CN102823771A - 一种仔猪用生物活性酸化剂，预混料及其配合料 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种仔猪用生物活性酸化剂，预混料及其配合料。所述的仔猪用生物活性酸化剂根据如下步骤进行制备：1）将30-60重量份的混合有机酸均匀吸附于30-50重量份的沉淀二氧化硅，制成有机酸固体粉剂；2）将10-15重量份活性益生菌发酵液与10重量份的沉淀二氧化硅混合均匀，干燥制成活性益生菌固体粉剂；3）将重量比50%的步骤1）所得有机酸固体粉剂和步骤2)所得活性益生菌固体粉剂混合均匀即得。本发明的生物活性酸化剂具有无残留、无污染、不产生耐药性、耐药残留和耐药菌株，在仔猪饲料或饮水中加入本产品可以弥补胃酸分泌的不足，提高饲料转化率，提高生产性能和抵抗疾病能力。

Description

一种仔猪用生物活性酸化剂,预混料及其配合料

技术领域

本发明具体涉及一种仔猪用生物活性酸化剂，预混料及其配合料，属于饲料加工技术领域。

背景技术

随着畜牧业的不断增长，各种新技术不断推广应用，其中包括仔猪早期断奶技术，该技术的推广应用大大地加快了养猪生产，但仔猪在早期断奶后，由于自身消化道机能发育不全，特别是胃酸分泌不足，且子畜饲料的pH值多在5.8-6.5之间，常使子畜胃中的pH值较高。过高的pH值使得胃蛋白酶的活性降低，饲料利用率降低，而且易引起肠道受损，产生腹泻等症状，严重影响仔猪的生长和养殖户的经济效益。在仔猪早期断奶后，配合使用酸化剂，可以弥补胃酸分泌的不足，能提高饲料消化率，保证仔猪的健康生长。

另外，随着人们对抗生素饲料添加剂带来负面效应的意识不断提高，饲料微生态制剂是作为一种新型产品，具有无毒副作用、无耐药性、无残留、效果显著等诸多优点，受到了养殖业的欢迎。

目前，市场上的产品多为酸化剂或益生菌中的一种，两者共同使用的产品较少。由于单一的有机酸或者无机酸容易在进入动物肠道后被中和，难以在动物后肠道发挥作用，并不能起到持久、稳定的酸化效果。

发明内容

为了解决上述问题，本发明的目的在于提供一种仔猪用生物活性酸化剂，预混料及其配合料。

首先，本发明提供一种仔猪用生物活性酸化剂，根据如下步骤进行制备：

1）将30-60重量份的混合有机酸均匀吸附于30-50重量份的沉淀二氧化硅，制成有机酸固体粉剂；

2）将10-15重量份活性益生菌发酵液与10重量份的沉淀二氧化硅混合均匀，干燥制成活性益生菌固体粉剂；

3）将重量比50%的步骤1）所得有机酸固体粉剂和步骤2)所得活性益生菌固体粉剂混合均匀即得。

其中，所述活性益生菌固体粉剂中益生菌活菌含量为10⁹-10¹¹CFU/g。

其中，所述的仔猪用生物活性酸化剂中沉淀二氧化硅的粒度为60-200目。

其中，所述的仔猪用生物活性酸化剂中混合有机酸30-60重量份由DL-乳酸15-20重量份，柠檬酸4-10重量份，丁酸钠10-20重量份，乙酸0.1-10重量份和延胡索酸0.3-6重量份混合而成。

其中，活性益生菌为枯草芽孢杆菌和乳酸菌的混合物。

其中，乳酸菌优选为嗜酸乳杆菌和/或约氏乳杆菌。

进一步地，所述的枯草芽孢杆菌为枯草芽孢杆菌CGMCC No.4628。

本发明的枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）CGMCC No.4628已于CN200810106520.5中公布。

进一步地，所述的嗜酸乳杆菌为嗜酸乳杆菌CGMCC No.5093。

本发明的嗜酸乳杆菌（Lactobacillus acidophilus）CGMCCNo.5093已在CN201110396544.0中公布。

进一步地，所述的约氏乳杆菌为约氏乳杆菌CGMCC No.4926。

本发明的约氏乳杆菌(Lactobacillus johnsonii)CGMCC No.4926已在专利CN201110416416.8中公布。

本发明还提供含有所述生物活性酸化剂的饲料添加剂。所述的饲料添加剂还可以含有常规的维生素添加剂、微量元素添加剂、氨基酸添加剂、饲料酶制剂以及中草药提取物等。进一步的，本发明所述的饲料添加剂还可以添加到仔猪预混料中，制备成仔猪用预混料，因此，本发明还提供还有所述饲料添加剂的预混料。进一步的，本发明所述的饲料添加剂还可以添加到基础日粮，如玉米-豆粕日粮中，因此，本发明还提供还有所述饲料添加剂的配合料。

本发明采用了以下技术方案，使其具有其他产品不具有的特点：

1）分别制备活性益生菌固体粉剂和混合有机酸固体粉剂，然后再将两种粉剂混合均匀，制备工艺简单，发酵过程以及发酵工艺参数都经过申请人实验、优化，简单方便，易于各类养殖户、饲料企业操作，可直接添加于仔猪用预混料和配合饲料中使用，且避免了外源有机酸对益生菌的有害刺激作用；2）在制备活性益生菌固体粉剂时，对于枯草芽孢杆菌初始培养时添加相对较少的养分以控制菌的生长速度，进入对数期后加入碳源含量高的新鲜培养基以维持菌体的营养需要，确保较高的活菌数，进入稳定期后升高温度或者降低搅拌速度，有利于芽孢的成熟；对于乳酸菌的培养采取中期加入碳酸钙溶液和补加50%葡萄糖溶液，避免有害产物的积累，从而促进菌体生长；3）在本发明中，在高效有机酸化剂配方的基础上添加定殖能力强、繁殖速度快、产酸能力强、生物安全性高的益生菌，所添加的益生菌能够抑制大肠杆菌、沙门氏菌等病原微生物的繁殖，促进有益菌群的生长；枯草芽孢杆菌分泌的各种酶有助于提高饲料的利用率。因此，制备的仔猪用生物活性固体酸化剂效果显著，能够提高饲料利用率，促进动物生长，提高动物免疫力和抗病力，从而达到增加经济效益的目的。

具体实施方式

以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。

实施例1

（1）制备混合有机酸固体粉剂

取饲用级DL-乳酸15kg、柠檬酸4.3kg、丁酸钠10.1kg、乙酸0.2kg、延胡索酸0.4kg，密闭加热溶解完全，通过无菌管道输送至于混合机内，喷涂于30kg200目沉淀二氧化硅颗粒上，使吸附均匀，制备成有机酸固体粉剂。

（2）制备活性益生菌固体粉剂

1）乳酸菌发酵液的制备

乳酸菌的活化培养：将甘油冻存管中保藏菌种乳酸菌（嗜酸乳杆菌CGMCC No.5093或约氏乳杆菌CGMCC No.4926）用接种针在MRS琼脂培养基平板中划线，37℃恒温培养20h。然后将平板上长出的单菌落接种至装有100mLMRS液体培养基的250mL锥形瓶中，37℃恒温培养20h。再次将培养好的菌液在MRS培养基平板上划线培养，37℃恒温培养20h后，将单菌落接种至装有100mLMRS液体培养基的250mL锥形瓶中，37℃恒温培养20h。将以上操作重复3次，完成乳酸菌的活化。

乳酸菌种子液的制备：将活化好的乳酸菌菌液以5%接种量加入5L发酵罐。培养参数为：温度，37℃；搅拌速度，50rmp；pH值，6.0±0.5；培养时间，24h。发酵过程中加入0.5-1%的CaCO₃，调节pH在6.2~6.5；发酵8h后进行补料，即加入50%的葡萄糖200mL。

将上述乳酸菌液体种子液以1%的接种量加入到50L发酵罐中，培养参数为：温度，37℃；搅拌速度，50rmp；pH值，6.0±0.5；培养时间，20h。发酵过程中加入0.5-1%的CaCO₃，调节pH在6.2~6.5；发酵8h后进行补料，即加入50%的葡萄糖1L。

培养乳酸菌所用的MRS液体培养基配方如下：蛋白胨，10.0g/L；牛肉膏，8.0g/L；酵母膏，4.0g/L；葡萄糖，20.0g/L；吐温80，1mL/L；磷酸氢二钾，2.0g/L；三水乙酸钠，5.0g/L；柠檬酸三铵，2.0g/L；七水硫酸镁，0.2g/L；硫酸锰，0.05g/L；pH6.2±0.2。

MRS琼脂培养基是在MRS液体培养基的基础上添加琼脂15g/L。

50L发酵罐增殖培养乳酸菌所用的优化培养基配方如下：蛋白胨，10.0g/L；牛肉膏，8.0g/L；酵母膏，6.0g/L；葡萄糖，25.0g/L；吐温80，1mL/L；磷酸氢二钾，3.0g/L；三水乙酸钠，5.0g/L；柠檬酸三铵，2.0g/L；七水硫酸镁，0.2g/L；硫酸锰，0.05g/L；pH6.2±0.2。

2）枯草芽孢杆菌发酵液的制备

枯草芽孢杆菌的活化培养：将甘油冻存管中保藏菌种的枯草芽孢杆菌用接种针在MNB琼脂培养基平板中划线，30℃恒温培养20h。然后将平板上长出的单菌落接种至装有100mL MNB液体培养基的250mL锥形瓶中，30℃恒温培养20h。再次将培养好的菌液在MNB培养基平板上划线培养，30℃恒温培养20h后，将单菌落接种至装有100mL MNB液体培养基的250mL锥形瓶中，30℃恒温培养20h。将以上操作重复3次，完成枯草芽孢杆菌的活化。

枯草芽孢杆菌种子液的制备：将活化好的枯草芽孢杆菌菌液以5%接种量加入5L发酵罐。培养参数为：温度，30℃；搅拌速度，250rmp；pH值，7.0±0.5；培养时间，24h。

将上述枯草芽孢杆菌液体种子液以1%的接种量加入到50L发酵罐中，培养参数为：温度，30℃；搅拌速度，250rmp；pH值，7.0±0.5；培养时间，8h。然后加入补料培养基，控制发酵液内总糖在2-4%g/L，继续培养12h。

培养枯草芽孢杆菌所用的MNB液体培养基配方如下：葡萄糖，5.0g/L；蛋白胨，5.0g/L；牛肉膏，3.0g/L；酵母浸粉，1.0g/L；七水硫酸镁，0.5g/L；硫酸锰，0.005g/L；pH7.0±0.2。

MNB琼脂培养基是在MNB液体培养基的基础上添加琼脂15g/L。

50L发酵罐增殖培养枯草芽孢杆菌8h前所用培养基配方如下：葡萄糖，5.0g/L；蛋白胨，5.0g/L；牛肉膏，3.0g/L；酵母浸粉，1.0g/L；七水硫酸镁，0.5g/L；硫酸锰，0.005g/L；pH7.0±0.2。

枯草芽孢杆菌补料培养基配方如下：葡萄糖，150.0g/L；蛋白胨，50.0g/L；pH7.0±0.2。

3）枯草芽孢杆菌和乳酸菌菌粉制备

取枯草芽孢杆菌发酵液10kg与100目沉淀二氧化硅10kg置于混合机内混合均匀，干燥制成枯草芽孢杆菌固体粉剂；另取约氏乳杆菌发酵液10kg与100目沉淀二氧化硅10kg置于混合机内混合均匀，干燥制成约氏乳杆菌固体粉剂。

（3）制备仔猪用生物活性酸化剂

将（1）中得到的有机酸固体粉剂30kg加入（2）中得到的枯草芽孢杆菌粉剂与约氏乳杆菌固体粉剂，混合均匀，得到本发明中的一种仔猪用生物活性酸化剂产品。

实施例2

（1）制备混合有机酸固体粉剂

取饲用级DL-乳酸20kg、柠檬酸4.7kg、丁酸钠12.3、乙酸10kg、延胡索酸5kg，密闭加热溶解完全，通过无菌管道输送至于混合机内，喷涂于40kg60目沉淀二氧化硅颗粒上，使吸附均匀，制备成有机酸固体粉剂。

（2）制备活性益生菌固体粉剂

1）乳酸菌发酵液的制备同实施例1。

2）枯草芽孢杆菌发酵液的制备同实施例1。

3）枯草芽孢杆菌和乳酸菌菌粉制备。

取枯草芽孢杆菌发酵液13kg与100目沉淀二氧化硅10kg置于混合机内混合均匀，干燥制成枯草芽孢杆菌固体粉剂；另取嗜酸乳杆菌发酵液13kg与100目沉淀二氧化硅10kg置于混合机内混合均匀，干燥制成嗜酸乳杆菌固体粉剂。

（3）制备仔猪用生物活性酸化剂

将（1）中得到的有机酸固体粉剂的46kg加入（2）中得到的枯草芽孢杆菌粉剂与嗜酸乳杆菌固体粉剂，混合均匀，得到本发明中的一种仔猪用生物活性酸化剂产品。

实施例3

（1）制备混合有机酸固体粉剂

取饲用级DL-乳酸18kg、柠檬酸10kg、丁酸钠18kg、乙酸9kg、延胡索酸5kg，密闭加热溶解完全，通过无菌管道输送至于混合机内，喷涂于40kg100目沉淀二氧化硅颗粒上，使吸附均匀，制备成有机酸固体粉剂。

（2）制备活性益生菌固体粉剂

1）乳酸菌发酵液的制备同实施例1。

2）枯草芽孢杆菌发酵液的制备同实施例1。

3）枯草芽孢杆菌和乳酸菌菌粉制备。

取枯草芽孢杆菌发酵液14kg与200目沉淀二氧化硅10kg置于混合机内混合均匀，干燥制成枯草芽孢杆菌固体粉剂；另取嗜酸乳杆菌发酵液7kg和约氏乳杆菌发酵液7kg与200目沉淀二氧化硅10kg置于混合机内混合均匀，干燥制成嗜酸乳杆菌和约氏乳杆菌混合菌固体粉剂。

（3）制备仔猪用生物活性酸化剂

将（1）中得到的有机酸固体粉剂45kg加入（2）中得到的枯草芽孢杆菌粉剂与嗜酸乳杆菌和约氏乳杆菌混合菌固体粉剂，混合均匀，得到本发明中的一种仔猪用生物活性酸化剂产品。

试验例1本发明仔猪用生物活性酸化剂对断奶仔猪的饲用效果

1、试验动物

本试验选用96头28日龄断奶且平均体重为7.5±0.2kg的健康大白×长白二元杂交去势公猪。

2、试验设计

用市售的一种饲料添加用酸化剂（购买于四川省畜科饲料有限公司）产品作为对照组，本发明的仔猪用生物活性酸化剂产品（实施例1~3）作为试验组1~3。按体重一致的原则，将96头仔猪随机分为4个处理，每个处理3个重复，每个重复8头猪，预饲4天，试验正式期21天。

3、试验日粮

依据中国猪饲养标准（2004）配制日粮，见表1。

表1试验日粮配方及营养成分表(饲喂基础）

¹预混料为每kg粮提供以下营养成分：维生素A，12,000IU；维生素D3，2,500IU；维生素E，30IU；维生素K3，3mg；维生素B12，0.012mg；核黄素，4mg；尼克酸，40mg；泛酸，15mg；氯化胆碱，400mg；叶酸，0.7mg；维生素B1，1.5mg；维生素B6，3mg；生物素，0.1mg；锌，105mg；锰，22mg；铁，84mg；铜，225mg；碘，0.50mg；硒，0.35mg。

²粗蛋白、钙和总磷为实测值，其余为计算值。

4、饲养管理

试验采用全封闭式猪舍。舍内温度、通风强度和湿度自动化控制，舍温在试验开始时保持在30℃，然后每周下降1.5℃，最终猪舍温度恒定为26℃。试验仔猪按圈饲养，乳头式饮水器。粉料饲喂，自由采食和饮水。按常规管理程序进行驱虫和免疫。所有试验操作按照中国农业大学动物福利的相关程序和要求执行。

5、统计分析

采用SAS软件（SAS Institute，1996）中的单因素方差分析模型进行数据分析，结果用均值及平均标准误表示，P<0.05为差异显著。

6试验结果与分析

绝食12h后，于试验第21d，称重和结料用于计算平均日增重、平均日采食量和料重比，试验结果见表2。与对照组相比，试验组仔猪的平均日增重显著提高（P＜0.05），平均日采食量极显著增加（P＜0.01），同时，与对照组相比，试验组料重比降低，其中试验组2和试验组3仔猪料重比显著降低（P＜0.05），这说明本发明酸化剂的作用的发挥与其中所含的益生菌的种类、菌粉含量有关，因为益生菌能够通过抑制大肠杆菌、沙门氏菌等病原微生物的繁殖，促进有益菌群的生长；且益生菌分泌的各种酶有助于提高饲料的利用率，从而达到增加经济效益的目的。另外，试验也观察到试验组仔猪采食旺盛，精神充沛，拉稀等异常情况较少，体观较好。

表2生物活性酸化剂对仔猪生长性能的影响

以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明技术原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

Claims (9)

1.一种仔猪用生物活性酸化剂，其特征在于，根据如下步骤进行制备：

1）将30-60重量份的混合有机酸均匀吸附于30-50重量份的沉淀二氧化硅，制成有机酸固体粉剂；

2）将10-15重量份活性益生菌发酵液与10重量份的沉淀二氧化硅混合均匀，干燥制成活性益生菌固体粉剂；

3）将重量比50%的步骤1）所得有机酸固体粉剂和步骤2)所得活性益生菌固体粉剂混合均匀即得。

2.如权利要求1所述的仔猪用生物活性酸化剂，其特征在于，所述活性益生菌固体粉剂中益生菌活菌含量为10⁹-10¹¹CFU/g。

3.如权利要求1或2所述的仔猪用生物活性酸化剂，其特征在于，所述的沉淀二氧化硅的粒度为60-200目。

4.如权利要求1或2所述的仔猪用生物活性酸化剂，其特征在于：所述的混合有机酸包括DL-乳酸15-20重量份，柠檬酸4-10重量份，丁酸钠10-20重量份，乙酸0.1-10重量份和延胡索酸0.3-6重量份。

5.如权利要求1或2所述的仔猪用生物活性酸化剂，其特征在于，所述的活性益生菌为枯草芽孢杆菌和乳酸菌的混合物。

6.如权利要求5所述的仔猪用生物活性酸化剂，其特征在于，所述的乳酸菌为嗜酸乳杆菌和/或约氏乳杆菌。

7.含有权利要求1~6任一项所述的仔猪用生物活性酸化剂的仔猪饲料添加剂。

8.含有权利要求7所述添加剂的仔猪用预混料。

9.含有权利要求7所述添加剂的仔猪用配合料。