CN102757461A - 一种改性卵磷脂络合碘及其制备方法和用途 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种改性卵磷脂络合碘及其制备方法和用途。该改性卵磷脂络合碘具有式（1）所示的结构：其中，R₁和R₂独立地代表饱和脂肪酸的烃基。本发明的改性卵磷脂络合碘的稳定性好，与卵磷脂络合碘一样，可用于治疗碘引起的甲状腺肿、儿童甲状腺机能减退和增进视网膜新陈代谢等适应症，并具有依从性好、疗效确实的优点。而且改性卵磷脂络合碘比卵磷脂络合碘提高了乳化稳定性和分散性，抗氧化性大大提高，有利于药品质量及稳定性。

Description

一种改性卵磷脂络合碘及其制备方法和用途

技术领域

本发明涉及有机碘化合物，更具体地，涉及一种改性卵磷脂络合碘及其制备方法和用途。

背景技术

卵磷脂属于一种混合物，是存在于动植物组织以及卵黄之中的一组黄褐色的油脂性物质，其构成成分包括磷酸、胆碱、脂肪酸、甘油、糖脂、甘油三酸酯以及磷脂。卵磷脂分子结构如下：

式中R₁和R₂代表脂肪酸的烃基。磷脂酰胆碱分子中不同碳位上所接的脂肪酸不同：α碳位（R₁CO-）上接的几乎都是饱和脂肪酸，而β碳位（R₂CO-）上接的通常为油酸、亚油酸、亚麻酸及花生四烯酸等不饱和脂肪酸。

卵磷脂的化学性质主要表现在酯键、脂肪酸上不饱和键和磷脂的-CH₂CH₂N(CH₃)₃基团上，其中R₂上不饱和脂肪酸上的双键可发生氢化、羟基化、羟氯化、磺化和卤代反应等加成反应。

1955年，日本柳金太郎发明了一种新型的碘化合物，即卵磷脂络合碘片，该药是在以碘治疗甲状腺肿的过程中过量服用反而加重病情的背景下研制出的，它是由卵磷脂中的不饱和脂肪酸与碘络合而成的有机碘药物。分子式为C₈₈H₁₆₄O₁₆N₂P₂I₂，分子量为1822.03。

近年的研究证明卵磷脂络合碘可改善视网膜的代谢，在实验性葡萄膜炎的动物试验中可明确显示卵磷脂络合碘片释放的微量碘能抑制抗体的产生从而起到抗炎的作用。视网膜电图（ERG）提示视网膜的功能也因此有所善，有试验证实碘对视网膜的新陈代谢产生促进作用。

卵磷脂络合碘临床上主要用于治疗血管痉挛性视网膜炎、出血性视网膜炎、玻璃体出血、玻璃体混浊、中央静脉闭合性视网膜炎和婴儿哮喘、支气管炎、缺碘性甲状腺肿、缺碘性甲状腺机能减退。

现有卵磷脂络合碘主要采用天然的大豆磷脂作为络合底物，卵磷脂的稳定性受光、温度、湿度、溶剂和pH等因素的影响，因而容易导致氧化，不稳定等问题。由于卵磷脂自身稳定性问题，进而容易导致卵磷脂络合碘稳定性降低，络合碘的自然分解程度增加。

发明内容

为了克服上述卵磷脂络合碘不稳定的缺陷，本发明提供一种改性卵磷脂络合碘及其制备方法和用途。

本发明的上述目的是采用以下技术方案来实现的。

一方面，本发明提供一种改性卵磷脂络合碘，其具有式（1）所示的结构：

其中，R₁和R₂独立地代表饱和脂肪酸的烃基。

优选地，R₂选自饱和油酸、亚油酸、亚麻酸和花生四烯酸的烃基。

优选地，R₂选自氢化、羟基化、卤化、羟卤化、磺化的油酸、亚油酸、亚麻酸和花生四烯酸的烃基。

另一方面，本发明提供一种上述改性卵磷脂络合碘的制备方法，该方法包括：使式（2）所示的改性卵磷脂在催化剂存在下与碘反应生成式（1）所示改性卵磷脂络合碘的步骤

其中，R₁和R₂独立地表示饱和脂肪酸的烃基。

优选地，该方法包括如下步骤：

a.将式（2）所示的改性卵磷脂溶于温度为30~60℃下的冰醋酸溶剂中，搅拌至完全溶解；

b.向步骤（a）的溶液中加入碘，在Mg催化剂下，迅速升温至100~120℃下，反应10~12小时，过滤，即得。

优选地，R₂选自饱和油酸、亚油酸、亚麻酸和花生四烯酸的烃基。

优选地，R₂选自氢化、羟基化、卤化、羟卤化、磺化的油酸、亚油酸、亚麻酸和花生四烯酸的烃基。

优选地，式（2）所示的改性卵磷脂采用以下任一方法制备而成：

（a）在镍或钯催化剂存在下，将卵磷脂，例如大豆卵磷脂与过量氢气发生加成反应，即得到氢化卵磷脂；

（b）在有机酸，例如乳酸的存在下，将卵磷脂，例如大豆卵磷脂与过量过氧化氢发生反应，即得到羟基化卵磷脂；

（c）将卵磷脂，例如大豆卵磷脂与过量卤化氢发生加成反应，即得到卤化卵磷脂；

（d）将卵磷脂，例如大豆卵磷脂与过量次氯酸发生反应，即得到羟氯化卵磷脂；

（e）将卵磷脂，例如大豆卵磷脂与过量SO₃发生反应，即得到磺化卵磷脂。

实际上，本发明的改性卵磷脂络合碘是先对卵磷脂R₂基团上不饱和脂肪酸上的双键进行多种加成反应，包括氢化、羟基化、羟氯化、磺化和卤化等，使其变为饱和单键的改性卵磷脂。然后将改性的卵磷脂，即氢化、羟基化、羟氯化、磺化或卤化卵磷脂与碘进行络合反应，从而形成改性卵磷脂络合碘。

又一方面，本发明提供一种药物组合物，其包含上述改性卵磷脂络合碘以及任选的药学上可接受的赋形剂和/或载体。

优选地，所述药物组合物为固体口服制剂，优选为片剂、胶囊剂或颗粒剂。

再一方面，本发明提供上述改性卵磷脂络合碘和/或上述药物组合物在制备用于治疗血管痉挛性视网膜炎、出血性视网膜炎、玻璃体出血、玻璃体混浊、中央静脉闭合性视网膜炎、婴儿哮喘、支气管炎、缺碘性甲状腺肿和缺碘性甲状腺机能减退的药物中的用途。

本发明的改性卵磷脂络合碘的稳定性好，与卵磷脂络合碘一样，可用于治疗碘引起的甲状腺肿、儿童甲状腺机能减退和增进视网膜新陈代谢等适应症，并具有依从性好、疗效确实的优点。而且改性卵磷脂络合碘比卵磷脂络合碘提高了乳化稳定性和分散性，抗氧化性大大提高，有利于药品质量及稳定性。

与现有技术相比，本发明具有以下有益的技术效果：氧化性方面，改性卵磷脂络合碘由于磷脂的分子中为饱和脂肪酸，不容易被空气中的氧气氧化。与卵磷脂络合碘相比，与空气长时间接触，不会被氧化成棕黄色，不存在口感苦涩等变质问题。

热敏性方面，改性卵磷脂络合碘耐高温，随着温度的升高氧化的速度几乎不变，在高温试验条件下，改性卵磷脂络合碘稳定，而卵磷脂络合碘在相对较短的时间颜色明显加深。

根据改性后的卵磷脂络合碘稳定性大大提高这一优势，在制备改性卵磷脂络合碘的过程中，加热温度可在100℃～120℃，缩短反应时间，提高收率，方法简单，适合工业化生产；在制剂方面，产品质量稳定，对药包材及生产环境要求没有卵磷脂络合碘严格，节约成本。

附图说明

图1为氢化卵磷脂、氢化卵磷脂络合碘、氢化卵磷脂+碘混合物的DSC曲线；

图2羟基化卵磷脂、羟基化卵磷脂络合碘、羟基化卵磷脂+碘混合物的DSC曲线；

图3氯代卵磷脂、氯代卵磷脂络合碘、氯代卵磷脂+碘混合物的DSC曲线；

图4羟氯化卵磷脂、羟氯化卵磷脂络合碘、羟氯化卵磷脂+碘混合物的DSC曲线；

图5磺化卵磷脂、磺化卵磷脂络合碘、磺化卵磷脂+碘混合物的DSC曲线。

具体实施方式

实施例1改性卵磷脂络合碘制备实验条件筛选

a.将改性卵磷脂溶于温度为30~60℃下的冰醋酸溶剂中，搅拌至完全溶解；

b.向步骤（a）的溶液中加入碘，在Mg催化剂下，迅速升温，反应，过滤，即得相应的改性卵磷脂络合碘，其中升温温度及反应时间如表1所示。

表1实验条件筛选

结论：由表1可见，卵磷脂络合碘在90℃时，收率较低，如果延长时间，收率无太大变化，如果提升温度，卵磷脂络合碘会被氧化而变性。改性卵磷脂络合碘在90℃时，反应较慢，收率较低，在100℃～120℃时，收率有显著提高，在130℃时，改性卵磷脂络合碘被氧化变成棕黑色粉末，反应时间上，8h时收率较低，在10h～12h时，收率显著提高，在14h时，收率几乎无变化。因此，改性卵磷脂络合碘的反应条件为：在温度为100℃～120℃时，反应10h～12h。

实施例2~8为改性卵磷脂络合碘的制备

实施例2氢化卵磷脂络合碘的制备

将5g卵磷脂溶解在20ml二氯甲烷中，加入催化剂0.2gPd/C，置换空气后，H₂加压到2MPa，温度设定为65℃，反应70min，反应结束后过滤，加水分液三次，得到有机相减压蒸馏，得到粗品氢化产物。将粗品采用制备型薄层色普法进行提纯，展开剂为氯仿：无水乙醇：三乙胺：去离子水为10:10:11:2.7，得到后的硅胶带用氯仿萃取，合并，干燥得到氢化卵磷脂产品。

将氢化卵磷脂溶于温度为40℃下的冰醋酸溶剂中，搅拌至完全溶解，向溶液中加入碘，在Mg催化剂下，迅速升温，温度在100℃温度下，反应11h，过滤，即得。

结构解析：

UV：氢化卵磷脂络合碘λmax218nm，较氢化卵磷脂的λmax194红移。

IR：λ3430、2918、2850、1740、1468和1384、1092cm-1等吸收峰，表示本品结构中存在酯羰基、磷酰基、胺基等基团。

DSC：为了证明氢化卵磷脂络合碘并非是氢化卵磷脂和碘的简单混合物，我们对氢化卵磷脂、氢化卵磷脂络合碘、氢化卵磷脂+碘混合物进行DSC测试，DSC曲线图谱见图1，三者在25℃~500℃区间内热分解过程中的热量变化明显不同，充分表明氢化卵磷脂和碘以化学键结合形成了一种新物质-氢化卵磷脂络合碘。

实施例3羟基化卵磷脂络合碘的制备

将卵磷脂5g搅拌加热到70℃,加入1-3滴乙酸，然后滴加0.75g浓度为30%过氧化氢溶液，反应3h。用10%氢氧化钠溶液中和至pH为7-8，真空脱水至1.5%以下,得到羟基化的产品。将粗品采用制备型薄层色普法进行提纯，展开剂为氯仿：无水乙醇：三乙胺：去离子水为10:11:11:2.7，得到后的硅胶带用氯仿萃取，合并，干燥得到羟基化卵磷脂产品。

将羟基化卵磷脂溶于温度为30℃下的冰醋酸溶剂中，搅拌至完全溶解，向溶液中加入碘，在Mg催化剂下，迅速升温，温度在100℃温度下，反应12h，过滤，即得。

结构解析：

UV：羟基化卵磷脂络合碘λmax242nm，较羟基化卵磷脂的λmax223红移。

IR：λ3432、2919、2853、1741、1467和1385、1096cm-1等吸收峰，表示本品结构中存在酯羰基、磷酰基、胺基等基团。

DSC：为了证明羟基化卵磷脂络合碘并非是羟基化卵磷脂和碘的简单混合物，我们对羟基化卵磷脂、羟基化卵磷脂络合碘、羟基化卵磷脂+碘混合物进行DSC测试，DSC曲线图谱见图2，三者在25℃~500℃区间内热分解过程中的热量变化明显不同，充分表明羟基化卵磷脂和碘以化学键结合形成了一种新物质-羟基化卵磷脂络合碘。

实施例4氯代卵磷脂络合碘的制备

将卵磷脂5g与100ml四氯化碳混合,搅拌，加入2ml氯化氢及2滴引发剂,在氮气保护中搅拌反应3h。后减压蒸掉溶剂得到粗品卤化产物。将粗品采用制备型薄层色普法进行提纯，展开剂为氯仿：无水乙醇：三乙胺：去离子水为10:12:11:2.7，得到后的硅胶带用氯仿萃取，合并，干燥得到氯代卵磷脂产品。

将氯代卵磷脂溶于温度为60℃下的冰醋酸溶剂中，搅拌至完全溶解，向溶液中加入碘，在Mg催化剂下，迅速升温，温度在110℃温度下，反应10h，过滤，即得。

UV：氯代卵磷脂络合碘λmax242nm，较氯代卵磷脂的λmax223红移。

IR：λ3431、2917、2852、1742、1466和1386、1095cm-1等吸收峰，表示本品结构中存在酯羰基、磷酰基、胺基等基团。

DSC：为了证明氯代卵磷脂络合碘并非是氯代卵磷脂和碘的简单混合物，我们对氯代卵磷脂、氯代卵磷脂络合碘、氯代卵磷脂+碘混合物进行DSC测试，DSC曲线图谱见图3，三者在25℃~500℃区间内热分解过程中的热量变化明显不同，充分表明氯代卵磷脂和碘以化学键结合形成了一种新物质-氯代卵磷脂络合碘。

实施例5溴代卵磷脂络合碘的制备

其制备方法同实施例4，其区别仅在于将其中的氯化氢替换为溴化氢。

实施例6碘代卵磷脂络合碘的制备

其制备方法同实施例4，其区别仅在于将其中的氯化氢替换为碘化氢。

实施例7羟氯化卵磷脂络合碘的制备

称取大豆卵磷脂5g溶于25ml正己烷，加热搅拌，当水浴温度达到45-50℃时缓缓分次加入4ml的次氯酸钠搅拌，再加入乙酸调节pH值到2-3,反应3h。反应后的产物水洗分离取上层液体在37摄氏度左右真空旋转蒸发，用氯仿转移固体真空干燥得到粗品羟氯化卵磷脂。将粗品采用制备型薄层色普法进行提纯，展开剂为氯仿：无水乙醇：三乙胺：去离子水为10:11.3:11.7:2.7，得到后的硅胶带用氯仿萃取，合并，干燥得到羟氯化卵磷脂产品。（制备方法参照：食品科学，2003,24（7），58-62）。

将羟氯化卵磷脂溶于温度为40℃下的冰醋酸溶剂中，搅拌至完全溶解，向溶液中加入碘，在Mg催化剂下，迅速升温，温度在120℃温度下，反应11h，过滤，即得。

UV：羟氯化卵磷脂络合碘λmax220nm，较羟氯化卵磷脂的λmax199nm红移。

IR：λ3434、2921、2854、1742、1470和1388、1097cm-1等吸收峰，表示本品结构中存在酯羰基、磷酰基、胺基等基团。

DSC：为了证明羟氯化卵磷脂络合碘并非是羟氯化卵磷脂和碘的简单混合物，我们对羟氯化卵磷脂、羟氯化卵磷脂络合碘、羟氯化卵磷脂+碘混合物进行DSC测试，DSC曲线图谱见图4，三者在25℃~500℃区间内热分解过程中的热量变化明显不同，充分表明羟氯化卵磷脂和碘以化学键结合形成了一种新物质-羟氯化卵磷脂络合碘。

实施例8磺化卵磷脂络合碘的制备

将卵磷脂5g溶解于50ml甲醇中，搅拌加热到80℃，通入SO₃气体，反应5-8h，冷却后用氨水调节pH为5-8，再用体积为卵磷脂质量20%H₂O₂脱色，干燥得到磺化卵磷脂产品。

将磺化卵磷脂溶于温度为60℃下的冰醋酸溶剂中，搅拌至完全溶解，向溶液中加入碘，在Mg催化剂下，迅速升温，温度在100℃温度下，反应12h，过滤，即得。

UV：磺化卵磷脂络合碘λmax267nm，较磺化卵磷脂的λmax252红移。

IR：λ3434、2919、2854、1745、1470和1387、1095cm-1等吸收峰，表示本品结构中存在酯羰基、磷酰基、胺基等基团。

DSC：为了证明磺化卵磷脂络合碘并非是磺化卵磷脂和碘的简单混合物，我们对磺化卵磷脂、磺化卵磷脂络合碘、磺化卵磷脂+碘混合物进行DSC测试，DSC曲线图谱见图5，三者在25℃~500℃区间内热分解过程中的热量变化明显不同，充分表明磺化卵磷脂和碘以化学键结合形成了一种新物质-磺化卵磷脂络合碘。

实施例9~11分别为改性卵磷脂络合碘制剂的实施例，其中用到的改性卵磷脂络合碘分别由实施例2-4制备而来

实施例9改性卵磷脂络合碘片

处方：

制备方法：

将处方量的改性卵磷脂络合碘、乳糖、微晶纤维素、交联聚乙烯吡咯烷酮粉碎，过筛后混匀，加适量的1%羟丙甲纤维素制成软材后，制粒，干燥，加硬脂酸镁混匀，压片，即得。

实施例10改性卵磷脂络合碘胶囊

处方：

制备方法：

将处方量的改性卵磷脂络合碘、淀粉、微晶纤维素过筛后混匀，灌装胶囊，即得。

实施例11改性卵磷脂络合碘颗粒

处方：

制备方法：

将处方量的改性卵磷脂络合碘、蔗糖粉碎、过筛后混匀，取适量的1%羧甲基纤维素钠水溶液制成软材后，制粒，干燥，加香精、滑石粉，混匀，分装，即得。

实施例12~14分别为影响因素试验、加速试验和长期稳定性试验。

实施例12影响因素试验

1、样品来源

卵磷脂络合碘：购自西安力邦制药有限公司

改性卵磷脂络合碘：即氢化卵磷脂络合碘、羟基化卵磷脂络合碘、氯化卵磷脂络合碘、溴化卵磷脂络合碘、碘化卵磷脂络合碘、羟氯化卵磷脂络合碘和磺化卵磷脂络合碘，分别由实施例2~8制备而来。

2、影响因素试验条件

将供试品放入平皿中，厚度为5~10mm，按以下三个条件进行放置。

高温试验：在60℃恒温放置10天。

高湿度试验：在25℃相对湿度92.5%条件下放置10天。

强光照射试验：在药物光照测定仪下，以约4500LX光照度下放置10天。

以上各试验条件下的供试品分别于第0，5，10天按时取样，进行各项测定，其试验结果见表2-4。

3、影响因素试验结果

表2高温试验

表3高湿度试验

表4强光照射试验

结果表明：60℃高温条件下放置10天，卵磷脂络合碘颜色变深，而改性卵磷脂络合碘无明显变化；25℃相对湿度92.5%条件下放置10天，卵磷脂络合碘吸湿明显且颜色变深，而改姓卵磷脂络合碘变化不明显；4500LX光照条件下放置10天，卵磷脂络合碘颜色变深，改性卵磷脂络合碘无明显变化。可见，在光、温度、湿度等影响因素下，卵磷脂络合碘在颜色、水分上均有显著变化，且有少量的卵磷脂络合碘被破坏，因此改姓卵磷脂络合碘较卵磷脂络合碘的稳定性好。

实施例13加速试验

1、样品来源

卵磷脂络合碘：购自西安力邦制药有限公司

改性卵磷脂络合碘：即氢化卵磷脂络合碘、羟基化卵磷脂络合碘、氯化卵磷脂络合碘、溴化卵磷脂络合碘、碘化卵磷脂络合碘、羟氯化卵磷脂络合碘和磺化卵磷脂络合碘，分别由实施例2~8制备而来。

2、加速试验条件

将各个样品用药用低密度聚乙烯袋包装，外包装用铝塑袋密封，于40℃±2℃，相对湿度75%±5%条件下放置，分别于0，1，2，3，6个月按时取样，进行各项测定，其结果见下表5。

3、加速试验结果

表5加速试验

实施例14长期稳定性试验

1、样品来源

改性卵磷脂络合碘：即氢化卵磷脂络合碘、羟基化卵磷脂络合碘、氯化卵磷脂络合碘、溴化卵磷脂络合碘、碘化卵磷脂络合碘、羟氯化卵磷脂络合碘和磺化卵磷脂络合碘，由实施例2~8制备而来。

2、长期稳定性试验条件

将各个样品用药用低密度聚乙烯袋包装，外包装用铝塑袋密封，于25℃±2℃，RH60%±10%下放置，分别于0，3，6，9，12，24个月按时取样，进行各项测定，其结果见表6。

表6长期稳定性试验

实施例15-17为药理实验

实施例15治疗缺碘性甲状腺肿、缺碘性甲状腺机能减退

1、样品来源

卵磷脂络合碘：购自西安力邦制药有限公司

改性卵磷脂络合碘：即氢化卵磷脂络合碘、羟基化卵磷脂络合碘、氯化卵磷脂络合碘、溴化卵磷脂络合碘、碘化卵磷脂络合碘、羟氯化卵磷脂络合碘和磺化卵磷脂络合碘，由实施例2~8制备而来。

2.试验动物

80只wistar大鼠，体重80-100克，雌雄各半（由中国医科大学试验动物中心提供）。

3.分组、模型制备及给药

（1）分组情况:

按体重随机分两组，一组为正常对照组（NI）15只，另一组为模型组（MI）95只，均以低碘饲料喂养。低碘饲料中碘含量为58.7ng/g（正常饲料碘含量为186ng/g）。

（a）正常对照组（NI）：低碘饲料饲养，饮用加碘水（浓度为0.3μg/ml），以保证大鼠每日碘的正常需要量（约2-5μg/天）。

（b）模型组（MI）：低碘饲料饲养，饮用去离子水（碘含量为0-5ng/m1）。

制备模型：按上述条件喂养3个月后，于MI组和NI组中各取5只大鼠处死，取出甲状腺。肉眼可见MI组大鼠的甲状腺有明显的充血现象，体积增大，重量增加，平均重量可达167.45mg，为NI组的9.2倍（NI组甲状腺平均重量为18.2mg）。证明已成功地复制出低碘大鼠动物模型。

随机将MI组分为9组，即为低碘组（LI）、卵磷脂络合碘组、氢化卵磷脂络合碘组、羟基化卵磷脂络合碘组，氯化卵磷脂络合碘组，溴化卵磷脂络合碘组，碘化卵磷脂络合碘组，羟氯化卵磷脂络合碘组，磺化卵磷脂络合碘组，每组10只。除NI组和MI组外，其余各组继续喂低碘饲料，并且每天灌胃给予相应药物，均为60μg/kg（按照卵磷脂络合碘人的临床剂量600μg/人折算）。NI组和MI组则也同法饲养，每天灌胃同体积蒸馏水。给药3个月后处死，进行如下指标检测：（1）收集24小时尿量，记录总量，并取出10ml，采用温和酸消化砷-铈反应分光光度法测尿碘含量。（2）将每只大鼠的一侧甲状腺组织放入备好的福尔马林溶液中固定，然后用蜡块包埋，做切片进行甲状腺形态学观察。（3）体视学分析:应用MIAS-2000型图象分析系统测量甲状腺体视学参数。

3.结果

（1）大鼠24小时尿碘含量测定

表7各组大鼠24小时尿碘排出量(μg/L)的比较

*LI组与其它9组间有显著差异，P<0.01

**改性卵磷脂络合碘八组与正常组和卵磷脂络合碘组间无显著差异，P＞0.05

从24小时尿中排出的总碘含量来看，低碘组与其它9组比较明显下降（P<0.01），而灌胃给予卵磷脂络合碘的大鼠，其尿碘总量与正常组和卵磷脂络合碘组对比无显著性差异（P>0.05）。说明改性卵磷脂络合碘与卵磷脂络合碘在补碘方面其效果无显著性差异。

（2）甲状腺组织形态学观察

甲状腺肉眼观察低碘组明显充血肿大，LI组单位体重的甲状腺重量均明显高于其它9组（P<0.01），而灌胃给予改性卵磷脂络合碘的大鼠，外观和单位体重的甲状腺重量与正常组和卵磷脂络合碘组对比无显著性差异（P>0.05）。光镜下LI组甲状腺滤泡呈现增生、密集，滤泡腔变小，其内含有的胶质明显减少，上皮细胞呈立方状或高柱状。改性卵磷脂络合碘和卵磷脂络合碘治疗组甲状腺滤泡、滤泡腔、及其滤泡腔内含有的胶质量明显恢复。

表8各组大鼠单位体重甲状腺重量的比较（mg/g）

（3）体视学参数改变特点

如9、10所示，模型组甲状腺滤泡和滤泡腔的平均体积(V_Q)、平均表面积(S_Q)明显小于正常组(P<0.01)，而滤泡及滤泡腔的表面积与其体积比(S/V)、数密度(N_v)大于正常组(P<0.01)，表明长期严重缺碘导致甲状腺功能的明显减退。

经补改性卵磷脂络合碘和卵磷脂络合碘3个月后甲状腺组织形态学观察及体视学指标均较低碘组有所恢复(P<0.01)，而改性卵磷脂络合碘组和卵磷脂络合碘组组间各项指标并无显著性差异。说明改性卵磷脂络合碘和卵磷脂络合碘对缺碘的治疗疗效十分明显。

表9各组大鼠甲状腺滤泡腔体视学测量指标（X±SD）

*LI组与其它9组间有显著性差异，P＜0.01。其它9组间差异无显著性，P>0.1。

表10各组大鼠甲状腺滤泡腔体视学测量指标2（X±SD）

*LI组与其它9组间有显著性差异，P＜0.01。其它9组间差异无显著性，P>0.1。

实施例16、治疗哮喘和支气管炎

样品来源：

卵磷脂络合碘：购自西安力邦制药有限公司

改性卵磷脂络合碘：即氢化卵磷脂络合碘、羟基化卵磷脂络合碘、氯化卵磷脂络合碘、溴化卵磷脂络合碘、碘化卵磷脂络合碘、羟氯化卵磷脂络合碘和磺化卵磷脂络合碘由实施例2~8制备而来。

模型一：对过敏性哮喘豚鼠血浆cAMP、cGMP含量的作用

豚鼠致敏：取豚鼠100只，随机均匀分为正常对照组、模型组、卵磷脂络合碘组、氢化卵磷脂络合碘组、羟基化卵磷脂络合碘组，氯化卵磷脂络合碘组，溴化卵磷脂络合碘组，碘化卵磷脂络合碘组，羟氯化卵磷脂络合碘组，磺化卵磷脂络合碘组，共计10组。除正常对照组豚鼠腹腔注射纯化水、后腿肌注生理盐水之外，其他各组豚鼠均以4%卵清蛋白生理盐水0.2mL后腿肌注和4%氢氧化铝凝胶0.2mL腹腔注射，共致敏3周。

引喘和治疗：从致敏结束前6d起，除正常对照组外，每组隔天以超声雾化器喷入2%卵清蛋白生理盐水引喘，同时，各组豚鼠灌胃给药，模型组灌胃给予等体积蒸馏水(5ml/kg)，每日一次，共15日。

第21日，除正常对照组和模型组外，各组豚鼠灌胃给药约50μg/kg（按照卵磷脂络合碘人的临床剂量600μg/人折算）、用2%卵清蛋白生理盐水引喘lh后，乌拉坦麻醉颈总动脉取血，分离血浆，采用放射免疫分析法，按试剂盒说明书的步骤进行血浆CAMP、CGMP含量的测定。

表11改性卵磷脂络合碘对过敏性哮喘豚鼠血浆cAMP、cGMP水平及cAMP/cGMP比值的影响（X±SD，n=10）

结果表明，模型组豚鼠的血浆cAMP下降，CGMP升高，cAMP/cGMP比值降低，与正常对照组比较有显著差异（P<0.05）；卵磷脂络合碘和改性卵磷脂络合碘均升高血浆CAMP水平、降低CGMP水平、cAMP/cGMP比值增大，与模型组比较有显著差异（P<0.05），改性卵磷脂络合碘组与卵磷脂络合碘组比较无显著性差异（P>0.1）。

模型二、对乙酰胆碱致豚鼠气管条痉挛的作用

1.试验动物

白色豚鼠，体重350g~400g，雌雄各半（由中国医科大学试验动物中心提供）。

2.分组、模型制备及给药

分组根据受试药物，分为卵磷脂络合碘组、氢化卵磷脂络合碘组、羟基化卵磷脂络合碘组，氯化卵磷脂络合碘组，溴化卵磷脂络合碘组，碘化卵磷脂络合碘组，羟氯化卵磷脂络合碘组，磺化卵磷脂络合碘组，共计8组。

制备豚鼠气管条标本：将豚鼠用木捶击头处死，迅速剪开颈部皮肤和组织，分离气管，从甲状软骨至气管下端分叉处将整段气管剪下，放入盛有改良Krebs营养液[g/L(mmol/L)]：NaCl 7.5(128)、KCl 0.35(4.7)、CaCl₂0.24(2.2)、MgCl₂ 0.05(0.6)、NaH₂PO₄ 0.1(0.8)、NaHCO₃ 1.0-1.25(12-15)、Glucose 1.0(5.6)中，仔细剔除气管周围的结缔组织，将气管剪成螺旋条状。

观察药物的作用：让气管螺旋条在浴槽中平衡30min，然后记录一段正常的标本舒缩曲线，再分别向浴槽内滴加各种药液。每次加药前，均先放掉浴槽中溶液。并用营养液冲洗气管螺旋条3次，以清除原药液。再加入30mlkres液于浴槽内。待舒缩曲线恢复到用药前水平后，再滴加下组药液。给药顺序是先加乙酰胆碱，使浴槽内浓度为1.67×10^-6g/m1，当气管平滑肌张力显著增加，收缩曲线升高，且呈强直性时，分别滴加卵磷脂络合碘和改性卵磷脂络合碘(浴槽内浓度为9.03×10^-3μg/m1)。每条气管段用3次即弃去，再换新的气管段。观察给药后曲线下降幅度，按公式(同上)求出药物拮抗乙酞胆碱引致豚鼠离体气管条痉挛的解痉百分率。

解痉百分率=（给药前曲线高度-给药后曲线高度）/给药前曲线高度×100%

3.结果：

表12改性卵磷脂络合碘对乙酰胆碱致豚鼠气管条痉挛的影响(X±SDn=10)

卵磷脂络合碘组给药前后相比较得出的解痉率，很明显的说明卵磷脂络合碘对乙酰胆碱致豚鼠气管条痉挛有较强的解痉作用。但改性卵磷脂络合碘与卵磷脂络合碘无组间差异（P>0.05）。

实施例17、治疗视网膜炎

1、样品来源

卵磷脂络合碘：购自西安力邦制药有限公司

改性卵磷脂络合碘：即氢化卵磷脂络合碘、羟基化卵磷脂络合碘、氯化卵磷脂络合碘、溴化卵磷脂络合碘、碘化卵磷脂络合碘、羟氯化卵磷脂络合碘和磺化卵磷脂络合碘，由实施例2~8制备而来。

2.试验动物

健康4周龄雄性SD大鼠100只,体质量180~220g。（由中国医科大学试验动物中心提供）。眼部经裂隙灯和检眼镜检查屈光间质清晰,眼底无病变。

3.材料

链脲佐菌素(STZ，美国Sigma公司),罗氏罗康全活力型血糖标准试纸（德国罗氏公司），VEGF检测试剂盒（武汉博士德生物工程公司）。罗氏罗康全活力型血糖仪（德国罗氏公司），DHW-60恒温水浴，DEN LEYMKZ酶标仪（广东丹利科技有限公司），CX41光学显微镜（日本Olympus公司）。

4.方法

1）动物模型的建立、模型建立成功标准和分组及药物干预

取10只SD大鼠作为正常对照组。90只大鼠诱导成糖尿病模型。将STZ粉末溶于pH4.5的0.1%枸橼酸盐缓冲液中，配制成1%STZ溶液。然后按60mg·kg^-1剂量腹腔注射1%STZ溶液，24h后尾静脉取空腹血测血糖,血糖≥16.7mmol·L^-1者确定为糖尿病模型诱导成功。90只大鼠血糖均≥16.7mmol·L-1,全部成模。随即将90只糖尿病大鼠按随机数字表法分为9组：糖尿病模型组、卵磷脂络合碘组、氢化卵磷脂络合碘组、羟基化卵磷脂络合碘组，氯化卵磷脂络合碘组，溴化卵磷脂络合碘组，碘化卵磷脂络合碘组，羟氯化卵磷脂络合碘组，磺化卵磷脂络合碘组，每组10只。除正常对照组和糖尿病模型组外，其余各组继每天灌胃给予相应药物，均为60μg/kg(按照卵磷脂络合碘人的临床剂量600μg/人折算)，1次/天，共30天。正常对照组和糖尿病模型组灌胃给予相应容量蒸馏水,1次/天，共30天。

2）取材

各组大鼠分别在干预30天后,将大鼠处死，立即取右眼行免疫组化ELISA测定;左眼置4%多聚甲醛溶液固定,以备HE、免疫组化切片。

3）检测方法

A.制片及病理检查：各组大鼠视网膜组织均经4%多聚甲醛固定,常规石蜡包埋,厚4um连续切片，作HE、免疫组化染色,经DAB显色后,苏木精复染,中性树胶封片。然后进行病理检查，在光学显微镜下观察各组大鼠视网膜组织的病理变化及VEGF阳性细胞表达情况。

B.免疫组化ELISA法检测VEGF的表达：取各组大鼠视网膜组织匀浆后,1000rpm离心5min,取上清液。每孔中各加入标准品及上清液100μL,置37℃ 90min,洗板;每孔中加入一抗100μL,置37℃ 60min,洗板;每孔加入酶标抗体100μL,置37℃ 30min,洗板;加入底物工作液90μL,置37℃20min;加入终止液100μL,30min内用酶标仪在450nm处测OD值。根据样品OD值在曲线图上查出相应VEGF浓度。VEGF阳性表达判断标准：细胞呈棕褐色着色即为阳性表达细胞。

5.结果

1）病理检查显示

光学显微镜下观察：正常对照组大鼠视网膜组织学结构与正常人视网膜组织结构相似,有完整的10层结构(由外向内:色素上皮层,视杆、视锥细胞层,外界膜,外核层,外从状层,内核层,内从状层,神经节细胞层,神经纤维层,内界膜)视网膜各层结构清晰,排列整齐。干预30天后,糖尿病模型组大鼠视网膜各层组织变薄、结构疏松及细胞空泡化改变。卵磷脂络合碘组大鼠视网膜组织病变较糖尿病组轻;但与正常对照组比较,有水肿、空泡等病理改变。改性卵磷脂络合碘组与卵磷脂络合碘组相比较，无明显差异。

正常对照组大鼠视网膜组织中VEGF阳性细胞微量表达于色素上皮层、神经节细胞层及内核层。糖尿病模型组大鼠视网膜组织中VEGF阳性细胞大量表达，其层次与正常对照组相同。卵磷脂络合碘组大鼠视网膜组织中VEGF阳性细胞大量表达,表达层次与正常对照组相同。但阳性反应程度较糖尿病组减弱。改性卵磷脂络合碘组与卵磷脂络合碘组相比较，无明显差异。

2）免疫组化ELISA法测定结果:

糖尿病模型组、卵磷脂络合碘组VEGF在大鼠视网膜组织中表达水平均高于正常对照组(P<0.05或P<0.01)，卵磷脂络合碘组VEGF在大鼠视网膜组织中表达水平低于糖尿病模型组(P<0.05)。改性卵磷脂络合碘组与卵磷脂络合碘组相比较，无明显差异。

表13各组大鼠视网膜组织中VEGF表达水平的比较（ng·L^-1）

与正常对照组比较,△P<0.01;与糖尿病模型组比较,*P<0.05。

6.结论

卵磷脂络合碘能通过降低VEGF的表达,从而延缓视网膜病变进程，而且改性卵磷脂络合碘也具有相似的药理作用，因此可将其应用于预防和治疗糖尿病视网膜病变。

Claims (8)

1.一种改性卵磷脂络合碘，其具有式（1）所示的结构：

其中，R₁和R₂独立地代表饱和脂肪酸的烃基。

2.根据权利要求1所述的改性卵磷脂络合碘，其特征在于，R₂选自饱和油酸、亚油酸、亚麻酸和花生四烯酸的烃基；优选地，R₂选自氢化、羟基化、卤化、羟卤化、磺化的油酸、亚油酸、亚麻酸和花生四烯酸的烃基。

3.一种权利要求1或2所述改性卵磷脂络合碘的制备方法，该方法包括：使式（2）所示的改性卵磷脂在催化剂存在下与碘反应生成式（1）所示改性卵磷脂络合碘的步骤

其中，R₁和R₂独立地表示饱和脂肪酸的烃基。

4.权利要求3所述的制备方法，其特征在于，该方法包括如下步骤：

a.将式（2）所示的改性卵磷脂溶于温度为30~60℃下的冰醋酸溶剂中，搅拌至完全溶解；

b.向步骤（a）的溶液中加入碘，在Mg催化剂下，迅速升温至100~120℃下，反应10~12小时，过滤，即得。

5.根据权利要求3或4所述的制备方法，其特征在于，R₂选自饱和油酸、亚油酸、亚麻酸和花生四烯酸的烃基；优选地，R₂选自氢化、羟基化、卤化、羟卤化、磺化的油酸、亚油酸、亚麻酸和花生四烯酸的烃基。

6.根据权利要求3或4所述的制备方法，其特征在于，式（2）所示的改性卵磷脂采用以下任一方法制备而成：

（a）在镍或钯催化剂存在下，将卵磷脂，例如大豆卵磷脂与过量氢气发生加成反应，即得到氢化卵磷脂；

（b）在有机酸，例如乳酸的存在下，将卵磷脂，例如大豆卵磷脂与过量过氧化氢发生反应，即得到羟基化卵磷脂；

（c）将卵磷脂，例如大豆卵磷脂与过量卤化氢发生加成反应，即得到卤化卵磷脂；

（d）将卵磷脂，例如大豆卵磷脂与过量次氯酸发生反应，即得到羟氯化卵磷脂；

（e）将卵磷脂，例如大豆卵磷脂与过量SO₃发生反应，即得到磺化卵磷脂。

7.一种药物组合物，其包含权利要求1或2所述的改性卵磷脂络合碘以及任选的药学上可接受的赋形剂和/或载体；

优选地，所述药物组合物为固体口服制剂，优选为片剂、软胶囊、胶囊剂或颗粒剂。

8.根据权利要求1或2所述的改性卵磷脂络合碘和/或根据权利要求7所述的药物组合物在制备用于治疗血管痉挛性视网膜炎、出血性视网膜炎、玻璃体出血、玻璃体混浊、中央静脉闭合性视网膜炎、婴儿哮喘、支气管炎、缺碘性甲状腺肿和缺碘性甲状腺机能减退的药物中的用途。

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