CN101293038A

CN101293038A - 胆木叶提取物及制备方法及其制剂与用途

Info

Publication number: CN101293038A
Application number: CNA2007100216805A
Authority: CN
Inventors: 肖伟; 戴翔翎; 凌娅; 丁岗; 王振中; 李明慧; 曹亮
Original assignee: Jiangsu Kanion Pharmaceutical Co Ltd
Current assignee: Jiangsu Kanion Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 2007-04-24
Filing date: 2007-04-24
Publication date: 2008-10-29
Anticipated expiration: 2027-04-24
Also published as: HK1121965A1; CN101293038B

Abstract

本发明公开了一种胆木叶提取物，其特征在于所述的提取物是通过下述方法之一获得的提取物：(1)胆木叶提取物，为中药胆木叶经水提除杂后所得提取物；(2)胆木叶提取物，为中药胆木叶经醇提除杂后所得提取物；(3)胆木叶提取物，为中药胆木叶经亲脂性有机溶剂提取除杂后所得提取物，所述的亲脂性有机溶剂包括但不仅限于正丁醇或醋酸乙酯。本发明还公开了胆木叶提取物的制备方法、制剂和新用途。本发明胆木叶提取物具有确切的清热解毒的功效。本发明的提取工艺简便合理，可得到有效部位。本发明开辟了从胆木叶中得到胆木叶提取物并用于清热解毒药物的先河，不仅有利于缓解原料短缺，而且有利于持续性、合理性开发利用和保护胆木资源。

Description

胆木叶提取物及制备方法及其制剂与用途

技术领域

本发明提供了一种中草药提取物，特别是一种胆木叶提取物；本发明还涉及该提取物的制备方法以及该提取物的药物制剂与医药用途。

背景技术

急性扁桃腺炎，是儿童及青壮年常见疾病，3岁以下、40岁以上少见。其病因主要是细菌或病毒感染，受凉及过度疲劳常为诱因；急性咽炎是咽粘膜并波及粘膜下及淋巴组织的急性炎症，常继发于急性鼻炎或急性扁桃体之后或为上呼吸道感染之一部分。亦常为全身疾病的局部表现或为急性传染病之前驱症状；急性结膜炎是眼结膜的急性炎症。是眼科临床最常见的球病。多见的病因为病毒、细菌和过敏反应。属中医“天行赤眼、暴风客热”范畴。以上均属上呼吸道感染范畴，上呼吸道感染90％以上由病毒、细菌感染引起，发病率极高，据南方医药经济研究所统计，我国1999年的门诊量为21亿人次，其中20％～30％是因为上呼吸道感染而就医，加上自购与自备药物治疗者，全国每年的患病人次高达10亿人次。目前临床治疗本病用药多为化学药，多采用抗生素、糖皮质激素、解热镇痛药等，均具有不同程度的毒副作用(包括肝、肾毒性)或耐药性，特别是滥用抗生素形成的后果尤为严重。据中国青年报2004年4月29日报道，我国已成为世界上滥用抗生素最为严重的国家之一，每年有8万人死于抗生素滥用。我国抗“非典”期间，临床治疗证明，大剂量糖皮质激素会造成病人骨坏死，临床已提出建议，须慎用糖皮质激素。

中药以其独有的优势替代临床大部分化学药物特别是抗生素的使用，能够减少抗生素滥用的风险，有利提高医疗质量，降低病人就医成本。因此，发现和研制中药、天然药物防治急性扁桃腺炎、急性咽喉炎、急性结膜炎及上呼吸道感染的药物具有重要意义。

胆木，又名乌檀，药乌檀，黄羊木，为茜草科乌檀属乔木乌檀干燥的茎、枝、树皮和根。生于高山近顶或半山腰荫蔽潮湿地带的杂木林中，分布广东(西部和西南部)、广西和海南等。胆木性味苦，寒，具有清热解毒，消肿止痛之功效。我国广西、广东和海南民间常用于感冒发热、肺炎、肠炎、痢疾、湿疹、皮疹、脓疡等病的治疗。国内目前有“胆木注射液”和“胆木浸膏片”中药制剂，临床用于急性扁桃腺炎，急性咽喉炎，急性结膜炎及上呼吸道感染。国内外对胆木的化学成分报导较少，主要为生物碱如乌檀费新碱(naucleficine)，乌檀费丁碱(nauclefidine)，乌檀福林碱(nauclefoline)等。“胆木注射液”和“胆木浸膏片”均以胆木心材作为原药材入药制备，年缺口500多吨，备受原料的制约。

但是，迄今为止，尚未见有从胆木叶部位得到提取物的制备工艺，也未见胆木叶提取物用于制备防治呼吸系统疾病药物用途的报导。以胆木叶代替胆木心材作为原药材，有利于持续性、合理性开发利用和保护胆木资源，具有明显的优势。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是针对现有技术的不足，提供一种新的制药原料胆木叶提取物。

本发明所要解决的另一个技术问题是提供了上述胆木叶提取物的一种制备方法。

本发明所要解决的另一个技术问题是提供了上述胆木叶提取物的制剂。

本发明所要解决的另一个技术问题是提供了上述胆木叶提取物的医药用途。

本发明所要解决的技术问题是采用以下的技术方案来实现的。本发明是一种胆木叶提取物，其特点是，所述的提取物是通过下述方法之一获得的提取物：

(1)胆木叶提取物，为中药胆木叶经水提除杂后所得提取物；

(2)胆木叶提取物，为中药胆木叶经醇提除杂后所得提取物；

(3)胆木叶提取物，为中药胆木叶经亲脂性有机溶剂提取除杂后所得提取物，所述的亲脂性有机溶剂包括但不仅限于醋酸乙酯或正丁醇。

本发明所述的亲脂性有机溶剂还可以是氯仿、异丙醇、戊醇、醋酸丁酯或其它亲脂性有机溶剂，下同。

本发明所说的胆木叶是茜草科植物乌檀的干燥的叶，包括生药和炮制品。

本发明所要解决的技术问题还可以通过以下的技术方案来进一步实现。以上所述的胆木叶提取物，其特点是，所述的水提除杂方法包括如下步骤：取胆木叶，加水提取，药渣再经0～5次水提取后，过滤，合并水提液，浓缩，用醇沉与/或过大孔树脂方法除去杂质，或者经包括但不仅限于氯仿、醋酸乙酯或正丁醇的有机溶剂萃取并回收有机溶剂，即得胆木叶提取物。

本发明所述的有机溶剂还可以是异丙醇、戊醇、醋酸丁酯或其它有机溶剂，下同。

本发明所要解决的技术问题还可以通过以下的技术方案来进一步实现。以上所述的胆木叶提取物，其特点是，所述的水提除杂方法包括如下步骤：取胆木叶，分别用3～15倍量的水提取1～5次，合并滤液，滤过，通过用50％以上浓度醇沉的方法或者用大孔树脂柱层析，收集30％～95％乙醇洗脱液，或者用包含但不仅限于氯仿、醋酸乙酯或正丁醇的有机溶剂萃取，收集萃取液并回收有机溶剂，除去杂质，即得胆木叶提取物。

本发明所要解决的技术问题还可以通过以下的技术方案来进一步实现。以上所述的胆木叶提取物，其特点是，所述的醇提除杂方法包括如下步骤：取胆木叶，加乙醇适量提取，再经0～5次乙醇提取后，过滤，合并提取液，浓缩，经水沉与/或过大孔树脂方法除去杂质，或者用包括但不仅限于氯仿、醋酸乙酯、正丁醇的有机溶剂萃取并回收有机溶剂，即得胆木叶提取物。

本发明所要解决的技术问题还可以通过以下的技术方案来进一步实现。以上所述的胆木叶提取物，其特点是，所述的醇提除杂方法包括如下步骤：取胆木叶，分别用3～15倍量的50％～95％乙醇提取1～5次，合并滤液，滤过，通过用水沉的方法或用大孔树脂柱层析，收集30％～95％乙醇洗脱液，或用包含但不仅限于氯仿、醋酸乙酯、正丁醇的有机溶剂萃取，除去杂质，滤过，滤液浓缩，得胆木叶提取物。

本发明所要解决的技术问题还可以通过以下的技术方案来进一步实现。以上所述的胆木叶提取物，其特点是，所述的亲脂性有机溶剂提取除杂提取方法包括如下步骤：取胆木叶，加亲脂性有机溶剂适量提取，此亲脂性有机溶剂包括但不仅限于醋酸乙酯或正丁醇，再经0～5次亲脂性有机溶剂提取后，过滤，合并提取液，回收有机溶剂，经水沉与/或过大孔树脂方法除去杂质，即得胆木叶提取物。

本发明所要解决的技术问题还可以通过以下的技术方案来进一步实现。以上所述的胆木叶提取物，其特点是，所述的亲脂性有机溶剂提取除杂提取方法包括如下步骤：取胆木叶，分别用5～15倍量的50％～95％亲脂性有机溶剂提取1～5次，合并滤液，滤过，此亲脂性有机溶剂包括但不仅限于醋酸乙酯或正丁醇，滤液回收有机溶剂，通过用水沉的方法或用大孔树脂柱层析，收集30％～95％乙醇洗脱液，除去杂质，滤过，滤液浓缩，即得胆木叶提取物。

本发明所要解决的技术问题还可以通过以下的技术方案来进一步实现。本发明还公开了一种以上技术方案所述的胆木叶提取物的制备方法，其特点是，它采用下述之一的方法步骤：

(1)胆木叶提取物的提取方法，是取中药胆木叶为原料，再经水提除杂的方法，得胆木叶提取物；

(2)胆木叶提取物的提取方法，是取中药胆木叶为原料，再经醇提除杂的方法，得胆木叶提取物；

(3)胆木叶提取物的提取方法，是取中药胆木叶为原料，再经亲脂性有机溶剂提取除杂，得胆木叶提取物；所述的亲脂性有机溶剂包括但不仅限于醋酸乙酯或正丁醇。

在上述提取方法中，胆木叶提取物可以采用回流法、浸渍法和渗漉法提取。

本发明所要解决的技术问题还可以通过以下的技术方案来进一步实现。以上所述的胆木叶提取物制备方法，其特点是，所述的水提除杂的方法是指以上胆木叶提取物技术方案中所述的水提除杂的方法步骤。

本发明所要解决的技术问题还可以通过以下的技术方案来进一步实现。以上所述的胆木叶提取物制备方法，其特点是，所述的醇提除杂的方法是指以上胆木叶提取物技术方案中所述的醇提除杂的方法步骤。

本发明所要解决的技术问题还可以通过以下的技术方案来进一步实现。以上所述的胆木叶提取物制备方法，其特点是，所述的亲脂性有机溶剂提取除杂的方法是指以上胆木叶提取物技术方案中所述的亲脂性有机溶剂提取除杂的方法步骤。

本发明所要解决的技术问题还可以通过以下的技术方案来进一步实现。本发明还公开了一种如以上任何一项技术方案中所述的胆木叶提取物或者其制备方法所制得的胆木叶提取物制剂，其特点是，它以胆木叶提取物为有效原料，加入药剂学上可接受的药用辅料，制成临床上可接受的任何一种剂型的药剂，其剂型包括但不限于胶囊剂、软胶囊剂、片剂、丸剂、滴丸剂、颗粒剂、口服液体制剂、注射液和冻干粉针剂。

本发明胆木叶提取物的用途为在制备清热解毒药物中的应用，其病症包括急性扁桃腺炎、急性咽喉炎、急性结膜炎及上呼吸道感染。

以下是发明人所做的药效作用实验。

1、胆木叶提取物体外抗菌作用。

精密定量称取受试样品胆木叶提取物，用无菌水配制成50mg/ml的溶液。然后将配制的药液分别用适量无菌水进行倍比稀释，使各药液成一系列浓度梯度，依次是：50，25，12.5，6.25，3.13，1.57，0.79，0.40，0.20，0.10(mg/ml)。然后取各梯度药液2ml，分别加入到无菌平皿(平皿直径9cm)中，再加入已灭菌融化的保温于55℃水浴中的MH培养基18ml，立即充分混匀，冷凝后待用。这样，各含药平板中药物的最终浓度依次为：5，2.5，1.25，0.625，0.313，0.157，0.079，0.04，0.02，0.01(mg/ml)。同时设空白对照，只加入20ml的琼脂培养基。将已预先活化的各试验菌株分别接种到2ml培养液中，37℃培养过夜，再用相应的培养液作适当的稀释，使菌液浓度约为：10⁷～10⁸(CFU/ml)(控制菌液浓度方法：用分光光度计测定培养液的光密度，然后作适当的稀释)。然后用多点接种仪点种各试验菌于各含药的MH培养基平板上，空白对照同时进行。每点含菌量约为：10⁴～10⁵(CFU)。37℃，培养24小时，观察并记录各菌的最低抑菌浓度MIC值，并计算MIC。

体外抗菌试验结果表明：胆木叶提取物对各试验菌株均具有抗菌活性。结果见表1。

表1胆木叶提取物体外对致病性细菌的MIC值的测定(MIC：mg/ml)

2.胆木叶提取物体内抗菌作用

2.1对金黄色葡萄球菌感染小鼠的保护作用

菌液制备：取临床分离金黄色葡萄球菌接种于营养肉汤培养基中，置37℃孵箱培养18h。取出，划线于血平板上(10％羊红细胞营养琼脂平板)，37℃孵箱培养20h。取出，用6ml 5％的胃膜素(PH 7.2)洗脱菌落，并用4ml生理盐水溶液将血平板冲洗干净，合并后吹打，使菌落分散并分别用生理盐水配成0.33ml/ml、0.20ml/ml、0.11ml/ml、0.06ml/ml浓度菌液备用。选择合适的菌液浓度：取ICR小鼠40只，♀

各半，体重18～22g。随机分组，每组1个浓度，腹腔注射金黄色葡萄球菌菌液，每鼠0.5ml，观察感染小鼠死亡数，结果感染小鼠死亡率分别为100％、100％、90％、40％。故实验选用0.11ml/ml浓度菌液。

正式试验：取ICR小鼠240只，体重18～22g，

♀各半。

取ICR小鼠120只，随机分6组，每组20只。正常对照组(灌胃)、模型组(灌胃)、双黄连口服液组(10ml/kg)和胆木叶提取物I、II、III组(10mg/kg、50mg/kg、250mg/kg)。以上各组小鼠均灌胃给药，1次/天×5天。

另取ICR小鼠120只，随机分6组，每组20只。即正常对照组(注射)、模型组(注射)、双黄连注射液组(10ml/kg)和胆木叶提取物I、II、III组(2mg/kg、10mg/kg、50mg/kg)。以上各组小鼠均注射给药，1次/天×5天。

第3天给药后，除空白对照组以外，其余各组均腹腔注射金黄色葡萄球菌培养液0.5ml/鼠(菌液浓度0.11ml/ml)。然后继续给药2天。观察各组动物7日内死亡情况。

实验结果显示：胆木叶提取物对金黄色葡萄球菌感染小鼠具有明显的保护作用。见表2、3。

表2胆木叶提取物灌胃给药对金黄色葡萄球菌感染小数死亡的保护作用

^##p＜0.01与正常对照组比较；^＊p＜0.05 ^＊＊p＜0.01与模型组比较

表3胆木叶提取物注射给药对金黄色葡萄球菌感染小数死亡的保护作用

^##p＜0.01与正常对照组比较；^*p＜0.05 ^**p＜0.01与模型组比较

2.2对肺炎双球菌感染小鼠的保护作用

菌液制备：取临床分离肺炎双球菌接种入营养肉汤培养基中，置37℃孵箱培养18h。取出，划线于血平板上(1％羊红细胞营养琼脂平板)，37℃孵箱培养24h，取出。用6ml 5％的胃膜素(PH 7.2)洗脱菌落，并用4ml生理盐水溶液将血平板冲洗干净，合并后吹打，使菌落分散。用生理盐水配成1ml/ml、0.5ml/ml、0.33ml/ml、0.25ml/ml浓度菌液备用。选择合适的菌液浓度：取ICR小鼠40只，♀

各半，体重18～22g随机分组，每组1个浓度，腹腔注射肺炎双球菌菌液0.5ml/鼠，观察感染小鼠死亡数，结果感染小鼠死亡率分别为100.0％，100.0％，60.0％，30.0％。故实验选用0.45ml/ml浓度菌液(小鼠死亡率估计80～90％之间)。

正式试验：取ICR小鼠240只，体重18～22g，

♀各半。

第3天给药1小时后，除正常对照组外，其余各组均腹腔注射肺炎双球菌培养液0.5ml/鼠(菌液浓度0.45ml/ml)。然后继续给药2天。观察各组动物7日内死亡情况。

实验结果显示：胆木叶提取物灌胃(口服)及注射对肺炎双球菌感染小鼠都具有保护作用。见表4、5。

表4胆木叶提取物灌胃对肺炎双球菌感染小鼠死亡的保护作用

表5胆木叶提取物注射对肺炎双球菌感染小鼠死亡的保护作用

3、胆木叶提取物体外抗病毒作用

胆木叶提取物对甲型流感病毒和乙型流感病毒致细胞病变的抑制作用。

在长成单层细胞的MDCK培养板中，每孔感染甲型流感病毒或乙型流感病毒100TCID₅₀。吸附1h后倾去病毒液，分别加入不同浓度的胆木叶提取物药液，37℃5％CO₂培养箱中培养，观察细胞病变。同时设细胞对照组，利巴韦林组(10mg/ml)和病毒对照组。

实验结果显示：胆木叶提取物能够抑制甲型流感病毒对MDCK细胞的毒性作用；也能够抑制乙型流感病毒对MDCK细胞的毒性作用。表明胆木叶提取物具有体外抗病毒的作用。见表6-7。

表6胆木叶提取物对甲型流感病毒的抑制作用

注：-无细胞病变；+25％细胞病变；++50％细胞病变；+++75％细胞病变；++++100％细胞病变。

表7胆木叶提取物对乙型流感病毒的抑制作用

4、胆木叶提取物体内抗病毒作用

4.1对甲型流感病毒感染小鼠死亡的保护作用

取ICR小鼠240只，体重18～22g，

♀各半。

取ICR小鼠120只，随机分6组，每组20只。正常对照组(灌胃)、模型组(灌胃)、双黄连口服液组(10ml/kg)和胆木叶提取物I、II、III组(10mg/kg、50mg/kg、250mg/kg)。以上各组小鼠均灌胃给药。

另取ICR小鼠120只，随机分6组，每组20只。即正常对照组(注射)、模型组(注射)、双黄连注射液组(10ml/kg)和胆木叶提取物I、II、III组(2mg/kg、10mg/kg、50mg/kg)。以上各组小鼠均注射给药。

给药1h后除空白对照组外，其余各组在乙醚浅麻醉下，以血凝试验640以上的尿囊液给小鼠滴鼻感染，每鼠30μl(20个LD₅₀致死量)，观察14天内动物感染后发病及死亡情况。

实验结果显示：胆木叶提取物灌胃(口服)及注射均可明显延长甲型流感病毒感染小鼠的存活天数，显著降低甲型流感病毒感染小鼠死亡数。表明胆木叶提取物对甲型流感病毒感染小鼠具有明显的保护作用。见表8、9。

表8胆木叶提取物灌胃对甲型流感病毒感染小鼠死亡的保护作用

表9胆木叶提取物注射对甲型流感病毒感染小鼠死亡的保护作用

^##p＜0.01与空白对照组比较；^＊p＜0.05 ^＊＊p＜0.01与模型组比较

4.2对甲型流感病毒感染小鼠肺病变的影响

取ICR小鼠120只，体重13～16g，

♀各半。

取ICR小鼠60只，随机分6组，每组10只。正常对照组(灌胃)、模型组(灌胃)、利巴韦林组(0.5g/kg)和胆木叶提取物I、II、III组(10mg/kg、50mg/kg、250mg/kg)。以上各组小鼠均灌胃给药，1次/天×5天。

另取ICR小鼠60只，随机分6组，每组10只。即正常对照组(注射)、模型组(注射)、穿琥宁注射液组(133mg/kg)和胆木叶提取物I、II、III组(2mg/kg、10mg/kg、50mg/kg)。以上各组小鼠均注射给药，1次/天×5天。

除空白对照组外，其余各组于给药第1天，在乙醚浅麻醉下以病毒尿囊液滴鼻感染小鼠，每鼠30μl(15个LD₅₀攻击量)。然后继续给药4天。末次给药后将小鼠禁食(不禁水)，次日进行下列实验：取肺，用1％甲醛溶液固定后，常规取材，脱水，石蜡包埋，制片，HE染色后作病理组织学检查，观察肺部病变程度。实验结果如下见表10、11。

表10胆木叶提取物灌胃对甲型流感病毒感染小鼠肺病变的影响

^#p＜0.01与正常对照组比较；^＊p＜0.05 ^＊＊p＜0.01与模型组比较

表11胆木叶提取物注射对甲型流感病毒感染小鼠肺病变的影响

注：1.病变积分根据病变程度不同，依次标记为“-”、“+”、“++”、“+++”、“++++”。“-”为无明显改变，记为0分；“+”为轻度病变改变，记为1分；“++”为中度病理改变，记为2分；“+++”为重度病理改变，记为3分；“++++”为极重度病理改变，记为4分。积分值越高，表示病变程度越重。2.统计采用秩和检验。

上述结果显示：胆木叶提取物能减轻甲型流感病毒所致小鼠的肺部感染，具有抗甲型流感病毒的作用。

4.3对乙型流感病毒感染小鼠死亡的保护作用

取ICR小鼠240只，体重18～22g，

♀各半。

给药1h后除空白对照组外，其余各组在乙醚浅麻醉下，以血凝试验640以上的尿囊液给小鼠滴鼻感染，每鼠40μl(20个LD₅₀致死量)，观察14天内动物感染后发病及死亡情况。

实验结果显示胆木叶提取物可明显延长乙型流感病毒感染小鼠的存活天数，也可降低甲型流感病毒感染小鼠死亡数。表明胆木叶提取物对甲型流感病毒感染小鼠具有一定的保护作用。

表12胆木叶提取物灌胃对乙型流感病毒感染小鼠死亡的保护作用

表13胆木叶提取物注射对乙型流感病毒感染小鼠死亡的保护作用

4.4对乙型流感病毒感染小鼠肺病变的影响

取ICR小鼠120只，体重13～16g，

♀各半。

除空白对照组外，其余各组于给药第1天，在乙醚浅麻醉下以病毒尿囊液滴鼻感染小鼠，每鼠30μl(20个LD₅₀攻击量)。然后继续给药5天。末次给药后将小鼠禁食(不禁水)，次日进行下列实验：取肺，用1％甲醛溶液固定后，常规取材，脱水，石蜡包埋，制片，HE染色后作病理组织学检查，观察肺部病变程度。实验结果如下见表9。胆木叶提取物灌胃给药及注射给药均能减轻乙型流感病毒所致小鼠的肺部感染，具有抗乙型流感病毒的作用。

表14胆木叶提取物灌胃对乙型流感病毒感染小鼠肺病变的影响

表15胆木叶提取物注射对乙型流感病毒感染小鼠肺病变的影响

5、胆木叶提取物抗炎镇痛作用

5.1对小鼠耳廓肿胀的影响

取正常ICR小鼠100只，体重25～30g，雄性。

取50只随机分为5组，每组10只小鼠，即正常对照组(灌胃)、乙酰水杨酸组(0.11g/kg)和胆木叶提取物低、中、高剂量组(10mg/kg、50mg/kg、250mg/kg)，分别灌胃给予相应药物(正常对照组灌胃给予等容积蒸馏水)，每日一次，连续3日。

另取50只随机分为5组，每组10只小鼠，即正常对照组(注射)、醋酸地塞米松注射液组(4mg/kg)和胆木叶提取物低、中、高剂量组(2mg/kg、10mg/kg、50mg/kg)，分别注射给予相应药物(正常对照组注射给予等容积生理盐水)，每日一次，连续3日。

第3日各灌胃组给药40min、各注射组给药5min后，分别用2％巴豆油0.05ml涂于小鼠左耳前后两面，在致炎4h后处死小鼠，沿耳廓基线剪下左右两耳，用打孔器(直径9mm)分别在同一部位取下圆耳片，电子天平称重，以小鼠左右耳壳重量之差值作为耳壳肿胀度，并计算肿胀百分率。

胆木叶提取物灌胃、注射给药组均能减轻巴豆油致小鼠耳肿胀度，降低肿胀率，与对照组相比有显著性差异(p＜0.05，p＜0.01)。表明胆木叶提取物具有显著的抗炎作用，结果见表16。

表16胆木叶提取物灌胃及注射对巴豆油所致小鼠耳肿胀的影响(X±S)

注：与正常对照组(灌胃)相比，^＊p＜0.05，^＊＊p＜0.01；与正常对照组(注射)相比，^Δp＜0.05，^ΔΔp＜0.01

5.2对乙酸腹腔刺激致小鼠疼痛反应的影响

取正常ICR小鼠100只，体重25～30g，雄性。

另取50只随机分为5组，每组10只小鼠，即正常对照组(注射)、吗啡组(10mg/kg)和胆木叶提取物低、中、高剂量组(2mg/kg、10mg/kg、50mg/kg)，分别注射给予相应药物(正常对照组注射给予等容积生理盐水)，每日一次，连续3日。

第3日各灌胃组给药40min、各注射组给药5min后，各组小鼠腹腔注射0.6％乙酸0.2ml/只，观察注射乙酸后15min内各组小鼠出现的扭体反应动物数和扭体反应次数。

胆木叶提取物灌胃、注射给药组均能减少小鼠扭体次数，与正常对照组相比有显著性差异(p＜0.05，p＜0.01)。表明胆木叶提取物具有镇痛作用，结果见表17。

表17胆木叶提取物灌胃及注射对乙酸腹腔刺激致小鼠疼痛反应的影响(X±S)

注：与正常对照组(灌胃)相比，^＊p＜0.05，^＊＊p＜0.01；与正常对照组(注射)相比，^Δp＜0.05，^△△p＜0.01

6、胆木叶提取物解热作用

对干酵母所致大鼠发热的解热作用

取雄性SD大鼠180只，体重160～180g。测正常体温，每日2次，连续3日。实验日每小时测体温1次，连续3次，选取体温变动不高于0.3℃的大鼠用于实验。取合格大鼠，每鼠于背部皮下注射20％干酵母溶液15ml/kg。4小时后若大鼠体温升高＞1℃者进行分组给药。

选取发热合格大鼠100只，随机分为10组：(1)空白对照I组：生理盐水5ml/kg；(2)双黄连注射液组：5ml/kg；(3)胆木叶提取物注射I组：1mg/kg；(4)胆木叶提取物注射II组：5mg/kg；(5)胆木叶提取物注射III组：25mg/kg；(6)空白对照II组：生理盐水5ml/kg；(7)双黄连口服液组：5ml/kg；(8)胆木叶提取物灌胃I组：5mg/kg；(9)胆木叶提取物灌胃II组：25mg/kg；(10)胆木叶提取物灌胃III组：125mg/kg。

(1)、(2)、(3)、(4)、(5)组均按5ml/kg静脉注射给药；(6)、(7)、(8)、(9)、(10)均按5ml/kg灌胃给药。于给药后15、30、45、60、90、120、180、240min观察大鼠体温变化。

结果进行组间比较。显示，胆木叶提取物注射各给药组在注射给药后能明显降低干酵母所致大鼠体温，与空白对照组比较具有显著性差异(P＜0.05，0.01)；胆木叶提取物在灌胃给药后对亦有一定的降低干酵母所致大鼠体温升高的作用的，表明胆木叶提取物具有抗高热的作用，胆木叶提取物静脉给药的降温作用比灌胃给药作用强。见表18、19。

表18胆木叶提取物对干酵母所致大鼠发热的影响(静脉注射给药)(x±s)

^＊p＜0.05，^＊＊p＜0.01与空白对照I组比较

表19胆木叶提取物对干酵母所致大鼠发热的影响(灌胃给药)(x±s)

^＊p＜0.05，^＊＊p＜0.01与空白对照II组比较

本发明的有益效果如下：

1.本发明的提取工艺简便合理，可得到有效部位。

2.经实验证明，本发明胆木叶提取物具有确切的清热解毒的功效。所说的病症包括急性扁桃腺炎、急性咽喉炎、急性结膜炎及上呼吸道感染。

3.本发明提取物具有体内、体外抗菌活性。对24种临床分离菌具有显著的体外抑制作用；对金黄色葡萄球菌感染小鼠(体内)、肺炎双球菌感染小鼠具有保护作用。

4.本发明提取物具有体内、体外抗病毒活性。对甲型流感病毒和乙型流感病毒致细胞病变具有抑制作用；对甲型流感病毒感染小鼠具有明显的保护作用；能减轻甲型流感病毒所致小鼠的肺部感染；能减轻乙型流感病毒所致小鼠的肺部感染，具有抗乙型流感病毒的作用。

5.本发明提取物具有抗炎镇痛作用。能减轻巴豆油致小鼠耳肿胀度，降低肿胀率，具有显著的抗炎作用；能减少小鼠扭体次数，具有镇痛作用。

6.本发明提取物具有解热作用。能明显降低干酵母所致大鼠体温，有一定的降低干酵母所致大鼠体温升高的作用。

本发明克服了原有技术的技术偏见，开辟了从胆木叶中得到胆木叶提取物并用于清热解毒药物的先河，不仅有利于缓解原料短缺，而且有利于持续性、合理性开发利用和保护胆木资源。

具体实施方式

实施例1。一种胆木叶提取物，它是通过下述方法之一获得的提取物：

(1)胆木叶提取物，为中药胆木叶经水提除杂后所得提取物；

(2)胆木叶提取物，为中药胆木叶经醇提除杂后所得提取物；

(3)胆木叶提取物，为中药胆木叶经亲脂性有机溶剂提取除杂后所得提取物，所述的亲脂性有机溶剂为正丁醇或醋酸乙酯。

实施例2。一种胆木叶提取物，它是通过下述方法之一获得的提取物：

(1)胆木叶提取物，为中药胆木叶经水提除杂后所得提取物；

(2)胆木叶提取物，为中药胆木叶经醇提除杂后所得提取物；

(3)胆木叶提取物，为中药胆木叶经亲脂性有机溶剂提取除杂后所得提取物，所述的亲脂性有机溶剂是氯仿、异丙醇、戊醇、醋酸乙酯、醋酸丁酯或其它亲脂性有机溶剂。

实施例3。一种胆木叶提取物，它是通过下述水提除杂方法获得的提取物：所述的水提除杂方法包括如下步骤：取胆木叶，加水提取，过滤，浓缩，用醇沉方法除去杂质，即得胆木叶提取物。

实施例4。一种胆木叶提取物，它是通过下述水提除杂方法获得的提取物：所述的水提除杂方法包括如下步骤：取胆木叶，加水提取，药渣再经1次水提取后，过滤，合并水提液，浓缩，过大孔树脂方法除去杂质，即得胆木叶提取物。

实施例5。一种胆木叶提取物，它是通过下述水提除杂方法获得的提取物：所述的水提除杂方法包括如下步骤：取胆木叶，加水提取，药渣再经2次水提取后，过滤，合并水提液，浓缩，用醇沉与过大孔树脂方法除去杂质，即得胆木叶提取物。

实施例6。一种胆木叶提取物，它是通过下述水提除杂方法获得的提取物：所述的水提除杂方法包括如下步骤：取胆木叶，加水提取，药渣再经3次水提取后，过滤，合并水提液，浓缩，经有机溶剂氯仿、醋酸乙酯或正丁醇萃取并回收有机溶剂，即得胆木叶提取物。

实施例7。一种胆木叶提取物，它是通过下述水提除杂方法获得的提取物：所述的水提除杂方法包括如下步骤：取胆木叶，加水提取，药渣再经5次水提取后，过滤，合并水提液，浓缩，经有机溶剂异丙醇、戊醇、醋酸乙酯、醋酸丁酯或其它有机溶剂萃取并回收有机溶剂，即得胆木叶提取物。

实施例8。一种胆木叶提取物，它是通过下述水提除杂方法获得的提取物：所述的水提除杂方法包括如下步骤：取胆木叶，分别用3倍量的水提取1次，合并滤液，滤过，用50％以上浓度醇沉的方法除去杂质，即得胆木叶提取物。

实施例9。一种胆木叶提取物，它是通过下述水提除杂方法获得的提取物：所述的水提除杂方法包括如下步骤：取胆木叶，分别用15倍量的水提取5次，合并滤液，滤过，通过用大孔树脂柱层析，收集30％～95％乙醇洗脱液，除去杂质，即得胆木叶提取物。

实施例10。一种胆木叶提取物，它是通过下述水提除杂方法获得的提取物：所述的水提除杂方法包括如下步骤：取胆木叶，分别用9倍量的水提取3次，合并滤液，滤过，用有机溶剂氯仿、醋酸乙酯或正丁醇萃取，收集萃取液并回收有机溶剂，除去杂质，即得胆木叶提取物。

实施例11。一种胆木叶提取物，它是通过下述水提除杂方法获得的提取物：所述的水提除杂方法包括如下步骤：取胆木叶，分别用6倍量的水提取4次，合并滤液，滤过，用有机溶剂异丙醇、戊醇、醋酸乙酯、醋酸丁酯或其它有机溶剂萃取，收集萃取液并回收有机溶剂，除去杂质，即得胆木叶提取物。

实施例12。一种胆木叶提取物，它是通过下述醇提除杂方法获得的提取物：所述的醇提除杂方法包括如下步骤：取胆木叶，加乙醇适量提取，过滤，浓缩，经水沉方法除去杂质，即得胆木叶提取物。

实施例13。一种胆木叶提取物，它是通过下述醇提除杂方法获得的提取物：所述的醇提除杂方法包括如下步骤：取胆木叶，加乙醇适量提取，再经1次乙醇提取后，过滤，合并提取液，浓缩，过大孔树脂方法除去杂质，即得胆木叶提取物。

实施例14。一种胆木叶提取物，它是通过下述醇提除杂方法获得的提取物：所述的醇提除杂方法包括如下步骤：取胆木叶，加乙醇5倍量提取1次，再经10倍量乙醇提取2次后，过滤，合并提取液，浓缩，经水沉与过大孔树脂方法除去杂质，即得胆木叶提取物。

实施例15。一种胆木叶提取物，它是通过下述醇提除杂方法获得的提取物：所述的醇提除杂方法包括如下步骤：取胆木叶，加乙醇8倍量提取，再经12倍量乙醇提取3次后，过滤，合并提取液，浓缩，用有机溶剂氯仿、醋酸乙酯或正丁醇的萃取并回收有机溶剂，除去杂质，即得胆木叶提取物。

实施例16。一种胆木叶提取物，它是通过下述醇提除杂方法获得的提取物：所述的醇提除杂方法包括如下步骤：取胆木叶，加乙醇12倍量提取，再经15倍量乙醇提取5次后，过滤，合并提取液，浓缩，用有机溶剂异丙醇、戊醇、醋酸乙酯、醋酸丁酯或其它有机溶剂萃取并回收有机溶剂，除去杂质，即得胆木叶提取物。

实施例17。一种胆木叶提取物，它是通过下述醇提除杂方法获得的提取物：所述的醇提除杂方法包括如下步骤：取胆木叶，分别用3倍量的95％乙醇提取5次，合并滤液，滤过，通过用水沉的方法除去杂质，即得胆木叶提取物。

实施例18。一种胆木叶提取物，它是通过下述醇提除杂方法获得的提取物：所述的醇提除杂方法包括如下步骤：取胆木叶，用15倍量的50％乙醇提取3次，合并滤液，滤过，用大孔树脂柱层析，收集30％～95％乙醇洗脱液，除去杂质，即得胆木叶提取物。

实施例19。一种胆木叶提取物，它是通过下述醇提除杂方法获得的提取物：所述的醇提除杂方法包括如下步骤：取胆木叶，分别用9倍量的70％乙醇提取2次，合并滤液，滤过，用有机溶剂氯仿、醋酸乙酯或正丁醇萃取，除去杂质，即得胆木叶提取物。

实施例20。一种胆木叶提取物，它是通过下述醇提除杂方法获得的提取物：所述的醇提除杂方法包括如下步骤：取胆木叶，分别用6倍量的60％乙醇提取4次，合并滤液，滤过，用有机溶剂异丙醇、戊醇、醋酸乙酯、醋酸丁酯或其它有机溶剂萃取，除去杂质，即得胆木叶提取物。

实施例21。一种胆木叶提取物，它是通过下述醇提除杂方法获得的提取物：所述的醇提除杂方法包括如下步骤：取胆木叶，分别用12倍量的80％乙醇提取3次，合并滤液，滤过，通过用水沉的方法除去杂质，即得胆木叶提取物。

实施例22。一种胆木叶提取物，它是通过下述亲脂性有机溶剂提取除杂提取方法获得的提取物：该方法包括如下步骤：取胆木叶，加亲脂性有机溶剂正丁醇适量提取，过滤，回收有机溶剂正丁醇，经水沉方法除去杂质，即得胆木叶提取物。

实施例23。一种胆木叶提取物，它是通过下述亲脂性有机溶剂提取除杂提取方法获得的提取物：该方法包括如下步骤：取胆木叶，加亲脂性有机溶剂醋酸乙酯适量提取，再经1次醋酸乙酯提取后，过滤，合并提取液，回收有机溶剂，过大孔树脂方法除去杂质，即得胆木叶提取物。

实施例24。一种胆木叶提取物，它是通过下述亲脂性有机溶剂提取除杂提取方法获得的提取物：该方法包括如下步骤：取胆木叶，加亲脂性有机溶剂氯仿或异丙醇适量提取，再经3次氯仿或异丙醇提取后，过滤，合并提取液，回收有机溶剂，经水沉与过大孔树脂方法除去杂质，即得胆木叶提取物。

实施例25。一种胆木叶提取物，它是通过下述亲脂性有机溶剂提取除杂提取方法获得的提取物：该方法包括如下步骤：取胆木叶，加亲脂性有机溶剂戊醇、醋酸乙酯、醋酸丁酯或其它亲脂性有机溶剂适量提取，再经5次相同的提取后，过滤，合并提取液，回收有机溶剂，过大孔树脂方法除去杂质，即得胆木叶提取物。

实施例26。一种胆木叶提取物，它是通过下述亲脂性有机溶剂提取除杂提取方法获得的提取物：该方法包括如下步骤：取胆木叶，用5倍量的95％亲脂性有机溶剂正丁醇或醋酸乙酯提取1次，滤过，滤液回收有机溶剂，通过用水沉的方法除去杂质，即得胆木叶提取物。

实施例27。一种胆木叶提取物，它是通过下述亲脂性有机溶剂提取除杂提取方法获得的提取物：该方法包括如下步骤：取胆木叶，分别用15倍量的50％亲脂性有机溶剂乙酯戊醇或醋酸乙酯提取5次，合并滤液，滤过，用大孔树脂柱层析，收集30％～95％乙醇洗脱液，除去杂质，即得胆木叶提取物。

实施例28。一种胆木叶提取物，它是通过下述亲脂性有机溶剂提取除杂提取方法获得的提取物：该方法包括如下步骤：取胆木叶，分别用9倍量的70％亲脂性有机溶剂戊醇提取2次，合并滤液，滤过，滤液回收有机溶剂，用大孔树脂柱层析，收集30％～95％乙醇洗脱液，除去杂质，即得胆木叶提取物。

实施例29。一种胆木叶提取物，它是通过下述亲脂性有机溶剂提取除杂提取方法获得的提取物：该方法包括如下步骤：取胆木叶，分别用7倍量的60％亲脂性有机溶剂醋酸丁酯提取3次，合并滤液，滤过，滤液回收有机溶剂，通过用水沉的方法除去杂质，即得胆木叶提取物。

实施例30。一种胆木叶提取物，它是通过下述亲脂性有机溶剂提取除杂提取方法获得的提取物：该方法包括如下步骤：取胆木叶，分别用12倍量的80％亲脂性有机溶剂正丁醇提取4次，合并滤液，滤过，滤液回收有机溶剂，通过用水沉的方法除去杂质，即得胆木叶提取物。

实施例31。一种胆木叶提取物的制备方法，它采用下述之一的方法步骤：

(3)胆木叶提取物的提取方法，是取中药胆木叶为原料，再经亲脂性有机溶剂提取除杂，得胆木叶提取物；所述的亲脂性有机溶剂为正丁醇或醋酸乙酯。

实施例32。一种胆木叶提取物的制备方法，它采用下述之一的方法步骤：

(3)胆木叶提取物的提取方法，是取中药胆木叶为原料，再经亲脂性有机溶剂提取除杂，得胆木叶提取物；所述的亲脂性有机溶剂为氯仿、异丙醇、戊醇、醋酸乙酯、醋酸丁酯或其它亲脂性有机溶剂。

实施例33。一种胆木叶提取物的制备方法，它以中药胆木叶为原料，采用实施例3-11中的任何一项中所述的水提除杂方法步骤制得胆木叶提取物。

实施例34。一种胆木叶提取物的制备方法，它以中药胆木叶为原料，采用实施例12-21中的任何一项中所述的醇提除杂方法步骤制得胆木叶提取物。

实施例35。一种胆木叶提取物的制备方法，它以中药胆木叶为原料，采用实施例22-30中的任何一项中所述的亲脂性有机溶剂提取除杂步骤制得胆木叶提取物。

实施例36。一种胆木叶提取物制剂，它以实施例1或2或3或4所述的胆木叶提取物为有效原料，加入药剂学上可接受的药用辅料，制成胶囊剂。用于治疗急性扁桃腺炎、急性咽喉炎、急性结膜炎或上呼吸道感染疾病。

实施例37。一种胆木叶提取物制剂，它以实施例5或6或7或8所述的胆木叶提取物为有效原料，加入药剂学上可接受的药用辅料，制成软胶囊剂。作为清热解毒的药物。

实施例38。一种胆木叶提取物制剂，它以实施例9或10或11或12所述的胆木叶提取物为有效原料，加入药剂学上可接受的药用辅料，制成片剂。作为清热解毒的药物或者用于治疗急性扁桃腺炎、急性咽喉炎、急性结膜炎或上呼吸道感染疾病。

实施例39。一种胆木叶提取物制剂，它以实施例13或14或15或16所述的胆木叶提取物为有效原料，加入药剂学上可接受的药用辅料，制成丸剂。作为清热解毒的药物或用于治疗急性扁桃腺炎、急性咽喉炎、急性结膜炎或上呼吸道感染疾病。

实施例40。一种胆木叶提取物制剂，它以实施例17或18或19或20所述的胆木叶提取物为有效原料，加入药剂学上可接受的药用辅料，制成滴丸剂。作为清热解毒的药物或用于治疗急性扁桃腺炎、急性咽喉炎、急性结膜炎或上呼吸道感染疾病。

实施例41。一种胆木叶提取物制剂，它以实施例21或22或23或24所述的胆木叶提取物为有效原料，加入药剂学上可接受的药用辅料，制成颗粒剂。作为清热解毒的药物或用于治疗急性扁桃腺炎、急性咽喉炎、急性结膜炎或上呼吸道感染疾病。

实施例42。一种胆木叶提取物制剂，它以实施例25或26或27或28所述的胆木叶提取物为有效原料，加入药剂学上可接受的药用辅料，制成口服液体制剂。作为清热解毒的药物或用于治疗急性扁桃腺炎、急性咽喉炎、急性结膜炎或上呼吸道感染疾病。

实施例43。一种胆木叶提取物制剂，它以实施例29或30所述的胆木叶提取物为有效原料，加入药剂学上可接受的药用辅料，制成软注射液。作为清热解毒的药物或用于治疗急性扁桃腺炎、急性咽喉炎、急性结膜炎或上呼吸道感染疾病。

实施例44。一种胆木叶提取物制剂，它以实施例32或33所述方法制得的胆木叶提取物为有效原料，加入药剂学上可接受的药用辅料，制成胶囊剂或片剂或丸剂或滴丸剂。作为清热解毒的药物或用于治疗急性扁桃腺炎、急性咽喉炎、急性结膜炎或上呼吸道感染疾病。

实施例45。一种胆木叶提取物制剂，它以实施例34或35或36所述方法制得的胆木叶提取物为有效原料，加入药剂学上可接受的药用辅料，制成冻干粉针剂。作为清热解毒的药物或用于治疗急性扁桃腺炎、急性咽喉炎、急性结膜炎或上呼吸道感染疾病。

实施例46。取胆木叶5kg，用12倍量的水加热提取2小时，滤过，药渣继续加10倍、8倍剂量水分别提取1.5h、1h，各自滤过，合并滤液并浓缩至1∶1(1g生药相当于1ml)，加入95％乙醇使含醇量达到75％，静置过夜后滤过，药液减压浓缩后真空干燥，得胆木叶提取物，粉碎，与适量药用淀粉混合均匀，喷洒乙醇湿法制粒，干燥，整粒，制成颗粒剂。

实施例47。取胆木叶5kg，用80％乙醇浸泡3次，每次12倍量，每次7d，合并药液，回收乙醇至无醇味，加热水适量，混匀，静置过夜，滤过，药液减压浓缩后真空干燥，得胆木叶提取物，粉碎，与适量药用淀粉混合均匀，喷洒乙醇湿法制粒，干燥，整粒，加入适量硬脂酸镁，混匀后，压片，制得片剂。

实施例48。取胆木叶5kg，用12倍量的水加热提取2小时，滤过，药渣继续加10倍、8倍剂量水分别提取1.5h、1h，各自滤过，合并滤液并浓缩至1∶1(1g生药相当于1ml)，将浓缩液经HPD-100大孔树脂柱层析，先以水洗脱，再以40％～95％乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，浓缩后真空干燥，得胆木叶提取物，粉碎，与适量药用淀粉混合均匀，喷洒乙醇湿法制粒，干燥，整粒，灌装，制成胶囊。

实施例49。取胆木叶5kg，用80％乙醇浸泡7d后渗漉，收集渗漉液30倍体积，回收乙醇至无醇味，加水适量，混匀，用氯仿萃取出去脂溶性杂质，水层溶液上AB-8大孔树脂柱，先用水洗脱，再分别用30％～95％乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，浓缩后真空干燥，得胆木叶提取物，按注射液制备方法制得符合医用要求的注射液。

实施例50。取胆木叶5kg，用12倍量的水加热提取2小时，滤过，药渣继续加10倍、8倍剂量水分别提取1.5h、1h，各自滤过，合并滤液并浓缩至1∶1(1g生药相当于1ml)，用正丁醇逆流萃取，正丁醇液减压浓缩后真空干燥，得胆木叶提取物干膏粉备用。将PEG4000与PEG6000按1∶1.5混合，90℃熔融，充分混匀，然后再加入适量干膏粉搅拌均匀。按滴丸剂制备方法制得符合医用要求的滴丸，即得。

实施例51。取胆木叶5kg，用12倍量的70％乙醇加热回流提取2小时，滤过，药渣继续加10倍乙醇提取1.5h，滤过，合并滤液，回收乙醇至无醇味，加热水适量，混匀，静置过夜，滤过，药液减压浓缩后干燥，粉碎，得胆木叶提取物浸膏粉，按软胶囊制备方法制得符合医用要求的软胶囊，即得。

实施例52。取胆木叶5kg，用5倍量的水加热提取3小时，滤过，药渣继续加10倍、15倍剂量水分别提取4h、5h，各自滤过，合并滤液并浓缩至1∶1(1g生药相当于1ml)，加入90％乙醇使含醇量达到70％，静置过夜后滤过，药液减压浓缩后真空干燥，得胆木叶提取物，粉碎，与适量药用淀粉混合均匀，喷洒乙醇湿法制粒，干燥，整粒，制成颗粒剂。

实施例53。取胆木叶5kg，用8倍量的水加热提取2小时，滤过，药渣继续加12倍、14倍剂量水分别提取2h、3h，各自滤过，合并滤液并浓缩至1∶1(1g生药相当于1ml)，将浓缩液经HPD-100大孔树脂柱层析，先以水洗脱，再以40％～95％乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，浓缩后真空干燥，得胆木叶提取物，粉碎，与适量药用淀粉混合均匀，喷洒乙醇湿法制粒，干燥，整粒，灌装，制成胶囊。

实施例54。取胆木叶5kg，用65％乙醇浸泡4次，每次15倍量，每次9d，合并药液，回收乙醇至无醇味，加热水适量，混匀，静置过夜，滤过，药液减压浓缩后真空干燥，得胆木叶提取物，粉碎，与适量药用淀粉混合均匀，喷洒乙醇湿法制粒，干燥，整粒，加入适量硬脂酸镁，混匀后，压片，制得片剂。

实施例55。取胆木叶5kg，用95％乙醇浸泡5d后渗漉，收集渗漉液20倍体积，回收乙醇至无醇味，加水适量，混匀，用氯仿萃取出去脂溶性杂质，水层溶液上AB-8大孔树脂柱，先用水洗脱，再分别用30％乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，浓缩后真空干燥，得胆木叶提取物，按注射液制备方法制得符合医用要求的注射液。

实施例56。取胆木叶5kg，用75％乙醇浸泡6d后渗漉，收集渗漉液25倍体积，回收乙醇至无醇味，加水适量，混匀，用氯仿萃取出去脂溶性杂质，水层溶液上AB-8大孔树脂柱，先用水洗脱，再分别用60％乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，浓缩后真空干燥，得胆木叶提取物，按注射液制备方法制得符合医用要求的注射液。

实施例57。取胆木叶5kg，用75％乙醇浸泡6d后渗漉，收集渗漉液25倍体积，回收乙醇至无醇味，加水适量，混匀，用氯仿萃取出去脂溶性杂质，水层溶液上AB-8大孔树脂柱，先用水洗脱，再分别用60％乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，浓缩后真空干燥，得胆木叶提取物，按注射液制备方法制得符合医用要求的注射液。

实施例58。取胆木叶5kg，分别用20倍量醋酸乙酯提取3次，滤过，合并滤液，加热水适量，混匀，静置过夜，滤过，药液减压浓缩后真空干燥，得胆木叶提取物，粉碎，与适量药用淀粉混合均匀，喷洒乙醇湿法制粒，干燥，整粒，加入适量硬脂酸镁，混匀后，压片，制得片剂。

实施例59。取胆木叶5kg，分别用15倍量氯仿提取5次，滤过，合并滤液，上AB-8大孔树脂柱，先用水洗脱，再分别用90％乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，浓缩后真空干燥，得胆木叶提取物，按注射液制备方法制得符合医用要求的注射液。

实施例60。取胆木叶5kg，分别用5倍量正丁醇提取5次，滤过，合并滤液，上AB-8大孔树脂柱，先用水洗脱，再分别用65％乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，浓缩后真空干燥，得胆木叶提取物，粉碎，与适量药用淀粉混合均匀，喷洒乙醇湿法制粒，干燥，整粒，制成颗粒剂。

Claims

1.一种胆木叶提取物，其特征在于所述的提取物是通过下述方法之一获得的提取物：

(1)胆木叶提取物，为中药胆木叶经水提除杂后所得提取物；

(2)胆木叶提取物，为中药胆木叶经醇提除杂后所得提取物；

(3)胆木叶提取物，为中药胆木叶经亲脂性有机溶剂提取除杂后所得

提取物，所述的亲脂性有机溶剂包括但不仅限于正丁醇或醋酸乙酯。

2.根据权利要求1所述的胆木叶提取物，其特征在于，所述的水提除杂方法包括如下步骤：取胆木叶，加水提取，药渣再经0～5次水提取后，过滤，合并水提液，浓缩，用醇沉与/或过大孔树脂方法除去杂质，或者经包括但不仅限于氯仿、醋酸乙酯或正丁醇的有机溶剂萃取并回收有机溶剂，即得胆木叶提取物。

3.根据权利要求2所述的胆木叶提取物，其特征在于，所述的水提除杂方法包括如下步骤：取胆木叶，分别用3～15倍量的水提取1～5次，合并滤液，滤过，通过用50％以上浓度醇沉的方法或者用大孔树脂柱层析，收集30％～95％乙醇洗脱液，或者用包含但不仅限于氯仿、醋酸乙酯或正丁醇的有机溶剂萃取，收集萃取液并回收有机溶剂，除去杂质，即得胆木叶提取物。

4.根据权利要求1所述的胆木叶提取物，其特征在于，所述的醇提除杂方法包括如下步骤：取胆木叶，加乙醇适量提取，再经0～5次乙醇提取后，过滤，合并提取液，浓缩，经水沉与/或过大孔树脂方法除去杂质，或者用包括但不仅限于氯仿、醋酸乙酯或正丁醇的有机溶剂萃取并回收有机溶剂，除去杂质，即得胆木叶提取物。

5.根据权利要求4所述的胆木叶提取物，其特征在于，所述的醇提除杂方法包括如下步骤：取胆木叶，分别用3～15倍量的50％～95％乙醇提取1～5次，合并滤液，滤过，通过用水沉的方法或用大孔树脂柱层析，收集30％～95％乙醇洗脱液，或用包含但不仅限于氯仿、醋酸乙酯或正丁醇的有机溶剂萃取，除去杂质，即得胆木叶提取物。

6.根据权利要求1所述的胆木叶提取物，其特征在于，所述的亲脂性有机溶剂提取除杂提取方法包括如下步骤：取胆木叶，加亲脂性有机溶剂适量提取，此亲脂性有机溶剂包括但不仅限于正丁醇或醋酸乙酯，再经0～5次亲脂性有机溶剂提取后，过滤，合并提取液，回收有机溶剂，经水沉与/或过大孔树脂方法除去杂质，即得胆木叶提取物。

7.根据权利要求6所述的胆木叶提取物，其特征在于，所述的亲脂性有机溶剂提取除杂提取方法包括如下步骤：取胆木叶，分别用5～15倍量的50％～95％亲脂性有机溶剂提取1～5次，合并滤液，滤过，此亲脂性有机溶剂包括但不仅限于正丁醇或醋酸乙酯，滤液回收有机溶剂，通过用水沉的方法或用大孔树脂柱层析，收集30％～95％乙醇洗脱液，除去杂质，即得胆木叶提取物。

8.一种如权利要求1所述的胆木叶提取物的制备方法，其特征在于，它采用下述之一的方法步骤：

(3)胆木叶提取物的提取方法，是取中药胆木叶为原料，再经亲脂性有机溶剂提取除杂，得胆木叶提取物；所述的亲脂性有机溶剂包括但不仅限于正丁醇或醋酸乙酯。

9.根据权利要求8所述的制备方法，其特征在于，所述的水提除杂的方法是指权利要求2或3所述的水提除杂的方法步骤。

10.根据权利要求8所述的制备方法，其特征在于，所述的醇提除杂的方法是指权利要求4或5所述的醇提除杂的方法步骤。

11.根据权利要求8所述的制备方法，其特征在于，所述的亲脂性有机溶剂提取除杂的方法是指权利要求6或7所述的亲脂性有机溶剂提取除杂的方法步骤。

12.一种如权利要求1-7中任何一项所述的胆木叶提取物或者如权利要求8或9或10或11所述的制备方法所制得的胆木叶提取物制剂，其特征在于，它以胆木叶提取物为有效原料，加入药剂学上可接受的药用辅料，制成临床上可接受的任何一种剂型的药剂，其剂型包括但不限于胶囊剂、软胶囊剂、片剂、丸剂、滴丸剂、颗粒剂、口服液体制剂、注射液和冻干粉针剂。

13.权利要求1-7中任何一项所述的胆木叶提取物，或者权利要求8或9或10或11所述的制备方法所制得的胆木叶提取物在制备清热解毒的药物中的应用。

14.权利要求1-7中任何一项所述的胆木叶提取物，或者权利要求8或9或10或11所述的制备方法所制得的胆木叶提取物在制备治疗急性扁桃腺炎、急性咽喉炎、急性结膜炎或上呼吸道感染疾病的药物中的应用。