CN101602786B

CN101602786B - N6-取代腺苷衍生物、其制法以及药物组合物与用途

Info

Publication number: CN101602786B
Application number: CN200810114594.3A
Authority: CN
Inventors: 张建军; 石建功; 李敏; 訾佳辰; 朱承根; 王亚芳; 杨永春; 徐瑞明; 樊晓娜
Original assignee: Institute of Materia Medica of CAMS
Current assignee: Institute of Materia Medica of CAMS
Priority date: 2008-06-10
Filing date: 2008-06-10
Publication date: 2014-04-30
Anticipated expiration: 2028-06-10
Also published as: CN101602786A

Abstract

本发明公开了N6-取代腺苷衍生物、其制法以及药物组合物与用途，具体涉及如通式(I)所示的一类N6-取代腺苷衍生物，这类化合物的两种制备方法，这类化合物的作为有效成分的药物组合物，及这类化合物在作为制备治疗镇静催眠、抗惊厥、抗癫痫、抗帕金森氏疾病和痴呆药物、保健品中的应用。

Description

N6-取代腺苷衍生物、其制法以及药物组合物与用途

技术领域

本发明涉及一类N6-取代腺苷衍生物，这类化合物的制备方法，含有这类化合物的药物组合物，及其作为制备治疗镇静催眠、抗惊厥、抗癫痫、抗帕金森氏疾病和痴呆药物、保健品中的应用，属于医药技术领域。

背景技术

N⁶-取代的嘌啉和腺苷类衍生物是具有重要生物活性的物质，部分结构以微量形式存在于天然植物中，作为植物细胞分裂素能够促进植物细胞的分裂和分化，具有促进种子的发芽、芽的分化、枝的形成，以及叶绿素和淀粉的产生等重要生物学功能，并且在植物生物工程技术研究中有比较广泛应用。最近的研究发现，组氨酸激酶类包括AHK2、AHK3和AHK4作为细胞分裂素的受体，在细胞分裂素信号传导通路中发挥及其重要作用。其中，对N⁶-异戊烯衍生物取代的嘌啉类衍生物的研究报道相对较多，而对N⁶-异戊烯衍生物取代的核苷类衍生物的研究报道较少。同时，由于在细胞分裂分化中的重要生理作用，该类成分在医药生物学及其药理活性的研究，主要集中在抗肿瘤和抗病毒方面，其他方面的报道很少，尚无镇静催眠作用的报道。Karel Dolezal；Igor Popa；EvaHauserova；Lukas Spichal；Kuheli Chakrabarty；Ondrej Novak；Vladimir Krystof；Jiri Voller；Jan Holub and Miroslav Strnad，Preparation，biological activity andendogenous occurrence of N⁶-benzyladenosines，Bioorganic & MedicinalChemistry，2007，15，3737-3747.(以及该文引用文献)。

在对中药天麻和手掌参活性成分研究的过程中，本申请的发明人通过活性跟踪的方法从天麻和手掌参提取物中同时分离得到了具有显著镇静催眠作用的N⁶-(4-羟基苄基)腺苷。尽管该成分最近有人也从天麻中分离得到，并且发现具有防止PC12细胞凋亡和与腺苷A_2A受体的结合作用，但是该化合物和类似成分在镇静催眠等中枢神经系统方面的作用，尚无报道。在此基础上，本申请的发明人进行了N⁶-(4-羟基苄基)腺苷的合成和衍生化修饰，并对它们的镇静催眠活性进行了进一步评价，确证了它们的镇静催眠作用。Nai-KueiHuang，Yijuang Chern，Jim-Min Fang，Chia-ILin，Wan-PingChen，and Yun-LianLin，NeuroprotectivePrinciplesfromGastrodiaelata，J.Nat.Prod.，2007，70，571-574。(以及该文引用文献)。

N⁶-(4-羟基苄基)腺苷[N⁶-(4-hydroxybenzyl)adenine riboside]。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一类N⁶-取代腺苷衍生物的制备方法及其作为治疗镇静催眠、抗惊厥、抗癫痫、抗帕金森氏疾病和痴呆药物、保健品的活性成分的用途。

具体而言，本发明涉及如通式(I)所示的N⁶-取代腺苷衍生物

其中，R选自取代或非取代的苯基、取代或非取代的含有1-2个杂原子的五元或六元杂环、C1-6烷基、C3-8环烷基；

苯基、五元杂环、六元杂环上的取代基选自：H、OH、C1-4烷基、C1-4烷氧基、NH₂、NO₂、卤素。

优选的，本发明所述N⁶-取代腺苷衍生物包括如下结构式的化合物：

其中，R₁～R₅各自独立的选自H、OH、C1-4烷基、C1-4烷氧基、NH₂、NO₂、Cl、Br或F。

更优选：R₁＝R₄＝R₅＝H，R₂＝R₃＝OH；

R₁＝R₄＝R₅＝H，R₂＝OMe，R₃＝OH；

R₁＝R₄＝R₅＝R₂＝H，R₃＝OH；

其中

R₁～R₄各自独立的选自H、OH、C1-4烷基、C1-4烷氧基、NH₂、NO₂、Cl、Br或 F。

更优选：R₃＝R₄＝H，R₁＝R₂＝OH；

R₃＝R₄＝H，R₁＝OMe，R₂＝OH；

R₁＝R₂＝R₃＝R₄＝H；

其中

R₁～R₄各自独立的选自H、OH、C1-4烷基、C1-4烷氧基、NH₂、NO₂、Cl、Br或F。

更优选：R₁＝R₄＝H，R₂＝R₃＝OH；

R₁＝R₄＝H，R₂＝OH，R₃＝Me；

R₁＝R₂＝R₃＝R₄＝H；

其中，R₁～R₄各自独立的选自H、OH、C1-4烷基、C1-4烷氧基、NH₂、NO₂、Cl、Br或F。

更优选：R₁＝R₄＝H，R₂＝R₃＝OH；

R₁＝R₄＝H，R₂＝OH，R₃＝Me；

R₁＝R₂＝R₃＝R₄＝H；

其中

X代表O、N和S，更优选：X＝O；X＝N；

本发明最优选的化合物选自：

N⁶-(3，4-二羟基苄基)-腺苷

N⁶-(3-甲氧基-4-羟基苄基)-腺苷

N⁶-(4-羟基苄基)-腺苷

N⁶-(苄基)-腺苷

N⁶-(吡啶-2-亚甲基)-腺苷

N⁶-(吡啶-3-亚甲基)-腺苷

N⁶-(异丁基)-腺苷

N⁶-(环己基)-腺苷

N⁶-(2-硝基苄基)-腺苷。

本发明还公开了本发明化合物的制备方法。

(1)用于制备本发明化合物的原料6-氯嘌呤核苷，可以根据文献(Davolland Blowy，J.Am.Chem.Soc.1957，73，2936)中的方法，通过次黄嘌啉(6-q羟基嘌啉)与三氯氧磷(POCl₃)反应合成得到；或直接从试剂公司购买(Sigma，Aldrich，Fluka等)。

(2)用于制备本发明化合物的原料之二醛也是可以通过商业购买的或更根据现有技术制备。各种醛包括取代或非取代的苯甲醛、取代或非取代的吡啶醛、烷基醛包括直链烷基醛、支链烷基醛以及环烷基醛。例如苯甲醛的衍生物包括单取代、双取代、三取代、四取代和五取代，取代基包括OH、OMe、NH₂、NO₂、Cl、Br和F。

所述化合物的基本合成方法有以下两种：

第一种方法包括如下步骤是：

第一步，苯甲醛衍生物与盐酸羟胺反应得到苯甲醛衍生物的肟。反应优选在醇作为溶剂、在无水乙酸钠存在和室温搅拌的条件下进行。反应完成后将反应液的溶剂蒸干，用水溶解后，用乙酸乙酯萃取，萃取物蒸去乙酸乙酯，得第一步反应物。

第二步，将上步得到的苯甲醛衍生物的肟氢化得苯甲胺衍生物的盐酸盐。氢化优选醇作为溶剂，优选的醇是乙醇。氢化条件优选是在Pd/C和浓盐酸存在的条件下常压氢化。

第三步，苯甲胺衍生物的盐酸盐和6-氯嘌呤核苷反应。反应优选在N，N-二异丙基乙胺存在下的条件下进行。反应的溶剂优选是醇，优选的醇是正丙醇。反应优选在加热的条件下进行，反应的温度70℃。反应的时间是5-11小时，优选是7-9小时，最优选是8小时。反应完成后反应液蒸干溶剂，经重结晶或色谱分离纯化目标产物。重结晶的溶剂优选是无水乙醇。色谱分离纯化的优选是硅胶柱，优选的洗脱液是氯仿∶甲醇＝15∶1-8∶1。

第二种方法的基本步骤是：

第一步，将苯并三氮唑、苯甲醛衍生物和腺苷反应制备第一步产物。反应的溶剂优选是无水醇。反应优选在催化量酸存在的条件下进行，优选的酸是冰醋酸。反应优选在加热的条件下进行，最优选的反应温度是溶剂回流的温度。反应的时间是10-18小时，优选是13-15小时，最优选是14小时。反应完成后，反应液蒸去溶剂，第一步产物可以经重结晶或色谱分离纯化。色谱分离的优选条件是使用硅胶柱，氯仿∶甲醇体积比30∶1-15∶1作为流动相。

第二步，将第一步得到的产物和NaBH₄反应制备目标产物。反应的溶剂优选是无水四氢呋喃。反应优选在加热的条件下进行，最优选的反应温度是溶剂回流的温度。反应的时间是5-11小时，优选是7-9小时，最优选是8小时。反应完成后反应液冷却至室温后，倒入冰水混合物中，用酸中和，再用氯仿萃取。取氯仿层回收溶剂后，经重结晶或色谱分离纯化目标产物。色谱分离的优选条件是使用硅胶柱，氯仿∶甲醇体积比30∶1-15∶1作为流动相。

本发明的另一目的是提供了含有所述N⁶-取代的嘌啉和腺苷类衍生物的药物组合物及其制备方法，该组合物含有治疗有效量的本发明的N⁶-取代的嘌啉和腺苷类衍生物，以及任选的含有药用载体。其中所述的药用载体的药学领域常用的药用载体；所述组合物的制备方法是药学领域常规的药物制备方法。

本发明的药物组合物中还可以含有其它的药物化合物，制成复合制剂。

利用本发明方法得到的N⁶-取代的嘌啉和腺苷类衍生物可以与药物上可接受的载体和/或其他药物提取物或药用单体化合物一起制成药物制剂，其中所述的药物制剂是药学领域常用的剂型，例如注射剂或口服制剂，所述的注射剂例如是溶液、悬浮液、乳液或冻干粉针制剂等，所述的口服制剂例如是片剂、胶囊、口服液或滴丸等。利用本发明的N⁶-取代的嘌啉和腺苷类衍生物制备所述各种剂型时，可以按照药学领域的常规生产方法制备。应用本发明的N⁶-取代的嘌啉和腺苷类衍生物制备各种制剂时，其中的有效成分可以得到有效地控制，获得质量均一的药品。

本发明进行了大量的药物实验，证明了本发明的N⁶-取代的嘌啉和腺苷类衍生物具有镇静催眠、抗惊厥、抗癫痫、抗帕金森氏疾病和防治痴呆的作用，对镇静催眠、抗惊厥、抗癫痫、抗帕金森氏疾病和防治痴呆，具有良好的治疗作用，并可用作或加入保健品，有利于改善身体状况，提高免疫力。

因此，本发明还提供了本发明N⁶-取代的嘌啉和腺苷类衍生物在制药和保健品领域中的应用，特别是本发明N⁶-取代的嘌啉和腺苷类衍生物在制备用于镇静催眠、抗惊厥、抗癫痫、抗帕金森氏疾病和防治痴呆的药物中的应用，本发明的N⁶-取代的嘌啉和腺苷类衍生物可用于制备治疗镇静催眠、抗惊厥、抗癫痫、抗帕金森氏疾病和防治痴呆疾病，特别是镇静催眠、抗惊厥、抗癫痫抗帕金森氏疾病和防治痴呆疾病的药物和保健品。

在将本发明的N⁶-取代的嘌啉和腺苷类衍生物或本发明的组合物用于治疗上述疾病时，其用药量可参照使用N⁶-取代的嘌啉和腺苷类衍生物进行治疗时的用量；在将本发明的N⁶-取代的嘌啉和腺苷类衍生物或本发明的组合物用作保健品，或将其加入保健品时，其用量应少于通常的治疗量。

具体实施方式

下面的实施例可进一步说明本发明，但不以任何方式限制本发明。

实施例1：N⁶-(3，4-二羟基苄基)-腺苷的制备

第一步，称取2.76g 3，4-二羟基苯甲醛，2.52g盐酸羟胺，3.26g无水乙酸钠，溶于80ml乙醇中。室温下，搅拌反应6小时。蒸干溶剂，用40ml水溶解，乙酸乙酯萃取(40×3ml)，蒸去乙酸乙酯，得淡黄色固体(3，4-二羟基苯甲醛肟)2.72g。

第二步，2.72g 3，4-二羟基苯甲醛肟溶于70ml乙醇中，加700mg 10％Pd/C，8ml浓盐酸，常压氢化，得白色晶体(3，4-二羟基苯甲胺盐酸盐)2.98g。

第三步，将2.98g 3，4-二羟基苯甲胺盐酸盐溶于70ml正丙醇中，加1g 6-氯嘌呤核苷和14ml N，N-二异丙基乙胺，加热至70℃，反应8小时。蒸干溶剂，经硅胶柱色谱分离，用氯仿∶甲醇＝15∶1-8∶1洗脱，得本标题化合物，为无色结晶0.95g。

正离子ESIMS m/z 390[M+H]⁺；负离子ESIMS m/z 388[M-H]^-和 424[M+Cl]^-。¹H NMR(300MHz，DMSO)：8.71(2H，brs)，8.35(1H，s)，8.27(1H，brs)，8.19(1H，s)，6.72(1H，brs)，6.61(1H，d，7.8 Hz)，6.57(1H，brd，7.8Hz)，5.87(1H，d，5，1Hz)，5.40(3H，m)，4.61(1H，m)，4.53(2H，m)，4.13(1H，m)，3.95(1H，m)，3.66(1H，m)，3.54(1H，m)。

实施例2：N⁶-(3-甲氧基-4-羟基苄基)-腺苷的制备

第一步，称取3.04g 3-甲氧基-4-羟基苯甲醛，2.52g盐酸羟胺，3.26g无水乙酸钠，溶于80ml乙醇中。室温下，搅拌反应6小时。蒸干溶剂，用40ml水溶解，乙酸乙酯萃取(40×3ml)，蒸去乙酸乙酯，得淡黄色固体(3-甲氧基-4-羟基苯甲醛肟)2.99g。

第二步，2.99g 3-甲氧基-4-羟基苯甲醛肟溶于70ml乙醇中，加700mg 10％Pd/C，8ml浓盐酸，常压氢化，得白色晶体(3-甲氧基-4-羟基苯甲胺盐酸盐)3.31g。

第三步，将3.31g 3-甲氧基-4-羟基苯甲胺盐酸盐溶于70ml正丙醇中，加1g 6-氯嘌呤核苷和14ml N，N-二异丙基乙胺，加热至70℃，反应8小时。蒸干溶剂，经硅胶柱色谱分离，用氯仿∶甲醇＝15∶1洗脱，得本标题化合物，为无色结晶1.02g。

正离子ESIMS m/z 404[M+H]⁺；负离子ESIMS m/z 402[M-H]^-和438[M+Cl]^-。¹H NMR(300MHz，DMSO)：8.78(1H，s)，8.35(1H，s)，8.29(1H，brs)，8.20(1H，brs)，6.96(1H，brs)，6.72(1H，brd，7.8Hz)，6.66(1H，d，7.8Hz)，5.87(1H，d，6.3Hz)，5.37-5.44(2H，m)，5.18(1H，4.5Hz)，4.60(2H，m)，4.11(2H，m)，3.95(1H，m)，3.71(3H，s)，3.66(1H，m)，3.54(1H，m)。

实施例3：N⁶-(4-羟基苄基)-腺苷的制备

第一步，称取2.55g 4-羟基苯甲醛，2.60g盐酸羟胺，3.40g无水乙酸钠，溶于80ml乙醇中。室温下，搅拌反应6小时。蒸干溶剂，用40ml水溶解，乙酸乙酯萃取(40×3ml)，蒸去乙酸乙酯，得淡黄色固体(4-羟基苯甲醛肟)2.66g。

第二步，2.66g 4-羟基苯甲醛肟溶于70ml乙醇中，加300mg 10％Pd/C，8ml浓盐酸，常压氢化，得白色晶体(4-羟基苯甲胺盐酸盐)3.02g。

第三步，将3.02g 4-羟基苯甲胺盐酸盐溶于70ml正丙醇中，加1g 6-氯嘌呤核苷和14ml N，N-二异丙基乙胺，加热至70℃，反应8小时。蒸干溶剂，无水乙醇重结晶，得本标题化合物，为无色结晶1.07g。

正离子ESIMS m/z 374[M+H]⁺、396[M+Na]⁺和412[M+K]⁺；负离子ESIMS m/z 372[M-H]^-和408[M+Cl]^-。¹H NMR(400MHz，CD₃OD)：8.19(2H，s)，7.16(2H，d，8.4Hz)，6.68(2H，d，8.4Hz)，5.89(1H，d，6.4Hz)，4.69(1H，dd，6.4，5.2Hz)，4.64(2H，brs)，4.26(1H，dd，5.2，2.4Hz)，4.11(1H，q，2.4Hz)，3.83(1H，dd，12.8，2.4Hz)，3.68(1H，dd，12.8，2.4Hz)。¹³C NMR(100MHz，CD₃OD)：156.1，156.0，154.4，152.3，148.4，139.8，130.1，128.5，119.7，114.8，87.9，85.8，73.3，70.6，61.6，42.3。

实施例4：N⁶-(苄基)-腺苷的制备

第一步，称取1.08g苯甲醛，1.29g盐酸羟胺，1.67g无水乙酸钠，溶于40ml乙醇中。室温下，搅拌反应6小时。蒸干溶剂，用20ml水溶解，乙酸乙酯萃取(20×3ml)，蒸去乙酸乙酯，得淡黄色固体(苯甲醛肟)1.13g。

第二步，1.13g苯甲醛肟溶于40ml乙醇中，加85mg 10％Pd/C，1ml浓盐酸，常压氢化，得白色晶体(苯甲胺盐酸盐)1.29g。

第三步，将355mg苯甲胺盐酸盐溶于40ml正丙醇中，加143mg 6-氯嘌呤核苷和2ml N，N-二异丙基乙胺，加热至70℃，反应8小时。蒸干溶剂，经硅胶柱色谱分离，用氯仿∶甲醇＝30∶1洗脱，得本标题化合物，为无色固体151mg。

正离子ESIMS m/z 358[M+H]⁺；负离子ESIMS m/z 356[M-H]^-和392[M+Cl]^-。¹H NMR(300MHz，CD₃OD)：8.20(1H，s)，8.18(1H，brs)，7.14-7.34(5H，m)，5.90(1H，d，6.6Hz)，4.77(2H，brs)，4.69(1H，dd，6.3，5.4Hz)，4.26(1H，dd，5.4，2.4Hz)，4.11(1H，q，2.4Hz)，3.83(1H，dd，12.6，2.4Hz)，3.68(1H，dd，12.6，2.4Hz)。

实施例5：N⁶-(吡啶-2-亚甲基)-腺苷的制备

第一步，称取1.09g 2-吡啶甲醛，1.29g盐酸羟胺，1.67g无水乙酸钠，溶于40ml乙醇中。室温下，搅拌反应6小时。蒸干溶剂，用20ml水溶解，乙酸乙酯萃取(20×3ml)，蒸去乙酸乙酯，得淡黄色固体(2-吡啶甲醛肟)1.08g。

第二步，1.08g 2-吡啶甲醛肟溶于40ml乙醇中，加85mg 10％Pd/C，1ml浓盐酸，常压氢化，得白色晶体(2-吡啶甲胺盐酸盐)1.19g。

第三步，将357mg 2-吡啶甲胺盐酸盐溶于40ml正丙醇中，加143mg 6-氯嘌呤核苷和2mlN，N-二异丙基乙胺，加热至70℃，反应8小时。蒸干溶剂，经硅胶柱色谱分离，用氯仿∶甲醇＝30∶1-15∶1洗脱，得本标题化合物，为无色固体119mg。

正离子ESIMS m/z 358[M+H]⁺。¹H NMR(300MHz，CD₃OD)：8.56(1H，m)，8.39(1H，m)，8.22(1H，s)，8.19(1H，s)，7.89(1H，brd，7.8Hz)，7.39(1H，dd，7.8，5.1Hz)，5.90(1H，d，6.3Hz)，4.80(2H，brs)，4.69(1H，dd，6.3，5.4Hz)，4.27(1H，dd，5.4，2.4Hz)，4.1 1(1H，q，2.4Hz)，3.83(1H，dd，12.6，2.4Hz)，3.68(1H，dd，12.6，2.4Hz)。

实施例6：N⁶-(吡啶-3-亚甲基)-腺苷的制备

第一步，称取1.09g 3-吡啶甲醛，1.29g盐酸羟胺，1.67g无水乙酸钠，溶于40ml乙醇中。室温下，搅拌反应6小时。蒸干溶剂，用20ml水溶解，乙酸乙酯萃取(20×3ml)，蒸去乙酸乙酯，得淡黄色固体(3-吡啶甲醛肟)1.03g。

第二步，1.03g 3-吡啶甲醛肟溶于40ml乙醇中，加85mg 10％Pd/C，1ml浓盐酸，常压氢化，得白色晶体(3-吡啶甲胺盐酸盐)1.16g。

第三步，将357mg 3-吡啶甲胺盐酸盐溶于40ml正丙醇中，加143mg 6-氯嘌呤核苷和2ml N，N-二异丙基乙胺，加热至70℃，反应8小时。蒸干溶剂，经硅胶柱色谱分离，用氯仿∶甲醇＝30∶1-15∶1洗脱，得本标题化合物，为无色固体114mg。

正离子ESIMS m/z 358[M+H]⁺。¹H NMR(300MHz，CD₃OD)：8.45(1H，m)，8.24(1H，brs)，8.17(1H，s)，7.74(1H，td，7.8，1.8Hz)，7.38(1H，brd，7.8Hz)，7.26(！H，m)，5.92(1H，d，6.6Hz)，4.88(2H，brs)，4.69(1H，dd，6.3，5.4Hz)，4.27(1H，dd，5.4，2.4Hz)，4.11(1H，q，2.4Hz)，3.83(1H，dd，12.3，2.4Hz)，3.68(1H，dd，12.3，2.4Hz)。

实施例7：N⁶-(异丁基)-腺苷的制备

第一步，称取苯并三氮唑148mg，异丁醛108mg，腺苷251mg置于100ml三颈瓶中，加40ml无水乙醇和催化量冰醋酸，接加液漏斗(内装4

分子筛)，接冷凝管，加热至90℃回流，反应14h。期间，每30min补加异丁醛1ml。蒸去溶剂得粘稠液体，经硅胶柱色谱分离，用氯仿∶甲醇＝30∶1-15∶1洗脱，得白色固体368mg，产率85％。

第二步，将368mg第一步产物置于100ml三颈瓶中，加191mg NaBH₄，加60ml无水四氢呋喃，加热至80℃回流，反应8h。待反应液冷却至室温，倒入冰水混合物中，用乙酸中和，用氯仿萃取。取氯仿层，经硅胶柱色谱分离，用氯仿∶甲醇＝30∶1-15∶1洗脱，得本标题化合物，为白色固体36mg，产率13.3％。

正离子ESIMS m/z 324[M+H]⁺；负离子ESIMS m/z 322[M-H]^-和358[M+Cl]^-。¹H NMR(300MHz，DMSO)：8.33(1H，s)，8.18(1H，brs)，7.92(1H，brs)，5.86(1H，d，6.3 Hz)，5.42(2H，d，5.1Hz)，5.17(1H，m)，4.61(1H，m)，4.13(1H，m)，3.95(1H，m)，3.68(1H，m)，3.55(1H，m)，3.29(2H，m)，1.95(1H，m)，0.87(6H，d，6.6Hz)。

实施例8：N⁶-(环己基-亚甲基-)-腺苷的制备

第一步，称取苯并三氮唑148mg，环己基甲醛168mg，腺苷251mg置于100ml三颈瓶中，加40ml无水乙醇和催化量冰醋酸，接加液漏斗(内装4 分子筛)，接冷凝管，加热至90℃回流，反应14h。蒸去溶剂得粘稠液体，经硅胶柱色谱分离，用氯仿∶甲醇＝30∶1-15∶1洗脱，得白色固体219mg，产率48.5％

第二步，将152mg第一步产物置于100ml三颈瓶中，加73mg NaBH₄，加60ml无水四氢呋喃，加热至90℃回流，反应8h。待反应液冷却至室温，倒入冰水混合物中，用乙酸中和，用氯仿萃取。取氯仿层，经硅胶柱色谱分离，用氯仿∶甲醇＝30∶1-15∶1洗脱，得白色固体65mg，产率58.3％。

正离子ESIMS m/z 364[M+H]⁺；负离子ESIMS m/z 362[M-H]^-和398[M+Cl]^-。¹H NMR(300MHz，DMSO)：8.32(1H，s)，8.18(1H，brs)，7.88(1H，brs)，5.86(1H，d，6.3Hz)，5.42(2H，d，6.0Hz)，5.17(1H，d，5.1Hz)，4.61(1H，m)，4.13(1H，m)，3.95(1H，m)，3.66(1H，m)，3.51(1H，m)，3.32(2H，m)，0.89-1.71(11H，m)。

实施例9：N⁶-(2-硝基苄基)-腺苷的制备

第一步，称取苯并三氮唑148mg，2-硝基苯甲醛226mg，腺苷251mg置于100ml三颈瓶中，加40ml无水乙醇和催化量冰醋酸，接加液漏斗(内装4

分子筛)，接冷凝管，加热至90℃回流，反应14h。蒸去溶剂得粘稠液体，经硅胶柱色谱分离，用氯仿∶甲醇＝30∶1-15∶1洗脱，得白色固体133mg，产率27.3％。

第二步，将105mg第一步产物置于100ml三颈瓶中，加46mg NaBH₄，加60ml无水四氢呋喃，加热至90℃回流，反应8h。待反应液冷却至室温，倒入冰水混合物中，用乙酸中和，用氯仿萃取。取氯仿层，经硅胶柱色谱分离，用氯仿∶甲醇＝30∶1-15∶1洗脱，得白色固体22 mg，产率27.1％。

正离子ESIMS m/z 403[M+H]⁺。¹H NMR(300MHz，DMSO)：8.52(2H，brs)，8.43(1H，brs)，8.16(1H，s)，8.04(1H，dd，8.1，1.2Hz)，7.66(1H，td，8.1，1.2Hz)，7.46-7.54(2H，m)，6.57(1H，brd，7.8Hz)，5.89(1H，d，5，7Hz)，5.44(1H，d，6.0Hz)，5.32(1H，t，6.0Hz)，5.19(1H，d，5.1Hz)，4.98(1H，m)，4.62(1H，m)，4.06-4.15(2H，m)，3.96(1H，m)，3.68(1H，m)，3.55(1H，m)。

药理实验

实施例1：N⁶-取代的嘌啉和腺苷类衍生腹腔给药对小鼠自主活动的影响

雄性昆明种小鼠，18～20g，随机分组，对照组腹腔注射生理盐水0.1mg/kg，其余各组腹腔注射给受试物；观察并记录5 min内各组小鼠自主活动的次数。结果见表1。

表1腹腔给药对小鼠自主活动的影响(n＝7-10，x±SE)

与对照组比较，^*p＜0.05，^**p＜0.01，^***p＜0.005，t-test。

实施例2：N⁶-取代的嘌啉和腺苷类衍生灌胃给药灌胃对小鼠自主活动的影响

雄性昆明种小鼠，18～20g，随机分组，对照组灌胃生理盐水0.1mg/kg，

其余各组灌胃给受试物；观察并记录15min内各组小鼠自主活动的次数。

结果见表2.

表2灌胃对小鼠自主活动的影响(n＝7-12，x±SE)

与对照组比较，^*p＜0.05，t-test.

实施例3：N⁶-取代的嘌啉和腺苷类衍生物腹腔给药协同戊巴比妥钠诱导小鼠入睡试验

雄性昆明种小鼠，18～20g，随机分组，对照组腹腔注射生理盐水0.1mg/kg，其余各组腹腔注射给受试物；给药后30min，各组腹腔注射戊巴比妥钠睡眠最大阈下剂量23mg/kg，观察并记录15min内各组小鼠入睡只数。

结果见表3。

表3腹腔给药协同戊巴比妥钠诱导小鼠入睡试验(n＝7-12，x±SE)

与对照组比较，^**p＜0.01，^***p＜0.005。

实施例4：N⁶-取代的嘌啉和腺苷类衍生物口服给药协同戊巴比妥钠诱导小鼠入睡试验

雄性昆明种小鼠，18～20g，随机分组，对照组灌胃给生理盐水0.1mg/kg，

其余各组灌胃给受试物；给药后30min，各组腹腔注射戊巴比妥钠睡眠最大阈

下剂量23mg/kg，观察并记录15min内各组小鼠入睡只数。

结果见表4。

表4口服给药协同戊巴比妥钠诱导小鼠入睡试验(n＝7-10，x±SE)

与对照组比较，^**p＜0.01。

实施例5：N⁶-取代的嘌啉和腺苷类衍生物口服或腹腔给药对戊巴比妥钠诱导的小鼠睡眠时间的影响

雄性昆明种小鼠，18～20g，随机分组。对照组灌胃给生理盐水0.1mg/kg，其余各组灌胃或腹腔注射给受试物；给药后30 min，各组腹腔注射戊巴比妥钠阈上睡眠剂量39mg/kg，观察并记录各组小鼠入睡潜伏期和睡眠持续时间。

结果见表5。

表5药物对戊巴比妥钠诱导的小鼠睡眠时间的影响(x±SE)

N＝8.与对照组比较，^*p＜0.05 ^**p＜0.01。

Claims

1.如通式(I)所示的N⁶-取代腺苷衍生物在制备治疗镇静催眠、抗惊厥、抗癫痫疾病的产品中的应用；

其中，R选自取代的苯基；

苯基上的取代基选自：OH、C1-4烷基、C1-4烷氧基、NH₂、NO₂。

2.根据权利要求1的应用，其特征在于，所述的化合物选自

N⁶-(3，4-二羟基苄基)-腺苷

N⁶-(3-甲氧基-4-羟基苄基)-腺苷

N⁶-(4-羟基苄基)-腺苷

N⁶-(2-硝基苄基)-腺苷。