CN102919174A

CN102919174A - 鲤鲫杂交鱼的选育方法及其远缘杂交品系的建立方法

Info

Publication number: CN102919174A
Application number: CN2012104495856A
Authority: CN
Inventors: 刘少军; 肖军; 谢翔; 陶敏; 张纯; 罗凯坤; 刘筠
Original assignee: Hunan Normal University
Current assignee: Hunan Normal University
Priority date: 2012-11-12
Filing date: 2012-11-12
Publication date: 2013-02-13
Anticipated expiration: 2032-11-12
Also published as: CN102919174B

Abstract

本发明公开了一种鲤鲫杂交鱼的选育方法，包括以下步骤：首先，以锦鲤为母本亲鱼，以红鲫为父本亲鱼，对父、母本亲鱼先进行人工催产，再进行人工干法授精，将受精卵置于培养皿中进行流水孵化，再对孵化出的鱼苗进行饲养、检测，进而选育出雌性或雄性可育的鲤鲫杂交F₁代个体。本发明还公开了一种鲤鲫杂交鱼远缘杂交品系的建立方法，将前述选育方法获得的鲤鲫杂交F₁代中的雄性杂交鱼和雌性杂交鱼进行自交，培育得到鲤鲫杂交F₂代。本发明不仅为优良品种的选育奠定了良好基础，而且为后续的新型多倍体鱼的选育提供了宝贵的资源，对今后的遗传育种及生物进化学的研究具有重要意义。

Description

鲤鲫杂交鱼的选育方法及其远缘杂交品系的建立方法

技术领域

本发明涉及一种鱼类的远缘杂交方法，尤其涉及一种以鲤鱼为母本、鲫鱼为父本的远缘杂交方法。

背景技术

杂交技术是改良鱼类性状常用的方法，亲缘关系在种间或种间以上的杂交一般称为远缘杂交。远缘杂交作为一种重要的鱼类遗传育种和性状改良方法，它可以整合整套外源基因，从而改变杂交后代基因的表达调控，使得杂交后代可能在生长速度、抗逆性、抗病性以及肉质等方面表现出杂种优势。如红鲫与湘江野鲤的属间远缘杂交形成的杂交后代具有生长速度快、肉质鲜嫩、抗病力强、存活率高等优点。现今一般的观点认为鲫鱼和鲤鱼间杂交一代是完全不育的，如何利用和改进现有的生物学技术和方法来对现有的自然鱼种进行遗传改良以获得性状更为优良、品种更加丰富和对遗传研究更有意义的新型多倍体鱼，就成为本领域技术人员长期面临和需要解决的问题。

发明内容

本发明要解决的技术问题是克服现有技术的不足，提供一种所获杂交鱼品种优良的鲤鲫杂交鱼的选育方法，还提供一种所获杂交鱼品种优良的鲤鲫杂交鱼远缘杂交品系建立的方法。

为解决上述技术问题，本发明提出的技术方案为一种鲤鲫杂交鱼的选育方法，包括以下步骤：首先，以锦鲤为母本亲鱼，以红鲫为父本亲鱼，对所述父、母本亲鱼先进行人工催产，再进行人工干法授精，将受精卵置于培养皿中进行流水孵化，再对孵化出的鱼苗进行饲养、检测，进而选育出雌性或雄性可育的鲤鲫杂交F₁代个体。

上述鲤鲫杂交鱼的选育方法中，所述母本亲鱼选取两龄以上、无病态、发育良好、性成熟特征明显的锦鲤，所述父本亲鱼选取两龄以上、无病态、发育良好、性成熟特征明显的红鲫；所述父、母本亲鱼在进行人工催产前，先放入亲鱼池内人工精养3～4个月。

上述鲤鲫杂交鱼的选育方法中，所述人工催产的具体操作步骤优选包括：在4月初至5月下旬，水温维持在20℃～26℃，对母本亲鱼先注射绒毛膜促性腺激素（HCG）与黄体素释放激素类似物（LRH-A）的混合液催产，其中绒毛膜促性腺激素的用量为600IU/kg～800IU/kg，黄体素释放激素类似物的用量为10ug/kg～20ug/kg；再对父本亲鱼注射绒毛膜促性腺激素与黄体素释放激素类似物的混合液，相比母本亲鱼，其注射剂量减半；然后按1∶（5～10）的数量比将注射后的母本亲鱼、父本亲鱼放入同一产卵池（水面面积为80 m²左右）中，然后向产卵池中冲水（视水情及时向池中冲水，尤其在产卵前3h～4h），注入一定水量后停止冲水并让父、母本亲鱼在静水中催产，直至其开始顺利产卵和产精。

上述的鲤鲫杂交鱼的选育方法中，所述检测过程包括利用流式细胞测定DNA含量以及利用肾细胞染色体制备工艺检测饲养后鲤鲫杂交鱼的染色体倍性。

上述本发明的技术方案中，锦鲤与红鲫的属间远缘杂交形成的杂交后代F₁除具有生长速度快、肉质鲜嫩、抗病力强、存活率高等优点外，体背还明显增高，头部颜色金灰相间，鳞片外缘呈金黄色，背部呈整齐的金黄色，是一种外形优美、体色独特、具有良好观赏价值及应用前景的杂交鱼。更重要的是，传统观点认为鲫鱼和鲤鱼间杂交一代是完全不育的，但通过采用本发明的上述选育方法，我们在杂交F₁代的雌性和雄性群体中稳定地获得了可育的个体，并且通过后续的研究发现，前述杂交F₁代的可育个体经过自交可稳定制备鲤鲫杂交二倍体F₂代，这为后续异源四倍体鱼的培育奠定了坚实的基础。

作为一个总的技术构思，本发明还提供一种鲤鲫杂交鱼远缘杂交品系的建立方法，将上述选育方法获得的鲤鲫杂交F₁代中的雄性杂交鱼和雌性杂交鱼进行自交，培育得到鲤鲫杂交F₂代。通过鲤鲫杂交F₁自交可以稳定获得鲤鲫杂交F₂代，经过我们的检测研究发现，鲤鲫杂交F₂代同样两性可育。通过对F₂进行自交，有望在其后代F₃中发现两性可育并可稳定遗传的四倍体，利用异源四倍体鲫鲤与二倍体杂交，则有望制备具有生长速度快、抗逆性强、不育的三倍体鲫（鲤）鱼，可见，鲤鲫杂交鱼远缘杂交品系的建立将具有明显的经济效益和社会效益。

上述的鲤鲫杂交鱼远缘杂交品系的建立方法，所述自交的具体方法为：将两龄以上的所述雄性杂交鱼和雌性杂交鱼放入亲鱼池内，先进行人工催产，再进行人工干法授精和流水孵化，最后进行饲养，直至鱼苗长成后经检测获得鲤鲫杂交F₂代二倍体鱼。

上述的鲤鲫杂交鱼远缘杂交品系的建立方法中，所述杂交鱼的人工催产过程优选包括：当繁殖季节水温稳定在20℃～26℃时，选择腹部膨大、轻压腹部能挤出墨绿色卵子的雌性杂交鱼个体作为母本亲鱼，选择挤出水样精液的雄性杂交鱼个体，利用普通光学显微镜对精液进行镜检，选择精液中有活精子的雄性杂交鱼个体作为父本亲鱼，然后先对母本注射黄体素释放激素类似物（LRH-A）、绒毛膜促性腺激素（HCG）及地欧酮（DOM）的混合催产剂进行催产，所述黄体素释放激素类似物的用量为10ug/kg～15ug/kg，所述绒毛膜促性腺激素的用量为500IU/kg～1000IU/kg，所述地欧酮的用量为1mg/kg；母本亲鱼注射完成后4h～5h再注射父本亲鱼，父本亲鱼的黄体素释放激素类似物和绒毛膜促性腺激素的注射剂量相比母本亲鱼减半，且父本亲鱼不注射地欧酮；注射完毕后按1∶（5～10）的数量比将母、父本亲鱼放入同一（水面面积为80 m²左右，水深为1m左右）产卵池中，然后在产卵前3h～4h（据水情及时）向池中冲水，此后停止注水，让鱼在静水中催产，直至其开始顺利产卵和产精。

上述的鲤鲫杂交鱼远缘杂交品系的建立方法，在所述自交的人工干法授精过程中，选取不带粘稠物质、游离自如的卵子进行干法人工授精。将获得的受精卵进行孵化，待鱼苗全部孵出后，继续在玻璃培养皿中培育2天，再将鱼苗放入网箱中继续饲养，其中清水的高度从30cm高逐渐提升，在一周内升高到0.8m～1.2m，当鱼苗长到3cm～4cm长时，转入池塘中饲养；1～2天后泼洒豆浆，2～3次/天，力求细、匀，直至鱼苗长成后经检测获得鲤鲫杂交F₂代二倍体鱼。所述自交的检测过程优选包括利用流式细胞测定DNA含量以及利用肾细胞染色体制备工艺检测饲养后鲤鲫杂交鱼的染色体倍性。

本发明的上述技术方案中，锦鲤(Colorcarp)在生物学上属于鲤形目、鲤科、鲤属(Cyprinus)、鲤(Cyprinus carpio Linnaeus)，是人们对自然鱼种进行杂交选育而形成的一种典型的观赏性鱼，锦鲤具有体格健美、色彩艳丽、花纹美丽、泳姿优美等优点，有“水中活宝石”和“会游泳的艺术品”之称。红鲫同样隶属于鲤科（Cyprinidae）、鲫属（Carassius）、鲫种（Carassius auratus）中的二倍体鱼（2n=100），其体形优美，抗逆性强，肉质细嫩。本发明通过属间的远源杂交，整合了父母本花纹美丽、体型健美、抗逆性强等优点；其次，本发明也克服了远源杂交不能成活或者成活率低的问题；在同等养殖条件下，本发明方法培育的鲤鲫F₁具有高受精率和高孵化率，鲤鲫体色独特，鲤鲫的头部颜色金灰相间，鳞片外缘呈金黄色，背部呈整齐的金黄色，具有良好的观赏价值及应用前景。

已有的研究表明，利用红鲫（2n=100）为母本及湘江野鲤（2n = 100）为父本产生的远缘杂交后代中，F₁－F₂为二倍体（2n=100），而在二倍体F₂个体中，存在能分别产生二倍体卵子和二倍体精子的雌、雄个体，二倍体卵子和二倍体精子结合，形成了两性可育的四倍体鱼（F₃）。目前四倍体鲫鲤已连续繁殖了20代（F₃－F₂₂），形成了一个遗传性状稳定的四倍体鱼群体（4n = 200）。而本发明中利用锦鲤和红鲫进行属间远缘杂交，获得的鲤鲫F₁两性可育，通过进一步的自交，已成功选育出鲤鲫F₂群体，形成了鲤鲫杂交鱼品系，这为选育异源四倍体鱼品系奠定了坚实的基础。通过继续在锦鲤（2n=100）和红鲫（2n=100）的杂交后代中进行多代选育，也有望获得两种新型四倍体资源——四倍体鲤鲫。因此，二倍体鲤鲫的培育，不仅为优良品种的选育奠定了良好基础，而且为后续的新型多倍体鱼的选育提供了宝贵的资源，对今后的遗传育种及生物进化学的研究具有重要意义。

附图说明

图1为本发明中锦鲤（♀）×红鲫（♂）F₁后代的外形照片。

图2为本发明中锦鲤（♀）×红鲫（♂）F₁的DNA含量图。

图3为本发明中锦鲤（♀）×红鲫（♂）F₁后代的染色体（2n=100）。

图4为本发明中锦鲤（♀）×红鲫（♂）F₁的精巢性腺切片。

图5为本发明中锦鲤（♀）×红鲫（♂）F₁的卵巢性腺切片。

图6为本发明中锦鲤（♀）×红鲫（♂）F₂后代的外形照片。

图7为本发明中锦鲤（♀）×红鲫（♂）F₂的DNA含量图。

图8为本发明中锦鲤（♀）×红鲫（♂）F₂后代的染色体（2n=100）。

具体实施方式

以下结合说明书附图和具体优选的实施例对本发明作进一步描述，但并不因此而限制本发明的保护范围。

实施例：

一种鲤鲫杂交鱼远缘杂交品系的建立方法，包括：首先，以锦鲤为母本亲鱼，以红鲫为父本亲鱼，对父、母本亲鱼先进行人工催产，再进行人工干法授精，将受精卵置于培养皿中进行流水孵化，再对孵化出的鱼苗进行饲养、检测，进而选育出鲤鲫杂交F₁代；将选育获得的鲤鲫杂交F₁代中的雄性杂交鱼和雌性杂交鱼进行自交，培育得到鲤鲫杂交F₂代。

本实施例的上述鲤鲫杂交鱼远缘杂交品系的建立方法具体包括以下两大步骤：

1. 鲤鲫F₁代的获得。

1.1父母亲本的选择和培养：选取两龄以上、无病态、发育良好、性成熟特征明显的雌性锦鲤作为母本亲鱼，再选择两龄以上、无病态、发育良好、性成熟特征明显的雄性红鲫作为父本亲鱼，将父、母本亲鱼放入亲鱼池内，人工精养3～4个月。

1.2人工催产：在4月初至5月下旬，水温维持在20℃～26℃时，将亲鱼池内两龄以上的雌性亲鱼注射绒毛膜促性腺激素（HCG）与黄体素释放激素类似物（LRH-A）的混合液催产，其中绒毛膜促性腺激素的用量为600IU/kg～800IU/kg、黄体素释放激素类似物的用量为10ug/kg～20ug/kg。再选择雄性亲鱼，对其注射绒毛膜促性腺激素与黄体素释放激素类似物的混合液，相比雌性亲鱼，其注射剂量减半。注射完毕后按1∶（3～5）的数量比将母、父本亲鱼放入水面面积为90m²左右的同一产卵池中，然后视水情及时向产卵池中冲水，尤其在产卵前3h～4h，注入一定水量后，停止注水，让父、母本亲鱼在静水中催产，直至其开始顺利产卵和产精。

1.3人工授精与孵化：当人工催产8h～12h后，选取产卵顺利的母本与产精顺利的父本进行人工干法授精，将受精卵均匀铺于玻璃培养皿中，20℃左右的流水孵化。

1.4鲤鲫F₁的饲养：待鱼苗全部孵出后，继续在玻璃培养皿中培育2天，再将鱼苗放入网箱中继续饲养，其中清水的高度从30cm高逐渐提升，在一周内升高到0.8m～1.2m，当鱼苗长到3cm～4cm长时，转入池塘中饲养；1～2天后泼洒豆浆，2～3次/天，力求细、匀。鱼苗长成后经检测获得鲤鲫F₁杂交二倍体鱼（外形照片参见图1）。

待鲤鲫F₁杂交二倍体鱼苗培育九个月左右后，随机抽样，人工测量并分析其生物学性状相关数据，如侧线鳞数、背鳍条数、体长/体高值等，并分别与其父、母本成体的各项已知数据进行比较，比较结果如下表1、表2所示。

表1：锦鲤（♀）×红鲫（♂）F₁及其父母本可量性状比值统计

表1注：鲤鲫F₁指锦鲤（♀）×红鲫（♂) F₁。

表2：锦鲤（♀）×红鲫（♂）F₁及其父母本可数性状比值统计

表2注：Ⅲ表示硬鳍条数。

由上表1和表2可见，在形态特征方面，对鲤鲫品系F₁可量性状和可数性状的测量和统计分析表明，鲤鲫品系F₁的大部分外形性状介于父、母本之间显示杂交性状，有的性状偏向红鲫，如鲤鲫F₁体长/全长的比值为0.80，偏向红鲫的0.81，鲤鲫F₁头长/体长的比值为0.28，偏向红鲫的0.27；有的性状鲤鲫F₁偏向锦鲤，如鲤鲫F₁体高/体长为0.40，偏向锦鲤的0.38；鲤鲫头高/头长为1.02，偏向锦鲤的0.96。

另一方面抽取鲤鲫F₁的血液，其具体步骤为：鲤鲫F₁取10尾从尾静脉抽取1ml血，用血液抗凝剂（ACD）稀释。以二倍体普通红鲫血做对照，经流式细胞仪测定DNA含量。稀释的血液样品先用荧光染料DAPI染色10分钟，再经流式细胞仪上样检测。以普通红鲫鱼为参照，用流式细胞仪测定二倍体鲤鲫F₁中的DNA含量，结果分别如图2所示，分析图中数据可知，二倍体鲤鲫F₁所含的DNA平均含量为105.3。

再用肾细胞直接制片法对鲤鲫F₁的体细胞染色体数目进行抽样检测，肾细胞直接制片法的具体检测方法为：在18℃～22℃水温下培育实验鱼1～3天后，对实验鱼注射植物血凝素（PHA）1～3次，每次剂量为2ug/g～8ug/g体重，间隔时间为12～24小时，在解剖取材前2～6小时，注射秋水仙素，剂量为2ug/g～4ug/g体重；取出肾组织，在生理盐水下剪碎肾组织，0.075 mol/L氯化钾（KCl）低渗处理，在20℃温度下低渗40～60分钟；用体积比为1∶3的冰醋酸∶甲醇的混合液固定肾细胞1～3次，再在冰冻载玻片上滴片，Giemsa染液染色。Olympus CX41显微镜下镜检，拍照。用上述检测方法得到的检测结果如图3所示，由图3可以看出，鲤鲫F₁二倍体染色体数目为2n=100。

从鲤鲫杂交F₁代2月龄起，每年按月定时取材，每次取四条鱼，共计取样88个，利用石蜡切片技术对其性腺发育情况进行检测。具体步骤为：1）取实验鱼称重解剖，取性腺用Bouin氏液固定1～2天；2）洗涤：Bouin氏液固定的材料直接换70%酒精更换数次即可；3）脱水：70%、80%、95%、100%酒精梯度脱水，其中，95%、100%酒精重复两次，可以保证组织中水分脱除干净，各级酒精脱水的时间约45min～1h，然后加入1/2 100％酒精＋1/2 二甲苯30min～45min，再入二甲苯直到组织透明为止约为15min～30min；4）透蜡：透蜡以前做好准备工作，如准备蜡杯，事先熔蜡，放入温箱，保持温度55℃～60℃左右，注意勿使温度过高防止组织发脆。将已经透明的组织放入二甲苯石蜡混合液内约20min～30min，然后入纯蜡杯，每杯透蜡45min～1h，共2～3小时透蜡完毕；5）折纸盒：按组织块大小折成纸盒，盒上注明材料名称、代号等；6）包埋：准备好小镊子、酒精灯、冷水等；将透蜡后的组织块放入加热后的熔融状态的石蜡中（用小纸盒盛之），待其冷却凝固；7）修切和固着蜡块；8）切片和烘片：37℃烘片1～3天；9）染色：二甲苯20min，两次，1/2 100％酒精＋1/2 二甲苯 5min，100%、95%、80%、70%酒精各5min，蒸馏水5min，吸水纸吸干。苏木精染20min～40min，水冲洗干净。分色（1%HCl 3～10秒；蒸馏水3～10秒， 1%氨水3～10秒），70%、80%、90%、95%（加0.5% 的伊红）、95%、100%、100%酒精脱水各2min，1/2 100%酒精＋1/2 二甲苯 5min，二甲苯5min，两次；10）树胶封片，镜检，拍照。图4所示为鲤鲫F₁完全能育型精巢的石蜡切片，图5所示为鲤鲫F₁完全发育卵巢的石蜡切片。

2. 鲤鲫F₂代的获得。

2.1鲤鲫F₁代的人工催产：当鲤鲫F₁代达到两年龄时，在繁殖季节，当水温稳定在20～26℃之间时，选择腹部膨大，轻压腹部能挤出墨绿色卵子的雌性杂交鱼个体作为母本，对于只能挤出水样精液的雄性杂交鱼个体，利用普通光学显微镜对精液进行镜检，选择精液中有活精子的杂交鱼个体作为父本，然后先对母本注射黄体素释放激素类似物、绒毛膜促性腺激素及地欧酮的混合催产剂进行催产，黄体素释放激素类似物的用量为10ug/kg～15ug/kg，绒毛膜促性腺激素的用量为500IU/kg～1000IU/kg，地欧酮的用量为1mg/kg；母本亲鱼注射完成后4h～5h再注射父本亲鱼，父本亲鱼的黄体素释放激素类似物和绒毛膜促性腺激素的注射剂量相比母本亲鱼减半，且父本亲鱼不注射地欧酮；注射完毕后按1∶（5～10）的数量比将母、父本亲鱼放入水面面积为80 m²左右、水深为1m左右的同一产卵池中，然后据水情及时向池中冲水，尤其在产卵前3～4h，注入一定水量后，停止注水，让鱼在静水中催产，直至其开始顺利产卵和产精。

2.2鲤鲫F₁代的人工授精及孵化：上述步骤2.1的人工催产完后再进行人工干法授精，在人工干法授精的过程中，应选取不带粘稠物质，游离自如的卵子，与筛选出的雄性亲本进行干法人工授精，将获得的受精卵进行孵化，鱼苗孵化后对其进行饲养获得鲤鲫F₂（其外形照片可参见图6），并对饲养后的鲤鲫F₂主要生物学特性进行检测，建立F₂群体。

通过肾细胞染色体制备技术、流式细胞测定法、组织切片技术、扫描和投射电镜技术对鲤鲫F₁和F₂主要生物学特性进行研究。

通过实验发现鲤鲫F₁雄性个体中仅有4.7％的生殖腺是完全能育型（参见图4），雌性个体中41.5％的生殖腺为完全能育型（参见图5）。在繁殖季节，轻压腹部可挤出墨绿色卵子的个体为可育雌性；精液在显微镜镜检下可以观测到有活力精子的个体为雄性可育个体，利用可育雌性和雄性交配，可以稳定获得鲤鲫杂交F₂代。

待鲤鲫F₂鱼苗培育九个月左右后，随机抽样，抽取鲤鲫F₂的血液，用ACD稀释。以二倍体普通红鲫血作对照，经流式细胞仪测定其DNA含量，其具体步骤同鲤鲫F₁流式细胞操作步骤，检测结果如图7所示。分析图中数据可知，鲤鲫F₂所含的DNA平均含量为99.8。

再用肾细胞直接制片法对鲤鲫F₂的体细胞染色体数目进行抽样检测，肾细胞直接制片法的具体检测方法同鲤鲫F₁的体细胞染色体数目检测步骤。检测结果如图8所示，由图8可以看出，鲤鲫F₂的染色体数目为2n=100。

本实施例方法培育出新的鲤鲫杂交鱼品系。鲤鲫品系具有高受精率和高孵化率，此外其还具有一些独特的外形特征，如其头部颜色金灰相间，鳞片外缘呈金黄色，背部呈整齐的金黄色，抗逆性强，有较高的观赏价值和良好的市场前景。这为选育异源四倍体鱼品系奠定了坚实的基础，在生物进化和鱼类遗传育种方面具有重要的生物学意义。

Claims

1.一种鲤鲫杂交鱼的选育方法，包括以下步骤：首先，以锦鲤为母本亲鱼，以红鲫为父本亲鱼，对所述父、母本亲鱼先进行人工催产，再进行人工干法授精，将受精卵置于培养皿中进行流水孵化，再对孵化出的鱼苗进行饲养、检测，进而选育出雌性或雄性可育的鲤鲫杂交F₁代个体。

2.根据权利要求1所述的鲤鲫杂交鱼的选育方法，其特征在于：所述母本亲鱼选取两龄以上、无病态、发育良好、性成熟特征明显的锦鲤，所述父本亲鱼选取两龄以上、无病态、发育良好、性成熟特征明显的红鲫；所述父、母本亲鱼在进行人工催产前，先放入亲鱼池内人工精养3～4个月。

3.根据权利要求2所述的鲤鲫杂交鱼的选育方法，其特征在于，所述人工催产的具体操作步骤包括：在4月初至5月下旬，水温维持在20℃～26℃，对母本亲鱼先注射绒毛膜促性腺激素与黄体素释放激素类似物的混合液催产，其中绒毛膜促性腺激素的用量为600IU/kg～800IU/kg，黄体素释放激素类似物的用量为10ug/kg～20ug/kg；再对父本亲鱼注射绒毛膜促性腺激素与黄体素释放激素类似物的混合液，相比母本亲鱼，其注射剂量减半；然后按1∶（5～10）的数量比将注射后的母本亲鱼、父本亲鱼放入同一产卵池中，然后向产卵池中冲水，之后停止冲水并让父、母本亲鱼在静水中催产，直至其开始顺利产卵和产精。

4.根据权利要求3所述的鲤鲫杂交鱼的选育方法，其特征在于，所述检测过程包括利用流式细胞测定DNA含量以及利用肾细胞染色体制备工艺检测饲养后鲤鲫杂交鱼的染色体倍性。

5.一种鲤鲫杂交鱼远缘杂交品系的建立方法，其特征在于，将权利要求1～4中任一项所述选育方法获得的鲤鲫杂交F₁代中的雄性杂交鱼和雌性杂交鱼进行自交，培育得到鲤鲫杂交F₂代。

6.根据权利要求5所述的鲤鲫杂交鱼远缘杂交品系的建立方法，其特征在于，所述自交的具体方法为：将两龄以上的所述雄性杂交鱼和雌性杂交鱼放入亲鱼池内，先进行人工催产，再进行人工干法授精和流水孵化，最后进行饲养，直至鱼苗长成后经检测获得鲤鲫杂交F₂代二倍体鱼。

7.根据权利要求6所述的鲤鲫杂交鱼远缘杂交品系的建立方法，其特征在于，所述杂交鱼的人工催产过程包括：当繁殖季节水温稳定在20℃～26℃时，选择腹部膨大、轻压腹部能挤出墨绿色卵子的雌性杂交鱼个体作为母本亲鱼，选择挤出水样精液的雄性杂交鱼个体，利用普通光学显微镜对精液进行镜检，选择精液中有活精子的雄性杂交鱼个体作为父本亲鱼，然后先对母本注射黄体素释放激素类似物、绒毛膜促性腺激素及地欧酮的混合催产剂进行催产，所述黄体素释放激素类似物的用量为10ug/kg～15ug/kg，所述绒毛膜促性腺激素的用量为500IU/kg～1000IU/kg，所述地欧酮的用量为1mg/kg；母本亲鱼注射完成后4h～5h再注射父本亲鱼，父本亲鱼的黄体素释放激素类似物和绒毛膜促性腺激素的注射剂量相比母本亲鱼减半，且父本亲鱼不注射地欧酮；注射完毕后按1∶（5～10）的数量比将母、父本亲鱼放入同一产卵池中，然后在产卵前3h～4h向池中冲水，此后停止注水，让鱼在静水中催产，直至其开始顺利产卵和产精。

8.根据权利要求6或7所述的鲤鲫杂交鱼远缘杂交品系的建立方法，其特征在于，在所述自交的人工干法授精过程中，选取不带粘稠物质、游离自如的卵子进行干法人工授精。

9.根据权利要求6或7所述的鲤鲫杂交鱼远缘杂交品系的建立方法，其特征在于，所述自交的检测过程包括利用流式细胞测定DNA含量以及利用肾细胞染色体制备工艺检测饲养后鲤鲫杂交鱼的染色体倍性。