CN102743471B - 胆木提取物及其对盆腔炎的治疗应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种胆木提取物，其是通过将胆木粉碎成粗粉，装入萃取釜，采用超临界二氧化碳提取，收集提取物，得超临界提取物；将超临界后的药渣进行水提，浓缩，得水提取物；水提取物与超临界提取物合并混匀成胆木提取物；再经干燥成干膏粉，将干膏粉制备成所需剂型。本发明另外公开了胆木提取物在治疗盆腔炎的应用。本发明具有的优点是：本发明组方疗效显著，盆腔炎症改善情况均较对照组好，显示该组方对盆腔炎的治疗效果较西药甲硝唑好；由于盆腔炎易复发，需要长期用药，而西药多是以抗生素类治疗为主，副作用大，易产生耐药性；而中成药由于副作用小，适于长期用药，适应盆腔炎容易复发的特点；可适用于盆腔炎的长期治疗。

Description

胆木提取物及其对盆腔炎的治疗应用

技术领域

本发明涉及中草药胆木的提取物及其治疗应用，具体采用超临界二氧化碳提取的胆木提取物及其对盆腔炎的治疗应用。

背景技术

盆腔炎(pelvicinflamematorydisease，PID)系指女性子宫颈以上盆腔生殖器(包括子宫体部、输卵管、卵巢)和盆腔腹膜及其邻近结缔组织感染引起的临床综合征。盆腔炎多发生在性活跃期、有月经的妇女，初潮前、绝经后或未婚者很少发生盆腔炎。若发生盆腔炎也往往是邻近器官炎症的扩散。按其发病过程、临床表现可分为急性与慢性两种。急性盆腔炎是指女性内生殖器及其周围结缔组织、盆腔腹膜发生的急性炎症，可局限于一个部位，也可几个部位同时发病。常见致病菌为葡萄球菌、链球菌、大肠杆菌、厌氧菌及性传播病原体，如淋菌、支原体、衣原体等。经淋巴、血行或直接蔓延至盆腔而引起。慢性盆腔炎是指女性内生殖器及其周围结缔组织、盆腔腹膜的慢性炎症。其主要临床表现为月经紊乱、白带增多、腰腹疼痛及不孕等，如已形成慢性附件炎，则可触及肿块。

据世界卫生组织估计，性传播疾病泛滥导致全世界每年新增3亿3千多万性病患者，其中有10％～30％将发展为PID，其结果是带来长期慢性盆腔痛、不孕不育或宫外孕等一系列家庭和社会问题。盆腔炎是威胁女性健康的十大疾病之一，新的药物的开发研制和新的治疗途径的摸索将为该症的治疗提供更为有效的手段。由于目前对盆腔炎的发病机理仍缺乏足够的了解，每年有成千上万的患者因得不到及时彻底的治疗而留下一系列后遗症。中药及中药成分对盆腔炎的治疗具有一定的优势，通过标本兼治可达到抗菌消炎，提高机体免疫力及改善组织微循环的效果，具有广阔的发展前景。

胆木，又名乌檀，药乌檀，黄羊木，为茜草科乌檀属乔木乌檀(NaucleaofficinalisPierrcexPitard)干燥的茎、枝、树皮和根。生于高山近顶或半山腰荫蔽潮湿地带的杂木林中，分布广东(西部和西南部)、广西和海南等。胆木性味苦，寒，具有清热解毒，消肿止痛之功效。胆木中含有的多种黄酮有抑制细菌蛋白质合成、阻滞叶酸代谢的作用，同时对病毒蛋白质合成有抑制作用，具有广谱抗菌、抗病毒作用，由于抗菌、抗病毒有效成分复杂，细菌病毒不易产生耐药性。

发明内容

本发明的目的是针对以上所述现有技术存在的不足，提供一种副作用小，适于长期用药，适应盆腔炎容易复发的特点的胆木提取物。

本发明的另一目的是提供一种胆木提取物的制备方法。

本发明的第三目的是提供一种副作用小，适于长期用药，适应盆腔炎容易复发的特点的胆木提取物对盆腔炎的治疗应用。

为了实现本发明的上述目的，本发明采取的技术方案是：胆木提取物，是通过将胆木粉碎成粗粉，装入萃取釜，采用超临界二氧化碳提取，收集提取物，得超临界提取物(含有脂溶性成分)；将超临界后的药渣进行水提，浓缩，得水提取物(含水溶性成分)；水提取物与超临界提取物合并混匀成胆木提取物。

所述的粗粉为20-40目，优选24目。

胆木提取物经干燥，得胆木干膏粉，然后加入辅料，制粒，制成片剂等。

所述胆木提取物的制备方法，其包括的步骤如下：将胆木粉碎成粗粉，装入萃取釜，萃取釜压力20MPa，分离I压力8-10MPa，分离II压力3-6MPa，萃取温度为45℃±2，分离I温度为60℃±2，分离II温度为35℃±2，萃取时间为2-3小时，收集提取物，得超临界提取物，备用；超临界后的药渣，加7-9倍量水提取二次，每次1-2.5小时，滤过，合并二次滤液，浓缩至在60℃时相对密度为1.05-1.07，形成清膏，得水提取物；水提取物与超临界提取物合并混匀，干燥，得胆木干膏粉。

所述干膏粉中可以加入适量辅料，混匀，制粒，压片、分装，即得成药。

所述胆木提取物在治疗盆腔炎的治疗应用。

所述胆木提取物可以根据临床使用制成包括颗粒剂、片剂、胶囊剂等口服制剂及栓剂等腔道给药制剂。

与现有技术相比，本发明具有的优点是：效显著，盆腔炎症改善情况均较对照组好，显示该组方对盆腔炎的治疗效果较西药甲硝唑好；由于盆腔炎易复发，需要长期用药，而西药多是以抗生素类治疗为主，副作用大，易产生耐药性；而中成药由于副作用小，适于长期用药，适应盆腔炎容易复发的特点；可适用于盆腔炎的长期治疗。

具体实施方式

以下结合具体实施例对本发明进行详细的说明。

实施例1：

将胆木粉碎成粗粉，装入萃取釜，萃取釜压力20MPa，分离I压力9MPa，分离II压力5MPa，萃取温度为45℃，分离I温度为60℃，分离II温度为35℃，萃取时间为2.5小时，收集提取物，得超临界提取物，备用；超临界后的药渣，加8倍量水提取二次，每次2小时，滤过，合并二次滤液，浓缩至相对密度1.05-1.07(60℃)，形成清膏，得水提取物，水提取物与超临界提取物合并，混匀，干燥，得胆木干膏粉；将干膏粉可以加入适量辅料，混匀，制粒，压片、分装，制得片剂成药。

实施例2：

将胆木粉碎成粗粉，装入萃取釜，萃取釜压力20MPa，分离I压力9MPa，分离II压力5MPa，萃取温度为45℃，分离I温度为60℃，分离II温度为35℃，萃取时间为2.5小时，收集提取物，得超临界提取物，备用；超临界后的药渣，加8倍量水提取二次，每次2小时，滤过，合并二次滤液，浓缩至相对密度1.05-1.07(60℃)，形成清膏，得水提取物，水提取物与超临界提取物合并，混匀，干燥，得胆木干膏粉；将干膏粉加入适量辅料制粒，装入胶囊，分装，制得胶囊剂成药。

实施例3：

将胆木粉碎成粗粉，装入萃取釜，萃取釜压力20MPa，分离I压力9MPa，分离II压力5MPa，萃取温度为45℃，分离I温度为60℃，分离II温度为35℃，萃取时间为2.5小时，收集提取物，得超临界提取物，备用；超临界后的药渣，加8倍量水提取二次，每次2小时，滤过，合并二次滤液，浓缩至相对密度1.32-1.42(60℃)，形成稠膏。在超临界提稠膏中缓缓加入聚山梨酯、羊毛脂、山梨醇单棕榈酸酯、半合成脂肪酸甘油酯、于45℃以下溶化，混合均匀，注入栓剂模中，冷却，制成栓剂，分装，即制得栓剂。

所述胆木提取物还可以根据临床使用制成包括颗粒剂等口服制剂及栓剂等腔道给药制剂。

上述超临界萃取的机组可以选用南通华安超临界萃取有限公司生产的型号为HA420-40-96超临界萃取机组。

药效学及临床研究观察

(一)药效学研究试验

1抗炎作用

1.1胆木提取物对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响

取SPF级NIH小鼠50只，雌雄各半，体重18-22g，适应环境后，随机分为5组，每组12只：①正常对照组(给予等容积的蒸馏水)；②阿司匹林组0.1g·kg^-1；③-⑤分别给予胆木提取物高、中、低剂量组，相当于胆木饮片2.0g·kg^-1、1.0g·kg^-1、0.5g·kg^-1。每天上午9时各给药组均按剂量灌胃给药，正常对照组同法灌胃给予等体积蒸馏水，给药体积为20mL·kg^-1，每日给药1次，连续5d。末次给药30min后，每只小鼠均右耳涂抹二甲苯40μL/只，2h后脱颈椎处死小鼠，用8mm打孔器打下小鼠左右耳片，称重。以右耳减去左耳重量差作为炎症肿胀度(肿胀度＝W_右耳-W_左耳)。试验结果显示，胆木提取物具有一定的抑制二甲苯致小鼠耳肿胀的作用。统计分析结果见表1。

表1胆木提取物对二甲苯所致小鼠耳肿胀的影响

注：与正常对照组比较*P＜0.05，**P＜0.01。

1.2胆木提取物对大鼠棉球肉芽肿的影响

取SPF级SD大鼠50只，雌雄各半，体重180-220g，适应环境后，随机分为5组，每组10只：①正常对照组(给予等容积的蒸馏水)；②阿司匹林组0.1g·kg^-1；③-⑤分别给予胆木提取物高、中、低剂量组，相当于胆木饮片1.4g·kg^-1、0.7g·kg^-1、0.35g·kg^-1。将各组大鼠乙醚麻醉，铺无菌操作巾，大鼠固定架固定大鼠，盖无菌手术巾，在大鼠胸部剑突上测作1cm切口，用眼科镊将已干燥灭菌棉球(重量为20mg，高压灭菌)，分别埋植于大鼠两侧腋窝皮下，缝合切口，伤口处涂抹碘酒溶液。将大鼠送回饲养笼，手术当天开始给药，各给药组按剂量给药，正常对照组给予等体积的蒸馏水，给药体积为10ml·kg^-1，每天1次，连续5d。末次给药30min后，脱颈椎处死所有大鼠，手术取出棉球，随即称重棉球湿重。然后置于60℃电热恒温鼓风干燥箱中烤24h至恒重，取出，称量干重，此重量减去原来棉球的重量即为肉芽肿重量。试验结果显示，胆木提取物能够显著降低大鼠棉球肉芽肿的重量，说明胆木提取物能够抑制棉球肉芽肿的形成。统计分析结果见表2。

表2胆木提取物对大鼠棉球肉芽肿的影响

注：与正常对照组比较*P＜0.05，**P＜0.01。

1.3胆木提取物对角叉菜胶致大鼠足肿胀的影响

取SPF级SD大鼠50只，雌雄各半，体重180-220g，适应环境后，随机分为5组，每组10只：①正常对照组(给予等容积的蒸馏水)；②阿司匹林组0.1g·kg^-1；③-⑤分别给予胆木提取物高、中、低剂量组，相当于胆木饮片1.4g·kg^-1、0.7g·kg^-1、0.35g·kg^-1。各给药组按剂量灌胃给药，正常对照组给予等体积的蒸馏水，给药体积为10mL·kg^-1，每天1次，连续5天。末次给药前，于每只大鼠右后足趾处用油性笔作一标记，并以YLS-7A型足趾容积测量仪量右后足趾的体积，作为致炎前的正常足趾体积。末次给药1h后，在每只大鼠右后足趾皮下注射1％角叉菜胶0.1mL/只，测定注入致炎剂后1h、2h、4h、6h右后足趾的体积，减去致炎前大鼠右后足趾的正常体积，减去致炎前大鼠右后足趾的正常体积，即为大鼠在不同时间段的足趾肿胀度。分析比较不同时间段各组大鼠足趾肿胀度的差异(肿胀度＝V_t-V_正常)。试验结果显示，胆木提取物能够显著降低在致炎后1h、2h、4h、6h大鼠右后足趾的肿胀度，并且以高剂量的治疗作用最为明显。统计分析结果见表3。

表3胆木提取物对大鼠足趾肿胀度的影响

注：与正常对照组比较*P＜0.05，**P＜0.01。

2体外抑菌试验

将胆木提取物配制成浓度相当于原生药1g/mL的药液，装入三角瓶中，置于4℃冰箱保存备用。取保存的供试菌株(大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和沙门氏菌)，接种牛肉蛋白胨培养基，37℃培养24h，转接肉汤培养基，培养16h后，将菌液稀释至10⁶个cfu/mL。将灭菌后的牛肉膏蛋白胨培养基倾入灭菌培养皿内，放置凝固，后作为底层培养基。用无菌吸管吸取大肠杆菌培养液0.1mL，滴在平皿底层培养基上，用无菌棒将菌液涂匀，在平皿底部作好相应标记，用无菌镊子在每个平皿中等距离放置3个牛津杯，用滴灌分别将药液加到牛津杯中，以滴满为度，盖上平皿盖。然后将滴加药液的平皿水平置恒温箱内，37℃培养18-24h，用游标卡尺测量抑菌圈直径。试验结果显示，胆木提取物对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和沙门氏菌均有抗菌作用，抑菌试验结果见表4。

表4胆木提取物对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和沙门氏菌体外抑菌效果

注：抑菌圈直径≥20mm为高敏；抑菌圈直径15～20mm为中敏；抑菌圈直径≤15mm为低敏；无抑菌圈为耐药。

(二)临床疗效观察

本发明所述中草药具有良好的临床疗效，其临床疗效观察结果如下：

盆腔炎(pelvicinflamematorydisease，PID)是女性内生殖器(子宫、输卵管、卵巢)及其周围结缔组织和盆腔炎腹膜炎症的总称，任何一处发生炎症时，均可称为盆腔炎。本发明所述中草药具有良好的临床疗效，报道如下。

1一般资料

共观察病人60例，均来自东莞市桥头医院及中山市博爱医院，具有典型症状，表现为下腹疼痛，发热、或伴见恶寒，带下量多、色黄或稠，有异味，月经不调以及肢体困倦，小便黄少，大便干燥等。将病人随机分为治疗组和对照组。治疗组35例，年龄20～48岁，平均年龄34岁；病程最长14周，最短2周，平均5周；对照组25例，年龄22～49岁，平均35岁；病程最长14周，最短2周，平均4.6周。两组条件基本相似，各组的年龄、病程及病情程度，经统计学处理，无显著性差异，具有可比性。

2病例选择：

2.1诊断标准

参照《中药新药临床研究指导原则(试行)》中盆腔炎的诊断标准来制定有关内容。

1)西医诊断标准

急性盆腔炎：

(1)下腹疼痛伴发热，或伴见恶寒：为临床主要症状。病情严重者，起病较急，可有高热，寒战，下腹剧痛，头痛，食欲不振。病情较轻者，起病较缓慢，高热不明显，可出现持续低热，轻微下腹疼痛，久治不愈。

(2)白带量多：非月经期发病可有白带增多，呈脓性或血性，并有臭味。

(3)月经不调：若月经期发病可出现经量增多、经期延长或阴道不规则出血。

(4)恶心呕吐及腹泻：若炎症激惹肠道或伴有腹膜炎，则可出现恶心呕吐或腹泻等消化道症状。

(5)膀胱、直肠刺激压迫症状：如尿频尿急或排尿困难、里急后重感或排便困难等。

慢性盆腔炎：

(1)低热、疲乏：全身症状多不明显，有时仅有低热，易感疲乏，病程长者部分患者可出现神经衰弱症状，如精神不振、周身不适、失眠等症。

(2)下腹坠胀疼痛或腰骶部胀痛：为临床主要症状。因慢性炎症形成子宫、输卵管黏连或盆腔瘀血所致，疼痛常常在劳累、性交、月经前后加重。

(3)白带增多：呈黄色或淡黄色水样，或黄绿色，可有臭味。

(4)月经不调：以月经量多或经期延长多见，因慢性炎症导致盆腔瘀血，或影响卵巢功能所致。

(5)不孕：因慢性炎症导致输卵管粘连阻塞所致。

2)中医辨证标准：盆腔炎的中医辨证标准按照《中药新药临床研究指导原则(试行)》中关于盆腔炎辨证分型湿热瘀结标准进行。

湿热瘀结证：下腹胀痛或刺痛，痛处固定；腰骶胀痛；带下量多，色黄质稠。

神疲乏力，经期腹痛加剧，月经量多或伴经期延长，小便黄，大便干燥或溏而不爽。舌质红或暗红，或见边尖瘀点或瘀斑，苔黄腻或白腻，脉弦滑或弦涩。

2.2纳入病例标准

1)符合急、慢性盆腔炎西医诊断标准。

2)符合中医证候诊断标准。

3)根据各期临床试验目的以及本病特点，确定受试年龄范围。

2.3排除病例标准

1)不符合急、慢性盆腔炎西医诊断标准及中医证候诊断标准。

2)妊娠期或近期准备妊娠妇女、哺乳期妇女。

3)合并有心、肝、肾和造血系统等严重疾患者。

4)无法合作者，如合并有神经、精神疾患，或不愿合作者。

5)过敏体质或对多种药物过敏者。

6)急性盆腔炎病情危重者。

7)近期曾采用同类药物治疗，如服用过相关或相拮抗作用的药物，致药物疗效难以判断者。

3治疗方法及疗效判定标准

3.1治疗方法

治疗组用本发明所述胆木胶囊(0.5g/粒，相当于饮片4g/粒)一日3次，一次4粒；对照组采用甲硝唑，口服，一次0.4g，一日3次。每4周为一疗程，观察2个疗程。

3.2疗效判定标准

参照《中药新药临床研究指导原则(试行)》中关于慢性盆腔炎的疗效评定标准，分为4级。

(1)痊愈治疗后下腹疼痛及腰骶胀痛等症消失，妇科检查及理化检查正常。证候、体征积分和减少≥95％。停药1月内未复发。

(2)显效治疗后下腹疼痛及腰骶胀痛等症消失或明显减轻，妇科检查及理化检查明显改善。证候、体征积分和减少≥70％，＜95％。

(3)有效治疗后下腹疼痛及腰骶胀痛等症减轻，妇科检查及理化检查有所改善。证候、体征积分和减少≥30％，＜70％。

(4)无效治疗后下腹疼痛及腰骶胀痛等症无减轻或有加重，妇科检查及理化检查较治疗前无改善或有加重。证候、体征积分和减少＜30％。

4结果

两组治疗前后疗效情况比较，结果见表5。

表5本发明所述胆木提取物与甲硝唑疗效情况比较

结果表明，本发明所述组方在治疗盆腔炎方面疗效显著。盆腔炎症改善情况均较对照组好，显示该组方对盆腔炎的治疗效果较西药甲硝唑好。由于盆腔炎易复发，需要长期用药，而西药多是以抗生素类治疗为主，副作用大，易产生耐药性；而中成药由于副作用小，适于长期用药，适应盆腔炎容易复发的特点。因此，本发明所述组方可适用于盆腔炎的长期治疗。

Claims (4)

1.胆木提取物在制备治疗盆腔炎药物中的应用，所述胆木提取物，是通过将胆木粉碎成粗粉，装入萃取釜，采用超临界二氧化碳提取，收集提取物，得超临界提取物；将超临界后的药渣进行水提，浓缩，得水提取物；水提取物与超临界提取物合并混匀成胆木提取物；包括的步骤如下：

将胆木粉碎成粗粉，装入萃取釜，萃取釜压力18-22MPa，分离I压力8-10MPa，分离II压力3-6MPa，萃取温度为45℃±2，分离I温度为60℃±2，分离II温度为35℃±2，萃取时间为2-3小时，收集提取物，得超临界提取物；超临界后的药渣，加7-9倍量水提取二次，每次1-2.5小时，滤过，合并二次滤液，浓缩至在60℃时相对密度为1.05-1.07，形成清膏，得水提取物；水提取物与超临界提取物合并混匀。

2.如权利要求1所述的胆木提取物在制备治疗盆腔炎药物中的应用，其特征在于：胆木提取物经干燥，制得胆木干膏粉。

3.如权利要求1-2任一所述的胆木提取物在制备治疗盆腔炎药物中的应用，其特征在于：制成的剂型包括口服制剂或腔道给药制剂中的一种或几种。

4.如权利要求3所述的胆木提取物在制备治疗盆腔炎药物中的应用，其特征在于：所述口服制剂为颗粒剂、片剂或胶囊剂；所述腔道给药制剂为栓剂。