CN102992988B

CN102992988B - 一种取代间苯三酚衍生物及其应用

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Publication number: CN102992988B
Application number: CN201210555547.9A
Authority: CN
Inventors: 王永刚; 苏薇薇; 彭维; 吴忠
Original assignee: 苏薇薇
Current assignee: Sun Yat Sen University
Priority date: 2012-12-19
Filing date: 2012-12-19
Publication date: 2015-06-17
Anticipated expiration: 2032-12-19
Also published as: CN102992988A

Abstract

本发明公开了结构如通式（I）所示的系列取代间苯三酚衍生物及其药学上可接受的盐。其中，通式（I）所示的A选自H、甲基、乙基或丙基；B₁选自H、烯丙基或天然苷型双糖基；B₂或B₃分别选自H或烯丙基；X-Y表示两个碳原子之间以单键或双键连接。本发明还进一步提供了上述化合物的制备方法，及其在制备改善呼吸系统功能，特别是止咳药物方面的应用。经实验证明，本发明涉及的衍生物具有显著的止咳作用，没有临床成瘾性；理化性质稳定，合成工艺简单，适合规模化生产，具有作为止咳临床用药的良好前景。

Description

一种取代间苯三酚衍生物及其应用

技术领域

本发明涉及系列取代间苯三酚衍生物；及其在制备改善呼吸系统功能，尤其是止咳药物制剂中的应用。

背景技术

柚皮素（Naringenin）是柚皮苷(Naringin)的苷元，广泛存在于樱花的花蕾、梅的花蕾、橘皮、化橘红等植物原料组织中。柚皮素和柚皮苷均具有止咳作用。柚皮素的化学性质稳定，在进入人体内后，以原形药物存在；柚皮苷是柚皮素在其7位上结合一双糖形成的苷，进入人体后，在胃酸和各种酶的作用下水解掉双糖，变成柚皮素，故在人体内主要以柚皮素的形式发挥药理作用（Kazuo Ishii,Takashi Furuta,Yasuji Kasuya. Determination of naringin and naringenin in human plasma by high-performance liquid chromatography. Journal of Chromatography B, 683(1996);225-229）。柚皮素及柚皮苷的分子结构如下：

柚皮素的分子结构

柚皮苷的分子结构

目前临床上最常用于治疗咳嗽的药物为磷酸可待因，但该药具有临床成瘾性。

发明内容

本发明提供了以柚皮素和柚皮苷为原料进行结构改造得到的系列取代间苯三酚衍生物及其在药学上可接受的盐，被证明具有改善呼吸系统功能，特别是止咳作用；并进一步公开上述衍生物的制备方法及在制备止咳药物制剂中的应用。

本发明所述的衍生如下述通式(I)所示：

其中A选自H、甲基、乙基或丙基；B₁选自H、烯丙基或天然苷型双糖基；B₂或B₃分别选自H或烯丙基；X-Y表示两个碳原子之间以单键或双键连接。

所述的天然苷型双糖基选自鼠李糖、葡萄糖或通过1→2苷键结合而成的新橙皮糖双糖。

所述的衍生物或其药学上可接受的盐可作为活性成分制成单方或组合物药物制剂。所述制剂可制成药学上可接受的各种剂型。活性成分按质量比为药物总量的0.1-95%。

本发明的衍生物有助于改善呼吸系统功能，具有止咳、化痰作用，适用于细菌和病毒所致呼吸系统功能障碍的疾病。

本发明的取代间苯三酚衍生物的药物组合物可根据本领域公知的方法制备。用于此目的时，如果需要，可将本发明的取代间苯三酚衍生物与一种或多种固体或液体药物赋形剂和/或辅剂结合，制成可作为人药或兽药使用的适当的施用形式或剂量形式。

本发明的取代间苯三酚衍生物或含有它的药物组合物可以单位剂量形式给药，给药途径可为肠道或非肠道，如口服、肌肉、皮下、鼻腔、口腔粘膜、皮肤、腹膜或直肠等。

本发明的取代间苯三酚衍生物或含有它的药物组合物的给药途径可为注射给药，包括静脉注射、肌肉注射、皮下注射、皮内注射和穴位注射等。

给药剂型可以是液体剂型、固体剂型。如液体剂型可以是真溶液类、胶体类、微粒剂型、乳剂剂型、混悬剂型。其他剂型例如片剂、胶囊剂滴丸、气雾剂、丸剂、粉剂、溶液剂、混悬剂、栓剂、冻干粉针剂等。

本发明的取代间苯三酚衍生物可以制成普通制剂，也可以是缓释制剂、控释制剂、靶向制剂及各种微粒给药系统。

例如为了将单位给药剂型制成片剂，可以广泛使用本领域公知的各种载体。关于载体的例子是，例如稀释剂与吸收剂，如淀粉、糊精、硫酸钙、乳糖、甘露醇、蔗糖、氯化钠、葡萄糖、尿素、碳酸钙、白陶土、微晶纤维素、硅酸铝等；湿润剂如水、甘油、聚乙二醇、乙醇、丙醇等；粘合剂如淀粉浆、糊精、糖浆、蜂蜜、葡萄糖溶液、阿拉伯胶浆、明胶浆、羧甲基纤维素、甲基纤维素、紫胶、磷酸钾、聚乙烯吡咯烷酮等；崩解剂，如干燥淀粉、海藻酸盐、琼脂粉、褐藻淀粉、碳酸氢钠与枸橼酸、碳酸钙、聚氧乙烯山梨醇脂肪酸脂、十二烷基磺酸钠、甲基纤维素、乙基纤维素等；崩解抑制剂，例如蔗糖、硬脂酸甘油脂、可可脂、氢化植物油等；吸收促进剂，例如季铵盐、十二烷基硫酸钠等；润滑剂，例如滑石粉、二氧化硅、玉米淀粉、硬脂酸盐、硼酸、液状石蜡、聚乙二醇等。还可以将片剂进一步制成包衣片，例如糖包衣片、薄膜包衣片、肠溶包衣片，或双层片和多层片。

例如为了将给药单元制成丸剂，可以广泛使用本领域公知的各种载体。关于载体的例子是，例如稀释剂与吸收剂，如葡萄糖、乳糖、淀粉、可可脂、氢化植物油、聚乙烯吡咯烷酮、高岭土、滑石粉等；粘合剂，如阿拉伯胶、黄蓍胶、明胶、乙醇、蜂蜜、米糊或面糊等；崩解剂，如琼脂粉、干燥淀粉、海藻酸盐、十二烷基磺酸钠、甲基纤维素、乙基纤维素等。

例如为了将给药单元制成胶囊剂，将有效成分的本发明的取代间苯三酚衍生物与上述的各种载体混合，并将由此得到的混合物置于硬的明胶或软胶囊中。也可将有效成分的本发明的取代间苯三酚衍生物制成微囊剂，混悬于水性介质中形成混悬剂，也可装入硬胶囊中，或制成注射剂应用。

例如将有效成分的本发明的取代间苯三酚衍生物制成注射用制剂，如溶液剂、混悬剂溶液、乳剂、冻干粉针剂等，这种制剂可以是含水或非水的，可含一种和/或多种药效学上可接受的载体，如稀释剂、粘合剂、润滑剂、防腐剂、表面活性剂或分散剂。如稀释剂可选自水、乙醇、聚乙二醇、1，3-丙二醇、乙氧基化的异硬脂醇、多氧化的异硬脂醇、聚氧乙烯山梨醇脂肪酸脂等。另外，为了制备等渗注射液，可以向注射用制剂中添加适量的氯化钠、葡萄糖或甘油，此外，还可以添加常规的助溶剂、缓冲剂、pH调节剂等。这些辅料是本领域常用的。此外，如需要，也可以向药物制剂中添加着色剂、防腐剂、香料、矫味剂、甜味剂或其它材料。

本发明的取代间苯三酚衍生物药物组合物的给药剂量取决于许多因素，例如所要预防或治疗疾病的性质和严重程度，患者或动物的性别、年龄、体重、性格及个体反应，给药途径、给药次数等，因此本发明的治疗剂量可以有大范围的变化。本发明药物成分的使用剂量是本领域技术人员公知的。可以根据本发明的取代间苯三酚衍生物组合物中最后的制剂中所含有的实际药物数量，加以适当的调整，以达到其治疗有效量的要求，完成本发明的预防或治疗目的。本发明的取代间苯三酚衍生物的每天的合适剂量范围从0.01-1000mg/kg体重，尤其是1-100mg/kg体重。上述剂量可以单一剂量形式或分成例如二、三或四个等几个剂量形式给药，这受限于给药医生的临床经验以及临床运用给药方案。

实验证明，本发明涉及的取代间苯三酚衍生物具有显著的止咳作用，镇咳率甚至可达47%。效果优于或接近磷酸可待因，没有临床成瘾性副作用；且理化性质稳定，合成工艺简单，适合规模化生产，具有替代磷酸可待因作为止咳临床用药的良好前景。

具体实施方式

一、本发明涉及的取代间苯三酚衍生物的制备方法。

实施例1：

(E)-1-（2，4-双烯丙氧基）-6-羟苯基）-3-（4-（烯丙基）苯基）丙烯1-酮。(E)-1-(2,4-bis(allyloxy)-6- hydroxyphenyl)-3-(4-(allyloxy)phenyl) prop-2-en-1-one.

将5g柚皮素溶于50ML的N，N-二甲基甲酰胺（DMF）中，再加入3eq当量的碳酸钾K₂CO₃，系统冷却至0度，滴加二个当量的2eq烯丙基溴。逐渐升至室温后，反应24小时，滴加600ML的氯化钠水溶液，用醋酸乙酯萃取。水洗三次取有机相，浓缩，通过硅胶柱层析分离，（溶剂石油醚：醋酸乙酯 =20:1）得淡黄色固体1.3g。熔点MP=55-58度，薄层层析：石油醚：醋酸乙酯= 5:1，Rf=0.7，质谱 M+H= 393.3，产率 =18%。

核磁共振：¹H-NMR(400Mhz,DMSO-d6): δ4.634(6H, dd, J1=17.6Hz; J2=4.8Hz, allyloxy-OCH2-),δ5.280(3H,m,allyloxy-Hb),δ5.431(3H,t,J=16.4Hz,allyloxy-Hc),δ6.043(3H,m,allyloxy-Ha),δ6.132(1H,s,H-5’’), δ6.189(1H, s, H-3’’), δ7.020(2H,d, J=8.8Hz,H-2’,H-6’), δ7.637(3H,m, H-2’,H-6’,H-2),δ7.727(1H, d, J=15.6Hz, H-3)。

¹³C-NMR(100Mhz,DMSO-d6):δ192.66(C-1),δ166.01(C-6’’),δ164.74(C-2’’),δ161.21(C-4’’),δ160.67(C-4’),δ142.79(C-3),δ133.83-133.40(allyloxy-C-bc),δ130.73(C-2’,C-6’),δ127.97(C-1’),δ125.59(C-2),δ118.95-118.8(allyloxy-C-a),δ115.68(C-3’,C-5’),δ107.02(C-1’’),δ95.30(C-3’’),δ92.98(C-5’’),δ69.91-68.83(allyloxy-OCH₂-)。

结构进一步通过二维核磁共振，HSQC和HMBC实验确证。

实施例2：

1-（2，4，6-三羟基-3-丙基苯基）-3-4-羟基苯基）丙烷1-酮。

1-(2,4,6-trihydroxy-3-propylphenyl)-3-(4-hydroxyphenyl)propan-1-one。

将1g 6-烯丙基柚皮素溶于100ml乙醇中。加入催化剂10% Pd/C，0.5g. 常压氢化20小时。过滤除去固体物，滤液浓缩，经硅胶柱层析分离纯化，石油醚：醋酸乙酯=2:1，得淡红色固体0.11g。熔点MP=183-185度。薄层层析：石油醚：醋酸乙酯=1:1，Rf=0.3，质谱 M-H= 315.3，HPLC纯度 =99%。

核磁共振：¹H-NMR(400Mhz, DMSO-d6): δ0.854 (3H,t,J=7.2Hz,H-3’’), δ1.405(2H,q,J1=7.2Hz, H-2’’), δ2.386(2H,t,J=7.6Hz, H-1’’), δ2.761(2H, t, J=8Hz,H-2), δ3.224(2H,t,J=7.6Hz, H-3), δ5.999(1H, s, H-6), δ6.663(2H, d,J=8.4Hz, H-3’,H-5’), δ7.015(1H, d, J=8.4Hz, H-2’,H-6’), δ9.110(-9OH), δ10.201(-4’OH), δ10.516(-7OH),δ13.977(-5OH)。

¹³C-NMR(100Mhz,inDMSO-d6):δ204.74(C-4),δ163.99(C-7),δ163.01(C-9),δ160.30(C-5),δ155.83(C-4’),δ132.17(C-1’),δ129.58(C-2’,C-6’),δ115.52(C-3’,C-5’), δ106.96 (C-8), δ103.95(C-10), δ94.54(C-6), δ45.97(C-3), δ24.27 (C-1’’), δ22.23(C-2’’), δ14.48(C-3’’)。

结构进一步通过二维核磁共振，HSQC和HMBC实验确证。

实施例3：

（E）-1-（4-丙烯氧基）-2，6-二羟基苯基）-3-（4-（丙烯氧基）苯基）丙烯-1-酮。

(E)-1-(4-(allyloxy)-2,6-dihydroxyphenyl)-3-(4-(allyloxy)phenyl)prop-2-en-1-one.

将5g柚皮素溶于50ML的 N，N-二甲基甲酰胺（DMF）中，再加入3eq当量的碳酸钾K2CO3，系统冷却至0度，滴加二个当量的2eq烯丙基溴。逐渐升至室温后，反应24小时，滴加600ML的氯化钠水溶液，用醋酸乙酯萃取。水洗三次取有机相，浓缩，通过硅胶柱层析分离，石油醚：醋酸乙酯 =10:1 得混合物淡黄色2g 。用二氯甲烷重结晶得 0.6g 固体。熔点 MP=121-125度，薄层层析：Rf=0.7，石油醚：醋酸乙酯 = 2:1，Rf=0.7，质谱 M+H= 393.3。

核磁共振：¹H-NMR(400Mhz, DMSO-d6) δ4.654(4H, dd, J1=18.0Hz; J2=5.2Hz, allyloxy-OCH2-),δ5.301(2H,m,allyloxy-Hb),δ5.437(2H,t,J=16.4Hz,allyloxy-Hc),δ6.089(2H,m,allyloxy-Ha),δ6.126(1H,d,J=2.4Hz,H-3’’),δ6.183(1H,d,J=2.4Hz,H-5’’),δ6.830(2H,d,J=8.8Hz,H-3’,H-5’),δ7.528(2H, d, J=8.8Hz,,H-2’,H-6’), δ7.616 (1H, d, J=15.6Hz, H-2), δ7.683(1H, d, J=15.6Hz, H-3)。

¹³C-NMR(100Mhz,DMSO-d6):δ192.62(C-1),δ165.98(C-4’’),δ164.59(C-2’’),δ161.13(C-6’’),δ160.50(C-4’),δ143.48(C-3),δ133.46-133.39(allyloxy-C-b,c),δ130.97(C-2’,C-6’),δ126.29(C-1’),δ124.39(C-2),δ118.83-118.41(allyloxy-C-a),δ116.39(C-3’,C-5’),δ106.97(C-1’’),δ95.26(C-3’’),δ92.92(C-5’’), δ69.85-69.05(allyloxy-OCH₂-)。

实施例4 ：

1-（2，4，6-三羟基苯基）-3-(4-羟基苯基)丙烷-1-酮。

1-(2,4,6-trihydroxyphenyl)-3- (4-hydroxyphenyl)propan-1-one.

将1g 柚皮素（naringenin）溶于100ml乙醇中。加入催化剂10% Pd/C， 0.5g. 常压氢化20小时。过滤除去固体物，滤液浓缩，经硅胶柱层析分离纯化，石油醚：醋酸乙酯=1:1. 得淡红色固体0.19g，熔点MP=262-263度薄层层析：石油醚：醋酸乙酯=1:1，Rf=0.2，高分辨质谱HR-EIMS m/z 274.0834[M]+。

核磁共振：¹H-NMR(400Mhz,DMSO-d6): δ2.767(2H, t, J=7.2Hz), δ3.221(2H,t,J=7.2Hz),δ5.810(1H,s,H-6,H-8),δ6.661(2H,d,J=8.4Hz,H-3’,H-5’),δ7.015(1H,d,J=8.4Hz,H-2’,H-6’), δ9.097 (-4’OH), δ10.308(-7OH), δ12.208(-5OH, -9OH)。

¹³C-NMR(100Mhz,DMSO-d6):δ204.67(C-4),δ165.03(C-7),δ164.64(C-5,C-9),δ155.83(C-4’),δ132.08(C-1’),δ129.58(C-2’,C-6’),δ115.51(C-3’,C-5’),δ104.20(C-10), δ95.13,(C-8,C-6),δ45.87(C-3), δ29.89 (C-2)。

实施例5：

还原型柚皮苷 (Reduced form of naringin)

将1.6g 柚皮苷（naringin）溶于100ml甲醇中。加入催化剂10% Pd/C， 1g。常压氢化5小时。过滤除去固体物，滤液浓缩，二氯甲烷重结晶得淡黄色固体1.0g。熔点MP=155-158度，薄层层析：石油醚：醋酸乙酯=10:1， Rf=0.46，质谱ms：M-H=581.5， HPLC纯度=99%，产率 =63.5%。

核磁共振：¹H-NMR(400Mhz,DMSO-d6): δ1.180(3H,d=6.4Hz , H-),δ 2.788(2H, t=8Hz, H-), δ 3.248(4H,m,H-), δ3.455(3H, q), δ3.689(3H, m), δ4.432(1H, d, J=5.6Hz), δ4.536(1H,t), δ4.631(2H, q), δ5.070(3H, q), δ5.273(1H,d, J=5.6Hz), δ6.018(2H, s), δ6.670(2H, d, J=8.4Hz),δ7.030(2H, d, J=8.4Hz), δ9.117(1H, s), δ12.276(1H,s)。

¹³C-NMR(100Mhz,DMSO-d6):δ205.55,δ164.187,δ163.372, δ155.87, δ131.95, δ129.61, δ115.56, δ105.79, δ101.08,δ97.63, δ95.30, δ77.65, δ77.33, δ77.08, δ72.35,δ71.01, δ770.88, δ69.96, δ68.80, δ60.79, δ46.14,δ40.64,δ40.43, δ40.22, δ40.01, δ39.80, δ39.59, δ39.39,δ29.77, δ18.59。

二、本发明的实施例化合物单次给药对氨水引咳小鼠的镇咳药效实验

（一）材料

1、实验动物：雄性KM小鼠（购买自广东省动物中心，合格证号：SCXK（粤）2008-0002，NO.0113738）。

2、实验分组与药品处理：

空白对照组：含50%（v/v）PEG400的生理盐水。

阳性对照药磷酸可待因组：磷酸可待因由青海制药厂有限公司生产，批号：20091212。实验前取磷酸可待因粉末，加含50%（v/v）PEG400的生理盐水配成浓度为0.47 μmol/ml的溶液。

实施例化合物：实施例化合物粉末，分别用含50%（v/v）PEG400的生理盐水配成浓度为7.44 μmol/ml的溶液或混悬液。

3、试剂与仪器：

YLS-8A诱咳引喘仪（山东医学科学设备站产品）。

磷酸可待因（青海制药厂有限公司，批号：20091212），25%氨水（天津市广成化学试剂厂，批号：20110515），PEG400（天津市广成化学试剂厂，批号：20110308），0.9 %氯化钠注射液（广州科伦药业有限公司，批号D1201104-1）。灌胃针：广东省职业卫生检验中心实验动物中心定制。

（二）实验环境

中山大学实验动物房。

（三）实验方法

取合格雄性KM小鼠，按表1随机分为空白对照组，阳性对照药磷酸可待因组，实施例化合物组。

各组小鼠按0.2ml/10g体重灌胃或腹腔注射给药，给药1h后放入引咳箱中，往雾化杯中加入25%浓氨水1ml，雾化15s（雾化速率0.15ml/min），计数3min内的咳嗽数。（典型咳嗽为张嘴低头伴有脖子颤抖，常有前扑动作）。

数据统计与分析：所有数据经t检验法检验剔除异常数据后，由SPSS17.0进行统计分析，其中采用one-way ANOVA进行方差分析，采用Dunnett法进行各给药组与对应空白组间的多重比较。

（四）实验结果

经统计，各组动物雾化开始后3分钟内咳嗽次数见表1。

表1：各组化合物对氨水引咳小鼠的镇咳作用

与空白组比较 * P ＜ 0.05 ** P ＜ 0.01。

下面的制剂实施例说明包含由本发明提供的取代间苯三酚衍生物中实施例1的化合物的药用制剂。

制剂实施例1片剂：

制备方法：将实施例1的化合物、乳糖、玉米淀粉混合，用水均匀湿润，过筛并干燥，再过筛，加入硬脂酸镁，然后将混合物压片，每片重250毫克。

制剂实施例2胶囊剂：

实施例1的化合物 10毫克

乳糖 188毫克

硬脂酸镁 2毫克

制备方法：将实施例1的化合物、乳糖、硬脂酸镁混合，过筛，在合适的容器中均匀混合，然后将混合物装入硬明胶胶囊，每个胶囊重200毫克。

制剂实施例3安瓿剂：

实施例1的化合物 2毫克

氯化钠 9毫克

制备方法：将实施例1的化合物和氯化钠溶解于适量的注射用水中，过滤所得溶液，在无菌条件下装入安瓿瓶中。

制剂实施例4鼻喷雾剂：

制备方法：搅拌下于适当体积的重蒸馏水中每次加入一种成分，直至完全溶解，然后再加入另一种成分。加水至2毫升后，将该溶液在无菌过滤器上过滤，装入瓶中并按照适当的剂量分隔。

Claims

1.一种间苯三酚衍生物或其药学上可接受的盐在制备止咳药物制剂中的应用，所述衍生物是：

(1)1-(2，4，6-三羟基-3-丙基苯基)-3-4-羟基苯基丙烷1-酮，或

(2)(E)-1-(4-丙烯氧基)-2，6-二羟基苯基-3-(4-(丙烯氧基)苯基)丙烯-1-酮，或

(3)还原型柚皮苷中的一种。

2.如权利要求1所述的应用，其中的衍生物的制备方法为：

(1)1-(2，4，6-三羟基-3-丙基苯基)-3-4-羟基苯基)丙烷1-酮的制备方法包括以下步骤：将6-烯丙基柚皮素溶于乙醇中，加入催化量的催化剂10％Pd/C，常压氢化20小时；过滤除去固体物，滤液浓缩，用比例为2:1的石油醚：醋酸乙酯过硅胶柱层析分离纯化得目标产物；

(2)(E)-1-(4-丙烯氧基)-2，6-二羟基苯基-3-(4-(丙烯氧基)苯基)丙烯-1-酮的制备方法：将柚皮素溶于N，N-二甲基甲酰胺中，再加入3eq当量的碳酸钾K₂CO₃，系统冷却至0度，滴加二个当量的2eq烯丙基溴；逐渐升至室温后，反应24小时，滴加600ML的氯化钠水溶液，用醋酸乙酯萃取；水洗有机相，浓缩，用10:1石油醚：醋酸乙酯过硅胶柱层析分离纯化得目标产物；

(3)还原型柚皮苷的制备方法：将柚皮苷溶于甲醇中，加入催化量的催化剂10％Pd/C，常压氢化5小时，过滤除去固体物，滤液浓缩，用二氯甲烷重结晶得目标产物。

3.如权利要求1所述的应用，其特征在于：所述药物制剂的剂型为药学上可接受的剂型；所述的活性成分按质量比计占组合物药物制剂的0.1-95％。