CN109329122B - 一种改良日本白鲫的选育方法及其品系的建立方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种改良日本白鲫的选育方法，以日本白鲫为母本，团头鲂为父本，得到的杂交后代挑选出染色体数目为148的异源四倍体鲫鲂进行人工精养、人工催产及人工干法授精，将受精卵滴水孵化后进行饲养，得到的自交后代挑选出两性可育的、染色体数目为100的改良二倍体日本白鲫。获得的改良日本白鲫不但生长迅速、繁殖率高，而且头小、体背高、肉质好、抗病力强。本发明还提供了改良日本白鲫的品系建立方法，可以获得两性可育且遗传稳定的改良日本白鲫品系，在鱼类遗传育种和生物进化方面具有重要意义，在生产应用上，该改良日本白鲫品系的建立，为培育新型优良鲫鱼提供了优质的种质资源库。
Description
技术领域
本发明属于鱼类杂交育种领域，尤其涉及一种改良日本白鲫的选育方法及其品系的建立方法。
背景技术
日本白鲫(Carassius auratus cuvieri Temmincket Schlegel)在生物分类学上属于鲤形目、鲤科鲫属中的二倍体鱼(2n＝100)；日本白鲫体型大，体色银白，杂食性，繁殖率高，是一种成长快、经济效益高的优质鱼类。但是，日本白鲫在养殖过程中容易出现烂尾等病情，且日本白鲫肌肉蛋白含量偏低。因此建立一种抗病性强且肉质好的日本白鲫白鲫改良品种在水产上具有重要的应用价值。
杂交育种是应用最为广泛的遗传育种手段之一，它通过杂交将两个或两个以上品种的部分优良性状整合的育种方法。一般根据杂交亲本亲缘关系的远近将杂交分为远缘杂交与近缘杂交。远缘杂交是指亲缘关系在种间及种间以上的杂交，是一种重要的鱼类遗传育种和性状改良方法，它可以整合整套外源基因，从而改变杂交后代基因的组成及表达调控，使得杂交后代可能在体型体色、生长速度、抗病性以及肉质等方面表现出杂种优势。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是，克服以上背景技术中提到的不足和缺陷，提供一种改良日本白鲫的选育方法及其品系的建立方法。
为解决上述技术问题，本发明提出的技术方案为提供一种改良日本白鲫的选育方法，包括如下步骤：以日本白鲫为母本，团头鲂为父本，进行杂交，得到的杂交后代通过流式细胞DNA含量测定法进行检测筛分，挑选出染色体数目为148的异源四倍体鲫鲂进行人工精养、人工催产及人工干法授精，将受精卵滴水孵化后进行饲养，得到的自交后代通过生物学方法进行检测筛分，挑选出两性可育的、染色体数目为100的改良二倍体日本白鲫，即得到所述的改良日本白鲫。
上述的选育方法，优选的，所述人工精养的具体操作包括以下步骤：将挑选出的异源四倍体鲫鲂单独养殖在池塘，饵料采用蛋白质量含量为25～35％的人工复合饲料，养殖密度为1900～2100尾/亩，雌雄比例为1:4～5；在繁殖期前3～4个月，挑选两龄及两龄以上、性成熟特征明显、体征良好的雌性异源四倍体鲫鲂作为远缘杂交的母本亲鱼，挑选能挤出水样精液的雄性异源四倍体鲫鲂作为父本亲鱼，将父本亲鱼及母本亲鱼放入亲鱼培育池进行精养，保持水质良好，在繁殖期前1～2个月以精饵饲养，每隔2～3天流水刺激一次，以促进亲鱼性腺发育成熟。
优选的，所述人工催产的具体操作包括以下步骤：在当年的4月中旬至5月上旬，当水温稳定在20℃以上时，对母本亲鱼注射黄体素释放激素类似物与绒毛膜促性腺激素的混合催产剂进行催产，黄体素释放激素类似物的量为10～12ug/kg，绒毛膜促性腺激素的量为600～700IU/kg，4～5h后再对父本亲鱼注射黄体素释放激素类似物与绒毛膜促性腺激素的混合催产剂进行催产，黄体素释放激素类似物的量为5～6ug/kg，绒毛膜促性腺激素的量为300～350IU/kg，注射完毕后按1:4～6的数量比将母、父本亲鱼放入同一水面面积为60～80m2产卵池中，然后及时向池中冲水，在产卵前3～4h，停止注水，让鱼在静水中催产，直至其开始顺利产卵和产精；注射时采用胸鳍基部无鳞处腹腔一针注射法。一针注射法相较于其他方法可以降低催产过程对亲鱼的伤害。
优选的，所述人工干法授精的具体操作包括如下步骤：人工催产10h后，挑选产卵顺利的雌性异源四倍体鲫鲂母本亲鱼，以及能产生水样精液的雄性异源四倍体鲫鲂的父本亲鱼，用湿毛巾将亲鱼包裹固定，用毛巾将打捞的亲鱼腹部擦干，然后轻压母本亲鱼腹部，将母本亲鱼卵子挤到干净无水的盆中，用同样的方法将产精量大的父本亲鱼精液挤到所述卵子上面，再用羽毛轻轻搅动1～2min，使之完成授精。
优选的，所述受精卵滴水孵化的具体操作包括如下步骤：将受精卵铺于培养皿中滴水孵化，水温保持在20～22℃，用吸管定期吸取死掉的受精卵，直至鱼苗孵出。
优选的，所述饲养的具体操作包括如下步骤：鱼苗全部孵出后，在大盆中培育2～3天，然后置于网箱中培育1～2天，每天喂两次鸡蛋黄，转入预先培肥的池塘饲养，池塘每天泼洒2～3次豆浆，待鱼苗长到4～5cm，每天喂两次饲料粉。
优选的，所述通过生物学方法进行检测筛分是利用肾组织染色体倍性检测法、流式细胞DNA含量测定法以及组织学切片观察法对自交后代鱼进行染色体数目、DNA含量以及性腺发育的检测，再根据检测结果进行筛分。
基于一个总的技术构思，本发明还相应提供了一种改良日本白鲫品系的建立方法，包括如下步骤：在所述选育方法选育得到的改良日本白鲫中，选择改良日本白鲫雌雄个体分别进行人工诱导雌核发育及雄核发育，再将雌核发育得到的能产生正常单倍体卵子的雌鱼与雄核发育得到的能产生白色精液的雄鱼交配，得到的后代中选择一龄及一龄以上、性成熟特征明显的进行自交，所述自交通过人工催产与人工干法授精实现，至少通过两代连续自交，获得遗传性状稳定、两性可育的改良日本白鲫品系。
本实验室开展了人工诱导鱼类雌核发育和雄核发育研究，发现用异源精子刺激鱼类卵子进行雌核发育，获得的雌核发育后代具有异源精子的染色体片段，这种“杂交”效应，使得雌核发育后代可能继承父本的一些优良性状，表现出“杂交”优势，雄核发育技术原理也大致相同。但是雄核发育过程中不能像雌核发育那样抑制第二极体排出来实现二倍化，所以只能抑制第一次卵裂而使染色体加倍，从而导致加倍过程更加困难，且鲤鱼卵子的紫外照射时间难以准确把控。因此，提高卵子的遗传失活效率以及找到一种合适的方法提高受精卵二倍化效率长期以来一直是本领域技术人员需要解决的技术难关。
优选的，所述人工诱导雌核发育的具体操作包括如下步骤：在繁殖季节、水温稳定在20℃以上时，选择一龄及一龄以上、性成熟特征明显的雌性改良日本白鲫和雄性团头鲂进行人工催产，将获得的团头鲂精子按1:3-4的质量比加入Hank’s液，然后置于培养皿中在功率为30瓦的紫光灯下进行照射，紫外灯距盛有精子溶液的培养皿10～12cm，培养皿放在冰上，并放置在摇床上摇动，观察精子的活力，待团头鲂精子活力明显减弱时停止照射，得到灭活的精液；将人工催产获得的改良日本白鲫的卵子挤入盆中，加入经过灭活的精液，再加入质量浓度为0.6％的生理盐水进行摇荡混合使其受精，将得到的受精卵放入4℃水中进行冷处理20min，然后置于培养皿中滴水孵化，进行饲养，得到能产生正常单倍体卵子的雌鱼。
利用团头鲂提供的精液进行雌核发育有两个优点：1)团头鲂与鲫在鱼类分类上属于不同的亚科，两者亲缘关系较远，团头鲂的精子经过紫外照射后不一定会完全遗传失活，再与鲫鱼卵子进行杂交也不容易形成杂合子后代；2)团头鲂具有很多优良性状，如草食性，抗病性强，肉质好，利用其诱导雌核发育可能使得雌核发育后代继承父本的一些优良性状。
优选的，所述雄核发育的具体操作包括如下步骤：在繁殖季节、水温稳定在20℃以上时，选择一龄及一龄以上、性成熟特征明显的雄性改良日本白鲫和雌性鲤鱼进行人工催产，将获得的鲤鱼卵子挤入加了卵巢液的培养皿中，然后在功率为30瓦的紫光灯下进行照射，紫外灯距盛有卵子溶液的培养皿10～12cm，培养皿放在冰上，并放置在摇床上摇动，紫外灯照射3min后停止照射；将人工催产获得的改良二倍体日本白鲫的精子挤入经紫外照射过鲤鱼卵子的培养皿中，再加入质量浓度为0.6％的生理盐水进行摇荡混合使其受精，将得到的受精卵放入4℃水中进行冷处理20min，然后置于培养皿中滴水孵化，进行饲养，得到能产生白色精液的雄鱼。
利用鲤鱼卵子进行雄核发育主要考虑鲤鱼与鲫鱼亲缘关系比较接近，鲤鱼卵子经过遗传失活后再与鲫鱼精子杂交，更容易受精。此外，鲤鱼也具有很多优良特征，如抗病能力以及耐低氧能力，利用其诱导雄核发育可能使得雄核发育后代继承母本的一些优良性状。
与现有技术相比，本发明的有益效果为：
1、本发明的选育方法，以日本白鲫为母本、团头鲂为父本进行杂交，后代再自交的方法培育出两性可育的、染色体数目为100的改良二倍体日本白鲫，通过该培育方法获得的改良日本白鲫不但继承了日本白鲫生长迅速、繁殖率高的特点，还结合了团头鲂头小、体背高、肉质好、抗病力强的优点，是一种新型优良鲫鱼养殖鱼类，本发明的培育方法对鱼类遗传育种和鱼类进化研究方面具有重要意义。
2、本发明的品系建立方法，选育得到的改良日本白鲫进行雌核发育、雄核发育以及连续自交，可以获得两性可育且遗传稳定的改良日本白鲫品系，在鱼类遗传育种和生物进化方面具有重要意义，在生产应用上，该改良日本白鲫品系的建立，为培育新型优良鲫鱼提供了优质的种质资源库。
3、本发明的品系建立方法建立得到的改良日本白鲫品系，遗传性状稳定，在自然条件下能自行繁殖，并在人工条件下具有高的受精率及孵化率。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
图1是本发明实施例中培育得到的改良日本白鲫外形图。
图2是日本白鲫平均DNA含量图。
图3是本发明实施例中培育得到的改良日本白鲫的DNA含量图。
图4是本发明实施例中培育得到的改良日本白鲫的染色体图(2n＝100)。
图5是本发明实施例中培育得到的改良日本白鲫的染色体核型图。
图6是本发明实施例中培育得到的改良日本白鲫的精巢石蜡切片图。
图7是本发明实施例中培育得到的改良日本白鲫的卵巢石蜡切片图。
具体实施方式
为了便于理解本发明，下文将结合说明书附图和较佳的实施例对本发明做更全面、细致地描述，但本发明的保护范围并不限于以下具体实施例。
除非另有定义，下文中所使用的所有专业术语与本领域技术人员通常理解含义相同。本文中所使用的专业术语只是为了描述具体实施例的目的，并不是旨在限制本发明的保护范围。
除非另有特别说明，本发明中用到的各种原材料、试剂、仪器和设备等均可通过市场购买得到或者可通过现有方法制备得到。
实施例1：
一种本发明的改良日本白鲫的选育方法，包括如下步骤：
1.亲本的选择和人工精养：在以日本白鲫为母本、团头鲂为父本的鲫鲂杂交F1代中，通过流式细胞DNA含量测定法(还可以结合外形特征)挑选出染色体数目为148的异源四倍体鲫鲂；对挑选出的异源四倍体鲫鲂进行单独养殖，养殖在一亩左右的池塘，池塘水深2米左右，饵料采用蛋白含量30％左右的人工复合饲料，养殖密度为2000尾/亩，雌雄比例约为1:5；在繁殖季节前3-4个月从异源四倍体鲫鲂中挑选两龄及两龄以上、性成熟特征明显、体征良好(体征良好表现为体型好、体色鲜艳、体质健壮和无病无伤)的雌性异源四倍体鲫鲂作为远缘杂交的母本亲鱼，挑选能挤出水样精液的雄性异源四倍体鲫鲂作为父本亲鱼，将父本亲鱼及母本亲鱼放入亲鱼培育池进行精养，保持水质良好，在繁殖期前1-2个月以精饵饲养，每隔2～3天流水刺激一次，以促进亲鱼性腺发育成熟。
2.人工催产：在4月中旬至5月下旬(即4月21日至5月31日，下同)，当水温稳定在20℃以上时，开始对异源四倍体鲫鲂亲鱼进行人工催产，对母本亲鱼注射黄体素释放激素类似物与绒毛膜促性腺激素的混合催产剂进行催产，黄体素释放激素类似物的量为10ug/kg，绒毛膜促性腺激素的量为600IU/kg，4～5h后再对父本亲鱼注射黄体素释放激素类似物与绒毛膜促性腺激素的混合催产剂进行催产，黄体素释放激素类似物的量为5ug/kg，绒毛膜促性腺激素的量为300IU/kg，注射完毕后按1:4～6的数量比将母、父本亲鱼放入同一水面面积为60-80m2产卵池中，然后视水情及时向池中冲水，在产卵前3～4h，注入适合水量后，停止注水，让鱼在静水中催产，直至其开始顺利产卵和产精；注射时采用胸鳍基部无鳞处腹腔一针注射法。
3.人工受精和孵化：当人工催产10h左右，挑选产卵顺利的雌性异源四倍体鲫鲂母本亲鱼，以及能产生水样精液的雄性异源四倍体鲫鲂的父本亲鱼，用湿毛巾将亲鱼包裹固定，用毛巾将打捞的亲鱼腹部擦干，然后轻压母本亲鱼腹部，将母本亲鱼卵子挤到干净无水的盆中，用同样的方法将产精量大的父本亲鱼精液挤到所述卵子上面，再用羽毛轻轻搅动1-2min，使之完成授精。
4.受精卵滴水孵化：将受精卵铺于培养皿中滴水孵化，水温保持在20-22℃，用吸管定期吸取死掉的受精卵，直至鱼苗孵出。
5.异源四倍体鲫鲂自交后代的饲养：待鱼苗全部孵出后，在大盆中培育2-3天，然后置于网箱中培育1天，每天喂两次鸡蛋黄，后转入预先培肥的池塘饲养。池塘每天泼洒2-3次豆浆，待鱼苗长到4-5cm，每天喂两次饲料粉。
6.检测筛分：得到的自交后代通过生物学方法进行检测筛分，挑选出两性可育的、染色体数目为100的改良二倍体日本白鲫。鱼苗长成后获得筛选出如图1所示的改良二倍体日本白鲫。
通过生物学方法进行检测筛分如下：
经杂交的改良日本白鲫在培育10个月左右，随机抽取其尾部静脉血液进行DNA含量测定(流式细胞DNA含量测定法)，以普通的日本白鲫的血液DNA含量作为对照，其结果如图2和3所示。由图2和3数据可知，改良日本白鲫平均DNA含量与日本白鲫平均DNA含量无显著差异(p<0.05)，说明本发明选育得到的鱼为改良的二倍体日本白鲫。
再用肾细胞直接制片法对改良日本白鲫的体细胞染色体数目进行抽样检测(肾组织染色体倍性检测法)。其检测结果如图4所示，改良日本白鲫的体细胞染色体数目为100条。
对质量好的改良日本白鲫的体细胞染色体进行核型分析。对染色体的全长以及断臂和长臂的长度进行测量，并通过染色体长臂和断臂的比例结合相关标准对染色体进行分类：比值在1.0-1.7之间的为中部着丝粒染色体，1.7-3.0的为亚中部着丝粒染色体，3.1-7.0的为亚端部着丝粒染色体，大于7.1的为端部着丝粒染色体。用上述方法检测结果如图5所示，改良日本白鲫F1的染色体核型为：22m+34sm+22st+22t。
从改良日本白鲫两月龄起，每月定时取其性腺进行组织学切片，对其性腺发育情况进行观察(组织学切片观察法)。图6所示为10月龄雄性改良日本白鲫精巢的石蜡切片，图7所示为10月龄雌性改良日本白鲫卵巢的石蜡切片。由图6数据可知，雄性改良日本白鲫精巢发育情况良好，10月龄改良日本白鲫精巢已经发育至IV期，在输精管中可以观察到大量的二级精母细胞。由图7数据可知，10月龄改良日本白鲫卵巢已经发育至II期，富含卵母细胞，并在卵黄核的位置靠近细胞核。
对10月龄的改良日本白鲫进行可数可量性状测定，同时与日本白鲫以及团头鲂的可数可量性状进行比较，其结果如表1，表2所示。改良日本白鲫的多个可数、可量性状与日本白鲫存在显著差异，其体高高于日本白鲫，头部小于日本白鲫，具有明显的团头鲂特征。改良日本白鲫不但继承了日本白鲫生长迅速、繁殖率高的特点，还结合了团头鲂头小、体背高、肉质好、抗病力强的优点，是一种新型优良鲫鱼养殖鱼类，本发明的培育方法对鱼类遗传育种和鱼类进化研究方面具有重要意义。
表1：改良日本白鲫、日本白鲫以及团头鲂的可数性状比较
表2：改良日本白鲫、日本白鲫以及团头鲂的可量性状比较
实施例2：
一种本发明的改良日本白鲫品系的建立方法，包括如下步骤：
1.改良日本白鲫的雌核发育
当上述实施例1选育方法选育得到的改良二倍体日本白鲫长到一龄时，在繁殖季节(4-6月)，水温稳定在20℃以上时，挑选性成熟特征明显(腹部膨胀)的雌性改良二倍体日本白鲫作为母本亲鱼，挑选性成熟特征明显(能挤出乳白色精液)的雄性团头鲂亲鱼；为亲鱼注射黄体素释放激素类似物(LRH-A)与绒毛膜促性腺激素(HCG)的混合催产剂进行催产，所述LRH-A的用量为10μg/kg，HCG的用量为600IU/kg；先注射母本亲鱼，4～5h后再注射父本亲鱼，父本亲鱼的注射剂量减半；注射完毕后按1:(4～6)的数量比将母、父本亲鱼产卵池中，然后视水情及时向池中冲水，尤其在产卵前3～4h，注入一定水量后，停止注水，让鱼在静水中催产，直至其开始顺利产卵和产精；将获得的团头鲂精子按1:3的质量比加入Hank’s液，然后在功率为30瓦的紫光灯下进行照射，紫外灯距盛有精子溶液的培养皿约10-12cm，培养皿放在冰上，并放置在摇床上不断摇动；开始每隔10min观察1次精子的活力，半小时后，每隔5min观察1次，直到观察到团头鲂精子活力明显减弱，停止照射；先将改良白鲫雌鱼的卵子挤入盆中，加入经过灭活的精液，再加入适量质量浓度为0.6％的生理盐水，摇荡1min左右，放入培养皿使其受精，受精后2min得到的受精卵放入4℃水中20min，后在培养皿中滴水孵化，水温保持在20～22℃，用吸管定期吸取死掉的受精卵，直至鱼苗孵出，孵出后的鱼苗在大盆中培育2～3天，然后置于网箱中培育1天，喂两次鸡蛋黄，后转入池塘饲养。池塘每天泼洒2～3次豆浆，待鱼苗长到4～5cm，每天喂两次饲料粉，得到能产生正常单倍体卵子的雌鱼。
2.改良日本白鲫的雄核发育
当上述实施例1选育方法选育得到的改良二倍体日本白鲫长到一龄时，在繁殖季节(4-6月)，水温稳定在20℃以上时，挑选性成熟特征明显(腹部膨胀)的雌性鲤鱼作为母本亲鱼，挑选性成熟特征明显(能挤出乳白色精液)的雄性改良白鲫作为父本亲鱼；为亲鱼注射黄体素释放激素类似物(LRH-A)与绒毛膜促性腺激素(HCG)的混合催产剂进行催产，所述LRH-A的用量为10μg/kg，HCG的用量为600IU/kg；先注射母本亲鱼，4～5h后再注射父本亲鱼，父本亲鱼的注射剂量减半；注射完毕后按1:(4～6)的数量比将母、父本亲鱼产卵池中，然后视水情及时向池中冲水，尤其在产卵前3～4h，注入一定水量后，停止注水，让鱼在静水中催产，直至其开始顺利产卵和产精；将获得的鲤鱼卵子挤入加了卵巢液的培养皿中，然后在功率为30瓦的紫光灯下进行照射，紫外灯距盛有精子溶液的培养皿约10～12cm，培养皿放在冰上，并放置在摇床上不断摇动，紫外灯照射三分钟后停止照射；将改良白鲫雄鱼的精子挤入经紫外照射过鲤鱼卵子的培养皿中，再加入适量质量浓度为0.6％的生理盐水，摇荡1min左右使其受精，受精后2min得到的受精卵放入4℃水中20min，后在培养皿中滴水孵化，水温保持在20～22℃，用吸管定期吸取死掉的受精卵，直至鱼苗孵出，孵出后的鱼苗在大盆中培育2～3天，然后置于网箱中培育1天，喂两次鸡蛋黄，后转入池塘饲养。池塘每天泼洒2～3次豆浆，待鱼苗长到4～5cm，每天喂两次饲料粉，得到能产生白色精液的雄鱼。
3.改良日本白鲫的人工授精、孵化及饲养
上述步骤1与2得到的能产生正常单倍体卵子的雌鱼与能产生白色精液的雄鱼交配，得到的后代中选择一龄及一龄以上、性成熟特征明显的进行自交，所述自交通过人工催产与人工干法授精实现，至少通过两代连续自交，获得遗传性状稳定、两性可育的改良日本白鲫品系。
通过肾细胞染色体制备技术、流式细胞测定法、组织学切片技术对每一代改良白鲫的主要生物学特性进行研究，其结果与第一代改良日本白鲫的结果一致，说明该改良白鲫品系遗传性状稳定。
本发明培育出改良日本白鲫品系。改良日本白鲫品系遗传性状稳定，在自然条件下能自行繁殖，并在人工条件下具有高的受精率及孵化率。改良日本白鲫不但继承了日本白鲫体型大，生长速度快，繁殖率高等优良特点，也遗传了团头鲂的体背高，肉质好，抗病能力强等优点，是一种优良的改良二倍体鲫鱼品种。本发明选育出的改良二倍体日本白鲫品系在鱼类遗传育种方面具有重要的意义。
Claims (7)
1.一种改良日本白鲫品系的建立方法，包括如下步骤：以日本白鲫为母本，团头鲂为父本，进行杂交，得到的杂交后代通过流式细胞DNA含量测定法进行检测筛分，挑选出染色体数目为148的异源四倍体鲫鲂进行人工精养、人工催产及人工干法授精，将受精卵滴水孵化后进行饲养，得到的自交后代通过生物学方法进行检测筛分，挑选出两性可育的、染色体数目为100的改良二倍体日本白鲫，即得到所述的改良日本白鲫；
在所述的改良日本白鲫中，选择改良日本白鲫雌雄个体分别进行人工诱导雌核发育及雄核发育，再将雌核发育得到的能产生正常单倍体卵子的雌鱼与雄核发育得到的能产生白色精液的雄鱼交配，得到的后代中选择一龄及一龄以上、性成熟特征明显的进行自交，所述自交通过人工催产与人工干法授精实现，至少通过两代连续自交，获得遗传性状稳定、两性可育的改良日本白鲫品系；
所述人工诱导雌核发育的具体操作包括如下步骤：在繁殖季节、水温稳定在20℃以上时，选择一龄及一龄以上、性成熟特征明显的雌性改良日本白鲫和雄性团头鲂进行人工催产，将获得的团头鲂精子按1:3-4的质量比加入Hank’s液，然后置于培养皿中在功率为30瓦的紫光灯下进行照射，紫外灯距盛有精子溶液的培养皿10～12 cm，培养皿放在冰上，并放置在摇床上摇动，观察精子的活力，待团头鲂精子活力明显减弱时停止照射，得到灭活的精液；将人工催产获得的改良日本白鲫的卵子挤入盆中，加入经过灭活的精液，再加入质量浓度为0.6%的生理盐水进行摇荡混合使其受精，将得到的受精卵放入4℃水中进行冷处理20min，然后置于培养皿中滴水孵化，进行饲养，得到能产生正常单倍体卵子的雌鱼；
所述雄核发育的具体操作包括如下步骤：在繁殖季节、水温稳定在20℃以上时，选择一龄及一龄以上、性成熟特征明显的雄性改良日本白鲫和雌性鲤鱼进行人工催产，将获得的鲤鱼卵子挤入加了卵巢液的培养皿中，然后在功率为30瓦的紫光灯下进行照射，紫外灯距盛有卵子溶液的培养皿10～12 cm，培养皿放在冰上，并放置在摇床上摇动，紫外灯照射3min后停止照射；将人工催产获得的改良二倍体日本白鲫的精子挤入经紫外照射过鲤鱼卵子的培养皿中，再加入质量浓度为0.6%的生理盐水进行摇荡混合使其受精，将得到的受精卵放入4℃水中进行冷处理20 min，然后置于培养皿中滴水孵化，进行饲养，得到能产生白色精液的雄鱼。
2.根据权利要求1所述的建立方法，其特征在于，所述人工精养的具体操作包括以下步骤：将挑选出的异源四倍体鲫鲂单独养殖在池塘，饵料采用蛋白质量含量为25～35%的人工复合饲料，养殖密度为1900～2100尾/亩，雌雄比例为1:4～5；在繁殖期前3～4个月，挑选两龄及两龄以上、性成熟特征明显、体征良好的雌性异源四倍体鲫鲂作为远缘杂交的母本亲鱼，挑选能挤出水样精液的雄性异源四倍体鲫鲂作为父本亲鱼，将父本亲鱼及母本亲鱼放入亲鱼培育池进行精养，保持水质良好，在繁殖期前1～2个月以精饵饲养，每隔2～3天流水刺激一次，以促进亲鱼性腺发育成熟。
3.根据权利要求1所述的建立方法，其特征在于，所述人工催产的具体操作包括以下步骤：在当年的4月中旬至5月上旬，当水温稳定在20℃以上时，对母本亲鱼注射黄体素释放激素类似物与绒毛膜促性腺激素的混合催产剂进行催产，黄体素释放激素类似物的量为10～12ug/kg，绒毛膜促性腺激素的量为600～700IU/kg，4～5 h后再对父本亲鱼注射黄体素释放激素类似物与绒毛膜促性腺激素的混合催产剂进行催产，黄体素释放激素类似物的量为5～6ug/kg，绒毛膜促性腺激素的量为300～350IU/kg，注射完毕后按1:4～6的数量比将母、父本亲鱼放入同一水面面积为60～80m2产卵池中，然后及时向池中冲水，在产卵前3～4 h，停止注水，让鱼在静水中催产，直至其开始顺利产卵和产精；注射时采用胸鳍基部无鳞处腹腔一针注射法。
4.根据权利要求1所述的建立方法，其特征在于，所述人工干法授精的具体操作包括如下步骤：人工催产10 h后，挑选产卵顺利的雌性异源四倍体鲫鲂母本亲鱼，以及能产生水样精液的雄性异源四倍体鲫鲂的父本亲鱼，用湿毛巾将亲鱼包裹固定，用毛巾将打捞的亲鱼腹部擦干，然后轻压母本亲鱼腹部，将母本亲鱼卵子挤到干净无水的盆中，用同样的方法将产精量大的父本亲鱼精液挤到所述卵子上面，再用羽毛轻轻搅动1～2min，使之完成授精。
5.根据权利要求1所述的建立方法，其特征在于，所述受精卵滴水孵化的具体操作包括如下步骤：将受精卵铺于培养皿中滴水孵化，水温保持在20～22℃，用吸管定期吸取死掉的受精卵，直至鱼苗孵出。
6.根据权利要求1所述的建立方法，其特征在于，所述饲养的具体操作包括如下步骤：鱼苗全部孵出后，在大盆中培育2～3天，然后置于网箱中培育1～2天，每天喂两次鸡蛋黄，转入预先培肥的池塘饲养，池塘每天泼洒2～3次豆浆，待鱼苗长到4～5 cm，每天喂两次饲料粉。
7.根据权利要求1所述的建立方法，其特征在于，所述通过生物学方法进行检测筛分是利用肾组织染色体倍性检测法、流式细胞DNA含量测定法以及组织学切片观察法对自交后代鱼进行染色体数目、DNA含量以及性腺发育的检测，再根据检测结果进行筛分。
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Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
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Non-Patent Citations (2)
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| 人工诱导兴国红鲤单性发育研究;朱传忠;《万方数据知识服务平台》;20060613;第三章、第23-28页 * |
| 多倍体鲫鲂的分子生物学特性研究;戴婧;《中国优秀硕士学位论文全文数据库农业科技辑》;20140915(第9期);第三章、第21-27页 * |
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| GR01 | Patent grant | ||
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