CN104189657B - 兼具防治下生殖道感染的外用避孕药 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种兼具防治下生殖道感染的外用避孕药及其制备方法。它由下述重量份数的原料药制成的药剂：黄柏10～40份、白果10～40份、龙葵30～120份、蒲公英20～60份、败酱草30～120份、白藓皮10～40份、土茯苓30～120份、薄荷10～25份、冰片1.0～2.5份、牡丹皮10～40份。本发明不仅能有效防治下生殖道感染，同时还具有外用杀精的功效。本发明对阴道具有保护作用，同时还有防治生殖道炎症和润滑的作用。本发明对阴道常见致病菌及部分性传播感染病源体有杀灭或抑制作用，对乳酸菌影响甚微。与目前单纯阴道用杀精产品相比，局部刺激等不适反应少。

Description

兼具防治下生殖道感染的外用避孕药

技术领域

本发明涉及外用避孕药品，具体地指一种兼具防治下生殖道感染的外用避孕药。

背景技术

女性下生殖道感染(Genital Tract Infection GTI)性疾病是临床常见病、多发病。性传播感染(Sexually Transmitted Infection,STI)是指通过性接触而传播的疾病(以往称为性传播疾病Sexually Transmitted Diseases,STDs)。

20世纪80年代以来，流动人口日益增多，性观念的改变，不安全性行为增加。我国生殖道感染(Reproductive Tract Infection RTI)和STI的不断增加，已从沿海蔓延到内陆，从城市向农村发展。如，获得性免疫缺陷综合征(Acquired immunodeficiencysyndrome，AIDS)已从高危人群向低危人群蔓延，形势相当严峻。据统计，近几年我国性病发病人数仍逐年增多，不少地区性病的发病率在传染病的顺序中名列第二、三位，已婚妇女下生殖道感染发病率高达50％，70％的妇女一生中，至少患过一次外阴阴道念珠菌病(Vulvovaginal candidiasis VVC)，其中5％-10％的妇女患有复发性阴道念珠菌病(Recurrent Vulvovaginal candidiasis RVVC)。

由于女性生殖道的解剖、生理特点，较男性更易感染，且感染后约半数无临床表现，常不能及时诊断和治疗而致疾病进一步发展与传播。RTI及STI其发病率增长如此迅速，不易控制已成为世界一危害严重的社会及公共卫生问题，因而倍受重视与关注。有效防治RTI与STI已成为当前一项十分严峻而迫切的任务。

现代医学对于下生殖道感染主要针对病原体进行治疗。在预防方面，因引起生殖道感染的病原微生物种类很多，加之病原体的变异与耐药问题，给选用抗生素或抗病毒药物来预防生殖道感染带来了极大的难度，兼具预防性传播感染的外用避孕技术的研究，主要集中在屏障方法、外用杀精与具有消毒作用的化学制剂上。屏障避孕方法对STI有良好的预防作用，但因避孕套使用上的不便、撕裂和影响性快感，多数情况是断续使用，大大降低了防范效果。女用避孕套对正常生殖道菌群可能有损伤作用，且费用较男用避孕套相比费用高，特别是在发展中国家，可接受性低。外用杀精与具有消毒作用的化学制剂在其预防性传播感染(STI)的效果尚在研究中，消毒剂又因对局部黏膜刺激性破坏了阴道内环境而导致使用受到限制，联合机械/化学屏障法也未取得突破进展。

将有效避孕与预防下生殖道感染相结合，研制具有避孕、消炎双重作用的外用药物对稳定低生育水平，提高出生人口素质，和有效防治重大疾病相结合，是建设和谐社会的必然要求，无论在国内还是在国际范围内都有广泛需求。

发明内容

本发明的目的就是要克服现有技术所存在的不足，提供一种兼具防治下生殖道感染的外用避孕药。

女性下生殖道感染属中医的“阴痒”、“带下”范畴，祖国传统医学认为此类疾病由于生活不洁，外感淫热毒邪；或肾精亏虚，邪气乘虚而入，湿热毒邪交搏于下焦，带脉不能约束致赤白带下，阴户红肿瘙痒等诸症。宜清、宜利。

本发明根据祖国医学理论对“阴痒”、“带下病”病机的认识，参考现代药理研究成果，结合临床实践，按中医理论选药组方，达到“清热解毒、燥湿止带、收敛生肌”的功效。

本发明兼具防治下生殖道感染的外用避孕药，它是由下述重量份数的原料药制成的药剂：

黄柏10～40份、白果10～40份、龙葵30～120份、蒲公英20～60份、败酱草30～120份、白藓皮10～40份、土茯苓30～120份、薄荷10～25份、冰片1.0～2.5份、牡丹皮10～40份。

本发明药物的优选重量份配比范围是：

黄柏3～10份、白果3～10份、龙葵3～30份、蒲公英3～10份、败酱草3～30份、白藓皮3～10份、土茯苓5～30份、薄荷3～15份、冰片0.1～1.0份、牡丹皮3～10份。

本发明药物的最佳重量份配比是：

黄柏10份、白果10份、龙葵30份、蒲公英15份、败酱草30份、白藓皮10份、土茯苓15份、薄荷10份、冰片0.3份、牡丹皮10份。

本发明药物组合物可以多种方式使用，由所述十味原料药的提取物为活性成分，加入药学上可接受的辅料或辅助性成分制备而成的药剂，所述的药剂为水剂、凝胶剂、膜剂、泡沫剂或可溶性避孕套，优选为水剂。

根据上述十味中药的理化性质及药理作用，对本发明药物提取工艺及制剂工艺进行研究，得到本发明药物制作成水剂较为合理的制备方法，包括如下步骤：

1)黄柏用6倍其重量的质量分数为70％乙醇加热回流提取二次，每次1小时，合并提取液，滤过，滤液备用；

2)牡丹皮进行水蒸气蒸馏，收集蒸馏液，备用；

3)薄荷进行水蒸气蒸馏，收集蒸馏液，备用；

4)将白果、龙葵、蒲公英、败酱草、白藓皮、土茯苓与薄荷、黄柏和牡丹皮的残渣加水煎煮二次，加水量为药物总重量的8～10倍，每次1.5小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度为1.08～1.14，加乙醇使含醇量为50％，静置24小时，取上清液再加乙醇使含醇量为75％，静置24小时，取上清液，备用；

5)合并上述步骤1)与步骤4)的两种溶液，挥尽乙醇，加入牡丹皮的蒸馏液、薄荷的蒸馏液、冰片，搅匀，加水定容，搅匀，即得。

本发明药物的用法与用量：本发明药物的用药量取决于具体剂型，以及病人的年龄、体重、健康状况等因素。作为指导：水剂，10～20ml外搽或外洗，或稀释后坐浴，必要时在医生指导下阴道灌洗等。

本发明药物中的黄柏，性寒味苦，入肾、膀胱经，具有清热燥湿、泻火解毒的功效，尤擅除下焦湿热为其特长为君药；白果，甘、苦、涩、平，入肺、肾经，收涩除湿止带，主治湿浊带下，龙葵，苦、甘、微寒，入肺、膀胱经，具有清热解毒、消肿止痒功效，主治疮痈肿毒、湿疹、皮炎，白果与龙葵共为臣药；蒲公英、败酱草、白藓皮、土茯苓、牡丹皮清热解毒、消痈排脓、杀虫灭虱、除湿止痒、收敛生饥，共为佐药；加之性味辛、凉，具有清热止痛，防腐、止痒、通窍之品薄荷、冰片为使药共奏清热解毒杀虫灭虱、燥湿止带、收敛生肌之功效。无十八反、十九畏之配伍禁忌。

本发明的有益效果在于：

1)对阴道常见致病菌及部分性传播感染病源体有杀灭或抑制作用，如金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、白色念珠菌、乙型链球菌、解脲脲原体、阴道毛滴虫及脆弱拟杆菌、单纯性疱疹病毒2型等，并通过抑制病原体与宿主阴道上皮细胞的黏附、提高阴道局部天然免疫作用防治多种下生殖道感染，如白色念珠菌阴道炎、滴虫性阴道炎、细菌性阴道病、生殖器疱疹病毒等。

2)不仅能有效防治下生殖道感染，同时还具有外用杀精的功效。与目前单纯阴道用杀精产品相比，局部刺激等不适反应少，对阴道具有保护作用，对乳酸菌影响甚微，同时还有防治生殖道炎症和润滑的作用。

3)与外用杀精剂壬苯醇醚具有良好的杀精避孕协同药效，在同等外用杀精抗生育药效下，可减少1/3～1/4壬苯醇醚用量，显著减轻壬苯醇醚的阴道刺激的副作用。正常状态下性交前使用，对阴道正常菌群(如乳酸杆菌)影响甚微；而在疾病情况下治疗使用，本发明药物可以促进阴道内乳杆菌、SIgA、SLPI逐渐恢复到正常水平，具有双重调节作用。

附图说明

图1为本发明药物浓度对大肠杆菌的杀菌时间曲线图。

图2为Western blot检测各组小鼠阴道SLPI表达图。

图3为小鼠阴道组织SLPI灰度比图。

具体实施方式

为了更好地解释本发明，以下结合附图和具体实施例对本发明作进一步的详细说明，但它们不对本发明构成限定。

实施例1

组成：黄柏10g、白果10g、龙葵30g、蒲公英15g、败酱草30g、白藓皮10g、土茯苓15g、薄荷10g、冰片0.3g、牡丹皮10g。

制备方法：

1)黄柏用6倍其重量的质量分数为70％乙醇加热回流提取二次，每次1小时，合并提取液，滤过，滤液备用；

2)牡丹皮进行水蒸气蒸馏，收集蒸馏液，约30ml，备用；

3)薄荷进行水蒸气蒸馏，收集蒸馏液，备用；

4)将白果、龙葵、蒲公英、败酱草、白藓皮、土茯苓与薄荷、黄柏和牡丹皮的残渣加水煎煮二次，加水量为药物总重量的8～10倍，每次1.5小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度为1.08～1.14，加乙醇使含醇量为50％，静置24小时，取上清液再加乙醇使含醇量为75％，静置24小时，取上清液，备用；

5)合并上述步骤1)与步骤4)的两种溶液，挥尽乙醇，加入牡丹皮的蒸馏液、薄荷的蒸馏液、冰片，搅匀，加水定容，搅匀，即得本发明的水剂。

药效实验

1、对多种阴道致病微生物的杀灭或抑制作用

将实施例1中所得到的兼具防治下生殖道感染的外用避孕药做体外抗菌活性检测，几种常见的菌种：金黄色葡萄球菌(SA)、大肠杆菌(EC)、乙型溶血性链球菌(ST)、白色念珠菌(CA)的检测结果如表1所示。

其中，MIC为在体外能够抑制细菌生长的最低药物浓度，MIC50、MIC90为在一批实验中能抑制50％或90％受试菌生长的最低药物浓度；

MBC为在体外能够使细菌总数减少(杀灭)99.9％以上的最低药物浓度，MBC50、MBC90为在一批实验中能使50％或90％受试菌的活菌数减少99.9％的最低药物浓度。

表1体外抗菌活性检测结果(单位：mg·ml^-1)

其中，本发明的药物浓度对大肠杆菌的杀菌时间曲线如图1所示。结果表明：作用24小时，本发明的药物浓度7.8mg·ml^-1能够轻微抑制大肠杆菌的生长，62.5mg·ml^-1可以使大肠杆菌的存活量迅速下降，125mg·ml^-1可以完全清除大肠杆菌。

本发明将所制得的药物与阳性对照药物红霉素进行比较，检测两种药物对解脲支原体(Uu)的MIC及MBC值，检测结果如表2所示。

表2对Uu的MIC及MBC值检测结果

由表2的检测结果说明：本发明对解脲支原体耐药株最小抑菌浓度MIC范围为：15.62～250(mg/ml)，最小杀菌浓度MBC的范围为：15.62～250(mg/ml)；耐药株MIC50≤31.25、MBC50≤62.5、MIC90≤125，MBC90≤250；非耐药株MIC范围为：15.62～125(mg/ml)；MBC的范围为：15.62～250(mg/ml)；非耐药株MIC50≤31.25、MBC50≤62.5，MIC90≤62.5,MBC90≤125。表明本产品对解脲支原体耐药株、非耐药株均有较好的抗病原体作用。

本发明体外研究了所制得的药物在单纯性疱疹病毒2型(HSV-2)的抗病毒作用。采用细胞病变(CPE)抑制法和MTT法进行实验，检测本发明药物和阳性对照药物无环鸟苷抗HSV-2的毒性数据，分别如表3、4所示。采用空斑法进行实验，检测本发明药物和阳性对照药物无环鸟苷对HSV-2吸附细胞的阻断作用，如表5所示。

表3CPE抑制法测药物抗HSV-2的毒性数据

表4MTT法测测药物抗HSV-2的毒性数据

表5空斑法检测药物对HSV-2吸附细胞的阻断作用

由表3、4体外实验的结果表明，在确定最低无细胞毒浓度基础上，本发明有良好的抗生殖器疱疹病毒的作用，与无环鸟苷相比，8mg/ml的本发明产品相当于1mg/ml无环鸟苷的抗病毒作用。由表5空斑法的结果表明，本发明阻断HSV-2与细胞的吸附是其抗病毒作用的机制之一。

通过琼脂稀释法研究表明本发明对厌氧菌脆弱拟杆菌的抑制作用，检测结果如表6所示。

表6各药物组对脆弱拟杆菌的MIC

药物	MIC
		本发明的药物	0.5g.ml-1
壬苯醇醚(N-9)	﹥20mg.ml-1
		甲硝唑	0.625ug.ml-1
本发明的药物与N-9混用	0.125g.ml-1+0.25mg.ml-1

由表6的结果表明，本发明对厌氧菌脆弱拟杆菌有抑制作用。

而且，通过实验进一步研究发现，本发明与N-9混用，对脆弱拟杆菌抑菌有协同作用。

2、对多种阴道炎防治

本发明通过实验分别研究了本发明药物(JZ1)、阳性对照药物10％壬苯醇醚(N-9)、联苯苄唑及本发明药物与壬苯醇醚合用的JZ2在给小鼠阴道灌洗，分析白色念珠菌菌丝检出率、炎症分值及预防率，分析检测结果如表7所示。

表7分析白色念珠菌的检测结果

组别	n	菌丝检出率(％)	阴性数	炎症分值	预防率(％)
						空白对照组	20	80	0	1.30±0.48	0
基质对照组	20	60	4	1.00±0.47	20
						JZ1高剂量	20	20**△△	13	0.40±0.52**△	65**△△Β
JZ1中剂量	20	30**	7	0.70±0.48	35*
						JZ1低剂量	20	40**	6	0.80±0.42	30*

10％N-9	20	50*	5	0.80±0.42	25*
						联苯苄唑	20	10**△△	13	0.40±0.52**△	65**△△Β
JZ2高剂量	20	10**△△	13	0.50±0.52**△	65**△Β
						JZ2中剂量	20	30**	7	0.70±0.48	35*
JZ2低剂量	20	30**	6	0.80±0.42	30*

注：与空白对照组比较：*表示P<0.05，**表示P<0.01；与基质对照组比较：△表示P<0.05，△△表示P<0.01；与10％N-9组比较：Β表示P<0.05。

由表7的检测结果表明：空白对照组菌丝检出率较其余各组高，感染率达100％。本发明药物高剂量组和联苯苄唑组的菌丝检出率、炎症分值均较空白对照组、基质对照组明显降低，且差异有统计学意义(P<0.05)；预防率可达65.0％，与空白对照组、基质对照组比较差异均有统计学意义(P<0.01)。本发明药物中、低剂量组、10％N-9组菌丝检出率及炎症分值均较空白对照组明显降低，预防率与空白对照组之间的差异有统计学意义(P<0.05)，但与基质对照组之间的差异无统计学意义(P>0.05)。高剂量的本发明药物预防率与联苯苄唑相当，比10％N-9效果好，且与之比较差异均有统计学意义(P<0.05)。

本发明通过实验进一步研究发现，将实施例1所制的药物与N-9混合使用，对白色念球菌抑菌有协同作用。

本发明通过实验研究了本发明药物对滴虫性阴道炎的预防作用。给小鼠接种培养好的滴虫液，造模。实验动物分组如表8所示：

表8实验动物分组

组别	动物数(只)
		2g·ml-1+10%N-9(JEH)	10
1g·ml-1+10%N-9(JEM)	10
		0.5g·ml-1+10%N-9(JEL)	10
2g·ml-1(JZH)	10
		1g·ml-1(JZM)	10
0.5g·ml-1(JZL)	10
		0.25g·ml-1(JZD)	10
10%N-9(N-9)	10
		甲硝唑组(MET)	10
基质对照组(CG)	10
		空白对照组(MOD)	12

在接种后的第2、4、7、10、12、14天观察上述几组小鼠阴道内有无活滴虫。各组不同时间感染率如表9所示。

表9各组小鼠在不同时间感染滴虫情况

注：与空白对照组比较：*表示P<0.05，**表示P<0.01；JE(H、M、L)组和JZ(H、M、L、D)组比较：△表示P<0.05，△△表示P<0.01；各组和MET组比较：▲表示P<0.05，▲▲表示P<0.01。

由表9的的检测结果表明：同一时间下，JE(H、M、L)组、JZ(H、M、L、D)组、N-9及甲硝唑各浓度组滴虫死亡率与空白对照组比较差异均有显著性意义，相同浓度时，滴虫死亡率随着作用时间的延长而增加。JE(H、M、L)组为本发明药物与N-9混合使用，实验表明使用JE(H、M、L)组药物作用2h滴虫全部死亡时，所需本发明药物的浓度为0.25g.ml^-1，所需的N-9浓度为0.625mg.ml^-1；而单用JZ1作用2小时滴虫全部死亡的浓度为0.5g.ml^-1，N-9浓度为1mg.ml^-1。这说明本发明药物和N-9混用，对阴道毛滴虫抑菌表现出较好的协同性。

3、杀精作用及阴道避孕对比实验

采用WHO推荐的Sander-Ceamer氏法，将市售的壬苯醇醚(N-9)、本发明的药物与本发明的药物和N-9混用分别进行体外杀精实验，对照测试结果如表10所示。

表10中，A表示为1g/ml本发明药物，B表示为0.5mg/ml的N-9，C表示为0.25mg/ml的N-9，D表示为0.125mg/ml的N-9E表示为0.0625mg/ml的N-9。

表10对人精子活动率及精子前向运动率的影响()

与相应浓度N-9单独使用组比较：*表示P＜0.05，**表示P＜0.01，***表示P＜0.001。

实验表明，本发明药物作用3min体外最低杀精浓度为1g/ml，失活精子活动均为恢复。本发明药物和N-9混用时，20s、3min的最低杀精浓度均比单独使用N-9时低，对正常人精子前向运动率、活动率和存活率的影响与相应浓度的N-9单独使用比较均有统计学差异，且未发现两药混合后有不良反应或沉淀产生。

本发明将市售的壬苯醇醚(N-9)、本发明的药物与本发明的药物和N-9混用分别进行大鼠体内杀精和避孕实验，对照测试结果分别如表11、12所示。

表11、12中，A表示为1g/ml本发明药物，B表示为14％的N-9，C表示为12％的N-9，D表示为10％的N-9，E表示为0.0625mg/ml的N-9。

表11药物对大鼠体内杀精对照实验结果

表12药物对大鼠体内避孕实验结果

组别	动物数	妊娠动物数	平均孕珠数	妊娠抑制率(避孕率％)
					自然对照组	15	15	12.80±1.22	0
基质对照组	15	13	9.60±4.00	13.33
					A	15	10	7.10±5.48	33.33
B	15	0	0.00±0.00**△△	100**△△
					C	15	4	1.90±4.33**△	83.33**△△
D	15	7	4.60±5.50	53.33*
					E	15	12	8.10±4.50	20
A+B	15	0	0.00±0.00**△△	100**△△
					A+C	15	0	0.00±0.00**△△	100**△△Β
A+D	15	2	1.20±3.79**△△	86.66**△△Β
					A+E	15	9	3.90±4.74*	40*

与自然对照组比较：*表示P＜0.05，**表示P＜0.01；与基质对照组比较：△表示P＜0.05，△△表示P＜0.01；与相同浓度N-9组比较：Β表示P＜0.05。

由表11、12的结果表明：本发明药物具有体内杀精作用，与与N-9具有协同杀精作用。本发明药物在与N-9混用时的避孕效果比相应浓度单独使用N-9好。

4、对阴道正常菌群影响实验

本发明通过实验研究本发明药物对阴道正常菌群的影响。先将小鼠随机分为4组，即：空白对照组、基质对照组、本发明药物组、10％N-9组。在正常状态下性交前，各药物组小鼠阴道内一次性给药，24h及72h两个时段观察。小鼠阴道内产H2O2乳杆菌菌落数和H2O2浓度的检测结果分别如表13、14所示。

表13H₂O₂乳杆菌菌落数(活菌数×10⁶CFU/mL，)

分组	产H2O2乳杆菌(24h)	产H2O2乳杆菌(72h)
			空白对照组	1.32±0.22▲	1.30±0.18▲
基质对照组	1.29±0.16▲	1.32±0.24▲
			本发明药物组	1.28±0.26▲	1.31±0.22▲
10％N-9组	0.40±0.13●	0.54±0.09●

注：组间比较：与空白对照组相比，^●表示P<0.01；与10％N-9相比，^▲表示P<0.01；其他任意两组相比，P＞0.05。组内比较：任意两组相比，P＞0.05。

表14小鼠阴道内H₂O₂浓度(mmol/L，)

分组	H2O2浓度(24h)	H2O2浓度(72h)
			空白对照组	12.60±5.77■	16.61±7.88■
基质对照组	12.86±5.43▲	16.63±5.47▲
			本发明药物组	11.88±5.47▲	12.02±5.32▲
10％N-9组	5.10±2.01●	6.75±5.50●

注：组间比较：与空白对照组相比，^●表示P<0.05；与10％N-9相比，^▲表示P<0.01，^■表示P＜0.05；其他任意两组相比，P＞0.05。组内比较：任意两组相比，P＞0.05。

由表13、14结果表明：本发明药物组24h及72h阴道产H₂O₂乳杆菌菌落数和H₂O₂浓度与空白对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05)，而10％N-9组阴道产H₂O₂乳杆菌菌落数和H₂O₂浓度与空白对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。即，本发明药物对正常状态下性交前使用对阴道正常菌群(如乳酸杆菌)影响甚微。

在疾病情况下(如白色念珠菌阴道炎)治疗时，本发明药物可以使阴道内乳杆菌逐渐恢复到正常水平，具有双重调节作用。

5、双重调节作用

本发明通过实验研究本发明药物的双重调节作用。先将小鼠随机分为7组，即：正常对照组、白色念珠菌模型组(简称“模型组”)、空白凝胶组、联苯苄唑凝胶组、浓度为2％的本发明凝胶药物组、浓度为1％的本发明凝胶药物组、小檗碱凝胶组。上述药物组在治疗阴道炎疾病前后，小鼠阴道分泌型免疫球蛋白A(SIgA)表达结果如表15所示。

表15小鼠阴道SIgA表达()

分组	n	治疗前	治疗后
				正常对照组	10	0.0267±0.0052	0.0317±0.0075
模型组	10	0.0567±0.0082☆	0.0850±0.0055☆
				空白凝胶组	10	0.0583±0.0075☆	0.0800±0.0063☆
联苯苄唑组	10	0.0550±0.0055☆	0.0383±0.0075△*
				2％本发明药物组	10	0.0567±0.0082☆	0.0383±0.0075△*
1％本发明药物组	10	0.0567±0.0052☆	0.0467±0.0082☆△
				小檗碱组	10	0.0583±0.0075☆	0.0467±0.0052☆△

注：☆表示与正常对照组相比P<0.05，△表示与模型组相比P<0.05，*表示与正常组相比P>0.05。

由表15结果表明：模型组和空白凝胶组在治疗后小鼠SIgA表达增多，与正常对照组相比有极显著性差异(P<0.05)；1％本发明药物组和小檗碱组在治疗后小鼠SIgA表达也有所增多，与正常组相比有显著性差异(P<0.05)，与模型组相比也有显著性差异(P<0.05)；联苯苄唑组和2％本发明药物组与正常组相比差异无统计学意义(P>0.05)。在治疗阴道炎时，使用合适浓度，即2％本发明药物可使SIgA逐渐恢复到正常水平，具有双重调节作用。

Western blot检测各组小鼠阴道用药后的阴道分泌性白细胞蛋白酶抑制剂(SLPI)表达如图2所示。小鼠阴道组织SLPI灰度比如图3所示。

图2、3中：1为正常对照组；2为模型组；3为空白凝胶组；4为联苯苄唑凝胶组；5为2％的本发明药物组；6为1％的本发明药物组；7为小檗碱凝胶组。

由图2、3结果表明：模型组和空白凝胶组小鼠SLPI表达增多，与正常组相比有极显著性差异(P<0.01)；1％本发明药物组和小檗碱组表达也有所增多，与正常组相比有显著性差异(P<0.05)，与模型组相比也有显著性差异(P<0.05)；联苯苄唑组和2％本发明药物组与正常组相比差异无统计学意义(P>0.05)，联苯苄唑组和2％本发明药物组与1％本发明药物组和小檗碱组相比差异有统计学意义(P<0.05)。因此，在治疗阴道炎时，使用合适浓度，即2％本发明药物可使SLPI逐渐恢复到正常水平，具有双重调节作用。

上述药效实验结果表明：

1)本发明的药物可以杀灭或抑制多种阴道致病微生物的作用，如金黄色葡萄球菌(SA)、大肠杆菌(EC)、乙型溶血性链球菌(ST)、白色念珠菌(CA)、解脲脲原体(Uu)、阴道毛滴虫及脆弱拟杆菌、单纯性疱疹病毒2型(HSV-2)；

2)本发明的药物对受试菌的活性依次为：阴道毛滴虫、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌(SA)、乙型溶血性链球菌(ST)、脆弱拟杆菌和白色念球菌(CA)；并且对Uu临床分离株有抑制作用；

3)本发明可通过抑制病原体与宿主阴道上皮细胞的黏附、防治多种阴道炎，如白色念珠菌阴道炎、滴虫性阴道炎、细菌性阴道病、生殖器疱疹病毒等，宫颈炎。本发明药物与壬苯醇醚混用，对阴道毛滴虫，脆弱拟杆菌和白色念球菌抑菌有协同作用；

4)本发明药物在体内外杀精、抗生育方面均与N-9有良好的协同作用；在相同避孕效果下，使用本发明药物可减少N-9的用药剂量，从而降低对阴道刺激性；

5)在治疗阴道炎疾病情况下，本发明药物可以使阴道内乳杆菌、SIgA、SLPI逐渐恢复到正常水平，具有双重调节作用。

Claims (3)

1.一种兼具防治下生殖道感染的外用避孕药，其特征在于，它是由下述重量份数的原料药制成的药剂：

黄柏10份、白果10份、龙葵30份、蒲公英15份、败酱草30份、白藓皮10份、土茯苓15份、薄荷10份、冰片0.3份、牡丹皮10份。

2.根据权利要求1所述的兼具防治下生殖道感染的外用避孕药，其特征在于：它是由所述十味原料药的提取物为活性成分，加入药学上可接受的辅料制备而成的药剂，所述的药剂为水剂、凝胶剂、膜剂、泡沫剂或可溶性避孕套。

3.一种根据权利要求2所述的兼具防治下生殖道感染的外用避孕药的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

1）黄柏用6倍其重量的质量分数为70%乙醇加热回流提取二次，每次1小时，合并提取液，滤过，滤液备用；

2）牡丹皮进行水蒸气蒸馏，收集蒸馏液，备用；

3）薄荷进行水蒸气蒸馏，收集蒸馏液，备用；

4）将白果、龙葵、蒲公英、败酱草、白藓皮、土茯苓与薄荷、黄柏和牡丹皮的残渣加水煎煮二次，加水量为药物总重量的8~10倍，每次1.5小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度为1.08~1.14，加乙醇使含醇量为50%，静置24小时，取上清液再加乙醇使含醇量为75%，静置24小时，取上清液，备用；

5）合并上述步骤1）与步骤4）的两种溶液，挥尽乙醇，加入牡丹皮的蒸馏液、薄荷的蒸馏液、冰片，搅匀，加水定容，搅匀，即得。