CN102712940A - 用酶从甜菊苷中制备甜菊醇的方法 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及一种通过使用含有果胶酶的可商购的酶混合物CYTOLASE PCL5
Figure DPA00001578063700011
使糖苷残基从甜菊苷中裂解而生产甜菊醇的方法。在一些优选的方法中，反应在酵母培养物的存在下进行。还描述了Helix pomatia酶与CYTOLASE PCL5的组合。

Description

用酶从甜菊苷中制备甜菊醇的方法
发明概述
本发明涉及一种通过使用含有果胶酶的可商购的酶混合物CYTOLASE PCL5
Figure BPA00001578064000011
使糖苷残基从甜菊苷中裂解而生产甜菊醇的方法。在一些优选的方法中，反应在酵母的存在下进行。
背景技术
Stevia rebaudiana(甜叶菊)含有甜味化合物，即甜菊苷(stevioside)和莱苞迪苷A(rebaudioside A)，它们主要被用作无卡路里的甜味剂。甜菊醇(steviol)是这些化合物的苷元衍生物。甜菊醇可用于改善认知功能；参见例如WO 2009/071277(DSM IP ASSETS，B.V.)。
从甜菊苷中生产甜菊醇很困难。甜菊苷的酸水解很麻烦，因为在酸性条件下，所制的甜菊醇重排变为异甜菊醇。甚至已有多个文献报导不能通过这种方法得到甜菊醇(Kohda等1976 Phytochemistry 15：981-983.)。
Ogawa等1980；Tetrahedron 36：2641-2648描述了一种使用高碘酸钠使甜菊苷裂解来生产甜菊醇的替代方法。然而，该方法需要高度稀释的体系和大量过量(约＞10mol当量)的昂贵的高碘酸钠来实现有用的产率。因此，对于生产大量甜菊醇来说，该方法不经济。
下列文献描述了几种基于酶的方法：
Bridel等1931 Bull.Soc.Chimie Biol.13：781-96指出，甜菊苷不能通过多种“发酵产物”(例如苦杏仁酶、鼠李糖化酶、Aspergillus niger(黑曲霉)或浸软和风干底层的发酵酵母)来水解。作者利用来自蜗牛(Helixpomatia)的淀粉酶制剂获得了成功。然而，他们从每只动物中得到“仅0.5cm3的纯的消化液”，因而不适合大规模生产。Mosettig等1955 J.Org.Chem.20：884-899也通过利用蜗牛的酶制剂(被称为“酶汁”和“干制剂”)使用葡糖苷的酶促水解来制备少量(小于0.5克)的甜菊醇。没有给出酶的进一步特征。
Khoda等在前述文献中报导了其他作者利用粗制的橘皮苷酶从甜菊苷中产生甜菊醇，但重复该方法时，得到莱苞迪苷B和葡萄糖，而不是期望的甜菊醇。
Ruddat等1965 Arch.Biochem.Biophys.110：496-499；Gianfagna等1983 Phytochemistry 22(2)：427-430；以及Pezzuto等1985 Proc.Natl.Acad.Sci.USA 82：2475-2482均描述了使用多种可商购的果胶酶(分别为来自Rohm& Haas的″Pectinol 59L″；来自Corning Biosystems的″Pectinol 50L″；来自Rohm & Haas的″Pectinol AC″)的过程。Davis等，1992 Phytopathology 82：1244-50报导了，″Pectinol 59L″不再是可商购的，并且不清楚其他果胶酶是否仍有售。
需要一种从甜菊苷中生产甜菊醇的有效方法，并且该方法适于商业化大规模生产。
发明内容
业已发现，根据本发明的可商购的酶制剂(CYTOLASE PCL5)能使甜菊苷裂解以产生甜菊醇，并且可以被用在高效的、商业上可行的方法中。因而，本发明的一个方面是一种生产甜菊醇的方法，该方法包括：
a)使甜菊苷与CYTOLASE PCL5
Figure BPA00001578064000022
酶制剂接触，并且
b)回收甜菊醇。
同样业已发现，在裂解期间释放的糖(葡萄糖)可抑制上述酶促反应。因此，优选地，上述反应在酵母的存在下进行。酵母可以除去所产生的葡萄糖，从而使酶促反应可以不受阻碍地进行。因此，本发明的另一方面是一种生产甜菊醇的方法，该方法包括：
a)在活酵母培养物的存在下，使甜菊苷与CYTOLASE PCL5酶制剂接触，并且
b)回收甜菊醇。
附图说明
在整篇说明书中，化合物名称后面出现的数字指的是下列图中所描述的化合物。
图1显示了莱苞迪苷A和甜菊苷的水解。
图2显示了通过Helix pomatia酶和果胶酶使甜菊苷水解。
″CYTOLASE PCL5″是可商购自DSM Food Specialties，Delft，TheNetherlands的酶制剂。其为从选定的Aspergillus niger的GRAS株中得到的酶的混合物，包括果胶酶和半纤维素酶。其通常被用于生产具有低含量半乳糖醛酸的果汁和用于使水果汁制品澄清，也有其他用途的报导：
●其β-D-葡萄糖苷酶活性可用于制造葡萄酒和香槟(参见WO1998/38316)
●其β-吡喃葡萄糖苷酶和α-鼠李糖苷酶活性可用于水解类固醇糖苷以生产去葡萄糖去鼠李糖假叶树素(desglucodesrhamnoruscin，见US6,911,325)。
″酵母″指的是Saccharomyces cerevisceae、Saccharomyces pastorianus、或可以使用已知的技术用于大规模发酵的其他酵母菌种，前提是该酵母能将葡萄糖转化为二氧化碳和乙醇。
该反应所用的甜菊苷起始物料不需要以提纯或分离的形式存在。在一个优选的实施方式中，它们以包含甜菊苷的植物提取物的形式存在，例如Stevia sp.提取物，更优选地以Stevia rebaudiana提取物的形式存在。提取物中也可能存在不可裂解的甜菊苷组分。优选的Stevia提取物包含较高浓度的甜菊苷和较低浓度的不可裂解的甜菊苷(例如莱苞迪苷A)，其随反应的时间进程积聚，使得该方法不太高效。提取物中甜菊苷的优选浓度为占所有甜菊苷的至少50％，优选＞90重量％。高含量的甜菊苷可以很容易地购买到。
不完全清楚的是哪种酶适合介导使糖从甜菊苷中裂解以生产甜菊醇的反应。例如，一些果胶酶适合，但其他的不适合；类似的，一些β-葡糖苷酸酶适合，而其他的不适合。因此，研究了多种酶和酶混合物以确定其适用性。在多个所测的样品中，一些没有产生反应，甚至在培育4天之后。通过下列酶获得至少部分成功：
来自Helix pomatia的β-葡聚糖酶(FLUKA 49103)；
来自Helix pomatia的H-3型β-葡糖苷酸酶(SIGMA G8885)；
来自Helix pomatia的H-2型β-葡糖苷酸酶(SIGMA G0876)；
来自Helix pomatia的HP-2型β-葡糖苷酸酶(SIGMA 7017)；
来自Aspergillus niger的果胶酶(SIGMA PS4716)；
来自Aspergillus aculeatus的果胶酶(SIGMA P2611)；
来自Helix pomatia的H-1型硫酸酯酶(SIGMA S9626)；
CYTOLASE PCL5
Figure BPA00001578064000041
(DSM)
在多种酶中，发现CYTOLASE PCL5
Figure BPA00001578064000042
具有良好的活性并且是可商购的，因而是本发明优选的酶。
此外，注意到，该酶是通过裂解的葡萄糖的产生进行反馈抑制的，而不被甜菊醇(其不是可水溶的)抑制。因此，尽管可以在其他反应物不存在的情况下通过用甜菊苷培育CYTOLASE PCL5
Figure BPA00001578064000043
小规模生产甜菊醇，但对于大规模生产来说，由于葡萄糖的累积，这不是最优选的方法。
然而，根据本发明业已发现，通过酵母在最高40℃下发酵，直到葡萄糖转化为二氧化碳和乙醇，几乎能使酶活性恢复到最初的活性。该方法可以扩大至适合大规模生产甜菊醇的工业水平，这是迄今为止都不可能的。因此，本发明的另一方面是用于商业规模生产甜菊醇的方法，该方法包括在酵母发酵的条件下，使甜菊苷或莱苞迪苷与CYTOLASE PCL5
Figure BPA00001578064000044
接触，然后回收所产生的甜菊醇。
如果需要，在发酵步骤之后，剩余甜菊苷(例如存在于Stevia提取物中)的任选的进一步酶促水解可用于增大甜菊醇的量。因为该酶制剂在较高的温度下比酵母培养物稳定，所以酶促水解可以在比用于培养酵母的温度更高的温度下进行。例如，该温度可以高于40℃，优选为约40-60℃，更优选为约55℃。底物对酶的潜在抑制可以通过连续加入Stevia提取物而避免，因而保持甜菊苷的浓度在较低的水平。因此，本发明的另一方面是：
一种用于商业规模生产甜菊醇的方法，该方法包括：
a)在发酵的条件下，为甜菊苷和CYTOLASE PCL5
Figure BPA00001578064000051
提供酵母培养物，以产生包含甜菊醇的培养基；并且
b)在培养基中、在升高的温度条件下水解至少部分剩余的甜菊苷，以产生富含甜菊醇的培养基。
富含甜菊醇的培养基可以原样使用，或者任选地，可以分离出甜菊醇并提纯(如果需要的话)。
Stevia提取物的水解和葡萄糖的发酵可以同时进行，但由于酵母的tmax＝40℃，在40℃下总的水解速率比按顺序的水解和发酵时的速率低。
酶的组合
根据本发明还发现，CYTOLASE PCL5
Figure BPA00001578064000052
(或来自Aspergillus niger的果胶酶(SIGMA PS4716)或来自Aspergillus aculeatus的果胶酶(SIGMAP2611))与选自由下列酶组成的组中的第二酶制剂组合：
来自Helix pomatia的H-3型β-葡糖苷酸酶(SIGMA G8885)；
来自Helix pomatia的H-2型β-葡糖苷酸酶(SIGMA G0876)；
来自Helix pomatia的HP-2型β-葡糖苷酸酶(SIGMA 7017)；
来自Helix pomatia的H-1型硫酸酯酶(SIGMA S9626)；
与使用单一的酶制剂相比，该组合可以更有效地使甜菊苷水解。
如图2所示，来自Helix pomatia(葡萄园蜗牛)的酶使甜菊苷(1)快速裂解为甜茶苷(5)，然后进一步缓慢裂解为甜菊单苷(6)和甜菊醇葡糖苷酯(7)的混合物，随后缓慢裂解为最终的甜菊醇(3)。不论酶主要包含硫酸酯酶还是葡糖苷酸酶活性，均观察到这种模式。
活性的果胶酶和Cytolase使甜菊苷(1)缓慢裂解为甜茶苷(5)，然后较快速地水解为6/7，最终裂解为甜菊醇(3)。CYTOLASE PCL5
Figure BPA00001578064000053
和活性的果胶酶通过类似的活性使甜菊苷(1)裂解为甜菊醇。CYTOLASE PCL5被用于进一步开发，因为这种酶可用于食品生产并且易于从DSM得到。
发现，与单独使用一种酶相比，来自Helix pomatia的酶与果胶酶或CYTOLASE PCL5
Figure BPA00001578064000055
的混合物使甜菊苷更快地裂解并且需要更少量的酶。Helix pomatia酶使第一水解步骤裂解地更快。果胶酶和CYTOLASEPCL5
Figure BPA00001578064000061
使后面的水解步骤更快地进行。因此，本发明的另一方面是一种特别优选的酶组合，其为：
CYTOLASE PCL5
Figure BPA00001578064000062
和来自Helix pomatia的葡糖苷酸酶HP2 SigmaG7017；以及CYTOLASE PCL5
Figure BPA00001578064000063
和来自Helix pomatia的H-2型葡糖苷酸酶SIGMA G0876。
下面所描述的实施例能更好地说明本发明。
评估各种酶和酶制剂(被统称为″酶″)使甜菊苷和莱苞迪苷A裂解以生产甜菊醇的能力。50mg Stevia提取物RV140-54(19％莱苞迪苷A，19％甜菊苷[w％])在5ml pH为4.1的缓冲溶液(0.1mol/l H3PO4+NaOH)中溶解，50μl酶溶液或10mg冻干粉；40℃(rem 1)。结果显示在下面的表1中。
表1酶的评估
Figure BPA00001578064000071
1d＝天
所有这些酶都不能使莱苞迪苷A裂解，因此优选地，被用作起始原料的Stevia提取物应该包含大量甜菊苷和少量莱苞迪苷A。
实施例2
通过甜菊苷的酶促水解来生产甜菊醇
在55℃下，通过加入约1.6ml正磷酸(1mol/l)将3000ml水、108ml CYTOLASE PCL5
Figure BPA00001578064000081
和12ml来自Helix pomatia的葡糖苷酸酶HP2(Sigma G7017)、16.5g磷酸二氢钾(Fluka)、120g甜菊苷95％″DAEPyung″的溶液调至pH＝4.2。
混合物在55℃下搅拌4天。HPLC表明甜菊苷几乎完全水解为甜菊醇。
将甜菊醇的细浆液的温度降至40℃，然后加入2.0g干酵母(干的发面酵母(bakers yeast))。使混合物在40℃下搅拌24小时，直到二氧化碳的放出几乎停止。将混合物加热到55℃，并通过加入约16ml氢氧化钾溶液(1mol/l)将pH调至pH＝4.2。
向混合物中加入120g甜菊苷95％“DAE Pyung”。米色浆液在55℃下搅拌6小时。HPLC表明甜菊苷(1)和中间体(5，6，7)几乎完全水解为甜菊(3)。
白色的浆液被冷却到环境温度，然后通过布氏漏斗过滤。环境温度下，湿的滤饼在3L反应烧瓶中在3000ml乙酸乙酯中悬浮1小时。将乳液过滤并用200ml乙酸乙酯(“Fluka 45760”)洗涤。
有机相在环境温度下在3L反应烧瓶中与7.5g活性炭(Norit CA1)搅拌45分钟。过滤黑色的浆液。用100ml乙酸乙酯洗涤残余物。透明的滤液在旋转蒸发仪中在真空下浓缩，直到得到稠的浆液。过滤悬浮液。用滤液重复该过程。将滤饼合并，并在真空下干燥18小时。我们得到：72.1g甜菊醇，为白色晶体，含量：98％[a％]。
实施例3
通过甜菊苷的酶促水解来生产甜菊醇
溶液包含500ml水、36ml CYTOLASE PCL5
Figure BPA00001578064000082
和20g甜菊苷(95％″DAE Pyung″)。
混合物在55℃下搅拌4天。HPLC表明甜菊苷几乎完全水解为甜菊醇。将甜菊醇的沉淀过滤并用水洗涤。残余物在真空下干燥。我们得到7.29g含量为91％的甜菊醇。
实施例4
用“葡糖苷酸酶H2+Cytolase PCL5”(酶混合物1∶4)使甜菊苷水解
条件：
100mg甜菊苷，含量＝98％；
20μl β-葡糖苷酸酶H2型Helix pomatia SIGMA G0876；
80μl CYTOLASE PCL5
缓冲溶液：0.01mmol/l磷酸盐pH＝4.2；
48h；45℃
表2
Figure BPA00001578064000092
*参考如图2中示的化合物编号
酶受到产物葡萄糖的抑制。不除去葡萄糖时，葡萄糖对酶的抑制将延长反应时间并限制最大浓度。
实施例5
酵母、除去葡萄糖的影响
条件：
100mg甜菊苷，含量＝98％；
40yl β-葡糖苷酸酶H2型Helix pomatia SIGMA G0876；
160yl CYTOLASE PCL5
Figure BPA00001578064000101
缓冲溶液：0.01mmol/l磷酸盐pH＝4.2；
在35℃下24小时；在50℃下71小时
通过甜菊苷的裂解而形成的葡萄糖抑制通过酶的进一步裂解。干的发面酵母成功除去葡萄糖而不影响酶促水解。用酵母处理在≤40℃下进行，因为在45℃下，酵母在数小时内失活。葡萄糖转化为二氧化碳和乙醇之后，酶重新获得全部活性。在40℃，裂解和葡萄糖的发酵可以同时进行，尽管总的反应速率低于顺序法(在55℃下水解6天，然后再40℃下发酵1天)。数据在下面的表3中给出。
表3
Figure BPA00001578064000102
*参考如图2中示的化合物编号

Claims (8)

1.一种生产甜菊醇的方法，其包括：使甜菊苷与CYTOLASE PCL5
Figure FPA00001578063900011
酶制剂接触，并且回收甜菊醇。
2.如权利要求1所述的方法，其中，所述甜菊苷存在于植物提取物中。
3.如权利要求1或2所述的方法，其中，所述植物提取物是Stevia sp.提取物。
4.如权利要求3所述的方法，其中，所述Stevia提取物包含大量甜菊苷。
5.如权利要求1-4中任意一项所述的方法，其中，所述使甜菊苷与CYTOLASE PCL5
Figure FPA00001578063900012
酶制剂接触的步骤在培养基中活酵母培养物的存在下、在能在培养基中产生甜菊醇的条件下进行。
6.如权利要求1-5中任意一项所述的方法，其进一步包括：在升高的温度条件下在培养基中使至少部分剩余的甜菊苷水解，以产生富含甜菊醇的培养基。
7.如权利要求1-6中任意一项所述的方法，其中，所述CYTOLASEPCL5酶制剂还包含来自Aspergillus sp.的果胶酶。
8.一种酶制剂，其选自由下列组成的组：
a)CYTOLASE PCL5
Figure FPA00001578063900014
和来自Helix pomatia的葡糖苷酸酶HP2 SigmaG7017；
b)CYTOLASE PCL5
Figure FPA00001578063900015
和来自Helix pomatia的H-2型葡糖苷酸酶SIGMA G0876；以及
c)来自Helixpomatia的酶与果胶酶或CYTOLASE PCL5
Figure FPA00001578063900016
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Cited By (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104725438A (zh) * 2013-12-18 2015-06-24 江南大学 一种制备槐糖的方法
CN104725437A (zh) * 2013-12-19 2015-06-24 江南大学 碱性水解莱鲍迪苷ⅰ制备昆布二糖和莱鲍迪苷b
CN105255971A (zh) * 2015-10-27 2016-01-20 江南大学 双酶法制备甜菊单糖苷
CN107188800A (zh) * 2017-07-19 2017-09-22 江南大学 具有晶型a形式的甜菊醇晶体、其制备方法及应用
CN108424939A (zh) * 2018-03-14 2018-08-21 江南大学 一种制备甜菊醇单葡萄糖酯及其晶型a形式晶体的方法
CN113930377A (zh) * 2021-10-14 2022-01-14 广西大学 一株全细胞催化提高莱鲍迪苷a含量的工程菌

Families Citing this family (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR101724569B1 (ko) * 2011-07-29 2017-04-07 한국생명공학연구원 루부소사이드 생산하는 신규 제조방법
WO2013063102A1 (en) 2011-10-28 2013-05-02 TaylorBaby, LLC Flavored wipe and dispensing system
US11730683B2 (en) 2011-10-28 2023-08-22 TaylorBaby, LLC Flavored wipe and dispensing system
CN102796789B (zh) * 2012-08-14 2013-11-06 成都南诺格生物科技有限责任公司 甜菊醇转化为甜菊单苷的方法
JP6370608B2 (ja) * 2014-05-28 2018-08-08 株式会社シャローム 抗炎症性物質の製造方法
EP2957182A1 (en) 2014-06-18 2015-12-23 Technische Hochschule Mittelhessen Improved natural sweetener compositions
JP6778207B2 (ja) * 2015-10-30 2020-10-28 サントリーホールディングス株式会社 Ａｏｂｇｌ３ホモログを用いたステビオール配糖体およびステビオールの製造方法
WO2017073717A1 (ja) * 2015-10-30 2017-05-04 サントリーホールディングス株式会社 Ａｏｂｇｌ１ホモログを用いたステビオール配糖体およびステビオールの製造方法
CN109154012B (zh) 2016-05-25 2022-04-15 三得利控股株式会社 使用aobgl11同源体的甜菊醇及甜菊醇糖苷的制造方法
US10463065B2 (en) 2016-12-01 2019-11-05 Council Of Scientific And Industrial Research Enzyme-assisted extraction of steviol glycosides from the leaves of Stevia rebaudiana Bertoni

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101497633A (zh) * 2009-03-10 2009-08-05 南京师范大学 一种同时制备异甜菊醇和槐糖的方法
CN101883568A (zh) * 2007-12-03 2010-11-10 帝斯曼知识产权资产管理有限公司 含有甜菊提取物或甜菊提取物组分的新颖的营养药物组合物及其用途

Family Cites Families (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
AR012837A1 (es) 1997-02-28 2000-11-22 Dsm Nv Beta-glucosidasas: metodos para su obtencion, preparaciones con las mismas y sus correspondientes usos
ITMI991222A1 (it) 1999-06-01 2000-12-01 Indena Spa Processo per la preparazione di derivati di glicosidi steroidei di ruscus aculeatus mediante idrolisi enzimatica

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101883568A (zh) * 2007-12-03 2010-11-10 帝斯曼知识产权资产管理有限公司 含有甜菊提取物或甜菊提取物组分的新颖的营养药物组合物及其用途
CN101497633A (zh) * 2009-03-10 2009-08-05 南京师范大学 一种同时制备异甜菊醇和槐糖的方法

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
PEZZUTO, J. M.等: "Metabolically activated steviol, the aglycone of stevioside, is mutagenic", 《PROCEEDINGS OF THE NATIONAL ACADEMY OF SCIENCES》 *

Cited By (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104725438A (zh) * 2013-12-18 2015-06-24 江南大学 一种制备槐糖的方法
CN104725437A (zh) * 2013-12-19 2015-06-24 江南大学 碱性水解莱鲍迪苷ⅰ制备昆布二糖和莱鲍迪苷b
CN104725437B (zh) * 2013-12-19 2018-10-02 江南大学 碱性水解莱鲍迪苷i制备昆布二糖和莱鲍迪苷b
CN105255971A (zh) * 2015-10-27 2016-01-20 江南大学 双酶法制备甜菊单糖苷
CN105255971B (zh) * 2015-10-27 2018-10-23 江南大学 双酶法制备甜菊单糖苷
CN107188800A (zh) * 2017-07-19 2017-09-22 江南大学 具有晶型a形式的甜菊醇晶体、其制备方法及应用
CN107188800B (zh) * 2017-07-19 2021-05-28 江南大学 具有晶型a形式的甜菊醇晶体、其制备方法及应用
CN108424939A (zh) * 2018-03-14 2018-08-21 江南大学 一种制备甜菊醇单葡萄糖酯及其晶型a形式晶体的方法
CN113930377A (zh) * 2021-10-14 2022-01-14 广西大学 一株全细胞催化提高莱鲍迪苷a含量的工程菌
CN113930377B (zh) * 2021-10-14 2023-12-26 广西大学 一株全细胞催化提高莱鲍迪苷a含量的工程菌

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