CN102762541A - 作为趋化因子受体的调节剂的二氮杂*衍生物 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及新的式(I)的二环化合物及其药用盐，
Figure DPA00001545560500011
其中n，m，p，A，L，R1，R2，R3，R4，R5，R6，R7，R7，R8，R9，和R10如在说明书和权利要求书中定义。这些化合物是CCR2受体、CCR5受体和/或CCR3受体的拮抗剂，并且可以用作药剂。

Description

作为趋化因子受体的调节剂的二氮杂*衍生物
本发明涉及新的式(I)的杂环化合物，
Figure BPA00001545560700012
其中
是单键或双键，条件是当
Figure BPA00001545560700014
是双键时，R5或R6之一不存在；
A是芳基或芳基甲基，其中所述环任选地被1-3个取代基取代，所述取代基独立地选自由下列各项组成的组中：卤素，芳基，杂芳基，C1-6烷基，卤代C1-6烷基，C1-6烷氧基和卤代C1-6烷氧基；
L是键，N(R’)-C(＝O)，NH-C(＝S)，或CH＝CH-C(＝O)，其中R’是氢或C1-4烷基；
R1和R2彼此独立地选自由下列各项组成的组中：
-C1-6烷基，
-C3-6烯基，
-C3-6炔基，
-羟基C2-6烷基，
-C1-6烷氧基C2-6烷基，
-C3-7环烷基，其任选地被1-3个取代基取代，所述取代基独立地选自由Rd组成的组中：
-C3-7环烷基C1-6烷基，其中所述C3-7环烷基任选地被1-3个取代基取代，所述取代基独立地选自由Rd组成的组中：
-C7-10二环烷基，
-苯基C1-3烷基，其中所述苯环任选地被1-3个取代基取代，所述取代基独立地选自由Rd组成的组中：
-杂芳基C1-3烷基，其中所述杂芳基任选地被1-3个取代基取代，所述取代基独立地选自由Rd组成的组中：
-杂环基，其任选地被1-3个取代基取代，所述取代基独立地选自由Rd组成的组，或
-杂环基C1-6烷基，其中所述杂环基任选地被1-3个取代基取代，所述取代基独立地选自由Rd组成的组中；或
R1和R2，与它们所连接的氮原子一起形成任选地被一到三个取代基取代的杂环基，所述取代基独立地选自由Rd组成的组中，并且其中由R1和R2形成的所述杂环基的环碳原子之一任选地被C＝O或SO2取代；和/或
由R1和R2形成的杂环基的环碳原子之一也是作为C3-7环烷基或杂环基的另一个环的环碳原子，其任选地被C1-6烷基取代，并且其中所述另一个环的一个或两个环碳原子任选地被羰基取代；
R3和R4彼此独立地选自由下列各项组成的组中：
-氢，
-羟基，
-C1-6烷基，
-C1-6烷氧基，
-C3-7环烷基，
-C3-7环烷基C1-6烷基，
-C1-6烷氧基羰基，
-羧基，
-氨基甲酰基，
-单或二-C1-6烷基取代的氨基甲酰基，
-C1-6烷氧基羰氧基，
-单或二-C1-6烷基取代的氨基羰氧基，
-C1-20烷基羰氧基-C1-6烷基，
-C1-20烷氧基羰氧基-C1-6烷基，
-芳基羰氧基-C1-6烷基，其中所述芳基任选地被一个到三个取代基取代，所述取代基独立地选自由下列各项组成的组中：卤素，C1-6烷基，卤代C1-6烷基，C1-6烷氧基和卤代C1-6烷氧基；
-单或二-C1-6烷基取代的氨基羰氧基-C1-6烷基，
-芳基取代的氨基羰氧基-C1-6烷基，其中所述芳基任选地被一个到三个取代基取代，所述取代基独立地选自由下列各项组成的组中：卤素，C1-6烷基，卤代C1-6烷基，C1-6烷氧基和卤代C1-6烷氧基；
-羟基-C1-6烷基，
-C1-6烷氧基-C1-6烷基，
-卤素，或
-卤代C1-6烷基；
p是0或1；
R5和R6独立地是氢，C1-6烷基或C3-7环烷基，其中所述C1-6烷基和所述C3-7环烷基任选地被一个到三个取代基取代，所述取代基独立地选自由下列各项组成的组中：氨基，羟基，羧基，氨基甲酰基，单或二-C1-6烷基取代的氨基甲酰基和C1-6烷氧基羰基；或
R5和R6，与它们所连接的碳原子一起形成C3-7环烷基或杂环基；
R7，R8，R9和R10彼此独立地选自由下列各项组成的组中：
-氢，
-羧基，
-氨基甲酰基，
-单或二-C1-6烷基取代的氨基甲酰基，
-C1-6烷基，其任选地被1-3个取代基取代，所述取代基独立地选自由下列各项组成的组中：羟基，C1-6烷氧基，羧基，氨基甲酰基，单或二-C1-6烷基取代的氨基甲酰基和C1-6烷氧基羰基，芳基和杂芳基，其中所述芳基和所述杂芳基任选地被一个到三个取代基取代，所述取代基独立地选自由下列各项组成的组中：卤素，
C1-6烷基，卤代C1-6烷基，C1-6烷氧基和卤代C1-6烷氧基；
-C3-7环烷基或
-芳基；
Rd是羟基，氰基，NRaRb，卤素，C1-6烷基，卤代C1-6烷基，羟基C1-6烷基，C1-6烷氧基，C1-6烷氧基C1-6烷基，C3-7环烷基，C1-6烷氧基羰基，C1-6烷基-羰氧基，酰基，-C(O)NRaRb，
-NRa-C(O)-Rb，-NRa-C(O)-ORb，-NRa-C(O)-NRb，-NRa-SO2-Rb，
-NRa-SO2-NRbRc，-OC(O)NRaRb，-OC(O)ORa，C1-6烷基磺酰基，C1-6烷基亚硫酰基，C1-6烷硫基，苯基，苯基C1-3烷基，杂芳基，杂芳基C1-3烷基和杂环基，并且所述苯基和所述苯基C1-3烷基的苯基，所述杂芳基和所述杂芳基C1-3烷基的杂芳基，和所述杂环基任选地被1-3个取代基取代，所述取代基独立地选自由下列各项组成的组中：羟基，氰基，NRaRb，卤素，C1-6烷基，卤代C1-6烷基，羟基C1-6烷基，C1-6烷氧基羰基，酰基，-C(O)NRaRb，-NRa-C(O)-Rb，
-NRa-C(O)-ORb，-NRa-C(O)-NRb，-NRa-SO2-Rb，-NRa-SO2-NRbRc，
-OC(O)NRaRb，-OC(O)ORa，C1-6烷基磺酰基，C1-6烷基亚硫酰基和C1-6烷硫基，并且所述杂环基的一个或两个环碳原子任选地被羧基取代；
Ra，Rb和Rc独立地是氢或C1-6烷基；
n是0-2的整数；
m是0-2的整数；
m+n是0-3的整数；
或其前药或其药用盐。
此外，本发明涉及用于制备上述化合物的方法和中间体，包含所述化合物的药物制剂，这些化合物用于制备药物制剂的应用。
式(I)的化合物是CCR2受体(趋化因子受体2/单核细胞趋化蛋白1受体)拮抗剂和/或也是CCR5受体(趋化因子受体5)和/或CCR3受体(趋化因子受体3)拮抗剂。趋化因子是小的、具有分泌促炎细胞因子功能的家族，其作为白细胞的化学引诱物发挥作用。响应于炎性信号，它们促进白细胞从血管床运输到周围组织。趋化因子结合于受体(GPCRs)后，趋化作用通过启动涉及增加的Ca-流出的信号传导途径，抑制cAMP生产，重排细胞骨架，激活整联蛋白和细胞迁移过程和增加粘附蛋白的表达而起始。
认为促炎趋化因子涉及动脉粥样硬化和其它具有炎性成分的重要疾病的发展，如类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis)，哮喘(asthma)，多发性硬化(multiple sclerosis)，移植排斥(transplant rejection)和局部缺血再灌注损伤(ischemia reperfusion injury)，其中对肾病(nephropathy)和外周血管疾病(peripheral vascular diseases)具有特别明显的作用。认为单核细胞趋化蛋白1是在这些疾病中通过在单核细胞和在一些T淋巴细胞上的CCR2受体介导炎性过程的主要的刺激趋化因子。此外，涉及的MCP-1/CCR2与代谢综合征进展到肥胖症和糖尿病的更严重阶段相关。CCR2还通过其与CCR5(具有作为病毒进入宿主细胞的共同受体的作用)的杂二聚体化与HIV感染相关，并且因此与自体免疫疾病的进程相关。
因此，CCR2可以是用于治疗外周血管疾病和更具体地用于治疗患有重症肢体缺血的患者的新药物的靶标。此外，来自开发关于此适应症的新CCR2药物的研究结果和经验可以促进动脉粥样硬化治疗的随后发展。存在来自在wt或apoE-/-或LDL-R-/-背景中的MCP-1和CCR2ko小鼠的动物模型的大量信息，显示MCP-1/CCR2途径对于单核细胞/巨噬细胞募集是必需的，并且对于内膜增生和动脉粥样硬化病灶的形成和稳定性也是必需的。此外，许多报道描述MCP-1/CCR2途径涉及人损伤后和许多炎性过程，包括涉及血管床。
本发明提供新的式(I)化合物，其是CCR2受体拮抗剂，还具有针对CCR3和CCR5的一些拮抗剂活性。
除非另外指出，提出下列定义来举例说明和定义用于描述本发明的各种术语的含义和范围。
术语“卤素”，“卤素原子”或“卤代”指氟、氯、溴或碘。优选的“卤素”基团是氟或氯。
术语“C1-6烷基”或“低级烷基”，单独地或与其他基团组合，指具有1-6个碳原子的支链或直链单价烷基原子团。该术语进一步例示为这样的原子团如甲基，乙基，正丙基，异丙基，正丁基，仲丁基，叔丁基。更优选C1-4烷基或C1-3烷基。术语“C2-6烷基”含义与“C1-6烷基”相同，除了C2-6烷基具有2-6个碳原子；并且术语“C3-6烷基”含义与“C1-6烷基”相同，除了C3-6烷基具有3-6个碳原子；等。术语“C1-20烷基”的含义与“C1-6烷基”相同，除了C1-20烷基具有1-20个碳原子。
术语“C1-20烷基羰氧基-C1-6烷基”指基团Rb1-C(O)-O-Rb2，其中Rb2是C1-6亚烷基并且Rb1是如上定义的C1-20烷基。
术语“C1-20烷氧基羰氧基-C1-6烷基”指基团Ra3-C(O)-O-Rb3，其中Rb3是C1-6亚烷基并且Ra3是如上定义的C1-20烷氧基。
术语“C1-6烷氧基，”单独地或与其它基团组合，意为基团R’-O-，其中R’是C1-6烷基。
术语“C1-6烷氧基-羰基”指基团Ra1-C(O)-，其中Ra1是如上定义的C1-6烷氧基。
术语“C1-6烷氧基-C1-6烷基”意为如本文定义的由C1-6烷氧基取代的C1-6烷基。
术语“C1-6烷氧基-羰氧基”指基团Ra2-C(O)-O-，其中Ra2是如上定义的C1-6烷氧基。
术语“C1-6烷基-羰氧基”指基团Ra2-C(O)-O-，其中Ra2是如上定义的C1-6烷基。
术语“芳基”，单独或与其它基团组合，意为由包含6-14个碳原子的一个或多个稠环组成的环状芳香烃原子团，例如苯基或萘基。术语“芳基甲基”优选地意为苯基-CH2-或萘基-CH2原子团。
术语“苯基-C1-3烷基”意为由苯基取代的C1-3烷基，如本文定义。
术语“芳基羰氧基-C1-6烷基”指基团Rc1-C(O)-O-Rc2-，其中Rc2是C1-6亚烷基并且Rc1是芳基，如上定义。
术语“C3-6烯基”，单独地或与其它基团组合，意为包含碳-碳双键的具有3-6个碳原子的直链或支链烃残基，条件是C3-6烯基与该分子的余下部分的连接点的碳原子不与C3-6烯基的另一个碳原子通过碳-碳双键结合。C3-6烯基的实例是2-丙烯基。
术语“C1-6亚烷基”，单独地或与其它基团组合，意为1-6个碳原子的支链或直链饱和二价烃原子团，如亚甲基，亚乙基，四甲基亚乙基。
术语“C3-6-炔基”，单独地或与其它基团组合，意为具有3-6个碳原子的包含碳-碳三键的直链或支链烃残基，条件是C3-6炔基与该分子的余下部分的连接点的碳原子不与C3-6炔基的另一个碳原子通过碳-碳三键结合。C3-6炔基的实例是2-丙炔基。
术语“羧基”指基团-C(O)OH。
术语“氨基甲酰基”指基团-C(O)NH2。
术语“C3-7环烷基，”单独地或与其它基团组合，意为3-7个环碳的饱和单价单环烃原子团(例如，环丙基，环丁基或环己基)。
术语“C3-7环烷基C1-6烷基”意为由一个或多个，优选地一个或两个如本文定义的C3-7环烷基取代的C1-6烷基。
术语“C7-10二环烷基，”单独地或与其它基团组合，意为具有两个环的7-10个环碳的饱和单价环烃原子团，其中一个环的两个或多个环碳原子是其它环的环碳原子(例如，二环[2.2.1]庚基)。
术语“卤代C1-6烷氧基，”单独地或与其它基团组合，意为被一个或多个卤素取代的C1-6烷氧基。在具体的实施方案中，C1-6烷氧基被1-3个卤素取代。
术语“卤代C1-6烷基”意为被一个或多个相同或不同的卤素原子取代的C1-6烷基。实例是1-氟甲基，二氟甲基，三氟甲基，1-氟乙基，2-氟乙基和2，2，2-三氟乙基。最优选的“卤代C1-6烷基”是三氟甲基。
术语″杂芳基″单独或与其它基团组合，意为具有1-3个环杂原子的5-10个环原子的芳香单环或二环芳香原子团，所述杂原子独立地选自N，O，和S，余下的环原子是C。更具体地，术语“杂芳基”包括但不限于，吡啶基，呋喃基，噻吩基，噻唑基，异噻唑基，三唑基，咪唑基，异唑基，吡咯基，嘧啶基，吡唑基，吡嗪基，嘧啶基，苯并呋喃基，四氢苯并呋喃基，异苯并呋喃基，苯并噻唑基，苯并异噻唑基，苯并三唑基，吲哚基，异吲哚基，苯并
Figure BPA00001545560700081
唑基，喹啉基，四氢喹啉基，异喹啉基，苯并咪唑基，苯并异唑基或苯并噻吩基，咪唑并[1，2-a]-吡啶基，咪唑并[2，1-b]噻唑基，及其衍生物。最优选的杂芳基是异喹啉基，吡啶基和喹啉基。术语“杂芳基甲基”意为杂芳基-CH2-原子团。
术语“杂芳基-C1-3烷基”意为被杂芳基取代的C1-3烷基，如本文定义。
术语“杂环基”，单独或与其它基团组合，意为4-9个环原子的非芳香族单或二环原子团，其中1-3个环原子是独立地选自N，O和S(O)n的杂原子(其中n是0-2的整数)，余下的环原子是C。杂环基原子团的实例包括，但不限于，氮杂环丁烷基，吡咯烷基，六氢氮杂
Figure BPA00001545560700083
基，氧杂环丁烷基，四氢呋喃基，四氢苯硫基，
Figure BPA00001545560700084
唑烷基，噻唑烷基，异
Figure BPA00001545560700085
唑烷基，吗啉基，哌嗪基，哌啶基，四氢吡喃基，硫代吗啉基，奎宁环基，咪唑啉基或6-氮杂-螺[2，5]辛-6基。更优选的杂环基是哌啶基或6-氮杂-螺[2，5]辛-6基。
术语“杂环基-C1-3烷基”意为被一个杂环基取代的C1-3烷基，如本文定义。
术语“羟基C1-6烷基”意为由一个或多个，优选地一个羟基取代的C1-6烷基。
术语“单或二-C1-6烷基取代的氨基羰基”指基团-OC(O)NRb1Rc1其中Rb1和Rc1的至少一个是C1-6烷基，且另一个是氢或C1-6烷基。
术语“单或二-C1-6烷基取代的氨基羰氧基”指基团-OC(O)NRv1Rv2，其中Rv1和Rv2的至少一个是C1-6烷基，且另一个是氢或C1-6烷基。
术语“酰基”意为R-C(O)-，其中R是C1-6烷基，卤代C1-6烷基，C3-7环烷基或C3-7环烷基C1-6烷基。
术语“单或二-C1-6烷基取代的氨基羰氧基-C1-6烷基”意为由单或二-C1-6烷基取代的氨基羰氧基取代的C1-6烷基，如上定义。
术语，“C1-6烷基磺酰基”，“C1-6烷基亚硫酰基”和“C1-6烷硫基”分别意为C1-6烷基-SO2-，C1-6烷基-SO-和C1-6烷基-S-。
关于其定义在上文给出的化学基团的优选原子团是在实施例中具体例示的那些。
式(I)的化合物可以形成药用酸加成盐。所述药用盐的实例是式(I)的化合物与生理相容的无机酸形成的盐，所述无机酸如盐酸、氢溴酸、硫酸、亚硫酸或磷酸；或与有机酸形成的盐，所述有机酸如甲磺酸、对甲苯磺酸、乙酸、乳酸、三氟乙酸、柠檬酸、富马酸、马来酸、酒石酸、琥珀酸或水杨酸。术语″药用盐″指这样的盐。
″任选的″或″任选地″意为随后描述的事件或情形可以但不必需发生，并且描述包括其中事件或情形发生的例子和其中事件或情形不发生的例子。例如，“任选地被烷基取代的芳基”意为烷基可以但不必需存在，并且该描述包括其中芳基基团被烷基取代的情形和芳基基团未被烷基基团取代的情形。
″药用赋形剂″意为用于制备药物组合物的赋形剂，其通常是安全无毒的并且在生物学和其它方面都不是不合需要的，并且包括可被接受用于兽医应用以及人药物应用的赋形剂。用在说明书和权利要求书中的“药用赋形剂”包括一种和多于一种的这样的赋形剂的两种情形。
术语″独立地″用于本文时意指变量应用的任一种情形都与在同一化合物中的具有相同或不同定义的变量的存在与否不相关。因此，在其中R″出现两次并且被定义为“独立地碳或氮”的化合物中，两个R″都可以是碳，两个R″都可以是氮，或一个R″可以是碳，而另一个是氮。
当任何变量(例如R1，R2)在描绘和描述本发明使用或要求保护的化合物的任何结构部分或式中存在不只一次时，其在每次存在的定义独立于其在任一其它存在的定义。此外，取代基和/或变量的组合仅在如果所述化合物导致化学稳定的化合物时是允许的。
具有相同的分子式但是在性质或在其原子结合的顺序或其原子在空间的排列上不同的化合物被称为“异构体”。在空间上其原子排列不同的异构体被称为“立体异构体”。彼此不是镜像的立体异构体被称为“非对映异构体”，而彼此是不可重叠的镜像的那些被称为“对映异构体”。当化合物具有不对称中心时，例如如果碳原子与四个不同的基团结合时，一对对映异构体是可能的。对映异构体可以通过其不对称中心的绝对构型来表征并且通过Cahn，Ingold和Prelog的R-和S-程序化原则进行描述，或通过其中分子旋转偏振光平面的方式进行描述，并被称为右旋或左旋的(即，分别为(+)或(-)-异构体)。手性化合物可以作为个体对映异构体或作为其混合物存在。将包含等比例的对映异构体的混合物称为“外消旋混合物”。
式(I)化合物可以具有一个或多个不对称中心。除非另外指出，在说明书和权利要求书中具体化合物的描述或命名意欲包括其个体对映异构体和混合物，外消旋或其他，以及个体差向异构体及其混合物。用于确定立体化学和分离立体异构体的方法是本领域公知的(见在“Advanced Organic Chemistry(高级有机化学)”，第4版J.March，JohnWiley和Sons，New York，1992中的讨论)。
尽管前文描述了本发明的宽泛定义，优选式(I)的某些化合物。
i)在式(I)的化合物中，A是苯基或萘基，其中所述苯基和所述萘基任选地被一到三个取代基取代，所述取代基选自由下列各项组成的组中：卤素、卤代C1-6烷基和卤代C1-6烷氧基。优选地，A是被一个或两个取代基取代的苯基，所述取代基选自由卤素原子、三氟甲基和三氟甲氧基组成的组中，更优选地所述取代基独立地选自由下列各项组成的组中：氯、氟、三氟甲基和三氟甲氧基。A尤其是3-氯-4-三氟甲基-苯基，4三氟甲基-苯基，3，4双三氟甲基-苯基或3，4-二氯苯基，更尤其是3-氯-4-三氟甲基-苯基，4三氟甲基-苯基或3，4-二氯苯基。
ii)在式(I)的化合物中，R1和R2，与它们所连接的氮原子一起形成任选地被一到三个取代基取代的杂环基，所述取代基独立地选自由下列各项组成的组中：羟基、卤素、C1-6烷基C1-6烷氧基C1-6烷基、-NH-C(O)-O(C1-4烷基)、C1-6烷基-羰氧基、咪唑基、苯基、吡啶基、吡唑基和羟基C1-6烷基；和/或
由R1和R2形成的杂环的环碳原子之一也是作为C3-7环烷基或杂环基的另一个环的环碳原子。
由R1和R2形成的杂环与它们所连接的氮原子一起优选地是哌啶基，或吡咯烷基，并且所述哌啶基和吡咯烷基任选地被一个或两个取代基取代，所述取代基独立地选自由下列各项组成的组中：羟基C1-6烷基和羟基C1-6烷基，和/或
由R1和R2形成的所述哌啶基和吡咯烷基的环碳原子之一也由C3-7环烷基或杂环基共用。
更优选地，在式(I)的化合物中，R1和R2与它们所连接的氮原子一起形成螺-杂环基如6-氮杂-螺[2，5]辛-6-基，5-氮杂螺[2.5]辛-5-基，7-氮杂-螺[3.5]壬-7-基，8-氮杂-螺[4.5]癸-8-基，1，8-二氮杂-螺[4.5]癸-8-基，1，3，8-三氮杂-螺[4.5]癸-8-基，2，8-二氮杂-螺[4.5]癸-8-基，1-氧杂-3，8-二氮杂-螺[4.5]癸-8-基，1-氧杂-8-氮杂-螺[4.5]癸-8-基，2-氧杂-8-氮杂-螺[4.5]癸-8-基，2-氧杂-7-氮杂-螺[3.5]壬-7-基，1-氧杂-7-氮杂-螺[3.5]壬-7-基，9-氮杂-螺[5.5]十一烷-9-基，1-氧杂-4，9-二氮杂-螺[5.5]十一烷-9-基，三氮杂-螺[4.5]癸烷-2，4-二酮，2-氧代-1-氧杂-3，8-二氮杂-螺[4.5]癸-8-基，2，8-二氮杂-螺[4.5]癸烷，氮杂-螺[4.5]癸-8-基，其中所述螺-杂环基的环任选地被1-3个取代基取代，所述取代基独立地选自由下列各项组成的组中：羟基，氧代，烷氧基，氟或C1-6烷基。最优选地，所述螺杂环基是6-氮杂-螺[2，5]辛-6-基，其中所述螺-杂环基的环任选地被一个到两个取代基取代，所述取代基独立地选自由下列各项组成的组中：羟基或C1-6烷基。
在式(I)的化合物中，R1和R2与它们所连接的氮原子一起形成尤其是(S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2，5]辛-6-基。
iii)在式(I)的化合物中，其中R1和R2是甲基。
iv)在式(I)的化合物中，
Figure BPA00001545560700111
优选地是单键。
v)在式(I)的化合物中，p优选地是0。
vi)在式(I)的化合物中，n+m尤其是1或2，优选地n是0或1，m是1或2并且n+m是1或2。
vii)在式(I)的化合物中，其中R3和R4之一是氢，卤素，羟基，C1-4烷基，羟基-C1-4烷基，C1-4烷氧基-C1-4烷基，羧基，氨基甲酰基，单-C1-4烷基取代的氨基甲酰基，或C1-4烷氧基-羰基而另一个是氢。尤其地，R3和R4之一是氢，羟基，C1-4烷基，羟基-C1-4烷基，C1-4烷氧基-C1-4烷基，羧基或C1-4烷氧基-羰基，且另一个是氢。优选地，R3和R4是氢，氟或羟基-C1-4烷基，且另一个是氢。更优选地，R3和R4之一是氢或羟基-C1-4烷基，且另一个是氢。
viii)在式(I)的化合物中，R5和R6之一优选地是氢或C1-4烷基，且另一个是氢。更优选地，R5和R6之一是氢或甲基，且另一个是氢。
ix)在式(I)的化合物中，R7，R8，R9和R10尤其独立地是氢，C1-6烷基或氨基甲酰基，优选地R7，R8，R9和R10独立地是氢或C1-6烷基。优选地，R9和R10之一是氢或C1-4烷基，且另一个是氢，以及R7和R8之一是氨基甲酰基，羧基或氢，且另一个是氢。更优选地，R9或R10之一是甲基，且另一个是氢，以及R7，R8是氢。最优选地，R7，R8，R9和R10是氢。
x)在式(I)的化合物中，L优选地是键，NH-C(＝O)或CH＝CH-C(＝O)。更优选地，L是NH-C(＝O)或键。最优选地，L是NH-C(＝O)。
xi)式(I)的化合物，R5和R6之一优选地是氢或甲基并且另一个是氢；R7，R8，R9和R10是氢，其中L是NHC(＝O)，并且R1和R2与它们所连接的氮原子一起形成(S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2，5]辛-6-基。
xii)本发明优选的化合物是式(I)的化合物，其是
(S)-4-[4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁基]-2-甲基-3-氧代-哌嗪-1-甲酸(4-三氟甲基-苯基)-酰胺；
(S)-4-[(S)-4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-1-羟甲基-4-氧代-丁基]-2-甲基-3-氧代-哌嗪-1-甲酸(3-氯-4-三氟甲基-苯基)-酰胺；
(S)-4-(3-氯-4-三氟甲基-苯基)-1-[4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁基]-3-甲基-哌嗪-2-酮；
1-[(E)-3-(3，4-二氯-苯基)-丙烯酰基]-4-[3-(4-羟基-4-甲基-哌啶-1-基)-3-氧代-丙基]-[1，4]二氮杂
Figure BPA00001545560700121
-5-酮；
4-[4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁基]-5-氧代-[1，4]二氮杂
Figure BPA00001545560700122
-1-甲酸(3-氯-4-三氟甲基-苯基)-酰胺；
1-(3-氯-4-三氟甲基-苯基)-4-[(S)-4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-1-羟甲基-4-氧代-丁基]-[1，4]二氮杂
Figure BPA00001545560700131
-5-酮；
(R)-1-(3，4-双-三氟甲基-苯基)-4-[(S)-4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-1-羟甲基-4-氧代-丁基]-2-甲基-[1，4]二氮杂-5-酮；
(S)-4-[(S或R)-3-氟-4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁基]-2-甲基-3-氧代-哌嗪-1-甲酸(3-氯-4-三氟甲基-苯基)-酰胺；
(S)-4-[(S)-4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-1-羟甲基-4-氧代-丁基]-2-甲基-3-氧代-哌嗪-1-甲酸(3，4-双-三氟甲基-苯基)-酰胺；
(3S，6S)-N1-(3-氯-4-(三氟甲基)苯基)-4-(4-((S)-4-羟基-6-氮杂螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代丁基)-6-甲基-5-氧代哌嗪-1，3-二甲酰胺；
(3S，6S)-4-[4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁基]-6-甲基-5-氧代-哌嗪-1，3-二甲酸3-酰胺1-[(3，4-双-三氟甲基-苯基)-酰胺]。
在另一个实施方案中，本发明提供式(I’)的化合物：
Figure BPA00001545560700133
其中A，L，n，m，p，R3，R4，R5，R6，R7，R8，R9，R10，Rd如上定义。
在另一个实施方案中，本发明提供式(I”)的化合物：
Figure BPA00001545560700141
其中A，L，n，m，R3，R4，R7，R8，R9，R10，Rd如上定义。
一般合成方法
在方案1中，A，L，R1，R2，R3，R4，R5，R6，R7，R8，R9，R10和n，m，p如前定义。其中
Figure BPA00001545560700142
是单键的式(I)化合物由方案1和4中的式(Ia)表示，其中A，L，R1，R2，R3，R4，R5，R6，R7，R8，R9，R10和n，m，p如前定义。
方案1的游离杂环1是商购的或可以用本领域公知的方法或随后描述的方法合成。可以通过在低温的脱质子化作用和烷基化随后进行第二次脱质子化作用和烷基化来将R5，R6-基团引入在适合的被保护的杂环1上。还可以从相应的哌嗪酮(见例如Design and synthesis ofcombinatorial scaffolds-diazepinone and homopiperazine (设计和合成组合支架-二氮杂
Figure BPA00001545560700143
酮和高哌嗪))合成7-元杂环1。Sun，Chung-Ming.Department of Chemistry，National Dong-Hwa University(国立东华大学化学系)，Hualien，Taiwan.Letters in Drug Design & Discovery(2005)，2(1)，48-50)。
式2的化合物(L＝CH＝CH-CO)可以通过与肉桂酸衍生物A-CH＝CH-COOH的反应从仲胺1合成(步骤a)。例如，该反应典型地在存在或不存在碱如三乙胺，二异丙基乙胺，4-甲基吗啉，和/或4-(二甲基氨基)吡啶，和在存在偶联剂如N，N’-二环己基碳二亚胺，1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基-碳二亚胺盐酸盐，O-(苯并三唑-1-基)-N，N，N’，N’-四甲基脲鎓六氟-磷酸盐，O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N，N，N’，N’-四甲基脲鎓六氟-磷酸盐或溴-三-吡咯烷基-磷鎓六氟磷酸盐时，在0℃和80℃之间的温度，在质子惰性溶剂(如二氯甲烷、四氢呋喃、N，N-二甲基甲酰胺，N-甲基吡咯烷酮及其混合物)中进行。
备选地，该反应可以在两个步骤中进行，包括首先形成肉桂酰氯A-CH＝CH-COCl，和随后与胺1在存在碱时进行偶联反应。典型地，用于形成酰基氯所用的试剂是亚硫酰氯，五氯化磷，草酰氯或氰尿酰氯，并且反应通常在不存在溶剂或在存在质子惰性溶剂如二氯甲烷，甲苯或丙酮时进行。可以任选地加入碱，如例如吡啶、三乙胺、二异丙基乙胺或4-甲基吗啉，并且可以使用催化量的N，N-二甲基甲酰胺。获得的肉桂酰氯可以被分离或原样与胺1在质子惰性溶剂(如二氯甲烷，四氢呋喃或丙酮)中在存在碱时进行反应。典型的碱是三乙胺，4-甲基吗啉，吡啶，二异丙基乙胺或4-(二甲基氨基)吡啶，水性饱和的NaHCO3或其混合物。
使用本领域已知的方法和试剂，式2的化合物(L＝键)可以通过与卤化物A-Hal(Hal是F，Cl，Br，或I)或硼酸A-B(OH)2反应自仲胺1来合成。
例如，反应可以用卤化物A-Hal，在20℃和200℃之间的温度，在存在碱(例如碳酸钾，碳酸铯或三乙胺)时在溶剂(如乙腈，N，N-二甲基甲酰胺或N-甲基吡咯烷酮)中，任选地在微波照射下进行。
备选地，反应可以用卤化物A-Hal，在存在铜(I)盐，例如碘化铜(I)，或氧化铜(I)时在存在碱(例如磷酸钾，叔丁醇钠或碳酸铯)和任选地二醇配体，例如1，2-乙二醇时，在溶剂如2-丙醇或N-甲基吡咯烷酮中，在60℃和120℃之间的温度进行。
备选地，反应可以在20℃和120℃之间的温度，在溶剂如甲苯，1，2-二甲氧基乙烷或1，4-二
Figure BPA00001545560700151
烷中，在存在钯源，例如双(三-叔丁基膦)钯(0)，氯化钯(II)或乙酸钯(II)，和膦配体，例如，2，2′-双(二苯膦)-1，1′-联萘基或2′，4′，6′-三异丙基-1，1′-联苯基-2-基二环己基膦，碱例如磷酸三钾，磷酸钾，甲醇钠或碳酸铯时进行。可以使用微波加热。
备选地，反应可以在0℃和40℃之间的温度，在溶剂如二氯甲烷中，在碱(例如三乙胺或吡啶)存在时，在存在无水乙酸铜(II)时，任选地在存在分子筛时，用硼酸A-B(OH)2进行。
用例如NaH作为碱，在0℃，任选地在室温，在溶剂如THF或N，N-二甲基甲酰胺中，在存在3时进行酰胺2的脱质子化作用(L＝CH＝CH-CO或键)(步骤b)。结构单元3是商购的或可以用本领域公知的方法或如在实验部分中所述进行合成。
酯4可以进一步进行操作，例如可以引入或修饰R4或R3。备选地，可以在溶剂如THF中用碱如六甲基二甲硅烷基叠氮化锂/钾或钠，在-78℃到-10℃对酰胺2(L＝CH＝CH-CO或键)进行脱质子化作用，并且可以首先用溴代乙酸甲酯进行烷基化以提供酯4(n，m＝0并且R3＝H，R4＝H)。优选地在-78℃，该酯可以进一步通过例如用六甲基二甲硅烷基叠氮化物在溶剂(如THF中)对酯4(n，m＝0和R3＝H，R4＝H)进行脱质子化作用和用溴代乙酸叔丁酯进行烷基化而被转化为4(n＝0，m＝1和R3＝H，R4＝COOMe，Re＝叔丁基)。酯4(n＝0，m＝1和R3＝H，R4＝COOMe，Re＝叔丁基)也可以进一步例如用在乙醇中的LiBH4选择性还原为4(n＝0，m＝1和R3＝H，R4＝CH2OH，Re＝叔丁基)，用在N，N-二甲基甲酰胺中的甲基碘和NaH作为碱来进行烷基化以提供4(n＝0，m＝1和R3＝H，R4＝CH2OMe，Re＝叔丁基)。
在步骤c，方案1中，酯4被脱保护以提供酸5。在Re是叔丁基的情形中，在0℃和20℃的温度，在溶剂如1，4-二
Figure BPA00001545560700161
烷，水或其混合物中，例如用氯化氢进行脱保护。在Re是苄基的情形中，在存在适合的催化剂例如披钯活性炭时，在溶剂如甲醇、乙醇、四氢呋喃、乙酸乙酯或其混合物中，在1巴到10巴的压力，例如通过氢化进行脱保护。在Re是低级烷基的情形中，在-20℃和120℃之间的温度，在溶剂如水、甲醇、四氢呋喃和其混合物中，例如通过碱介导的水解来进行脱保护。典型的试剂是水性或氢氧化锂，氢氧化钠，氢氧化钾，碳酸氢钠，碳酸钠，碳酸氢钾和碳酸钾。
在方案1，步骤d中，使用本领域已知的试剂和方法，通过与胺HN(R1)(R2)的反应将羧酸5转化为酰胺Ia。例如，反应在下述条件下进行：在质子惰性溶剂如二氯甲烷、四氢呋喃、N，N-二甲基甲酰胺、N-甲基吡咯烷酮及其混合物中，在0℃和80℃之间的温度，在存在或不存在碱如三乙胺，二异丙基乙胺或4-甲基吗啉和在存在偶联剂如N，N’-二环己基碳二亚胺，1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基-碳二亚胺盐酸盐，O-(苯并三唑-1-基)-N，N，N’，N’-四甲基脲鎓六氟-磷酸盐，O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N，N，N’，N’-四甲基脲鎓六氟磷酸盐或溴-三-吡咯烷基-磷鎓六氟磷酸盐和任选地在存在催化剂如1-羟基苯并三唑或二甲基-吡啶-4-基-胺时。
还可以直接将甲基酯4(Re＝Me)转化为最终化合物Ia(步骤e)。将酯4溶解于溶剂如甲醇、乙醇、四氢呋喃或其混合物中并用过量的胺HNR1R2进行处理，并在室温到60℃搅拌1夜到3天。
在酯4(n＝0，m＝1和R3＝H，R4＝CH2OMe，Re＝叔丁基；上述)的情形中，如上所述进行Re脱保护和用氨HNR1R2进行偶联提供最终化合物Ia(n＝0，m＝1和R3＝H，R4＝CH2OMe)。
备选地，可商购或通过1的保护获得的被保护的杂环6(步骤f，PG1是适合的保护基，例如，叔丁基氧基羰基或苄氧基羰基，其可以正交地(orthogonally)脱保护为COORe酯)，可以在前述步骤b和c后被转化为酸7。使用前述的试剂和方法(见步骤d)随后对PG1进行脱保护(步骤g)通过与胺HN(R1)(R2)反应将羧酸7转化为酰胺8。在其中PG1是叔丁氧基羰基的情形中，在0℃和20℃之间温度，在溶剂如1，4-
二
Figure BPA00001545560700171
烷，二氯甲烷，乙醇或其混合物中，例如用氯化氢进行脱保护。在其中PG1是苄氧基羰基的情形中，任选地在存在酸如HCl或乙酸和存在适合的催化剂，例如披钯活性炭时，在溶剂如甲醇，乙醇，四氢呋喃，乙酸乙酯或其混合物中，在1巴和10巴之间的压力例如通过氢化作用进行脱保护。在其中PG1是苄氧基羰基并且N(R1)(R2)是包含环丙基的胺的情形中，在Pt2O上用氢在乙酸中进行氢化作用产生二甲基类似物酰胺8(步骤g)。
可以通过与上述关于步骤a的肉桂酸衍生物A-CH＝CH-COOH或A-CH＝CH-COCl反应自仲胺8合成式Ia(L＝CH＝CH-CO)的化合物。
使用上述关于步骤a的方法和试剂，通过与卤化物A-Hal(Hal是F，Cl，Br，或I)或硼酸A-B(OH)2反应，从仲胺8合成式Ia(L＝键)的化合物。
通过与通式A-N＝C＝O的异氰酸酯或通式A-NH-C(＝O)-O-Ph的氨基甲酸苯酯反应，从仲胺8合成式Ia的化合物，其中L是NH-C(＝O)。
反应典型地在存在或不存在碱如三乙胺，二异丙基乙胺，4-甲基吗啉和/或4-(二甲基氨基)吡啶时，在0℃和120℃之间的温度，在质子惰性溶剂如二氯甲烷，四氢呋喃，N，N-二甲基甲酰胺，N-甲基吡咯烷酮，二甲亚砜，乙腈及其混合物中进行。通式A-N＝C＝O的异氰酸酯或氨基甲酸苯酯A-NH-C(＝O)-O-Ph可商购或可以通过本领域已知的方法进行合成。例如，异氰酸酯A-N＝C＝O可以在0℃到70℃的温度，在溶剂如四氢呋喃中或在0℃到90℃的二氯乙烷中，在存在碱如吡啶时，通过与光气，二光气或三光气反应，从相应的芳基胺A-NH2进行合成。可以在-20℃和20℃之间的温度，在溶剂如四氢呋喃中，通过与氯甲酸苯酯的反应，从相应的芳基胺A-NH2制备氨基甲酸苯酯A-NH-C(＝O)-O-Ph。
其中L是NH-C(＝S)的式Ia的化合物可以通过与通式A-N＝C＝S的异硫氰酸酯反应，从仲胺8合成。典型地在存在或不存在碱如三乙胺，二异丙基乙胺，4-甲基吗啉和/或4-(二甲基-氨基)吡啶时，在0℃和120℃之间的温度，在质子惰性溶剂如二氯甲烷、四氢呋喃、N，N-二甲基甲酰胺、N-甲基吡咯烷酮、二甲亚砜、乙腈及其混合物中进行反应。通式A-N＝C＝S的异硫氰酸酯可以在0℃和70℃之间的温度，在溶剂如四氢呋喃中，在存在碱如吡啶时，通过与硫光气反应从相应的芳基胺A-NH2合成。
使用本领域已知的和在方案4中讨论的试剂和方法可以将在Ia或在任何合成中间体中的取代基R3和/或R4相互转化。
Figure BPA00001545560700191
在方案1中，n，m，p，A，L，R1，R2，R3，R4，R5，R6，R7，R8，R9，R10PG1和Re如上定义。
中间体15可以如在方案2中概述进行合成。
在方案2中，Re是叔丁基，苄基，或低级烷基，例如甲基或乙基，Rf是低级烷基，例如甲基或乙基，Rh是C1-3烷基或苄基并且R3，R4，R5，R6，R7，R8，R9，R10和n，m，p如前定义。
在方案2，步骤a中，用胺10对醛或酮9进行还原胺化作用，形成11a。用于该转化的适合的试剂是硼氢化试剂，例如硼氢化钠、三乙酰氧基硼氢化钠或氰基硼氢化钠。该反应任选地在存在脱水剂如硫酸镁或分子筛时，在-20℃到50℃的温度，在溶剂如甲醇、二氯甲烷、1，2-二氯乙烷、乙酸、水或其混合物中进行。可以将有机-R10复合物用于引入R10结构部分。式9的醛或酮可商购或可以按照本领域公知的方法进行合成。
在方案2，步骤b中，使用本领域已知的方法和试剂将仲胺11a转化为被保护的衍生物11b。例如，在其中PG1是苄氧基羰基的情形中，在0℃和30℃的温度，在溶剂如丙酮、四氢呋喃、水或其混合物中，在存在碱，例如碳酸氢钠时，使用氯甲酸苄基酯进行反应。
在方案2，步骤c中，裂解11b的乙缩醛基团，形成羰基化合物12。在0℃和100℃之间的温度，在溶剂如水、甲醇、丙酮、2-丁酮或其混合物中，在存在酸性催化剂，例如盐酸、甲酸、甲苯4-磺酸或吡啶鎓甲苯4-磺酸盐时进行反应。
在方案2，步骤d中，使用本领域公知的方法，例如还原性胺化作用，通过与胺13反应，将醛或酮12转化为15。0℃和80℃之间的温度，在使用适合的还原剂，例如硼氢化钠、三乙酰氧基硼氢化钠、氰基硼氢化钠或硼烷吡啶复合物，在溶剂如甲醇、乙醇、乙酸、1，2-二氯乙烷或其混合物中进行到中间体14的反应。一般地，中间体14自发环化为杂环15。在不完全的情形中，用催化量的1，5，7-三氮杂二环[5.4.0]癸-5-烯终止环化作用。
在方案2中，n，m，p，R3，R4，R5，R6，R7，R8，R9，R10，PG1，Rf和Re如上定义。
式13的胺可商购或可以如在实验部分中所述进行合成。
在方案3中，A，L，R1，R2，R3，R4，R5，R6，R7，R8，R9，R10和n，m，p如前定义。
中间体12也可以如在方案3中所述进行合成。Rh是C1-3烷基或苄基，PG1是适合的保护基如叔丁氧基羰基或苄氧基羰基。
在方案3，步骤a中，在0℃和60℃之间的温度，将氨基醇16与丙烯酸酯17反应，其是纯净的或在溶剂如甲醇中。接着，使用本领域已知的试剂和方法用适合的保护基对仲胺中间体进行保护，由此形成18。在PG1是叔丁氧基羰基的情形中，任选地在存在碱，例如三乙胺时，在溶剂如二氯甲烷或N，N-二甲基甲酰胺中，例如用二叔丁基二碳酸酯进行反应。在其中PG1是苄氧基羰基的情形中，在存在碱，例如三乙胺或碳酸氢钠时，在溶剂如水、丙酮、四氢呋喃或其混合物中，例如用N-(苄基氧基羰氧基)琥珀酰亚胺或氯甲酸苄基酯进行反应。
式16的氨基醇可商购或可以如在实验部分中所述进行合成。
在步骤b，方案3中，使用本领域已知的试剂和方法，将醇18氧化为醛或酮12。例如，在0℃和25℃之间的温度，在存在碳酸氢钠和催化量的溴化钠或溴化钾时，在水和二氯甲烷的两相混合物中，用次氯酸钠进行氧化。备选地，可以在0℃和40℃之间的温度，在溶剂如二氯甲烷中，在存在催化量的2，2，6，6-四甲基哌啶-1-氧基原子团时，用三氯异氰尿酸进行氧化。备选地，可以在溶剂如二氯甲烷，乙腈或其混合物中，在0℃和40℃之间的温度，在存在化学计量的共氧化剂如4-甲基-吗啉-4-氧化物和分子筛时，用催化量的四丙基铵过镣酸盐进行氧化。备选地，在低于0℃的温度，典型地在-78℃和-60℃之间，在存在有机碱如三乙胺时，在溶剂中如二氯甲烷中，可以使用基于二甲亚砜的试剂，如二甲亚砜-草酰氯，或二甲亚砜-三氟乙酸酐。备选地，在0℃和25℃之间的温度，在存在有机碱如三乙胺时，在二甲亚砜或二甲亚砜-二氯甲烷溶剂混合物中使用吡啶-三氧化硫。
Figure BPA00001545560700231
在方案3中，p，R5，R7，R8，R9，R10，PG1和Rh如上定义。
在方案4中，A，L，R1，R2，R3，R4，R5，R6，R7，R8，R9，R10，Re和n，m，p如前定义。
可以以两种方式将双重保护的中间体15转化为最终化合物Ia(方案4)。对于在A-L部分中关于固定的酰胺的变化，用在方案1的步骤c，步骤d和步骤g中所述的条件，将酯15进行水解(步骤a)，与胺HN(R1)(R2)偶联为酰胺19(步骤b)并将其脱保护为游离胺20(步骤c)。
式Ia的化合物(L＝CH＝CH-CO)可以通过与肉桂酸衍生物(步骤d)，方案1中所述的A-CH＝CH-COOH或A-CH＝CH-COCl反应来从仲胺20合成。
使用在方案1中所述的方法和试剂，通过与卤化物A-Hal(Hal是F，Cl，Br，或I)或硼酸A-B(OH)2反应(步骤d)从仲胺20合成式Ia的化合物(L＝键)。
其中L是NH-C(＝O)的式Ia的化合物可以通过与在方案1中所述的通式A-N＝C＝O的异氰酸酯或通式A-NH-C(＝O)-O-Ph的氨基甲酸苯酯(步骤d)反应从仲胺20进行合成。
其中L是NH-C(＝S)的式Ia的化合物可以通过与如在方案1中所述的通式A-N＝C＝S的异硫氰酸酯反应(步骤d)来从仲胺20进行合成。
关于在酰胺部分和固定的A-L基团中的变化的第二途径，将15进行脱保护(步骤c)为胺21，并将A-L基团引入以提供22(步骤d)，其全都用在方案1中所述的条件进行。还可以按照在方案5中所述的方法合成中间体22(L＝键，p＝0，R8和R10＝H)。用在方案1中所述的条件进行水解为酸并与胺HN(R1)(R2)偶联提供Ia(步骤a和b)。
使用本领域已知的试剂和方法，在Ia或在任何合成中间体中的取代基R3和/或R4可以相互转化。例如，可以用在THF或EtOH中的硼氢化锂或用在THF中原位产生的LiBH2(OMe)2，将酯(R3和/或R4＝C1-6烷氧基羰基)选择性还原为相应的醇(R3和/或R4＝羟甲基)。可以例如在溶剂(如四氢呋喃、N，N-二甲基甲酰胺或N，N-二甲基乙酰胺)中用烷基卤，用氢化钠作为碱，或在存在氧化银(I)时，用烷基卤，将这些醇进一步转化为醚(R3和/或R4＝CH2OC1-6烷基)。关于Ia(R3和/或R4＝CH2OH和L＝NH-(CO或CS))，在存在氧化银(I)时，在乙腈中用烷基卤进行烷基化，提供脲烷基化的Ia(R3和/或R4＝CH2OH和L＝NC1-6烷基-(CO或CS))。类似地，例如通过使用碱(如氢氧化锂或氢氧化钠)，在溶剂(如水、甲醇、四氢呋喃或其混合物)中进行碱介导的水解，可以将酯(R3和/或R4＝C1-6烷氧基羰基)水解为相应的羧酸(R3和/或R4＝COOH)。如在方案1，步骤d中所述，接着可以将这些酸转化为相应的酰胺(R3和/或R4＝氨基羰氧基，单-或二-C1-6烷基取代的氨基羰氧基)。关于Ia或在任何合成中间体(R3和/或R4＝C1-6烷基O-PG2)中，可以裂解保护基PG2，例如用在二
Figure BPA00001545560700241
烷中的HCl来裂解叔丁基-二甲基甲硅烷基保护基或在存在适合的催化剂，例如披钯活性炭时，存在或不存在酸如HCl水溶液时，在溶剂如甲醇、乙醇、四氢呋喃、乙酸乙酯或其混合物中在1巴到10巴的压力下通过氢化作用来裂解保护基，从而提供醇Ia或中间体(R3和/或R4＝C1-6烷基OH)。
Figure BPA00001545560700251
化合物22也可以如在方案5中所述进行合成。
在方案5中，A，R1，R2，R3，R4，R5，R6，R7，R9和n，m如前定义。Re是低级烷基，苄基或叔丁基并且Rf是低级烷基，例如，甲基或乙基，LG是离去基团，例如，氯或溴。L＝键，p＝0，R8和R10＝H。
在方案5，步骤a中，通过与羰基衍生物23A的还原胺化反应或通过与卤化物23B的亲核取代反应，将伯胺13转化为仲胺24。类似于方案2，步骤d，进行与23A的还原胺化反应。例如在溶剂(如甲醇，乙醇，N，N-二甲基甲酰胺或乙腈)中，在0℃到溶剂的沸点的温度，在存在碱(例如，碳酸氢钾，碳酸钾)时，任选地在存在碘化钠时，进行与23B的亲核取代反应。
在方案5，步骤b中，使用本领域技术人员熟知的方法，通过与N-芳基氨基酸25反应，将仲胺24转化为通式26的酰胺。例如，反应在下述条件下进行：在存在偶联剂如N，N’-二环己基碳二亚胺，1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基-碳二亚胺盐酸盐，O-(苯并三唑-1-基)-N，N，N’，N’-四甲基脲鎓六氟磷酸盐，O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N，N，N’，N’-四甲基脲鎓六氟磷酸盐或溴-三-吡咯烷基-磷鎓六氟磷酸盐，在质子惰性溶剂中如二氯甲烷，四氢呋喃，N，N-二甲基甲酰胺，N-甲基吡咯烷酮及其混合物中，在-40℃和80℃之间的温度，在存在或不存在碱如三乙胺，二异丙基乙胺，4-甲基吗啉，和/或4-(二甲基氨基)吡啶时。
备选地，该反应可以在两个步骤中进行，包括首先形成25的酰基卤衍生物，随后在碱存在下与胺24进行偶联反应。典型地，用于形成酰基氯所用的试剂是亚硫酰氯，五氯化磷，草酰氯或氰尿酰氯，并且反应通常在不存在溶剂或在存在质子惰性溶剂如二氯甲烷，甲苯或丙酮时进行。可以任选地加入碱，如例如吡啶、三乙胺、二异丙基乙胺或4-甲基吗啉，并且可以使用催化量的N，N-二甲基甲酰胺。获得的酰基氯可以被分离或原样与胺24在质子惰性溶剂(如二氯甲烷，四氢呋喃或丙酮)中在存在碱时进行反应。典型的碱是三乙胺，4-甲基吗啉，吡啶，二异丙基乙胺或4-(二甲基氨基)吡啶或其混合物。
备选地，所述反应可以在两个步骤中进行，包括首先形成通过与试剂如氯甲酸乙酯、氯甲酸异丁酯或乙酸酐，在溶剂如二氯甲烷或四氢呋喃中，在-30℃和20℃之间的温度反应获得的25的混合酸酐衍生物，随后如上所述与胺24进行反应。
在R3或R4中存在羟基(例如，R3或R4＝羟基或羟甲基)可能会干扰步骤b的酰胺偶联反应的情形中，可以在存在碱如三乙胺或N-甲基吗啉时，通过与氯三甲基甲硅烷反应，作为三甲基甲硅烷基醚来暂时保护24的羟基。
N-芳基氨酸25可商购或可以如在实验部分中所述进行合成。
在方案5，步骤c中，乙缩醛的裂解和26的还原环化作用形成哌嗪酮22(L＝键，p＝0，R8和R10＝H)，如关于方案4的中间体所述。这种转化使用酸，例如三氟乙酸或甲磺酸，和还原剂如硼氢化钠或三乙基甲硅烷，在溶剂如二氯甲烷，1，4-二
Figure BPA00001545560700271
烷，四氢呋喃，水或其混合物中，在一个步骤中进行。备选地，该反应可以在两个步骤中进行，即首先在存在酸，例如三氟乙酸或甲磺酸时，在溶剂如水或二氯甲烷中形成3，4-二氢-1H-吡嗪-2-酮中间体，随后使用适合的催化剂，例如披钯活性炭，在溶剂如甲醇、乙醇、乙酸乙酯或其混合物中，在0℃到50℃之间的温度，在1巴到10巴的压力进行催化氢化作用。
Figure BPA00001545560700272
在方案5中，n，m，p，A，R3，R4，R5，R6，R7，R8，R9，R10，LG，Rf和Re如上定义。式Ib的化合物也可以如在方案6中所述来进行制备。
在方案6中，A，R1，R2，R3，R4，R5，R6，R7，R8，R9，R10和n，m如前定义。Re是低级烷基，苄基或叔丁基。在方案6和7中，其中
Figure BPA00001545560700281
是单键的式(I)化合物由式(Ib)代表，其中
Figure BPA00001545560700282
是双键的式(I)化合物由式(Ib(双键)代表，并且其中p是1，其中A，R1，R2，R3，R4，R5，R6，R7，R8，R9，R10，n和m如前定义。
N-芳基氨基酸27可商购或可以如在实验部分中所述进行合成。硼烷-还原提供醇28(步骤a)。任选地，可以通过Weinreb-酰胺从酸27引入R7，随后与有机-R7复合物反应从而提供酮29。如在方案3，步骤b中所述，可以将醇28氧化为醛29(步骤b)。按照在方案2，步骤d中所述的条件，进行与胺13的还原胺化作用以提供胺30(步骤c)。使用Mukaiyama等(Chemistry Letters，pp.1045-1048，1975)所述的条件，与酸31偶联，所述酸31可商购或可以从相应的酯合成，从而提供中间体32(步骤d)，该中间体32可以用TFA和三乙基甲硅烷(按照在方案5，步骤c中显示的条件)进行环化为33(R5，R6＝H)或34(R5，R6不是H)(步骤e)。在方案6中的中间体33可以进行水解，并与胺HNR1R2偶联(步骤f)以提供最终的不饱和化合物Ib，如在方案4，步骤a和步骤b中所述。烯烃可以在存在乙酸时，用在甲醇中的Pt2O进行选择性氢化，以提供相应的饱和Ib(步骤g)。备选地，通过烯烃33的氢化作用(如与步骤g所述相同的条件)形成的34也可以被水解并与胺HNR1R2偶联以提供最终的不饱和化合物Ib(步骤f)，如在方案4的步骤a和步骤b中所述。
在方案6中，n，m，A，R1，R2，R3，R4，R5，R6，R7，R8，R9，R10，Rf和Re如上定义。
在方案7中，A，R1，R2，R3，R4，R5，R6，R7，R8和n，m如前定义。Re是低级烷基或苄基，R9，R10＝H，p＝1。
也可以如在方案7中所概述来合成最终化合物Ib(L＝键，p＝1)。LG是离去基团，例如，氯，溴，或碘。
在方案7，步骤a中，在50℃到60℃的温度，用例如叔丁基β-卤代alkanate 36对苯胺35进行单烷基化，其中用2，6-二甲基吡啶作为碱，开始不用溶剂，接着在乙腈中进行单烷基化(步骤a)。接着，用相同的条件，用溴乙酸甲酯将该中间体第二次进行烷基化以提供中间体37(步骤b)。
在方案7，步骤c中，对37的甲基酯进行选择性还原，形成醇38。在0℃和40℃之间的温度，在溶剂如甲醇或乙醇中，用适合的还原剂(例如硼氢化锂)或用在THF中原位产生的LiBH2(OMe)2完成该转化。
任选地，可以通过选择性水解甲基酯37，Weinreb-酰胺形成，随后与有机-R7复合物反应来引入R7以提供酮39。如在方案3，步骤b中所述，可以将醇38氧化为醛39(步骤d)。按照在方案2，步骤d中所述的条件，与胺13进行还原性胺化作用以提供胺40(步骤e)。可以将有机-R8复合物用于在亚氨基-中间体中引入R8结构部分。用在方案1，步骤c和步骤d中所述的条件，将叔丁酯40裂解并环化为[1，4]二氮杂
Figure BPA00001545560700301
-5-酮41(步骤f)。水解和与胺HNR1R2的偶联提供最终化合物Ib(步骤g)，如在方案1，步骤c和步骤d中所述。
Figure BPA00001545560700311
在方案7中，n，m，A，R1，R2，R3，R4，R5，R6，R7，R8，R9，R10，LG，和Re如上定义。
式5的中间体也可以如在方案8中所述合成。A，L，R1，R2，R3，R4，R5，R6，R7，R8，R9，R10，m，n和p如前定义。
在方案8，步骤a中，以类似于方案1，步骤a的方式，将仲胺42转化为化合物43。
在方案8，步骤b中，使用本领域已知的试剂和条件，将醇43氧化为羧酸5。例如，在0℃和25℃之间的温度，任选地在存在相转移催化剂如四丁基硫酸氢铵时，在存在碳酸氢钠和催化量的溴化钾和2，2，6，6-四甲基哌啶-1-氧基原子团时，在水和二氯甲烷的两相混合物中，用次氯酸钠进行氧化。备选地，在30℃和70℃之间的温度，在水和乙腈的缓冲(优选地在pH约7的磷酸盐缓冲液)溶剂混合物中，在存在催化量的次氯酸钠和2，2，6，6-四甲基哌啶-1-氧基原子团时使用亚氯酸钠进行该反应。
下面根据在WO2009/010429中公开的方法描述式42的氨基醇的合成。
在方案8中，n，m，p，A，L，R3，R4，R5，R6，R7，R8，R9和R10如上定义。
式15和19的中间体也可以如在方案9中所述进行合成。A，L，R1，R2，R3，R4，R5，R6，R7，R8，R9，R10，m，n和p如前定义。Re是叔丁基。Rh是C1-3烷基或苄基。
在方案9，步骤a和c中，使用本领域已知的试剂和条件，通过与胺13(或分别地46)的反应，将醛/酮12(来自方案2)转化为氨基-腈44和45。例如，在0℃和25℃之间的温度，在存在路易斯酸，例如碘化锌时，在二氯甲烷中，将醛/酮12与三甲基甲硅烷基氰化物和胺13(或46)的盐酸盐反应。备选地，在0℃和25℃之间的温度，在存在胺碱，例如三乙胺，N-甲基吗啉时，例如，通过在不存在任何溶剂时与三甲基甲硅烷基氰化物反应，并接着在二氯甲烷中与胺13反应，首先将醛/酮12转化为氰基醇。在步骤b中，将化合物44和45分别环化为15和19(R8＝CN)。这可以使用两步法来实现，即例如通过使用碱如氢氧化锂或氢氧化钠，在非-亲核溶剂如水、四氢呋喃、1，4-二烷或其混合物中进行碱-介导的水解来选择性水解酯Re，并随后以类似于方案5，步骤b的方法通过酰胺键形成进行环化。在关于化合物45的某些情形中，前述水解条件可以直接导致环化产物(不需要第二酰胺偶联步骤)，同时将腈水解为羧酰胺19(R8＝CONH2)。备选地，通过下述方式可以随后选择性水解化合物15和19(R8＝CN)中的腈为羧酰胺：使用本领域已知的试剂和条件，例如用过氧化氢处理，在存在催化或化学数量的无机碱如碳酸钾时，在极性溶剂如甲醇，二甲亚砜中，在从0℃到100℃的温度，进行或备选地，使用本领域已知的试剂和条件，例如用催化碱如甲醇钠、叔丁醇钾或化学数量的酸如无水氯化氢，在亲核溶剂如甲醇，乙醇，2-丙醇中，在0℃到25℃的温度，通过烷氧基脒进行，并且随后进行水解后处理。可以使用Evans等(Tetrahedron Lett.(四面体通讯)1997，38，4535.)的条件实现羧酰胺向羧酸的进一步的选择性水解。
在方案9中，n，m，p，A，R1，R2，R3，R4，R5，R6，R7，R9，R10，PG1，Re，Rh和Re如上定义。
以类似于在PCT国际申请WO2009/010429中所述方法的方式，如在方案10中所述合成中间体42。PG1和PG2是适合的保护基。例如，PG1是叔丁氧基羰基并且PG2是苄基，LG是离去基团，例如，氯或溴，R3，R4，R5，R6，R7，R8，R9，R10，m，n和p如前所述。
在方案10，步骤a中，使用本领域已知的试剂和条件，使氨基醇46b与卤化物47通过亲核取代进行反应，形成仲胺48。例如，反应在20℃到溶剂的沸点的温度，任选地在存在碱，例如碳酸氢钾或碳酸钾时，任选地在存在碘化钠时，在溶剂如甲醇，乙醇，或乙腈中进行。
式46b的氨基醇可商购或可以如在文献中所述进行合成。
在方案10，步骤b中，使用本领域技术人员熟知的方法，通过与式49的N-保护的氨基酸反应，将仲胺48转化为通式50的酰胺。例如典型地在下述条件下进行反应：在质子惰性溶剂中，如二氯甲烷，四氢呋喃，N，N-二甲基甲酰胺，N-甲基吡咯烷酮和其混合物中，在0℃和80℃之间的温度，在存在或不存在碱如三乙胺，二异丙基乙胺，4-甲基吗啉和/或4-(二甲基氨基)吡啶时，和在存在偶联剂如N，N’-二环己基碳二亚胺，1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基-碳二亚胺盐酸盐，O-(苯并三唑-1-基)-N，N，N’，N’-四甲基脲鎓六氟磷酸盐，O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N，N，N’，N’-四甲基脲鎓六氟磷酸盐或溴-三-吡咯烷基-磷鎓六氟磷酸盐时。
式49的N-保护的氨基酸可商购或可以使用在文献中所述的方法进行合成。
在方案10，步骤c中，使用本领域已知的方法和试剂，将化合物50转化为仲胺51。例如，在PG1是叔丁氧基羰基的情形中，例如使用在1，4-二
Figure BPA00001545560700351
烷中的氯化氢或在二氯甲烷中的三氟乙酸来裂解保护基，PG1。使用本领域熟知的方法，例如Mitsunobu反应，将得到的氨基醇环化为51。该反应需要膦，优选地三苯膦和二烷基偶氮二羧酸酯，例如二乙基偶氮二羧酸酯或二异丙基偶氮二羧酸酯，并且在惰性溶剂(例如四氢呋喃或甲苯)中，在0℃和100℃之间的温度进行。可以加入碱从而中和来自脱保护步骤的任何残留的酸，所述碱例如三乙胺或4-甲基吗啉。
备选地，在其中R10是H的情形中，以类似于方案3步骤b的方式进行50的羟基的氧化，形成半缩醛胺中间体，使其进行PG1的裂解并还原性环化为51。例如，在PG1是叔丁氧基羰基的情形中，在-78℃到+20℃之间的温度，在溶剂如二氯甲烷中，在存在三乙基甲硅烷时，使用三氟乙酸进行后者。
在方案10，步骤d中，移去51的羟基保护基以产生42。在适合的条件下，例如通过在1巴到100巴的压力下进行氢化，在溶剂如甲醇，乙醇或乙酸中，在存在适合的氢化催化剂例如披钯活性炭时进行这种脱保护。
Figure BPA00001545560700361
在方案10中，PG1，PG2，LG，R3，R4，R5，R6，R7，R8，R9，R10，m，n和p如前定义。
在方案11中，A，R1，R2，R3，R4，R5，R6，R7，R8和n，m如前定义。Pg1是苄氧基羰基或叔丁氧基羰基，R9，R10＝H，p＝1。
还可以如在方案11中所述合成最终化合物Ib(L＝键，p＝1)。
在方案11，步骤a中，如在方案1中所述，将被保护的氨基酸52与胺HNR1R2偶联并脱保护以提供胺46。
在方案11，步骤b中，用与胺46的还原性胺化将醛或酮39转化为胺53。可以将有机-R8复合物用于将R8结构部分引入亚氨基-中间体。用在方案1，步骤c和步骤d中所述的条件，裂解叔丁酯53，并将其环化为最终的[1，4]二氮杂-5-酮Ib(步骤c)。
在方案11中，n，m，A，R1，R2，R3，R4，R5，R6，R7，R8，和Pg1如上定义。
式I的化合物可以具有一个或多个不对称碳原子并且可以以光学纯的对映异构体形式、对映异构体的混合物形式存在，如例如外消旋物，光学纯的非对映异构体，非对映异构体、非对映异构体外消旋物的混合物或非对映异构体外消旋物的混合物存在。例如通过外消旋物的解析，通过不对称合成或不对称色谱法(用手性吸附剂或洗脱剂进行色谱法)获得光学活性形式。本发明包括所有这些形式。
如上所述，式(I)化合物是CCR2受体拮抗剂，还具有针对CCR3和CCR5的某些拮抗剂活性。因此，这些化合物可以通过阻断CCR2刺激来预防多种白细胞群体的迁移。因此，它们可以用于治疗和/或预防炎性和/或变应性疾病，如周围动脉闭塞性疾病(peripheral arterialocclusive disease)、重症肢体缺血(critical limb ischemia)(CLI)、易损动脉粥样硬化斑块患者(vulnerable atherosclerotic plaque patients)、不稳定型心绞痛(unstable angina)、充血性心力衰竭(congestive heart failure)、左心室肥大(left ventricular hypertrophy)、局部缺血再灌注损伤(ischemia reperfusion injury)、卒中(stroke)、心肌病(cardiomyopathy)、再狭窄(restenosis)、类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis)、糖尿病(diabetes)和糖尿病性并发症(diabetic complications)、糖尿病性肾病(diabetic nephropathy)、肠易激综合征(irritable bowel syndrome)、局限性回肠炎(Crohn’s disease)、多发性硬化(multiple sclerosis)、神经性疼痛、动脉粥样硬化血栓形成(atherothrombosis)和/或在糖尿病/CLI中的烧伤/溃疡，和哮喘。
预防和/或治疗炎性疾病，特别是周围动脉闭塞性疾病或动脉粥样硬化血栓形成是优选的适应症。
本发明因此还涉及包含如上定义的化合物和药用赋形剂的药物组合物。
同样地，本发明包括如上所述的化合物，其用作治疗活性物质，尤其作为治疗和/或预防炎性和/或变应性疾病的治疗活性物质，具体地作为治疗和/或预防下述疾病的治疗活性物质：周围动脉闭塞性疾病、重症肢体缺血、易损动脉粥样硬化斑块患者、不稳定型心绞痛、充血性心力衰竭、左心室肥大、局部缺血再灌注损伤、卒中、心肌病、再狭窄、类风湿性关节炎、糖尿病性肾病、肠易激综合征、局限性回肠炎、多发性硬化、神经性疼痛、动脉粥样硬化血栓形成，在糖尿病/CLI中的烧伤/溃疡，和变态反应，哮喘。
本发明还涉及如上所述的化合物用于制备药剂的应用，所述药剂用于治疗性治疗和/或预防性治疗炎性和/或变应性疾病，具体地用于治疗性和/或预防性治疗下述疾病：周围动脉闭塞性疾病、重症肢体缺血、易损动脉粥样硬化斑块患者、不稳定型心绞痛、充血性心力衰竭、左心室肥大、局部缺血再灌注损伤、卒中、心肌病、再狭窄、类风湿性关节炎、糖尿病性肾病、肠易激综合征、局限性回肠炎、多发性硬化)、神经性疼痛、动脉粥样硬化血栓形成，在糖尿病/CLI中的烧伤/溃疡和哮喘。所述药剂包含如上所述的化合物。
本发明还涉及用于制备式(I)化合物的方法和中间体以及用于制备中间体的方法。
可以通过下述测定法来证实本发明化合物的CCR2受体拮抗剂活性。
受体结合测定法
用来自稳定过量表达人CCR2B的CHOK1-CCR2B-A5细胞(Euroscreen)的膜进行结合测定法。
通过在10mM Tris pH 7.4，1mM EDTA，0.05mM苯甲脒，亮抑酶肽6mg/L中对细胞进行匀浆化，并在1000g分离碎片来进制备膜。接着，在50mM Tris pH 7.4，MgCl2 10mM，EGTA 1mM，甘油10％，苯甲脒0.05mM，亮抑肽酶6mg/l中在100000g分离该膜。
关于结合，将在50mM HEPES pH 7.2，1mM CaCl2，5mM MgCl2，0.5％BSA，0.01％NaN3中多种浓度的CCR2拮抗剂化合物和100pM125I-MCP-1(PerkinElmer，2200Ci/mmol)一起加入约5 fMol CCR2膜并将其在室温温育1小时。关于非特异性对照，加入57.7nM MCP-1(R&D Systems或在罗氏(Roche)制备)。通过GF/B(玻璃纤维滤器；PerkinElmer)板收集膜，用0.3％聚乙烯亚胺，0.2％BSA平衡，风干，结合通过在顶计数器(topcounter)(NXT Packard)中计数来确定。将特异性结合定义为总的结合减去非特异性结合并且典型地代表总结合的约90-95％。拮抗剂活性表示为抑制50％特异性结合所需要的抑制剂浓度(IC50)。
钙动员测定法
将稳定过量表达人趋化因子受体2同种型B的CHOK1-CCR2B-A5细胞(来自Euroscreen)在补充了5％FBS，100U/ml青霉素，100μg/ml链霉素，400μg/ml G418和5μg/ml嘌呤霉素的Nutrient Hams F12培养基中进行培养。
关于测定法，将细胞在37℃在5％CO2，在384-孔黑色透明平底聚苯乙烯板(Costar)中培养过夜。在用DMEM，20mM Hepes，2.5mM丙磺舒，0.1％BSA(DMEM测定缓冲液)洗涤后，将细胞在相同的DMEM测定缓冲液中用4μM Fluo-4在30℃加载2小时。移去过量染料，将细胞用DMEM测定缓冲液进行洗涤。用DMEM测定缓冲液/含有或不含有各种浓度的测试化合物的0.5％DMSO来制备384-孔的化合物板。按照一般方法，测试化合物的激动剂和拮抗剂活性。
将测试化合物加入测定板中，并将激动剂活性用FLIPR(488nm激发；510-570nm发射；Molecular Devices)作为荧光监测80秒。在30℃温育20-30min后，加入20nM MCP-1(R&D；Roche)并再次监测荧光80秒。将细胞内钙的增加报告为激动剂曝光后减去曝光前的基底荧光的最大荧光。将拮抗剂活性表示为抑制特异性钙增加的50％所需要的抑制剂浓度。
本发明的化合物在Ca动员测定法中显示关于CCR2 1nM到10μM，优选地1nM到1.5μM的IC50值。下表显示关于本发明的某些选定化合物的测量值。
可以将式(I)化合物和/或它们的药用盐用作药剂，例如以用于肠、肠胃外或局部施用的药物制剂形式的药剂。例如，可以将它们经口施用，例如以片剂、包衣片剂、锭剂、硬明胶胶囊和软明胶胶囊、溶液剂、乳剂或混悬剂形式施用，经直肠施用，例如以栓剂形式施用，肠胃外施用，例如以注射溶液剂或混悬剂或输注溶液剂形式施用，或局部施用，例如以软膏剂、乳膏或油进行施用。优选口服施用。
药物制剂的制备可以以本领域任何技术人员熟悉的方式进行，其通过将所述式I的化合物和/或它们的药用盐，任选地与其它治疗活性物质组合与适合的无毒惰性治疗相容性固体或液体载体物质(如果需要，一般的药用辅剂)一起配制为盖仑制剂施用形式进行制备。
适合的载体物质不仅是无机载体物质，还可以是有机载体物质。因此，例如可以将乳糖、玉米淀粉或其衍生物、滑石、硬脂酸或其盐用作片剂、包衣片剂、锭剂和硬明胶胶囊的载体物质。用于软明胶胶囊的适合的载体物质例如是植物油、蜡、脂肪和半固体和液体的多元醇(这取决于活性成分的性质，然而在软明胶胶囊中可能不需要载体)。用于制备溶液剂和糖浆剂的适合的载体物质例如是水、多元醇、蔗糖、转化糖。用于注射溶液剂的适合的载体物质例如是水、醇、多元醇、甘油和植物油。用于栓剂的适合的载体物质例如是天然或硬化油，蜡，脂肪和半液体或液体多元醇。用于局部制剂的适合的载体物质是甘油酯、半合成和合成甘油酯、氢化油、液态蜡、液态石蜡、液态脂肪醇、固醇、聚乙二醇和纤维素衍生物。
考虑将一般的稳定剂、防腐剂、湿润剂和乳化剂、稠度改良剂、风味改良剂、改变渗透压的盐、缓冲物质、增溶剂、着色剂和掩蔽剂以及抗氧化剂作为药物辅剂。
式(I)化合物的剂量可以在宽泛的范围内变化，这取决于待控制的疾病、患者的年龄和个体状况以及施用方式，当然也要适合每个具体个案的个体需求。对于成年患者，考虑约1到1000mg，尤其是约1到300mg的每日剂量。取决于疾病的严重性和精确的药物动力学模式，以一个或数个每日剂量单位，例如1-3个剂量单位施用化合物。
药物制剂方便地包含约1-500mg，优选地1-100mg的式(I)的化合物。
Figure BPA00001545560700411
Figure BPA00001545560700421
Figure BPA00001545560700431
可以将式(I)化合物和/或它们的药用盐用作药剂，例如以用于肠、肠胃外或局部施用的药物制剂形式的药剂。例如，可以将它们经口施用，例如以片剂、包衣片剂、锭剂、硬明胶胶囊和软明胶胶囊、溶液剂、乳剂或混悬剂形式施用，经直肠施用，例如以栓剂形式施用，肠胃外施用，例如以注射溶液剂或混悬剂或输注溶液剂形式施用，或局部施用，例如以软膏剂、乳膏或油进行施用。优选口服施用。
药物制剂的制备可以以本领域任何技术人员熟悉的方式进行，其通过将所述式I的化合物和/或它们的药用盐，任选地与其它治疗活性物质组合与适合的无毒惰性治疗相容性固体或液体载体物质(如果需要，一般的药用辅剂)一起配制为盖仑制剂施用形式进行制备。
适合的载体物质不仅是无机载体物质，还可以是有机载体物质。因此，例如可以将乳糖、玉米淀粉或其衍生物、滑石、硬脂酸或其盐用作片剂、包衣片剂、锭剂和硬明胶胶囊的载体物质。用于软明胶胶囊的适合的载体物质例如是植物油、蜡、脂肪和半固体和液体的多元醇(这取决于活性成分的性质，然而在软明胶胶囊中可能不需要载体)。用于制备溶液剂和糖浆剂的适合的载体物质例如是水、多元醇、蔗糖、转化糖。用于注射溶液剂的适合的载体物质例如是水、醇、多元醇、甘油和植物油。用于栓剂的适合的载体物质例如是天然或硬化油，蜡，脂肪和半液体或液体多元醇。用于局部制剂的适合的载体物质是甘油酯、半合成和合成甘油酯、氢化油、液态蜡、液态石蜡、液态脂肪醇、固醇、聚乙二醇和纤维素衍生物。
考虑将一般的稳定剂、防腐剂、湿润剂和乳化剂、稠度改良剂、风味改良剂、改变渗透压的盐、缓冲物质、增溶剂、着色剂和掩蔽剂以及抗氧化剂作为药物辅剂。
式(I)化合物的剂量可以在宽泛的范围内变化，这取决于待控制的疾病、患者的年龄和个体状况以及施用方式，当然也要适合每个具体个案的个体需求。对于成年患者，考虑约1到1000mg，尤其是约1到300mg的每日剂量。取决于疾病的严重性和精确的药物动力学模式，以一个或数个每日剂量单位，例如1-3个剂量单位施用化合物。
药物制剂方便地包含约1-500mg，优选地1-100mg的式(I)的化合物。
实施例
下列实施例用于更加详细地阐明本发明。不过，它们并不意欲以任何方式限制其范围。
简称：
aq.＝水性的，EDCI＝N-(3-二甲基氨基丙基)-N’-乙基碳二亚胺盐酸盐，当量＝当量 FTIR＝傅立叶转换红外光谱，GC＝气相色谱，HATU＝O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-1，1，3，3-四甲基脲鎓六氟磷酸盐，HOBT＝1-羟基苯并-三唑，HPLC＝高压液相色谱，IPC＝过程质量控制(In-process control)，ISP＝离子喷射，MS＝质谱，NMR＝核磁共振光谱，sat＝饱和的，TEMPO＝2，2，6，6-四甲基哌啶-1-氧基，TLC＝薄层色谱。
中间体1
(外消旋)-4-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-2-碘代-丁酸甲酯
A)(S)-4-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-2-甲磺酰基氧基-丁酸甲酯
用2.09ml(15.00mmol，1.5eq)的三乙胺和在0℃在5分钟内用0.82ml(10.50mmol，1.051eq)的甲磺酰氯处理50ml二氯甲烷中的2.48g(10.00mmol)的(S)-4-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)-2-羟基丁酸甲酯的溶液(J.Am.Chem.Soc.(美国化学会会志)2005，127，1090)。1小时后在0℃，在10％水性磷酸二氢钾溶液/二乙醚(x3)之间分配反应物，用饱和水性的碳酸氢钠溶液(新鲜制备)和10％水性的氯化钠溶液洗涤有机相，在Na2SO4上干燥并蒸发以给出作为黄色油的2.91g(89％)的标题化合物。MS：327.1(MH+).
B)(外消旋)-4-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-2-碘代-丁酸甲酯
用2.65g(17.70mmol)的碘化钠处理90ml 2-丁酮中的2.89g(8.85mmol)的(S)-4-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-2-甲磺酰基氧基-丁酸甲酯的溶液并于90℃搅拌
Figure BPA00001545560700451
小时。冷却反应物，过滤并蒸发。将残余物悬浮在用Na2SO4处理的二氯甲烷中并过滤以在蒸发后给出2.94g(93％)暗褐色油的标题化合物。MS：343.0(M-CH3)+.
中间体2
(S)-6-氮杂-螺[2.5]辛-4-醇；盐酸盐
a)4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛烷-6-甲酸叔丁酯
●方法A
在氩气下，于0℃向1，2-二氯乙烷(80ml)中的二乙基锌(甲苯中的1.1M溶液，37.5ml，0.04mmol)的溶液中加入氯碘代甲烷(5.99ml，0.08mmol)。将该混合物搅拌15分钟，之后加入3-羟基-4-亚甲基-哌啶-1-甲酸叔丁酯在1，2-二氯乙烷(10ml)中的溶液(J.Org.Chem.(有机化学杂志)2001，66，2487)(4.19g，19.6mmol)，其后将反应物于0℃搅拌0.5小时并随后让其达到室温，再搅拌1小时。随后通过加入饱和水性的氯化铵溶液猝灭反应，分离，并干燥(Na2SO4)和浓缩有机相。通过快速柱色谱法(SiO2；乙酸乙酯/庚烷2∶8-1∶1)纯化给出结晶固体状的标题产物(2.4g，54％)。MS：228.2(MH+).
●方法B
于25℃，将2.00g(9.4mmol，1当量)3-羟基-4-亚甲基-哌啶-1-甲酸叔丁酯溶于甲苯中。以这样的速率添加甲苯中的17.05ml(2当量)1.1M二乙基锌溶液，以保持反应温度在30℃以下。于25℃ 15-30分钟后，在2-3小时中加入2.29ml(3当量)二碘代甲烷，保持反应温度于25℃(通过Tr-Tj测量和/或线上FTIR反应监测可最佳跟踪反应)。结束添加后30-60分钟后，以这样的速率向得到的白色混悬液中加入4.57ml 2-乙基己酸，以保持反应温度在25-30℃之间。将浑浊的白色混悬液搅拌30分钟。加入10ml庚烷，随后加入由20ml 25％水性的氨水溶液和30ml水组成的混合物。分离有机相并用由10ml 25％水性的氨水溶液和30ml水组成的混合物洗涤。用20ml半饱和的水性氯化钠溶液洗涤有机相，合并，在硫酸钠上干燥，过滤并在减压下浓缩至油状(可以在放置过程中结晶)。通过在庚烷或备选地在叔丁基甲醚/庚烷中结晶纯化粗制螺-哌啶醇，以约80％产率给出白色粉末状的标题产物。
b)(S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛烷-6-甲酸叔丁酯
●方法A
通过在Chiralpak
Figure BPA00001545560700461
AD柱(庚烷/2丙醇95∶5)上进行(外消旋)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛烷-6-甲酸叔丁酯的手性分离来制备标题化合物。
方法B
将4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛烷-6-甲酸叔丁酯(3.00g；13.07mmol)溶于叔丁基甲醚(20.5ml)和丁酸乙烯酯(6.5ml)中。将溶液加热至50℃并通过加入脂肪酶TL(3.0g；Meito Sangyo，Tokyo)来起始反应。将溶液于50℃搅拌46h直到残余醇的对映异构体过量为＞99％。滤去酶，用叔丁基甲醚洗涤滤饼并在真空中浓缩滤液。将残余油在硅胶上进行色谱(80g；0.040-0.063mm；二氯甲烷→二氯甲烷/丙酮9∶1)以便从残余的(S)-醇中分离形成的光学富集的(R)-丁酸酯(1.18g白色结晶；40％)。解析学：＞99GC；＞99％ee(GC于BGB-176上；30m x 0.25mm；H2；1.2巴；以3℃/min 80℃至210℃；inj.200℃；Det.215℃；停留时间：(R)-醇28.58min，(S)-醇29.00min)。[α]D＝-43.35°(c＝1.00，CHCl3)。
●方法C
Figure BPA00001545560700471
通过TEMPO/漂白氧化作用或通过Swern氧化作用由4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛烷-6-甲酸叔丁酯生产标题化合物：
a)TEMPO/漂白氧化作用
向4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛烷-6-甲酸叔丁酯(20.0g，88.0mmol)在二氯甲烷(170ml)中的溶液中加入溴化钠(1.092g，10.6mmol)，碳酸氢钠(2.439g，29.0mmol)和2，2，6，6-四甲基哌啶1-氧基(237.1mg，1.49mmol)。将混合物冷却至-5℃并在10分钟内加入次氯酸钠溶液(9.5％于水中，55.16ml)导致红色着色并且温度升至9℃。将混合物于0-5℃搅拌35分钟，当转化尚未完成时(剩余2.5％的起始物料)，在30分钟内加入另外的次氯酸钠溶液(9.5％在水中，7.0ml)并于0℃将混合物再搅拌30分钟。GC分析表明完全转化(剩余＜0.1％的的起始物料)。在10分钟内加入硫代硫酸钠溶液(10％在水中，100ml)导致脱色。分离有机相，用水(100ml)洗涤，在硫酸钠(50g)上干燥，过滤并蒸发(15mbar，40℃)以给出微黄色粉末状的4-氧代-6-氮杂-螺[2.5]辛烷-6-甲酸叔丁酯(19.84g)，GC纯度99a％。将粉末溶于加温的叔丁基甲醚(20ml)中，加入庚烷(60ml)以诱导结晶并将白色混悬液于0-5℃搅拌1.5h。过滤，用庚烷(20ml)洗涤并进行干燥(10mbar，45℃)，提供白色结晶物质样的4-氧代-6-氮杂-螺[2.5]辛烷-6-甲酸叔丁酯(17.25g，87％)，GC纯度100a％。1H-NMR(CDCl3，300MHz)：4.08(s，CH2(5))，3.66(m，CH2(7))，1.88(m，CH2(8))，1.48(s，tert-Bu)，1.40(m，2H)，0.81(m，2H).
b)Swern氧化作用
于-70℃，在45分钟内向草酰氯(42.35ml，0.480mol)在二氯甲烷(910ml)中的溶液中加入二甲亚砜(68.24ml，0.961mol)在二氯甲烷(910ml)中的溶液。将溶液搅拌15分钟并在40分钟内加入4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛烷-6-甲酸叔丁酯(91.00g，0.400mol)在二氯甲烷(910ml)中的溶液，保持内部温度在-60℃以下。将混合物搅拌35分钟并于10分钟内在-60℃以下加入三乙胺(280.4ml，2.00mol)。移去冷却浴并将黄色混悬液搅拌1小时随后用水(1.4l)猝灭。分离有机相，用水(3x 1l)和饱和的水性氯化钠(3l)溶液洗涤并蒸发。将残余的橙色粉末溶于叔丁基甲醚(1.40l)中，过滤混浊溶液(Hyflo Speedex)以除去某些不可溶物质并蒸发澄清的滤液以提供黄色粉末状的粗制4-氧代-6-氮杂-螺[2.5]辛烷-6-甲酸叔丁酯(91.9g)。将物质再溶于叔丁基甲醚(300ml)中并通过使用3∶1庚烷/叔丁基甲醚混合物(6.5l)在硅胶(700g)上过滤进行纯化。蒸发和干燥(10mbar，40℃)给出微白色粉末状的4-氧代-6-氮杂-螺[2.5]辛烷-6-甲酸叔丁酯(80.58g，89％)，GC纯度100a％。
Figure BPA00001545560700481
将D(+)-一水合葡萄糖(300g)和六水合氯化镁(1.0g)溶于10mMMES缓冲液pH 6.5(2.4L；Sigma M3671)中。加入4-氧代-6-氮杂-螺[2.5]辛烷-6-甲酸叔丁酯(300g；1.33mmol)和□-NAD(3.0g；游离酸；Roche Diagnostics批号10004626)后，重新调节pH并加热混悬液至35℃。通过加入酮还原酶KRED-NADH-117(3.0g；前身是Biocatalytics，目前是Codexis)和葡萄糖脱氢酶GDH-102(300mg；Biocatalytics)来起始反应。将混悬液于35℃剧烈搅拌，通过可控的添加(pH-stat)1.0M水性的氢氧化钠溶液将pH保持恒定于6.5。在消耗1.307L(对应于98％的转化；在17h后)后，用乙酸乙酯(10L)提取反应混合物。将有机相在硫酸钠上干燥并在真空中浓缩(200mbar/45℃)直到蒸发下降。冷却后，油状残余物(411g)开始结晶并用庚烷(1L)搅拌2小时。滤去晶体并将滤液蒸发至干燥，重溶于乙酸乙酯(150ml)中并如上述在真空中浓缩。用庚烷(200ml；2h)搅拌在冷却后再次形成的结晶混悬液并滤去晶体。用庚烷洗涤两批次的晶体并在高真空下干燥以产生93％产率的标题化合物(250.77g和34.60g白色晶体)，每一种都具有＞98.5％GC和99.8％ee的纯度。[α]D＝-44.97°(c＝1.00，CHCl3).
●方法D
Figure BPA00001545560700491
将3-羟基-4-亚甲基-哌啶-1-甲酸叔丁酯(4.50g；21.10mmol)溶于叔丁基甲醚(63ml)和丁酸乙烯酯(22.5ml)中。将溶液加热至50℃并通过加入脂肪酶TL IM(1.08g(载体固定的)；Novozymes，丹麦)起始反应。将溶液于50℃搅拌20小时直到剩余醇的对映异构体过量为＞99％。滤去酶，用叔丁基甲醚洗涤滤饼并将滤液在真空中浓缩。将残余油在硅胶上进行色谱(100g；0.040-0.063mm；二氯甲烷→二氯甲烷/丙酮9∶1)以便从残余的(S)-醇(1.83g白色晶体；41％)中分离形成的光学富集(R)-丁酸酯。解析学：＞99GC；＞99％ee(GC于BGB-176上；30mx 0.25mm；H2；1.2bar；以3℃/min，80℃至210℃；inj.200℃；Det.210℃；停留时间：(R)-醇29.60分钟，(S)-醇29.81分钟)。[α]D＝-17.70°(c＝1.00，CHCl3).
以类似于中间体2a，方法B的方式从(S)-3-羟基-4-亚甲基-哌啶-1-甲酸叔丁酯生产标题化合物。
c)(S)-6-氮杂-螺[2.5]辛-4-醇；盐酸盐
用氯化氢溶液(4M于1，4-二
Figure BPA00001545560700493
烷中，30ml)在室温处理(S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛烷-6-甲酸叔丁酯(3.26g，14.3mmol)在乙醇(10ml)中的溶液，随后在1小时后加入叔丁基甲醚(40ml)。将混悬液搅拌1小时，随后通过过滤收集沉淀以提供标题化合物(2.11g，90％)。白色固体，MS：128.1(M+H)+.
(S)-6-氮杂-螺[2.5]辛-4-醇；盐酸盐的备选制备
i)环丙烷甲酸叔丁酯
将219.1g(1.91mol，1当量)叔丁醇钾悬浮于2.5L叔丁基甲醚中并冷却至0-5℃。在60分钟内加入200g(1当量)环丙烷碳酰氯，保持温度在0-5℃(冰-乙醇水浴冷却)。线上FTIR反应监测表明了进料控制反应。将反应混合物于0-5℃搅拌30分钟并加入1L的5％水性碳酸氢钠溶液。分离水相并用500ml叔丁基甲醚提取。用500ml半饱和的水性氯化钠溶液洗涤有机相，合并并在减压下(30℃/150mbar)浓缩以提供271g的标题化合物(对于8％残余叔丁基甲醚校正的91％产率)。
ii)1-烯丙基-环丙烷甲酸叔丁酯
将15.9ml(1.15当量)二异丙胺溶于65ml四氢呋喃中并冷却至约-10℃。在25分钟内加入65ml(1.08当量)己烷中的1.6M丁基锂溶液，保持温度在-10℃和0℃之间。在约-5℃50分钟后，将反应混合物冷却至-75℃。在15分钟内加入15g(96.7mmol，1当量，92％w/w纯度)环丙烷甲酸叔丁酯在20ml四氢呋喃中的溶液，保持温度在-75℃和-70℃之间。将反应混合物于-75℃搅拌5h(2.5小时后获得乳状反应混合物。在20分钟内加入12.87g(1.10当量)烯丙基溴溶液，保持温度在-75℃和-60℃之间。将反应混合物于-78℃搅拌1h，加温至室温并搅拌过夜。将反应混合物冷却至0℃。加入100ml饱和的水性氯化铵溶液，随后加入30ml水，提供澄清二相混合物。用50ml叔丁基甲醚提取混合物3次。合并有机相，在硫酸钠上干燥，过滤并在减压下(40℃/20mbar)浓缩以给出16.44g的粗制产物。将粗制产物蒸馏(2mbar；约40℃蒸馏头温度)以约65％产率提供标题化合物。
iii)1-(2-氧代-乙基)-环丙烷甲酸叔丁酯
将6.9g(36.34mmol，1当量，通过GC 96％a％)1-烯丙基-环丙烷甲酸叔丁酯溶于40ml二氯甲烷和40ml甲醇中。将溶液冷却到-72℃并将臭氧鼓泡通过反应混合物直到获得蓝色。接着，鼓泡氮气以去除过量臭氧直到获得无色溶液。加入10ml(3.68当量)二甲基硫化物和14ml(2.76当量)三乙胺。将反应混合物加温到室温并在该温度搅拌过夜(过氧化物测试阴性，pH 7-8)。将微黄色反应混合物加入100ml饱和氯化铵水溶液(放热)并用70ml二氯甲烷提取3次。合并有机相，通过硫酸钠干燥，过滤并在减压下浓缩以提供粗制醛，将其通过SiO2(二氯甲烷；TLC：乙酸乙酯/庚烷1∶2)过滤进行纯化以提供3.90g(96％GC，56％产率)作为油的标题化合物。
iv)1-[2-(苄基-叔丁氧基羰基甲基-氨基)-乙基]-环丙烷甲酸叔丁酯
将10.5g(54.7mmol，1当量)1-(2-氧代-乙基)-环丙烷甲酸叔丁酯和13.21g(1.08当量)N-苄基甘氨酸叔丁酯溶于140ml甲苯中。加入21g(1.63当量)三乙酰氧基硼氢化钠(从25℃到28℃放热)并在室温将反应混合物搅拌5h(通过GC IPC)。加入2ml(0.64当量)乙酸在15ml甲苯中的溶液。在室温30分钟后，将反应混合物冷却到0℃并在40分钟内加入100ml饱和碳酸氢钠水溶液(起泡)。加入50ml乙酸乙酯。将混合物在室温搅拌30分钟。将混合物用200ml乙酸乙酯提取，并用50ml乙酸乙酯提取第二次。用50ml饱和碳酸氢钠水溶液洗涤有机相，随后用50ml饱和氯化钠水溶液进行洗涤。合并有机相，通过硫酸钠干燥，过滤并在减压下浓缩，以提供21.5g作为油的标题化合物(约95％产率，关于约3％残留甲苯和3％胺起始物料校正)。
v)6-苄基-6-氮杂-螺[2.5]辛-4-酮盐酸盐
将10.8g(24.4mmol，1当量)1-[2-(苄基-叔丁氧基羰基甲基-氨基)-乙基]-环丙烷甲酸叔丁酯溶于35ml四氢呋喃中。在2.5h内逐滴加入50ml(2.05当量)在四氢呋喃中的1M六甲基二硅基氮基锂(lithiumhexamethyldisilazanide)溶液，保持温度在20℃和25℃之间。在室温2h后(通过HPLC IPC)，将反应混合物(包含6-苄基-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-4-烯-5-甲酸叔丁酯的锂盐)冷却到-10℃(冰乙醇冷却浴)并加入75ml 1M的硫酸水溶液(温度增加到2℃)。将反应混合物加温到室温，并在40℃，在减压下去除四氢呋喃。将得到的反应混合物加热到40℃达1h，在室温搅拌15h，并在40℃再搅拌3h以结束反应(通过GC的IPC；水解中间体6-苄基-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-4-烯-5-甲酸叔丁酯，随后进行脱羧)。将反应混合物冷却到0℃并通过加入10ml2M的氢氧化钠水溶液来中和到pH 7.4，加入50ml 1M碳酸氢钠水溶液，将pH调节到9.4。将粗制溶液用叔丁基甲醚和乙酸乙酯提取。合并有机相，通过硫酸钠干燥，并通过SiO2填料过滤。将溶液在减压(45℃/20mbar)下浓缩以提供4.56g作为游离碱的粗制产物。将粗制油溶于8ml乙酸乙酯中，冷却到0℃并逐滴加入5.1ml氯化氢溶液(4.3M在乙酸乙酯中(放热2℃到18℃))。将反应混合物在室温搅拌过夜(胶状晶体)并过滤。滤饼用10ml乙酸乙酯洗涤并在减压下干燥直到恒重以提供4.54g作为灰白色晶体的标题化合物(74％产率)。
vi)(S)-6-苄基-6-氮杂-螺[2.5]辛-4-醇
将300mg 6-苄基-6-氮杂-螺[2.5]辛-4-酮盐酸盐(1.19mmol，1当量)，1.5ml的2-丙醇和28ml的30mM TRIS-HCl水性缓冲液(pH 8.1)的混合物加热到35℃。将pH再调节到8.0。通过加入□-NAD(1mg；游离酸；Roche Diagnostics批号10 004 626)和酮还原酶KRED-NADH-117(29.3mg；Codexis[前身Biocatalytics])起始反应。将混悬液在35℃搅拌，通过受控的添加(pH-stat)1.0M氢氧化钠水溶液，将pH恒定在8.0。在大约80面积％转化和1d后，加入另外的2-丙醇(0.3ml)，□-NAD(3mg；游离酸；Roche Diagnostics批号10004 626)，酮还原酶KRED-NADH-117(30mg；Codexis前身Biocatalytics])和氯化镁(12.7mg)。4d后，98.5面积％转化和消耗5.9ml1.0M氢氧化钠水溶液，通过加入氯化钠(9g)，乙酸乙酯(30ml)和助滤剂(1g Dicalite Speedex)来终止反应混合物。将混合物搅拌30min并过滤。将滤液用30ml乙酸乙酯提取3次。将合并的有机相通过硫酸钠干燥，过滤并在减压下浓缩以提供超过99.9％e.e的粗制产物。通过快速色谱法进行纯化提供作为无色的油的标题化合物。
vii)(S)-6-氮杂-螺[2.5]辛-4-醇
将100mg(S)-6-苄基-6-氮杂-螺[2.5]辛-4-醇溶于1ml甲醇并通过在硫酸钡上的钯进行氢化。在脱苄基作用后(通过GC IPC)，过滤催化剂，并在减压下浓缩滤液以提供标题化合物。在存在三乙胺时，将氨基醇用在甲醇中的二叔丁基-二碳酸酯处理。通过手性GC分析粗制的叔丁氧基羰基-保护的胺产物(BGB-176；30m x 0.25mm；在43分钟内80℃到210℃)并证实与中间体2b相同。
可以通过用在乙酸乙酯中的HCl处理氨基醇来获得标题化合物的盐酸盐。
制备N-苄基甘氨酸叔丁酯
将40g(205mmol，1当量)溴代乙酸叔丁酯溶于200ml乙腈中。将溶液冷却到0-5℃并在15分钟内，加入在90ml乙腈溶液中的47g苄基胺(2.14当量)。5分钟后，将反应混合物加温到室温并搅拌3h(通过GC的IPC)。过滤得到的混悬液并蒸发到恒重以提供49g黄色的油。
将油溶于200ml庚烷并用50ml碳酸氢钠水溶液洗涤3次。将有机相通过硫酸钠干燥，过滤并蒸发以提供35.8g的粗制产物。在高真空下的蒸馏提供27.2g的标题产物(通过GC 95％纯).
中间体3
(3S，4S)-4-甲基-哌啶-3-醇；盐酸盐
A)(外消旋，反式)-3-羟基-4-甲基-哌啶-1-甲酸叔丁酯
将(外消旋，反式)-1-苄基-4-甲基-哌啶-3-醇(Tetrahedron.Lett.(四面体通讯)2000，41，5817)(13.0g，63mmol)与氢氧化钯(20％在活性炭上，4g)一起溶于甲醇中，并在氢气氛(气囊)下搅拌16h，随后加入二叔丁基二碳酸酯(13.8g，63mmol)，将反应物搅拌1h，通过Hyflo过滤并浓缩以提供作为结晶固体的标题产物(13.3g，98％)。MS：216.2(MH+).
B)(外消旋，顺式)-4-甲基-3-(4-硝基-苄氧基)-哌啶-1-甲酸叔丁酯
将(外消旋，反式)-3-羟基-4-甲基-哌啶-1-甲酸叔丁酯(6.0g，28mmol)与三苯膦(8.9g，34mmol)，4-硝基苯甲酸(5.7g，34mmol)一起溶于四氢呋喃(40ml)中，并冷却到0℃，之后逐滴加入二异丙基偶氮二甲酸酯(6.9g，34mmol)。移去冰浴，并使反应物达到室温，搅拌16h。接着，直接将反应物吸附到硅胶上，并通过快速柱色谱法(乙酸乙酯/庚烷2∶8)纯化以提供作为白色固体的标题产物(4.0g，40％)。MS：365.2(MH+)。
C)(外消旋，顺式)-3-羟基-4-甲基-哌啶-1-甲酸叔丁酯
将(外消旋，顺式)-4-甲基-3-(4-硝基-苄氧基)-哌啶-1-甲酸叔丁酯(5.0g，14mmol)溶于甲醇(70ml)中，并加入6M氢氧化钠水溶液(4.5ml，27mmol)。将反应物搅拌1h，随后在真空下去除溶剂，将残余物在水和二氯甲烷之间分配，收集有机相，干燥(Na2SO4)并浓缩以提供作为结晶固体的标题产物(2.6g，87％).MS：216.1(MH+).
D)(3S，4S)-4-甲基-哌啶-3-醇；盐酸盐
将(外消旋，顺式)-3-羟基-4-甲基-哌啶-1-甲酸叔丁酯在ChiralpakAD柱上分离(异丙醇/庚烷5∶95)，随后，用在二
Figure BPA00001545560700541
烷中的氯化氢溶液对(-)-对映异构体进行脱保护以提供作为白色粉末的标题化合物。MS：116.2(MH+).
中间体4
(3S，5S)-5-甲基-哌啶-3-醇；盐酸盐
A)(S)-3-(苄基-乙氧基羰基甲基-氨基)-丁酸乙酯
向冷却到0℃的乙醇(55ml)中逐滴加入乙酰基溴化物(41ml，0.6mol)，随后加入(S)-4-甲基-二氢-呋喃-2-酮(Tetrahedron(四面体)1983，39，3107；18.6g，0.2mol)在乙醇(20ml)中的溶液。移去冰浴，并使反应物达到室温。2h的搅拌后，浓缩反应物，并将残余物再次溶解于二氯甲烷中，用饱和碳酸氢钠水溶液洗涤，干燥(Na2SO4)并浓缩，提供(S)-4-溴-3-甲基-丁酸乙酯(33.6g，定量的)。将其再次溶解于乙醇(100ml)中，冷却到0℃并加入N-苄基甘氨酸乙酯(28.2g，0.14mol)和三乙胺(22.4ml，0.16mmol)。接着，将反应物加温到75℃达4d，随后浓缩反应物，将残余物再次溶解于二氯甲烷中，用饱和碳酸氢钠水溶液洗涤，干燥(Na2SO4)并浓缩。通过快速柱色谱法纯化(乙酸乙酯/庚烷5∶95)提供作为浅金色油的标题产物(20.3g，43％).MS(ISP)＝322.2(M+H)+.
B)(S)-1-苄基-5-甲基-哌啶-3-酮
向氢化钠(在矿物油中的55％分散体，6.4g，14mmol)在甲苯(90ml)中的混悬液中加入在甲苯(10ml)中的(S)-3-(苄基-乙氧基羰基甲基-氨基)-丁酸乙酯(20.3g，0.06mol)，随后加入乙醇(1ml)。接着发生剧烈反应，在15分钟后，用乙酸乙酯稀释反应物，用10％柠檬酸水溶液洗涤，干燥(Na2SO4)并浓缩。将残余物通过快速柱色谱法(乙酸乙酯/庚烷1∶9)纯化，提供非对映异构体的复合混合物(7.2g，42％)。将一份该物质(3.5g，13mmol)溶于25％的盐酸水溶液(20ml)中，并在120℃在松散封闭的管中加热36h。蒸发溶剂，将残余物再次溶解于二氯甲烷中，用饱和碳酸氢钠水溶液洗涤，干燥(Na2SO4)并浓缩。通过快速柱色谱法纯化(乙酸乙酯/庚烷1∶4)，提供作为结晶固体的标题产物(1.1g，43％).MS(ISP)＝204.3(M+H)+.
C)(3S，5S)-1-苄基-5-甲基-哌啶-3-醇
在-78℃，向(S)-1-苄基-5-甲基-哌啶-3-酮(1.1g，5mmol)在无水四氢呋喃(15ml)中的溶液中加入K-selectride(10.8ml，11mmol，在四氢呋喃中的1M溶液)。在-78℃ 2h后，小心加入数滴水，使反应物达到室温，通过蒸发去除四氢呋喃，并将残余物再次溶解于二氯甲烷中，用饱和碳酸氢钠水溶液洗涤，干燥(Na2SO4)并浓缩。通过快速柱色谱法(乙酸乙酯/庚烷1∶4)纯化，提供作为结晶固体的标题产物(0.9g，43％)。MS(ISP)＝204.3(M+H)+.
D)(3S，5S)-5-甲基-哌啶-3-醇；盐酸盐
向溶于甲醇中的(S)-1-苄基-5-甲基-哌啶-3-酮(0.9g，4mmol)的溶液中，加入25％盐酸水溶液直到pH是酸性的，随后加入钯(10％在活性炭上，0.2g)。将混合物在1氢气压(气囊)下搅拌6h。接着，通过Hyflo过滤反应物并浓缩以提供作为白色粉末的标题产物(0.66g，定量)。MS(ISP)＝116.1(M+H)+.
中间体5
 3-{4-[(E)-3-(3，4-二氯-苯基)-丙烯酰基]-7-氧代-[1，4]二氮杂-1-基}-丙酸
A)
Figure BPA00001545560700552
将9.77g(43.65mmol)(E)-3，4-二氯肉桂酸在250ml二氯甲烷中的溶液在室温用3滴DMF处理。逐滴加入在30ml二氯甲烷中的4.15ml(48.02mmol，1.1eq)草酰氯并持续搅拌3h。蒸发该溶液，将其再次溶解于170ml的二氯甲烷中，冷却(0℃)，并用4.48g(39.29mmol，0.9eq)的2，3，6，7-四氢-(1H)-1，4-二氮杂
Figure BPA00001545560700553
-5(4H)-酮和12.17ml(87.30mmol，2eq)的三乙胺在80ml二氯甲烷中的溶液处理。将反应物过夜加温到室温，接着在二氯甲烷/MeOH 9∶1(x3)/10％KHSO4水溶液之间分配，将有机相用饱和NaHCO3水溶液和10％NaCl水溶液洗涤，通过Na2SO4干燥，并蒸发。将残余物用甲苯溶解并蒸发，并用二氯甲烷/Et2O结晶以提供作为白色固体的7.99g(58％)标题化合物。MS：312.8(MH+，2Cl).
Figure BPA00001545560700561
基}-丙酸乙酯
将4.00g(12.77mmol)的1-[(E)-3-(3，4-二氯-苯基)-丙烯酰基]-[1，4]二氮杂
Figure BPA00001545560700562
-5-酮和1.63ml(12.77mmol)的3-溴丙酸乙酯在60ml DMF中的混悬液在0℃用两份的0.61g(14.05mmol)的NaH(55％在油中)进行处理。在室温30分钟后搅拌混悬液，得到溶液，并在0℃进一步搅拌过夜。将反应物用冷10％KHSO4水溶液中和并用EtOAc提取(3x)。将有机相用10％NaCl水溶液洗涤，通过Na2SO4干燥，蒸发并结晶(二氯甲烷/MeOH)以产生3.71g(70％)作为灰白色固体的标题化合物。MS：413.1(MH+，2Cl).
Figure BPA00001545560700563
基}-丙酸
在0℃，将3.50g(8.47mmol)的3-{4-[(E)-3-(3，4-二氯-苯基)-丙烯酰基]-7-氧代-[1，4]二氮杂
Figure BPA00001545560700564
-1-基}-丙酸乙酯在80ml的四氢呋喃/乙醇(1∶1)的溶液用16.94ml(16.94mmol)的1M氢氧化锂水溶液处理，并在该温度保护3h。将反应物用冷10％KHSO4水溶液中和并用EtOAc(3x)提取。将有机相用10％NaCl水溶液洗涤，通过Na2SO4干燥并蒸发以产生3.20g(98％)作为白色固体的标题化合物。MS：385.0(MH+，2Cl).
中间体6
(外消旋)-2-{4-[(E)-3-(3，4-二氯-苯基)-丙烯酰基]-7-氧代-[1，4]二氮杂
Figure BPA00001545560700565
-1-基}-4-羟基-丁酸甲酯
A)(外消旋)-4-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-2-{4-[(E)-3-(3，4-二氯-苯
Figure BPA00001545560700571
在0℃，将0.313g(0.100mmol)的1-[(E)-3-(3，4-二氯-苯基)-丙烯酰基]-[1，4]二氮杂
Figure BPA00001545560700572
-5-酮(中间体5A)在10ml THF中的混悬液用0.135g(0.120mmol)的叔丁醇钾进行处理。10分钟后，加入0.394g(0.110mmol)的(外消旋)-4-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-2-碘代-丁酸甲酯(中间体1)。将反应物在0℃搅拌1h，在RT搅拌15h，接着用冷的10％硫酸氢钾水溶液中和，并用二乙醚提取(3x)。将有机相用饱和碳酸氢钠水溶液，10％氯化钠水溶液洗涤，通过Na2SO4干燥，蒸发，并通过快速凝胶柱(正庚烷/乙酸乙酯1∶1到2∶3)纯化以产生0.19g(35％)作为浅黄色粘性油的标题化合物。MS：543.3(MH+，2Cl).
B)(外消旋)-2-{4-[(E)-3-(3，4-二氯-苯基)-丙烯酰基]-7-氧代-[1，4]二氮
Figure BPA00001545560700573
在0℃，将0.175g(0.320mmol)的(外消旋)-4-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-2-{4-[(E)-3-(3，4-二氯-苯基)-丙烯酰基]-7-氧代-[1，4]二氮杂
Figure BPA00001545560700574
-1-基}-丁酸甲酯在4.9ml甲醇中的溶液用0.8ml(3.22mmol，4M在二
Figure BPA00001545560700575
烷中)的HCl处理，并在室温保持1.5h。用冷的饱和碳酸氢钠水溶液和二乙醚(2x)提取，随后干燥(Na2SO4)并蒸发，提供0.165g(定量)的标题化合物以及作为白色胶的50％内酯(1-[(E)-3-(3，4-二氯-苯基)-丙烯酰基]-4-(2-氧代-四氢-呋喃-3-基)-[1，4]二氮杂
Figure BPA00001545560700576
-5-酮)。MS：429.3(MH+，2Cl).
中间体7
外消旋-(2-{4-[(E)-3-(3，4-二氯-苯基)-丙烯酰基]-7-氧代-[1，4]二氮杂
Figure BPA00001545560700577
-1-基}-琥珀酸1-甲酯)
Figure BPA00001545560700578
乙酸甲酯
在-78℃，将2.60g(8.30mmol)的1-[(E)-3-(3，4-二氯-苯基)-丙烯酰基]-[1，4]二氮杂-5-酮(中间体5A)在46ml THF中的混悬液用在THF中的9.30ml(9.30mmol)六甲基二甲硅烷基叠氮化锂1M缓慢进行处理。在-78℃20分钟后，将混合物加温以使溶液整体都接近-10℃，并立刻冷却到-78℃。接着，将1.18ml(12.45mmol)的溴代乙酸甲酯在15ml THF的溶液逐滴加入。将溶液自然地过夜加温到室温，倾注在10％KHSO4水溶液上并用EtOAc(3x)提取。将有机相干燥(Na2SO4)并蒸发以提供3.21g(定量)包含最多5％溴代甲酯的浅褐色固体的标题化合物。MS：385.3(MH+，2Cl).
Figure BPA00001545560700581
琥珀酸4-叔丁酯1-甲酯
在-78℃，将0.50g(1.30mmol)的{4-[(E)-3-(3，4-二氯-苯基)-丙烯酰基]-7-氧代-[1，4]二氮杂
Figure BPA00001545560700582
-1-基}-乙酸甲酯在25ml THF中的溶液用在THF中的1.48ml(1.48mmol)的六甲基二甲硅烷基叠氮化锂1M进行缓慢处理。在-78℃30分钟后，逐滴加入0.67ml(4.54mmol)的溴代乙酸叔丁酯在2.5ml THF中的溶液。将溶液在-78℃搅拌5h，倾在冷却的10％KHSO4水溶液上并用Et2O提取(3x)。将有机相用10％NaCl水溶液洗涤，干燥(Na2SO4)并蒸发。将残余物在SiO2-柱(正庚烷/EtOAc1∶1到2∶3)上进行纯化以提供18％产率作为浅黄色泡沫的标题化合物。MS：499.1(MH+，2Cl).
Figure BPA00001545560700583
琥珀酸1-甲酯
将0.30g(0.60mmol)的2-{4-[(E)-3-(3，4-二氯-苯基)-丙烯酰基]-7-氧代-[1，4]二氮杂
Figure BPA00001545560700584
-1-基}-琥珀酸4-叔丁酯1-甲酯在1.2ml二
Figure BPA00001545560700585
烷的溶液冷却到～6°，并将1.50ml(6.01mmol)在二
Figure BPA00001545560700586
烷中的盐酸4M，接着将1滴水加入，并在室温持续搅拌过夜。蒸发溶液，将其溶解于乙腈中并蒸发(2x)以提供定量的作为黄色油的标题化合物。MS：441.2(M-H-，2Cl).
中间体8
外消旋-(2-{4-[(E)-3-(3-氯-苯基)-丙烯酰基]-7-氧代-[1，4]二氮杂-1-基}-琥珀酸1-甲酯)
Figure BPA00001545560700588
在室温，将20.00g(109.52mmol)(E)-3-氯肉桂酸在500ml二氯甲烷中的溶液用6滴DMF进行处理。逐滴加入在60ml二氯甲烷中的10.08ml(115.00mmol)草酰氯，并持续搅拌3h30。蒸发溶液，将其再次溶解于400ml的二氯甲烷中，冷却(0℃)并用12.50g(109.52mmol)的[1，4]二氮杂
Figure BPA00001545560700591
-5-酮和30.49ml(219.05mmol)的三乙胺在190ml二氯甲烷中的溶液进行处理。将反应物过夜加温到室温，接着蒸发。将沉淀物悬浮在90ml水中，搅拌30min，并过滤，用水洗涤，以在减压下干燥过夜后提供28.03g(92％)作为灰白色粉末的标题化合物。MS：278.9(MH+，1Cl).
Figure BPA00001545560700592
甲酯
类似于在中间体7A中所述的方法，在SiO2-柱(正庚烷/EtOAc4∶1-0∶1梯度接着EtOAc/MeOH 98∶2)上纯化后，1-[(E)-3-(3-氯-苯基)-丙烯酰基]-[1，4]二氮杂
Figure BPA00001545560700593
-5-酮以85％的产率提供作为白色泡沫的标题化合物。MS：351.1(MH+，1Cl).
Figure BPA00001545560700594
珀酸4-叔丁酯1-甲酯
类似于在中间体7B中所述的方法，在SiO2-柱(正庚烷/EtOAc1∶1-0∶1梯度)上纯化后，{4-[(E)-3-(3-氯-苯基)-丙烯酰基]-7-氧代-[1，4]二氮杂
Figure BPA00001545560700595
-1-基}-乙酸甲酯以20％产率提供作为白色泡沫的标题化合物。MS：351.1(MH+，1Cl).
D)
Figure BPA00001545560700596
珀酸1-甲酯
类似于在中间体7C中所述的方法，2-{4-[(E)-3-(3-氯-苯基)-丙烯酰基]-7-氧代-[1，4]二氮杂
Figure BPA00001545560700597
-1-基}-琥珀酸4-叔丁酯1-甲酯以定量产率提供作为浅黄色泡沫的标题化合物。MS：407.2M-H-，1Cl).
中间体9
(顺式)-(外消旋)-3，4-双-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-哌啶
通过(顺式)-(外消旋)-3，4-二羟基-哌啶-1-甲酸苄酯(Tetrahedron(四面体)2006，62，3284-3291)，随后进行甲硅烷化(在DMF中的叔丁基-氯-二甲基-硅烷/咪唑)和氢化(10％Pd/C，在乙醇中的H2)进行制备。
中间体10
(外消旋，顺式)-4-羟甲基-4-甲基-哌啶-3-醇；盐酸盐
A)(外消旋)-1-苄基-4-甲基-3-氧代-哌啶-4-甲酸乙酯
将7.75g(69.02mmol)的叔丁醇钾在125ml THF中的乳状溶液冷却(0℃)，并用10.44g(34.00mmol)的乙基-N-苄基-3-氧代-4-哌啶-甲酸酯盐酸盐逐份处理，以使温度不会升高超过5℃。在RT 1h后，将反应物冷却(0℃)，并用4ml的THF中的5.07ml(35.70mmol)碘代甲烷缓慢处理。在室温4.5h后，冷却反应物(0℃)，并用40ml饱和NH4Cl水溶液中和。将水相用Et2O提取(3x)。将有机相用饱和NaCl水溶液洗涤，通过Na2SO4干燥并蒸发以提供4.97g(53％)的作为橙色油的标题化合物。MS：276.1(MH+).
B)(外消旋，顺式)-1-苄基-4-羟甲基-4-甲基-哌啶-3-醇和(外消旋，反 式)-1-苄基-4-羟甲基-4-甲基-哌啶-3-醇
将24.33ml(1.2M在甲苯中，29.20mmol)的DIBALH滴入2.01g(7.30mmol)(外消旋)-1-苄基-4-甲基-3-氧代-哌啶-4-甲酸乙酯在37mlTHF中的干冰冷却(-30℃)的溶液。将溶液自然加温到室温，冷却(0℃)，并再次用6.08ml(1.2M在甲苯中，7.30mmol)的DIBALH进行处理。在室温4小时后，将反应物用冰冷却的10％KHSO4水溶液进行中和。将混合物用醚提取(3x)，将有机相用10％KHSO4水溶液和10％NaCl水溶液进行洗涤，干燥(Na2SO4)并蒸发以在快速硅胶柱(二氯甲烷/MeOH 99∶1-95∶5)后提供0.28g(16％)作为粘性橙色油的(外消旋，顺式)-1-苄基-4-羟甲基-4-甲基-哌啶-3-醇，MS：236.1(MH+)，
0.20g(12％)(外消旋)-1-苄基-4-羟甲基-4-甲基-哌啶-3-醇的顺式/反式混合物
和作为粘性橙色油的0.19g(11％)(外消旋，反式)-1-苄基-4-羟甲基-4-甲基-哌啶-3-醇。MS：236.3(MH+)
C)(外消旋，顺式)-4-羟甲基-4-甲基-哌啶-3-醇；盐酸盐
在MeOH中，在H2-气氛上，用1当量的1N HCl水溶液和Pd/C(10％)对(外消旋，顺式)-1-苄基-4-羟甲基-4-甲基-哌啶-3-醇进行氢化，提供作为浅黄色固体的标题化合物。MS：146.1(MH+).
中间体11
(3SR，4SR)-4-氟-哌啶-3-醇；盐酸盐
A)(3SR，4SR)-4-氟-哌啶-3-醇-1-甲酸叔丁酯
将(外消旋)-7-氧杂-3-氮杂-二环[4.1.0]庚烷-3-甲酸叔丁酯(heterocycles(杂环化合物)1994，39，163)(2.0g，10mmol)溶于DCE(1.5ml)和trisHF.Et3N(1.6g，10mmol)的混合物中，并加热到80℃12h，其后将反应物用二氯甲烷进行稀释，用饱和的NaHCO3洗涤，接着用饱和的NH4Cl洗涤，干燥(Na2SO4)并浓缩。通过快速柱色谱法纯化(EtOAc∶正庚烷 3∶7)，提供作为黄色液体的标题化合物(1.5g，66％)。MS：220.1(MH+).还获得作为黄色油的区域异构体(外消旋，反式)-3-氟-4-羟基-哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.26g，12％)。MS：220.1(MH+)。
B)(3SR.4SR)-4-氟-哌啶-3-醇；盐酸盐
将(外消旋，反式)-4-氟-哌啶-3-醇-1-甲酸叔丁酯(0.5g，2mmol)用二
Figure BPA00001545560700611
烷中的HCl进行脱保护，提供作为白色粉末的标题产物(0.34g，95％)。MS：120.1(MH+).
中间体12
3-[(S)-4-(3，4-二氯-苯基氨基甲酰基)-3-甲基-2-氧代-哌嗪-1-基]-丙酸
A)(S)-2-(2，2-二甲氧基-乙基氨基)-丙酸甲酯
在0℃，向L-丙氨酸甲酯盐酸盐(5.00g，35.8mmol)在甲醇(100mL)的溶液中加入二甲氧基醛(在叔丁基甲醚中的45％溶液，12.0mL，47mmol)硬脂酸镁(38.8g，322mmol)，和氰基硼氢化钠(3.08g，46.6mmol)。移去冰浴，接着，在16h后，在0℃通过小心加入饱和碳酸氢钠水溶液来破坏过量试剂。将反应混合物在饱和碳酸氢钠水溶液和乙酸乙酯之间进行分配。将有机层用盐水进行洗涤，干燥(MgSO4)，过滤，并蒸发以提供标题化合物(5.50g，80％)。浅黄色液体，MS(ISP)＝192.2(M+H)+。
B)(S)-2-[苄基氧基羰基-(2，2-二甲氧基-乙基)-氨基]-丙酸甲酯
在0℃，将氯甲酸苄酯(4.46g，24.8mmol)加入(S)-2-(2，2-二甲氧基-乙基氨基)-丙酸甲酯(4.75g，24.8mmol)和碳酸氢钠(4.17g，49.7mmol)在丙酮(25mL)和水(25mL)的混合物中。移去冰浴，接着在2h后，将反应混合物倾在冰水上，并用乙酸乙酯提取。干燥有机层(MgSO4)，过滤，并蒸发。色谱法(SiO2；庚烷-乙酸乙酯梯度提供标题化合物(5.84g，72％)。黄色油，MS(ISP)＝348.2(M+Na)+.
C)(S)-2-[苄氧基羰基-(2-氧代-乙基)-氨基]-丙酸甲酯
将(S)-2-[苄氧基羰基-(2，2-二甲氧基-乙基)-氨基]-丙酸甲酯(26.0g，80.0mmol)和吡啶鎓甲苯-4-磺酸盐(10.0g，40.0mmol)在2-丁酮(260mL)和水(8.6mL，0.48mol)中的溶液在回流下加热16h，接着将溶液分配在乙酸乙酯和水之间。将有机层用盐水洗涤，干燥(MgSO4)，过滤，并蒸发以提供标题化合物(24.3g)，将其直接用于下一步中。黄色油，MS(ISP)＝348.3(M+Na)+。
D)(S)-4-(2-叔丁氧基羰基-乙基)-2-甲基-3-氧代-哌嗪-1-甲酸苄酯
将(S)-2-[苄氧基羰基-(2-氧代-乙基)-氨基]-丙酸甲酯(1.25g，4.50mmol)在二氯甲烷(25mL)中的溶液在室温逐滴加入3-氨基-丙酸叔丁酯盐酸盐(0.86g，4.70mmol)，三乙胺(0.66ml，4.70mmol)，乙酸(0.51，9.00mmol)，和三乙酰氧基硼氢化钠(1.09g，5.10mmol)在二氯甲烷(12.5mL)中的混悬液中，并搅拌过夜。将反应物用水性10％KHSO4/EtOAc提取(3x)。将有机相用饱和的NaHCO3水溶液、10％NaCl进行洗涤，通过Na2SO4干燥，在蒸发溶剂后产生1.21g(58％)的作为浅黄色油的标题化合物。MS：377.3(MH+).
E)3-((S)-3-甲基-2-氧代-哌嗪-1-基)-丙酸叔丁酯与0.1HCl
将1.19g(3.20mmol)(S)-4-(2-叔丁氧基羰基-乙基)-2-甲基-3-氧代-哌嗪-1-甲酸苄酯在15ml甲醇中的溶液用0.32ml的1M盐酸水溶液和0.12g的Pd/C(10％)的溶液处理，并在H2-气氛上搅拌1h。过滤后，蒸发溶液，将其溶解于二氯甲烷中，干燥(Na2SO4)并在减压下蒸发，产生0.77g(90％)作为浅黄色油的标题化合物。MS：243.3(MH+).
F)3-[(S)-4-(3，4-二氯-苯基氨基甲酰基)-3-甲基-2-氧代-哌嗪-1-基]-丙酸 叔丁酯
在0℃，将0.75g(3.10mmol)3-((S)-3-甲基-2-氧代-哌嗪-1-基)-丙酸叔丁酯与0.1HCl在16ml二氯甲烷中的溶液用0.70g(3.70mmol)的3，4-二氯苯基异氰酸酯和0.52ml(3.70mmol)的三乙胺进行处理。30分钟后，将反应物加温到室温并用水性10％KHSO4/EtOAc(3x)提取3次。将有机相用饱和NaHCO3水溶液，10％NaCl洗涤，并通过Na2SO4干燥，在通过快速硅胶柱(EtOAc/正庚烷1∶2到3∶1)纯化后，产生0.91g(68％)作为白色泡沫的标题化合物。MS：374.1(MH+，2Cl).
G)3-[(S)-4-(3，4-二氯-苯基氨基甲酰基)-3-甲基-2-氧代-哌嗪-1-基]-丙酸
在0℃，将0.45g(1.10mmol)的3-[(S)-4-(3，4-二氯-苯基氨基甲酰基)-3-甲基-2-氧代-哌嗪-1-基]-丙酸叔丁酯在3.0ml二氯甲烷中的溶液用5.40ml(21.60mmol，4M在二
Figure BPA00001545560700631
烷中)的HCl处理，并搅拌，加温到室温过夜。蒸发反应物，将其溶解于甲苯并蒸发(3x)，提供0.52g(定量)的作为浅黄色泡沫的标题化合物。MS：372.1(M-H-，2Cl).
中间体13
(S)-1-[4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁基]-3-甲基-哌嗪-2-酮
A)(S)-4-(3-叔丁氧基羰基-丙基)-2-甲基-3-氧代-哌嗪-1-甲酸苄酯
类似于中间体12D，(S)-2-[苄氧基羰基-(2-氧代-乙基)-氨基]-丙酸甲酯(中间体12C)和4-氨基-丁酸叔丁酯盐酸盐以98％产率提供作为橙色的油的标题化合物。MS：413.2(M+Na+).
B)(S)-4-(3-羧基-丙基)-2-甲基-3-氧代-哌嗪-1-甲酸苄酯
类似于中间体12G，(S)-4-(3-叔丁氧基羰基-丙基)-2-甲基-3-氧代-哌嗪-1-甲酸苄酯以定量产率提供作为褐色油的标题化合物。MS：335.2(MH+).
C)(S)-4-[4-((S)-4-羟基-6-氮杂-[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁基]-2-甲基-3- 氧代-哌嗪-1-甲酸苄酯
类似于在实施例15中所述的方法，(S)-4-(3-羧基-丙基)-2-甲基-3-氧代-哌嗪-1-甲酸苄酯和1.1当量的(S)-6-氮杂-螺[2.5]辛-4-醇；在快速色谱法(SiO2，EtOAc/2-丙醇100％EtOAc到1/2)后，盐酸盐(中间体2)以64％产率提供作为浅黄色泡沫的标题化合物。MS：444.2(MH+).
D)(S)-1-[4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基-4-氧代-丁基]-3-甲基-哌 嗪-2-酮
类似于中间体12E，不用HCl水溶液来氢化(S)-4-[4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁基]-2-甲基-3-氧代-哌嗪-1-甲酸苄酯，以98％产率提供作为浅黄色油的标题化合物。MS：310.2(MH+).
中间体14
1-异氰酰-4-三氟甲氧基-苯
向0.41ml(3.00mmol)的4-(三氟甲氧基)苯胺在5.4ml THF的溶液中加入0.22ml(1.80mmol)氯甲酸三氯甲酯并加热到回流45分钟。在减压下蒸发溶液，将其溶解于甲苯并蒸发(2x)，以提供0.60g(99％)的作为粉红色固体的标题化合物。MS：203 M+.
中间体15
1-异氰酰-3-三氟甲氧基-苯
类似于中间体14，3-(三氟甲氧基)苯胺提供97％的作为白色固体的标题化合物。MS：203 M+.
中间体16
2-氯-4-异氰酰-1-三氟甲基-苯
类似于中间体14，3-氯-4-(三氟甲基)苯胺提供73％的作为浅褐色油的标题化合物。MS：221(M+，1Cl).
中间体17
2-氯-4-异氰酰-1-三氟甲氧基-苯
类似于中间体14，3-氯-4-(三氟甲氧基)苯胺提供86％的作为浅褐色油的标题化合物。MS：237(M+，1Cl).
中间体18
1-氯-4-异氰酰-2-三氟甲氧基-苯
类似于中间体14，4-氯-3-(三氟甲氧基)苯胺提供87％的作为浅褐色油的标题化合物。MS：237(M+，1Cl).
中间体19
4-[(S)-4-(3-氯-苯基氨基甲酰基)-3-甲基-2-氧代-哌嗪-1-基]-丁酸
A)4-[(S)-4-(3-氯-苯基氨基甲酰基)-3-甲基-2-氧代-哌嗪-1-基]-丁酸叔 丁酯
类似于实施例25，3-((S)-3-甲基-2-氧代-哌嗪-1-基)-丙酸叔丁酯(中间体12E)与0.1HCl和3-氯苯基异氰酸酯提供79％的作为白色泡沫的标题化合物。MS：354.12(M-tBu+H+，1Cl).
B)4-[(S)-4-(3-氯-苯基氨基甲酰基)-3-甲基-2-氧代-哌嗪-1-基]-丁酸
类似于中间体12G，4-[(S)-4-(3-氯-苯基氨基甲酰基)-3-甲基-2-氧代-哌嗪-1-基]-丁酸叔丁酯和在二
Figure BPA00001545560700651
烷中的HCl提供定量的作为白色泡沫的标题化合物。MS：354.12(MH+，1Cl).
中间体20
2-氧杂-7-氮杂-螺[3.5]壬烷三氟-乙酸盐
在0℃，将三氟乙酸(125mg，1.1mmol)加入2-氧杂-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁酯(美国专利7,105,507 B2；50mg，0.22mmol)在二氯甲烷中的溶液中，接着1h后，浓缩反应混合物以提供标题化合物(83mg)，其包含大约1当量另外的三氟乙酸。无色的油，1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)：8.4(br.s，2H)，4.32(s，4H)，3.05-2.95(m，4H)，1.95-1.9(m，4H).
中间体21
(S)-1-[5-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-5-氧代-戊基]-3-甲基-哌嗪-2-酮
A)(S)-4-(4-叔丁氧基羰基-丁基)-2-甲基-3-氧代-哌嗪-1-甲酸苄酯
类似于中间体12D，(S)-2-[苄氧基羰基-(2-氧代-乙基)-氨基]-丙酸甲酯(中间体12C)和4-氨基-戊酸叔丁酯盐酸盐以86％产率提供作为浅黄色油的标题化合物。MS：349.18(MH+).
B)(S)-4-(4-羧基-丁基)-2-甲基-3-氧代-哌嗪-1-甲酸苄酯
类似于中间体12G，(S)-4-(4-叔丁氧基羰基-丁基)-2-甲基-3-氧代-哌嗪-1-甲酸苄酯和在二烷中的HCl以99％产率提供作为褐色油的标题化合物。MS：349.18(MH+).
C)(S)-4-[5-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-5-氧代-戊基-2-甲基-3- 氧代-哌嗪-1-甲酸苄酯
类似于在实施例15中所述的方法，(S)-4-(4-羧基-丁基)-2-甲基-3-氧代-哌嗪-1-甲酸苄酯和1.1当量的(S)-6-氮杂-螺[2.5]辛-4-醇；盐酸盐(中间体2)在快速色谱法后(SiO2，二氯甲烷/MeOH 100％二氯甲烷到85/15)以61％产率提供作为浅黄色非晶形固体的标题化合物。MS：458.26(MH+).
D)(S)-1-[5-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-5-氧代-戊基-3-甲基-哌 嗪-2-酮
类似于中间体12E，在不用HCl水溶液的条件下氢化(S)-4-[5-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-5-氧代-戊基-2-甲基-3-氧代-哌嗪-1-甲酸苄酯，以83％产率提供作为浅黄色油的标题化合物。MS：324.23(MH+).
中间体22
(外消旋)-4-氨基-3-羟基-丁酸甲酯；HCl
在0℃，将1.95ml(27.40mmol)的乙酰氯小心加入20ml的MeOH，随后加入1.19g(10.00mmol)的DL-4-氨基-3-羟基丁酸。在0℃，持续搅拌2h，接着蒸发反应物并在减压下干燥以产生1.76g(定量)作为无色粘性油的标题化合物。MS：134.08(MH+).
中间体23
(S)-1-[(R，S)-2-羟基-4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁基]-3-甲基-哌嗪-2-酮
A)(S)-4-((R，S)-2-羟基-3-甲氧基羰基-丙基)-2-甲基-3-氧代-哌嗪-1-甲 酸苄酯
注意：使用前，两种起始物料与甲苯一起蒸发(2x)！
在0℃，将0.88g(5.18mmol)的(外消旋)-4-氨基-3-羟基-丁酸甲酯；HCl(中间体22)和1.38ml(9.89mmol)的三乙胺在23.6ml的二氯甲烷中的溶液用1.31ml(10.36mmol)氯三甲基硅烷在11.8ml的二氯甲烷的溶液逐滴处理(10分钟)。移去冷却浴，并在室温1.5h后，在减压下蒸发溶剂。
将粗制产物悬浮在23.6ml的二氯甲烷和0.70ml(4.94mmol)的三乙胺中，并加入0.54ml(9.42mmol)的AcOH(pH～5)和1.18g(5.41mmol)的三乙酰氧基硼氢化钠。冷却反应物(0℃)并在20分钟内用在20ml二氯甲烷中的(S)-2-[苄氧基羰基-(2-氧代-乙基)-氨基]-丙酸甲酯(中间体12C)逐滴处理。移去冷却浴并将反应物在室温搅拌过夜。将反应物倾在水性10％KHSO4/Et2O上(3x)。将有机相用饱和的NaHCO3水溶液洗涤(2x)，10％NaCl洗涤并通过Na2SO4干燥以在蒸发后产生1.83g的作为黄色油的粗制化合物。将该油溶于80ml的THF中，加入40ml的25％AcOH，并在1.5h后，用水性10％KHSO4/Et2O提取该混合物(3x)。将有机相用水性饱和NaHCO3(2x)洗涤，10％NaCl洗涤，并通过Na2SO4上干燥，以在快速色谱法(SiO2，正庚烷/AcOEt 2∶1-1∶4)后产生1.15g(61％)的作为无色粘性油的标题化合物。MS：365.17(MH+).
B)(S)-4-((R，S)-3-羧基-2-羟基-丙基)-2-甲基-3-氧代-哌嗪-1-甲酸苄酯
在0℃，将0.91g(2.50mmol)的(S)-4-((R，S)-2-羟基-3-甲氧基羰基-丙基)-2-甲基-3-氧代-哌嗪-1-甲酸苄酯在12.6ml的四氢呋喃/乙醇(1∶1)中的溶液用5.0ml(5.00mmol)的1M氢氧化锂水溶液进行处理，并在室温搅拌1.5h。将反应物用冷的水性10％KHSO4中和并用Et2O提取(3x)。将有机相用水性10％NaCl洗涤，通过Na2SO4干燥并蒸发以在沉淀后(二氯甲烷/正戊烷)产生0.66g(75％)作为浅黄色粘性油的标题化合物。MS：351.15(MH+).
C)(S)-4-[(R，S)-2-羟基-4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基-4-氧代-丁 基]-2-甲基-3-氧代-哌嗪-1-甲酸苄酯
类似于在实施例15中所述的方法，在沉淀(二氯甲烷/正戊烷)后，(S)-4-((R，S)-3-羧基-2-羟基-丙基)-2-甲基-3-氧代-哌嗪-1-甲酸苄酯和1.1当量的(S)-6-氮杂-螺[2.5]辛-4-醇；盐酸盐(中间体2)以定量产率提供作为灰白色固体的标题化合物。MS：460.24(MH+).
D)(S)-1-[(R，S)-2-羟基-4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁 基]-3-甲基-哌嗪-2-酮
类似于中间体12E，在不用HCl水溶液的条件下氢化(S)-4-[(R，S)-2-羟基-4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁基]-2-甲基-3-氧代-哌嗪-1-甲酸苄酯以在沉淀(二氯甲烷/Et2O)后以定量产率提供作为白色非晶形固体的标题化合物。MS：326.20(MH+).
中间体24
(S)-4-氨基-3-羟基-丁酸甲酯，盐酸盐
类似于中间体22，(S)-(+)-4-氨基-3-羟基丁酸和在MeOH中的乙酰氯提供作为浅黄色油的定量标题化合物。MS：134.08(MH+).
中间体25
(S)-1-[(S)-2-羟基-4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁基]-3-甲基-哌嗪-2-酮
A)(S)-4-((S)-2-羟基-3-甲氧基羰基-丙基)-2-甲基-3-氧代-哌嗪-1-甲酸 苄酯
类似于在实施例12D中所述的方法，(S)-2-[苄氧基羰基-(2-氧代-乙基)-氨基]-丙酸甲酯(中间体12C)和(S)-4-氨基-3-羟基-丁酸甲酯，盐酸盐(中间体24)以59％产率提供作为浅黄色油的标题化合物。MS：365.17(MH+).
B)(S)-4-((S)-3-羧基-2-羟基-丙基)-2-甲基-3-氧代-哌嗪-1-甲酸苄酯
类似于在实施例23B中所述的方法，在用EtOAc提取和沉淀(二氯甲烷/正戊烷)后，(S)-4-((S)-2-羟基-3-甲氧基羰基-丙基)-2-甲基-3-氧代-哌嗪-1-甲酸苄酯和1M氢氧化锂水溶液以81％产率提供作为浅黄色蜡状固体的标题化合物。MS：351.15(MH+).
C)(S)-4-[(S)-2-羟基-4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁 基]-2-甲基-3-氧代-哌嗪-1-甲酸苄酯
类似于在实施例15中所述的方法，在沉淀(二氯甲烷/正戊烷)后，(S)-4-((S)-3-羧基-2-羟基-丙基)-2-甲基-3-氧代-哌嗪-1-甲酸苄酯和1.1当量的(S)-6-氮杂-螺[2.5]辛-4-醇；盐酸盐(中间体2)以87％产率提供的作为白色固体的标题化合物。MS：460.24(MH+).
D)(S)-1-[(S)-2-羟基-4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁 基]-3-甲基-哌嗪-2-酮
类似于中间体12E，在不用HCl水溶液的条件下氢化(S)-4-[(S)-2-羟基-4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁基]-2-甲基-3-氧代-哌嗪-1-甲酸苄酯，以64％产率提供作为灰白色蜡状固体的标题化合物。MS：326.21(MH+).
中间体26
4-异氰酰-1，2-双-三氟甲基-苯
类似于中间体14，3，4-双(三氟甲基)苯胺提供79％的作为黄色固体的标题化合物。MS：255(M+).
中间体27
4-氨基-2，2-二甲基-丁酸甲酯，盐酸盐
类似于中间体22，4-氨基-2，2-二甲基丁酸和在MeOH中的乙酰氯提供98％的作为灰白色固体的标题化合物。MS：146.12(MH+).
中间体28
(S)-1-[4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-3，3-二甲基-4-氧代-丁基]-3-甲基-哌嗪-2-酮
A)(S)-4-(3-甲氧基羰基-3-甲基-丁基)-2-甲基-3-氧代-哌嗪-1-甲酸苄酯
类似于在实施例12D中所述的方法，(S)-2-[苄氧基羰基-(2-氧代-乙基)-氨基]-丙酸甲酯(中间体12C)和4-氨基-2，2-二甲基-丁酸甲酯，盐酸盐(中间体27)，以90％产率提供作为浅黄色油的标题化合物。MS：377.21(MH+).
B)(S)-4-(3-羧基-3-甲基-丁基)-2-甲基-3-氧代-哌嗪-1-甲酸苄酯
类似于在实施例23B中所述的方法，(S)-4-(3-甲氧基羰基-3-甲基-丁基)-2-甲基-3-氧代-哌嗪-1-甲酸苄酯和1M氢氧化锂水溶液以70％产率提供作为浅黄色油的标题化合物。MS：363.19(MH+).
C)(S)-4-[4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-3，3-二甲基-4-氧代-丁 基]-2-甲基-3-氧代-哌嗪-1-甲酸苄酯
类似于在实施例15中所述的方法，在用快速色谱法(SiO2，二氯甲烷/甲醇98∶2-95∶5)纯化后，(S)-4-(3-羧基-3-甲基-丁基)-2-甲基-3-氧代-哌嗪-1-甲酸苄酯和1.7当量的(S)-6-氮杂-螺[2.5]辛-4-醇；盐酸盐(中间体2)以67％产率提供作为浅黄色泡沫的标题化合物。MS：472.28(MH+).
D)(S)-1-[4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺-[2.5]辛-6-基)-3，3-二甲基-4-氧代-丁 基]-3-甲基-哌嗪-2-酮
类似于中间体12E，不用HCl水溶液氢化(S)-4-[4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-3，3-二甲基-4-氧代-丁基]-2-甲基-3-氧代-哌嗪-1-甲酸苄酯，以99％产率提供作为浅黄色油的标题化合物。MS：338.24(MH+).
中间体29
(S)-5-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-2-((S)-3-甲基-2-氧代-哌嗪-1-基)-5-氧代-戊酸甲酯；盐酸盐
A)(S)-2-((S)-4-苄氧基羰基-3-甲基-2-氧代-哌嗪-1-基)-戊二酸5-叔丁 酯1-甲酯
类似于在实施例12D中所述的方法，(S)-2-[苄氧基羰基-(2-氧代-乙基)-氨基]-丙酸甲酯(中间体12C)和L-谷氨酸γ-叔丁酯α-甲酯；盐酸盐以97％产率提供作为浅黄色油的标题化合物。MS：471.21(M+Na+).
B)(S)-2-((S)-4-苄氧基羰基-3-甲基-2-氧代-哌嗪-1-基)-戊二酸1-甲酯
类似于在中间体12G中所述的方法，(S)-2-((S)-4-苄氧基羰基-3-甲基-2-氧代-哌嗪-1-基)-戊二酸5-叔丁酯1-甲酯和在二
Figure BPA00001545560700701
烷中的HCl以97％产率提供褐色油的标题化合物。MS：393.17(MH+).
C)(S)-4-[(S)-4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-1-甲氧基羰基-4-氧 代-丁基]-2-甲基-3-氧代-哌嗪-1-甲酸苄酯
类似于在实施例15中所述的方法，在用快速色谱法(SiO2，二氯甲烷/甲醇98∶2-9∶1)纯化后，(S)-2-((S)-4-苄氧基羰基-3-甲基-2-氧代-哌嗪-1-基)-戊二酸1-甲酯和1.1当量的(S)-6-氮杂-螺[2.5]辛-4-醇；盐酸盐(中间体2)以71％产率提供作为浅褐色油的标题化合物。MS：502.26(MH+).
D)(S)-5-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-2-((S)-3-甲基-2-氧代-哌嗪 -1-基)-5-氧代-戊酸甲酯；盐酸盐
类似于中间体12E，用1当量的HCl水溶液氢化(S)-4-[(S)-4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-1-甲氧基羰基-4-氧代-丁基]-2-甲基-3-氧代-哌嗪-1-甲酸苄酯以在沉淀(二氯甲烷/Et2O)后以定量产率提供作为灰白色固体的标题化合物。MS：366.20M-H-).
中间体30
4-(2，2-二甲氧基-乙基氨基)-丁酸叔丁酯
向2.94g(15.00mmol)的4-氨基丁酸叔丁酯；盐酸盐在75mlMeOH中的冷却溶液(0℃)加入2.51ml(18.00mmol)的二甲氧基乙醛(45％溶液在TBME中)，3.86ml(15.00mmol)的三乙胺，16.75g(135.00mmol)的硫酸镁，3.43ml(60.00mmol)的AcOH和1.29g(19.50mmol)的氰基硼氢化钠(1.99g，31.6mmol)。将反应在室温搅拌2h，再加入0.39ml(1.50mmol)的二甲氧基乙醛(45％溶液，在TBME中)，并且在1.5h后，将反应混合物在饱和NaHCO3水溶液和EtOAc/Et2O(1∶1)之间分配(3x)。将有机相用饱和NaHCO3水溶液，10％NaCl洗涤并通过Na2SO4干燥以在溶剂蒸发后产生1.87g(50％)的作为浅黄色油的标题化合物。MS：248.18(MH+).
中间体31
(R)-2-(3，4-二氯-苯基氨基)-丙酸(62％ee)
在氩气下，将6.00g(22.00mmol)3，4-二氯碘代苯，2.94g(33.00mmol)D-丙氨酸，0.42g(2.20mmol)碘化铜(I)，0.96g(4.40mmol)2-羟基苯甲醛苯基腙，14.00g(66.00mmol)磷酸三钾在32ml的N，N-二甲基甲酰胺中的混合物在80℃搅拌16h，接着在冷却后用水稀释，并通过加入25％HCl水溶液酸化到pH 3。将混合物用EtOAc提取(3x)，将有机相用盐水洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤并蒸发。快速色谱法(SiO2；二氯甲烷/MeOH 95∶5到4∶1)提供3.11g(60％)作为浅褐色固体的标题化合物((R)和(S)立体异构体的81∶19混合物，BGB-175*0.25柱)。MS：231.9(M-H-，2Cl).
中间体32
(S)-2-(3-氯-4-三氟甲基-苯基氨基)-丙酸(26％ee)
类似于中间体31，L-丙氨酸和4-溴-2-氯苯并三氟化物提供69％的标题化合物(作为(S)和(R)立体异构体的63∶37混合物，BGB-175*0.25柱)，其为浅褐色固体。MS：266.02(M-H-，Cl).
中间体33
(S)-2-(4-氯-3-三氟甲氧基-苯基氨基)-丙酸(22％ee)
类似于中间体31，L-丙氨酸和5-溴-2-氯(三氟甲氧基)苯提供38％的作为浅褐色固体的标题化合物(作为(S)和(R)立体异构体的61∶39混合物，BGB-175*0.25柱)。MS：282.01(M-H-，Cl).
中间体34
4-[(R)-4-(3-氯-4-三氟甲基-苯基)-3-甲基-7-氧代-2，3，4，7-四氢-[1，4]二氮杂
Figure BPA00001545560700721
-1-基]-丁酸(22％ee)
A)(R)-2-(3-氯-4-三氟甲基-苯基氨基)-丙酸
类似于中间体31，D-丙氨酸和4-溴-2-氯苯并三氟化物提供73％作为黄色固体的标题化合物(作为(R)和(S)立体异构体的61∶39混合物，BGB-175*0.25柱)。MS：266.02(M-H-，Cl).
B)(R)-2-(3-氯-4-三氟甲基-苯基氨基)-丙-1-醇(22％ee)
在0℃，将20.55ml(20.55mmol，1M在THF中)的硼烷-四氢呋喃复合溶液逐滴加入2.20g(8.20mmol)的(R)-2-(3-氯-4-三氟甲基-苯基氨基)-丙酸(22％ee)在33ml THF中的溶液中，接着在10分钟后，去除冰浴，并将溶液在室温搅拌2.5h。冷却后，加入14ml的MeOH和0.7ml的H2SO4，在室温30分钟，和在回流1小时后，在真空中浓缩反应混合物。将残余物在用NaCl溶液饱和的1M水性氢氧化钠和EtOAc之间分配(3x)。将有机层用盐水洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤，并蒸发。快速硅胶柱(CH2Cl2/MeOH 99∶1)提供1.94g(93％)的标题化合物，其为作为黄色油的(R)和(S)立体异构体的61∶39混合物。MS：252.04(M-H-，Cl)
C)4-[(R)-2-(3-氯-4-三氟甲基-苯基氨基)-丙基氨基]-丁酸叔丁酯 (22％ee)
在10分钟内，在-50到-60℃，向0.36ml(4.10mmol)的草酰氯在10ml CH2Cl2中的溶液加入0.60ml(8.50mmol)二甲亚砜在2.4ml的CH2Cl2中的溶液。将溶液搅拌5分钟，并在10分钟内加入0.90(3.50mmol)(R)-2-(3-氯-4-三氟甲基-苯基氨基)-丙-1-醇(22％ee)在10ml的CH2Cl2中的溶液。将混合物搅拌15分钟，并在20分钟内加入2.47ml(17.70mmol)的三乙胺。将混悬液搅拌75分钟，并缓慢到0℃(完全氧化，随后进行TLC，SiO2，EtOAc∶正庚烷1∶1)。加入0.73g(3.70mmol)的4-氨基丁酸叔丁酯；盐酸盐和0.41ml(7.10mmol)的乙酸将pH调节到5，随后加入0.85g(3.90mmol)的三乙酰氧基硼氢化钠。在0℃ 5分钟和在室温1.5h后，将反应物倾在饱和NaHCO3水溶液的溶液上，并用EtOAc提取(3次)。将有机相用10％NaCl水溶液的溶液洗涤。将合并的有机相通过Na2SO4进行干燥，并在真空下去除溶剂以提供1.31g(94％)作为(R)和(S)非对映异构体的61∶39混合物的标题化合物，其为橙色的油。MS：395.17(MH+，Cl).
D)4-[[(R)-2-(3-氯-4-三氟甲基-苯基氨基)-丙基]-(3，3-二甲氧基-丙酰)- 氨基]-丁酸叔丁酯(22％ee)
将1.25g(3.20mmol)的4-[(R)-2-(3-氯-4-三氟甲基-苯基氨基)-丙基氨基]-丁酸叔丁酯(22％ee)在25ml CH2Cl2中的溶液用1.00g(3.80mmol)的2-氯-1-甲基吡啶鎓碘化物和0.51g(3.80mmol)的3，3-二甲氧基-丙酸(通过用LiOH水解，从3，3-二甲氧基-丙酸甲酯合成)在5mlCH2Cl2中的溶液进行处理。将混悬液冷却，并用1.89ml(7.90mmol)的三丁胺在0℃处理。将反应物自然加温到室温过夜。将反应物用10％KHSO4水溶液/二乙醚提取(3x)。将有机相用10％KHSO4水溶液(2x)、饱和NaHCO3水溶液、10％NaCl水溶液洗涤，并通过Na2SO4干燥以产生1.68g(定量)标题化合物，其为(R)和(S)非对映异构体的61∶39混合物，其为浅褐色油。MS：511.22(MH+，Cl).
E)4-[(R)-4-(3-氯-4-三氟甲基-苯基)-3-甲基-7-氧代-2，3，4，7-四氢-[1，4] 二氮杂
Figure BPA00001545560700731
-1-基]-丁酸(22％ee)
将1.00g(2.00mmol)的4-[[(R)-2-(3-氯-4-三氟甲基-苯基氨基)-丙基]-(3，3-二甲氧基-丙酰)-氨基]-丁酸叔丁酯(22％ee)在18ml CH2Cl2中的冷却溶液(0℃)用2.25ml(29.40mmol)的三氟乙酸处理并在室温2h后用1.55ml(9.80mmol)的三乙基硅烷处理。将反应物在室温搅拌16h，冷却(0℃)并用4.09ml(29.40mmol)的三乙胺中和。将残余物溶于二乙醚和冷水。将反应物用10％KHHSO4水溶液/EtOAc提取(3x)。将有机相用10％KHSO4水溶液洗涤，通过Na2SO4干燥并蒸发。快速硅胶柱(CH2Cl2/MeOH 99∶2到9∶1)提供0.57g(74％)的标题化合物，其为作为褐色油的(R)和(S)非对映异构体的61∶39混合物。MS：389.09(M-H-，Cl).
中间体35
4-[(R)-4-(4-氯-3-三氟甲基-苯基)-3-甲基-7-氧代-2，3，4，7-四氢-[1，4]二氮杂
Figure BPA00001545560700741
-1-基]-丁酸(46％ee)
A)(R)-2-(4-氯-3-三氟甲基-苯基氨基)-丙酸(46％ee)
类似于中间体31，D-丙氨酸和1-氯-4-碘代-2-三氟甲基-苯提供66％的作为褐色固体的标题化合物((R)和(S)立体异构体的73∶27混合物，Reprosil手性-NR柱)。MS：266.02(M-H-，Cl).
B)(R)-2-(4-氯-3-三氟甲基-苯基氨基)-丙-1-醇(46％ee)
类似于中间体34B，(R)-2-(4-氯-3-三氟甲基-苯基氨基)-丙酸(46％ee)和硼烷-四氢呋喃复合物提供87％的标题化合物，其为浅褐色的油。MS：254.06(MH+，Cl).
C)4-[(R)-2-(4-氯-3-三氟甲基-苯基氨基)-丙基氨基]-丁酸甲酯(46％ ee)
类似于中间体34C，(R)-2-(3-氯-4-三氟甲基-苯基氨基)-丙-1-醇(46％ee)和4-氨基丁酸甲酯盐酸盐提供94％的作为红色油的标题化合物。MS：353.12(MH+，Cl).
D) 4-[[(R)-2-(4-氯-3-三氟甲基-苯基氨基)-丙基]-(3，3-二甲氧基-丙酰)- 氨基]-丁酸甲酯(46％ee)
类似于中间体34D，4-[(R)-2-(4-氯-3-三氟甲基-苯基氨基)-丙基氨基]-丁酸甲酯(46％ee)和3，3-二甲氧基-丙酸提供87％的作为褐色油的标题化合物。MS：469.17(MH+，Cl).
E)4-[(R)-4-(4-氯-3-三氟甲基-苯基)-3-甲基-7-氧代-2，3，4，7-四氢-[1，4]
Figure BPA00001545560700742
类似于中间体34E，4-[[(R)-2-(4-氯-3-三氟甲基-苯基氨基)-丙基]-(3，3-二甲氧基-丙酰)-氨基]-丁酸甲酯(46％ee)和TFA/三乙基硅烷提供37％作为褐色蜡状固体的标题化合物。MS：405.12(MH+，Cl).
F)4-[(R)-4-(4-氯-3-三氟甲基-苯基)-3-甲基-7-氧代-2，3，4，7-四氢-[1，4]
类似于关于中间体5C所述的方法，4-[(R)-4-(4-氯-3-三氟甲基-苯基)-3-甲基-7-氧代-2，3，4，7-四氢-[1，4]二氮杂
Figure BPA00001545560700744
-1-基]-丁酸甲酯(46％ee)与在THF/MeOH中的1M氢氧化锂水溶液一起提供标题化合物，其产率为96％，是浅褐色固体。MS：391.10(MH+，Cl).
中间体36
{4-[(E)-3-(3，4-二氯-苯基)-丙烯酰基]-7-氧代-[1，4]二氮杂
Figure BPA00001545560700751
-1-基}-乙酸
Figure BPA00001545560700752
乙酸乙酯
类似于在中间体5B中所述的方法，在SiO2-柱(正庚烷/EtOAc1∶2到100％EtOAc)上纯化后，1-[(E)-3-(3，4-二氯-苯基)-丙烯酰基]-[1，4]二氮杂
Figure BPA00001545560700753
-5-酮(中间体5A)和溴代乙酸乙酯提供标题化合物，其产率为51％，是白色泡沫。MS：399.1(MH+，2Cl).
Figure BPA00001545560700754
酸
类似于在中间体5C中所述的方法，{4-[(E)-3-(3，4-二氯-苯基)-丙烯酰基]-7-氧代-[1，4]二氮杂-1-基}-乙酸乙酯和1M氢氧化锂水溶液在用水性10％KHSO4酸化、过滤和用水洗涤后，以定量产率提供标题化合物，其为白色固体。MS：371.0(MH+，2Cl).
中间体37
(外消旋)-(2-甲基-吡咯烷-2-基)-甲醇
将1.6g(6.4mmol)的2-羟甲基-2-甲基-吡咯烷-1-甲酸苄酯(WO2008/81910 A1)溶于10ml MeOH，加入0.1g的10％披钯活性炭，并将混合物在氢气压(气囊)下搅拌30分钟。接着，通过Hyflo过滤反应物并浓缩，以定量产率提供标题化合物，其为白色泡沫。1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)：3.1(s，2H)，2.83-2.74(m，2H)，1.68-1.60(m，4H)，0.98(s，3H).
中间体38
3-{(R)-4-[(E)-3-(3-氯-苯基)-丙烯酰基]-3-甲基-7-氧代-[1，4]二氮杂
Figure BPA00001545560700756
-1-基}-丙酸
A){(R)-2-[叔丁氧基羰基-(3-羟基-丙基)-氨基]-1-甲基-乙基}-氨基甲酸 苄酯
向25g(0.12mol)Z-丙氨醇(Z-alaninol)在200ml的CH2Cl2和25ml(0.18mol)的三乙胺的冰冷溶液中加入10ml(0.13mol)的甲磺酰氯。将反应物搅拌0.5h，随后将其用10％柠檬酸溶液洗涤，干燥(Na2SO4)并浓缩，提供30.5g的结晶甲磺酰盐(mesyate)。接着，将其逐份加入43ml(0.84mol)的预先加热到70℃的3-氨基-丙-1-醇。在80℃再加热1h后，使反应物冷却并倾入水(200ml)中，用EtOAc进行提取。将EtOAc部分浓缩到约200ml，并加入26g(0.12mol)的Boc2O，将混合物搅拌3h，随后将其用10％柠檬酸洗涤，干燥(Na2SO4)并浓缩。在SiO2-柱(正庚烷/EtOAc 1∶1到1∶3)上纯化，以63％产率提供标题化合物，其为无色胶。MS：367.3(MH+).
B)3-{{(R)-2-[叔丁氧基羰基-(3-羟基-丙基)-氨基]-1-甲基-乙 基}-[(E)-3-(3-氯-苯基)-丙烯酰基]-氨基}-丙酸甲酯
向在300ml MeOH中的45.6g(0.12mol)的{(R)-2-[叔丁氧基羰基-(3-羟基-丙基)-氨基]-1-甲基-乙基}-氨基甲酸苄酯中加入5g 10％Pd/C，并将混合物在1氢气压(气囊)搅拌2h。接着，通过Hyflo过滤该混合物(用MeOH洗涤)并再次浓缩到约150ml体积。加入11.2ml(0.12mol)的甲基丙烯酸酯，并将混合物搅拌16h，随后将反应物浓缩到干燥，将残余物再次溶解于50ml CH2Cl2，冷却到0℃并通过导管迅速加入24.3g(0.12mol)3-氯-肉桂酰氯和24ml(0.17mol)三乙胺在200ml CH2Cl2的冷却(-15℃)溶液中。在添加结束时，将反应物再搅拌15分钟，随后将反应物用10％柠檬酸溶液，饱和NaHCO3水溶液洗涤，干燥(Na2SO4)并浓缩。在SiO2-柱(正庚烷/EtOAc 7∶3-9∶1)上纯化，以64％产率提供标题化合物，其为无色胶。MS：483.3(MH+，Cl).
C)(R)-1-[(E)-3-(3-氯-苯基)-丙烯酰基]-4-(3-羟基-丙基)-2-甲基-[1，4]二
将63.1g(0.13mol)的3-{{(R)-2-[叔丁氧基羰基-(3-羟基-丙基)-氨基]-1-甲基-乙基}-[(E)-3-(3-氯-苯基)-丙烯酰基]-氨基}-丙酸甲酯溶于130ml的在MeOH中的4N HCl。将反应物搅拌4h，随后将其蒸发到干燥，并将残余物再次溶解于CH2Cl2，用饱和NaHCO3水溶液洗涤，干燥(Na2SO4)并将混合物浓缩到300ml。接着，加入3.6g(0.03mol)的1，5，7-三氮杂二环癸-5-烯，并将混合物搅拌16h，随后蒸发溶剂。将残余物再次溶解于100ml的MeOH中，并加入6N NaOH直到pH为碱性，将混合物搅拌1h。蒸发溶剂，将残余物再次溶解于CH2Cl2，用10％柠檬酸溶液洗涤，用饱和NaHCO3水溶液洗涤，干燥(Na2SO4)并浓缩。这提供了62％产率的标题化合物，其为无色泡沫。MS：351.2(MH+，Cl).
Figure BPA00001545560700771
-1-基}-丙酸
向在5ml的冰冷CH2Cl2中的0.52g(1mmol)的(R)-1-[(E)-3-(3-氯-苯基)-丙烯酰基]-4-(3-羟基-丙基)-2-甲基-[1，4]二氮杂
Figure BPA00001545560700772
-5-酮，0.002g(0.01mmol)TEMPO中加入在用NaHCO3饱和的4.6ml(6mmol)的13％次氯酸钠的溶液中的0.018g(0.2mmol)的溴化钾。将混合物快速搅拌5分钟，随后加入数滴MeOH，并分离相。用1N HCl酸化水溶液，并重复用CH2Cl2提取，干燥(Na2SO4)并浓缩。这提供了92％产率的标题化合物，其为无色泡沫。MS：365.2(MH+，Cl).
中间体39
4-[4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁基]-[1，4]二氮杂
Figure BPA00001545560700773
-5-酮
Figure BPA00001545560700774
甲酸苄酯
向冷却到0℃的在15ml DMF中的1.4g(5mmol)的6-氨基-5-氧代-[1，4]二氮杂-1-甲酸苄酯和2.1g(7mmol)的(4-碘代丁氧基)-叔丁基二甲基甲硅烷中加入0.4g(8mmol)的氢化钠(50％分散体)。使反应物达到室温，并搅拌16h，随后将反应物用叔丁基甲醚稀释，并倾到冷的饱和NH4Cl水溶液上。将有机相用盐水洗涤，干燥(Na2SO4)并浓缩。在SiO2-柱(正庚烷/EtOAc 1∶1)上纯化，提供97％产率的标题化合物，其为无色的油。MS：435.3(MH+).
在0℃，向在5ml MeOH中的1.1g(3.0mmol)4-[4-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-丁基]-5-氧代-[1，4]二氮杂-1-甲酸苄酯中加入0.03ml(0.3mmol)乙酰氯。使反应物加温到室温，20分钟搅拌后，蒸发反应物到干燥，提供定量产率的标题化合物，其为无色胶。MS：321.2(MH+).
C)4-[4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁基]-5-氧代-[1，4]
Figure BPA00001545560700782
向0.44g(1.4mmol)的4-(4-羟基-丁基)-5-氧代-[1，4]二氮杂
Figure BPA00001545560700783
-1-甲酸苄酯在5ml乙腈∶水(1∶1)的冰冷溶液中加入0.043g(0.3mmol)TEMPO和0.97g(3.0mmol)的(二乙酰氧基碘代)苯。搅拌混合物，使其达到室温，并再搅拌3h，随后将其蒸发到干燥。将粗制残余物再次溶解于5ml的DMF，加入0.68g(2mmol)的HATU和0.6ml(4.0mmol)的三乙胺，随后加入0.25g(2.0mmol)的(S)-6-氮杂-螺[2.5]辛-4-醇.盐酸盐(中间体2)。将反应物搅拌16h，随后将混合物倾到饱和NaHCO3水溶液上，用EtOAc提取。将合并的有机相用盐水洗涤，干燥(Na2SO4)并浓缩。在SiO2-柱(CH2Cl2/MeOH 95∶5)上纯化，提供55％产率的标题化合物，其为无色泡沫。MS：444.3(MH+).
D)4-[4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁基]-[1，4]二氮杂
Figure BPA00001545560700784
向在10ml MeOH中的0.44g(1mmol)的4-[4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁基]-5-氧代-[1，4]二氮杂
Figure BPA00001545560700785
-1-甲酸苄酯中加入0.05g的10％披钯活性炭。在1氢气压下搅拌混合物1.5h，随后通过Hyflo过滤反应物并浓缩，提供85％产率的标题化合物，其为无色泡沫。MS：310.4(MH+).
中间体40
4-[4-(3-氯-4-三氟甲氧基-苯基)-7-氧代-[1，4]二氮杂-1-基]-丁酸
A)3-(3-氯-4-三氟甲氧基-苯基氨基)-丙酸叔丁酯
将9.26g(42.4mmol)的3-氯-4-三氟甲氧基-苯基胺和4.39ml(42.4mmol)的2，6-二甲基吡啶在50ml甲苯的溶液用7.30ml(42.4mmol)的3-溴代丙酸叔丁酯缓慢处理，并在回流温度搅拌2天。接着，将反应物在水性10％KHSO4和EtOAc之间分配(3x)。将有机相用10％NaCl洗涤，在Na2SO4上干燥，蒸发并通过快速硅胶柱(正庚烷∶EtOAc 9∶1)纯化以产生9.59g(60％)作为褐色液体的标题化合物。MS：339(M+，Cl).
B)3-[(3-氯-4-三氟甲氧基-苯基)-甲氧基羰基甲基-氨基]-丙酸叔丁酯
将8.50g(22.5mmol)的3-(3-氯-4-三氟甲氧基-苯基氨基)-丙酸叔丁酯，10.71ml(112.6mmol)的溴代甲酸酯和13.07ml(112.6mmol)的2，6-二甲基吡啶的净溶液在60℃搅拌14h，用30ml CH3CN稀释并在1l 5℃加热20h。接着，将反应物在10％KHSO4水溶液和EtOAc之间分配(3x)。将有机相用水性10％NaCl洗涤，在Na2SO4上干燥，蒸发并通过快速硅胶柱(正庚烷∶EtOAc 95∶5到85∶1)纯化以产生5.94g(64％)作为浅黄色油的标题化合物。MS：412.11(MH+，Cl).
C)3-[(3-氯-4-三氟甲氧基-苯基)-(2-羟基-乙基)-氨基]-丙酸叔丁酯
将3.00g(7.3mmol)的3-[(3-氯-4-三氟甲氧基-苯基)-甲氧基羰基甲基-氨基]-丙酸叔丁酯在20ml THF中的溶液用4.44ml(8.9mmol)的LiBH4(2M在THF中)和0.59ml(14.6mmol)的MeOH(在室温进行冷却浴)进行处理。将反应物在室温搅拌2h，冷却到0℃并用2ml丙酮终止。将反应物用4.5ml的环己烷进行稀释，加入18ml的水性2NNaOH，并在30分钟后用EtOAc进行提取(3x)。将有机相用水性10％NaCl进行洗涤，干燥(Na2SO4)并蒸发，在快速硅胶柱(EtOAc∶正庚烷1∶4-1∶1)后提供2.21g(78％)作为浅黄色油的标题化合物。MS：384.12(MH+，Cl).
D)3-[(3-氯-4-三氟甲氧基-苯基)-(2-氧代-乙基)-氨基]-丙酸叔丁酯
在-50到-60℃，在20分钟内，向0.55ml(6.3mmol)草酰氯在21ml CH2Cl2中的溶液中加入0.93ml(13.1mmol)二甲亚砜在7ml CH2Cl2中的溶液。将溶液搅拌5分钟，接着在20分钟内，加入2.10g(5.5mmol)3-[(3-氯-4-三氟甲氧基-苯基)-(2-羟基-乙基)-氨基]-丙酸叔丁酯在14mlCH2Cl2中的溶液。将混合物搅拌15分钟，并在20分钟内加入3.81ml(27.4mmol)的三乙胺。将混悬液搅拌3h并缓慢加温到-5℃。将反应物用冷的10％KH2PO4水溶液中和(用固体KH2PO4调节到pH 4-5)并用EtOAc进行提取(3x)。将有机相用水性饱和NaHCO3(新鲜制备)，水性10％NaCl进行洗涤，通过Na2SO4进行干燥，蒸发以产生2.21g(定量)的作为黄色油的标题化合物。MS：381(M+，Cl).
E)4-{2-[(2-叔丁氧基羰基-乙基)-(3-氯-4-三氟甲氧基-苯基)-氨基]-乙 基氨基}-丁酸甲酯
向0.50g(1.3mmol)3-[(3-氯-4-三氟甲氧基-苯基)-(2-氧代-乙基)-氨基]-丙酸叔丁酯在6ml二氯甲烷中的溶液中逐滴加入0.22g(1.4mmol)4-氨基丁酸甲酯盐酸盐，0.18ml(1.3mmol)三乙胺，0.15ml(2.6mmol)乙酸和0.32g(1.5mmol)三乙酰氧基硼氢化钠在4ml二氯甲烷中的冷却(0℃，pH约5)混悬液中并在0℃搅拌30分钟。将反应物用水性饱和NaHCO3/EtOAc进行提取(3x)。将有机相用水性饱和NaHCO3进行洗涤，并通过Na2SO4干燥，在溶剂蒸发后产生0.61g(83％)作为黄色油的标题化合物。MS：483.19(MH+，Cl).
F)4-{2-[(2-羧基-乙基)-(3-氯-4-三氟甲氧基-苯基)-氨基]-乙基氨基}- 丁酸甲酯二盐酸盐
将0.30g(0.6mmol)的4-{2-[(2-叔丁氧基羰基-乙基)-(3-氯-4-三氟甲氧基-苯基)-氨基]-乙基氨基}-丁酸甲酯在2ml二氯甲烷中的溶液冷却(0℃)，用3.10ml(12.4mmol)的HCl溶液(4M在二
Figure BPA00001545560700801
烷中)处理并在室温搅拌16h。蒸发溶液，将其悬浮在乙腈中并蒸发(3x)以产生0.33g(97％)作为浅黄色油的标题化合物。MS：427.12(MH+，Cl).
Figure BPA00001545560700802
甲酯
将0.16g(0.3mmol)4-{2-[(2-羧基-乙基)-(3-氯-4-三氟甲氧基-苯基)-氨基]-乙基氨基}-丁酸甲酯二盐酸盐在2.5ml CH2Cl2的溶液用0.04ml(0.3mmol)三乙胺处理并在0℃用0.08g(0.4mmol)EDCI处理。使冷却浴达到室温并在15h后，将反应物用水性10％KHSO4/Et2O进行提取(3x)。将有机相用10％KHSO4，10％NaCl洗涤，并通过Na2SO4干燥，在溶剂蒸发后产生0.11g(76％)作为黄色油的标题化合物。MS：409.11(MH+，Cl).
Figure BPA00001545560700803
类似于关于中间体5C所述的方法，4-[4-(3-氯-4-三氟甲氧基-苯基)-7-氧代-[1，4]二氮杂
Figure BPA00001545560700811
-1-基]-丁酸甲酯与在THF/MeOH中的1M氢氧化锂水溶液提供99％产率的作为浅黄色油的标题化合物。MS：395.10(MH+，Cl).
中间体41
(S)-2-氨基-5-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-5-氧代-戊酸甲酯；与HCl的化合物
A)(S)-2-叔丁氧基羰基氨基-5-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-5- 氧代-戊酸甲酯
类似于关于实施例15所述的方法，BOC-L-谷氨酸α甲酯和1.05当量的(S)-6-氮杂-螺[2.5]辛-4-醇；盐酸盐(中间体2)提供59％产率的作为浅黄色油的标题化合物。MS：371.22(MH+).
B)(S)-2-氨基-5-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-5-氧代-戊酸甲酯； 与HCl的化合物
类似于关于中间体12G所述的方法，(S)-2-叔丁氧基羰基氨基-5-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-5-氧代-戊酸甲酯和10当量的在
二
Figure BPA00001545560700812
烷中的HCl在0℃30分钟，室温30分钟，用乙腈蒸发并用CH2Cl2/Et2O沉淀后，提供定量产率的作为灰白色粉末的标题化合物。MS：271.16(MH+).
中间体42
(S)-2-[(R，S)-4-(3，4-双-三氟甲基-苯基)-3-甲基-7-氧代-[1，4]二氮杂
Figure BPA00001545560700813
-1-基]-戊二酸1-甲酯
A)2-(3，4-双-三氟甲基-苯基氨基)-丙酸乙酯
类似于中间体40B，将3，4-双(三氟甲基)苯胺和2-溴代丙酸乙酯与2，6-二甲基吡啶在82℃加热20h，用乙腈稀释，并用1当量的2-溴代丙酸乙酯和2，6-二甲基吡啶处理并回流2天，再次用1当量的2-溴代丙酸乙酯和2，6-二甲基吡啶处理，并持续回流2天。后处理和通过快速硅胶柱(正庚烷/乙酸乙酯9∶1到2∶1)的纯化产生49％的作为黄色油的标题化合物。MS：328.08(M-H-).
B)2-(3，4-双-三氟甲基-苯基氨基)-丙酸
类似于中间体5C，2-(3，4-双-三氟甲基-苯基氨基)-丙酸乙酯和1M氢氧化锂水溶液提供97％的作为灰白色固体的标题化合物。MS：300.05(M-H-).
C)2-(3，4-双-三氟甲基-苯基氨基)-丙-1-醇
类似于中间体34B，2-(3，4-双-三氟甲基-苯基氨基)-丙酸和硼烷-四氢呋喃复合溶液提供71％作为浅黄色油的标题化合物。MS：286.07(M-H-).
D)(S)-2-[(R，S)-2-(3，4-双-三氟甲基-苯基氨基)-丙基氨基]-戊二酸5-叔 丁酯1-甲酯
类似于中间体34C，2-(3，4-双-三氟甲基-苯基氨基)-丙-1-醇和L-谷氨酸γ-叔丁酯α-甲酯盐酸盐提供定量的作为黄色油的标题化合物。
MS：487.20(MH+).
E) (S)-2-[[(R，S)-2-(3，4-双-三氟甲基-苯基氨基)-丙基]-(3，3-二甲氧基-丙 酰)-氨基]-戊二酸5-叔丁酯1-甲酯
类似于中间体34D，(S)-2-[(R，S)-2-(3，4-双-三氟甲基-苯基氨基)-丙基氨基]-戊二酸5-叔丁酯1-甲酯和3，3-二甲氧基-丙酸提供定量的作为橙色胶的标题化合物。MS：603.25(MH+).
F)(S)-2-[(R，S)-4-(3，4-双-三氟甲基-苯基)-3-甲基-7-氧代-2，3，4，7-四氢
Figure BPA00001545560700821
类似于中间体34E，(S)-2-[[(R，S)-2-(3，4-双-三氟甲基-苯基氨基)-丙基]-(3，3-二甲氧基-丙酰)-氨基]-戊二酸5-叔丁酯1-甲酯和TFA/三乙基硅烷提供46％作为浅褐色油的标题化合物。MS：483(MH+).
G)(S)-2-[(R，S)-4-(3，4-双-三氟甲基-苯基)-3-甲基-7-氧代-[1，4]二氮杂
Figure BPA00001545560700822
类似于关于实施例126所述的方法，在EtOH中，使用PtO2和H2-气压，(S)-2-[(R，S)-4-(3，4-双-三氟甲基-苯基)-3-甲基-7-氧代-2，3，4，7-四氢-[1，4]二氮杂
Figure BPA00001545560700823
-1-基]-戊二酸1-甲酯提供93％产率的作为浅黄色泡沫的标题化合物。MS：485.15(MH+).
中间体43
4-[(S)-4-(3，4-双-三氟甲基-苯基)-3-甲基-2-氧代-哌嗪-1-基]-丁酸
A) 4-((S)-3-甲基-2-氧代-哌嗪-1-基)-丁酸叔丁酯，0.1当量的HCl
类似于中间体12E，将(S)-4-(3-叔丁氧基羰基-丙基)-2-甲基-3-氧代-哌嗪-1-甲酸苄酯(中间体13A)用Pd/C(10％)氢化以产生95％产率作为橙色油的标题化合物。MS：257.19(MH+).
B)4-[(S)-4-(3，4-双-三氟甲基-苯基)-3-甲基-2-氧代-哌嗪-1-基]-丁酸叔 丁酯
将0.20g(0.78mmol)4-((S)-3-甲基-2-氧代-哌嗪-1-基)-丁酸叔丁酯，0.1当量HCl，0.53g(1.56mmol)4-碘代-1，2-双-三氟甲基-苯(WO2007034282)，0.04g(0.078mmol)双(三叔丁膦)钯(0)和0.33g(1.56mmol)磷酸三钾在2ml 1，2-二甲氧基乙烷中的混合物进行脱气并在微波照射下，在120℃加热2h，用二氯甲烷稀释，过滤并蒸发。在SiO2-柱(在正庚烷中的异丙醇，2到5％)上进行纯化，提供35％产率的作为浅褐色油的标题化合物。MS：413.13(M[-C4H8]H+).
C)4-[(S)-4-(3，4-双-三氟甲基-苯基)-3-甲基-2-氧代-哌嗪-1-基]-丁酸
类似于中间体12G，4-[(S)-4-(3，4-双-三氟甲基-苯基)-3-甲基-2-氧代-哌嗪-1-基]-丁酸叔丁酯和HCl(4M在二
Figure BPA00001545560700831
烷中)提供84％的标题化合物，其为褐色泡沫。MS：411.11M-H-).
中间体44
(S)-4-[(S)-4-(3-氯-4-三氟甲基-苯基)-3-甲基-2-氧代-哌嗪-1-基]-3-羟基-丁酸(61％ds)
A)(S)-4-(2，2-二甲氧基-乙基氨基)-3-羟基-丁酸甲酯
将2.50g(14.7mmol)(S)-4-氨基-3-羟基-丁酸甲酯；HCl(中间体24)在18ml甲醇中的溶液用6.19g(73.7mmol)碳酸氢钠，2.2ml(14.7mmol)的二甲氧基乙醛(在H2O中60％)，0.250g的Pd/C(10％)进行处理，并在H2-气压上搅拌4h。过滤后，蒸发溶液，溶解于甲苯，在减压下蒸发(2x)以产生3.781g(70％)作为黄色油的标题化合物。MS：222.13(MH+).
B)(S)-4-[[(S)-2-(3-氯-4-三氟甲基-苯基氨基)-丙酰]-(2，2-二甲氧基-乙 基)-氨基]-3-羟基-丁酸甲酯(61％ds)
在0℃，向0.915g(3.4mmol)(S)-2-(3-氯-4-三氟甲基-苯基氨基)-丙酸(26％ee)(中间体32)和0.394ml(3.6mmol)4-甲基吗啉在10.0ml DMF中的溶液中，加入1.86g(4.9mmol)HATU，在30分钟后，加入在6.5ml DMF中的1.20g(3.3mmol)的(S)-4-(2，2-二甲氧基-乙基氨基)-3-羟基-丁酸甲酯。搅拌溶液，并加温过夜。将反应物倾入水性10％KHSO4/EtOA上(3x)。将有机相用水性10％KHSO4，饱和NaHCO3，10％NaCl洗涤，并通过Na2SO4干燥以产生1.91g(62％)作为浅褐色油的标题化合物。MS：469.14(MH+).
C)(S)-4-[(S)-4-(3-氯-4-三氟甲基-苯基)-3-甲基-2-氧代-哌嗪-1-基]-3-羟 基-丁酸甲酯(61％ds)
将1.82g(3.9mmol)的(S)-4-[[(S)-2-(3-氯-4-三氟甲基-苯基氨基)-丙酰]-(2，2-二甲氧基-乙基)-氨基]-3-羟基-丁酸甲酯在室温溶解于39.0ml二氯甲烷中，冷却(0℃)，并用4.4ml三氟乙酸处理。在0℃30分钟和在室温2.5h后，加入3.2ml(19.3mmol)的三乙基硅烷，并在室温搅拌过夜。在0℃，将反应物用8.1ml(58mmol)的三乙胺中和并在10分钟后，倾在水性10％KHSO4/EtOAc上(3x)。将有机相用水性10％KHSO4，饱和NaHCO3，10％NaCl洗涤，并经过Na2SO4干燥，在快速色谱法(SiO2，EtOAc/庚烷从1∶1到4∶1)后产生0.114g(7％)作为黄色油的标题化合物。MS：409.2(MH+).
D)(S)-4-[(S)-4-(3-氯-4-三氟甲基-苯基)-3-甲基-2-氧代-哌嗪-1-基]-3-羟 基-丁酸(61％ds)
类似于中间体3B，将(S)-4-[(S)-4-(3-氯-4-三氟甲基-苯基)-3-甲基-2-氧代-哌嗪-1-基]-3-羟基-丁酸甲酯用1M水性氢氧化锂水解(1h)，在提取(EtOAc)和沉淀(二氯甲烷/正戊烷)后，提供82％产率的作为浅黄色泡沫的标题化合物。MS：393.08(MH+).
中间体45
(S)-4-[(S)-4-(3-氯-4-三氟甲基-苯基)-3-甲基-2-氧代-哌嗪-1-基]-5-甲氧基-戊酸(61％ds)
A)(S)-4-苄氧基羰基氨基-5-羟基-戊酸叔丁酯
类似于G.Kokotos(Synthesis(合成)1990，299)，在-10℃，将5.00g(14.8mmol)的Z-Glu(OtBu)-OH在74.0ml THF中的溶液用1.63ml(14.8mmol)4-甲基吗啉，1.41ml(14.8mmol)氯甲酸乙酯进行处理。10分钟后，将1.682g(44.5mmol)硼氢化钠以一份加入。接着，在0℃，在25分钟的阶段中逐滴加入甲醇(148ml)。将溶液搅拌20分钟，接着用10％KHSO4溶液中和。在减压下蒸发有机溶剂，并将获得的残余物倾在10％KHSO4上，用EtOAc提取(3x)。将有机相用水性10％KHSO4，10％NaCl洗涤，通过Na2SO4干燥并蒸发以产生5.16g(定量的)作为黄色油的标题化合物。MS：324.18(MH+).
B)(S)-4-苄氧基羰基氨基-5-甲氧基-戊酸叔丁酯
将4.82ml(77.3mmol)的碘代甲烷和2.50g(7.7mmol)(S)-4-苄氧基羰基氨基-5-羟基-戊酸叔丁酯在25ml乙腈中的溶液冷却(0℃)并用2.72g(11.8mmol)氧化银(I)处理。将反应混合物在室温搅拌3天。过滤反应物，并蒸发，在快速色谱法(SiO2，二氯甲烷/醚2.5％)后产生1.70g(65％)作为浅黄色油的标题化合物。MS：360.18(M+Na).
C)(S)-4-氨基-5-甲氧基-戊酸叔丁酯；HCl
类似于实施例14H，将(S)-4-苄氧基羰基氨基-5-甲氧基-戊酸叔丁酯用甲醇中的Pd/C(10％)，用1当量的HCl水溶液氢化2h，在沉淀(二氯甲烷/正戊烷)后，提供90％产率的作为灰白色蜡状固体的标题化合物。MS：204.16(MH+).
D)(S)-4-(2，2-二甲氧基-乙基氨基)-5-甲氧基-戊酸叔丁酯
类似于中间体44A，(S)-4-氨基-5-甲氧基-戊酸叔丁酯；HCl和1当量的二甲氧基乙醛(在H2O中60％)提供69％产率的作为黄色油的标题化合物。MS：292.21(MH+).
E)(S)-4-[[(S)-2-(3-氯-4-三氟甲基-苯基氨基)-丙酰]-(2，2-二甲氧基-乙 基)-氨基]-5-甲氧基-戊酸叔丁酯(61％ds)
类似于中间体44B，(S)-4-(2，2-二甲氧基-乙基氨基)-5-甲氧基-戊酸叔丁酯和(S)-2-(3-氯-4-三氟甲基-苯基氨基)-丙酸(26％ee)(中间体32)提供79％产率的作为橙色油的标题化合物。MS：539.21(MH+，1Cl)。
F)(S)-4-[(S)-4-(3-氯-4-三氟甲基-苯基)-3-甲基-2-氧代-哌嗪-1-基]-5-甲 氧基-戊酸(61％ds)
类似于中间体44C，将(S)-4-[[(S)-2-(3-氯-4-三氟甲基-苯基氨基)-丙酰]-(2，2-二甲氧基-乙基)-氨基]-5-甲氧基-戊酸叔丁酯用三氟乙酸/三乙基硅烷环化以提供36％产率的作为褐色油的标题化合物。MS：421.2(MH+，1Cl).
中间体46
(S)-1-[(R，S)-3-羟基-4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁基]-3-甲基-哌嗪-2-酮
A)(外消旋)-4-氨基-2-羟基-丁酸甲酯；HCl
在0℃，将7.79ml(109.6mmol)的乙酰氯小心加入70ml MeOH中，随后加入8.60g(40.0mmol)的(外消旋)-4-氨基-2-羟基丁酸。在0℃持续搅拌2h，接着将反应物蒸发并在减压下干燥以产生6.98g(定量的)作为白色固体的标题化合物。MS：134.08(MH+).
B)(S)-4-((R，S)-3-羟基-3-甲氧基羰基-丙基)-2-甲基-3-氧代-哌嗪-1-甲酸 苄酯
将0.840g(5.0mmol)(外消旋)-4-氨基-2-羟基-丁酸甲酯；HCl，0.690ml(5.0mmol)三乙胺，0.514ml(9.0mmol)乙酸，1.13g(5.2mmol)三乙酰氧基硼氢化钠(pH～5)在17.5ml的二氯甲烷中的溶液在室温用1.26g(4.5mmol)的(S)-2-[苄氧基羰基-(2-氧代-乙基)-氨基]-丙酸甲酯(中间体12C)在35.0ml二氯甲烷中的溶液逐滴处理(10分钟)。将反应物在室温搅拌过夜。将反应物倾在水性10％KHSO4/EtOAc上(3x)。将有机相用水性10％KHSO4，饱和的NaHCO3，10％NaCl洗涤，通过Na2SO4干燥，在快速色谱法(SiO2，正庚烷/AcOEt 1∶1到0∶10)后，产生0.428g(26％)作为浅黄色粘性油的标题化合物。MS：365.17(MH+).
C)(S)-4-((R，S)-3-羧基-3-羟基-丙基)-2-甲基-3-氧代-哌嗪-1-甲酸苄酯
在0℃，将0.556g(1.5mmol)的(S)-4-((R，S)-3-羟基-3-甲氧基羰基-丙基)-2-甲基-3-氧代-哌嗪-1-甲酸苄酯在8.0ml的四氢呋喃/乙醇(1∶1)中的溶液用3.5ml(3.1mmol)的1M氢氧化锂水溶液进行处理，在室温搅拌5h。将反应物用水性10％KHSO4中和，用EtOAc提取(3x)。将有机相用水性10％KHSO4，10％NaCl洗涤，通过Na2SO4干燥并蒸发以产生0.585g(定量的)作为浅灰色油的标题化合物。MS：351.15(MH+).
D)(S)-4-[(R，S)-3-羟基-4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁 基]-2-甲基-3-氧代-哌嗪-1-甲酸苄酯
将0.557g(1.6mmol)的(S)-4-((R，S)-3-羧基-3-羟基-丙基)-2-甲基-3-氧代-哌嗪-1-甲酸苄酯在室温溶解于16ml DMF中，随后加入0.222g(1.7mmol)(S)-6-氮杂-螺[2.5]辛-4-醇，盐酸盐(中间体2)，0.443ml(3.2mmol)三乙胺，并在0℃在10分钟后，加入0.665g(1.7mmol)HATU。将溶液搅拌过夜，并加温到室温。将反应物用水性10％KHSO4中和并用EtOAc提取(3x)。将有机相用水性10％KHSO4，10％NaCl洗涤，通过Na2SO4干燥并蒸发，在沉淀(二氯甲烷/正戊烷)后产生0.564g(77％)作为灰白色固体的标题化合物。MS：460.24(MH+).
E)(S)-1-[(R，S)-3-羟基-4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基-4-氧代-丁 基]-3-甲基-哌嗪-2-酮
将0.546g(1.2mmol)(S)-4-[(R，S)-2-羟基-4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁基]-2-甲基-3-氧代-哌嗪-1-甲酸苄酯在18ml甲醇中的溶液用0.055g Pd/C(10％)处理，并在H2-气压上搅拌1夜。过滤后，蒸发溶液，将其溶解于二氯甲烷，在减压下蒸发(3x)，并用醚沉淀以产生0.363g(94％)作为灰白色粉末的标题化合物。MS：326.21(MH+).
中间体47
(S)-1-[(S)-3-羟基-4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁基]-3-甲基-哌嗪-2-酮；HCl
A)(S)-4-氨基-2-羟基-丁酸甲酯；HCl
类似于中间体46A，在MeOH中的(S)-(+)-4-氨基-2-羟基丁酸和乙酰氯定量提供作为白色蜡状固体的标题化合物。MS：134.1(MH+).
B)(S)-4-((S)-2-羟基-3-甲氧基羰基-丙基)-2-甲基-3-氧代-哌嗪-1-甲酸 苄酯
类似于中间体46B，(S)-4-氨基-2-羟基-丁酸甲酯，盐酸盐和(S)-2-[苄氧基羰基-(2-氧代-乙基)-氨基]-丙酸甲酯(中间体12C)提供15％产率作为浅黄色油的标题化合物。MS：365.17(MH+)
C)(S)-4-((S)-3-羧基-3-羟基-丙基)-2-甲基-3-氧代-哌嗪-1-甲酸苄酯
类似于中间体46C，(S)-4-((S)-3-羟基-3-甲氧基羰基-丙基)-2-甲基-3-氧代-哌嗪-1-甲酸苄酯和1M氢氧化锂水溶液在用EtOAc提取后，提供98％产率的作为浅黄色粘性油的标题化合物。MS：351.15(MH+).
D)(S)-4-[(S)-3-羟基-4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁 基]-2-甲基-3-氧代-哌嗪-1-甲酸苄酯
类似于中间体46D，(S)-4-((S)-3-羧基-3-羟基-丙基)-2-甲基-3-氧代-哌嗪-1-甲酸苄酯和1.1当量的(S)-6-氮杂-螺[2.5]辛-4-醇；盐酸盐(中间体2)在沉淀(二氯甲烷/正戊烷)后提供75％产率的作为白色固体的标题化合物。MS：460.24(MH+).
E)(S)-1-[(S)-3-羟基-4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁 基]-3-甲基-哌嗪-2-酮；HCl
类似于中间体46E，(S)-4-[(S)-3-羟基-4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁基]-2-甲基-3-氧代-哌嗪-1-甲酸苄酯用在甲醇中的Pd/C(10％)，用1当量的HCl水溶液氢化1h，在沉淀(二氯甲烷/醚)后提供99％产率作为白色固体的标题化合物。MS：370.20(MH+).
中间体48
(S)-1-[(R，S)-3-氟-4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁基]-3-甲基-哌嗪-2-酮；HCl
A)外消旋-4-氨基-2-氟-丁酸甲酯；HCl
类似于中间体46A，在MeOH中的外消旋-4-氨基-2-氟-丁酸和乙酰氯提供(在22h后)90％产率的作为灰白色蜡状固体的标题化合物。MS：136.08(MH+).
B)(S)-4-((R，S)-3-氟-3-甲氧基羰基-丙基)-2-甲基-3-氧代-哌嗪-1-甲酸苄 酯
类似于中间体46B，外消旋-4-氨基-2-氟-丁酸甲酯；HCl和(S)-2-[苄氧基羰基-(2-氧代-乙基)-氨基]-丙酸甲酯(中间体12C)提供25％产率的作为无色油的标题化合物。MS：367.17(MH+).
C)(S)-4-((R，S)-3-羧基-3-氟-丙基)-2-甲基-3-氧代-哌嗪-1-甲酸苄酯
类似于中间体46C，在30分钟后并用EtOAc提取后，(S)-4-((R，S)-3-氟-3-甲氧基羰基-丙基)-2-甲基-3-氧代-哌嗪-1-甲酸苄酯和1M氢氧化锂水溶液提供定量产率的标题化合物，其为白色泡沫。MS：353.15(MH+).
D)(S)-4-[(R，S)-3-氟-4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁 基]-2-甲基-3-氧代-哌嗪-1-甲酸苄酯
类似于中间体46D，(S)-4-((R，S)-3-羧基-3-氟-丙基)-2-甲基-3-氧代-哌嗪-1-甲酸苄酯和1.1当量的(S)-6-氮杂-螺[2.5]辛-4-醇；盐酸盐(中间体2)在沉淀(二氯甲烷/正戊烷和二氯甲烷/醚)后，提供84％产率作为白色粉末的标题化合物。MS：462.24(MH+).
E)(S)-1-[(R，S)-3-氟-4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁 基]-3-甲基-哌嗪-2-酮；HCl
类似于中间体46E，将(S)-4-[(R，S)-3-氟-4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁基]-2-甲基-3-氧代-哌嗪-1-甲酸苄酯用在甲醇中的Pd/C(10％)用1当量的HCl水溶液氢化1h，以在用乙腈蒸发(3x)后，提供定量产率作为白色粉末的标题化合物。MS：328.20(MH+).
中间体49
(S)-1-[(S)-4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-1-甲氧基甲基-4-氧代-丁基]-3-甲基-哌嗪-2-酮；HCl
A)(S)-4-((S)-3-叔丁氧基羰基-1-甲氧基甲基-丙基)-2-甲基-3-氧代-哌嗪 -1-甲酸苄酯
类似于中间体46B，(S)-2-[苄氧基羰基-(2-氧代-乙基)-氨基]-丙酸甲酯(中间体12C)和(S)-4-氨基-5-甲氧基-戊酸叔丁酯；HCl(中间体45C)提供39％产率的标题化合物，其为浅黄色油.MS：435.25(MH+).
B)(S)-4-((S)-3-羧基-1-甲氧基甲基-丙基)-2-甲基-3-氧代-哌嗪-1-甲酸 苄酯
在0℃，将0.620g(1.4mmol)的(S)-4-((S)-3-叔丁氧基羰基-1-甲氧基甲基-丙基)-2-甲基-3-氧代-哌嗪-1-甲酸苄酯在4.2ml二氯甲烷中的溶液用7.13ml(28.5mmol，20当量)在二烷中的4N HCl水溶液进行处理。将溶液搅拌过夜，并加温到室温。蒸发溶液，将其悬浮在甲苯中，蒸发(3x)，悬浮在乙腈中并蒸发(3x)以提供0.551g(定量的)标题化合物，其为浅黄色油。MS：379.19(MH+).
C)(S)-4-[(S)-4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-1-甲氧基甲基-4-氧 代-丁基]-2-甲基-3-氧代-哌嗪-1-甲酸苄酯
类似于中间体46D，(S)-4-((S)-3-羧基-1-甲氧基甲基-丙基)-2-甲基-3-氧代-哌嗪-1-甲酸苄酯和1.1当量的(S)-6-氮杂-螺[2.5]辛-4-醇；盐酸盐(中间体2)在沉淀(二氯甲烷/正戊烷)后，提供定量产率的作为灰白色固体的标题化合物。MS：488.28(MH+).
D)(S)-1-[(S)-4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-1-甲氧基甲基-4-氧 代-丁基]-3-甲基-哌嗪-2-酮；HCl
类似于中间体46E，将(S)-4-[(S)-4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-1-甲氧基甲基-4-氧代-丁基]-2-甲基-3-氧代-哌嗪-1-甲酸苄酯用甲醇中的Pd/C(10％)用1当量的HCl水溶液氢化1h，在沉淀(二氯甲烷/醚)后，提供93％产率的标题化合物，其为白色固体。MS：354.24(MH+).
中间体50
(R)-5-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-2-((S)-3-甲基-2-氧代-哌嗪-1-基)-5-氧代-戊酸甲酯；HCl.
A)(R)-2-((S)-4-苄氧基羰基-3-甲基-2-氧代-哌嗪-1-基)-戊二酸5-叔丁 酯1-甲酯
类似于在中间体12D中所述的方法，(S)-2-[苄氧基羰基-(2-氧代-乙基)-氨基]-丙酸甲酯(中间体12C)和D-谷氨酸γ叔丁酯α甲酯；盐酸盐提供97％产率的标题化合物，其为黄色的油。MS：449.22(MH+).
B(R)-2-((S)-4-苄氧基羰基-3-甲基-2-氧代-哌嗪-1-基)-戊二酸1-甲酯
类似于在中间体12G中所述的方法，(R)-2-((S)-4-苄氧基羰基-3-甲基-2-氧代-哌嗪-1-基)-戊二酸5-叔丁酯1-甲酯和在二烷中的HCl提供96％产率的标题化合物，其为粘性褐色油。MS：393.16(MH+).
C)(S)-4-[(R)-4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-1-甲氧基羰基-4-氧 代-丁基]-2-甲基-3-氧代-哌嗪-1-甲酸苄酯
类似于在实施例15中所述的方法，(R)-2-((S)-4-苄氧基羰基-3-甲基-2-氧代-哌嗪-1-基)-戊二酸1-甲酯和1.1当量的(S)-6-氮杂-螺[2.5]辛-4-醇；盐酸盐(中间体2)在用快速色谱法(SiO2，EtOAc)纯化和自二氯甲烷/正戊烷沉淀后，提供61％产率的标题化合物，其为非晶形灰白色固体。MS：502.25(MH+).
D)(R)-5-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-2-((S)-3-甲基-2-氧代-哌嗪 -1-基)-5-氧代-戊酸甲酯；HCl
类似于中间体12E，将(S)-4-[(R)-4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-1-甲氧基羰基-4-氧代-丁基]-2-甲基-3-氧代-哌嗪-1-甲酸苄酯用1当量的HCl水溶液氢化，在沉淀(二氯甲烷/Et2O)后提供定量产率的标题化合物，其为灰白色非晶形固体。MS：368.21(MH+).
实施例1
1-[(E)-3-(3，4-二氯-苯基)-丙烯酰基]-4-[3-(4-羟基-哌啶-1-基)-3-氧代-丙基]-[1，4]二氮杂-5-酮
Figure BPA00001545560700912
在0℃，将0.100g(0.26mmol)的3-{4-[(E)-3-(3，4-二氯-苯基)-丙烯酰基]-7-氧代-[1，4]二氮杂
Figure BPA00001545560700913
-1-基}-丙酸(中间体5)和0.032g(0.31mmol)的4-羟基哌啶在5ml二氯甲烷中的溶液用0.060g(0.31mmol)的EDCI进行处理。使冷却浴达到室温，并在4小时后，将反应物用水性10％KHSO4/EtOAc进行提取(3x)。将有机相用饱和NaHCO3水溶液，10％NaCl洗涤，并通过Na2SO4进行干燥，在溶剂蒸发后产生0.108g(89％)的标题化合物，其为白色固体。MS：468.3(MH+，1Cl).
实施例2
1-[(E)-3-(3，4-二氯-苯基)-丙烯酰基]-4-[3-((3RS，4SR)-3，4-二羟基-哌啶-1.-基)-3-氧代-丙基]-[1，4]二氮杂
Figure BPA00001545560700914
-5-酮
Figure BPA00001545560700921
A)(外消旋)-顺式-3，4-双-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-哌啶-1-基]-3-氧
Figure BPA00001545560700922
类似于在实施例1中所述的方法，3-{4-[(E)-3-(3，4-二氯-苯基)-丙烯酰基]-7-氧代-[1，4]二氮杂
Figure BPA00001545560700923
-1-基}-丙酸(中间体5)和(顺式)-(外消旋)-3，4-双-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-哌啶(中间体9)提供95％产率的标题化合物，其为白色固体。MS：712.5(MH+，2Cl).
B)(外消旋)-顺式-1-[(E)-3-(3，4-二氯-苯基)-丙烯酰
Figure BPA00001545560700924
-5-酮
类似于在中间体6B中所述的方法，用在二
Figure BPA00001545560700925
烷中的HCl处理(外消旋)-顺式-3，4-双-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-哌啶-1-基]-3-氧代-丙基}-1-[(E)-3-(3，4-二氯-苯基)-丙烯酰基]-[1，4]二氮杂
Figure BPA00001545560700926
-5-酮提供82％产率的标题化合物，其为灰白色泡沫。MS：484.2(MH+，2Cl).
实施例3
(外消旋)-2-{4-[(E)-3-(3，4-二氯-苯基)-丙烯酰基]-7-氧代-[1，4]二氮杂-1-基}-4-羟基-N，N-二甲基-丁酰胺
Figure BPA00001545560700928
将0.081g(0.19mmol)的(外消旋)-2-{4-[(E)-3-(3，4-二氯-苯基)-丙烯酰基]-7-氧代-[1，4]二氮杂
Figure BPA00001545560700929
-1-基}-4-羟基-丁酸甲酯(具有50％的内酯，1-[(E)-3-(3，4-二氯-苯基)-丙烯酰基]-4-(2-氧代-四氢-呋喃-3-基)-[1，4]二氮杂
Figure BPA00001545560700931
-5-酮)(中间体6)悬浮在1ml THF中，用0.34ml(1.89mmol，33％在EtOH中)二甲基胺处理并在50℃加热16h。溶剂蒸发和干燥提供0.08g(96％)标题化合物，其为浅黄色泡沫。MS：442.3(MH+，2Cl).
实施例4
(外消旋)-2-{4-[(E)-3-(3，4-二氯-苯基)-丙烯酰基]-7-氧代-[1，4]二氮杂
Figure BPA00001545560700932
-1-基}-4-羟基-N，N-二甲基-丁酰胺
Figure BPA00001545560700933
以类似于在实施例3中所述的方法，用哌啶处理在EtOH中的(外消旋)-2-{4-[(E)-3-(3，4-二氯-苯基)-丙烯酰基]-7-氧代-[1，4]二氮杂
Figure BPA00001545560700934
-1-基}-4-羟基-丁酸甲酯(具有50％的内酯，1-[(E)-3-(3，4-二氯-苯基)-丙烯酰基]-4-(2-氧代-四氢-呋喃-3-基)-[1，4]二氮杂
Figure BPA00001545560700935
-5-酮)(中间体6)，在60℃处理1.5天，并在室温处理2天，提供43％的标题化合物，其为浅黄色泡沫。MS：482.2(MH+，2Cl).
实施例5
外消旋-(1-[(E)-3-(3，4-二氯-苯基)-丙烯酰基]-4-[3-羟基-1-(吡咯烷-1-羰基)-丙基]-[1，4]二氮杂
Figure BPA00001545560700936
-5-酮)
Figure BPA00001545560700937
类似于在实施例3中所述的方法，在室温用吡咯烷处理在EtOH中的(外消旋)-2-{4-[(E)-3-(3，4-二氯-苯基)-丙烯酰基]-7-氧代-[1，4]二氮杂
Figure BPA00001545560700941
-1-基}-4-羟基-丁酸甲酯(具有50％的内酯，1-[(E)-3-(3，4-二氯-苯基)-丙烯酰基]-4-(2-氧代-四氢-呋喃-3-基)-[1，4]二氮杂
Figure BPA00001545560700942
-5-酮)(中间体6)过夜，提供了88％作为白色泡沫的标题化合物。MS：468.1(MH+，2Cl).
实施例6
外消旋-(1-[(E)-3-(3，4-二氯-苯基)-丙烯酰基]-4-(1-羟甲基-3-氧代-3-哌啶-1-基-丙基)-[1，4]二氮杂
Figure BPA00001545560700943
-5-酮)
Figure BPA00001545560700944
A)外消旋-2-{4-[(E)-3-(3，4-二氯-苯基)-丙烯酰基]-7-氧代-[1，4]二氮杂
Figure BPA00001545560700945
将0.286g(0.65mmol)的2-{4-[(E)-3-(3，4-二氯-苯基)-丙烯酰基]-7-氧代-[1，4]二氮杂
Figure BPA00001545560700946
-1-基}-琥珀酸1-甲酯(中间体7)在15ml二氯甲烷中的溶液用0.070ml(0.71mmol)的哌啶处理，并在0℃用0.148g(0.77mmol)的EDCI和0.009g(0.06mmol)的HOBT处理。将该混悬液自然加温到室温过夜，倾在10％KHSO4水溶液上，并用EtOAc提取(3x)。将有机相用饱和的NaHCO3水溶液和10％NaCl水溶液洗涤，干燥(Na2SO4)并蒸发，以提供0.332g(定量)的作为白色泡沫的标题化合物。MS：510.1(MH+，2Cl).
B)外消旋-(1-[(E)-3-(3，4-二氯-苯基)-丙烯酰基]-4-(1-羟甲基-3-氧代-3-
Figure BPA00001545560700947
将0.150g(0.29mmol)的2-{4-[(E)-3-(3，4-二氯-苯基)-丙烯酰基]-7-氧代-[1，4]二氮杂
Figure BPA00001545560700948
-1-基}-4-氧代-4-哌啶-1-基-丁酸甲酯在3.7ml EtOH中的冷却(0℃)溶液用0.013g(0.59mmol)的LiBH4(在48h过程中以3份进行，直到反应结束)处理。将混合物在室温搅拌48h，冷却到0℃并缓慢加入10％KHSO4水溶液。将混合物在水性饱和的NaHCO3/EtOAc之间分配(3x)。将有机相干燥(Na2SO4)并蒸发以提供0.136g(96％)作为白色泡沫的标题化合物。MS：482.2(MH+，2Cl).
实施例7
(R，S)-2-{4-[(E)-3-(3，4-二氯-苯基)-丙烯酰基]-7-氧代-[1，4]二氮杂
Figure BPA00001545560700951
-1-基}-4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁酸甲酯
Figure BPA00001545560700952
类似于在实施例6A中所述的方法，将2-{4-[(E)-3-(3，4-二氯-苯基)-丙烯酰基]-7-氧代-[1，4]二氮杂
Figure BPA00001545560700953
-1-基}-琥珀酸1-甲酯(中间体7)用1.5当量的Et3N(冷却前加入)和1.05当量的(S)-6-氮杂-螺[2.5]辛-4-醇；盐酸盐(中间体2)处理，在SiO2-柱上纯化后(二氯甲烷/异丙醇97.5∶2.5-9∶1梯度)提供33％产率的标题化合物，其为白色泡沫。MS：552.0(MH+，2Cl).
实施例8
外消旋-(2-{4-[(E)-3-(3，4-二氯-苯基)-丙烯酰基]-7-氧代-[1，4]二氮杂
Figure BPA00001545560700954
-1-基}-N，N-二甲基-琥珀酰胺酸甲酯)
Figure BPA00001545560700955
类似于在实施例6A中所述的方法，用4当量的Et3N(冷却前加入)和二甲基胺盐酸盐处理2-{4-[(E)-3-(3，4-二氯-苯基)-丙烯酰基]-7-氧代-[1，4]二氮杂
Figure BPA00001545560700961
-1-基}-琥珀酸1-甲酯(中间体7)，在SiO2-柱上纯化后(二氯甲烷/MeOH 98∶2)，提供57％产率的标题化合物，其为白色泡沫。MS：470.0(MH+，2Cl).
实施例9
(R，S)-2-{4-[(E)-3-(3，4-二氯-苯基)-丙烯酰基]-7-氧代-[1，4]二氮杂
Figure BPA00001545560700962
-1-基}-4-((3S，5S)-3-羟基-5-甲基-哌啶-1-基)-4-氧代-丁酸甲酯
Figure BPA00001545560700963
类似于在实施例6A中所述的方法，2-{4-[(E)-3-(3，4-二氯-苯基)-丙烯酰基]-7-氧代-[1，4]二氮杂-1-基}-琥珀酸1-甲酯(中间体7)，1.5当量的Et3N(冷却前加入)和1当量的(3S，5S)-5-甲基-哌啶-3-醇；盐酸盐(中间体4)在SiO2-柱上纯化(二氯甲烷/异丙醇97∶3-9∶1梯度)后，提供54％产率的标题化合物，其为白色泡沫。MS：540.0(MH+，2Cl).
实施例10
(R，S)-2-{4-[(E)-3-(3-氯-苯基)-丙烯酰基]-7-氧代-[1，4]二氮杂
Figure BPA00001545560700965
-1-基}-4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁酸甲酯
Figure BPA00001545560700966
类似于在实施例6A中所述的方法，2-{4-[(E)-3-(3-氯-苯基)-丙烯酰基]-7-氧代-[1，4]二氮杂
Figure BPA00001545560700967
-1-基}-琥珀酸1-甲酯(中间体8)以及1.1当量的Et3N(冷却前加入)和1.05当量的(S)-6-氮杂-螺[2.5]辛-4-醇；盐酸盐(中间体2)在SiO2-柱上(二氯甲烷/MeOH 98∶2-95∶5)纯化后提供76％产率的标题化合物，其为白色泡沫。MS：518.3(MH+，1Cl).
实施例11
1-[(E)-3-(3-氯-苯基)-丙烯酰基]-4-[(R，S)-3-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-1-羟甲基-3-氧代-丙基]-[1，4]二氮杂
Figure BPA00001545560700971
-5-酮
Figure BPA00001545560700972
类似于在实施例6B中所述的方法，(R，S)-2-{4-[(E)-3-(3-氯-苯基)-丙烯酰基]-7-氧代-[1，4]二氮杂
Figure BPA00001545560700973
-1-基}-4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁酸甲酯(实施例10)和2当量的LiBH4在仅搅拌1夜和在SiO2-柱(二氯甲烷/MeOH 98∶2-95∶5)上纯化后，提供88％产率的标题化合物，其为白色泡沫.MS：490.1(MH+，1Cl).
实施例12
外消旋-(2-{4-[(E)-3-(3-氯-苯基)-丙烯酰基]-7-氧代-[1，4]二氮杂
Figure BPA00001545560700974
-1-基}-N，N-二甲基-琥珀酰胺酸甲酯)
Figure BPA00001545560700975
类似于在实施例6A中所述的方法，2-{4-[(E)-3-(3-氯-苯基)-丙烯酰基]-7-氧代-[1，4]二氮杂
Figure BPA00001545560700976
-1-基}-琥珀酸1-甲酯(中间体8)，1.2当量的Et3N(冷却前加入)和二甲基胺盐酸盐在SiO2-柱上(二氯甲烷/MeOH99∶1-95∶5)纯化后提供73％产率的标题化合物，其为白色泡沫。MS：436.3(MH+，1Cl).
实施例13
1-[(E)-3-(3-氯-苯基)-丙烯酰基]-4-[(R，S)-3-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-1-甲氧基甲基-3-氧代-丙基]-[1，4]二氮杂
Figure BPA00001545560700981
-5-酮
Figure BPA00001545560700982
A)
Figure BPA00001545560700983
基}-4-羟基-丁酸叔丁酯
类似于在实施例6B中所述的方法，2-{4-[(E)-3-(3-氯-苯基)-丙烯酰基]-7-氧代-[1，4]二氮杂
Figure BPA00001545560700984
-1-基}-琥珀酸4-叔丁酯1-甲酯(中间体8C)和2当量的LiBH4在仅一夜搅拌和在SiO2-柱(二氯甲烷/MeOH98∶2-95∶5)上纯化后，提供84％产率的标题化合物，其为白色泡沫。MS：436.9(MH+，1Cl).
B)
Figure BPA00001545560700985
基}-4-甲氧基-丁酸叔丁酯
向0.200g(0.46mmol)的3-{4-[(E)-3-(3-氯-苯基)-丙烯酰基]-7-氧代-[1，4]二氮杂
Figure BPA00001545560700986
-1-基}-4-羟基-丁酸叔丁酯在0.73ml DMF中的溶液逐滴加入0.142ml(2.29mmol)的碘代甲烷。将溶液在0℃用0.024g(0.55mmol)的NaH(55％在油中)处理。将反应物在0℃搅拌3h，用冷的0％KHSO4水溶液中和并用EtOAc提取(3x)。将有机相用水性饱和的NaHCO3和水性10％NaCl洗涤，干燥(Na2SO4)，蒸发并在SiO2-柱(二氯甲烷/异丙醇99∶1-98∶2)上纯化，以提供61％产率的标题化合物，其为无色胶。MS：451.2(MH+，1Cl).
C)
Figure BPA00001545560700987
基}-4-甲氧基-丁酸类似于在中间体7C中所述的方法，3-{4-[(E)-3-(3-氯-苯基)-丙烯酰基]-7-氧代-[1，4]二氮杂
Figure BPA00001545560700991
-1-基}-4-甲氧基-丁酸叔丁酯提供定量产率的标题化合物，其为浅黄色胶。MS：393.0(M-H，1Cl).
D)1-[(E)-3-(3-氯-苯基)-丙烯酰基]-4-[(R，S)-3-((S)-4-羟基-6-氮 类似于在实施例6A中所述的方法，3-{4-[(E)-3-(3-氯-苯基)-丙烯酰基]-7-氧代-[1，4]二氮杂
Figure BPA00001545560700993
-1-基}-4-甲氧基-丁酸以及1.1当量的Et3N(冷却前加入)和1.05当量的(S)-6-氮杂-螺[2.5]辛-4-醇；盐酸盐(中间体2)在SiO2-柱上(二氯甲烷/异丙醇98∶2-9∶1)纯化后提供66％产率的标题化合物，其为白色泡沫。MS：504.2(MH+，1Cl).
实施例14
(R)-2-{4-[(E)-3-(3-氯-苯基)-丙烯酰基]-7-氧代-[1，4]二氮杂
Figure BPA00001545560700994
-1-基}-4-羟基-N，N-二甲基-丁酰胺
Figure BPA00001545560700995
A)3-[苄氧基羰基-(2-羟基-乙基)-氨基]-丙酸叔丁酯
将6.11g(100mmol)的乙醇胺冷却(0℃)，用14.52ml(100mmol)的叔丁基-丙烯酸酯处理，并在该温度搅拌15分钟。在加温到室温的过程中，开始反应，并将其25-30℃冷却，接着在室温搅拌18h。将该油溶于500ml的四氢呋喃和500ml的水中，在0℃加入27.42(110mmol)的N-(苄氧基羰氧基)琥珀酰亚胺，随后加入27.88ml(200mmol)的三乙胺。将反应物在室温搅拌超过3h，接着在10％硫酸氢钾水溶液和二乙醚之间分配(3x)。将有机相用10％硫酸氢钾水溶液，饱和碳酸氢钠水溶液，10％氯化钠水溶液洗涤，通过Na2SO4干燥，蒸发，并通过快速硅胶柱(正庚烷/乙酸乙酯4∶1到1∶1)纯化，以产生27.53g(85％)，作为浅黄色油的标题化合物。MS：324.2(MH+).
B)3-[苄氧基羰基-(2-氧代-乙基)-氨基]-丙酸叔丁酯
在-50到-60℃，在20分钟内向4.53ml(35.65mmol)的草酰氯在76ml二氯甲烷中的溶液加入5.81ml(74.40mmol)二甲亚砜在16ml二氯甲烷中的溶液。将该溶液搅拌5分钟，并在20分钟内加入10.03g(31.0mmol)3-[苄氧基羰基-(2-羟基-乙基)-氨基]-丙酸叔丁酯在67ml二氯甲烷中的溶液。将混合物搅拌15分钟，并在25分钟内加入21.6ml(155mmol)的三乙胺。将混悬液搅拌2h，并缓慢加温到0℃。将反应物用冷的10％磷酸二氢钾水溶液中和(用固体磷酸二氢钾调节到pH4-5)并用二乙醚提取(3x)。将有机相用10％磷酸二氢钾水溶液、饱和碳酸氢钠水溶液、10％氯化钠水溶液洗涤，通过Na2SO4干燥，蒸发以产生9.94g(99.8％)标题化合物，其为黄色油.MS：322.1(MH+).
C)(S)-4-苄氧基-2-{2-[苄氧基羰基-(2-叔丁氧基羰基-乙基)-氨基]-乙基 氨基}-丁酸甲酯
将3.71g(11.55mmol)的3-[苄氧基羰基-(2-氧代-乙基)-氨基]-丙酸叔丁酯和3.00g(11.55mmol)的(S)-2-氨基-4-苄氧基-丁酸甲酯；盐酸盐(中间体7)溶解在1，2-二氯乙烷/乙醇1∶180ml中，并用1.93ml(13.86mmol)的三乙胺，3.03ml的乙酸和3.03ml(24.25mmol，8M在吡啶中)的吡啶-硼烷复合物处理(用水浴冷却到室温)。将反应物在室温搅拌，历时
Figure BPA00001545560701001
接着在碳酸氢钠水溶液和二乙醚之间分配(3x)。将有机相用饱和碳酸氢钠水溶液，10％氯化钠水溶液洗涤，通过Na2SO4干燥，蒸发，并通过快速硅胶柱(二氯甲烷/正庚烷1∶1到二氯甲烷，接着二氯甲烷/乙酸乙酯4∶1到乙酸乙酯)纯化以产生4.81g(79％)的标题化合物，其为无色的油。MS：529.2(MH+).
D)(S)-4-苄氧基-2-{2-[苄氧基羰基-(2-羧基-乙基)-氨基]-乙基氨基}-丁 酸甲酯；盐酸盐.
将4.58g(8.66mmol)的(S)-4-苄氧基-2-{2-[苄氧基羰基-(2-叔丁氧基羰基-乙基)-氨基]-乙基氨基}-丁酸甲酯在17ml二
Figure BPA00001545560701002
烷中的溶液冷却(10℃)，用21.7ml(86.7mmol)在二
Figure BPA00001545560701003
烷中的4M氯化氢溶液，10滴水处理，并在室温搅拌12h。蒸发溶液，将其悬浮在乙腈中并蒸发(2x)，溶解于二氯甲烷，用Na2SO4处理，过滤并蒸发以产生4.42g(定量的)标题化合物，其为浅黄色泡沫.MS：471.2(M-H-).
Figure BPA00001545560701011
苄酯
将4.40g(8.64mmol)的(S)-4-苄氧基-2-{2-[苄氧基羰基-(2-羧基-乙基)-氨基]-乙基氨基}-丁酸甲酯；盐酸盐在85ml二氯甲烷中的溶液用1.20(8.64mmol)的三乙胺处理，并在0℃用1.99g(10.37mmol)的N-(3-二甲基氨基丙基)-N’-乙基碳二亚胺盐酸盐处理。使冷却浴达到室温，并在15h后将反应物用10％硫酸氢钾水溶液/二乙醚进行提取(3x)。将有机相用10％硫酸氢钾水溶液、10％氯化钠溶液洗涤，并通过Na2SO4干燥，以在溶剂蒸发后产生3.74g(95％)标题化合物，其为浅黄色的油。MS：455.2(MH+).
Figure BPA00001545560701012
酸酯
将2.01g(4.40mmol)的4-((S)-3-苄氧基-1-甲氧基羰基-丙基)-5-氧代-[l，4]二氮杂
Figure BPA00001545560701013
-1-甲酸苄酯在12ml的四氢呋喃/甲醇(1∶1)中的溶液在0℃用4.43ml(4.40mmol)的1M氢氧化锂水溶液处理，并在该温度保持3h。蒸发反应物，将其溶解于乙腈并再次蒸发(3x)以提供1.94g(98％)标题化合物，其为浅黄色泡沫。MS：439.2(M-H-).
G)4-((R)-3-苄氧基-1-二甲基氨基甲酰基-丙基)-5-氧代-[1，4]二氮杂
Figure BPA00001545560701014
在室温，将1.90g(4.30mmol)的锂；(R)-4-苄氧基-2-(4-苄氧基羰基-7-氧代-[1，4]二氮杂
Figure BPA00001545560701015
-1-基)-丁酸酯悬浮在25ml N，N-二甲基甲酰胺中，随后加入0.38g(4.70mmol)二甲胺盐酸盐，2.37ml(17.00mmol)的三乙胺并在0℃加入1.84g(4.70mmol)的O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-1，1，3，3-四甲基脲鎓六氟磷酸盐。将该溶液搅拌过夜并加温直到室温。将反应物倾在10％硫酸氢钾水溶液上，随后用Et2O提取(3次)。将有机相用饱和碳酸氢钠水溶液洗涤并用10％氯化钠水溶液洗涤。将合并的有机相通过Na2SO4干燥，并在真空下去除溶剂以提供2.00g(定量.)标题化合物，其为橙色的油.MS：468.3(MH+).
Figure BPA00001545560701016
盐
将1.85g(4.00mmol)4-((R)-3-苄氧基-1-二甲基氨基甲酰基-丙基)-5-氧代-[1，4]二氮杂
Figure BPA00001545560701021
-1-甲酸苄酯在57ml甲醇中的溶液用3.96ml的1M盐酸水溶液和0.20g的Pd/C(10％)的溶液处理，并在H2-气压上搅拌16h。过滤后，蒸发溶液，溶解于甲醇并蒸发(3x)，随后用二氯甲烷，并在减压下蒸发(3x)，以产生1.10g(99％)的标题化合物，其为白色泡沫。MS：244.1(MH+).
I)
Figure BPA00001545560701022
基}-4-羟基-N，N-二甲基-丁酰胺
类似于在实施例1中所述的方法，(R)-4-羟基-N，N-二甲基-2-(7-氧代-[1，4]二氮杂-1-基)-丁酰胺盐酸盐和(E)-3-氯肉桂酸与1.1当量的三乙胺提供72％产率的标题化合物，其为白色泡沫。MS：408.1(MH+，1Cl).
实施例15
(S)-4-[3-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-3-氧代-丙基]-2-甲基-3-氧代-哌嗪-1-甲酸(3，4-二氯-苯基)-酰胺
将0.070g(0.20mmol)的3-[(S)-4-(3，4-二氯-苯基氨基甲酰基)-3-甲基-2-氧代-哌嗪-1-基]-丙酸(中间体12)在1.5ml DMF中的溶液用0.045ml(0.28mmol)的(S)-6-氮杂-螺[2.5]辛-4-醇；盐酸盐(中间体2)，0.054ml(0.40mmol)的三乙胺处理，并在0℃用0.081g(0.22mmol)的HATU处理。将混悬液自然加温到室温过夜，倾在10％KHSO4水溶液上，并用EtOAc提取(3x)。将有机相用饱和NaHCO3水溶液和10％NaCl水溶液洗涤，干燥(Na2SO4)并蒸发以在用快速色谱法(SiO2，二氯甲烷/甲醇99∶1-96∶4)纯化后，提供0.069g(70％)作为白色泡沫的标题化合物.MS：483.2(MH+，2Cl)。
实施例16
(S)-2-甲基-3-氧代-4-(3-氧代-3-哌啶-1-基-丙基)-哌嗪-1-甲酸(3，4-二氯-苯基)-酰胺
Figure BPA00001545560701031
类似于在实施例15中所述的方法，3-[(S)-4-(3，4-二氯-苯基氨基甲酰基)-3-甲基-2-氧代-哌嗪-1-基]-丙酸(中间体12)和哌啶提供73％产率的标题化合物，其为白色固体。MS：441.1(MH+，2Cl).
实施例17
(S)-4-[3-((R，S)-3-羟基-哌啶-1-基)-3-氧代-丙基]-2-甲基-3-氧代-哌嗪-1-甲酸(3，4-二氯-苯基)-酰胺
Figure BPA00001545560701032
类似于在实施例15中所述的方法，3-[(S)-4-(3，4-二氯-苯基氨基甲酰基)-3-甲基-2-氧代-哌嗪-1-基]-丙酸(中间体12)和外消旋-3-羟基哌啶提供56％产率的标题化合物，其为灰白色固体.MS：457.1(MH+，2Cl).
实施例18
(S)-4-[3-(4-羟基-4-甲基-哌啶-1-基)-3-氧代-丙基]-2-甲基-3-氧代-哌嗪-1-甲酸(3，4-二氯-苯基)-酰胺
Figure BPA00001545560701041
类似于在实施例15中所述的方法，3-[(S)-4-(3，4-二氯-苯基氨基甲酰基)-3-甲基-2-氧代-哌嗪-1-基]-丙酸(中间体12)和4-甲基-哌啶-4-醇提供51％产率作为灰白色固体的标题化合物。MS：471.2(MH+，2Cl).
实施例19
(S)-4-[3-((3S，5S)-3-羟基-5-甲基-哌啶-1-基)-3-氧代-丙基]-2-甲基-3-氧代-哌嗪-1-甲酸(3，4-二氯-苯基)-酰胺
Figure BPA00001545560701042
类似于在实施例15中所述的方法，3-[(S)-4-(3，4-二氯-苯基氨基甲酰基)-3-甲基-2-氧代-哌嗪-1-基]-丙酸(中间体12)和1.1当量(3S，5S)-5-甲基-哌啶-3-醇；盐酸盐(中间体4)提供84％产率作为灰白色固体的标题化合物。MS：471.3(MH+，2Cl).
实施例20
(S)-4-[3-((3S，4S)-3-羟基-4-甲基-哌啶-1-基)-3-氧代-丙基]-2-甲基-3-氧代-哌嗪-1-甲酸(3，4-二氯-苯基)-酰胺
Figure BPA00001545560701043
类似于在实施例15中所述的方法，3-[(S)-4-(3，4-二氯-苯基氨基甲酰基)-3-甲基-2-氧代-哌嗪-1-基]-丙酸(中间体12)和1.1当量(3S，4S)-4-甲基-哌啶-3-醇；盐酸盐(中间体3)提供84％产率作为灰白色固体的标题化合物。MS：471.3(MH+，2Cl).
实施例21
(S)-4-[3-((3SR，4RS)-3-羟基-4-羟甲基-4-甲基-哌啶-1-基)-3-氧代-丙基]-2-甲基-3-氧代-哌嗪-1-甲酸(3，4-二氯-苯基)-酰胺
Figure BPA00001545560701051
类似于在实施例15中所述的方法，3-[(S)-4-(3，4-二氯-苯基氨基甲酰基)-3-甲基-2-氧代-哌嗪-1-基]-丙酸(中间体12)和1.1当量(外消旋，顺式)-4-羟甲基-4-甲基-哌啶-3-醇；盐酸盐(中间体10)提供81％产率的标题化合物，其为白色泡沫。MS：499.2(M-H-，2Cl).
实施例22
(S)-2-甲基-4-(3-吗啉-4-基-3-氧代-丙基)-3-氧代-哌嗪-1-甲酸(3，4-二氯-苯基)-酰胺
Figure BPA00001545560701052
类似于在实施例15中所述的方法，3-[(S)-4-(3，4-二氯-苯基氨基甲酰基)-3-甲基-2-氧代-哌嗪-1-基]-丙酸(中间体12)和吗啉提供45％产率的标题化合物，其为白色泡沫。MS：441.1(M-H-，2Cl).
实施例23
(S)-4-[3-((3SR，4SR)-4-氟-3-羟基-哌啶-1-基)-3-氧代-丙基]-2-甲基-3-氧代-哌嗪-1-甲酸(3，4-二氯-苯基)-酰胺
Figure BPA00001545560701061
类似于在实施例15中所述的方法，3-[(S)-4-(3，4-二氯-苯基氨基甲酰基)-3-甲基-2-氧代-哌嗪-1-基]-丙酸(中间体12)和1.1当量(外消旋，反式)-4-氟-哌啶-3-醇；盐酸盐(中间体11)提供59％产率的标题化合物，其为白色泡沫。MS：475.13(MH+，2Cl).
实施例24
(S)-2-甲基-3-氧代-4-[3-氧代-3-(4-三氟甲基-哌啶-1-基)-丙基]-哌嗪-1-甲酸(3，4-二氯-苯基)-酰胺
Figure BPA00001545560701062
类似于在实施例15中所述的方法，3-[(S)-4-(3，4-二氯-苯基氨基甲酰基)-3-甲基-2-氧代-哌嗪-1-基]-丙酸(中间体12)和4-三氟甲基-哌啶盐酸盐提供31％产率的标题化合物，其为白色泡沫。MS：509.13(MH+，2Cl).
实施例25
(S)-4-[4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁基]-2-甲基-3-氧代-哌嗪-1-甲酸(3，4-二氯-苯基)-酰胺
将0.050g(0.20mmol)的(S)-1-[4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁基]-3-甲基-哌嗪-2-酮(中间体13)在1ml二氯甲烷中的溶液用0.030g(0.20mmol)的3，4-二氯苯基异氰酸酯处理。1小时后，将反应蒸发并通过快速硅胶柱(二氯甲烷/甲醇98/2-9∶1)纯化以产生0.039g(48％)的作为白色泡沫的标题化合物。MS：495.2(M-H-，2Cl).
实施例26
(S)-4-[4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁基]-2-甲基-3-氧代-哌嗪-1-甲酸(3-氯-苯基)-酰胺
Figure BPA00001545560701072
类似于在实施例25中所述的方法，(S)-1-[4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁基]-3-甲基-哌嗪-2-酮(中间体13)和3-氯苯基异氰酸酯提供17％产率的标题化合物，其为白色泡沫。MS：463.2(MH+，Cl).
实施例27
(S)-4-[4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁基]-2-甲基-3-氧代-哌嗪-1-甲酸(4-氯-苯基)-酰胺
Figure BPA00001545560701073
类似于在实施例25中所述的方法，(S)-1-[4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁基]-3-甲基-哌嗪-2-酮(中间体13)和4-氯苯基异氰酸酯提供72％产率的标题化合物，其为白色泡沫。MS：463.2(MH+，Cl).
实施例28
(S)-4-[4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁基]-2-甲基-3-氧代-哌嗪-1-甲酸(3-三氟甲基-苯基)-酰胺
类似于在实施例25中所述的方法，(S)-1-[4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁基]-3-甲基-哌嗪-2-酮(中间体13)和3-(三氟甲基)苯基异氰酸酯提供24％产率的标题化合物，其为白色泡沫.MS：497.2(MH+).
实施例29
(S)-4-[4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁基]-2-甲基-3-氧代-哌嗪-1-甲酸(4-三氟甲基-苯基)-酰胺
Figure BPA00001545560701082
类似于在实施例25中所述的方法，(S)-1-[4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁基]-3-甲基-哌嗪-2-酮(中间体13)和4-(三氟甲基)苯基异氰酸酯提供32％产率的标题化合物，其为白色泡沫。MS：497.2(MH+).
实施例30
(S)-4-[4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁基]-2-甲基-3-氧代-哌嗪-1-甲酸(4-三氟甲氧基-苯基)-酰胺
Figure BPA00001545560701091
将0.050g(0.16mmol)的(S)-1-[4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁基]-3-甲基-哌嗪-2-酮(中间体13)和0.053ml(0.48mmol)的4-甲基吗啉在1ml二氯甲烷中的溶液用在1ml二氯甲烷中的0.033g(0.16mmol)的1-异氰酰-4-三氟甲氧基-苯(中间体14)在室温进行处理。1h后，再次加入0.005g的0.033g(0.16mmol)的1-异氰酰-4-三氟甲氧基-苯(中间体14)，并在30分钟后，将反应物用水性10％KHSO4/EtOAc进行提取(3x)。将有机相用饱和的NaHCO3水溶液，10％NaCl洗涤并通过Na2SO4干燥，以在用二氯甲烷/戊烷沉淀后，产生0.077g(93％)标题化合物，其为白色非晶形固体。MS：513.23(MH+).
实施例31
(S)-4-[4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁基]-2-甲基-3-氧代-哌嗪-1-甲酸(3-三氟甲氧基-苯基)-酰胺
Figure BPA00001545560701092
类似于在实施例30中所述的方法，(S)-1-[4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁基]-3-甲基-哌嗪-2-酮(中间体13)和1-异氰酰-3-三氟甲氧基-苯(中间体15)提供70％产率的标题化合物，其为白色非晶形固体。MS：513.23(MH+).
实施例32
(S)-4-[4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁基]-2-甲基-3-氧代-哌嗪-1-甲酸(4-氯-3-三氟甲基-苯基)-酰胺
Figure BPA00001545560701101
类似于在实施例25中所述的方法，(S)-1-[4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁基]-3-甲基-哌嗪-2-酮(中间体13)和1-氯-4-异氰酰-2-三氟甲基-苯提供定量产率的标题化合物，其为白色泡沫。MS：531.20(MH+，1Cl).
实施例33
(S)-4-[4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁基]-2-甲基-3-氧代-哌嗪-1-甲酸(3-氯-4-三氟甲基-苯基)-酰胺
Figure BPA00001545560701102
类似于在实施例30中所述的方法，(S)-1-[4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁基]-3-甲基-哌嗪-2-酮(中间体13)和2-氯-4-异氰酰-1-三氟甲基-苯(中间体16)提供83％产率的标题化合物，其为白色泡沫。MS：531.20(MH+，1Cl).
实施例34
(S)-4-[4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁基]-2-甲基-3-氧代-哌嗪-1-甲酸(3-氯-4-三氟甲氧基-苯基)-酰胺
Figure BPA00001545560701111
类似于在实施例30中所述的方法，(S)-1-[4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁基]-3-甲基-哌嗪-2-酮(中间体13)和2-氯-4-异氰酰-1-三氟甲氧基-苯(中间体17)提供68％产率的标题化合物，其为浅褐色泡沫。MS：547.19(MH+，1Cl).
实施例35
(S)-4-[4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁基]-2-甲基-3-氧代-哌嗪-1-甲酸(4-氯-3-三氟甲氧基-苯基)-酰胺
Figure BPA00001545560701112
类似于在实施例30中所述的方法，(S)-1-[4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁基]-3-甲基-哌嗪-2-酮(中间体13)和1-氯-4-异氰酰-2-三氟甲氧基-苯(中间体18)提供67％产率的标题化合物，其为浅褐色泡沫。MS：547.19(MH+，1Cl).
实施例36
(S)-2-甲基-4-[4-(2-氧杂-7-氮杂-螺[3.5]壬-7-基)-4-氧代-丁基]-3-氧代-哌嗪-1-甲酸(3-氯-苯基)-酰胺
Figure BPA00001545560701113
将0.035g(0.10mmol)的4-[(S)-4-(3-氯-苯基氨基甲酰基)-3-甲基-2-氧代-哌嗪-1-基]-丁酸(中间体19)和0.012g(0.11mmol)N-羟基-2-吡啶酮在1.5ml DMF中的混悬液在0℃用0.021g(0.11mmol)的EDCI处理并自然加温到室温过夜。接着加入0.035g(0.10mmol)的2-氧杂-7-氮杂-螺[3.5]壬烷三氟-乙酸盐(1∶2)(中间体20)和0.030ml(0.30mmol)的三乙胺在1.5ml的DMF中的溶液，并将反应物在室温搅拌1h。将该溶液倾在10％KHSO4水溶液上，并用Et2O提取(3x)。将有机相用饱和的NaHCO3水溶液和10％NaCl水溶液洗涤，干燥(Na2SO4)并蒸发以提供0.013g标题化合物，其最大纯度为60％。将水相再次用EtOAc提取(3x)，干燥有机相(NaSO4)，蒸发并在减压下干燥以提供0.029g(62％)标题化合物，其为浅黄色泡沫。MS：463.21(MH+，Cl).
实施例37和38
乙酸(S)-1-{4-[(S)-4-(3，4-二氯-苯基氨基甲酰基)-3-甲基-2-氧代-哌嗪-1-基]-丁酰}-4，4-二甲基-哌啶-3-基酯和(S)-4-[4-((S)-3-羟基-4，4-二甲基-哌啶-1-基)-4-氧代-丁基]-2-甲基-3-氧代-哌嗪-1-甲酸(3，4-二氯-苯基)-酰胺
Figure BPA00001545560701121
A)(S)-1-[4-((S)-3-羟基-4，4-二甲基-哌啶-1-基)-4-氧代-丁基]-3-甲基-哌 嗪-2-酮；乙酸酯
将0.050g(0.1mmol)的(S)-4-[4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁基]-2-甲基-3-氧代-哌嗪-1-甲酸苄酯(中间体13C)在3ml乙酸中的溶液用0.026g的PtO2处理并在H2-气压上搅拌2天。过滤和蒸发后，在3ml乙酸中，将粗制化合物再次用0.026g的PtO2/H2氢化3天。过滤和蒸发后，用甲苯再次蒸发残余物(3次)并将溶剂在真空下移除以提供0.057g(99％)标题化合物，其为浅黄色油。MS：312.23(MH+).
B)乙酸(S)-1-{4-[(S)-4-(3，4-二氯-苯基氨基甲酰基)-3-甲基-2-氧代-哌 嗪-1-基]-丁酰}-4，4-二甲基-哌啶-3-基酯和(S)-4-[4-((S)-3-羟基-4，4-二甲 基-哌啶-1-基)-4-氧代-丁基]-2-甲基-3-氧代-哌嗪-1-甲酸(3，4-二氯-苯 基)-酰胺
类似于在实施例30中所述的方法，(S)-1-[4-((S)-3-羟基-4，4-二甲基-哌啶-1-基)-4-氧代-丁基]-3-甲基-哌嗪-2-酮；乙酸酯和3，4-二氯苯基异氰酸酯与5当量的4-甲基吗啉在快速硅胶柱(二氯甲烷/甲醇100％二氯甲烷至85∶15)后提供：17％的乙酸(S)-1-{4-[(S)-4-(3，4-二氯-苯基氨基甲酰基)-3-甲基-2-氧代-哌嗪-1-基]-丁酰}-4，4-二甲基-哌啶-3-基酯(实施例37)，其为白色泡沫，MS：563.18(M+Na+，2Cl)，Rf0.55(二氯甲烷/甲醇9∶1)和38％的(S)-4-[4-((S)-3-羟基-4，4-二甲基-哌啶-1-基)-4-氧代-丁基]-2-甲基-3-氧代-哌嗪-1-甲酸(3，4-二氯-苯基)-酰胺(实施例38)，其为白色泡沫，MS：499.19(MH+，2Cl)，Rf 0.50(二氯甲烷/甲醇9∶1)。
实施例39
(S)-4-[4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁基]-2-甲基-3-氧代-哌嗪-1-甲酸(3-氯-苯基)-酰胺
Figure BPA00001545560701131
类似于在实施例25中所述的方法，(S)-1-[5-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-5-氧代-戊基-3-甲基-哌嗪-2-酮(中间体21)和3，4-二氯苯基异氰酸酯提供74％产率的标题化合物，其为白色泡沫。MS：511.19(MH+，2Cl).
实施例40
(S)-4-[(R，S)-2-羟基-4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁基]-2-甲基-3-氧代-哌嗪-1-甲酸(3，4-二氯-苯基)-酰胺
Figure BPA00001545560701141
类似于在实施例25中所述的方法，在二氯甲烷/DMF中的(S)-1-[(R，S)-2-羟基-4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁基]-3-甲基-哌嗪-2-酮(中间体23)和3，4-二氯苯基异氰酸酯提供57％产率的标题化合物，其为白色粉末。MS：513.16(MH+，2Cl).
实施例41
(S)-4-[(R，S)-2-羟基-4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁基]-2-甲基-3-氧代-哌嗪-1-甲酸(3-氯-4-三氟甲基-苯基)-酰胺
类似于在实施例30中所述的方法，(S)-1-[(R，S)-2-羟基-4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁基]-3-甲基-哌嗪-2-酮(中间体23)和1.2当量的2-氯-4-异氰酰-1-三氟甲基-苯(中间体16)提供57％产率的标题化合物，其为白色粉末。MS：547.19(MH+，Cl).
实施例42
(S)-4-[(S)-2-羟基-4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁基]-2-甲基-3-氧代-哌嗪-1-甲酸(3-氯-4-三氟甲基-苯基)-酰胺
Figure BPA00001545560701151
类似于在实施例30中所述的方法，(S)-(S)-1-[2-羟基-4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁基]-3-甲基-哌嗪-2-酮(中间体25)和1.2当量的2-氯-4-异氰酰-1-三氟甲基-苯(中间体16)提供36％产率的标题化合物，其为白色粉末。MS：547.19(MH+，Cl).
实施例43
(S)-4-[(R)-2-羟基-4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁基]-2-甲基-3-氧代-哌嗪-1-甲酸(3-氯-4-三氟甲基-苯基)-酰胺
Figure BPA00001545560701152
通过在Reprosil Chiral NR，(40％在正庚烷中的2-丙醇)上手性分离(S)-4-[(R，S)-2-羟基-4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁基]-2-甲基-3-氧代-哌嗪-1-甲酸(3-氯-4-三氟甲基-苯基)-酰胺(实施例41)来制备标题化合物，提供36％的(S)-4-[(S)-2-羟基-4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁基]-2-甲基-3-氧代-哌嗪-1-甲酸(3-氯-4-三氟甲基-苯基)-酰胺(实施例42)，其为灰白色非晶形固体，MS：547.19(MH+，Cl)和30％的(S)-4-[(R)-2-羟基-4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁基]-2-甲基-3-氧代-哌嗪-1-甲酸(3-氯-4-三氟甲基-苯基)-酰胺(实施例43)，其为灰白色非晶形固体。MS：547.19(MH+，Cl).
实施例44
(S)-4-[(R，S)-2-羟基-4-(((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁基]-2-甲基-3-氧代-哌嗪-1-甲酸(3-氯-4-三氟甲氧基-苯基)-酰胺
Figure BPA00001545560701161
类似于在实施例30中所述的方法，在二氯甲烷/DMF中的(S)-1-[(R，S)-2-羟基-4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁基]-3-甲基-哌嗪-2-酮(中间体23)和1.3当量的2-氯-4-异氰酰-1-三氟甲氧基-苯(中间体17)提供52％产率的标题化合物，其为白色固体。MS：563.19(MH+，Cl).
实施例45和实施例46
(S)-4-[(S)-2-羟基-4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁基]-2-甲基-3-氧代-哌嗪-1-甲酸(3-氯-4-三氟甲氧基-苯基)-酰胺和(S)-4-[(R)-2-羟基-4-(((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁基]-2-甲基-3-氧代-哌嗪-1-甲酸(3-氯-4-三氟甲氧基-苯基)-酰胺
Figure BPA00001545560701162
Figure BPA00001545560701171
通过在Reprosil Chiral NR，(40％在正庚烷中的2-丙醇)上手性分离(S)-4-[(R，S)-2-羟基-4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁基]-2-甲基-3-氧代-哌嗪-1-甲酸(3-氯-4-三氟甲氧基-苯基)-酰胺(实施例44)来制备标题化合物，提供39％的(S)-4-[(S)-2-羟基-4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁基]-2-甲基-3-氧代-哌嗪-1-甲酸(3-氯-4-三氟甲氧基-苯基)-酰胺(实施例45)，其为白色固体，MS：563.19(MH+，Cl)和38％的(S)-4-[(R)-2-羟基-4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁基]-2-甲基-3-氧代-哌嗪-1-甲酸(3-氯-4-三氟甲氧基-苯基)-酰胺(实施例46)，其为白色固体。MS：563.19(MH+，Cl).
实施例47
(S)-4-[(R，S)-2-羟基-4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁基]-2-甲基-3-氧代-哌嗪-1-甲酸(3，4-双-三氟甲基-苯基)-酰胺
类似于在实施例30中所述的方法，(S)-1-[(R，S)-2-羟基-4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁基]-3-甲基-哌嗪-2-酮(中间体23)和1.2当量的4-异氰酰-1，2-双-三氟甲基-苯(中间体26)提供51％产率的标题化合物，其为白色粉末。MS：581.21(MH+).
实施例48和实施例49
(S)-4-[(S)-2-羟基-4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁基]-2-甲基-3-氧代-哌嗪-1-甲酸(3，4-双-三氟甲基-苯基)-酰胺和(S)-4-[(R)-2-羟基-4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁基]-2-甲基-3-氧代-哌嗪-1-甲酸(3，4-双-三氟甲基-苯基)-酰胺
Figure BPA00001545560701181
通过在Reprosil Chiral NR，(40％在正庚烷中的2-丙醇)上手性分离(S)-4-[(R，S)-2-羟基-4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁基]-2-甲基-3-氧代-哌嗪-1-甲酸(3，4-双-三氟甲基-苯基)-酰胺(实施例47)制备标题化合物，提供41％的(S)-4-[(S)-2-羟基-4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁基]-2-甲基-3-氧代-哌嗪-1-甲酸(3，4-双-三氟甲基-苯基)-酰胺(实施例48)，其为白色粉末，MS：581.22(MH+)和24％的(S)-4-[(R)-2-羟基-4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁基]-2-甲基-3-氧代-哌嗪-1-甲酸(3，4-双-三氟甲基-苯基)-酰胺(实施例49)，其为白色粉末。MS：581.22(MH+).
实施例50
(S)-4-[4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-3，3-二甲基-4-氧代-丁基]-2-甲基-3-氧代-哌嗪-1-甲酸(3-氯-4-三氟甲基-苯基)-酰胺
Figure BPA00001545560701191
类似于在实施例30中所述的方法，(S)-1-[4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-3，3-二甲基-4-氧代-丁基]-3-甲基-哌嗪-2-酮(中间体28)和1.2当量的2-氯-4-异氰酰-1-三氟甲基-苯(中间体16)提供53％产率的标题化合物，其为灰白色泡沫。MS：559.23(MH+，Cl).
实施例51
(S)-4-[4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-3，3-二甲基-4-氧代-丁基]-2-甲基-3-氧代-哌嗪-1-甲酸(3-氯-4-三氟甲氧基-苯基)-酰胺
Figure BPA00001545560701192
类似于在实施例30中所述的方法，(S)-1-[4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-3，3-二甲基-4-氧代-丁基]-3-甲基-哌嗪-2-酮(中间体28)和1.2当量的2-氯-4-异氰酰-1-三氟甲氧基-苯(中间体17)提供53％产率的标题化合物，其为浅黄色泡沫。MS：575.22(MH+，Cl).
实施例52
(S)-2-[(S)-4-(3-氯-4-三氟甲基-苯基氨基甲酰基)-3-甲基-2-氧代-哌嗪-1-基]-5-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-5-氧代-戊酸甲酯
Figure BPA00001545560701201
类似于在实施例30中所述的方法，(S)-5-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-2-((S)-3-甲基-2-氧代-哌嗪-1-基)-5-氧代-戊酸甲酯；盐酸盐(中间体29)与1.4当量的4-甲基吗啉和1.4当量的2-氯-4-异氰酰-1-三氟甲基-苯(中间体16)提供75％产率的标题化合物，其为灰白色泡沫。MS：589.20(MH+，Cl).
实施例53
(S)-4-[(S)-4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-1-羟甲基-4-氧代-丁基]-2-甲基-3-氧代-哌嗪-1-甲酸(3-氯-4-三氟甲基-苯基)-酰胺
Figure BPA00001545560701202
将0.29g(0.50mmol)的(S)-2-[(S)-4-(3-氯-4-三氟甲基-苯基氨基甲酰基)-3-甲基-2-氧代-哌嗪-1-基]-5-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-5-氧代-戊酸甲酯在1.5ml THF中的冷却(-20℃)溶液用0.25ml(0.50mmol)的LiBH4(2M在THF中)和0.3ml THF中的0.04ml(1.00mmol)的MeOH处理。将反应物加温到+15℃(在3h内)，并在室温搅拌1.5h，冷却到0℃，并用0.17ml(2.28mmol)的丙酮终止。将反应物在水性10％KHSO4/EtOAc之间分配(3x)。将有机相用饱和NaHCO3水溶液，10％NaCl水溶液洗涤，干燥(Na2SO4)并蒸发，在快速硅胶柱(二氯甲烷/MeOH 96∶4-95∶5)和沉淀(二氯甲烷/醚)后提供0.19g(68％)的标题化合物，其为白色非晶形粉末。MS：561.21(MH+，Cl).
实施例54
(S)-2-[(S)-4-(3-氯-4-三氟甲氧基-苯基氨基甲酰基)-3-甲基-2-氧代-哌嗪-1-基]-5-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-5-氧代-戊酸甲酯
Figure BPA00001545560701211
类似于在实施例30中所述的方法，(S)-5-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-2-((S)-3-甲基-2-氧代-哌嗪-1-基)-5-氧代-戊酸甲酯(中间体29)与3当量的4-甲基吗啉和1.2当量的2-氯-4-异氰酰-1-三氟甲氧基-苯(中间体17)提供67％产率的标题化合物，其为白色泡沫。MS：605.20(MH+，Cl).
实施例55
(S)-4-[(S)-4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-1-羟甲基-4-氧代-丁基]-2-甲基-3-氧代-哌嗪-1-甲酸(3-氯-4-三氟甲氧基-苯基)-酰胺
Figure BPA00001545560701221
将0.200g(0.34mmol)的(S)-2-[(S)-4-(3-氯-4-三氟甲氧基-苯基氨基甲酰基)-3-甲基-2-氧代-哌嗪-1-基]-5-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-5-氧代-戊酸甲酯(实施例54)在1.0ml THF中的溶液用0.17ml(0.34mmol)的LiBH4(2M在THF中)和0.027ml(0.68mmol)的MeOH处理(用在室温的冷却浴)。将反应物在室温搅拌2h，冷却到0℃并用0.1ml丙酮终止。将反应物用0.3ml环己烷稀释，加入0.9ml 2NNaOH水溶液，并在30min后用EtOAc提取(3x)。将有机相用10％NaCl水溶液洗涤，干燥(Na2SO4)并蒸发，在快速硅胶柱(二氯甲烷/MeOH 98∶2to 9∶1)后提供0.172g(88％)作为白色泡沫的标题化合物。MS：577.20(MH+，Cl).
实施例56
锂；(S)-2-[(S)-4-(3-氯-4-三氟甲氧基-苯基氨基甲酰基)-3-甲基-2-氧代-哌嗪-1-基]-5-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-5-氧代-戊酸酯
Figure BPA00001545560701222
将0.050g(0.10mmol)的(S)-2-[(S)-4-(3-氯-4-三氟甲氧基-苯基氨基甲酰基)-3-甲基-2-氧代-哌嗪-1-基]-5-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-5-氧代-戊酸甲酯(实施例54)在0.2ml的四氢呋喃/MeOH(1∶1)中的溶液在0℃用0.083ml(0.10mmol)的1M氢氧化锂水溶液处理，并在该温度保持2h，加温直到室温(仍旧存在痕量的起始物料)，并再次冷却以加入0.008ml(0.01mmol)的1M氢氧化锂溶液。在室温2h后，蒸发反应物，将其溶解于乙腈并蒸发(3x)，沉淀(二氯甲烷/正戊烷)以提供0.027g(54％)标题化合物，其为白色泡沫。MS：589.17(M-H-，Cl).
实施例57
(S)-4-[(S)-4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-1-羟甲基-4-氧代-丁基]-2-甲基-3-氧代-哌嗪-1-甲酸(3-氯-4-三氟甲氧基-苯基)-甲基-酰胺
Figure BPA00001545560701231
将0.02ml(0.345mmol)的碘代甲烷和0.040g(0.069mmol)(S)-4-[(S)-4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-1-羟甲基-4-氧代-丁基]-2-甲基-3-氧代-哌嗪-1-甲酸(3-氯-4-三氟甲氧基-苯基)-酰胺(实施例55)在1.5ml乙腈中的溶液冷却(0℃)并用0.023g(0.100mmol)的氧化银(I)处理。将反应混合物在室温搅拌1天，再次用0.02ml(0.345mmol)的碘代甲烷处理，并搅拌3天。将反应物在水性10％KHSO4/EtOAc之间分配(3x)。将有机相用饱和的NaHCO3水溶液，10％NaCl水溶液洗涤，干燥(Na2SO4)并蒸发以提供0.040g(88％)标题化合物，其为灰白色泡沫。MS：591.22(MH+，Cl).
实施例58和实施例59
(R)-4-(3，4-二氯-苯基)-1-[4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁基]-3-甲基-哌嗪-2-酮和(S)-4-(3，4-二氯-苯基)-1-[4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁基]-3-甲基-哌嗪-2-酮
Figure BPA00001545560701241
A)4-[[(R)-2-(3，4-二氯-苯基氨基)-丙酰]-(2，2-二甲氧基-乙基)-氨基]-丁 酸叔丁酯(62％ee)
将0.99g(4.00mmol)的4-(2，2-二甲氧基-乙基氨基)-丁酸叔丁酯(中间体30)在24ml DMF中的溶液用1.03ml(4.40mmol)的(R)-2-(3，4-二氯-苯基氨基)-丙酸(62％ee)(中间体31)，0.48ml(4.40mmol)的三乙胺处理并在0℃用2.28g(6.00mmol)的HATU进行处理。将混悬液自然加温到室温过夜，倾在10％KHSO4水溶液上，并用Et2O提取(3x)。将有机相用饱和的NaHCO3水溶液和10％NaCl水溶液洗涤，干燥(Na2SO4)并蒸发，在用快速色谱法(SiO2，二氯甲烷/Et2O97.5∶2.5-4∶1)纯化后，提供1.37g(74％)作为浅黄色粘性油的标题化合物。MS：463.17(MH+，2Cl).
B)4-[(R)-4-(3，4-二氯-苯基)-3-甲基-2-氧代-哌嗪-1-基]-丁酸(62％ee)
将0.69ml(9.00mmol)的三氟乙酸加入0.28g(0.60mmol)4-[[(R)-2-(3，4-二氯-苯基氨基)-丙酰]-(2，2-二甲氧基-乙基)-氨基]-丁酸叔丁酯(62％ee)在6ml二氯甲烷中的冷却溶液(0℃)中。30分钟后，移去冰浴，接着，在1h后，加入0.49ml(3.00mmol)的三乙基硅烷。16h后，将反应混合物冷却到0℃并用1.25ml(9.00mmol)的三乙胺处理，接着在15分钟后，将其分配在Et2O(3x)/水性10％KHSO4之间，将有机相用水性10％KHSO4和水性10％NaCl洗涤，通过Na2SO4干燥并蒸发。沉淀残余物(二氯甲烷/正戊烷)以提供0.198g(96％)的标题化合物，其为褐色粘性油。MS：345.07(MH+，2Cl).
C)(R)-4-(3，4-二氯-苯基)-1-[4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧 代-丁基]-3-甲基-哌嗪-2-酮(81％ds)
类似于在实施例15中所述的方法，4-[(R)-4-(3，4-二氯-苯基)-3-甲基-2-氧代-哌嗪-1-基]-丁酸(62％ee)和1.1当量的(S)-6-氮杂-螺[2.5]辛-4-醇；盐酸盐(中间体2)在沉淀(Et2O/正戊烷)后，提供77％产率的标题化合物，其为浅黄色泡沫。MS：454.16(MH+，2Cl).
D)(R)-4-(3，4-二氯-苯基)-1-[4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧 代-丁基]-3-甲基-哌嗪-2-酮和(S)-4-(3，4-二氯-苯基)-1-[4-((S)-4-羟基-6- 氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁基]-3-甲基-哌嗪-2-酮
通过在Reprosil Chiral NR，(40％EtOH在正庚烷中)上手性分离(R)-4-(3，4-二氯-苯基)-1-[4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁基]-3-甲基-哌嗪-2-酮(81％ds)制备标题化合物，提供64％的(R)-4-(3，4-二氯-苯基)-1-[4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁基]-3-甲基-哌嗪-2-酮(实施例58)，其为浅黄色泡沫，MS：454.16(MH+，2Cl)和14％的(S)-4-(3，4-二氯-苯基)-1-[4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁基]-3-甲基-哌嗪-2-酮(实施例59)，其为白色固体。MS：454.16(MH+，2Cl).
实施例60和实施例61
(S)-4-(3-氯-4-三氟甲基-苯基)-1-[4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁基]-3-甲基-哌嗪-2-酮和(R)-4-(3-氯-4-三氟甲基-苯基)-1-[4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁基]-3-甲基-哌嗪-2-酮
Figure BPA00001545560701251
Figure BPA00001545560701261
A)4-[[(S)-2-(3-氯-4-三氟甲基-苯基氨基)-丙酰]-(2，2-二甲氧 基-乙基)-氨基]-丁酸叔丁酯(26％ee)
类似于实施例58和实施例59A，4-(2，2-二甲氧基-乙基氨基)-丁酸叔丁酯(中间体30)和(S)-2-(3-氯-4-三氟甲基-苯基氨基)-丙酸(26％ee)(中间体32)提供73％标题化合物，其为浅黄色粘性油。MS：519.18(M+Na+，Cl).
B)4-[(S)-4-(3-氯-4-三氟甲基-苯基)-3-甲基-2-氧代-哌嗪-1-基]-丁 酸(26％ee)
类似于实施例58和实施例59B，4-[[(S)-2-(3-氯-4-三氟甲基-苯基氨基)-丙酰]-(2，2-二甲氧基-乙基)-氨基]-丁酸叔丁酯(26％ee)提供94％的标题化合物，其为浅绿色泡沫。MS：379.10(MH+，Cl).
C)(S)-4-(3-氯-4-三氟甲基-苯基)-1-[4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6- 基-4-氧代-丁基]-3-甲基-哌嗪-2-酮(63％ds)
类似于在实施例15中所述的方法，4-[(S)-4-(3-氯-4-三氟甲基-苯基)-3-甲基-2-氧代-哌嗪-1-基]-丁酸(26％ee)和1.1当量的(S)-6-氮杂-螺[2.5]辛-4-醇；盐酸盐(中间体2)在沉淀(Et2O/正戊烷)后，提供95％产率的标题化合物，其为浅黄色泡沫。MS：488.19(MH+，Cl).
D)(S)-4-(3-氯-4-三甲基-苯基)-1-[4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6- 基)-4-氧代-丁基]-3-甲基-哌嗪-2-酮和(R)-4-(3-氯-4-三氟甲基-苯 基)-1-[4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁基]-3-甲基-哌嗪 -2-酮
通过在Reprosil Chiral NR，(40％EtOH在正庚烷中)上手性分离(S)-4-(3-氯-4-三氟甲基-苯基)-1-[4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁基]-3-甲基-哌嗪-2-酮(63％ds)来制备标题化合物，提供27％的(R)-4-(3-氯-4-三氟甲基-苯基)-1-[4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁基]-3-甲基-哌嗪-2-酮(实施例61)，其为灰白色泡沫，MS：488.19(MH+，Cl)和42％的(S)-4-(3-氯-4-三氟甲基-苯基)-1-[4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁基]-3-甲基-哌嗪-2-酮(实施例60)，其为灰白色泡沫，MS：488.19(MH+，Cl)。
实施例62和实施例63
(S)-4-(4-氯-3-三氟甲氧基-苯基)-1-[4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁基]-3-甲基-哌嗪-2-酮和(R)-4-(4-氯-3-三氟甲氧基-苯基)-1-[4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁基]-3-甲基-哌嗪-2-酮
Figure BPA00001545560701271
A)4-[[(S)-2-(4-氯-3-三氟甲氧基-苯基氨基)-丙酰]-(2，2-二甲氧基-乙 基)-氨基]-丁酸叔丁酯(22％ee)
类似于实施例58和实施例59A，4-(2，2-二甲氧基-乙基氨基)-丁酸叔丁酯(中间体30)和(S)-2-(4-氯-3-三氟甲氧基-苯基氨基)-丙酸(22％ee)(中间体33)提供46％的标题化合物，其为浅黄色油。MS：513.19(MH+，Cl).
B)4-[(S)-4-(4-氯-3-三氟甲氧基-苯基)-3-甲基-2-氧代-哌嗪-1-基]-丁酸 (22％ee)
类似于实施例58和实施例59B，4-[[(S)-2-(4-氯-3-三氟甲氧基-苯基氨基)-丙酰]-(2，2-二甲氧基-乙基)-氨基]-丁酸叔丁酯(22％ee)提供98％的标题化合物，其为绿色粘性的。MS：395.09(MH+，Cl).
C)(S)-4-(4-氯-3-三氟甲氧基-苯基)-1-[4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛 -6-基)-4-氧代-丁基]-3-甲基-哌嗪-2-酮(61％ds)
类似于在实施例15中所述的方法，4-[(S)-4-(4-氯-3-三氟甲氧基-苯基)-3-甲基-2-氧代-哌嗪-1-基]-丁酸(22％ee)和1.1当量的(S)-6-氮杂-螺[2.5]辛-4-醇；盐酸盐(中间体2)在沉淀(Et2O/正戊烷)后，提供63％产率的标题化合物，其为浅黄色泡沫。MS：504.19(MH+，Cl).
D)(S)-4-(4-氯-3-三氟甲氧基-苯基)-1-[4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛 -6-基)-4-氧代-丁基]-3-甲基-哌嗪-2-酮和(R)-4-(4-氯-3-三氟甲氧基-苯 基)-1-[4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁基]-3-甲基-哌嗪 -2-酮
通过在Reprosil Chiral NR，(40％EtOH在正庚烷中)上手性分离(S)-4-(4-氯-3-三氟甲氧基-苯基)-1-[4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁基]-3-甲基-哌嗪-2-酮(61％ds)制备标题化合物，提供25％的(R)-4-(4-氯-3-三氟甲氧基-苯基)-1-[4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁基]-3-甲基-哌嗪-2-酮(实施例63)，其为白色泡沫，MS：504.19(MH+，Cl)和33％的(S)-4-(4-氯-3-三氟甲氧基-苯基)-1-[4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁基]-3-甲基-哌嗪-2-酮(实施例62)，其为白色泡沫。MS：504.19(MH+，Cl).
实施例64
(S)-4-[(E)-3-(3-氯-4-氟-苯基)-丙烯酰基]-1-[3-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-3-氧代-丙基]-3-甲基-哌嗪-2-酮
A)3-{(S)-4-[(E)-3-(3-氯-4-氟-苯基)-丙烯酰基]-3-甲基-2-氧代-哌嗪-1- 基}-丙酸
将饱和碳酸氢钠水溶液(15ml)加入(S)-4-[(E)-3-(3-氯-4-氟-苯基)-丙烯酰基]-1-(3-羟基-丙基)-3-甲基-哌嗪-2-酮(PCT国际申请WO 2009010429A2；5.70g，16.1mmol)，溴化钾(191mg，1.61mmol)，和2，2，6，6-四甲基哌啶-1-氧基(25mg，0.16mmol)在二氯甲烷(300mL)中的溶液。在0℃，逐份加入次氯酸钠溶液(10％在水中，9.6ml，16mmol)，并通过薄层色谱法监测氧化过程。在所有的原料反应后，用碳酸氢钠洗涤反应混合物，并将水层用二氯甲烷提取2次。合并有机相，通过硫酸镁干燥，过滤，并蒸发，由此提供3-{(S)-4-[(E)-3-(3-氯-4-氟-苯基)-丙烯酰基]-3-甲基-2-氧代-哌嗪-1-基}-丙醛(5.15g，91％)。将水层用1M盐酸水溶液酸化到pH 3，用二氯甲烷提取。将有机层通过硫酸镁干燥，过滤，并蒸发以提供标题化合物(254mg，4％)。无色胶，MS：367.3(M-H，Cl)-。
B)(S)-4-[(E)-3-(3-氯-4-氟-苯基)-丙烯酰基]-1-[3-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺 [2.5]辛-6-基)-3-氧代-丙基]-3-甲基-哌嗪-2-酮
在室温，向3-{(S)-4-[(E)-3-(3-氯-4-氟-苯基)-丙烯酰基]-3-甲基-2-氧代-哌嗪-1-基}-丙酸(50mg，0.14mmol)，(S)-6-氮杂-螺[2.5]辛-4-醇盐酸盐(中间体2；24mg，0.15mmol)和4-甲基吗啉(41mg，0.41mmol)在N，N-二甲基甲酰胺(1mL)中的溶液中加入O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N，N，N’，N’-四甲基脲鎓六氟磷酸盐(77mg，0.20mmol)，接着，在16h后，将反应混合物分配在水和乙酸乙酯之间。将有机层用盐水洗涤，通过硫酸镁干燥，过滤，并蒸发。色谱法(SiO2；二氯甲烷→二氯甲烷/甲醇/25％氨水溶液90∶10∶0.25)产生标题化合物(37mg，54％)。白色固体，MS：478.2(M+H，Cl)+。
实施例65
(R)-1-(3-氯-4-三氟甲基-苯基)-4-[4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁基]-2-甲基-1，2，3，4-四氢-[1，4]二氮杂
Figure BPA00001545560701291
-5-酮(61％ds)
Figure BPA00001545560701292
类似于在实施例15中所述的方法，4-[(R)-4-(3-氯-4-三氟甲基-苯基)-3-甲基-7-氧代-2，3，4，7-四氢-[1，4]二氮杂
Figure BPA00001545560701293
-1-基]-丁酸(22％ee)(中间体34)和1.1当量的(S)-6-氮杂-螺[2.5]辛-4-醇；盐酸盐(中间体2)在通过快速色谱法(50g胺-二氧化硅，乙酸乙酯/正庚烷1∶1，4∶1，9∶1，100％，乙酸乙酯/乙醇99∶1-95∶5)纯化后，提供69％的标题化合物，其为灰白色泡沫。MS：500.19(MH+，Cl).
实施例66
(R)-1-(3-氯-4-三氟甲基-苯基)-4-[4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁基]-2-甲基-[1，4]二氮杂
Figure BPA00001545560701301
-5-酮(61％ds)
Figure BPA00001545560701302
将0.066g(0.1mmol)的(R)-1-(3-氯-4-三氟甲基-苯基)-4-[4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁基]-2-甲基-1，2，3，4-四氢-[1，4]二氮杂-5-酮(61％ds)(实施例65)在2ml MeOH中的溶液用0.007g的PtO2处理，并在H2-气压上搅拌2天。过滤和蒸发后，再次用0.007g的PtO2/H2，在2ml的MeOH和0.007ml(0.1mmol)的乙酸中氢化粗制化合物过夜。过滤和蒸发后，用甲苯再次蒸发残余物(3次)并在真空下去除溶剂以提供0.057g(86％)的作为白色泡沫的标题化合物。MS：502.21(MH+，Cl).
实施例67-94
关于实施例67-94的一般方法
向0.04g(0.1mmol)的3-{4-[(E)-3-(3，4-二氯-苯基)-丙烯酰基]-7-氧代-[1，4]二氮杂
Figure BPA00001545560701304
-1-基}-丙酸(中间体5)和0.04ml的三乙胺(0.3mmol)在0.8ml DMF中的溶液，加入0.05g(0.12mmol)的HATU。摇动混合物10分钟，之后加入适合的胺(0.12mmol)，将混合物摇动过夜。接着，通过制备HPLC直接纯化混合物。
表1.
Figure BPA00001545560701305
Figure BPA00001545560701311
Figure BPA00001545560701331
Figure BPA00001545560701341
Figure BPA00001545560701351
Figure BPA00001545560701361
实施例95-100
关于实施例95-100的一般方法
向0.04g(0.1mmol)的{4-[(E)-3-(3，4-二氯-苯基)-丙烯酰基]-7-氧代-[1，4]二氮杂
Figure BPA00001545560701372
-1-基}-乙酸(中间体36)和0.04ml的三乙胺(0.3mmol)在0.8ml DMF中的溶液加入0.05g(0.12mmol)的HATU。将混合物摇动10分钟，之后加入适合的胺(0.12mmol)，将混合物摇动过夜。接着，将混合物通过制备HPLC直接纯化。
表2.
Figure BPA00001545560701373
Figure BPA00001545560701381
实施例101-104
关于实施例101-104的一般方法
向0.04g(0.1mmol)的3-{(R)-4-[(E)-3-(3-氯-苯基)-丙烯酰基]-3-甲基-7-氧代-[1，4]二氮杂
Figure BPA00001545560701391
-1-基}-丙酸(中间体38)和0.04ml的三乙胺(0.3mmol)在0.8ml DMF中的溶液加入0.05g(0.12mmol)的HATU。将混合物摇动10分钟，之后加入适合的胺(0.12mmol)，并将混合物摇动过夜。接着，通过制备HPLC直接纯化该混合物。
表3.
Figure BPA00001545560701392
实施例105-115
关于实施例105-115的一般方法
向0.04g(0.1mmol)的4-[(S)-4-(3-氯-苯基氨基甲酰基)-3-甲基-2-氧代-哌嗪-1-基]-丁酸(中间体19)和0.04ml的三乙胺(0.3mmol)在0.8ml DMF中的溶液加入0.05g(0.12mmol)的HATU。将混合物摇动10分钟，之后加入适合的胺(0.12mmol)，将混合物摇动过夜。接着，通过制备HPLC直接纯化该混合物。
表4.
Figure BPA00001545560701402
Figure BPA00001545560701411
Figure BPA00001545560701421
实施例116-119
关于实施例116-119的一般方法
将0.03g(0.1mmol)的4-[4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁基]-[1，4]二氮杂
Figure BPA00001545560701422
-5-酮(中间体39)在0.8ml DMF中的溶液中加入适合的异氰酸酯(0.1mmol)，并将混合物摇动1h。通过制备HPLC将该混合物直接纯化。
表5.
Figure BPA00001545560701423
Figure BPA00001545560701431
实施例120
(2RS，5S)-4-(3，4-二氯-苯基氨基甲酰基)-1-[4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁基]-5-甲基-6-氧代-哌嗪-2-甲酸(60％ds)
Figure BPA00001545560701432
A)4-[({[苄氧基羰基-((S)-1-甲氧基羰基-乙基)-氨基]-甲基}-氰基-甲 基)-氨基]-丁酸叔丁酯
向在15ml CH2Cl2中的2.0g(7mmol)的(S)-2-[苄氧基羰基-(2-氧代-乙基)-氨基]-丙酸甲酯(中间体12C)加入1.4g(7mmol)的4-氨基丁酸叔丁酯盐酸盐，0.7g(2mmol)的ZnI2并最终加入1ml(8mmol)三甲基甲硅烷基氰化物。将反应物搅拌3h，随后将其用饱和的NaHCO3水溶液洗涤，干燥(Na2SO4)并蒸发，在快速硅胶柱(正庚烷/EtOAc 4∶6-1∶1)后，提供31％产率的标题化合物，其为无色胶。MS：448.3(MH+).B)(S)-4-(3-叔丁氧基羰基-丙基)-5-氰基-2-甲基-3-氧代-哌嗪-1-甲酸苄 酯
向在2ml THF中的1.0g(2mmol)的4-[({[苄氧基羰基-((S)-1-甲氧基羰基-乙基)-氨基]-甲基}-氰基-甲基)-氨基]-丁酸叔丁酯加入0.1g(2mmol)在0.5ml水中的一水合氢氧化锂。将反应物搅拌16h，随后将其蒸发到干燥。将残余物再次溶解于2ml DMF，并加入0.5g(2mmol)的EDCI和0.3g(2mmol)HOBT，并将混合物搅拌2h。接着，蒸发反应物，将残余物再次溶解于EtOAc，用水、盐水洗涤，干燥(Na2SO4)并浓缩，在快速硅胶柱(正庚烷/EtOAc 4∶6-1∶1)后提供78％产率的标题化合物，其为无色胶。MS：416.3(MH+).
C)(S)-4-(3-叔丁氧基羰基-丙基)-6-甲基-5-氧代-哌嗪-1，3-二甲酸1-苄 酯3-甲酯
向在10ml DMSO中的0.63g(2mmol)的(S)-4-(3-叔丁氧基羰基-丙基)-5-氰基-2-甲基-3-氧代-哌嗪-1-甲酸苄酯中加入0.21g(2mmol)的碳酸钾，随后加入0.6ml(6mmol)的35％过氧化氢水溶液。将混合物加热直到反应物开始鼓泡，接着终止加热。过滤反应物，用水稀释，并用叔丁基甲醚重复提取。干燥合并的有机物洗涤物(Na2SO4)并浓缩，以提供粗制羧酰胺。接着，将其溶解于15ml的乙酸酐/乙酸(3∶2)，冷却到0℃并加入0.76g(11mmol)的亚硝酸钠，将反应物搅拌16h。接着，将反应物浓缩到干燥，在CH2Cl2和饱和的水性NaHCO3之间分配，收集有机相，干燥(Na2SO4)并蒸发。将残余物溶于10ml THF，加入在0.5ml水中的0.1g 82mmol一水合氢氧化锂，并将反应物搅拌16h，随后加入Amberlite IR120树脂，直到pH是5，将反应物过滤并浓缩。将残余物溶于5ml的MeOH/CH2Cl2(1∶1)，并加入在二乙醚中的0.83ml(2mmol)的2M三甲基甲硅烷基二偶氮甲烷(剧烈鼓泡)，将反应物搅拌15分钟。浓缩并通过快速硅胶柱(正庚烷/EtOAc 4∶6到1∶1)纯化，提供30％产率的标题化合物，其为浅黄色胶。MS：449.3(MH+).
D)(S)-4-[4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁基]-6-甲基-5- 氧代-哌嗪-1，3-二甲酸1-苄酯3-甲酯
向在5ml THF中的0.15g(0.3mmol)的(S)-4-(3-叔丁氧基羰基-丙基)-6-甲基-5-氧代-哌嗪-1，3-二甲酸1-苄酯3-甲酯中加入1.5ml的37％盐酸。将反应物搅拌2h，随后将其蒸发到干燥。将残余物再次溶解于2m的DMF，并加入0.14g(0.4mmol)的HATU和0.06g(0.4mmol)的(S)-6-氮杂-螺[2.5]辛-4-醇盐酸盐(中间体2)，随后加入0.2ml(1.2mmol)的三乙胺。将反应物搅拌1h，随后蒸发溶剂，将残余物再次溶解于EtOAc，用水、盐水洗涤，干燥(Na2SO4)并浓缩，在快速硅胶柱(CH2Cl2/MeOH 95∶5)后提供定量产率的标题化合物，其为无色泡沫。MS：502.4(MH+).
E)(S)-4-(3，4-二氯-苯基氨基甲酰基)-1-[4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛 -6-基)-4-氧代-丁基]-5-甲基-6-氧代-哌嗪-2-甲酸甲酯
向在5ml MeOH中的0.17g(0.33mmol)的(S)-4-[4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁基]-6-甲基-5-氧代-哌嗪-1，3-二甲酸1-苄酯3-甲酯加入0.05g的10％披钯活性炭，将反应物在1氢气压下(气囊)搅拌1h。接着，将混合物通过Hyflo过滤并浓缩。将残余物再次溶解于2ml的CH2Cl2，并加入0.06g(0.34mmol)的3，4-二氯苯基异氰酸酯。将反应物搅拌0.5h，随后将其进行浓缩，在快速硅胶柱(EtOAc/MeOH 1∶0-9∶1)后提供77％产率的标题化合物，其为无色胶。MS：555.1(MH+，2Cl).
F)(2RS，5S)-4-(3，4-二氯-苯基氨基甲酰基)-1-[4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺 [2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁基]-5-甲基-6-氧代-哌嗪-2-甲酸(60％ds)
向在2ml MeOH中的0.15g(0.26mmol)的(S)-4-(3，4-二氯-苯基氨基甲酰基)-1-[4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁基]-5-甲基-6-氧代-哌嗪-2-甲酸甲酯中加入0.01g(0.26mmol)的一水合氢氧化锂。将反应物搅拌16h，随后加入Amberlite IR120树脂，直到pH是5，将反应物过滤并浓缩以提供73％产率的标题化合物，非对映异构体的6∶4混合物，其为无色胶。MS：541.3(MH+，2Cl).
实施例121
(3RS，6S)-4-[4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁基]-6-甲基-5-氧代-哌嗪-1，3-二甲酸3-酰胺1-[(3，4-二氯-苯基)-酰胺](50％ds)
Figure BPA00001545560701461
向在1ml DMF中的0.05g(0.1mmol)(S)-4-(3，4-二氯-苯基氨基甲酰基)-1-[4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁基]-5-甲基-6-氧代-哌嗪-2-甲酸中加入0.04g(0.1mmol)HATU和0.05ml的三乙胺，随后加入0.02g(0.03mmol)的碳酸铵。将混合物搅拌1h，随后浓缩反应物，将残余物再次溶解于CH2Cl2中，用饱和CH2Cl2水溶液洗涤，干燥(Na2SO4)并浓缩，在快速硅胶柱(CH2Cl2/MeOH 95∶5)后，提供89％产率的标题化合物，其为无色固体。MS：540.3(MH+，2Cl).
实施例122
1-(3-氯-4-三氟甲氧基-苯基)-4-[4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁基]-[1，4]二氮杂
Figure BPA00001545560701462
-5-酮
Figure BPA00001545560701463
类似于关于实施例15所述的方法，4-[4-(3-氯-4-三氟甲氧基-苯基)-7-氧代-[1，4]二氮杂
Figure BPA00001545560701464
-1-基]-丁酸(中间体40)和(S)-6-氮杂-螺[2.5]辛-4-醇；盐酸盐(中间体2)提供54％产率的作为浅黄色油的标题化合物。MS：504.19(MH+，Cl).
实施例123
(S)-2-[4-(3-氯-4-三氟甲基-苯基)-7-氧代-[1，4]二氮杂
Figure BPA00001545560701465
-1-基]-5-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-5-氧代-戊酸甲酯
Figure BPA00001545560701471
A)3-(3-氯-4-三氟甲基-苯基氨基)-丙酸叔丁酯
类似于关于中间体31所述的方法，4-溴-2-氯-1-三氟甲基-苯和3-溴丙酸叔丁酯提供53％产率的标题化合物，其为黄色油。MS：323(M+，Cl).
B)3-[(3-氯-4-三氟甲基-苯基)-甲氧基羰基甲基-氨基]-丙酸叔丁酯
类似于关于中间体40B所述的方法，3-(3-氯-4-三氟甲基-苯基氨基)-丙酸叔丁酯和溴代丙酸甲酯提供34％产率的作为黄色油的标题化合物。MS：396.12(MH+，Cl).
C)3-[(3-氯-4-三氟甲基-苯基)-(2-羟基-乙基)-氨基]-丙酸叔丁酯
类似于关于中间体40C所述的方法，3-[(3-氯-4-三氟甲基-苯基)-甲氧基羰基甲基-氨基]-丙酸叔丁酯和LiBH4(2M在THF中)/MeOH提供84％产率的标题化合物，其为黄色油。MS：368.12(MH+，Cl).
D)3-[(3-氯-4-三氟甲基-苯基)-(2-氧代-乙基)-氨基]-丙酸叔丁酯
类似于关于中间体40D所述的方法，将3-[(3-氯-4-三氟甲基-苯基)-(2-羟基-乙基)-氨基]-丙酸叔丁酯氧化为定量产率的标题化合物，其为黄色油。MS：365(M+，Cl).
E)(S)-2-{2-[(2-叔丁氧基羰基-乙基)-(3-氯-4-三氟甲基-苯基)-氨基]-乙 基氨基}-5-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-5-氧代-戊酸甲酯
类似于关于实施例14C所述的方法，3-[(3-氯-4-三氟甲基-苯基)-(2-氧代-乙基)-氨基]-丙酸叔丁酯和(S)-2-氨基-5-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-5-氧代-戊酸甲酯；与HCl的化合物(中间体41)提供52％产率的标题化合物，其为浅黄色泡沫。MS：620.27(MH+，Cl).
F)(S)-2-{2-[(2-羧基-乙基)-(3-氯-4-三氟甲基-苯基)-氨基]-乙基氨 基}-5-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-5-氧代-戊酸甲酯二盐酸盐
冷却(10℃)0.47g(0.8mmol)的(S)-2-{2-[(2-叔丁氧基羰基-乙基)-(3-氯-4-三氟甲基-苯基)-氨基]-乙基氨基}-5-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-5-氧代-戊酸甲酯在2.2ml二烷中的溶液，用1.9ml (7.6mmol)HCl溶液(4M在二
Figure BPA00001545560701482
烷中)，2滴水处理，并在室温搅拌22h。蒸发溶液，将其悬浮在乙腈中并蒸发(3x)以产生0.47g(92％)的标题化合物，其为浅黄色泡沫。MS(LC/MS)：564(MH+，Cl).
Figure BPA00001545560701483
基]-5-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基-5-氧代-戊酸甲酯
类似于关于中间体40G所述的方法，将(S)-2-{2-[(2-羧基-乙基)-(3-氯-4-三氟甲基-苯基)-氨基]-乙基氨基}-5-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-5-氧代-戊酸甲酯二盐酸盐环化为27％产率的标题化合物，其为灰白色固体。MS：546.20(MH+，Cl).
实施例124
1-(3-氯-4-三氟甲基-苯基)-4-[(S)-4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-1-羟甲基-4-氧代-丁基]-[1，4]二氮杂
Figure BPA00001545560701484
-5-酮
类似于关于中间体40C所述的方法，(S)-2-[4-(3-氯-4-三氟甲基-苯基)-7-氧代-[1，4]二氮杂
Figure BPA00001545560701486
-1-基]-5-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-5-氧代-戊酸甲酯(实施例123)和LiBH4(2M在THF中)/MeOH提供62％产率的标题化合物，其为黄色油。MS：518.20(MH+，Cl).
实施例125
(R)-1-(4-氯-3-三氟甲基-苯基)-4-[4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁基]-2-甲基-1，2，3，4-四氢-[1，4]二氮杂
Figure BPA00001545560701487
-5-酮(73％ds)
类似于关于实施例15所述的方法，4-[(R)-4-(4-氯-3-三氟甲基-苯基)-3-甲基-7-氧代-2，3，4，7-四氢-[1，4]二氮杂
Figure BPA00001545560701492
-1-基]-丁酸(46％ee)(中间体35)和(S)-6-氮杂-螺[2.5]辛-4-醇；盐酸盐(中间体2)提供69％产率的标题化合物，其为浅黄色油。MS：544.19(M+HCOO-，Cl).
实施例126
(R)-1-(4-氯-3-三氟甲基-苯基)-4-[4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁基]-2-甲基-[1，4]二氮杂
Figure BPA00001545560701493
-5-酮(73％ds)
将0.049g(0.1mmol)的(R)-1-(4-氯-3-三氟甲基-苯基)-4-[4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁基]-2-甲基-1，2，3，4-四氢-[1，4]二氮杂
Figure BPA00001545560701495
-5-酮(73％ds)和0.006ml(0.1mmol)的乙酸在2ml MeOH中的溶液用0.005g的PtO2处理，并在H2-气压下搅拌1天。过滤和蒸发后，将残余物用甲苯再次蒸发(3次)，在真空下去除溶剂以提供0.048g(98％)作为白色泡沫的标题化合物。MS：502.21(MH+，Cl).
实施例127
(S)-2-[(R，S)-4-(3，4-双-三氟甲基-苯基)-3-甲基-7-氧代-[1，4]二氮杂-1-基]-5-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-5-氧代-戊酸甲酯
Figure BPA00001545560701501
类似于关于实施例15所述的方法，(S)-2-[(R，S)-4-(3，4-双-三氟甲基-苯基)-3-甲基-7-氧代-[1，4]二氮杂
Figure BPA00001545560701502
-1-基]-戊二酸1-甲酯(中间体42)和(S)-6-氮杂-螺[2.5]辛-4-醇；盐酸盐(中间体2)提供73％产率作为灰白色泡沫的标题化合物。MS：594.24(MH+).
实施例128和129
(R)-1-(3，4-双-三氟甲基-苯基)-4-[(S)-4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-1-羟甲基-4-氧代-丁基]-2-甲基-[1，4]二氮杂
Figure BPA00001545560701503
-5-酮和(S)-4-[4-((S)-3-羟基-4，4-二甲基-哌啶-1-基)-4-氧代-丁基]-2-甲基-3-氧代-哌嗪-1-甲酸(3，4-二氯-苯基)-酰胺
Figure BPA00001545560701504
类似于在实施例53中所述的方法，(S)-2-[(R，S)-4-(3，4-双-三氟甲基-苯基)-3-甲基-7-氧代-[1，4]二氮杂
Figure BPA00001545560701505
-1-基]-5-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-5-氧代-戊酸甲酯和LiBH4(2M在THF中)/MeOH在快速硅胶柱(二氯甲烷/甲醇95∶5)后提供：47％的(R)-1-(3，4-双-三氟甲基-苯基)-4-[(S)-4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-1-羟甲基-4-氧代-丁基]-2-甲基-[1，4]二氮杂
Figure BPA00001545560701511
-5-酮(实施例128)，其为白色泡沫，MS：566.25(MH+)，Rf 0.18(二氯甲烷/甲醇9∶1)和29％的(S)-1-(3，4-双-三氟甲基-苯基)-4-[(S)-4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-1-羟甲基-4-氧代-丁基]-2-甲基-[1，4]二氮杂
Figure BPA00001545560701512
-5-酮(实施例129)，其为白色固体，MS：566.25(MH+)，Rf0.08(二氯甲烷/甲醇9∶1).
实施例130
(S)-4-(3，4-双-三氟甲基-苯基)-1-[4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁基]-3-甲基-哌嗪-2-酮
Figure BPA00001545560701513
类似于关于实施例15所述的方法，4-[(S)-4-(3，4-双-三氟甲基-苯基)-3-甲基-2-氧代-哌嗪-1-基]-丁酸(中间体43)和(S)-6-氮杂-螺[2.5]辛-4-醇；盐酸盐(中间体2)提供39％产率的标题化合物，其为灰白色泡沫(80％非对映立体选择性，可能由合成中间体43过程中的严格微波条件导致)。MS：522.22(MH+).
实施例131
(S)-4-(3-氯-4-三氟甲基-苯基)-1-[(S)-2-羟基-4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁基]-3-甲基-哌嗪-2-酮(80％ds)
Figure BPA00001545560701521
类似于实施例15，(S)-4-[(S)-4-(3-氯-4-三氟甲基-苯基)-3-甲基-2-氧代-哌嗪-1-基]-3-羟基-丁酸(61％ds)(中间体44)和1.1当量的(S)-6-氮杂-螺[2.5]辛-4-醇；盐酸盐(中间体2)在快速色谱法后(SiO2，二氯甲烷/甲醇2％)和沉淀(二氯甲烷/正戊烷)后，提供61％产率(80％ds)的标题化合物，其为白色粉末。MS：504.19(MH+，1Cl).
实施例132
(S)-4-(3-氯-4-三氟甲基-苯基)-1-[(S)-4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-1-甲氧基甲基-4-氧代-丁基]-3-甲基-哌嗪-2-酮(90％ds)
Figure BPA00001545560701522
类似于中间体15，(S)-4-[(S)-4-(3-氯-4-三氟甲基-苯基)-3-甲基-2-氧代-哌嗪-1-基]-5-甲氧基-戊酸(61％ds)(中间体45)和1.1当量的(S)-6-氮杂-螺[2.5]辛-4-醇；盐酸盐(中间体2)在快速色谱法后(SiO2，正庚烷/异丙醇1∶1)提供30％产率(90％ds)的标题化合物，其为灰白色蜡状固体。MS：532.22(MH+，1Cl).
实施例133
(S)-4-[(R，S)-3-羟基-4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁基]-2-甲基-3-氧代-哌嗪-1-甲酸(3-氯-4-三氟甲基-苯基)-酰胺
Figure BPA00001545560701531
将0.079g(0.2mmol)的(S)-1-[(R，S)-3-羟基-4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁基]-3-甲基-哌嗪-2-酮(中间体46)和0.080ml(0.7mmol)的4-甲基吗啉在1.25ml二氯甲烷中的溶液在室温用在1.25ml二氯甲烷中的0.065g(0.3mmol)的2-氯-4-异氰酰-1-三氟甲基-苯(中间体16)进行处理。1h后，将反应物用水性10％KHSO4/EtOAc提取(3×)。将有机相用水性饱和的NaHCO3，10％NaCl洗涤，并通过Na2SO4干燥，在快速色谱法(SiO2，二氯甲烷/甲醇4％)后产生0.087g(66％)作为灰白色泡沫的标题化合物。MS：547.19(MH+，lCl).
实施例134
(S)-4-[(S)-3-羟基-4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁基]-2-甲基-3-氧代-哌嗪-1-甲酸(3-氯-4-三氟甲基-苯基)-酰胺
Figure BPA00001545560701532
类似于在实施例133中所述的方法，(S)-1-[(S)-3-羟基-4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁基]-3-甲基-哌嗪-2-酮；HCl(中间体47)和1.2当量的2-氯-4-异氰酰-1-三氟甲基-苯(中间体16)提供74％产率的标题化合物，其为白色粉末。MS：547.2(MH+，1Cl).
实施例135
(S)-4-[(R，S)-3-羟基-4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁基]-2-甲基-3-氧代-哌嗪-1-甲酸(3，4-双-三氟甲基-苯基)-酰胺
Figure BPA00001545560701541
类似于在实施例133中所述的方法，(S)-1-[(R，S)-3-羟基-4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁基]-3-甲基-哌嗪-2-酮(中间体46)和1.2当量的4-异氰酰-1，2-双-三氟甲基-苯(中间体26)提供90％产率的标题化合物，其为灰白色粉末。MS：581.22(MH+).
实施例136
(S)-4-[(R，S)-3-氟-4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁基]-2-甲基-3-氧代-哌嗪-1-甲酸(3-氯-4-三氟甲基-苯基)-酰胺
Figure BPA00001545560701542
类似于在实施例133中所述的方法，(S)-1-[(R，S)-3-氟-4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁基]-3-甲基-哌嗪-2-酮；HCl(中间体48)和1.2当量的2-氯-4-异氰酰-1-三氟甲基-苯(中间体16)提供57％产率的标题化合物，其为白色粉末。MS：549.19(MH+，1Cl).
实施例137和138
(S)-4-[(R或S)-3-氟-4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁基]-2-甲基-3-氧代-哌嗪-1-甲酸(3-氯-4-三氟甲基-苯基)-酰胺和(S)-4-[(S或R)-3-氟-4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁基]-2-甲基-3-氧代-哌嗪-1-甲酸(3-氯-4-三氟甲基-苯基)-酰胺
Figure BPA00001545560701551
通过在Reprosil Chiral NR，(40％异丙醇在正庚烷中)上手性分离((S)-4-[(R，S)-3-氟-4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁基]-2-甲基-3-氧代-哌嗪-1-甲酸(3-氯-4-三氟甲基-苯基)-酰胺(实施例136)制备标题化合物，提供两种非对映异构体：33％(7.9％关于合成和分离计算)的(S)-4-[(R或S)-3-氟-4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁基]-2-甲基-3-氧代-哌嗪-1-甲酸(3-氯-4-三氟甲基-苯基)-酰胺(实施例137)，其为白色粉末，MS：549.19(MH+，1Cl)和37％(8.4％关于合成和分离计算)的(S)-4-[(S或R)-3-氟-4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁基]-2-甲基-3-氧代-哌嗪-1-甲酸(3-氯-4-三氟甲基-苯基)-酰胺(实施例138)，其为白色粉末，MS：549.19(MH+，1Cl).
实施例139
(S)-4-[(S)-4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-1-甲氧基甲基-4-氧代-丁基]-2-甲基-3-氧代-哌嗪-1-甲酸(3-氯-4-三氟甲基-苯基)-酰胺
Figure BPA00001545560701552
类似于在实施例133中所述的方法，(S)-1-[(S)-4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-1-甲氧基甲基-4-氧代-丁基]-3-甲基-哌嗪-2-酮；HCl(中间体49)和1.2当量的2-氯-4-异氰酰-1-三氟甲基-苯(中间体16)提供74％产率的标题化合物，其为白色粉末。MS：575.23(MH+，1Cl).
实施例140
(S)-2-[(S)-4-(3-氯-4-三氟甲基-苯基氨基甲酰基)-3-甲基-2-氧代-哌嗪-1-基]-5-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-5-氧代-戊酸
Figure BPA00001545560701561
类似于中间体5C，(S)-2-[(S)-4-(3-氯-4-三氟甲基-苯基氨基甲酰基)-3-甲基-2-氧代-哌嗪-1-基]-5-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-5-氧代-戊酸甲酯(实施例52)与在THF/MeOH中的1.1当量的1M氢氧化锂水溶液在加温直到室温过夜后，提供定量的标题化合物，其为白色固体。MS：575.2(MH+，1Cl).
实施例141
(S)-4-[(S)-1-氨基甲酰基-4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁基]-2-甲基-3-氧代-哌嗪-1-甲酸(3-氯-4-三氟甲基-苯基)-酰胺(80％ds，可能的(S)-1-氨基甲酰基和(R)-1-氨基甲酰基)
Figure BPA00001545560701562
将0.068g(0.10mmol)的(S)-2-[(S)-4-(3-氯-4-三氟甲基-苯基氨基甲酰基)-3-甲基-2-氧代-哌嗪-1-基]-5-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-5-氧代-戊酸(实施例140)在1ml DMF中的溶液在0℃用0.033ml(0.20mmol)的三乙胺和0.049g(0.11mmol)的HATU处理。1h后，加入0.009g(0.10mmol)的碳酸氢铵，接着，将混悬液自然加温到室温过夜，倾在10％KHSO4水溶液上并用EtOAc提取(3x)。将有机相用饱和的NaHCO3水溶液和10％NaCl水溶液洗涤，干燥(Na2SO4)并蒸发，用快速色谱法(SiO2，二氯甲烷/MeOH 95∶5)纯化和沉淀(二氯甲烷/正戊烷)后，提供0.031g(46％)标题化合物，其为白色固体(80％ds，1H-NMR在d6-DMSO中，在120℃)。MS：574.20(MH+，Cl).
实施例142
(S)-4-[(S)-4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-1-甲基氨基甲酰基-4-氧代-丁基]-2-甲基-3-氧代-哌嗪-1-甲酸(3-氯-4-三氟甲基-苯基)-酰胺(95.5％ds)
Figure BPA00001545560701571
类似于实施例141，(S)-2-[(S)-4-(3-氯-4-三氟甲基-苯基氨基甲酰基)-3-甲基-2-氧代-哌嗪-1-基]-5-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-5-氧代-戊酸(实施例140)在用HATU和1.5当量的甲胺(8M在乙醇中)预先激活5分钟后，提供53％产率的标题化合物，其为灰白色固体(95.5％ds，reprosil chiral-NR，正庚烷∶乙醇3∶2)。MS：588.22(MH+，1Cl).
实施例143
(S)-2-[(S)-4-(3，4-双-三氟甲基-苯基氨基甲酰基)-3-甲基-2-氧代-哌嗪-1-基]-5-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-5-氧代-戊酸甲酯
Figure BPA00001545560701572
类似于在实施例133中所述的方法，(S)-5-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-2-((S)-3-甲基-2-氧代-哌嗪-1-基)-5-氧代-戊酸甲酯；盐酸盐(中间体29)和1.3当量的4-异氰酰-1，2-双-三氟甲基-苯(中间体26)提供89％产率的标题化合物，其为非晶形白色固体。MS：623.22(MH+).
实施例144
(S)-4-[(S)-4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-1-羟甲基-4-氧代-丁基]-2-甲基-3-氧代-哌嗪-1-甲酸(3，4-双-三氟甲基-苯基)-酰胺
Figure BPA00001545560701581
类似于在实施例53中所述的方法，(S)-2-[(S)-4-(3，4-双-三氟甲基-苯基氨基甲酰基)-3-甲基-2-氧代-哌嗪-1-基]-5-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-5-氧代-戊酸甲酯(实施例143)和LiBH4(2M在THF中)/MeOH提供79％产率的标题化合物，其为非晶形白色固体。MS：595.23(MH+).
实施例145
(R)-2-[(S)-4-(3-氯-4-三氟甲基-苯基氨基甲酰基)-3-甲基-2-氧代-哌嗪-1-基]-5-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-5-氧代-戊酸甲酯
Figure BPA00001545560701582
类似于在实施例133中所述的方法，(R)-5-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-2-((S)-3-甲基-2-氧代-哌嗪-1-基)-5-氧代-戊酸甲酯；盐酸盐(中间体50)和1.2当量的2-氯-4-异氰酰-1-三氟甲基-苯(中间体16)提供85％产率的标题化合物，其为白色非晶形固体。MS：589.20(MH+，Cl).
实施例146
(S)-4-[(R)-4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-1-羟甲基-4-氧代-丁基]-2-甲基-3-氧代-哌嗪-1-甲酸(3-氯-4-三氟甲基-苯基)-酰胺
Figure BPA00001545560701591
类似于在实施例53中所述的方法，(R)-2-[(S)-4-(3-氯-4-三氟甲基-苯基氨基甲酰基)-3-甲基-2-氧代-哌嗪-1-基]-5-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-5-氧代-戊酸甲酯(实施例145)和LiBH4(2M在THF中)/MeOH提供66％产率的标题化合物，其为非晶形白色固体。MS：561.20(MH+，1Cl).
实施例147
(3S，6S)-N1-(3-氯-4-(三氟甲基)苯基)-4-(4-((S)-4-羟基-6-氮杂螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代丁基)-6-甲基-5-氧代哌嗪-1，3-二甲酰胺
A](2S，5RS)-4-(3-叔丁氧基羰基-丙基)-5-氨基甲酰基-2-甲基-3- 氧代-哌嗪-1-甲酸苄酯
如在实施例120的制备(步骤C)的第一步骤中所述制备标题化合物，提供无色胶。MS：434.30(MH+)
B](2S，5R)-5-氨基甲酰基-4-[4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6- 基)-4-氧代-丁基]-2-甲基-3-氧代-哌嗪-1-甲酸苄酯和(2S，5S)-5-氨基 甲酰基-4-[4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁基]-2-甲 基-3-氧代-哌嗪-1-甲酸苄酯
类似于在实施例120步骤D中所述的方法，(2S，5RS)-4-(3-叔丁氧基羰基-丙基)-5-氨基甲酰基-2-甲基-3-氧代-哌嗪-1-甲酸苄酯首先用HCl水解，接着与(S)-6-氮杂-螺[2.5]辛-4-醇盐酸盐(中间体2)偶联。可以通过快速柱色谱法(SiO2，EtOAc/MeOH 1∶0-9∶1)分离两种非对映异构体，首先提供22％产率作为非晶形白色固体的(2S，5R)-5-氨基甲酰基-4-[4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁基]-2-甲基-3-氧代-哌嗪-1-甲酸苄酯，MS：487.30(MH+)，接着提供20％产率的(2S，5S)-5-氨基甲酰基-4-[4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁基]-2-甲基-3-氧代-哌嗪-1-甲酸苄酯，其为无色泡沫，MS：487.30(MH+).
C](2S，5S)-1-[4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁 基]-5-甲基-6-氧代-哌嗪-2-甲酸酰胺
类似于在实施例120步骤E的第一部分中所述的方法，将(2S，5S)-5-氨基甲酰基-4-[4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁基]-2-甲基-3-氧代-哌嗪-1-甲酸苄酯用10％披钯活性炭进行处理，并将反应物在1氢气气压下搅拌，提供定量产率的标题化合物，其为无色泡沫。MS：353.4(MH+).
D](3S，6S)-N1-(3-氯-4-(三氟甲基)苯基)-4-(4-((S)-4-羟基-6-氮杂螺 [2.5]辛-6-基)-4-氧代丁基)-6-甲基-5-氧代哌嗪-1，3-二甲酰胺
类似于在实施例120步骤E的第二部分中所述的方法，使(2S，5S)-1-[4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁基]-5-甲基-6-氧代-哌嗪-2-甲酸酰胺与2-氯-4-异氰酰-1-三氟甲基-苯(中间体16)反应以提供88％产率的标题化合物，其为无色固体。MS：574.3(MH+，1Cl).
实施例148
(3R，6S)-N1-(3-氯-4-(三氟甲基)苯基)-4-(4-((S)-4-羟基-6-氮杂螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代丁基)-6-甲基-5-氧代哌嗪-1，3-二甲酰胺
Figure BPA00001545560701611
类似于在实施例120步骤E中所述的方法，首先使用10％披钯活性炭对(2S，5R)-5-氨基甲酰基-4-[4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁基]-2-甲基-3-氧代-哌嗪-1-甲酸苄酯(实施例147步骤B)进行脱保护，并随后与2-氯-4-异氰酰-1-三氟甲基-苯(中间体16)反应以提供73％产率的标题化合物。MS：574.3(MH+，1Cl).
实施例149
(3S，6S)-4-[4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁基]-6-甲基-5-氧代-哌嗪-1，3-二甲酸3-酰胺1-[(3，4-双-三氟甲基-苯基)-酰胺]
类似于在实施例147步骤D中所述的方法，使(2S，5S)-1-[4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁基]-5-甲基-6-氧代-哌嗪-2-甲酸酰胺与4-异氰酰-1，2-双-三氟甲基-苯(中间体26)反应以提供70％产率的标题化合物，其为无色固体。MS：608.1(MH+).
实施例150
(3R，6R)-4-[4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁基]-6-甲基-5-氧代-哌嗪-1，3-二甲酸3-酰胺1-[(3-氯-4-三氟甲基-苯基)-酰胺]
Figure BPA00001545560701621
类似于实施例147制备标题化合物，除了使用(S)-2-[苄氧基羰基-(2-氧代-乙基)-氨基]-丙酸甲酯(中间体12C)，(R)-2-[苄氧基羰基-(2-氧代-乙基)-氨基]-丙酸甲酯起始(类似地自D-丙氨酸甲酯进行制备)以提供白色固体。MS：574.2(MH+，1Cl).
实施例151
(3R，6R)-4-[4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁基]-6-甲基-5-氧代-哌嗪-1，3-二甲酸3-酰胺1-[(3，4-二氯-苯基)-酰胺]
Figure BPA00001545560701622
类似于实施例150，制备标题化合物，在最后一个步骤中使用3，4-二氯苯基异氰酸酯，以提供白色固体。MS：540.3(MH+，2Cl).
实施例A
可以以常规方式制备包含下述成分的薄膜衣片剂：
  成分   每片剂
  核
  式(I)的化合物   10.0mg   200.0mg
  微晶纤维素   23.5mg   43.5mg
  含水乳糖   60.0mg   70.0mg
  聚乙烯吡咯烷酮K30   12.5mg   15.0mg
  淀粉羟乙酸钠   12.5mg   17.0mg
  硬脂酸镁   1.5mg   4.5mg
  (核重量)   120.0mg   350.0mg
  薄膜衣：
  羟丙基甲基纤维素   3.5mg   7.0mg
  聚乙二醇6000   0.8mg   1.6mg
  滑石   1.3mg   2.6mg
  氧化铁(黄色)   0.8mg   1.6mg
  二氧化钛   0.8mg   1.6mg
筛分活性成分，并将其与微晶纤维素混合，将所述混合物用聚乙烯吡咯烷酮在水中的溶液成粒。将颗粒与淀粉羟乙酸钠和硬脂酸镁混合，并压缩以分别产生120或350mg的核。将核用上述薄膜衣的水溶液/混悬液包被。
实施例B
可以以常规方式制备包含下述成分的胶囊。：
  成分   每胶囊
  式(I)的化合物   25.0mg
  乳糖   150.0mg
  玉米淀粉   20.0mg
  滑石   5.0mg
筛分成分，混合并将其填充到2号胶囊中。
实施例C
注射溶液可以具有下述组成：
Figure BPA00001545560701641
将活性成分溶解于聚乙二醇400和注射用水的混合物中(部分)。用乙酸调节pH为5.0。通过添加剩余量的水，将体积调节为1.0ml。过滤溶液，使用适合的覆盖物填充到瓶子中并过滤。
实施例D
可以以常规方式制备包含下述成分的软明胶胶囊：
  胶囊含量
  式(I)的化合物   5.0mg
  黄色蜡   8.0mg
  氢化大豆油   8.0mg
  部分氢化的植物油   34.0mg
  大豆油   110.0mg
  胶囊内容物的重量   165.0mg
  明胶胶囊
  明胶   75.0mg
  甘油85％   32.0mg
  Karion 83   8.0mg(干物质)
  二氧化钛   0.4mg
  氧化铁黄色   1.1mg
将活性成分溶解于其它成分的加温熔融物中，并将混合物填充到适合大小的软明胶胶囊中。使用一般方法，处理填充的软明胶胶囊。
实施例E
可以以常规方式制备包含下述成分的囊剂。
  式(I)的化合物   50.0mg
  乳糖，细粉   1015.0mg
  微晶纤维素(AVICEL PH 102)   1400.0mg
  羧甲基纤维素钠   14.0mg
  聚乙烯吡咯烷酮K 30   10.0mg
  硬脂酸镁   10.0mg
  风味添加剂   1.0mg
使活性成分与乳糖、微晶纤维素和羧甲基纤维素钠混合，并用聚乙烯吡咯烷酮在水中的混合物成粒。将颗粒与硬脂酸镁和风味添加剂混合，并填充到囊剂中。

Claims (31)

1.式(I)的化合物：
Figure FPA00001545560600011
其中
Figure FPA00001545560600012
是单键或双键，条件是当
Figure FPA00001545560600013
是双键，R5或R6之一不存在；
A是芳基或芳基甲基，其中所述环任选地被1-3个取代基取代，所述取代基独立地选自由下列各项组成的组中：卤素，芳基，杂芳基，C1-6烷基，卤代C1-6烷基，C1-6烷氧基和卤代C1-6烷氧基；
L是键，N(R’)-C(＝O)，NH-C(＝S)，或CH＝CH-C(＝O)，其中R’是氢或C1-4烷基；
R1和R2彼此独立地选自由下列各项组成的组中：
-C1-6烷基，
-C3-6烯基，
-C3-6炔基，
-羟基C2-6烷基，
-C1-6烷氧基C2-6烷基，
-C3-7环烷基，其任选地被1-3个取代基取代，所述取代基独立地选自由Rd组成的组中：
-C3-7环烷基C1-6烷基，其中所述C3-7环烷基任选地被1-3个取代基取代，所述取代基独立地选自由Rd组成的组中：
-C7-10二环烷基，
-苯基C1-3烷基，其中所述苯环任选地被1-3个取代基取代，所述取代基独立地选自由Rd组成的组中：
-杂芳基C1-3烷基，其中所述杂芳基任选地被1-3个取代基取代，所述取代基独立地选自由Rd组成的组中：
-杂环基，其任选地被1-3个取代基取代，所述取代基独立地选自由Rd组成的组，或
-杂环基C1-6烷基，其中所述杂环基任选地被1-3个取代基取代，所述取代基独立地选自由Rd组成的组中；或
R1和R2，与它们所连接的氮原子一起形成任选地被一到三个取代基取代的杂环基，所述取代基独立地选自由Rd组成的组中，并且其中由R1和R2形成的所述杂环基的环碳原子之一任选地被C＝O或SO2取代；和/或
由R1和R2形成的杂环基的环碳原子之一也是作为C3-7环烷基或杂环基的另一个环的环碳原子，其任选地被C1-6烷基取代，并且其中所述另一个环的一个或两个环碳原子任选地被羰基取代；
R3和R4彼此独立地选自由下列各项组成的组中：
-氢，
-羟基，
-C1-6烷基，
-C1-6烷氧基，
-C3-7环烷基，
-C3-7环烷基C1-6烷基，
-C1-6烷氧基羰基，
-羧基，
-氨基甲酰基，
-单或二-C1-6烷基取代的氨基甲酰基，
-C1-6烷氧基羰氧基，
-单或二-C1-6烷基取代的氨基羰氧基，
-C1-20烷基羰氧基-C1-6烷基，
-C1-20烷氧基羰氧基-C1-6烷基，
-芳基羰氧基-C1-6烷基，其中所述芳基任选地被一个到三个取代基取代，所述取代基独立地选自由下列各项组成的组中：卤素，C1-6烷基，卤代C1-6烷基，C1-6烷氧基和卤代C1-6烷氧基；
-单或二-C1-6烷基取代的氨基羰氧基-C1-6烷基，
-芳基取代的氨基羰氧基-C1-6烷基，其中所述芳基任选地被一个到三个取代基取代，所述取代基独立地选自由下列各项组成的组中：卤素，C1-6烷基，卤代C1-6烷基，C1-6烷氧基和卤代C1-6烷氧基；
-羟基-C1-6烷基，
-C1-6烷氧基-C1-6烷基，
-卤素，或
-卤代C1-6烷基；
p是0或1；
R5和R6独立地是氢，C1-6烷基或C3-7环烷基，其中所述C1-6烷基和所述C3-7环烷基任选地被一个到三个取代基取代，所述取代基独立地选自由下列各项组成的组中：氨基，羟基，羧基，氨基甲酰基，单或二-C1-6烷基取代的氨基甲酰基和C1-6烷氧基羰基；或
R5和R6，与它们所连接的碳原子一起形成C3-7环烷基或杂环基；
R7，R8，R9和R10彼此独立地选自由下列各项组成的组中：
-氢，
-羧基，
-氨基甲酰基，
-单或二-C1-6烷基取代的氨基甲酰基，
-C1-6烷基，其任选地被1-3个取代基取代，所述取代基独立地选自由下列各项组成的组中：羟基，C1-6烷氧基，羧基，氨基甲酰基，单或二-C1-6烷基取代的氨基甲酰基和C1-6烷氧基羰基，芳基和杂芳基，其中所述芳基和所述杂芳基任选地被一个到三个取代基取代，所述取代基独立地选自由下列各项组成的组中：卤素，C1-6烷基，卤代C1-6烷基，C1-6烷氧基和卤代C1-6烷氧基；
-C3-7环烷基或
-芳基；
Rd是羟基，氰基，NRaRb，卤素，C1-6烷基，卤代C1-6烷基，羟基C1-6烷基，C1-6烷氧基，C1-6烷氧基C1-6烷基，C3-7环烷基，C1-6烷氧基羰基，C1-6烷基-羰氧基，酰基，-C(O)NRaRb，-NRa-C(O)-Rb，-NRa-C(O)-ORb，-NRa-C(O)-NRb，-NRa-SO2-Rb，-NRa-SO2-NRbRc，-OC(O)NRaRb，-OC(O)ORa，C1-6烷基磺酰基，C1-6烷基亚硫酰基，C1-6烷硫基，苯基，苯基C1-3烷基，杂芳基，杂芳基C1-3烷基和杂环基，并且所述苯基和所述苯基C1-3烷基的苯基，所述杂芳基和所述杂芳基C1-3烷基的杂芳基，并且所述杂环基任选地被1-3个取代基取代，所述取代基独立地选自由下列各项组成的组中：羟基，氰基，NRaRb，卤素，C1-6烷基，卤代C1-6烷基，羟基C1-6烷基，C1-6烷氧基羰基，酰基，-C(O)NRaRb，-NRa-C(O)-Rb，-NRa-C(O)-ORb，-NRa-C(O)-NRb，-NRa-SO2-Rb，-NRa-SO2-NRbRc，-OC(O)NRaRb，-OC(O)ORa，C1-6烷基磺酰基，C1-6烷基亚硫酰基和C1-6烷硫基，并且所述杂环基的一个或两个环碳原子任选地被羧基取代；
Ra，Rb和Rc独立地是氢或C1-6烷基；
n是0-2的整数；
m是0-2的整数；
m+n是0-3的整数；
或其前药或其药用盐。
2.根据权利要求1所述的化合物，其中A是苯基或萘基，其中所述苯基和所述萘基任选地被一到三个取代基取代，所述取代基选自由下列各项组成的组中：卤素、卤代C1-6烷基和卤代C1-6烷氧基。
3.根据权利要求1和2中任一项所述的化合物，其中A是被一个或两个取代基取代的苯基，所述取代基选自由卤素原子、三氟甲基和三氟甲氧基组成的组中。
4.根据权利要求1-3中任一项所述的化合物，其中A是被一个或两个取代基取代的苯基，所述取代基选自由氯、氟、三氟甲基和三氟甲氧基组成的组中。
5.根据权利要求1-4中任一项所述的化合物，其中A是3-氯-4-三氟甲基-苯基，4三氟甲基-苯基，3，4双三氟甲基-苯基或3，4-二氯苯基。
6.根据权利要求1-5中任一项所述的化合物，其中R1和R2，与它们所连接的氮原子一起形成任选地被一到三个取代基取代的杂环基，所述取代基独立地选自由下列各项组成的组中：羟基，卤素，C1-6烷基C1-6烷氧基C1-6烷基，-NH-C(O)-O(C1-4烷基)，C1-6烷基-羰氧基，咪唑基，苯基，吡啶基，吡唑基和羟基C1-6烷基；和/或
由R1和R2形成的杂环基的环碳原子之一也是作为C3-7环烷基或杂环基的另一个环的环碳原子。
7.根据权利要求1-6中任一项所述的化合物，其中R1和R2，与它们所连接的氮原子一起形成哌啶基或吡咯烷基，并且所述哌啶基和吡咯烷基任选地被一个或两个取代基取代，所述取代基独立地选自由下列各项组成的组中：羟基C1-6烷基和羟基C1-6烷基，和/或
由R1和R2形成的所述哌啶基和吡咯烷基的环碳原子之一也由C3-7环烷基或杂环基共用。
8.根据权利要求1-7中任一项的化合物，其中R1和R2与它们所连接的氮原子一起形成螺-杂环基如6-氮杂-螺[2，5]辛-6-基，5-氮杂螺[2.5]辛-5-基，7-氮杂-螺[3.5]壬-7-基，8-氮杂-螺[4.5]癸-8-基，1，8-二氮杂-螺[4.5]癸-8-基，1，3，8-三氮杂-螺[4.5]癸-8-基，2，8-二氮杂-螺[4.5]癸-8-基，1-氧杂-3，8-二氮杂-螺[4.5]癸-8-基，1-氧杂-8-氮杂-螺[4.5]癸-8-基，2-氧杂-8-氮杂-螺[4.5]癸-8-基，2-氧杂-7-氮杂-螺[3.5]壬-7-基，1-氧杂-7-氮杂-螺[3.5]壬-7-基，9-氮杂-螺[5.5]十一烷-9-基，1-氧杂-4，9-二氮杂-螺[5.5]十一烷-9-基，三氮杂-螺[4.5]癸烷-2，4-二酮，2-氧代-1-氧杂-3，8-二氮杂-螺[4.5]癸-8-基，2，8-二氮杂-螺[4.5]癸烷，氮杂-螺[4.5]癸-8-基，其中所述螺-杂环基的环任选地被1-3个取代基取代，所述取代基独立地选自由下列各项组成的组中：羟基，氧代，烷氧基，氟或C1-6烷基。
9.根据权利要求1-8中任一项所述的化合物，其中R1和R2与它们所连接的氮原子一起形成6-氮杂-螺[2，5]辛-6-基，其中所述螺-杂环基的环任选地被一个到两个取代基取代，所述取代基独立地选自由下列各项组成的组中：羟基或C1-6烷基。
10.根据权利要求1-9中任一项所述的化合物，其中R1和R2与它们所连接的氮原子一起形成(S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2，5]辛-6-基。
11.根据权利要求1所述的化合物，其中R1和R2是甲基。
12.根据权利要求1-11中任一项所述的化合物，其中
Figure FPA00001545560600061
是单键。
13.根据权利要求1-12中任一项所述的化合物，其中p是0。
14.根据权利要求1-13中任一项所述的化合物，其中n是0或1，m是1或2并且n+m是1或2。
15.根据权利要求1-14中任一项所述的化合物，其中R3和R4之一是氢，卤素，羟基，C1-4烷基，羟基-C1-4烷基，C1-4烷氧基-C1-4烷基，羧基氨基甲酰基，单-C1-4烷基取代的氨基甲酰基，或C1-4烷氧基-羰基，且另一个是氢。
16.根据权利要求1-15中任一项所述的化合物，其中R3和R4之一是氢或羟基-C1-4烷基，且另一个是氢。
17.根据权利要求1-16中任一项所述的化合物，其中R5和R6之一是氢或C1-4烷基，且另一个是氢。
18.根据权利要求1-17中任一项所述的化合物，其中R7，R8，R9和R10独立地是氢，C1-6烷基或氨基甲酰基。
19.根据权利要求1-18中任一项所述的化合物，其中R9和R10之一是氢或C1-4烷基，且另一个是氢，以及R7和R8之一是氨基甲酰基，羧基或氢，且另一个是氢。
20.根据权利要求1-19中任一项所述的化合物，其中R9或R10之一是甲基，且另一个是氢，以及R7，R8是氢，最优选地R7，R8，R9和R10是氢。
21.根据权利要求1-20中任一项所述的化合物，其中L是键，NH-C(＝O)或CH＝CH-C(＝O)。
22.根据权利要求1-21中任一项所述的化合物，其中L是NH-C(＝O)或键，最优选地L是NH-C(＝O)。
23.根据权利要求1-21中任一项所述的化合物，其中R5和R6之一是氢或甲基，且另一个是氢；R7，R8，R9和R10是氢，其中L是NHC(＝O)，并且R1和R2与它们所连接的氮原子一起形成(S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2，5]辛-6-基。
24.根据权利要求1所述的式(I’)的化合物，
Figure FPA00001545560600071
其中A，L，n，m，p R3，R4，R5，R6，R7，R8，R9，R10，Rd根据权利要求1-22中任一项定义。
25.根据权利要求1所述的式(I”)的化合物，
Figure FPA00001545560600072
其中A，L，n，m，R1，R2，R3，R4，R7，R8，R9，R10，Rd根据权利要求1-22中任一项定义。
26.根据权利要求1所述的化合物，其选自由下列各项组成的组中：
(S)-4-[4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁基]-2-甲基-3-氧代-哌嗪-1-甲酸(4-三氟甲基-苯基)-酰胺
(S)-4-[(S)-4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-1-羟甲基-4-氧代-丁基]-2-甲基-3-氧代-哌嗪-1-甲酸(3-氯-4-三氟甲基-苯基)-酰胺
(S)-4-(3-氯-4-三氟甲基-苯基)-1-[4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁基]-3-甲基-哌嗪-2-酮
1-[(E)-3-(3，4-二氯-苯基)-丙烯酰基]-4-[3-(4-羟基-4-甲基-哌啶-1-基)-3-氧代-丙基]-[1，4]二氮杂
Figure FPA00001545560600081
-5-酮
4-[4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁基]-5-氧代-[1，4]二氮杂
Figure FPA00001545560600082
-1-甲酸(3-氯-4-三氟甲基-苯基)-酰胺；
1-(3-氯-4-三氟甲基-苯基)-4-[(S)-4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-1-羟甲基-4-氧代-丁基]-[1，4]二氮杂
Figure FPA00001545560600083
-5-酮；
(R)-1-(3，4-双-三氟甲基-苯基)-4-[(S)-4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-1-羟甲基-4-氧代-丁基]-2-甲基-[1，4]二氮杂-5-酮；
(S)-4-[(S或R)-3-氟-4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁基]-2-甲基-3-氧代-哌嗪-1-甲酸(3-氯-4-三氟甲基-苯基)-酰胺；
(S)-4-[(S)-4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-1-羟甲基-4-氧代-丁基]-2-甲基-3-氧代-哌嗪-1-甲酸(3，4-双-三氟甲基-苯基)-酰胺；
(3S，6S)-N1-(3-氯-4-(三氟甲基)苯基)-4-(4-((S)-4-羟基-6-氮杂螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代丁基)-6-甲基-5-氧代哌嗪-1，3-二甲酰胺；
(3S，6S)-4-[4-((S)-4-羟基-6-氮杂-螺[2.5]辛-6-基)-4-氧代-丁基]-6-甲基-5-氧代-哌嗪-1，3-二甲酸3-酰胺1-[(3，4-双-三氟甲基-苯基)-酰胺]。
27.根据权利要求1-26中任一项所述的化合物，其用作治疗活性物质。
28.根据权利要求1-26中任一项所述的化合物，其用作治疗和/或预防下述疾病的治疗活性物质：周围动脉闭塞性疾病、重症肢体缺血、易损动脉粥样硬化斑块患者、不稳定型心绞痛、充血性心力衰竭、左心室肥大、局部缺血再灌注损伤、卒中、心肌病、再狭窄、类风湿性关节炎、糖尿病和糖尿病性并发症、糖尿病性肾病、肠易激综合征、局限性回肠炎、多发性硬化、神经性疼痛、动脉粥样硬化血栓形成和/或在糖尿病/重症肢体缺血中的烧伤/溃疡或哮喘。
29.用于制备式(Ia)的化合物的方法：
Figure FPA00001545560600091
所述方法包括下述步骤：使式(8)的化合物
Figure FPA00001545560600092
与式A-N＝C＝O，A-N＝C＝S的化合物，与式A-NH-C(＝O)-O-苯基，A-CH＝CH-COOH，A-CH＝CH-COCl，A-Hal或A-B(OH)2的氨基甲酸苯酯反应，
其中n，m，p，A，L，R1，R2，R3，R4，R5，R6，R7，R7，R8，R9，R10根据权利要求1-25中任一项定义。
30.用于制备式(Ia)的化合物的方法，
Figure FPA00001545560600093
所述方法包括下述步骤：使式(5)的化合物与
Figure FPA00001545560600101
与式HN(R1)(R2)的胺反应，其中n，m，p，A，L，R1，R2，R3，R4，R5，R6，R7，R7，R8，R9，R10如在权利要求1中所定义。
31.如前面所定义的发明，具体地关于新的化合物、中间体、药剂、用途和方法。
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