亡来提高肿瘤细胞的存活的那些。其它HIF则通过抑制免疫反应和增量调节炎症细胞中的血管生成因子而更间接地起作用。HIF也在干细胞，在这里，特别是据报道具有升高的HIF水平的肿瘤干细胞中起重要作用。通过由本发明的化合物对HIF调节途径的抑制，因而也对肿瘤干细胞具有治疗影响，所述肿瘤干细胞不具有高增殖速率并因此仅不足地受到细胞毒性物质的影响(参见Semenza, 2007; Weidemann和Johnson, 2008)。

通过HIF改变细胞代谢不限于肿瘤，而是也发生在其它长期或暂时的缺氧病理生理学过程中。HIF抑制剂-如本发明的化合物-在这些方面是治疗上有益的，其中，例如，通过细胞对缺氧情况的适应产生额外的损伤，因为受损伤的细胞如果不能执行预期的功能，会造成进一步损伤。对此的一个实例是，在中风以后在部分受损的组织中的癫痫病灶的形成。在心血管疾病的情况下，如果由血栓栓塞性事件、炎症、创伤、中毒或其它原因引起的缺血过程发生在心脏中或脑中，会发现类似的情形。这些可以导致损伤诸如局部地受阻的动作电位，后者又可以引起心律失常或慢性心力衰竭。在暂时形式中，例如由于呼吸暂停，在某些情况下，可能存在原发性血压升高，后者可以导致已知的后遗症，例如中风和心脏梗塞。

因此，通过根据本发明的化合物实现的HIF调节途径的抑制，也可以有益于诸如下述疾病：心力衰竭、心律失常、心肌梗塞、呼吸暂停诱发的高血压、肺性高血压、移植物缺血、再灌注损伤、中风和黄斑变性，以及创伤性损伤或切断以后的神经功能恢复。

因为HIF是控制从上皮细胞类型向间质细胞类型转变的因子之一，它特别对于肺和肾而言是重要的，也可以使用根据本发明的化合物，以预防或控制与HIF有关的肺和肾的纤维组织。

可以使用根据本发明的化合物用于其治疗的其它疾病是：炎症性关节疾病，诸如各种形式的关节炎，和炎症性肠疾病，例如，克罗恩氏病。

楚瓦士红细胞增多在红细胞生成过程中尤其在脾中由HIF-2α活性介导。根据本发明的化合物，作为HIF调节途径的抑制剂，因此在这里也适用于抑制过度的红细胞形成，并因此适用于减轻该疾病的影响。

本发明的化合物还可以用于治疗与过度的或异常的血管生成有关的疾病。这些尤其包括：糖尿病视网膜病变、缺血性视网膜静脉闭塞和早产儿的视网膜病变(参见Aiello等人, 1994; Peer等人, 1995)、年龄相关的黄斑变性(AMD；参见Lopez等人, 1996)、新生血管性青光眼、银屑病、晶状体后纤维增生、血管纤维瘤、炎症、风湿性关节炎(RA)、再狭窄、支架内再狭窄和血管植入以后的再狭窄。

此外，增加的血液供给也与癌性的肿瘤组织有关，并在这里导致加速的肿瘤生长。此外，新血管和淋巴管的生长会促进转移灶的形成，并因此促进肿瘤的传播。新淋巴管和血管对免疫豁免的组织（诸如眼）中的同种异体移植物也是有害的，例如，这增加了排斥反应的易感性。本发明的化合物因此也可以用于治疗前述疾病中的任一种，例如通过抑制血管的生长或减少血管的数目。这可以如下实现：通过抑制内皮细胞增殖或用于阻止或减弱血管形成的其它机理，和通过细胞凋亡造成的肿瘤细胞减少。

在肥胖的情况下，在脂肪组织中出现HIF-1α的富集，从而导致HIF介导的能量代谢向糖酵解的方向转移，使得增加量的葡萄糖作为能量载体被消耗。这同时导致减少的脂类代谢，并因此导致脂类在组织中的蓄积。因此，根据本发明的物质也适用于治疗HIF-1α介导的脂类在组织中的富集，特别是在肥胖的情况下。

本发明另外提供了根据本发明的化合物用于治疗和/或预防疾病、尤其是上述疾病的用途。

本发明另外提供了根据本发明的化合物用于生产药物的用途，所述药物用于治疗和/或预防疾病、尤其是上述疾病。

本发明另外提供了根据本发明的化合物在用于治疗和/或预防疾病、尤其是上述疾病的方法中的用途。

本发明另外提供了用于治疗和/或预防疾病、尤其是上述疾病的方法，所述方法使用有效量的至少一种根据本发明的化合物。

根据本发明的化合物可以单独使用，或在需要时与一种或多种其它药理学活性物质组合使用，条件是，该组合不会导致不希望的和不可接受的副作用。因此，本发明另外提供了药物，所述药物含有至少一种根据本发明的化合物和一种或多种其它活性化合物，尤其是用于治疗和/或预防上述的疾病。

例如，本发明的化合物可以与已知的用于治疗癌症的抗过度增生的、抑制细胞生长的或细胞毒性物质相组合。因此，根据本发明的化合物与常规用于癌症治疗的其它物质或与放射疗法的组合是特别适当的，因为肿瘤的缺氧区域对提及的常规疗法仅做出微弱响应，而相反本发明的化合物尤其在这些区域表现出它们的活性。

适用于组合的活性成分例如可提及：

阿地白介素、阿仑磷酸、Alfaferone、阿利维A酸、别嘌醇、Aloprim、Aloxi、六甲蜜胺、氨鲁米特、氨磷汀、氨柔比星、安吖啶、阿那曲唑、Anzmet、Aranesp、Arglabin、三氧化二砷、阿诺新、5-氮胞苷、硫唑嘌呤、BCG或tice-BCG、苯丁抑制素、醋酸倍他米松、倍他米松磷酸钠、贝沙罗汀、硫酸博来霉素、溴尿苷、硼替佐米、白消安、降钙素、Campath、卡培他滨、卡铂、康士得、Cefesone、西莫白介素、柔红霉素(Cerubidin)、苯丁酸氮芥、顺铂、Cladribin、氯膦酸、环磷酰胺、阿糖胞苷、达卡巴嗪、更生霉素、枸橼酸柔红霉素脂质体(Daunoxome)、地塞米松、磷酸地塞米松、戊酸雌二醇、地尼白介素2(Denileukin Diftitox)、甲基泼尼松龙(Depomedrol)、地洛瑞林、右雷佐生、己烯雌酚、大扶康、多西他赛、去氧氟尿苷、多柔比星、屈大麻酚、DW-166HC、Eligard、Elitek、表阿霉素（Ellence）、Emend、表柔比星、红细胞生成素-α、阿法依伯汀、依他铂、左旋噻咪唑(Ergamisol)、Estrace、雌二醇、雌莫司汀磷酸钠、炔雌醇、氨磷汀、依替膦酸、凡毕复、依托泊苷、法倔唑、Farstone、非格司亭、非那雄胺、Fligrastim、氟脲苷、氟康唑、氟达拉滨(Fludarabin)、5-氟脱氧尿苷单磷酸、5-氟尿嘧啶(5-FU)、氟甲睾酮、氟他胺、福美坦、Fosteabine、福莫司汀、氟维司群、Gammagard、吉西他滨、吉姆单抗、格列卫、Gliadel、戈舍瑞林、盐酸格拉司琼、组氨瑞林、美新、氢化可通（Hydrocorton）、赤式-羟基壬基腺嘌呤、羟基脲、替伊莫单抗、伊达比星、异环磷酰胺、干扰素-α、干扰素-α-2、干扰素-α-2α、干扰素-α-2β、干扰素-α-n1、干扰素-α-n3、干扰素-β、干扰素-γ-1α、白介素-2、甘乐能(Intron A)、易瑞沙、伊立替康、凯特瑞、硫酸香菇多糖、来曲唑、亚叶酸、亮丙瑞林、醋酸亮丙瑞林、左旋咪唑、左叶酸钙盐、Levothroid、Levoxyl、洛莫司汀、氯尼达明、屈大麻酚、氮芥、甲钴胺、醋酸甲羟孕酮、醋酸甲地孕酮、美法仑、Menest、6-巯嘌呤、美司钠、甲氨蝶呤、美特维克、米替福新、米诺环素、丝裂霉素C、米托坦、米托蒽醌、曲洛司坦、阿霉素脂质体(Myocet)、奈达铂、Neulasta、Neumega、优保津、尼鲁米特、诺瓦得士、NSC-631570、OCT-43、奥曲肽、盐酸昂丹司琼、Orapred、奥沙利铂、紫杉醇、Pediapred、培门冬酶、派罗欣、喷司他丁、溶血性链球菌制剂、盐酸毛果芸香碱、吡柔比星、普卡霉素、卟吩姆钠、泼尼莫司汀、泼尼松龙、泼尼松、倍美力、丙卡巴肼、Procrit、雷替曲塞、利比、依替膦酸铼-186、利妥昔单抗、罗荛愫、罗莫肽、Salagen、善宁、沙格司亭、司莫司汀、西佐喃、索布佐生、甲强龙、链佐星、氯化锶-89、Synthroid、他莫昔芬、坦洛新、他索那敏、Tastolactone、Taxoter、替西白介素、替莫唑胺、替尼泊苷、丙酸睾酮、Testred、硫鸟嘌呤、塞替派、促甲状腺素、替鲁膦酸(Tiludronsäure)、托泊替康、托瑞米芬(Toremifen)、托西莫单抗、Tastuzumab、Teosulfan、维甲酸、甲氨蝶呤（Trexall）、三甲基三聚氰胺、三甲曲沙、醋酸曲普瑞林、双羟萘酸曲普瑞林、UFT、尿苷、戊柔比星、维司力农、长春碱、长春新碱、长春地辛、长春瑞滨、维鲁利秦、右雷佐生（Zinecard）、净司他丁斯酯（Zinostatin-Stimalamer）、枢复宁(Zofran); ABI-007、Acolbifen、Actimmune、Affinitak、氨基蝶呤、Arzoxifen、Asoprisnil、阿他美坦、阿曲生坦、阿伐斯汀、CCI-779、CDC-501、西乐葆、西妥昔单抗、克立那托、醋酸环丙孕酮、地西他滨、DN-101、多柔比星-MTC、dSLIM、度他雄胺、Edotecarin、依氟鸟氨酸、依沙替康、芬维A胺(Fenretinid)、二盐酸组胺、组氨瑞林水凝胶植入物、钬-166 DOTMP、伊班膦酸、干扰素-γ、干扰素-PEG、Ixabepilon、钥孔戚血蓝素、L-651582、兰瑞肽、Lasofoxifen、Libra、Lonafarnib、Miproxifen、Minodronat、MS-209、脂质体MTP-PE、MX-6、那法瑞林、奈莫柔比星、新伐司他、诺拉曲塞、Oblimersen、Onko-TCS、Osidem、聚谷氨酸紫杉醇、帕米膦酸二钠、PN-401、QS-21、夸西泮、R-1549、雷洛昔芬、Ranpirnas、Regorafenib、13-顺式-Retinsäure、沙铂、西奥骨化醇、索拉非尼、T-138067、特罗凯、Taxoprexin、胸腺素-α-1、噻唑羧胺核苷、Tipifarnib、替拉扎明、TLK-286、Toremifen、transMID-107R、伐司朴达、伐普肽、Vatalanib、维替泊芬、Vinflunin、Z-100、唑来膦酸和它们的组合。

在一个优选的实施方案中，本发明的化合物可以与抗过度增生剂相组合，作为示例性地-而非排它的列举-所述抗过度增生剂可以是：

氨鲁米特、L-门冬酰胺酶、硫唑嘌呤、5-氮胞苷、博来霉素、白消安、喜树碱、卡铂、卡莫司汀、苯丁酸氮芥、顺铂、门冬酰胺酶（Colaspase）、环磷酰胺、阿糖胞苷、达卡巴嗪、更生霉素、柔红霉素、己烯雌酚、2',2'-二氟脱氧胞苷、多西他赛、多柔比星(阿霉素)、表柔比星、埃博霉素和它的衍生物、赤式-羟基壬基腺嘌呤、炔雌醇、依托泊苷、磷酸氟达拉滨、5-氟脱氧尿苷、5-氟脱氧尿苷单磷酸、5-氟尿嘧啶、氟甲睾酮、氟他胺、六甲基三聚氰胺、羟基脲、己酸羟孕酮、伊达比星、异环磷酰胺、干扰素、伊立替康、亚叶酸、洛莫司汀、氮芥、醋酸甲羟孕酮、醋酸甲地孕酮、美法仑、6-巯嘌呤、美司钠、甲氨蝶呤、丝裂霉素C、米托坦、米托蒽醌、紫杉醇、喷司他丁、N-膦酰基乙酰基-L-天冬氨酸酯(PALA)、普卡霉素、泼尼松龙、泼尼松、丙卡巴肼、雷洛昔芬、司莫司汀、链佐星、他莫昔芬、替尼泊苷、丙酸睾酮、硫鸟嘌呤、塞替派、托泊替康、三甲基三聚氰胺、尿苷、长春碱、长春新碱、长春地辛和长春瑞滨。

根据本发明的化合物也可以以非常有希望的方式与生物治疗剂相组合，所述生物治疗剂如抗体(例如阿伐斯汀、美罗华、爱必妥、赫赛汀)和重组蛋白，它们累加地或协同地增强HIF信号途径传递的抑制作用。

HIF调节途径的抑制剂，诸如根据本发明的化合物，也可以与针对血管生成的其它治疗剂相组合地实现积极效果，例如与阿伐斯汀、Axitinib、Recentin、Regorafenib、索拉非尼或舒尼替尼相组合。与蛋白酶体抑制剂和mTOR抑制剂和抗激素剂和甾体类代谢酶抑制剂的组合是特别合适的，因为它们具有有利的副作用谱(Nebenwirkungsprofil)。

通常，本发明的化合物与其它细胞生长抑制性的或细胞毒性的活性剂的组合，可以实现下述目的：

· 与使用单一活性成分的治疗相比，在减慢肿瘤生长方面、在减小肿瘤大小方面或甚至在完全消除肿瘤方面提高的效力；

· 与在单一疗法情况下相比，以更低的剂量使用化疗剂的可能性；

· 与单独施用相比，以更少的副作用实现更耐受的疗法的可能性；

· 治疗更宽的肿瘤谱的可能性；

· 实现对治疗的更高应答率；

· 与当前的标准疗法相比，更长的患者存活时间。

另外，根据本发明的化合物也可以与放射疗法和/或外科手术结合使用。

本发明另外提供了药物及其用于前述目的的用途：所述药物含有至少一种根据本发明的化合物，通常伴有一种或多种惰性、无毒、药学上合适的赋形剂。

根据本发明的化合物可以全身地和/或局部地起作用。为此目的，可以将它们以合适的方式施用，例如口服的、肠胃外的、肺的、鼻的、舌下的、舌的、经颊的、直肠的、真皮的、透皮的、结膜的、耳的途径，或作为植入物或支架。

根据本发明的化合物可以以适合这些给药途径的给药形式施用。

就口服给药而言，这样的给药形式是合适的：所述给药形式根据现有技术起作用，快速地和/或以受限制地释放根据本发明的化合物，其含有结晶形式和/或无定形化形式和/或溶解形式的根据本发明的化合物，例如片剂（无包衣的或包衣的片剂，例如具有胃液抗性的或延迟溶解的或不溶性的包衣，所述包衣控制根据本发明的化合物的释放）、在口腔中快速崩解的片剂或膜/淀粉纸、膜/冻干粉剂、胶囊剂（例如硬-或软明胶胶囊剂）、糖衣药丸、颗粒、丸剂、散剂、乳剂、混悬液、气雾剂或溶液。

绕开吸收步骤（例如静脉内的、动脉内的、心内的、椎管内的或腰椎内的给药），或包括吸收（例如肌肉内的、皮下的、皮内的、经皮的或腹膜内的给药），可以实现肠胃外给药。适合肠胃外给药的给药形式尤其是以溶液、混悬液、乳剂、冻干粉剂或无菌粉末形式的注射制剂和输注制剂。

就其它给药途径而言，合适的例如是，吸入药形式（尤其是粉末吸入器和喷雾器）、滴鼻剂、-溶液或-喷剂、用于舌、舌下或经颊给药的片剂、膜剂/淀粉纸剂或胶囊剂、栓剂、耳-或眼用制剂、阴道胶囊剂、水性混悬液（洗剂、振摇混合物）、亲脂混悬液、软膏剂、乳膏剂、透皮治疗体系（例如膏药）、乳状液、糊剂、泡沫、扑粉、植入物或支架。

优选口服和肠胃外给药，尤其是口服和静脉内给药。

可以将根据本发明的化合物转化成所述的给药形式。这可以以本身已知的方式，通过与惰性的、无毒的、药学上合适的赋形剂相混合来实现。这些赋形剂尤其包括载体材料（例如微晶纤维素、乳糖、甘露醇）、溶剂（例如液体聚乙二醇）、乳化剂和分散剂或润湿剂（例如十二烷基硫酸钠、聚氧山梨醇酐油酸酯）、粘合剂（例如聚乙烯吡咯烷酮）、合成的和天然的聚合物（例如白蛋白）、稳定剂（例如抗氧化剂例如抗坏血酸）、着色剂（例如无机颜料例如氧化铁）以及口味-和/或气味矫正剂。

一般而言，已经证实有利的是，在肠胃外给药时施用约0.001-1 mg/kg、优选约0.01-0.5 mg/kg体重的量用于获得有效的结果。在口服给药时，所述剂量是约0.01-100 mg/kg、优选约0.01-20 mg/kg和最优选0.1-10 mg/kg体重。

尽管如此，有时可能会需要偏离所述量，更确切地说取决于体重、给药途径、个体对活性物质的应答、制剂的类型和进行给药的时间或间隔。例如，在有些情况下，少于前述最少量可能是足够的，而在另一些情况下，必须超过所述上限。在施用更大量的情况下，可以推荐的是，将这些量分成在一天中多次的单独给药。

下面的工作实施例说明了本发明。本发明不限于所述实施例。

除非另有说明，在下述的实验和实施例中所述的百分比数据是重量百分比，份数是重量份数。液体/液体溶液的溶剂比、稀释比和浓度数据各基于体积计。

A. 实施例

缩写和首字母简略词:

abs. 绝对，无水

Ac 乙酰基

aq. 水性的

Bsp. 实施例

Bu 丁基

ca. 约，大约

CDI 1,1'-羰二咪唑

CI 化学电离(在MS中)

d 双峰(在NMR中)

d 天

DAST 二乙胺基三氟化硫

DC 薄层色谱法

DCI 直接化学电离(在MS中)

dd 双重双重峰(在NMR中)

DMAP 4-N,N-二甲氨基吡啶

DME 1,2-二甲氧基乙烷

DMF N,N-二甲基甲酰胺

DMSO 二甲基亚砜

dt 双重三重峰(在NMR中)

d. Th. 即

EDC N'-(3-二甲氨基丙基)-N-乙基碳二亚胺-氯化氢

ee 对映体过量

EI 电子碰撞电离(在MS中)

eq. 当量

ESI 电喷射电离(在MS中)

Et 乙基

GC 气相色谱法

h 小时

HOBt 1-羟基-1H-苯并三唑水合物

HPLC 高压-，高效液相色谱法

ⁱPr 异丙基

LC-MS 液相色谱法偶联的质谱法

lit. 文献(参考文献)

m 多重峰(在NMR中)

Me 甲基

min 分钟

MPLC 中压液相色谱法(在硅胶上；也称作“快速色谱法”)

Ms 甲磺酰基(甲磺酰基)

MS 质谱法

NMP N-甲基-2-吡咯烷酮

NMR 核磁共振光谱测定法

Pd/C 在活性炭上的钯

PEG 聚乙二醇

Pr 丙基

quart 四重峰(在NMR中)

quint 五重峰(在NMR中)

R_f 保留指数(在DC中)

RT 室温

R_t 保留时间(在HPLC中)

s 单峰(在NMR中)

sept 七重峰(在NMR中)

t 三重峰(在NMR中)

TBAF 四正丁基氟化铵

^tBu 叔丁基

Tf 三氟甲硫酰基(三氟甲磺酰基)

TFA 三氟醋酸

THF 四氢呋喃

UV 紫外光谱测定法

v/v (溶液的)体积比

zus. 共计。

HPLC-、LC/MS-和GC/MS-方法：

方法 1 (LC/MS) ：

MS仪器类型：Micromass ZQ；HPLC仪器类型：HP 1100系列；UV DAD；柱：Phenomenex Gemini 3µ, 30 mm x 3.00 mm；洗脱液A：1 l水+ 0.5 ml 50%的甲酸，洗脱液B：1 l乙腈+ 0.5 ml 50% 的甲酸；梯度：0.0 min 90% A→2.5 min 30% A→3.0 min 5% A→4.5 min 5% A；流速：0.0 min 1 ml/min→2.5 min/3.0 min/4.5 min 2 ml/min；恒温箱：50℃；紫外检测：210 nm。

方法 2 (LC/MS) ：

仪器：带有HPLC Agilent Serie 1100的Micromass Quattro Micro MS；柱：Thermo Hypersil GOLD 3µ, 20 mm x 4 mm；洗脱液A：1 l水+ 0.5 ml 50% 的甲酸，洗脱液B：1 l乙腈+ 0.5 ml 50% 的甲酸；梯度：0.0 min 100% A→3.0 min 10% A→4.0 min 10% A→4.01 min 100% A (流速2.5 ml/min)→5.00 min 100% A；恒温箱：50℃；流速：2 ml/min；紫外检测：210 nm。

方法 3 (LC/MS) ：

MS仪器类型：Micromass ZQ；HPLC仪器类型：Waters Alliance 2795；柱：Phenomenex Synergi 2.5µ MAX-RP 100A Mercury 20 mm x 4 mm；洗脱液A：1 l水+ 0.5 ml 50% 的甲酸，洗脱液B：1 l乙腈+ 0.5 ml 50% 的甲酸；梯度：0.0 min 90% A→0.1 min 90% A→3.0 min 5% A→4.0 min 5% A→4.01 min 90% A；流速：2 ml/min；恒温箱：50℃；紫外检测：210 nm。

方法 4 (LC/MS) ：

仪器：带有Waters UPLC Acquity的Micromass Quattro Premier；柱：Thermo Hypersil GOLD 1.9µ, 50 mm x 1 mm；洗脱液A：1 l水+ 0.5 ml 50% 的甲酸，洗脱液B：1 l乙腈+ 0.5 ml 50% 的甲酸；梯度：0.0 min 90% A→0.1 min 90% A→1.5 min 10% A→2.2 min 10% A；流速：0.33 ml/min；恒温箱：50℃；紫外检测：210 nm。

方法 5 (LC/MS) ：

仪器：带有HPLC Agilent Series 1100的Micromass Quattro LCZ；柱：Phenomenex Synergi 2.5µMAX-RP 100A Mercury 20 mm x 4 mm；洗脱液A：1 l水+ 0.5 ml 50% 的甲酸，洗脱液B：1 l乙腈+ 0.5 ml 50% 的甲酸；梯度：0.0 min 90% A→0.1 min 90% A→3.0 min 5% A→4.0 min 5% A→4.1 min 90% A；流速：2 ml/min；恒温箱：50℃；紫外检测：208-400 nm。

方法 6 (LC/MS) ：

仪器：Waters Acquity SQD UPLC System；柱：Waters Acquity UPLC HSS T3 1.8µ, 50 mm x 1 mm；洗脱液A：1 l水+ 0.25 ml 99% 的甲酸，洗脱液B：1 l乙腈+ 0.25 ml 99% 的甲酸；梯度：0.0 min 90% A→1.2 min 5% A→2.0 min 5% A；流速：0.40 ml/min；恒温箱：50℃；紫外检测：210-400 nm。

方法 7 (LC/MS) ：

MS仪器类型：Waters ZQ；HPLC仪器类型：Agilent 1100系列；UV DAD；柱：Thermo Hypersil GOLD 3µ, 20 mm x 4 mm；洗脱液A：1 l水+ 0.5 ml 50% 的甲酸，洗脱液B：1 l乙腈+ 0.5 ml 50% 的甲酸；梯度：0.0 min 100% A→3.0 min 10% A→4.0 min 10% A→4.1 min 100% A (流速2.5 ml/min)；恒温箱：55℃；流速：2 ml/min；紫外检测：210 nm。

方法 8 (LC/MS) ：

MS仪器类型：Micromass ZQ；HPLC仪器类型：HP 1100系列；UV DAD；柱：Phenomenex Gemini 3µ, 30 mm x 3.00 mm；洗脱液A：1 l水+ 0.5 ml 50% 的甲酸，洗脱液B：1 l乙腈+ 0.5 ml 50% 的甲酸；梯度：0.0 min 90% A→2.5 min 30% A→3.0 min 5% A→4.5 min 5% A；流速：0.0 min 1 ml/min→2.5 min/3.0 min/4.5 min 2 ml/min；恒温箱：50℃；紫外检测：210 nm。

方法 9 (GC/MS) ：

仪器：Micromass GCT, GC 6890；柱：Restek RTX-35, 15 m x 200µm x 0.33µm；氦恒定流速：0.88 ml/min；恒温箱：70℃；入口：250℃；梯度：70℃，30℃/min→310℃(保持3 min)。

方法 10 ( 分析型 HPLC) ：

仪器：具有DAD检测的HP 1100；柱：Kromasil 100 RP-18, 60 mm x 2.1 mm, 3.5µm；洗脱液A：5 ml高氯酸(70%的) / l水，洗脱液B：乙腈；梯度：0 min 2% B→0.5 min 2% B→4.5 min 90% B→6.5 min 90% B→6.7 min 2% B→7.5 min 2% B；流速：0.75 ml/min；柱温度: 30℃；紫外检测：210 nm。

方法 11 ( 制备型 HPLC) ：

柱：Grom-Sil 120 ODS-4 HE, 10µm, 250 mm x 30 mm；洗脱液和梯度程序：乙腈/0.1% 甲酸水溶液10:90 (0-3 min)，乙腈/0.1% 甲酸水溶液10:90→95:5 (3-27 min)，乙腈/0.1% 甲酸水溶液95:5 (27-34 min)，乙腈/0.1% 甲酸水溶液10:90 (34-38 min)；流速：50 ml/min；温度：22℃；紫外检测：254 nm。

方法 12 ( 制备型 HPLC) ：

柱：Daiso C18 Bio Spring柱, 10µm, 300 mm x 100 mm；洗脱液和梯度程序：水/甲醇80:20 (0-6 min)，水/甲醇80:20→20:80 (6-60 min)，水/ 甲醇20:80 (60-95 min)，水/甲醇10:90 (95-105 min)，水/甲醇80:20 (105-113 min)；流速：250 ml/min；温度：25℃；紫外检测：240 nm。

方法 13 ( 制备型 HPLC) ：

柱：Reprosil-Pur C18, 10µm, 250 mm x 30 mm；洗脱液和梯度程序：乙腈/0.1% 甲酸水溶液10:90 (0-3 min)，乙腈/0.1% 甲酸水溶液10:90→95:5 (3-27 min)，乙腈/0.1% 甲酸水溶液95:5 (27-34 min)，乙腈/0.1% 甲酸水溶液10:90 (34-38 min)；流速：50 ml/min；温度：22℃；紫外检测：254 nm。

方法 14 (LC/MS) ：

仪器：Waters Acquity SQD UPLC System；柱：Waters Acquity UPLC HSS T3 1.8µ, 30 mm x 2 mm；洗脱液A：1 l水+ 0.25 ml 99% 的甲酸，洗脱液B：1 l乙腈+ 0.25 ml 99% 的甲酸；梯度：0.0 min 90% A→1.2 min 5% A→2.0 min 5% A；流速：0.60 ml/min；恒温箱：50℃；紫外检测：208-400 nm。

就在下面没有明确描述其制备的所有反应物或试剂而言，它们从通常可及的来源商业得到。就在下面同样没有明确描述其制备且不可商业得到或从通常不可及的来源得到的所有其它反应物或试剂而言，参考在其中描述了它们的制备的公开文献。

原料化合物和中间体：

实施例1A

5-[1-(3-溴苄基)-5-甲基-1H-吡唑-3-基]-3-[4-(三氟甲氧基)苯基]-1,2,4-噁二唑

步骤 1: 5-(5-甲基-1H-吡唑-3-基)-3-[4-(三氟甲氧基)苯基]-1,2,4-噁二唑

在室温下，在15 min内，向20.25 g (125 mmol) 1,1'-羰二咪唑在75 ml无水DMF中的悬浮液中，滴加15.0 g (119 mmol) 5-甲基-1H-吡唑-3-甲酸在75 ml无水DMF中的溶液。将所述混合物在室温搅拌1 h 45 min以后，加入26.19 g (119 mmol) N'-羟基-4-(三氟甲氧基)苯甲脒。随后，将所述反应混合物加热至110℃保持4 h。冷却后，在旋转蒸发器上除去大部分溶剂。将800 ml水加入残余物中，并搅拌几分钟。抽滤出不溶物，并用乙醚洗涤。从滤液分离乙醚相，并用乙醚将水相另外萃取1次。将25 ml甲醇加入合并的乙醚萃取物中，并将预先已经抽滤出的产物悬浮于其中。在搅拌几分钟以后，再次抽滤出所述混合物。在高真空下干燥残余物，得到标题化合物(8.79 g)的第一级分。将相同量的水加入滤液中并振摇。相分离以后，用饱和氯化钠溶液洗涤有机相，经无水硫酸镁干燥，最后在旋转蒸发器上除去溶剂。在高真空下干燥残余物以后，以此方式得到标题化合物(24.43 g) 的第二级分。由此得到总共33.32 g (理论值的90%)标题化合物。

¹H NMR (400 MHz, CDCl₃, δ/ppm): 10.64 (宽峰, 1H), 8.23 (d, 2H), 7.34 (d, 2H), 6.82 (s, 1H), 2.46 (s, 3H)。

LC/MS (方法4, ESIpos): R_t = 1.28 min，m/z = 311 [M+H]⁺。

步骤 2: 5-[1-(3-溴苄基)-5-甲基-1H-吡唑-3-基]-3-[4-(三氟甲氧基)苯基]-1,2,4-噁二唑

在室温下，将6.58 g (58.7 mmol)固体叔丁醇钾加入14.0 g (45.1 mmol)得自实施例1A/步骤1的化合物和13.54 g (54.2 mmol) 3-溴苄基溴在450 ml无水二噁烷中的溶液中。将该反应混合物首先在室温搅拌16 h，然后在45℃还搅拌另外2 h，以完全转化。随后，加入500 ml水，并用每次约300 ml乙酸乙酯萃取混合物三次。用水和饱和食盐溶液依次洗涤合并的有机萃取物，经无水硫酸镁干燥，最后在旋转蒸发器上除去溶剂。通过与525 ml戊烷和35 ml二异丙醚的混合物一起搅拌，纯化得到的粗产物。抽滤出固体并干燥以后，得到19.08 g (理论值的84%，95%纯度)标题化合物。

¹H NMR (400 MHz, CDCl₃, δ/ppm): 8.25 (d, 2H), 7.44 (d, 1H), 7.33 (d, 2H), 7.32 (s, 1H), 7.22 (t, 1H), 7.08 (d, 1H), 6.83 (s, 1H), 5.43 (s, 2H), 2.30 (s, 3H)。

LC/MS (方法6, ESIpos): R_t = 1.45 min，m/z = 479/481 [M+H]⁺。

实施例2A

5-[1-(3-溴苄基)-5-甲基-1H-吡唑-3-基]-3-{4-[1-(三氟甲基)环丙基]苯基}-1,2,4-噁二唑

步骤 1: 1-溴-4-[1-(三氟甲基)环丙基]苯

首先，如下制备在蒙脱石上的活化溴化锌：将7.0 g (31.1 mmol)溴化锌预先装入1升烧瓶内的225 ml甲醇中，并加入28.2 g K10蒙脱石。随后，将所述悬浮液在室温搅拌1 h。然后，将所述混合物在旋转蒸发器上浓缩至干燥。在轻度真空(大约500毫巴)下将剩余的细粉在沙浴中加热至浴温200℃保持1 h，然后在氩下冷却。

然后如下制备标题化合物：将49.63 g (267 mmol) 1-苯基-1-(三氟甲基)环丙烷预先装入1.25升戊烷中，并加入在上面得到的在蒙脱石上的活化溴化锌。然后，用铝箔包裹在反应器的外面，以减少光射入。在搅拌下，缓慢地滴加137 ml (2.67 mol)溴。随后，将所述反应混合物在暗处在室温搅拌16 h。然后，在用冰冷却下，滴加1升饱和亚硫酸钠水溶液。抽滤出固体，并用戊烷洗涤2次。相分离以后，再用每次1升戊烷萃取滤液2次。合并的有机萃取物经无水硫酸钠干燥，过滤，并在仅轻度真空下在旋转蒸发器上除去溶剂。得到77.18 g (92%纯度，理论值的100%)标题化合物。

¹H NMR (400 MHz, CDCl₃, δ/ppm): 7.47 (d, 2H), 7.33 (s, 2H),1.37-1.34 (m, 2H), 1.03-0.98 (m, 2H)。

GC/MS (方法9, ESIpos): R_t = 3.43 min，m/z = 264/266 [M]⁺。

步骤 2: 4-[1-(三氟甲基)环丙基]苄腈

通过重复地施加轻度真空并用氩排气，将75.0 g (283 mmol)得自实施例2A/步骤1的化合物在990 ml DMF和10 ml水的混合物中的溶液脱氧。然后，加入37.87 g (322 mmol)氰化锌和32.69 g (28.3 mmol)四(三苯基膦)钯(0)。随后，将所述反应混合物加热至120℃保持5 h。在冷却至室温以后，滤出不溶物，并用少量DMF洗涤残余物。随后在旋转蒸发器上除去滤液中的溶剂。将得到的粗产物溶解于1.5升乙酸乙酯中，并用每次500 ml饱和氯化铵溶液洗涤所述混合物2次，并用500 ml饱和氯化钠溶液洗涤1次。在无水硫酸镁上干燥有机相以后，过滤所述混合物，在旋转蒸发器上浓缩滤液。借助于在175 g硅胶上的抽滤，使用40:1环己烷/乙酸乙酯作为洗脱液，纯化得到的油。浓缩产物级分并在高真空下干燥以后，得到49.7 g (理论值的83%)标题化合物。

¹H NMR (400 MHz, CDCl₃, δ/ppm): 7.65 (d, 2H), 7.57 (d, 2H), 1.46-1.42 (m, 2H), 1.09-1.03 (m, 2H)。

GC/MS (方法9, ESIpos): R_t = 3.79 min，m/z = 211 [M]⁺。

步骤 3: N'-羟基-4-[1-(三氟甲基)环丙基]苯甲脒

将14.48 g (208 mmol)羟基氯化铵和29 ml (208 mmol)三乙胺加入20.0 g (94.7 mmol)得自实施例2A/步骤2的化合物在500 ml乙醇中的溶液中。将所述反应混合物在回流下加热2 h。随后，在旋转蒸发器上除去约一半溶剂。将1.5升水加入残余物中，并将得到的悬浮液在室温搅拌20 min。然后，抽滤出固体，用少量冷水洗涤，并在高真空下干燥。为了进一步纯化，将它与120 ml戊烷和30 ml二氯甲烷的混合物一起搅拌。在再次抽滤出固体并干燥以后，得到15.79 g (理论值的68%)标题化合物。

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆, δ/ppm): 9.68 (s, 1H), 7.67 (d, 2H), 7.46 (d, 2H), 5.83 (s, 宽峰, 2H), 1.36-1.32 (m, 2H), 1.15-1.11 (m, 2H)。

LC/MS (方法4, ESIpos): R_t = 0.80 min，m/z = 245 [M+H]⁺。

步骤 4: 5-(5-甲基-1H-吡唑-3-基)-3-{4-[1-(三氟甲基)环丙基]苯基}-1,2,4-噁二唑

在室温下，在15 min内，向6.75 g (41.6 mmol) 1,1'-羰二咪唑在25 ml无水DMF中的悬浮液中，滴加5.0 g (36.6 mmol) 5-甲基-1H-吡唑-3-甲酸在25 ml无水DMF中的溶液。将该混合物在室温搅拌1 h 45 min以后，加入9.68 g (39.6 mmol)得自实施例2A/步骤3的化合物。随后，将该反应混合物加热至110℃保持2.5 h。冷却至室温以后，在剧烈搅拌下缓慢加入800 ml水，从而沉淀出产物。抽滤出固体，并用少量冷水洗涤。从沸腾的300 ml乙醇和350 ml水的混合物中重结晶仍然潮湿的粗产物。得到11.03 g (理论值的83%)标题化合物。

¹H NMR (400 MHz, CDCl₃, δ/ppm): 11.04 (s, 宽峰, 1H), 8.16 (d, 2H), 7.60 (d, 2H), 6.82 (s, 1H), 2.45 (s, 3H), 1.43-1.40 (m, 2H), 1.11-1.07 (m, 2H)。

LC/MS (方法6, ESIpos): R_t = 1.14 min，m/z = 335 [M+H]⁺。

步骤 5: 5-[1-(3-溴苄基)-5-甲基-1H-吡唑-3-基]-3-{4-[1-(三氟甲基)环丙基]苯基}-1,2,4-噁二唑

在0℃下，将436 mg (3.89 mmol)固体叔丁醇钾加入1.0 g (2.99 mmol)得自实施例2A/步骤4的化合物和897 mg (3.59 mmol) 3-溴苄基溴在30 ml无水二噁烷中的溶液中。然后将该反应混合物在室温搅拌16 h。然后，加入约200 ml水，并用每次约100 ml乙酸乙酯萃取该混合物三次。用水和饱和氯化钠溶液依次洗涤合并的有机萃取物，经无水硫酸镁干燥，最后在旋转蒸发器上除去溶剂。首先，借助于穿过硅胶的抽滤，使用10:1环己烷/乙酸乙酯作为洗脱液，纯化得到的粗产物。通过与50 ml戊烷和2 ml乙醚的混合物一起搅拌，进一步纯化产物。抽滤出固体并干燥以后，得到1.34 g (理论值的88%)标题化合物。

¹H NMR (400 MHz, CDCl₃, δ/ppm): 8.19 (d, 2H), 7.59 (d, 2H), 7.44 (d, 1H), 7.31 (s, 1H), 7.22 (t, 1H), 7.08 (d, 1H), 6.83 (s, 1H), 5.43 (s, 2H), 2.28 (s, 3H), 1.42-1.39 (m, 2H), 1.11-1.07 (m, 2H)。

LC/MS (方法6, ESIpos): R_t = 1.48 min，m/z = 503/505 [M+H]⁺。

实施例3A

5-[1-(3-溴苄基)-5-甲基-1H-吡唑-3-基]-3-[4-(1,1,1-三氟-2-甲基丙-2-基)苯基]-1,2,4-噁二唑

步骤 1: 2-(4-溴苯基)-1,1,1-三氟丙-2-醇

首先如下制备二氯(二甲基)钛在庚烷/二氯甲烷混合物中的悬浮液：将100 ml (100 mmol)四氯化钛在二氯甲烷中的1 M溶液冷却至-30℃，滴加100 ml (100 mmol)二甲基锌在庚烷中的1 M溶液，并在-30℃搅拌另外30 min。随后，将该悬浮液冷却至-40℃，并加入10 g (39.5 mmol) 1-(4-溴苯基)-2,2,2-三氟乙酮在50 ml二氯甲烷中的溶液。将所述混合物在-40℃搅拌另外5 min，然后，使温度达到室温，并将所述混合物在室温搅拌另外2 h。在用冰冷却的同时，缓慢地滴加50 ml水，然后用另外300 ml水稀释所述混合物。用二氯甲烷萃取所述混合物2次，用水洗涤合并的二氯甲烷相1次，经无水硫酸镁干燥，过滤，并在旋转蒸发器上除去溶剂。通过在硅胶上的柱色谱法(洗脱液：85:15环己烷/乙酸乙酯)，纯化残余物。得到10.5 g (理论值的100%)标题化合物，根据¹H NMR，其仍然含有溶剂残余物。

¹H NMR (400 MHz, CDCl₃, δ/ppm): 7.52 (d, 2H), 7.47 (d, 2H), 1.76 (s, 3H)。

LC/MS (方法1, ESIpos): R_t = 2.27 min，m/z = 268 [M+H]⁺。

步骤 2: 2-(4-溴苯基)-1,1,1-三氟丙-2-基甲磺酸酯

首先，在氩下，将3.12 g (78.05 mmol, 在矿物油中60%的)氢化钠放入45 ml THF中，在室温下滴加10.5 g (39.03 mmol)在实施例3A/步骤1中得到的化合物在20 ml THF中的溶液。将所述混合物在室温搅拌1 h并在40℃搅拌30 min以后，滴加8.94 g (78.05 mmol)甲磺酰氯在45 ml THF中的溶液，并将所述反应混合物在40℃搅拌另外60 min。随后，将50 ml水缓慢地滴加到该混合物中，用饱和碳酸氢钠水溶液稀释，并用乙酸乙酯萃取2次。合并的乙酸乙酯相经无水硫酸镁干燥，过滤，并在旋转蒸发器上除去溶剂。在己烷中搅拌残余物，滤出得到的固体，并在真空中干燥。得到12.4 g (理论值的92%)标题化合物。

¹H NMR (400 MHz, CDCl₃, δ/ppm): 7.58 (d, 2H), 7.43 (d, 2H), 3.16 (s, 3H), 2.28 (s, 3H)。

LC/MS (方法2, ESIpos): R_t = 2.32 min，m/z = 364 [M+NH₄]⁺。

步骤 3: 1-溴-4-(1,1,1-三氟-2-甲基丙-2-基)苯

首先，将12.4 g (35.72 mmol)在实施例3A/步骤2中得到的化合物放入250 ml二氯甲烷中，并将所述混合物冷却至0℃。然后，在0℃在搅拌下缓慢地滴加35.7 ml (71.44 mmol)三甲基铝的2 M溶液，然后，使所述混合物达到室温，并在室温搅拌另外1.5 h。将120 ml饱和碳酸氢钠水溶液缓慢地滴加所述混合物中，随后加入40 ml饱和氯化钠水溶液。用硅藻土过滤所述混合物，并再用二氯甲烷洗涤该硅藻土2次。用饱和氯化钠水溶液洗涤合并的二氯甲烷相1次，经无水硫酸镁干燥，并在旋转蒸发器上除去溶剂。得到8.69 g (理论值的87%)标题化合物，纯度为95%。

¹H NMR (400 MHz, CDCl₃, δ/ppm): 7.49 (d, 2H), 7.33 (d, 2H), 1.55 (s, 6H)。

GC/MS (方法9, ESIpos): R_t = 3.48 min，m/z = 266 [M]⁺。

步骤 4: 4-(1,1,1-三氟-2-甲基丙-2-基)苯甲腈

首先，在氩下，将3.34 g (12.50 mmol)在实施例3A/步骤3中得到的化合物放入2.5 ml脱气的DMF中，加入881 mg (7.50 mmol)氰化锌和867 mg (0.75 mmol)四(三苯基膦)钯(0)，并将所述混合物在80℃搅拌过夜。冷却至室温以后，用乙酸乙酯稀释所述反应混合物，滤出固体组分。用2 N氨水溶液洗涤滤液2次，并用饱和氯化钠水溶液洗涤1次，经无水硫酸镁干燥，在旋转蒸发器上除去溶剂。通过在硅胶上的柱色谱法(洗脱液：85:15环己烷/乙酸乙酯)，纯化残余物。得到2.08 g (理论值的78%)标题化合物。

¹H NMR (400 MHz, CDCl₃, δ/ppm): 7.68 (d, 2H), 7.62 (d, 2H), 1.60 (s, 6H)。

GC/MS (方法9, ESIpos): R_t = 3.83 min，m/z = 213 [M]⁺。

步骤 5: N'-羟基-4-(1,1,1-三氟-2-甲基丙-2-基)苯甲脒

将2.40 g (11.26 mmol)得自实施例3A/步骤4的化合物、1.72 g (24.77 mmol)羟基氯化铵和3.45 ml (24.77 mmol)三乙胺在60 ml乙醇中的混合物，在回流下搅拌1 h。冷却至室温以后，在旋转蒸发器上除去溶剂。将乙酸乙酯加入残余物中，滤出存在的固体。用水和饱和氯化钠水溶液依次洗涤乙酸乙酯溶液，经无水硫酸镁干燥，并过滤。除去溶剂以后，与石油醚一起研磨得到的油。抽滤出得到的固体并在高真空下干燥以后，得到2.65 g (理论值的96%)标题化合物。

¹H NMR (400 MHz, CDCl₃, δ/ppm): 8.0 (s, 宽峰, 1H), 7.62 (d, 2H), 7.52 (d, 2H), 4.88 (s, 宽峰, 2H), 1.60 (s, 6H)。

LC/MS (方法2, ESIpos): R_t = 1.34 min，m/z = 247 [M+H]⁺。

步骤 6: 5-(5-甲基-1H-吡唑-3-基)-3-[4-(1,1,1-三氟-2-甲基丙-2-基)苯基]-1,2,4-噁二唑

在室温下，依次将11.6 g (60.0 mmol) EDC、8.13 g (60.0 mmol) HOBt和14.8 g (60.0 mmol)得自实施例3A/步骤5的化合物加入7.57 g (60.0 mmol) 5-甲基-1H-吡唑-3-甲酸在300 ml无水DMF中的溶液中。首先将所述混合物在室温搅拌2 h，然后在140℃搅拌5 h。冷却后，将所述反应混合物搅拌进900 ml冰水中。抽滤出沉淀的产物，用冷水洗涤，然后在高真空下干燥。得到14.7 g (理论值的73%)标题化合物。

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆, δ/ppm): 11.80 (s, 宽峰, 1H), 8.17 (d, 2H), 7.63 (d, 2H), 6.83 (s, 1H), 2.46 (s, 3H), 1.63 (s, 6H)。

LC/MS (方法4, ESIpos): R_t = 1.34 min，m/z = 337 [M+H]⁺。

步骤 7: 5-[1-(3-溴苄基)-5-甲基-1H-吡唑-3-基]-3-[4-(1,1,1-三氟-2-甲基丙-2--基)苯基]-1,2,4-噁二唑

与在实施例2A/步骤5中所述的方法类似地，由750 mg (2.23 mmol)得自实施例3A/步骤6的化合物和669 mg (2.68 mmol) 3-溴苄基溴，制备1.02 g (理论值的84%，94%纯度)标题化合物。

¹H NMR (400 MHz, CDCl₃, δ/ppm): 8.20 (d, 2H), 7.62 (d, 2H), 7.44 (d, 1H), 7.32 (s, 1H), 7.22 (t, 1H), 7.08 (d, 1H), 6.83 (s, 1H), 5.43 (s, 2H), 2.29 (s, 3H), 1.63 (s, 6H)。

LC/MS (方法6, ESIpos): R_t = 1.49 min，m/z = 505/507 [M+H]⁺。

实施例4A

5-[1-(3-溴苄基)-5-甲基-1H-吡唑-3-基]-3-[4-(四氢-2H-吡喃-4-基)苯基]-1,2,4-噁二唑

步骤 1: 4-(四氢-2H-吡喃-4-基)苄腈

将186 mg (0.594 mmol)碘化镍(II)、90 mg (0.594 mmol)反式-2-氨基环己醇-氯化氢和3.63 g (19.8 mmol)六甲基二硅基氨基钠加入2.91 g (19.8 mmol) 4-氰基苯基硼酸[M. Nishimura等人, Tetrahedron 2002, 58 (29), 5779-5788]在20 ml异丙醇中的溶液中。将如此得到的悬浮液在室温在氩气氛下搅拌5 min。然后，加入2.1 g (9.90 mmol) 4-碘四氢吡喃[Heuberger等人 ,J. Chem. Soc. 1952, 910]。将所述反应混合物在75℃的温度下搅拌15 h以后，将它冷却至室温，并通过用约50 g硅胶过滤，用二氯甲烷很大程度地除去无机盐。通过MPLC (硅胶，洗脱液：二氯甲烷)，纯化粗产物。得到986 mg (理论值的53%)标题化合物。

¹H NMR (400 MHz, CDCl₃, δ/ppm): 7.60 (d, 2H), 7.32 (d, 2H), 4.12-4.07 (m, 2H), 3.56-3.50 (m, 2H), 2.87-2.79 (m, 1H), 1.86-1.73 (m, 4H)。

GC/MS (方法9, ESIpos): R_t = 5.97 min，m/z = 187 [M]⁺。

步骤 2: N'-羟基-4-(四氢-2H-吡喃-4-基)苯甲脒

将480 mg (2.56 mmol)得自实施例4A/步骤1的化合物、392 mg (5.64 mmol)羟基氯化铵和786µl (5.64 mmol)三乙胺在回流下在18 ml乙醇中加热16 h。随后，在旋转蒸发器上除去大部分挥发性组分。将50 ml水加入剩余的残余物中，将其在室温搅拌数分钟。然后，抽滤出固体，用少量冷水洗涤，最后在高真空下干燥。得到525 mg (理论值的93%)标题化合物。

¹H NMR (400 MHz, CDCl₃, δ/ppm): 7.58 (d, 2H), 7.26 (d, 2H), 6.79 (宽峰, 1H), 4.82 (s, 宽峰, 2H), 4.11-4.05 (m, 2H), 3.57-3.50 (m, 2H), 2.83-2.74 (m, 1H), 1.87-1.73 (m, 4H)。

LC/MS (方法2, ESIpos): R_t = 0.92 min，m/z = 221 [M+H]⁺。

步骤 3: 5-(5-甲基-1H-吡唑-3-基)-3-[4-(四氢-2H-吡喃-4-基)苯基]-1,2,4-噁二唑

在室温下，依次将785 mg (4.10 mmol) EDC、627 mg (4.10 mmol) HOBt和820 mg (3.72 mmol)得自实施例4A/步骤2的化合物加入469 mg (3.72 mmol) 5-甲基-1H-吡唑-3-甲酸在15 ml无水DMF中的溶液中。首先将所述混合物在室温搅拌16 h，然后在140℃搅拌20 min。冷却后，将100 ml水加入所述反应混合物中，并用每次约100 ml乙酸乙酯萃取3次。用饱和氯化钠溶液洗涤合并的有机萃取物，经无水硫酸镁干燥，最后在旋转蒸发器上浓缩至干燥。将剩余的残余物通过用乙腈搅拌得到450 mg标题化合物，并通过制备型HPLC (方法13)纯化母液以后，得到另外97 mg标题化合物(总产率为理论值的47%)。

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆, δ/ppm): 13.52 (s, 1H), 8.01 (d, 2H), 7.49 (d, 2H), 6.79 (s, 1H), 3.99-3.95 (m, 2H), 3.49-3.42 (m, 2H), 2.92-2.84 (m, 1H), 2.34 (s, 3H), 1.77-1.65 (m, 4H)。

LC/MS (方法6, ESIpos): R_t = 0.98 min，m/z = 311 [M+H]⁺。

步骤 4: 5-[1-(3-溴苄基)-5-甲基-1H-吡唑-3-基]-3-[4-(四氢-2H-吡喃-4-基)苯基]-1,2,4-噁二唑

与在实施例1A/步骤2中所述的方法类似地，由250 mg (0.806 mmol)得自实施例4A/步骤3的化合物和242 mg (0.967 mmol) 3-溴苄基溴，制备338 mg (理论值的87%)标题化合物。在这里，通过用10 ml其中已经加入了几滴二氯甲烷的戊烷/二异丙醚(5:1)进行搅拌，实现产物的最终纯化。

¹H NMR (400 MHz, CDCl₃, δ/ppm): 8.17 (d, 2H), 7.44 (d, 1H), 7.37 (d, 2H), 7.32 (s, 1H), 7.22 (t, 1H), 7.08 (d, 1H), 6.83 (s, 1H), 5.43 (s, 2H), 4.13-4.08 (m, 2H), 2.54 (dt, 2H), 2.88-2.79 (m, 1H), 2.28 (s, 3H), 1.92-1.78 (m, 4H)。

LC/MS (方法4, ESIpos): R_t = 1.52 min，m/z = 479/481 [M+H]⁺。

实施例5A

5-[1-(3-溴苄基)-5-甲基-1H-吡唑-3-基]-3-[4-(4-氟四氢-2H-吡喃-4-基)苯基]-1,2,4-噁二唑

步骤 1: 4-(4-羟基四氢-2H-吡喃-4-基)苯甲腈

在惰性条件下，在-40℃，将109 ml (218 mmol)异丙基氯化镁在乙醚中的2 M溶液滴加到50.0 g (218 mmol) 4-碘苄腈在1000 ml无水THF中的溶液中。将所述混合物在相同温度下搅拌1.5 h以后，加入32.8 g (327 mmol)四氢-4H-吡喃-4-酮在250 ml无水THF中的溶液。加入结束以后，首先将所述反应混合物在-40℃搅拌10 min，然后在0℃搅拌30 min，最后在室温搅拌60 min。然后，在-20℃加入约20 ml饱和氯化铵水溶液。随后，在旋转蒸发器上尽可能地除去溶剂。将1000 ml水加入剩余的残余物中，并用每次约500 ml二氯甲烷萃取3次。依次用水和饱和氯化钠溶液洗涤合并的有机萃取物。在无水硫酸镁上干燥以后，过滤所述混合物，并在旋转蒸发器上除去溶剂。通过与10:1环己烷/乙酸乙酯一起搅拌，纯化得到的粗产物。得到19.3 g (理论值的43%)标题化合物。

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆, δ/ppm): 7.80 (d, 2H), 7.70 (d, 2H), 5.30 (s, 1H), 3.81-3.70 (m, 4H), 2.02-1.94 (m, 2H), 1.51-1.48 (m, 2H)。

LC/MS (方法4, ESIpos): R_t = 0.71 min，m/z = 186 [M-H₂O+H]⁺, 204 [M+H]⁺。

步骤 2: 4-(4-氟四氢-2H-吡喃-4-基)苯甲腈

在惰性条件下，在-78℃，将6.19 g (38.4 mmol)二乙胺基三氟化硫(DAST)在58 ml二氯甲烷中的溶液滴加到6.5 g (31.98 mmol)得自实施例5A/步骤1的化合物在800 ml二氯甲烷中的悬浮液中。在-78℃保持30 min以后，借助于冰/水浴，将反应混合物非常快速地温热至-20℃。约30秒以后，加入200 ml 1 M氢氧化钠水溶液，将所述混合物温热至室温。用500 ml水稀释以后，用每次约200 ml乙醚萃取所述混合物3次。合并的有机萃取物经无水硫酸镁干燥，过滤以后，在旋转蒸发器上除去溶剂。借助于MPLC (硅胶，洗脱液：环己烷/乙酸乙酯10:1→5:1→2:1→1:1)，纯化粗产物。得到3.73 g (理论值的57%)标题化合物。

¹H NMR (400 MHz, CDCl₃, δ/ppm): 7.68 (d, 2H), 7.50 (d, 2H), 3.98-3.83 (m, 4H), 2.23-2.05 (m, 2H), 1.91-1.85 (m, 2H)。

GC/MS (方法9, ESIpos): R_t = 5.82 min，m/z = 205 [M]⁺。

步骤 3: 4-(4-氟四氢-2H-吡喃-4-基)-N'-羟基苯甲脒

根据在实施例4A/步骤2中描述的方法，由3.5 g (17.05 mmol)得自实施例5A/步骤2的化合物，得到3.57 g (理论值的88%)标题化合物。在该情况下，反应时间为2 h。

¹H NMR (500 MHz, DMSO-d₆, δ/ppm): 9.64 (s, 1H), 7.70 (d, 2H), 7.44 (d, 2H), 5.81 (s, 2H), 3.88-3.83 (m, 2H), 3.73-3.67 (m, 2H), 2.23-2.06 (m, 2H), 1.87-1.81 (m, 2H)。

LC/MS (方法4, ESIpos): R_t = 0.40 min，m/z = 239 [M+H]⁺。

步骤 4: 3-[4-(4-氟四氢-2H-吡喃-4-基)苯基]-5-(5-甲基-1H-吡唑-3-基)-1,2,4-噁二唑

在室温下，在约15 min内，将4.30 g (34.1 mmol) 5-甲基-1H-吡唑-3-甲酸在20 ml无水DMF中的溶液滴加到5.81 g (35.8 mmol) 1,1'-羰二咪唑(CDI)在25 ml无水DMF中的悬浮液中。将所述混合物在室温搅拌105 min以后，加入8.12 g (34.1 mmol)得自实施例5A/步骤3的化合物。随后，将该反应混合物加热至110℃保持5 h。冷却至室温以后，将所述混合物缓慢搅拌进800 ml水中。在这期间，产物沉淀出来。将它抽滤出，并用水洗涤。随后，将潮湿的粗产物由430 ml乙醇重结晶。滤出固体并干燥以后，得到8.31 g (理论值的74%)标题化合物。通过浓缩母液，得到另一级份(1.69 g，85%纯度，理论值的13% )。

¹H NMR (400 MHz, CDCl₃, δ/ppm): 10.73 (宽峰, 1H), 8.20 (d, 2H), 7.52 (d, 2H), 6.81 (s, 1H), 4.00-3.88 (m, 4H), 2.45 (s, 3H), 2.30-2.11 (m, 2H), 1.98-1.91 (m, 2H)。

LC/MS (方法1, ESIpos): R_t = 4.24 min，m/z = 329 [M+H]⁺。

步骤 5: 5-[1-(3-溴苄基)-5-甲基-1H-吡唑-3-基]-3-[4-(4-氟四氢-2H-吡喃-4-基)苯基]-1,2,4-噁二唑

与在实施例1A/步骤2中所述的方法类似地，由250 mg (0.761 mmol)得自实施例5A/步骤4的化合物和228 mg (0.914 mmol) 3-溴苄基溴，制备355 mg (理论值的94%)标题化合物。在这里可以省略：将反应混合物加热至45℃。通过用10 ml其中已经加入了几滴二氯甲烷的戊烷/二异丙醚(5:1)搅拌，实现产物的最终纯化。

¹H NMR (400 MHz, CDCl₃, δ/ppm): 8.23 (d, 2H), 7.53 (d, 2H), 7.44 (d, 1H), 7.32 (s, 1H), 7.23 (t, 1H), 7.08 (d, 1H), 6.84 (s, 1H), 5.43 (s, 2H), 4.00-3.87 (m, 4H), 2.29 (s, 3H), 2.30-2.11 (m, 2H), 1.98-1.91 (m, 2H)。

LC/MS (方法4, ESIpos): R_t = 1.52 min，m/z = 497/499 [M+H]⁺。

实施例6A

5-[1-(3-溴苄基)-5-甲基-1H-吡唑-3-基]-3-[4-(3-氟氧杂环丁烷-3-基)苯基]-1,2,4-噁二唑

步骤 1: 4-(3-羟基氧杂环丁烷-3-基)苯甲腈

在惰性条件下，在-40℃，将11 ml (21.8 mmol)异丙基氯化镁在乙醚中的2 M溶液滴加到5.0 g (21.8 mmol) 4-碘苄腈在100 ml无水THF中的溶液中。将所述混合物在相同温度搅拌1.5 h以后，将它冷却至-78℃，并借助于插管，将其缓慢地加入同样冷却至-78℃的、2.95 g (32.7 mmol，80%，在二氯甲烷中) 3-氧代氧杂环丁烷（3-Oxooxetan）[G. Wuitschik等人, Angew. Chem. Int. Ed. Engl. 2006, 45 (46), 7736-7739]在100 ml无水THF中的溶液中。加入结束以后，首先将所述反应混合物在-78℃搅拌10 min，然后在0℃搅拌2 h，最后在室温搅拌30 min。然后，加入数ml饱和氯化铵水溶液。随后，在旋转蒸发器上尽可能地除去溶剂。用200 ml水稀释得到的残余物，并用每次约200 ml乙酸乙酯萃取3次。依次用水和饱和氯化钠溶液洗涤合并的有机萃取物。在无水硫酸镁上干燥以后，过滤所述混合物，并在旋转蒸发器上除去溶剂。通过从10:1环己烷/乙酸乙酯中结晶，纯化得到的粗产物。得到2.42 g (理论值的63%)标题化合物。

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆, δ/ppm): 7.88 (d, 2H), 7.80 (d, 2H), 6.63 (s, 1H), 4.79 (d, 2H), 4.65 (d, 2H)。

HPLC (方法10): R_t = 3.09 min。

MS (DCI, NH₃): m/z = 193 [M+NH₄]⁺。

步骤 2: 4-(3-氟氧杂环丁烷-3-基)苯甲腈

与在实施例5A/步骤2中所述的方法类似地，由600 mg (3.43 mmol)得自实施例6A/步骤1的化合物和662 mg (4.11 mmol)二乙胺基三氟化硫(DAST)，制备495 mg (理论值的82%)标题化合物。在这里使用8:1环己烷/乙酸乙酯作为洗脱液用于MPLC纯化。

¹H NMR (400 MHz, CDCl₃, δ/ppm): 7.76 (d, 2H), 7.73 (d, 2H), 5.15 (dd, 2H), 4.81 (dd, 2H)。

LC/MS (方法2, ESIpos): R_t = 1.59 min，m/z = 178 [M+H]⁺。

步骤 3: 4-(3-氟氧杂环丁烷-3-基)-N'-羟基苯甲脒

根据在实施例4A/步骤2中描述的方法，由450 mg (2.54 mmol)得自实施例6A/步骤2的化合物，得到470 mg (理论值的86%)标题化合物。

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆, δ/ppm): 9.71 (s, 1H), 7.77 (d, 2H), 7.54 (d, 2H), 5.87 (s, 宽峰, 2H), 4.97 (dd, 2H), 4.91 (dd, 2H)。

LC/MS (方法2, ESIpos): R_t = 0.80 min，m/z = 211 [M+H]⁺。

步骤 4: 3-[4-(3-氟氧杂环丁烷-3-基)苯基]-5-(5-甲基-1H-吡唑-3-基)-1,2,4-噁二唑

在室温下，依次将502 mg (2.62 mmol) EDC、401 mg (2.62 mmol) HOBt和500 mg (2.38 mmol)得自实施例6A/步骤3的化合物加入300 mg (2.38 mmol) 5-甲基-1H-吡唑-3-甲酸在10 ml无水DMF中的溶液中。首先将所述混合物在室温搅拌16 h，然后在140℃搅拌45 min。冷却后，在旋转蒸发器上除去溶剂。将120 ml水加入剩余的残余物中，用每次约100 ml乙醚萃取3次。用饱和氯化钠溶液洗涤合并的有机萃取物，经无水硫酸镁干燥，过滤，最后在旋转蒸发器上浓缩。将粗产物与5 ml乙醇一起在室温搅拌1 h。过滤未溶解的固体并在高真空下干燥以后，得到第一级份204 mg标题化合物。将母液蒸发浓缩至干燥。随后，借助于制备型HPLC (方法13)，从残余物中分离出29 mg的另一级份标题化合物。如此共得到233 mg (理论值的33%)标题化合物。

¹H NMR (400 MHz, CDCl₃, δ/ppm): 8.27 (d, 2H), 7.72 (d, 2H), 6.81 (s, 1H), 5.05 (dd, 2H), 5.01 (dd, 2H), 2.47 (s, 3H)。

LC/MS (方法2, ESIpos): R_t = 1.93 min，m/z = 301 [M+H]⁺。

步骤 5: 5-[1-(3-溴苄基)-5-甲基-1H-吡唑-3-基]-3-[4-(3-氟氧杂环丁烷-3-基)苯基]-1,2,4-噁二唑

与在实施例1A/步骤2中所述的方法类似地，由250 mg (0.833 mmol)得自实施例6A/步骤4的化合物和250 mg (0.999 mmol) 3-溴苄基溴，制备347 mg (理论值的89%)标题化合物。在这里可以省略：将反应混合物加热至45℃。通过用10 ml其中已经加入了几滴二氯甲烷的戊烷/二异丙醚(5:1)搅拌，实现产物的最终纯化。

¹H NMR (400 MHz, CDCl₃, δ/ppm): 8.30 (d, 2H), 7.72 (d, 2H), 7.45 (d, 1H), 7.33 (s, 1H), 7.22 (t, 1H), 7.09 (d, 1H), 6.85 (s, 1H), 5.43 (s, 2H), 5.04 (dd, 2H), 5.00 (dd, 2H), 2.29 (s, 3H)。

LC/MS (方法4, ESIpos): R_t = 1.46 min，m/z = 469/471 [M+H]⁺。

实施例7A

5-[1-(3-溴苄基)-5-甲基-1H-吡唑-3-基]-3-[4-(1-甲氧基环丁基)苯基]-1,2,4-噁二唑

步骤 1: 4-(1-羟基环丁基)苄腈

与在实施例5A/步骤1中所述的方法类似地，由用32.67 g (143 mmol) 4-碘苄腈、75 ml (150 mmol)异丙基氯化镁在乙醚中的2 M溶液和15.0 g (214 mmol)环丁酮，制备13.31 g (理论值的78%)标题化合物。在该情况下，在室温下的反应时间为16 h，且在水性后处理以后，借助于抽滤在150 g硅胶上用环己烷/乙酸乙酯10:1→4:1作为洗脱液，纯化粗产物。

¹H NMR (400 MHz, CDCl₃, δ/ppm): 7.67 (d, 2H), 7.62 (d, 2H), 2.58-2.51 (m, 2H), 2.44-2.37 (m, 2H), 2.23-2.04 (m, 2H), 1.83-1.72 (m, 1H)。

HPLC (方法10): R_t = 3.47 min。

MS (DCI, NH₃): m/z = 191 [M+NH₄]⁺。

步骤 2: 4-(1-甲氧基环丁基)苄腈

在0℃，将508 mg (12.7 mmol)氢化钠(60%的悬浮液，在矿物油中)加入2.0 g (11.5 mmol)得自实施例7A/步骤1的化合物在40 ml无水DMF中的溶液中。1 h以后，加入863µl (13.9 mmol)碘甲烷，并除去冰-水浴。在室温搅拌16 h以后，将所述反应混合物倒在120 ml水上，并用每次约100 ml乙醚萃取3次。依次用水和饱和氯化钠溶液洗涤合并的有机萃取物，经无水硫酸镁干燥，过滤，最后在旋转蒸发器上除去溶剂。借助于抽滤在约100 g硅胶上用环己烷/乙酸乙酯20:1→4:1作为洗脱液，纯化剩余的残余物。得到1.27 g (理论值的59%)标题化合物。

¹H NMR (400 MHz, CDCl₃, δ/ppm): 7.68 (d, 2H), 7.54 (d, 2H), 2.95 (s, 3H), 2.46-2.32 (m, 4H), 2.03-1.93 (m, 1H), 1.76-1.63 (m, 1H)。

MS (DCI, NH₃): m/z = 205 [M+NH₄]⁺。

步骤 3: N'-羟基-4-(1-甲氧基环丁基)苯甲脒

与在实施例3A/步骤5中所述的方法类似地，由1.10 g (5.88 mmol)得自实施例7A/步骤2的化合物和612 mg (8.81 mmol)羟基氯化铵，制备1.28 g (理论值的93%，95%纯度)标题化合物。在该情况下，反应时间为16 h。

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆, δ/ppm): 9.62 (s, 1H), 7.68 (d, 2H), 7.40 (d, 2H), 5.80 (s, 宽峰, 2H), 2.83 (s, 3H), 2.37-2.24 (m, 4H), 1.91-1.81 (m, 1H), 1.65-1.53 (m, 1H)。

HPLC (方法10): R_t = 3.02 min。

MS (DCI, NH₃): m/z = 221 [M+H]⁺。

步骤 4: 3-[4-(1-甲氧基环丁基)苯基]-5-(5-甲基-1H-吡唑-3-基)-1,2,4-噁二唑

在室温下，在15 min内，向491 mg (3.03 mmol) 1,1'-羰二咪唑(CDI)在2 ml无水DMF中的悬浮液中，滴加364 mg (2.88 mmol) 5-甲基-1H-吡唑-3-甲酸在2 ml无水DMF中的溶液。将所述混合物在室温搅拌2 h以后，加入635 mg (2.88 mmol)得自实施例7A/步骤3的化合物。随后，将该反应混合物加热至110℃保持4.5 h。冷却至室温以后，在剧烈搅拌下，将该反应混合物缓慢搅拌进60 ml水中，在这期间沉淀出产物。抽滤出固体，并用少量冷水洗涤，在高真空下干燥以后，得到640 mg (理论值的68%，95%纯度)标题化合物。

¹H NMR (400 MHz, CDCl₃, δ/ppm): 10.85 (宽峰, 1H), 8.19 (d, 2H), 7.57 (d, 2H), 6.82 (s, 1H), 2.98 (s, 3H), 2.45 (s, 3H), 2.45-2.37 (m, 4H), 2.03-1.93 (m, 1H), 1.78-1.67 (m, 1H)。

LC/MS (方法6, ESIpos): R_t = 1.06 min，m/z = 311 [M+H]⁺。

步骤 5: 5-[1-(3-溴苄基)-5-甲基-1H-吡唑-3-基]-3-[4-(1-甲氧基环丁基)苯基]-1,2,4-噁二唑

与在实施例1A/步骤2中所述的方法类似地，由250 mg (0.806 mmol)得自实施例7A/步骤4的化合物和242 mg (0.967 mmol) 3-溴苄基溴，制备326 mg (理论值的84%)标题化合物。在这里可以省略：将反应混合物加热至45℃。

¹H NMR (400 MHz, CDCl₃, δ/ppm): 8.21 (d, 2H), 7.56 (d, 2H), 7.44 (d, 1H), 7.32 (s, 1H), 7.22 (t, 1H), 7.09 (d, 1H), 6.83 (s, 1H), 5.43 (s, 2H), 2.97 (s, 3H), 2.44-2.40 (m, 4H), 2.29 (s, 3H), 2.03-1.93 (m, 1H), 1.78-1.67 (m, 1H)。

LC/MS (方法6, ESIpos): R_t = 1.44 min，m/z = 479/481 [M+H]⁺。

实施例8A

3-{[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧基}氮杂环丁烷

步骤 1: 3-{[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧基}氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯

首先，将20.0 g (115 mmol) 3-羟基氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯和9.43 g (139 mmol)咪唑放入200 ml无水DMF中，并在室温下加入34.91 g (127 mmol)叔丁基(二苯基)甲硅烷基氯化物。将所述反应混合物在室温搅拌18 h以后，将它倒入3.2升水中，然后用每次约1升乙醚萃取3次。依次用饱和碳酸氢钠溶液、水和饱和氯化钠溶液洗涤合并的有机萃取物。在无水硫酸镁上干燥以后，过滤所述混合物，并在旋转蒸发器上除去溶剂。将剩余的残余物用100 ml戊烷搅拌几分钟。随后，抽滤出固体，并在高真空下干燥。得到29.18 g (理论值的61%)标题化合物。

¹H NMR (400 MHz, CDCl₃, δ/ppm): 7.60 (d, 4H), 7.46-7.37 (m, 6H), 4.53-4.49 (m, 1H), 3.93 (dd, 2H), 3.87 (dd, 2H), 1.41 (s, 9H), 1.04 (s, 9H)。

LC/MS (方法6, ESIpos): R_t = 1.65 min，m/z = 412 [M+H]⁺。

步骤 2: 3-{[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧基}氮杂环丁烷

在室温下，将70 ml三氟醋酸(TFA)滴加到20.0 g (48.6 mmol)得自实施例8A/步骤1的化合物在70 ml二氯甲烷中的溶液中。将所述反应混合物在室温搅拌30 min以后，在旋转蒸发器上除去所有挥发性组分。将1升1 M氢氧化钠水溶液加入剩余的残余物中，并用每次约200 ml二氯甲烷萃取3次。合并的有机萃取物经无水硫酸镁干燥，过滤，最后在旋转蒸发器上蒸发浓缩至干燥。在高真空下干燥残余物以后，得到14.85 g (理论值的98%)标题化合物。

¹H NMR (400 MHz, CDCl₃, δ/ppm): 7.61 (d, 4H), 7.45-7.36 (m, 6H), 4.64-4.58 (m, 1H), 3.68 (dd, 2H), 3.53 (dd, 2H), 2.19 (宽峰, 1H), 1.03 (s, 9H)。

LC/MS (方法6, ESIpos): R_t = 0.90 min，m/z = 312 [M+H]⁺。

实施例9A

4-{[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧基}哌啶

步骤 1: 4-{[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧基}哌啶-1-甲酸叔丁酯

首先，将10.0 g (49.7 mmol) 4-羟基哌啶-1-甲酸叔丁酯和4.06 g (59.7 mmol)咪唑放入100 ml无水DMF中，并在0℃下加入15.02 g (54.7 mmol)叔丁基(二苯基)甲硅烷基氯化物。将所述反应混合物在室温搅拌48 h以后，将它倒入1.6升水中，然后用每次约500 ml乙醚萃取3次。依次用饱和碳酸氢钠溶液、水和饱和氯化钠溶液洗涤合并的有机萃取物。在无水硫酸镁上干燥以后，过滤所述混合物，并在旋转蒸发器上除去溶剂。借助于抽滤(约300 g硅胶，洗脱液：环己烷→环己烷/乙酸乙酯2:1)，粗略地纯化剩余的残余物。得到22.21 g (理论值的91%，约90%纯度)标题化合物。

¹H NMR (400 MHz, CDCl₃, δ/ppm): 7.67 (d, 4H), 7.43-7.37 (m, 6H), 3.93-3.87 (m, 1H), 3.68-3.60 (m, 2H), 3.22-3.14 (m, 2H), 1.63-1.48 (m, 4H), 1.43 (s, 9H), 1.07 (s, 9H)。

LC/MS (方法6, ESIpos): R_t = 1.68 min，m/z = 440 [M+H]⁺。

步骤 2: 4-{[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧基}哌啶

与在实施例8A/步骤2中所述的方法类似地，由2.5 g (5.12 mmol, 90%纯度)得自实施例9A/步骤1的化合物，得到1.45 g (理论值的83%)标题化合物。在该情况下，借助于MPLC (约50 g硅胶，洗脱液：乙酸乙酯→乙酸乙酯/三乙胺9:1)纯化产物。

¹H NMR (400 MHz, CDCl₃, δ/ppm): 7.68 (d, 4H), 7.45-7.35 (m, 6H), 3.83-3.77 (m, 1H), 3.07-3.01 (m, 2H), 2.52-2.47 (m, 2H), 1.72-1.66 (m, 2H), 1.53-1.45 (m, 2H), 1.07 (s, 9H)。

LC/MS (方法14, ESIpos): R_t = 0.87 min，m/z = 340 [M+H]⁺。

实施例10A

5-[1-(3-溴苄基)-5-甲基-1H-吡唑-3-基]-3-{4-[(三氟甲基)硫烷基]苯基}-1,2,4-噁二唑

步骤 1: N'-羟基-4-[(三氟甲基)硫烷基]苯甲脒

将73 g (1.05 mol)羟基氯化铵加入113 g (500 mmol) 4-[(三氟甲基)硫烷基]苯甲腈和147 ml (1.05 mol)三乙胺在1.4升乙醇中的溶液中，然后将所述混合物在回流下加热30 min。冷却至室温以后，加入1升水，并用共1.4升乙酸乙酯萃取所述混合物3次。依次用水和饱和食盐溶液洗涤合并的有机萃取物。在无水硫酸镁上干燥以后，过滤所述混合物，并在旋转蒸发器上除去溶剂。将得到的残余物溶解于1升环己烷中，加入40 ml二异丙醚，并将所述混合物在室温搅拌20 min。抽滤出得到的固体，在高真空下干燥以后，得到第一份78.6 g标题化合物。浓缩滤液，随后将所述残余物在100 ml环己烷和5 ml乙酸乙酯的混合物中在沸腾加热下搅拌30 min。冷却后，抽滤出固体，并在高真空下干燥。得到第二份4.2 g标题化合物。如此得到共82.8 g (理论值的70%)标题化合物。

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆, δ/ppm): 9.90 (s, 1H), 7.80 (d, 2H), 7.72 (d, 2H), 5.94 (s, 2H)。

LC/MS (方法2, ESIpos): R_t = 1.42 min，m/z = 237 [M+H]⁺。

步骤 2: 5-(5-甲基-1H-吡唑-3-基)-3-{4-[(三氟甲基)硫烷基]苯基}-1,2,4-噁二唑

在室温下，在15 min内，向63.45 g (391 mmol) 1,1'-羰二咪唑在235 ml无水DMF中的悬浮液中，滴加47 g (373 mmol) 5-甲基-1H-吡唑-3-甲酸在235 ml无水DMF中的溶液。将该混合物在室温搅拌1 h 45 min以后，加入88 g (373 mmol)得自实施例10A/步骤1的化合物。随后，将该反应混合物加热至110℃保持4 h。冷却至室温以后，在剧烈搅拌下缓慢加入3.5升水，从而沉淀出产物。抽滤出固体，并用约1升冷水洗涤。通过从由各500 ml的乙腈和乙醇组成的溶剂混合物中重结晶，纯化粗产物。冷却、过滤并在高真空下干燥以后，得到第一份94.2 g标题化合物。由母液蒸发浓缩并从150 ml乙醇中再次结晶以后，得到另一份6.2 g标题化合物。如此得到共100.4 g (理论值的83%)标题化合物。

¹H NMR (400 MHz, CDCl₃, δ/ppm): 10.60 (宽峰, 1H), 8.23 (d, 2H), 7.79 (d, 2H), 6.81 (s, 1H), 2.47 (s, 3H)。

LC/MS (方法6, ESIpos): R_t = 1.17 min，m/z = 327 [M+H]⁺。

步骤 3: 5-[1-(3-溴苄基)-5-甲基-1H-吡唑-3-基]-3-{4-[(三氟甲基)硫烷基]苯基}-1,2,4-噁二唑

在室温下，将2.24 g (19.9 mmol)固体叔丁醇钾加入5.0 g (15.3 mmol)得自实施例10A/步骤2的化合物和4.60 g (18.4 mmol) 3-溴苄基溴在150 ml无水二噁烷中的溶液中。将所述反应混合物在室温搅拌16 h。随后，在旋转蒸发器上除去约50-100 ml的溶剂。用900 ml乙酸乙酯稀释剩余的残余物，并用每次200 ml水洗涤3次，最后用200 ml饱和食盐溶液洗涤1次。在无水硫酸镁上干燥和过滤以后，在旋转蒸发器上除去溶剂。从环己烷中重结晶得到的粗产物。抽滤出固体并干燥以后，得到5.03 g (理论值的66%)标题化合物。

¹H NMR (400 MHz, CDCl₃, δ/ppm): 8.27 (d, 2H), 7.78 (d, 2H), 7.44 (d, 1H), 7.32 (s, 1H), 7.22 (t, 1H), 7.09 (d, 1H), 6.84 (s, 1H), 5.43 (s, 2H), 2.29 (s, 3H)。

LC/MS (方法6, ESIpos): R_t = 1.49 min，m/z = 495/497 [M+H]⁺。

实施例11A

(S)-1-{3-[(5-甲基-3-{3-[4-(三氟甲氧基)苯基]-1,2,4-噁二唑-5-基}-1H-吡唑-1-基)甲基]苯基}氮杂环丁烷-3-基-N-(叔丁氧基羰基)-L-缬氨酸酯

将117 mg (0.955 mmol) 4-N,N-二甲氨基吡啶和915 mg (4.77 mmol) EDC加入750 mg (1.59 mmol)得自实施例1的化合物(参见工作实施例部分)和691 mg (3.18 mmol) (S)-N-(叔丁氧基羰基)-L-缬氨酸在30 ml二氯甲烷中的溶液中。将所述反应混合物在室温搅拌2 h以后，用100 ml二氯甲烷稀释，并用每次100 ml水洗涤2次，并用100 ml饱和食盐溶液洗涤1次。在无水硫酸镁上干燥以后，过滤，并浓缩，借助于MPLC (约100 g硅胶，洗脱液：环己烷/乙酸乙酯4:1→3:1)分离出产物。得到671 mg (理论值的90%)标题化合物。

¹H NMR (400 MHz, CDCl₃, δ/ppm): 8.27 (d, 2H), 7.33 (d, 2H), 7.19 (t, 1H), 6.81 (s, 1H), 6.56 (d, 1H), 6.38 (d, 1H), 6.24 (s, 1H), 5.39 (s, 2H), 5.37-5.31 (m, 1H), 4.95 (d, 宽峰, 1H), 4.24-4.18 (m, 3H), 3.83-3.73 (m, 2H), 2.28 (s, 3H), 2.20-2.11 (m, 1H), 1.43 (s, 9H), 0.98 (d, 3H), 0.90 (d, 3H)。

LC/MS (方法14, ESIpos): R_t = 1.53 min，m/z = 671 [M+H]⁺。

工作实施例：

实施例1

1-{3-[(5-甲基-3-{3-[4-(三氟甲氧基)苯基]-1,2,4-噁二唑-5-基}-1H-吡唑-1-基)甲基]苯基}氮杂环丁烷-3-醇

将2.0 g (4.17 mmol)得自实施例1A的化合物、1.95 g (6.26 mmol)得自实施例8A的化合物、256 mg (0.280 mmol)三(二亚苄基丙酮)二钯(0)、398 mg (0.835 mmol) 2-二环己基膦基-2',4',6'-三异丙基联苯(X-Phos)和2.72 g (8.35 mmol)碳酸铯在20 ml无水DMF中的混合物，在氩下在微波炉(Biotage Initiator, 动态控制入射功率)中加热至120℃持续2.5 h。冷却至室温以后，将100 ml水加入所述反应混合物中，用每次约100 ml乙酸乙酯萃取3次。依次用水和饱和氯化钠溶液洗涤合并的有机萃取物，经无水硫酸镁干燥，过滤，最后在旋转蒸发器上除去溶剂。将剩余的残余物溶解于40 ml THF中，并加入6.3 ml (6.26 mmol)四正丁基氟化铵(TBAF)在THF中的1 M溶液。将该混合物在室温搅拌1 h以后，以与上述相同的方式，对它进行水性后处理。通过用200 g硅胶抽滤，用环己烷/乙酸乙酯2:1 (3升)→1:1 (3升)作为洗脱液，纯化剩余的残余物。蒸发浓缩并在高真空下干燥以后，得到1.56 g (理论值的79%)标题化合物。

¹H NMR (400 MHz, CDCl₃, δ/ppm): 8.25 (d, 2H), 7.33 (d, 2H), 7.17 (t, 1H), 6.80 (s, 1H), 6.53 (d, 1H), 6.39 (d, 1H), 6.27 (s, 1H), 5.38 (s, 2H), 4.77-4.70 (m, 1H), 4.13 (dd, 2H), 3.63 (dd, 2H), 2.27 (s, 3H), 2.12 (d, 1H)。

LC/MS (方法6, ESIpos): R_t = 1.20 min，m/z = 472 [M+H]⁺。

实施例2

1-(3-{[5-甲基-3-(3-{4-[1-(三氟甲基)环丙基]苯基}-1,2,4-噁二唑-5-基)-1H-吡唑-1-基]甲基}苯基)氮杂环丁烷-3-醇

与在实施例1中所述的方法类似地，由500 mg (0.993 mmol)得自实施例2A的化合物和464 mg (1.49 mmol)得自实施例8A的化合物，得到289 mg (理论值的58%)标题化合物。在这里可以省略所述方法的第二个子步骤(用TBAF裂解甲硅烷醚)，因为在第一个子步骤中已经去掉了保护基。借助于MPLC (硅胶，洗脱液：1:1环己烷/乙酸乙酯)，和随后在25 ml戊烷、1 ml二异丙醚和125µl二氯甲烷的混合物中搅拌进行粗产物的纯化。

¹H NMR (400 MHz, CDCl₃, δ/ppm): 8.19 (d, 2H), 7.58 (d, 2H), 7.17 (t, 1H), 6.80 (s, 1H), 6.53 (d, 1H), 6.39 (d, 1H), 6.27 (s, 1H), 5.38 (s, 2H), 4.77-4.70 (m, 1H), 4.13 (dd, 2H), 3.63 (dd, 2H), 2.27 (s, 3H), 2.01 (d, 1H), 1.42-1.39 (m, 2H), 1.10-1.07 (m, 2H)。

LC/MS (方法6, ESIpos): R_t = 1.26 min，m/z = 496 [M+H]⁺。

实施例3

1-{3-[(5-甲基-3-{3-[4-(1,1,1-三氟-2-甲基丙-2-基)苯基]-1,2,4-噁二唑-5-基}-1H-吡唑-1-基)甲基]苯基}氮杂环丁烷-3-醇

与在实施例1中所述的方法类似地，由150 mg (0.297 mmol)得自实施例3A的化合物和139 mg (0.445 mmol)得自实施例8A的化合物，得到68 mg (理论值的46%)标题化合物。在这里，在所述方法的第一子步骤中的反应时间是1 h。借助于制备型HPLC (方法13)纯化粗产物。由得到的标题化合物的甲酸盐通过用碳酸氢盐料筒(得自Polymerlabs, Stratospheres SPE, PL-HCO₃ MP SPE, 容量0.9 mmol)渗滤该盐的甲醇溶液，得到游离碱。通过在3 ml戊烷和几滴二异丙醚的混合物中搅拌，实现最终的纯化。

¹H NMR (400 MHz, CDCl₃, δ/ppm): 8.20 (d, 2H), 7.63 (d, 2H), 7.17 (t, 1H), 6.80 (s, 1H), 6.53 (d, 1H), 6.39 (d, 1H), 6.27 (s, 1H), 5.38 (s, 2H), 4.77-4.70 (m, 1H), 4.13 (dd, 2H), 3.63 (dd, 2H), 2.27 (s, 3H), 2.18 (d, 1H), 1.62 (s, 6H)。

LC/MS (方法6, ESIpos): R_t = 1.27 min，m/z = 498 [M+H]⁺。

实施例4

1-{3-[(5-甲基-3-{3-[4-(四氢-2H-吡喃-4-基)苯基]-1,2,4-噁二唑-5-基}-1H-吡唑-1-基)甲基]苯基}氮杂环丁烷-3-醇

与在实施例3中所述的方法类似地，由150 mg (0.313 mmol)得自实施例4A的化合物和146 mg (0.469 mmol)得自实施例8A的化合物，得到77 mg (理论值的52%)标题化合物。

¹H NMR (400 MHz, CDCl₃, δ/ppm): 8.17 (d, 2H), 7.36 (d, 2H), 7.17 (t, 1H), 6.80 (s, 1H), 6.53 (d, 1H), 6.39 (d, 1H), 6.27 (s, 1H), 5.38 (s, 2H), 4.77-4.70 (m, 1H), 4.15-4.07 (m, 4H), 3.63 (dd, 2H), 3.55 (dt, 2H), 2.87-2.78 (m, 1H), 2.26 (s, 宽峰, 4H), 1.91-1.78 (m, 4H)。

LC/MS (方法4, ESIpos): R_t = 1.27 min，m/z = 472 [M+H]⁺。

实施例5

1-{3-[(3-{3-[4-(4-氟四氢-2H-吡喃-4-基)苯基]-1,2,4-噁二唑-5-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]苯基}氮杂环丁烷-3-醇

与在实施例3中所述的方法类似地，由150 mg (0.302 mmol)得自实施例5A的化合物和141 mg (0.452 mmol)得自实施例8A的化合物，得到62 mg (理论值的42%)标题化合物。

¹H NMR (400 MHz, CDCl₃, δ/ppm): 8.23 (d, 2H), 7.53 (d, 2H), 7.17 (t, 1H), 6.80 (s, 1H), 6.53 (d, 1H), 6.39 (d, 1H), 6.27 (s, 1H), 5.38 (s, 2H), 4.77-4.70 (m, 1H), 4.13 (dd, 2H), 4.00-3.87 (m, 4H), 3.63 (dd, 2H), 2.27 (d, 1H), 2.26 (s, 3H), 2.29-2.12 (m, 2H), 1.99-1.90 (m, 2H)。

LC/MS (方法4, ESIpos): R_t = 1.28 min，m/z = 490 [M+H]⁺。

实施例6

1-{3-[(3-{3-[4-(3-氟氧杂环丁烷-3-基)苯基]-1,2,4-噁二唑-5-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]苯基}氮杂环丁烷-3-醇

与在实施例3中所述的方法类似地，由150 mg (0.320 mmol)得自实施例6A的化合物和149 mg (0.479 mmol)得自实施例8A的化合物，得到60 mg (理论值的39%)标题化合物。

¹H NMR (400 MHz, CDCl₃, δ/ppm): 8.29 (d, 2H), 7.71 (d, 2H), 7.17 (t, 1H), 6.81 (s, 1H), 6.53 (d, 1H), 6.39 (d, 1H), 6.27 (s, 1H), 5.39 (s, 2H), 5.06 (dd, 2H), 5.00 (dd, 2H), 4.77-4.70 (m, 1H), 4.13 (dd, 2H), 3.63 (dd, 2H), 2.29 (d, 1H), 2.27 (s, 3H)。

LC/MS (方法4, ESIpos): R_t = 1.22 min，m/z = 462 [M+H]⁺。

实施例7

1-{3-[(3-{3-[4-(1-甲氧基环丁基)苯基]-1,2,4-噁二唑-5-基}-5-甲基-1H-吡唑-1-基)甲基]苯基}氮杂环丁烷-3-醇

与在实施例3中所述的方法类似地，由150 mg (0.313 mmol)得自实施例7A的化合物和146 mg (0.469 mmol)得自实施例8A的化合物，得到53 mg (理论值的36%)标题化合物。

¹H NMR (400 MHz, CDCl₃, δ/ppm): 8.22 (d, 2H), 7.56 (d, 2H), 7.17 (t, 1H), 6.80 (s, 1H), 6.53 (d, 1H), 6.39 (d, 1H), 6.27 (s, 1H), 5.38 (s, 2H), 4.77-4.70 (m, 1H), 4.13 (dd, 2H), 3.63 (dd, 2H), 2.97 (s, 3H), 2.46-2.39 (m, 4H), 2.27 (s, 3H), 2.21 (d, 1H), 2.03-1.93 (m, 1H), 1.78-1.67 (m, 1H)。

LC/MS (方法6, ESIpos): R_t = 1.21 min，m/z = 472 [M+H]⁺。

实施例8

1-{3-[(5-甲基-3-{3-[4-(三氟甲氧基)苯基]-1,2,4-噁二唑-5-基}-1H-吡唑-1-基)甲基]苯基}哌啶-4-醇

将150 mg (0.313 mmol)得自实施例1A的化合物、63 mg (0.626 mmol) 4-羟基哌啶、19 mg (0.021 mmol)三(二亚苄基丙酮)二钯(0)、30 mg (0.063 mmol) 2-二环己基膦基-2',4',6'-三异丙基联苯(X-Phos)和254 mg (0.782 mmol)碳酸铯在3 ml无水DMF中的混合物，在80℃在氩下搅拌12 h。冷却至室温以后，通过少量硅藻土过滤所述反应混合物，然后借助于制备型HPLC (方法11)，将滤液分离成它的组分。在蒸馏浓缩产物级分并在高真空下干燥以后，得到36 mg (理论值的23%)标题化合物。

¹H NMR (400 MHz, CDCl₃, δ/ppm): 8.27 (d, 2H), 7.34 (d, 2H), 7.21 (t, 1H), 6.86 (d, 1H), 6.81 (s, 1H), 6.75 (s, 1H), 6.61 (d, 1H), 5.40 (s, 2H), 3.87-3.81 (m, 1H), 3.53-3.49 (m, 2H), 2.90 (dt, 2H), 2.28 (s, 3H), 2.01-1.95 (m, 2H), 1.70-1.61 (m, 3H)。

LC/MS (方法6, ESIpos): R_t = 1.18 min，m/z = 500 [M+H]⁺。

实施例9

1-(3-{[5-甲基-3-(3-{4-[1-(三氟甲基)环丙基]苯基}-1,2,4-噁二唑-5-基)-1H-吡唑-1-基]甲基}苯基)哌啶-4-醇

与在实施例3中所述的方法类似地，由125 mg (0.248 mmol)得自实施例2A的化合物和50 mg (0.497 mmol) 4-羟基哌啶，得到20 mg (理论值的16%)标题化合物。在这里，在130℃的反应温度下进行该方法的第一个子步骤。根据方法11，进行制备型HPLC纯化。

¹H NMR (400 MHz, CDCl₃, δ/ppm): 8.18 (d, 2H), 7.59 (d, 2H), 7.20 (t, 1H), 6.86 (d, 1H), 6.80 (s, 1H), 6.75 (s, 1H), 6.61 (d, 1H), 5.40 (s, 2H), 3.87-3.81 (m, 1H), 3.53-3.49 (m, 2H), 2.90 (dt, 2H), 2.27 (s, 3H), 2.01-1.94 (m, 2H), 1.70-1.60 (m, 3H), 1.43-1.39 (m, 2H), 1.10-1.07 (m, 2H)。

LC/MS (方法4, ESIpos): R_t = 1.39 min，m/z = 524 [M+H]⁺。

实施例10

1-{3-[(5-甲基-3-{3-[4-(1,1,1-三氟-2-甲基丙-2-基)苯基]-1,2,4-噁二唑-5-基}-1H-吡唑-1-基)甲基]苯基}哌啶-4-醇

与在实施例9中所述的方法类似地，由125 mg (0.247 mmol)得自实施例3A的化合物和50 mg (0.495 mmol) 4-羟基哌啶，得到16 mg (理论值的12%)标题化合物。

¹H NMR (400 MHz, CDCl₃, δ/ppm): 8.20 (d, 2H), 7.62 (d, 2H), 7.20 (t, 1H), 6.86 (d, 1H), 6.80 (s, 1H), 6.75 (s, 1H), 6.61 (d, 1H), 5.40 (s, 2H), 3.88-3.80 (m, 1H), 3.54-3.48 (m, 2H), 2.90 (dt, 2H), 2.27 (s, 3H), 2.01-1.94 (m, 2H), 1.69-1.64 (m, 2H), 1.62 (s, 6H), 1.43 (d, 1H)。

LC/MS (方法6, ESIpos): R_t = 1.20 min，m/z = 526 [M+H]⁺。

实施例11

1-{3-[(5-甲基-3-{3-[4-(三氟甲氧基)苯基]-1,2,4-噁二唑-5-基}-1H-吡唑-1-基)甲基]苯基}哌啶-4-甲腈

与在实施例8中所述的方法类似地，由150 mg (0.313 mmol)得自实施例1A的化合物和69 mg (0.626 mmol) 4-氰基哌啶，得到68 mg (理论值的43%)标题化合物。

¹H NMR (400 MHz, CDCl₃, δ/ppm): 8.26 (d, 2H), 7.34 (d, 2H), 7.23 (t, 1H), 6.86 (d, 1H), 6.81 (s, 1H), 6.74 (s, 1H), 6.67 (d, 1H), 5.40 (s, 2H), 3.41-3.34 (m, 2H), 3.11-3.03 (m, 2H), 2.81-2.75 (m, 1H), 2.28 (s, 3H), 2.07-1.92 (m, 4H)。

LC/MS (方法2, ESIpos): R_t = 2.79 min，m/z = 509 [M+H]⁺。

实施例12

1-(3-{[5-甲基-3-(3-{4-[1-(三氟甲基)环丙基]苯基}-1,2,4-噁二唑-5-基)-1H-吡唑-1-基]甲基}苯基)哌啶-4-甲腈

与在实施例9中所述的方法类似地，由50 mg (0.099 mmol)得自实施例2A的化合物和22 mg (0.199 mmol) 4-氰基哌啶，得到23 mg (理论值的43%)标题化合物。

¹H NMR (400 MHz, CDCl₃, δ/ppm): 8.19 (d, 2H), 7.58 (d, 2H), 7.22 (t, 1H), 6.84 (d, 1H), 6.81 (s, 1H), 6.73 (s, 1H), 6.67 (d, 1H), 5.40 (s, 2H), 3.41-3.34 (m, 2H), 3.10-3.03 (m, 2H), 2.80-2.74 (m, 1H), 2.28 (s, 3H), 2.07-1.92 (m, 4H), 1.42-1.39 (m, 2H), 1.11-1.07 (m, 2H)。

LC/MS (方法6, ESIpos): R_t = 1.37 min，m/z = 533 [M+H]⁺。

实施例13

1-{3-[(5-甲基-3-{3-[4-(1,1,1-三氟-2-甲基丙-2-基)苯基]-1,2,4-噁二唑-5-基}-1H-吡唑-1-基)甲基]苯基}哌啶-4-甲腈

与在实施例9中所述的方法类似地，由125 mg (0.247 mmol)得自实施例3A的化合物和55 mg (0.495 mmol) 4-氰基哌啶，得到66 mg (理论值的50%)标题化合物。

¹H NMR (400 MHz, CDCl₃, δ/ppm): 8.20 (d, 2H), 7.62 (d, 2H), 7.22 (t, 1H), 6.84 (d, 1H), 6.81 (s, 1H), 6.73 (s, 1H), 6.67 (d, 1H), 5.40 (s, 2H), 3.40-3.34 (m, 2H), 3.10-3.03 (m, 2H), 2.80-2.74 (m, 1H), 2.28 (s, 3H), 2.07-1.91 (m, 4H), 1.63 (s, 6H)。

LC/MS (方法6, ESIpos): R_t = 1.38 min，m/z = 535 [M+H]⁺。

实施例14

1-(3-{[5-甲基-3-(3-{4-[(三氟甲基)硫烷基]苯基}-1,2,4-噁二唑-5-基)-1H-吡唑-1-基]甲基}苯基)哌啶-4-醇

将500 mg (1.01 mmol)得自实施例10A的化合物、514 mg (1.51 mmol)得自实施例9A的化合物、92 mg (0.101 mmol)三(二亚苄基丙酮)二钯(0)、96 mg (0.202 mmol) 2-二环己基膦基-2',4',6'-三异丙基联苯(X-Phos)和194 mg (2.02 mmol)叔丁醇钠在10 ml甲苯中的混合物，在氩下在微波炉(Biotage Initiator, 动态控制入射功率)中加热至80℃持续3 h。冷却至室温以后，将100 ml水加入所述反应混合物中，用每次约100 ml乙酸乙酯萃取3次。依次用水和饱和氯化钠溶液洗涤合并的有机萃取物，经无水硫酸镁干燥，过滤，最后在旋转蒸发器上除去溶剂。借助于MPLC (约70 g硅胶，洗脱液：环己烷→5:1环己烷/乙酸乙酯)，纯化得到的粗产物，它是对应的甲硅烷基保护的中间体。随后，将该产物溶解于3.5 ml THF中，并加入3.5 ml (3.5 mmol)四正丁基氟化铵(TBAF)在THF中的1 M溶液。将该混合物在室温搅拌20 min以后，在旋转蒸发器上浓缩。借助于MPLC (约20 g硅胶，洗脱液：环己烷/乙酸乙酯2:1→1:3)，分离出标题化合物。蒸发浓缩并干燥以后，再用戊烷/乙醚搅拌该产物1次。如此得到65 mg (理论值的12%)标题化合物。

¹H NMR (400 MHz, CDCl₃, δ/ppm): 8.27 (d, 2H), 7.78 (d, 2H), 7.21 (t, 1H), 6.87 (d, 1H), 6.81 (s, 1H), 6.75 (s, 1H), 6.61 (d, 1H), 5.40 (s, 2H), 3.88-3.81 (m, 1H), 3.54-3.49 (m, 2H), 2.90 (dt, 2H), 2.29 (s, 3H), 2.01-1.94 (m, 2H), 1.69-1.61 (m, 3H)。

LC/MS (方法6, ESIpos): R_t = 1.25 min，m/z = 516 [M+H]⁺。

实施例15

1-{3-[(5-甲基-3-{3-[4-(三氟甲氧基)苯基]-1,2,4-噁二唑-5-基}-1H-吡唑-1-基)甲基]苯基}氮杂环丁烷-3-基-N,N-二甲基甘氨酸酯

将86 mg (0.70 mmol) 4-N,N-二甲氨基吡啶和671 mg (3.50 mmol) EDC加入550 mg (1.17 mmol)得自实施例1的化合物和361 mg (3.50 mmol) N,N-二甲基甘氨酸在11 ml二氯甲烷中的溶液中。将所述反应混合物在室温搅拌8 h以后，在旋转蒸发器上除去所有挥发性的组分。将得到的残余物溶解于200 ml乙酸乙酯中，并用约100 ml水洗涤1次。在无水硫酸镁上干燥以后，过滤，并浓缩后，借助于MPLC (约30 g硅胶，洗脱液：25:25:1环己烷/乙酸乙酯/三乙胺)分离产物。得到第一级份328 mg标题化合物。通过从环戊基甲基醚中重结晶，从第二个仍未提纯的级分得到另外的115 mg标题化合物。如此得到共443 mg (理论值的68%)标题化合物。从二异丙醚/环戊基甲基醚(2:1, 1.5 ml/100 mg)中再次结晶，得到标题化合物，熔点为117℃。

¹H NMR (400 MHz, CDCl₃, δ/ppm): 8.26 (d, 2H), 7.33 (d, 2H), 7.18 (t, 1H), 6.81 (s, 1H), 6.55 (d, 1H), 6.39 (d, 1H), 6.24 (s, 1H), 5.39 (s, 2H), 5.38-5.32 (m, 1H), 4.21 (dd, 2H), 3.79 (dd, 2H), 3.20 (s, 2H), 2.36 (s, 6H), 2.28 (s, 3H)。

LC/MS (方法6, ESIpos): R_t = 0.95 min，m/z = 557 [M+H]⁺。

实施例16

(S)-1-{3-[(5-甲基-3-{3-[4-(三氟甲氧基)苯基]-1,2,4-噁二唑-5-基}-1H-吡唑-1-基)甲基]苯基}氮杂环丁烷-3-基L-缬氨酸酯

在0℃，将25 ml三氟醋酸(TFA)加入965 mg (1.44 mmol)得自实施例11A的化合物在45 ml二氯甲烷中的溶液中。将所述反应混合物在室温搅拌1 h。此后，在旋转蒸发器上除去所有挥发性的组分，并将得到的残余物重新溶解在500 ml二氯甲烷中。用每次约100 ml饱和碳酸氢钠溶液洗涤产物2次，然后用100 ml水洗涤1次，最后用100 ml饱和食盐溶液洗涤1次。在无水硫酸镁上干燥以后，过滤所述混合物，并在旋转蒸发器上除去溶剂。在40 ml戊烷、2 ml二异丙醚和几滴二氯甲烷的混合物中，搅拌得到的粗产物(780 mg)。抽滤出固体并在高真空下干燥以后，如此得到659 mg (理论值的80%)标题化合物。

¹H NMR (400 MHz, CDCl₃, δ/ppm): 8.27 (d, 2H), 7.33 (d, 2H), 7.19 (t, 1H), 6.80 (s, 1H), 6.57 (d, 1H), 6.39 (d, 1H), 6.25 (s, 1H), 5.39 (s, 2H), 5.35-5.30 (m, 1H), 4.24-4.20 (m, 2H), 3.80-3.74 (m, 2H), 3.32 (d, 1H), 2.28 (s, 3H), 2.12-2.00 (m, 1H), 0.98 (d, 3H), 0.91 (d, 3H)。

LC/MS (方法14, ESIpos): R_t = 0.96 min，m/z = 571 [M+H]⁺。

B. 药理学活性的评估

如本领域技术人员已知的，通过体外-和体内研究，可以检测根据本发明的化合物的药理学活性。通过例如体外-(肿瘤)细胞实验和体内-肿瘤模型，如下进一步详述，可以证实根据本发明的物质的有用性。通过文献中描述的众多研究，证实了HIF转录活性的抑制和肿瘤生长的抑制之间的联系(参见例如Warburg, 1956; Semenza, 2007)。

B-1. HIF 萤光素酶试验

用含有在HIF应答序列控制下的萤光素酶报告基因的质粒，稳定地转染HCT 116细胞。将这些细胞接种在微量滴定板中[20 000细胞/孔，在含有10% 胎牛血清(FKS)和100 μg/ml潮霉素的RPMI 1640培养基中]。在标准条件(5% CO₂, 21% O₂, 37℃，控湿)下温育过夜。次日早晨，在低氧室(1% O₂)中，用不同浓度的实验物质(0-10 μmol/l)温育细胞。24 h以后，根据生产商的说明书，加入Bright Glo试剂(Promega, Wisconsin, USA)，并在5 min以后，测量荧光。在常氧下温育的细胞用作背景对照。

在下表中列出了代表性的工作实施例在该试验中的IC₅₀值：

在WO 2008/141731-A2中作为实施例1描述的化合物5-[5-甲基-1-(4-甲基苄基)-1H-吡唑-3-基]-3-[4-(三氟甲氧基)苯基]-1,2,4-噁二唑，不同于根据本发明的化合物，不具有在苄基头部基团上的杂环基取代基，在该试验中表现出30 nmol/l的IC₅₀值。

B-2. 在体外对 HIF 靶基因的抑制：

在常氧条件下和在1%氧分压下(参见HIF萤光素酶试验)，用不同浓度的实验物质(1 nM至10 μM)温育人支气管癌细胞(H460和A549) 16 h。从细胞分离出总RNA，并转录成cDNA，在实时PCR中分析HIF靶基因的mRNA表达。在常氧条件下，但尤其是在缺氧条件下，与未处理的细胞相比，活性实验物质已经降低了HIF靶基因的mRNA表达。

B-3. 人异种移植肿瘤模型：

使用在免疫缺陷小鼠中的人肿瘤异种移植模型来评估所述物质。为此目的，在体外培养肿瘤细胞，并植入皮下，或者进一步皮下植入肿瘤异种移植物块。在已经建立肿瘤以后，通过口服、皮下或腹膜内疗法，治疗动物。在单一疗法中和在与其它药理学活性物质的联合治疗中，分析实验物质的活性。另外，表征了实验物质对高阶大小（fortgeschrittener Größe）(大约100 mm²)的肿瘤的肿瘤抑制效能。每天检查动物的健康状态，并根据动物保护规则进行治疗。用游标卡尺测量肿瘤面积(长度L, 宽度B = 较短的尺寸)。根据式(L x B²)/2，计算肿瘤体积。在研究结束时，将肿瘤生长的抑制确定为肿瘤面积或肿瘤重量的T/C比，并确定为TGI值(肿瘤生长抑制，根据式[1-(T/C)] x 100)确定 (T = 治疗组的肿瘤大小；C = 未治疗对照组的肿瘤大小)。

借助于治疗的和未治疗的荷瘤小鼠的计算机微断层摄影术和超声微观研究，鉴别实验物质对肿瘤血管体系结构和肿瘤内的血流量的影响。

C. 药代动力学参数的测定

可以如下测定根据本发明的化合物在静脉内或口服给药以后的药代动力学参数：

将待测物质作为溶液(例如在加入少量DMSO的相应血浆中，或在PEG/乙醇/水混合物中)静脉内地施用给动物(例如小鼠或大鼠)，作为溶液(例如在Solutol/乙醇/水或PEG/乙醇/水混合物中或PEG/乙醇/水混合物中)或作为混悬液(例如在Tylose中)各自通过管饲法实现口服给药。施用所述物质以后，在固定的时间从动物采血。将所述血液肝素化，然后由此通过离心得到血浆。通过LC-MS/MS，分析定量血浆中的物质。使用内部标准品并借助于验证过的计算机程序，由如此测得的血浆浓度-时间曲线，计算出药代动力学参数，诸如AUC (浓度-时间曲线下面积)、C_max (最大血浆浓度)、t_1/2 (半衰期)、V_SS (分布容积)和CL (清除率)、以及绝对的和相对的生物利用度F和F_rel (静脉内/口服对比，或在口服给药后混悬液与溶液的对比)。

为了测定从前药化合物释放的活性成分，如上所述静脉内地或口服地施用前药，并定量前药和释放的活性成分在处理过的血浆中的浓度。

C-1. 静脉内给药到大鼠中以后的药代动力学参数：

在每种情况下，以0.3-1.0 mg/kg的量，将待测物质作为在血浆中的溶液静脉内地施用给大鼠，在所述血浆中含有最多2% DMSO。下面显示了测得的工作实施例1和14（作为根据本发明的化合物的实施例）的动力学参数[CL_血浆= 血浆清除率]:

在WO 2008/141731-A2中作为实施例1描述的化合物5-[5-甲基-1-(4-甲基苄基)-1H-吡唑-3-基]-3-[4-(三氟甲氧基)苯基]-1,2,4-噁二唑，不同于根据本发明的化合物，不具有在苄基头部基团上的杂环基取代基，在静脉内给药给大鼠中以后表现出所述参数的下述数据：t_1/2 = 30 h，CL_血浆= 0.4 l/h/kg，V_SS = 6.9 l/kg。

C-2. 在大鼠中口服给药以后的药代动力学参数：

在每种情况下，以1-3 mg/kg的量，将待测物质作为在Solutol/乙醇/水(40:10:50或40:20:40)中的溶液口服地施用给大鼠。下面显示了测得的工作实施例1（作为根据本发明的化合物的实施例）的动力学参数[AUC_norm = 剂量-标准化的暴露(浓度/时间曲线下的面积)]:

在该表中的第2行给出了在口服施用实施例15的前药化合物(1 mg/kg结晶物，作为在水中的Tolyse悬浮液)以后得到的实施例1的药代动力学参数。在任何检查时间，在大鼠的血浆中都不可检测出所述前药化合物本身。

在WO 2008/141731-A2中作为实施例1描述的化合物5-[5-甲基-1-(4-甲基苄基)-1H-吡唑-3-基]-3-[4-(三氟甲氧基)苯基]-1,2,4-噁二唑，不同于根据本发明的化合物，不具有在苄基头部基团上的杂环基取代基，在口服给药给大鼠中以后表现出所述参数的下述数据：t_1/2 = 29 h，AUC_norm = 1.9 kg·h/l，F = 74%。

D. 稳定性特征的测定

可以在下述的实验中测定根据本发明的前药化合物对非特异性水解以及在血浆中的稳定性：

D-1. pH 依赖性的水解稳定性的测定：

将0.3 mg实验物质(前药)初始称重进2 ml HPLC瓶中，并加入0.6 ml乙腈或乙腈/DMSO混合物(含有最多20体积%的DMSO)。为了溶解所述物质，将样品容器放入超声浴中大约10秒。随后，在每种情况中加入1.0 ml水性缓冲溶液(商购可得的pH值 2、4、6.5、8和10的缓冲溶液)，并在超声浴中再次处理样品。在37℃的24小时时段内，每小时各取5µl样品溶液通过HPLC分析其未改变的前药的含量或通过水解从所述前药释放出的活性成分的含量。通过相应的HPLC峰的面积百分比进行定量。

下面列出了工作实施例15在pH 6.5的情况下的稳定性值:

随着pH而变化，在12 h以后，得到工作实施例15的下述值：

D-2. 体外血浆稳定性的测定：

将1 mg实验物质(前药)初始称重进2 ml HPLC瓶中，并加入1.5 ml DMSO和1 ml水。为了溶解所述物质，将样品容器放入超声浴中大约10秒。将0.5 ml 37℃的热的大鼠血浆或人血浆加入0.5 ml该溶液中。振摇所述样品，并取大约10µl用于第一次分析(时间t₀)。在开始温育以后最多2小时的时间内，取4-6个另外的等分试样用于定量。在测试期间，将样品保持在37℃。通过HPLC，进行表征和定量。

下面列出了工作实施例15在大鼠血浆中的稳定性值:

在人血浆中，得到工作实施例15的下述值:

E. 药物组合物的工作实施例

根据本发明的化合物可以以下述方式转化成药物制剂：

片剂：

组成：

100 mg根据本发明的化合物，50 mg乳糖(一水合物)，50 mg玉米淀粉(天然的)，10 mg聚乙烯吡咯烷酮(PVP 25) (BASF, Ludwigshafen, 德国)，和2 mg硬脂酸镁。

片剂重量212 mg。直径8 mm，曲率半径12 mm。

生产：

用5%的PVP在水中的溶液(w/w)，将根据本发明的化合物、乳糖和淀粉的混合物造粒。干燥后，将粒料与硬脂酸镁混合5分钟。用常规压片机压制该混合物(关于片剂尺寸见上)。用于压制的标准值使用15 kN的压制力。

用于口服施用的混悬液：

组成：

1000 mg根据本发明的化合物，1000 mg乙醇(96%)，400 mg Rhodigel®(黄原胶，得自FMC, Pennsylvania, USA)，和99 g水。

10 ml口服混悬液相当于100 mg根据本发明的化合物的单次剂量。

生产：

将Rhodigel悬浮于乙醇中，将根据本发明的化合物加入所述悬浮液中。在搅拌下，加入水。将所述混合物搅拌约6 h，直到Rhodigel溶胀结束。

用于口服施用的溶液：

组成：

500 mg根据本发明的化合物，2.5 g聚山梨酯，和97 g聚乙二醇400。20 g口服液相当于100 mg根据本发明的化合物的单次剂量。

生产：

在搅拌下，将根据本发明的化合物悬浮于聚乙二醇和聚山梨酯的混合物中。搅拌过程持续至根据本发明的化合物完全溶解。

静脉内溶液：

以低于饱和溶解度的浓度将根据本发明的化合物溶解在生理上耐受的溶剂(例如等渗食盐溶液、葡萄糖溶液5%和/或PEG 400溶液30%)中。将所述溶液灭菌过滤，并填充于无菌的且无热原的注射容器中。

F. 文献

Claims

1.式(I)的化合物和它们的盐、溶剂化物和所述盐的溶剂化物

其中

m表示数1或2，

n表示数1、2或3，

R¹表示羟基或氰基，

且

R²表示三氟甲氧基、三氟甲基硫烷基、三氟甲磺酰基、五氟硫烷基或下式的基团

其中

*表示与苯基环的键合位，

R^3A和R^3B各自独立地表示氟或甲基

或者

且

R⁴表示氢、氟、甲基、三氟甲基或甲氧基。

2.根据权利要求1所述的式(I)的化合物和它们的盐、溶剂化物和所述盐的溶剂化物，其中

m和n各自独立地表示数1或2，

R¹表示羟基或氰基，

且

R²表示三氟甲基、三氟甲氧基、三氟甲基硫烷基或下式的基团

其中

*表示与苯基环的键合位，

R^3A和R^3B均表示甲基，或者彼此相连，且与它们键合的碳原子一起，形成环丙烷-1,1-二基环、环丁烷-1,1-二基环、氧杂环丁烷-3,3-二基环或四氢-2H-吡喃-4,4-二基环，

且

R⁴表示氢、氟、甲基或三氟甲基。

3.根据权利要求1或2所述的式(I)的化合物和它们的盐、溶剂化物和所述盐的溶剂化物，其中

m和n都表示数1或2，

R¹表示羟基或氰基，

且

R²表示三氟甲氧基或下式的基团

，其中

*表示与苯基环的键合位。

4.根据权利要求1、2或3所述的式(I)化合物和它们的盐、溶剂化物和所述盐的溶剂化物，其中

R¹表示羟基，

且

m、n和R²分别具有在权利要求1、2或3中所给出的含义。

5.式(I-PD)的化合物和它们的盐、溶剂化物和所述盐的溶剂化物，

其中m、n和R²分别具有在权利要求1-4中所给出的含义，

且

R^PD表示下式的前药基团

，其中

#表示与氧原子的键合位，

R⁵表示氢或(C₁-C₄)-烷基，

且

R^6A和R^6B各自独立地表示氢或甲基。

6.根据权利要求5所述的式(I-PD)的化合物和它们的盐、溶剂化物和所述盐的溶剂化物，其中

R^PD表示下式的前药基团

，其中

#表示与氧原子的键合位。

7.用于制备在权利要求1-4中定义的式(I)的化合物的方法，其特征在于，在合适的钯催化剂和碱存在下，使式(II)的化合物

其中R²具有在权利要求1-4中所给出的含义

且

X表示溴或碘，

与式(III)的化合物偶联

其中m、n和R¹具有在权利要求1-4中所给出的含义，

并任选地将如此得到的式(I)的化合物分离成它们的对映异构体和/或非对映异构体，和/或使用适当的(i)溶剂和/或(ii)酸转化成它们的溶剂化物、盐和/或所述盐的溶剂化物。

8.用于制备在权利要求5和6中定义的式(I-PD)的化合物的方法，其特征在于，根据常规方法，用式(VIII)的化合物或该化合物的活化形式酯化式(I-A)的化合物

其中R^PD具有在权利要求5或6中所给出的含义，

其中m、n和R²各自具有在权利要求1-4中所给出的含义，

并任选地将如此得到的式(I-PD)的化合物分离成它们的对映异构体和/或非对映异构体，和/或使用适当的(i)溶剂和/或(ii)酸转化成它们的溶剂化物、盐和/或所述盐的溶剂化物。

9.如在权利要求1-6中的任一项中定义的化合物，用于治疗和/或预防疾病。

10.如在权利要求1-6中的任一项中定义的化合物，用于在治疗和/或预防癌症或肿瘤的方法中使用。

11.用于治疗和/或预防下述疾病的方法中的如在权利要求1-6中的任一项中定义的化合物：缺血性心血管疾病、心力衰竭、心肌梗塞、心律失常、中风、肺性高血压、肾和肺的纤维变性疾病、银屑病、糖尿病视网膜病变、黄斑变性、风湿性关节炎和楚瓦士红细胞增多。

12.如在权利要求1-6中的任一项中定义的化合物用于生产药物的用途，所述药物用于治疗和/或预防癌症或肿瘤。

13.如在权利要求1-6中的任一项中定义的化合物用于生产药物的用途，所述药物用于治疗和/或预防缺血性心血管疾病、心力衰竭、心肌梗塞、心律失常、中风、肺性高血压、肾和肺的纤维变性疾病、银屑病、糖尿病视网膜病变、黄斑变性、风湿性关节炎和楚瓦士红细胞增多。

14.药物，其包含与一种或多种惰性、无毒、药学上合适的赋形剂相组合的如在权利要求1-6中的任一项中定义的化合物。

15.药物，其包含与一种或多种其它活性成分相组合的如在权利要求1-6中的任一项中定义的化合物。

16.用于治疗和/或预防癌症或肿瘤的根据权利要求14或15所述的药物。

17.用于治疗和/或预防下述病症的根据权利要求14或15所述的药物：缺血性心血管疾病、心力衰竭、心肌梗塞、心律失常、中风、肺性高血压、肾和肺的纤维变性疾病、银屑病、糖尿病视网膜病变、黄斑变性、风湿性关节炎和楚瓦士红细胞增多。

18.用于在人类和动物中治疗和/或预防癌症或肿瘤的方法，其中使用有效量的至少一种在权利要求1-6中的任一项中定义的化合物，或有效量的在权利要求14-16中的任一项中定义的药物。

19.用于在人类和动物中治疗和/或预防下述病症的方法：缺血性心血管疾病、心力衰竭、心肌梗塞、心律失常、中风、肺性高血压、肾和肺的纤维变性疾病、银屑病、糖尿病视网膜病变、黄斑变性、风湿性关节炎和楚瓦士红细胞增多，其中使用有效量的至少一种在权利要求1-6中的任一项中定义的化合物，或有效量的在权利要求14、15和17中的任一项中定义的药物。